RU2782305C2

RU2782305C2 - Про-адм в качестве маркера мониторинга терапии для критически больных пациентов

Info

Publication number: RU2782305C2
Application number: RU2020111719A
Authority: RU
Inventors: Дариус УИЛСОН
Original assignee: Б.Р.А.Х.М.С Гмбх
Priority date: 2017-09-13
Filing date: 2018-09-13
Publication date: 2022-10-25

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к клинико-лабораторной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования последующего нежелательного явления в состоянии здоровья пациента. Осуществляют предоставление образца от указанного пациента, при этом пациент диагностирован как критически больной и начато медицинское лечение. Образец выделяют из организма пациента после постановки диагноза и начала лечения. Определяют уровень проадреномедуллина (проАДМ) или его фрагмента (фрагментов) в указанном образце. Низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента (фрагментов), определенный в образце, составляющий менее 4 нмоль/л, указывает на отсутствие последующего нежелательного явления. Высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента (фрагментов), определенный в образце, составляющий более 6,5 нмоль/л, указывает на последующее нежелательное явление. Дополнительно в образце проводят определение уровня прокальцитонина (ПКТ) или его фрагмента (фрагментов) с последующим прогнозированием нежелательного явления. Способ обеспечивает возможность прогнозирования последующего нежелательного явления в состоянии здоровья пациента, представляющего собой: смерть, новую инфекцию, органную недостаточность и/или ухудшение клинических симптомов, за счет определения в образце уровня проАДМ или его фрагмента (фрагментов) и, необязательно, уровня ПКТ или его фрагмента (фрагментов). 2 н. и 17 з.п. ф-лы, 32 табл., 10 пр.

Description

Изобретение относится к способу мониторинга терапии, включающему прогноз, оценку риска и/или стратификацию риска последующего нежелательного явления в состоянии здоровья пациента, включающему получение образца указанного пациента, при этом указанный пациент был диагностирован как критически больной и было начато медицинское лечение, при этом указанный образец выделен из организма пациента после постановки диагноза и начала лечения; определения уровня проадреномедуллина (проАДМ) или его фрагмента(фрагментов) в указанном образце, при этом указанный уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) коррелирует с вероятностью последующего нежелательного явления в состоянии здоровья указанного пациента. В предпочтительном варианте осуществления данное изобретение относится к способу, включающему дополнительно определение уровня прокальцитонина (ПКТ) или его фрагмента(фрагментов) в образце, выделенном из организма пациента. Предпочтительно способ по данному изобретению включает определение уровня прокальцитонина (ПКТ) или его фрагмента(фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец выделен во временной точке или перед временной точкой постановки диагноза и начала лечения (временная точка 0); определение уровня ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце, выделенном от указанного пациента после выделения первого образца и постановки диагноза и начала лечения; и определение того, является ли разница уровня ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце видимой по сравнению с уровнем ПКТ или его фрагмента(фрагментов) в первом образце.

Предпосылки изобретения

Несмотря на значительные улучшения в диагностических и профилактических мерах, частота сепсиса продолжает быстро возрастать у госпитализированных пациентов (1), при этом уровни смертности находятся в диапазоне от 10% до 54%, в зависимости от степени тяжести заболевания, используемого определения дисфункции органа и характерной для страны частоты (2, 3). Таким образом, ранняя и точная оценка как инфекционной нагрузки, так и тяжести заболевания, с точки зрения общего патофизиологического ответа хозяина, является особенно важным на ранних стадиях сепсиса для принятия быстрых и верных решений относительно диагностического исследования и стратегий лечения, а также в более поздней фазе для надежного ведения пациента, контроля лечения, решений о завершении участия в исследовании в присутствии клинического выздоровления.

В связи с этим, удивительно, что в отношении сепсиса в настоящее время не существует диагностического теста, представляющего собой золотой стандарт (4). Использование прокальцитонина (ПКТ) частично удовлетворило указанную неудовлетворенную потребность касательно оценки инфекционной нагрузки, при этом имеются экспериментальные и интервенционные данные в области применения антибиотиков (5-7). В то же время точный показатель тяжести заболевания еще не был показан.

По этой причине впоследствии были предложены многочисленные биомаркеры и клинические показатели, в том числе применение шкал оценки тяжести, таких как динамическая шкала оценки органной недостаточности (SOFA - Sequential Organ Failure Assessment), шкала оценки острых и хронических функциональных изменений (APACHE - Acute Physiological and Chronic Health Evaluation) II и упрощенная шкала оценки острых функциональных изменений (SAPS - Simplified Acute Physiological Score) II, однако они редко рассчитываются на ежедневной основе стандартным путем в связи со сравнительно высокой сложностью и требованиям к временным ресурсам, связанным с каждой шкалой оценки. Применение новых биомаркеров может удовлетворить указанную неудовлетворенную клиническую потребность, в то же время почти никакие из них успешно не вошли в широко распространенную клиническую практику (8).

Из указанных маркеров серединный фрагмент проадреномедуллина (СФ-проАДМ), пептид, образуемый несколькими тканями с целью стабилизации микроциркуляции и защиты от эндотелиальной проницаемости и последующей органной недостаточности (9-16), продемонстрировал значительные перспективы, особенно в областях, связанных с сепсисом (17), инфекциями нижних дыхательных путей (18-21), трансплантации легких (22) и торакальной хирургии (23). В этой связи можно отметить, что общепризнанным является то, что эндотелий и микроциркуляция играют значительную роль в патофизиологическом ответе хозяина на сепсис (24, 25), при этом происходит регуляция и распределение тока крови в каждом органе, имеющем важное значение (25), и, таким образом, они могут обеспечивать альтернативный показатель тяжести общего ответа хозяина по сравнению со шкалами оценки дисфункции отдельных органов.

Таким образом, в данном изобретении используется диапазон биомаркеров (ПКТ, лактат, С-реактивный белок, СФ-проАДМ) и клинические шкалы оценки (SOFA, APACHE II и SAPS II) с целью (i) получения точной оценки тяжести заболевания в пределах короткого времени после постановки диагноза, такого как, в пределах 24 часов после поставки диагноза, а также в пределах первых десяти дней терапии в ОРИТ (ICU - intensive care unit, отделение реанимации и интенсивной терапии), (ii) определения пациентов с низким риском, которые могут быть пригодными для ранней выписки из ОРИТ в послеоперационные условия, и (iii) определения пациентов, которые несмотря на улучшение клинической картины (например, снижения уровня ПКТ), сохраняют высокий или возрастающий риск смертности или других нежелательных явлений и могут нуждаться в срочных дополнительных диагностических и терапевтических мероприятиях.

Соответственно, СФ-проАДМ может быть использован в качестве средства для определения пациентов с высокой тяжестью заболевания, которые могут нуждаться в альтернативных диагностических и терапевтических мероприятиях, и пациентов с низкой тяжестью заболевания, которые потенциально могут подлежать ранней выписке из ОРИТ в сочетании с отсутствием специфических для ОРИТ видов терапии.

Существует потребность в области лечения критически больных пациентов, таких как пациенты с сепсисом, в дополнительных средствах мониторинга терапии в пределах короткого интервала времени после начала лечения, а также средствах прогноза, оценки риска и/или стратификацию риска последующего нежелательного явления в состоянии здоровья критического больного пациента.

Краткое описание сущности изобретения

В свете сложностей в предшествующем уровне техники технической проблемой, лежащей в основе данного изобретения, является обеспечение средства мониторинга терапии и оценки риска критически больного пациента после начала лечения, предпочтительно в пределах короткого интервала времени, до нескольких дней или недель включительно после начала лечения. Дополнительной технической проблемой, лежащей в основе данного изобретения, является обеспечение средств прогноза, оценки риска и/или стратификации риска последующего нежелательного явления в состоянии здоровья критически больного пациента, в частности, в пределах короткого интервала времени после начала лечения.

Таким образом, в данном изобретении предприняты попытки получения способа, набора и дополнительных средств мониторинга терапии критически больных пациентов, а также средств прогноза, оценки риска и/или стратификации риска последующего нежелательного явления в состоянии здоровья критически больного пациента на основании уровней проадреномедуллина (проАДМ), определяемого в образце, полученном от пациента. Таким образом, одной целью данного изобретения является применение биомаркера или комбинации биомаркеров для выделения критически больных пациентов, которые подверглись или подвергаются лечению, имеющие высокий риск нежелательного явления, из критически больных пациентов, которые имеют низкий риск последующего нежелательного явления.

Решение технической проблемы данного изобретения предложено в независимых пунктах формулы изобретения. Предпочтительные варианты осуществления данного изобретения предположены в зависимых пунктах формулы изобретения.

Таким образом, данное изобретение относится к способу мониторинга терапии, включающему прогноз, оценку риска и/или стратификацию риска последующего нежелательного явления в состоянии здоровья пациента, включающему

- получение образца от указанного пациента, при этом пациент был диагностирован как критически больной и было начато медицинское лечение, при этом образец был выделен из организма пациента после постановки диагноза и начала лечения,

- определение уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) в указанном образце,

- при этом указанный уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) коррелирует с вероятностью последующего нежелательного явления в состоянии здоровья указанного пациента.

В одном варианте осуществления пациенты в соответствии со способом по данному изобретению уже были диагностированы как критически больные и уже получали лечение. Таким образом, способ по данному изобретению может быть использован для мониторинга эффективности лечения или терапии, которые были начаты, на основании определения вероятности последующего нежелательного явления. Мониторинг терапии предпочтительно включает в себя прогноз нежелательного явления и/или стратификацию риска или оценку риска пациента по отношению к последующему нежелательному явлению, при этом указанная оценка риска и определение указанного риска необходимо рассматривать в качестве средства мониторинга начатой терапии.

Врачи или медицинский персонал, которые занимаются лечением пациентов, которые были диагностированы как критически больные, могут использовать способ по данному изобретению в различных клинических условиях, таких как условия первичной медицинской помощи, или предпочтительно стационарные условия, или в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). Указанный способ является крайне пригодным для мониторинга влияния терапии, которая была начата, на критически больного пациента, и может быть использован для оценки того, представляет ли собой пациент, подлежащий лечению, пациента с высоким риском, который должен находиться под пристальным медицинским наблюдением и потенциально должен проходить дополнительные медицинские мероприятия, или пациента с низким риском с улучшением состояния здоровья, который может не требовать пристального наблюдения и дополнительных мероприятий, возможно, в связи с тем, что начатое лечение приводит к успешному улучшению состояния пациента. Исходные виды лечения критически больных пациентов могут оказывать прямое влияние на вероятность нежелательных явлений в состоянии здоровья пациента. В связи с этим оценка риска/прогноз последующего нежелательного явления обеспечивает обратную связь или мониторинг начатой терапии.

Вероятность возникновения последующего нежелательного явления может быть оценено на основании сравнения уровня проАДМ или его фрагментов в образце по отношению к референтному уровню (такому как пороговое или граничное значение и/или популяционное среднее), при этом референтный уровень может соответствовать проАДМ или его фрагментам у здоровых пациентов или у пациентов, которые были диагностированы как критически больные.

Соответственно, способ по настоящему изобретению может облегчать прогноз вероятности последующего нежелательного явления в состоянии здоровья пациента. Это означает, что указанный способ по данному изобретению может дифференцировать пациентов с высоким риском, которые более вероятно будут страдать от осложнений, или пациентов, состояние которых станет более критическим в будущем, от пациентов с низким риском, состояние здоровья которых является стабильным или даже улучшается, в связи с чем не ожидается, что они будут страдать от нежелательного явления, такого как смерть пациента или ухудшение клинических симптомов или признаков пациента, которые могут требовать определенных терапевтических мероприятий.

Определенным преимуществом способа по данному изобретению является то, что пациент, который был определен как пациент с низким риском с помощью способа по данному изобретению, может быть более быстро выписан из ОРИТ. Кроме того, в случае пациентов с низким риском интенсивность и/или частота наблюдения состояния здоровья пациента могут быть снижены. Соответственно, больница или другое медицинское учреждение, ответственное за пациента, могут более эффективно принимать решение касательно того, какие пациенты будут требовать интенсивной медицинской терапии и наблюдения. Таким образом, соответствующая больница или учреждение, например, могут более эффективно занимать койко-места ОРИТ в случае пациентов с высоким риском. Это будет приводить к улучшению медицинской помощи в случае пациентов с высоким риском, поскольку медицинский персонал может сосредотачивать внимание на таких пациентах, в то время как пациенты с низким риском могут быть выписаны из ОРИТ. Это также будет приводить к значительным преимуществам в результате избежания расходов на излишние мероприятия, которые иным образом могут быть применены в отношении пациентов с низким риском.

Временная точка, когда пациенты были диагностированы как критически больные и начаты первые лечебные мероприятия, определяется как «временная точка 0», которая может представлять сбой эталон временной точки выделения образца, используемого для определения проАДМ или его фрагментов. Если постановка диагноза пациенту и начало лечения не происходят в одно и тоже время, временная точка 0 представляет собой временную точку, когда происходит последнее из этих двух явлений диагностики и начала медицинского лечения. В типичном случае диагностика критически больных пациентов непосредственно предшествует или сопутствует началу терапии.

Полной неожиданностью было то, что уровень проАДМ или его фрагментов в образце, полученном от пациента, может обеспечивать определяющую информацию о вероятности возникновения последующего нежелательного явления в состоянии здоровья указанных критически больных пациентов. Отсутствовало указание того, что одно измерение проАДМ или его фрагментов после постановки диагноза и начала лечения критически больного пациента может обеспечивать получение такой важной информации по отношению к эффективности текущего лечения и прогноза состояния здоровья пациента.

Применение проАДМ или их фрагментов в качестве единичного параметра в вариантах осуществления данного изобретения является предпочтительным по сравнению с применением других единичных параметров, таких как биомаркеры или клинические шкалы оценки, поскольку проАДМ является более точным в прогнозе нежелательного явления по сравнению с другими маркерами, такими как ПКТ, CRP, лактат, или клиническими шкалами оценки, такими как SOFA, SAPS II или APACHE II.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления образец выделяют из организма указанного пациента в пределах 30 минут после указанной постановки диагноза и начала лечения, или через по меньшей мере 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 дней или 10 дней после указанной постановки диагноза и начала лечения. В других вариантах осуществления образец выделяют из организма указанного пациента через 12-36 часов и/или 3-5 дней после начала лечения.

Тот факт, что уровень проАДМ или его фрагментов во временной точке, соответствующей не более приблизительно 30 минут после постановки диагноза и начала лечения, может обеспечивать получение такой информации, был полностью неожиданным.

В предпочтительных вариантах осуществления способа по данному изобретению указанный образец выделяют из организма указанного пациента через приблизительно 30 минут, 1 час, 2 часа, 3 часа, 4 часа, 5 часов, 6 часов, 7 часов, 8 часов, 9 часов, 10 часов, 11 часов, 12 часов, 14 часов, 16 часов, 18 часов, 20 часов, 22 часа, 24 часа, 30 часов, 36 часов, 42 часов, 48 часов, 60 часов, 72 часа, 84 часа, 4 дня, 5 дней, 6 дней, 7 дней, 8 дней, 9 дней или 10 дней после указанной постановки диагноза и начала лечения.

В других вариантах осуществления образец выделяют во временные точки после указанной постановки диагноза и начала антибиотикотерапии, соответствующие от 30 минут до 12 часов, 12-36 часам, 3-5 дням, 7-14 дням, 8-12 дням или 9-11 дням.

Диапазоны между теми или иными из указанных выше значений могут быть использованы для определения временной точки получения образца.

В другом предпочтительном варианте осуществления данного изобретения пациент был диагностирован с помощью по меньшей мере одного дополнительного биомаркера или клинической шкалы оценки. Особенно предпочтительно в контексте данного изобретения, если исходная постановка диагноза критического заболевания пациента во временной точке 0 была основана частично на уровне по меньшей мере одного биомаркера или определенной клинической шкалы оценки.

В определенных вариантах осуществления данное изобретение включает определение дополнительных параметров, таких как маркеры, биомаркеры, клинические шкалы оценки или т.п.

В другом предпочтительном варианте осуществления данного изобретения пациент был диагностирован с помощью по меньшей мере одного из биомаркеров прокальцитонина (ПКТ), лактата и С-реактивного белка и/или по меньшей мере одного из клинических шкал оценки SOFA, APACHE II и SAPS II. Определение проАДМ или его фрагментов в образцах пациентов, которые были диагностированы как критически больные и находятся на лечении, оказалось особенно пригодным для мониторинга терапии, если постановка диагноза пациента была основана на указанных маркерах, поскольку прогноз нежелательного явления в таких группах пациентов может быть более точным по сравнению с критически больными пациентами, которые были диагностированы с помощью других средств.

В одном варианте осуществления данного изобретения критически больной пациент представляет собой пациента с инфекционным заболеванием, пациента, диагностированного инфекционным заболеванием и одной или более имеющимися органными недостаточностями, пациента, диагностированного сепсисом, тяжелым сепсисом или септическим шоком, и/или пациента после получения травмы или после хирургического вмешательства. В свете данных, представленных в данном документе, прогностическое значение проАДМ в образцах указанных групп пациентов является особенно точным при прогнозе вероятности нежелательного явления у этих пациентов. В предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения нежелательное явление в состоянии здоровья указанного пациента представляет собой смерть, предпочтительно смерть в пределах 28-90 дней после постановки диагноза и начала лечения, новую инфекцию, органную недостаточность и/или ухудшение клинических симптомов, требующих направленной процедуры очистки, переливания препаратов крови, инфузии коллоидов, неотложной хирургической помощи, инвазивной механической вентиляции легких и/или заместительной почечной или печеночной терапии.

В предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения указанный уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) коррелирует с вероятностью последующего нежелательного явления в состоянии здоровья указанного пациента в пределах 28 дней после постановки диагноза и начала лечения. В дополнительных предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения указанный уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) коррелирует с вероятностью последующего нежелательного явления в состоянии здоровья указанного пациента в пределах 90 дней после постановки диагноза и начала лечения.

В определенных вариантах осуществления данного изобретения лечение, получаемое пациентом, включает в себя один или более видов антибиотикотерапии, инвазивную механическую вентиляцию легких, неинвазивную механическую вентиляцию легких, заместительную почечную терапию, применение вазопрессорных средств, инфузионную терапию, экстракорпоральную очистку крови и/или защиту органов.

В предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения образец выбирают из группы, состоящей из образца крови, образца сыворотки крови, образца плазмы крови и/или образца мочи.

Предпочтительно, в некоторых вариантах осуществления способ осуществляется путем определения проАДМ или его фрагмента(фрагментов), при этом указанное определение проАДМ включает в себя определение уровня СФ-проАДМ в образце. Использование определения СФ-проАДМ является предпочтительным для того или иного варианта осуществления и может рассматриваться в контексте каждого варианта осуществления соответственно. В предпочтительных вариантах осуществления может рассматриваться, что «фрагмент ADM» представляет собой СФ-проАДМ.

В дополнительных вариантах осуществления данного изобретения указанный уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) коррелирует с вероятностью последующего нежелательного явления в состоянии здоровья указанного пациента. В предпочтительном варианте осуществления уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) положительно коррелирует с вероятностью последующего нежелательного явления в состоянии здоровья указанного пациента. Другими словами, чем более высокий уровень проАДМ определен, тем более высокая вероятность последующего нежелательного явления.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления данного изобретения

- низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, или указывает на низкий риск последующего нежелательного явления, при этом низкий уровень тяжести составляет менее 4 нмоль/л, предпочтительно менее 3 нмоль/л, более предпочтительно менее 2,7 нмоль/л, или

- высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) указывает на последующее нежелательное явление, или указывает на высокий риск последующего нежелательного явления, при этом высокий уровень тяжести составляет более 6,5 нмоль/л, предпочтительно более 6,95 нмоль/л, более предпочтительно более 10,9 нмоль/л.

- уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов), составляющий менее 4 нмоль/л, предпочтительно менее 3 нмоль/л, более предпочтительно менее 2,7 нмоль/л, указывает на отсутствие последующего нежелательного явления или указывает на низкий риск последующего нежелательного явления, или

- уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов), составляющий более 6,5 нмоль/л, предпочтительно более 6,95 нмоль/л, более предпочтительно более 10,9 нмоль/л, указывает на последующее нежелательное явление или указывает на высокий риск последующего нежелательного явления.

В соответствии с настоящим изобретением термин «указывать» в контексте «указывать на последующее нежелательное явление» и «указывать на отсутствие последующего нежелательного явления» предназначен для обозначения величины риска и/или вероятности. Предпочтительно, «указание» на наличие или отсутствие нежелательного явления предназначено для оценки риска и в типичном случае его не следует рассматривать ограничивающим образом в качестве указания определенно абсолютного присутствия или отсутствия указанного явления.

Таким образом, под термином «указывает на отсутствие последующего нежелательного явления» или «указывает на последующее нежелательное явление» может подразумеваться указание на низкий или высокий риск возникновения нежелательного явления соответственно. В некоторых вариантах осуществления низкий риск связан с более низким риском по отношению к определяемым уровням проАДМ, составляющим больше указанных значений. В некоторых вариантах осуществления высокий риск связан с более высоким риском по отношению к определяемым уровням проАДМ, составляющим меньше указанных значений.

Учитывая вышеуказанное, определение высоких и низких уровней тяжести проАДМ в то же время является очень надежным по отношению к определению наличия или отсутствия последующего нежелательного явления при использовании граничных значений, раскрытых в данном документе, в результате чего оценка риска позволяет выполнить соответствующее действие со стороны медицинского работника.

Полной неожиданностью было то, что уровень проАДМ или его фрагментов могли коррелировать с вероятностью присутствия или отсутствия последующего нежелательного явления в контексте критически больных пациентов, которые получали лечение в этих временные точки. Уровни проАДМ в образцах, полученных от критически больных пациентов по данному изобретению, можно предпочтительно классифицировать на 3 различных уровня тяжести проАДМ. Высокие уровни проАДМ указывают на высокий уровень тяжести, промежуточные уровни указывают на промежуточный уровень тяжести и низкие уровни указывают на низкие уровни тяжести. Соответствующие концентрации, которые определяют граничные значения для соответствующих уровней тяжести зависят от многочисленных параметров, таких как временная точка выделения образца после постановки диагноза и начала лечения пациента с помощью способа по данному изобретению и способа, используемого для определения уровня проАДМ или его фрагментов в указанном образце.

Граничные значения, раскрытые в данном документе, предпочтительно относятся к измерениям уровня белка проАДМ или его фрагментов в образце плазмы крови, полученном от пациента с помощью анализа BRAHMS KRYPTOR Thermo Scientific. Соответственно, значения, раскрытые в данном документе, могут варьировать в некоторой степени в зависимости от используемого способа детекции/измерения, и предполагается, что конкретные значения, раскрытые в данном документе, также включают в себя соответствующие значения, определенные с помощью других способов.

В одном варианте осуществления данного изобретения низкий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, при этом низкий уровень тяжести составляет меньше граничного значения в диапазоне от 1,5 нмоль/л до 4 нмоль/л. Любое значение в пределах указанных диапазонов может рассматриваться в качестве соответствующего граничного значения для низких уровней тяжести проАДМ или их фрагментов, например, 1,5, 1,55, 1,6, 1,65, 1,7, 1,75, 1,8, 1,85, 1,9, 1,95, 2,0, 2,05, 2,1, 2,15, 2,2, 2,25, 2,3, 2,35, 2,4, 2,45, 2,5, 2,55, 2,6, 2,65, 2,7, 2,75, 2,8, 2,85, 2,9, 2,95, 3,0, 3,05, 3,1, 3,15, 3,2, 3,25, 3,3, 3,35, 3,4, 3,45, 3,5, 3,55, 3,6, 3,65, 3,7, 3,75, 3,8, 3,85, 3,9, 3,95, 4,0 нмоль/л.

В одном варианте осуществления данного изобретения высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на последующее нежелательное явление, при этом высокий уровень тяжести составляет выше граничного значения в диапазоне от 6,5 нмоль/л до 12 нмоль/л. Любое значение в пределах указанных диапазонов может рассматриваться в качестве соответствующего граничного значения для высоких уровней тяжести проАДМ или их фрагментов, например, 6,5, 6,55, 6,6, 6,65, 6,7, 6,75, 6,8, 6,85, 6,9, 6,95, 7,0, 7,05, 7,1, 7,15, 7,2, 7,25, 7,3, 7,35, 7,4, 7,45, 7,5, 7,55, 7,6, 7,65, 7,7, 7,75, 7,8, 7,85, 7,9, 7,95, 8,0, 8,05, 8,1, 8,15, 8,2, 8,25, 8,3, 8,35, 8,4, 8,45, 8,5, 8,55, 8,6, 8,65, 8,7, 8,75, 8,8, 8,85, 8,9, 8,95, 9,0, 9,05, 9,1, 9,15, 9,2, 9,25, 9,3, 9,35, 9,4, 9,45, 9,5, 9,55, 9,6, 9,65, 9,7, 9,75, 9,8, 9,85, 9,9, 9,95, 10,0, 10,05, 10,1, 10,15, 10,2, 10,25, 10,3, 10,35, 10,4, 10,45, 10,5, 10,55, 10,6, 10,65, 10,7, 10,75, 10,8, 10,85, 10,9, 10,95, 11,0, 11,05, 11,1, 11,15, 11,2, 11,25, 11,3, 11,35, 11,4, 11,45, 11,5, 11,55, 11,6, 11,65, 11,7, 11,75, 11,8, 11,85, 11,9, 11,95, 12,0 нмоль/л.

Граничные значения, раскрытые в данном документе, связанные с уровнем маркера или биомаркера, такого как проАДМ или ПКТ, необходимо понимать как «равные или больше» определенного граничного значения или «равные или меньше» определенного граничного значения. Например, вариант осуществления, относящийся к уровню проАДМ или его фрагменту(фрагментов), составляющему меньше 4 нмоль/л, предпочтительно меньше 3 нмоль/л, более предпочтительно менее 2,7 нмоль/л, необходимо понимать как относящийся к уровню проАДМ или его фрагмента(фрагментов), равному или меньше 4 нмоль/л, предпочтительно равному или меньше 3 нмоль/л, более предпочтительно равному или меньше 2,7 нмоль/л. Наоборот, вариант осуществления, относящийся к уровню проАДМ или его фрагменту(фрагментов), составляющему больше 6,5 нмоль/л, предпочтительно больше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно больше 10,9 нмоль/л, необходимо понимать как относящийся к уровню проАДМ или его фрагмента(фрагментов), равному или больше 6,5 нмоль/л, предпочтительно равному или больше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно равному или больше 10,9 нмоль/л.

В вариантах осуществления, описанных в данном документе, уровни тяжести определены предпочтительно с помощью граничных значений, которые представляют собой границы между низкими, промежуточными или высокими уровнями тяжести. Любые варианты осуществления, которые, таким образом, представляют собой граничные значения, могут использовать формат одного граничного значения в качестве границы между двумя уровнями тяжести, или одного граничного уровня для каждого уровня тяжести.

В некоторых вариантах осуществления граничное значение проАДМ между низкими и промежуточными уровнями тяжести составляет:

2,7 нмоль/л ± 20%, или 2,7 нмоль/л ± 15%, или ± 12%, ± 10%, ± 8%, или ± 5%, а между промежуточными и высокими уровнями тяжести:

10,9 нмоль/л ± 20%, или 10,9 нмоль/л ± 15%, или ± 12%, ± 10%, ± 8%, или ± 5%.

Указанные граничные значения предпочтительно являются релевантными для оценки уровня тяжести проАДМ на исходном уровне, другими словами, при постановке диагноза и/или начале лечения и/или госпитализации.

2,80 нмоль/л ± 20%, или 2,80 нмоль/л ± 15%, или ± 12%, ± 10%, ± 8%, или ± 5%, а между промежуточными и высокими уровнями тяжести:

9,5 нмоль/л ± 20%, или 9,5 нмоль/л ± 15%, или ± 12%, ± 10%, ± 8%, или ± 5%.

Указанные граничные значения предпочтительно являются релевантными для оценки уровня тяжести проАДМ через 1 день, другими словами, через примерно 24 часа после исходного уровня, другими словами, через примерно 1 день после постановки диагноза и/или начала лечения и/или госпитализации. Например, в вариантах осуществления, в которых проАДМ измеряется через один день после начала терапии, могут быть использованы граничные значения для дня 1. Как становится очевидным из вышеуказанного, граничное значение между промежуточным и высоким значением является в некоторой степени более низким, приблизительно меньше, чем на исходном уровне, т.е., со временем даже в некоторой степени более низкие (но все еще относительно высокие) уровни ассоциируются с высоким риском и классифицируются в высоком уровне тяжести.

7,7 нмоль/л ± 20%, или 7,7 нмоль/л ± 15%, или ± 12%, ± 10%, ± 8%, или ± 5%.

Указанные граничные значения предпочтительно являются релевантными для оценки уровня тяжести проАДМ через 4 дня, другими словами, через примерно 4 дня после исходного уровня, другими словами, через примерно 4 дня после постановки диагноза и/или начала лечения и/или госпитализации. Например, в вариантах осуществления, в которых проАДМ измеряется через 4 дня после начала терапии, могут быть использованы граничные значения для дня 4. Как становится очевидным из вышеуказанного, граничное значение между промежуточным и высоким значением является в некоторой степени более низким, приблизительно меньше, чем на исходном уровне или в день 1, т.е., со временем даже в некоторой степени более низкие (но все еще относительно высокие) уровни ассоциируются с высоким риском и классифицируются в высоком уровне тяжести.

В некоторых вариантах осуществления граничные уровни, подлежащие использованию в вариантах осуществления, описанных выше, могут быть скорректированы в соответствии с соответствующим уровнем в зависимости от дня, в который проводится измерение. Каждое из граничных значений подлежит некоторой вариации в результате общей дисперсии, что может быть ожидаемо специалистом в данной области техники. Релевантные граничные уровни определяют на основании исчерпывающих данных, представленных ниже, но во всех возможных вариантах осуществления не предполагается, что они являются конечными или точными значениями. При использовании аналогичного граничного значения по отношению к упомянутым значениям, т.е., в пределах ± 20%, ± 15%, ± 12%, ± 10%, ± 8%, или ± 5%, как может быть определено специалистом в данной области техники, можно предполагать аналогичные результаты.

Любой вариант осуществления, описывающий ± 20% от определенного граничного значения, может также рассматриваться как раскрывающий ± 15%, ± 12%, ± 10%, ± 8%, или ± 5%.

Любой вариант осуществления, описывающий граничное значение для исходного уровня, дня 1 или дня 4, может также рассматриваться как раскрывающий соответствующие граничные значения для других дней, например, вариант осуществления, описывающий граничное значение исходного уровня, может также рассматриваться как относящийся к тому же самому варианту осуществления, описывающему граничное значения дня 1 или дня 4.

- низкий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, при этом низкий уровень тяжести составляет меньше 2,7 нмоль/л, или

- высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на последующее нежелательное явление, при этом высокий уровень тяжести составляет больше 10,9 нмоль/л.

Указанный вариант осуществления данного изобретения является особенно предпочтительным, если уровни проАДМ или его фрагментов определяют в образце, который был выделен в день постановки диагноза и начала лечения пациента, особенно через приблизительно 30 минут после постановки диагноза и начала лечения. Это становится очевидным из анализа, предложенного в Примере 3.

- высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на последующее нежелательное явление, при этом высокий уровень тяжести составляет больше 10,9 нмоль/л,

- при этом уровень проАДМ или его фрагментов определяется в образце, который был выделен предпочтительно в день постановки диагноза и начала лечения.

- низкий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, при этом низкий уровень тяжести составляет меньше 2,8 нмоль/л, или

- высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на последующее нежелательное явление, при этом высокий уровень тяжести составляет больше 9,5 нмоль/л.

Указанный вариант осуществления данного изобретения является особенно предпочтительным, если уровни проАДМ или его фрагментов определяют в образце, который был выделен в день 1 после указанной постановки диагноза и начала лечения, что становится очевидным из Таблицы 12.

- высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на последующее нежелательное явление, при этом высокий уровень тяжести составляет больше 9,5 нмоль/л,

- при этом уровень проАДМ или его фрагментов определяется в образце, который был выделен предпочтительно через 1 день после постановки диагноза и начала лечения.

- низкий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, при этом низкий уровень тяжести составляет меньше 2,25 нмоль/л.

Указанное граничное значение для низкого уровня тяжести является особенно предпочтительным, поскольку в некоторых вариантах осуществления оно было определено как оптимальное граничное значение, между низким и промежуточным уровнем тяжести проАДМ или его фрагментов, когда образец выделяется из организма пациента через 4 дня, через 7 дней или через 10 дней после указанной постановки диагноза и начала лечения. Это становится очевидным из анализа, предложенного в Таблице 12.

- низкий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, при этом низкий уровень тяжести составляет меньше 2,25 нмоль/л,

- при этом уровень проАДМ или его фрагментов определяется в образце, который был выделен предпочтительно через 4, 7 или 10 дней после постановки диагноза и начала лечения.

- высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на последующее нежелательное явление, при этом высокий уровень тяжести составляет больше 7,7 нмоль/л.

Указанное граничное значение для высокого уровня тяжести является особенно предпочтительным, поскольку в некоторых вариантах осуществления оно было определено как оптимальное граничное значение, между промежуточным и высоким уровнем тяжести проАДМ или его фрагментов, когда образец выделяется из организма пациента через 4 дня после указанной постановки диагноза и начала лечения. Это становится очевидным из анализа, предложенного в Таблице 12.

- высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на последующее нежелательное явление, при этом высокий уровень тяжести составляет больше 7,7 нмоль/л,

- при этом уровень проАДМ или его фрагментов определяется в образце, который был выделен через 4 дня после постановки диагноза и начала лечения.

- высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на последующее нежелательное явление, при этом высокий уровень тяжести составляет больше 6,95 нмоль/л.

Указанное граничное значение для высокого уровня тяжести является особенно предпочтительным, поскольку в некоторых вариантах осуществления оно было определено как оптимальное граничное значение, между промежуточным и высоким уровнем тяжести проАДМ или его фрагментов, когда образец выделяется из организма пациента через 7 дня после указанной постановки диагноза и начала лечения. Это становится очевидным из анализа, предложенного в Таблице 12.

- высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на последующее нежелательное явление, при этом высокий уровень тяжести составляет больше 6,95 нмоль/л,

- при этом уровень проАДМ или его фрагментов определяется в образце, который был выделен через 7 дня после постановки диагноза и начала лечения.

- высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на последующее нежелательное явление, при этом высокий уровень тяжести составляет больше 7,45 нмоль/л.

Указанное граничное значение для высокого уровня тяжести является особенно предпочтительным, поскольку оно было определено как оптимальное граничное значение, между промежуточным и высоким уровнем тяжести проАДМ или его фрагментов, когда образец выделяется из организма пациента через 10 дня после указанной постановки диагноза и начала лечения. Это становится очевидным из анализа, предложенного в Таблице 12.

- высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагмента) указывает на последующее нежелательное явление, при этом высокий уровень тяжести составляет больше 7,45 нмоль/л,

- при этом уровень проАДМ или его фрагментов определяется в образце, который был выделен через 10 дня после постановки диагноза и начала лечения.

Предпочтительно, пациенты по данному изобретению представляют собой пациентов отделения реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ), при этом:

- низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) указывает на выписку указанного пациента из ОРИТ, или

- высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента(фрагментов) указывает на модификацию лечения пациента в ОРИТ.

Определенным преимуществом данного изобретения, которое основано на классификации определенных уровней проАДМ или его фрагментов, является то, что возможно оценить вероятность возникновения последующего нежелательного явления в состоянии здоровья пациента ОРИТ. На основании указанной оценки возможно регулировать следующие варианты лечения и лечебные решения.

Например, если уровень проАДМ или его фрагментов попадает в категорию низкого уровня тяжести проАДМ, лечащий врач может принимать решение с большей достоверностью о выписке указанного пациента из ОРИТ, поскольку маловероятно, что произойдет нежелательное явление в состоянии здоровья указанного пациента, предпочтительно, в пределах следующих 28 дней, более предпочтительно в пределах следующих 90 дней. Соответственно, может отсутствовать необходимость удерживать пациента в ОРИТ. Также может быть возможным принятие решений о том, что текущее лечение приводит к успешному улучшению состояния здоровья пациента, оцениваемого с помощью измерения риска нежелательного явления.

В отличие от этого, если определение уровня проАДМ или его фрагментов указанного пациента ОРИТ указывает на высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагментов, лечащий врач должен удерживать пациента в ОРИТ. В качестве дополнения необходимо учитывать корректировку лечения пациента, поскольку вероятно, что текущее лечение не приводит к улучшению состояния здоровья пациента, поэтому пациент более вероятно будет страдать от нежелательного явления в будущем.

Модификация лечения в контексте данного изобретения будет включать, но не ограничиваясь этим, корректировку дозы или режима введения текущего лекарственного препарата, изменение текущего лечения на другое лечение, добавление дополнительного варианта лечения к существующему лечению или остановку текущего лечения. Различные варианты лечения, которые могут быть применены к пациентам в контексте данного изобретения, были раскрыты в подробном описании данной заявки на патент.

В соответствии с особенно предпочтительным вариантом осуществления данного изобретения низкий уровень тяжести составляет менее 2,25 нмоль/л, при этом указанный образец выделяют из организма пациента ОРИТ через 1 день или более после указанной постановки диагноза и начала лечения, и низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) указывает на выписку указанного пациента из ОРИТ.

Таким образом, данное изобретение дополнительно относится к способу мониторинга терапии, включающему прогноз, оценку риска и/или стратификацию риска последующего нежелательного явления в состоянии здоровья пациента, включающему

- получение образца от указанного пациента, при этом пациент представляет собой пациента отделения реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ) и было начато медицинское лечение, при этом образец был выделен из организма пациента после помещения в ОРИТ и начала лечения,

- определение уровня адреномедуллина (ADM) или его фрагмента(фрагментов) в указанном образце,

В контексте способа по данному изобретению, относящегося к пациентам ОРИТ, референтное значение для временной точки, соответствующей выделению образца, используемого для определения проАДМ или его фрагментов, представляет собой временную точку, когда пациентов помещают в ОРИТ и начинают первые лечебные мероприятия (временная точка 0). Указанная временная точка соответствует постановке диагноза и началу лечения в способе по данному изобретению, относящемуся к пациентам, которые были диагностированы как критически больные.

Все варианты осуществления способа по данному изобретению, относящиеся к пациентам, которые были диагностированы как критически больные, при этом также считаются соответствующими вариантам осуществления способа по данному изобретению, относящемуся к пациентам ОРИТ.

Данное изобретение дополнительно относится к способам лечения по медицинским показаниям, описанным в данном документе, при этом популяцию пациентов, подлежащую лечению, определяют, стратифицируют, подвергают мониторингу, подвергают прогнозу, подвергают диагностике или иным образом оценивают с помощью способов, описанных в данном документе. Соответствующие виды лечения для способов раскрыты в данном документе. Таким образом, данное изобретение является особенно предпочтительным при определении пациентов с повышенным риском наличия нежелательного явления и начале профилактических или снижающих риск видов лечения, или начале видов лечения, направленных на наличие того или иного медицинского состояния, предпочтительно состояний, воспринимаемых как критическое заболевание.

Варианты осуществления данного изобретения, относящиеся к дополнительному определению уровня ПКТ и/или других биомаркеров или клинических шкал оценки в первом и втором образце (или во временной точке выделения первого и второго образца)

Предпочтительный вариант осуществления данного изобретения включает дополнительно определение уровня ПКТ или его фрагмента(фрагментов) в образце, выделенном из организма пациента. В предпочтительном варианте осуществления образец для определения уровня ПКТ или его фрагмента(фрагментов) выделяют до, в момент или после временной точки постановки диагноза и начала лечения.

Особенно предпочтительным является комбинирование определения проАДМ или его фрагментов с определением ПКТ или его фрагментов в образце, при этом образец, используемый для определения проАДМ, может быть тем же самым или другим образцом, используемым для детекции ПКТ.

Комбинированное определение проАДМ или его фрагментов с определением ПКТ или его фрагментов, либо в том же самом образце, либо в образцах, полученных в различные временные точки, обеспечивает синергический эффект в отношении точности и надежности определения риска последующего нежелательного явления. Указанные синергические эффекты также существуют для комбинированной оценки проАДМ или его фрагментов с другими маркерами или клиническими шкалами оценки, такими как лактат, CRP, SOFA, SAPS II, APACHE II или другие клинические оценки.

В соответствии с дополнительным предпочтительным вариантом осуществления данного изобретения способ, описанный в данном документе, включает дополнительно

- определение уровня ПКТ или фрагмента(фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец выделяют до, в момент или после постановки диагноза и начала лечения,

- определение уровня ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце, выделенном из организма указанного пациента, при этом второй образец был выделен после первого образца, предпочтительно в пределах 30 минут после выделения первого образца или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после выделения первого образца, и

- определение разницы в уровне ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с уровнем ПКТ или его фрагментом(фрагментами) в первом образце.

Особенно предпочтительным является комбинирование определения проАДМ или его фрагментов в образце, выделенном из организма пациента, с определением ПКТ или его фрагментов в первом образце и определением уровня ПКТ или его фрагментов во втором образце, выделенном после первого образца, при этом образец, используемый для определения проАДМ или его фрагментов, может быть тем же самым или отличаться от первого образца или второго образца, используемых для определения ПКТ или его фрагментов.

В предпочтительном варианте осуществления способ, описанный в данном документе, включает дополнительно

- определение уровня ПКТ или фрагмента(фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец выделяют в момент или до временной точки постановки диагноза и начала лечения (временная точка 0),

- определение уровня ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце (образец по п. 1), выделенном из организма указанного пациента после постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в пределах 30 минут после постановки указанного диагноза и начала лечения или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после постановки указанного диагноза и начала лечения, и

Особенно предпочтительным является комбинирование определения проАДМ или его фрагментов (во втором образце) с определением ПКТ или его фрагментов в более раннем образце (первом образце), который выделяют из организма указанного пациента и который может быть использован для диагностики указанного пациента в качестве критически больного во временной точке 0, и определения уровня ПКТ или его фрагментов во втором образце, выделенном в определенной временной точке после постановки диагноза и начала лечения, которая предпочтительно представляет собой ту же самую временную точку, в которой определяют проАДМ или его фрагменты. Как указано с помощью данных, представленных ниже, определение разницы в уровне ПКТ или его фрагментов во втором образце по сравнению с первым образцом привносит дополнительную информацию к информации, полученной исходя из уровней проАДМ или его фрагментов во втором образце. На основании указанной комбинированной информации может быть возможным с более высокой вероятностью прогноз того, произойдет ли нежелательное явление в состоянии здоровья указанного пациента по сравнению с прогнозом вероятности нежелательного явления исключительно на основании информации об уровне проАДМ или его фрагментов во втором образце. Это представляет собой неожиданный результат, поскольку биомаркеры для сепсиса в типичном случае не являются синергическими или комплементарными, а представляют собой исключительно альтернативные диагностические маркеры.

- определение уровня лактата в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец выделяют в момент или до временной точки постановки диагноза и начала лечения (временная точка 0),

- определение уровня лактата во втором образце (образец по п. 1), выделенном из организма указанного пациента в пределах 30 минут после постановки указанного диагноза и начала лечения или через по меньшей мере 30 минут, предпочтительно 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после постановки указанного диагноза и начала лечения, и

- определение разницы в уровне лактата во втором образце по сравнению с уровнем лактата в первом образце.

Предпочтительный вариант осуществления данного изобретения включает дополнительное определение уровня CRP или его фрагмента(фрагментов) в образце, выделенном из организма пациента. В предпочтительном варианте осуществления образец для определения уровня CRP или его фрагмента(фрагментов) выделяют до, в момент или после временной точки постановки диагноза и начала лечения.

Особенно предпочтительным является комбинирование определения проАДМ или его фрагментов с определением CRP или его фрагмента(фрагментов) в образце, при этом образец, используемый для определения проАДМ, может быть тем же самым или другим образцом, используемым для детекции CRP или его фрагмента(фрагментов).

- определение уровня CRP или фрагмента(фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец выделяют до, в момент или после постановки диагноза и начала лечения,

- определение уровня CRP или его фрагмента(фрагментов) во втором образце, выделенном из организма указанного пациента, при этом второй образец был выделен после первого образца, предпочтительно в пределах 30 минут после выделения первого образца или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после выделения первого образца, и

- определение разницы в уровне CRP или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с уровнем лактата в первом образце.

- определение уровня CRP или фрагмента(фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец выделяют в момент или до временной точки постановки диагноза и начала лечения (временная точка 0),

- определение уровня CRP или его фрагмента(фрагментов) во втором образце (образец по п. 1), выделенном из организма указанного пациента в пределах 30 минут после постановки указанного диагноза и начала лечения или через по меньшей мере 30 минут, предпочтительно 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после постановки указанного диагноза и начала лечения, и

- определение разницы в уровне CRP или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с уровнем CRP или его фрагментом(фрагментами) в первом образце.

Предпочтительный вариант осуществления данного изобретения включает дополнительно определение SOFA. В предпочтительном варианте осуществления SOFA определяют до, в момент или после временной точки постановки диагноза и начала лечения.

Особенно предпочтительным является комбинирование определения проАДМ или его фрагментов с определением SOFA, при этом временная точка выделения образца для определения проАДМ может быть той же самой или отличаться от временной точки определения SOFA.

- определение первого значения SOFA до, в момент или после временной точки постановки диагноза и начала лечения,

- определение второго значения SOFA в пределах 30 минут после определения первого значения SOFA или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после определения первого значения SOFA, и

- определение разницы двух определенных значений SOFA.

- определение SOFA в момент или до временной точки постановки диагноза и начала лечения (временная точка 0),

- определение SOFA в пределах 30 минут после постановки указанного диагноза и начала лечения или через по меньшей мере 30 минут, предпочтительно 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после постановки указанного диагноза и начала лечения, и

- определение разницы в SOFA, определенной после указанной постановки диагноза и начала лечения, и SOFA, определенной во временной точке 0.

Предпочтительный вариант осуществления данного изобретения включает дополнительно определение SAPS II. В предпочтительном варианте осуществления SAPS II определяют до, в момент или после временной точки постановки диагноза и начала лечения.

Особенно предпочтительным является комбинирование определения проАДМ или его фрагментов с определением SAPS II, при этом временная точка выделения образца для определения проАДМ может быть той же самой или отличаться от временной точки определения SAPS II.

- определение первого значения SAPS II до, в момент или после временной точки постановки диагноза и начала лечения,

- определение второго значения SAPS II в пределах 30 минут после определения первого значения SOFA или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после определения первого значения SAPS II, и

- определение разницы двух определенных значений SAPS II.

- определение SAPS II в момент или до временной точки постановки диагноза и начала лечения (временная точка 0),

- определение SAPS II в пределах 30 минут после постановки указанного диагноза и начала лечения или через по меньшей мере 30 минут, предпочтительно 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после постановки указанного диагноза и начала лечения, и

- определение разницы в SAPS II, определенной после указанной постановки диагноза и начала лечения, и SAPS II, определенной во временной точке 0.

Предпочтительный вариант осуществления данного изобретения включает дополнительно определение APACHE II. В предпочтительном варианте осуществления APACHE II определяют до, в момент или после временной точки постановки диагноза и начала лечения.

Особенно предпочтительным является комбинирование определения проАДМ или его фрагментов с определением APACHE II, при этом временная точка выделения образца для определения проАДМ может быть той же самой или отличаться от временной точки определения APACHE II.

- определение первого значения APACHE II до, в момент или после временной точки постановки диагноза и начала лечения,

- определение второго значения APACHE II в пределах 30 минут после определения первого значения APACHE II или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после определения первого значения APACHE II, и

- определение разницы двух определенных значений APACHE II.

- определение APACHE II в момент или до временной точки постановки диагноза и начала лечения (временная точка 0),

- определение APACHE II в пределах 30 минут после постановки указанного диагноза и начала лечения или через по меньшей мере 30 минут, предпочтительно 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после постановки указанного диагноза и начала лечения, и

- определение разницы в APACHE II, определенной после указанной постановки диагноза и начала лечения, и APACHE II, определенной во временной точке 0.

В предпочтительном варианте осуществления данного изобретения

- более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов), при этом низкий уровень тяжести составляет меньше 4 нмоль/л, предпочтительно меньше 3 нмоль/л, более предпочтительно меньше 2,7 нмоль/л, указывают на отсутствие последующего нежелательного явления, или

- более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов), при этом высокий уровень тяжести составляет больше 6,5 нмоль/л, предпочтительно больше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно больше 10,9 нмоль/л, указывают на последующее нежелательное явление.

В контексте данного изобретения определение более низкого уровня маркера во втором образце по сравнению с первым образцом может указывать на снижение уровней соответствующего маркера у пациента в ходе начатого лечения. Наоборот, повышенные уровни во втором образце по сравнению с первым образцом могут указывать на повышенные уровни маркера в ходе лечения.

Полной неожиданностью было то, что пациент со снижением уровня ПКТ со дня постановки диагноза и начала лечения до более поздней временной точки, составляющий по меньшей мере 30 минут после начала лечения, может все еще демонстрировать повышенный риск последующего нежелательного явления. В частности, указанный повышенный риск является очевидным, если был определен высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагментов.

Считается, что ПКТ представляет собой маркер критического заболевания пациента, в частности, в случае пациента с сепсисом. Соответственно, считается, что снижение значений ПКТ в ходе лечения указывает на улучшение состояния здоровья пациента. В то же время, как раскрыто в данном документе, стало очевидным, что несмотря на снижение значения ПКТ, пациент может иметь риск наличия последующего нежелательного явления, если уровень проАДМ или его фрагментов в более поздней временной точке представляет собой высокий уровень тяжести. Соответственно, лечащий врач может регулировать лечение такого пациента, который не будет определен как пациент с высоким риском без определения проАДМ или его фрагментов во втором образце.

С другой стороны, врач может быть уверен, что нежелательное явление вряд ли произойдет, если уровень ПКТ снижается в ходе лечения, в то время как уровень проАДМ или его фрагментов во втором образце представляет собой низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагментов. Соответственно, такие пациенты могут быть определены как пациенты с низким риском. Полной неожиданностью было то, что комбинация определения изменения уровней ПКТ в ходе лечения критически больного пациента с определением уровней проАДМ в более поздней временной точке, приводит к улучшенному мониторингу, прогнозу лечения и оценке риска возникновения последующего нежелательного явления в состоянии здоровья пациента.

В соответствии с другим предпочтительным вариантом осуществления способа, описанного в данном документе,

- повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов), при этом низкий уровень тяжести составляет меньше 4 нмоль/л, предпочтительно меньше 3 нмоль/л, более предпочтительно меньше 2,7 нмоль/л, указывают на отсутствие последующего нежелательного явления, или

- повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов), при этом высокий уровень тяжести составляет больше 6,5 нмоль/л, предпочтительно больше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно больше 10,9 нмоль/л, указывают на последующее нежелательное явление.

Большим преимуществом данного изобретения является то, что возможно определить пациентов с низким риском в группе критически больных пациентов на основе низкого уровня тяжести проАДМ во втором образце, даже в случае, если уровень ПКТ возрастает в ходе лечения пациента. Это было полной неожиданностью, поскольку считалось, что повышенные уровни ПКТ указывают на то, что состояние критически больного пациента ухудшается и, таким образом, будет предполагаться возникновение нежелательного явления. Соответственно, успешное лечение может быть остановлено и замещено модифицированным или другим лечением. Дополнительное определение проАДМ в более поздней временной точке позволяет определять пациентов с низким риском в группе пациентов с возрастающими уровнями ПКТ, что представляет собой значительное преимущество данного изобретения.

С другой стороны, возможно определение пациентов с высоким риском с возрастающими уровнями ПКТ и высоким уровнем тяжести проАДМ или его фрагментов, что представляет собой более точное определение таких пациентов, которые, вероятно, будут иметь нежелательное явление в будущем. Соответственно, лечение указанных пациентов можно регулировать, при этом сводя к минимуму риск того, что указанный пациент мог представлять собой пациента с низким риском.

В одном варианте осуществления данное изобретение дополнительно включает информирование пациента о результатах диагностического способа, описанного в данном документе.

Варианты осуществления данного изобретения, относящиеся к определению уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) в первом и втором образце

Предпочтительный вариант осуществления способа по данному изобретению включает дополнительно

- определение уровня проАДМ или фрагмента(фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец выделяют до, в момент или после постановки диагноза и начала лечения, и

- определение уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце, выделенном из организма указанного пациента, при этом указанный второй образец был выделен после первого образца и после временной точки постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут после выделения первого образца или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после выделения первого образца, и

- определение того, является ли разница в уровне CRP или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с уровнем CRP или его фрагментом(фрагментами) в первом образце очевидной.

Первый и второй образец, используемые для определения уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) могут быть теми же самыми или отличаться от первого и второго образца, используемых для определения уровня ПКТ или его фрагмента(фрагментов).

- определение уровня проАДМ или фрагмента(фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец выделяют в момент или до временной точки постановки диагноза и начала лечения (временная точка 0), и

- определение уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце после постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после постановки указанного диагноза и начала лечения, и

- определение уровня проАДМ или фрагмента(фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец используют для диагностики указанного пациента как критически больного (временная точка 0), и

Дополнительный предпочтительный вариант осуществления способа по данному изобретению включает дополнительно

- определение уровня проАДМ или фрагмента(фрагментов) и необязательно РСТ или его фрагмента(фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец выделяют в момент или до временной точки постановки диагноза и начала лечения (временная точка 0), и

- определение уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) и необязательно РСТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце, выделенном из организма указанного пациента, после постановки указанного диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут или через по меньшей мере 30 минут после постановки указанного диагноза и начала лечения, предпочтительно через 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после постановки указанного диагноза и начала лечения, и

- определение разницы в уровне проАДМ или его фрагмента(фрагментов) и/или разницы в уровне РСТ или его фрагментов во втором образце по сравнению с уровнем проАДМ или его фрагментом(фрагментами) в первом образце.

- определение уровня проАДМ или фрагмента(фрагментов) и необязательно РСТ или его фрагмента(фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец используют для диагностики указанного пациента как критически больного (временная точка 0),и

Неожиданным было то, что определение изменения уровней проАДМ или его фрагментов от временной точки постановки диагноза и начала лечения до более поздней временной точки может обеспечивать получение дополнительной информации в отношении возникновения последующего нежелательного явления в состоянии здоровья пациента, который был диагностирован как критически больной. Значительным преимуществом указанного варианта осуществления данного изобретения является то, что тот же самый образец, который используется для определения диагностического маркера во временной точке 0, также может использоваться для определения исходного уровня проАДМ или его фрагментов, который можно сравнивать с уровнем проАДМ или его фрагментов в более поздней временной точке после постановки диагноза и начала лечения. С помощью определения изменения уровня проАДМ или его фрагментов в ходе лечения пациентов точность прогноза возникновения нежелательного явления в состоянии здоровья пациента может быть дополнительно повышена.

В одном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, повышенный уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом указывает на последующее нежелательное явление.

Неожиданным было то, что на основании изменения уровня проАДМ или его фрагментов возможно достоверно прогнозировать вероятность возникновения нежелательного явления в состоянии здоровья пациента без определения дополнительных маркеров. Повышение уровня или уровня тяжести проАДМ или его фрагментов от временной точки постановки диагноза и начала лечения указывает на то, что вероятным является то, что произойдет нежелательное явление. Соответственно, на основании изменения проАДМ или его фрагментов в ходе лечения врач может принять решение о том, необходимо ли изменить или модифицировать лечение пациента или придерживаться исходного лечения.

В предпочтительном варианте осуществления способа по данному изобретению

- повышенный уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) и повышенный уровень РСТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом указывает на последующее нежелательное явление, и/или

- повышенный уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) и более низкий уровень РСТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом указывает на последующее нежелательное явление.

В предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения повышенный уровень проАДМ или его фрагментов во втором образце по сравнению с первым образом связан с повышенным уровнем тяжести проАДМ или его фрагментов. Наоборот, в предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения более низкий уровень проАДМ или его фрагментов во втором образце по сравнению с первым образом связан с более низким уровнем тяжести проАДМ или его фрагментов во втором образце по сравнению с первым образцом.

Значительным преимуществом, которое основано на изменении уровня проАДМ или его фрагментов в комбинации с определенным изменением ПКТ или его фрагментов в ходе лечения критически больного пациента является то, что может быть определена вероятность нежелательного явления в состоянии здоровья пациента. Соответственно, возможно надежно определить пациентов с высоким риском и пациентов с низким риском на основании изменений указанных двух маркеров. Было особенно неожиданным то, что снижение уровней ПКТ может быть ассоциировано с повышенной вероятностью последующего нежелательного явления, если они совпадают с возрастающими уровнями проАДМ или его фрагментов.

Дополнительные варианты осуществления данного изобретения

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления данного изобретения пациенты представляют собой пациентов отделения реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ), и

- более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов), при этом низкий уровень тяжести составляет меньше 4 нмоль/л, предпочтительно меньше 3 нмоль/л, более предпочтительно меньше 2,7 нмоль/л, указывают на выписку указанного пациента из ОРИТ;

- более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов), при этом высокий уровень тяжести составляет больше 6,5 нмоль/л, предпочтительно больше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно больше 10,9 нмоль/л, указывают на необходимость модификации лечения пациента в ОРИТ;

- повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов), при этом низкий уровень тяжести составляет меньше 4 нмоль/л, предпочтительно меньше 3 нмоль/л, более предпочтительно меньше 2,7 нмоль/л, указывают на выписку указанного пациента из ОРИТ; или

- повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов), при этом высокий уровень тяжести составляет больше 6,5 нмоль/л, предпочтительно больше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно больше 10,9 нмоль/л, указывают на необходимость модификации лечения пациента в ОРИТ.

Предпочтительным является то, чтобы с помощью комбинированного анализа изменения уровня ПКТ или его фрагментов и уровня тяжести проАДМ или его фрагментов во временной точке выделения второго образца (более поздняя временная точка) у пациента ОРИТ можно быть принять решение о том, представляет ли собой пациент пациента с низким риском, который может быть выписан из ОРИТ, при этом поддерживается текущее лечение, или представляет ли собой пациент пациента с высоким риском, который требует модификации или корректировки текущей терапии в ОРИТ с целью предупреждения возникновения нежелательного явления, на которое указывает соответствующая комбинация изменения уровней ПКТ и текущего уровня тяжести проАДМ.

В дополнительном варианте осуществления данное изобретение относится к набору для осуществления способа по данному изобретению, при этом набор содержит

- реагенты для детекции для определения уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) и необязательно для определения уровня ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка или их фрагмента(фрагментов) в образце, полученном от субъекта, и

- референтные данные, такие как референтный уровень, соответствующий высоким и/или низким уровням тяжести проАДМ, при этом низкий уровень тяжести составляет менее 4 нмоль/л, предпочтительно менее 3 нмоль/л, более предпочтительно менее 2,7 нмоль/л, а высокий уровень тяжести составляет более 6,5 нмоль/л, предпочтительно более 6,95 нмоль/л, более предпочтительно более 10,9 нмоль/л, и необязательно уровни ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка, при этом указанные референтные данные предпочтительно хранятся на машиночитаемом носителе и/или используются в форме компьютерного выполняемого кода, выполненного с возможностью сравнения определенных уровней проАДМ или его фрагмента(фрагментов) и необязательно определенных уровней ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка или их фрагмента(фрагментов) с указанными референтными данными.

- реагенты для детекции для определения уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) и необязательно для определения уровня ПКТ или его фрагмента(фрагментов) в образце, полученном от субъекта, и

- референтные данные, такие как референтный уровень, соответствующий высоким и/или низким уровням тяжести проАДМ, при этом низкий уровень тяжести составляет менее 4 нмоль/л, предпочтительно менее 3 нмоль/л, более предпочтительно менее 2,7 нмоль/л, а высокий уровень тяжести составляет более 6,5 нмоль/л, предпочтительно более 6,95 нмоль/л, более предпочтительно более 10,9 нмоль/л, и необязательно уровни ПКТ, при этом указанные референтные данные предпочтительно хранятся на машиночитаемом носителе и/или используются в форме компьютерного выполняемого кода, выполненного с возможностью сравнения определенных уровней проАДМ или его фрагмента(фрагментов) и необязательно определенных уровней ПКТ или его фрагмента(фрагментов) с указанными референтными данными.

Реагенты для детекции для определения уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) и необязательно для определения уровня ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка или их фрагмента(фрагментов) предпочтительно выбирают из реагентов, необходимых для осуществления способа, например, антитела, направленные на проАДМ, подходящие метки, такие как флуоресцентные метки, предпочтительно две отдельные флуоресцентные метки, подходящие для применения в анализе KRYPTOR, пробирки для сбора образцов.

В одном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) и необязательно дополнительно других биомаркеров, таких как, например, ПКТ или его фрагмента(фрагментов) определяют с помощью способа, выбранного из группы, состоящей из масс-спектрометрии (MS), иммунолюминесцентного анализа (LIA), радиоиммунологического анализа (RIA), хемилюминесцентного и флуоресцентного иммунологических анализов, иммуноферментного анализа (EIA), твердофазных иммуноферментных анализов (ELISA), люминесцентных чипов с использованием гранул, чипов с использованием магнитных гранул, анализов на основе белковых микрочипов, форматов экспресс-тестов, таких как, например, иммунохроматографические тест-полоски, анализ с использованием криптатов редкоземельных металлов и автоматизированные системы/анализаторы.

Способ в соответствии с данным изобретением может дополнительно осуществляться в виде гомогенного способа, при этом сэндвич-комплексы, образованные антителом/антителами и маркером, например, проАДМ или его фрагментом, которые подлежат детекции, остаются суспендированными в жидкой фазе. В этом случае предпочтительным является применение двух антител, при этом оба антитела метят с помощью частей системы детектирования, что приводит к образованию сигнала или активации сигнала, если оба антитела интегрированы в один сэндвич.

Такие методики осуществляются, в частности, в виде способов детекции на основе усиления флуоресценции или гашения флуоресценции. Особенно предпочтительный аспект относится к применению реагентов для детекции, которые необходимо использовать попарно, таких как, например, реагентов, которые описаны в US 4882733 А, ЕР-В1 0180492 или ЕР-В1 0539477 и предшествующем уровне техники, цитируемом в данном документе. В этом отношении становятся возможными измерения, в которых выявляют только продукты реакции, содержащие оба метящие компонента в одном иммунном комплексе в реакционной смеси.

Например, такие технологии предлагаются под торговыми названиями TRACE® (Time Resolved Amplified Cryptate Emission усиленное излучения криптата с временным разрешением) или KRYPTOR®, воплощающие идеи упомянутых выше заявок. Таким образом, в определенных предпочтительных аспектах используется диагностическое устройство для осуществления предложенного в данном документе способа. Например, определяют уровень белка проАДМ или его фрагмента и/или уровень любого дополнительного маркера предложенного в данном документе способа. В определенных предпочтительных аспектах диагностическое устройство представляет собой KRYPTOR®.

В одном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, способ представляет собой иммунологический анализ и при этом иммунологический анализ осуществляют в гомогенной фазе или в гетерогенной фазе.

В дополнительных вариантах осуществления способа, описанного в данном документе, способ дополнительно включает молекулярный анализ образца, полученного от указанного пациента, для определения инфекции. Образец, используемый для молекулярного анализа для определения инфекции, предпочтительно представляет собой образец крови. В предпочтительном варианте осуществления молекулярный анализ представляет собой способ, направленный на определение одной или нескольких биомолекул, происходящих из патогена. Указанная одна или несколько биомолекул могут представлять собой нуклеиновую кислоту, белок, сахар, углеводы, липид и/или их комбинацию, такую как гликозилированный белок, предпочтительно нуклеиновую кислоту. Указанная биомолекула предпочтительно является специфической по отношению к одному или нескольким патогенам. В соответствии с предпочтительными вариантами осуществления биомолекулы определяют с помощью одного или нескольких способов анализа биомолекул, выбранных из группы, содержащей способы амплификации нуклеиновых кислот, такие как ПЦР, qPCR, RT-PCR, qRT-PCR или изотермическая амплификация, масс-спектрометрию, детекцию ферментативной активности и способы детекции на основе иммунологических анализов. Дополнительные способы молекулярного анализа известны специалисту в данной области техники и состоят из способа по данному изобретению.

В одном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, первое антитело и второе антитело присутствуют диспергированными в жидкой реакционной смеси, и при этом первый метящий компонент, который представляет собой часть метящей системы, основанной на гашении или амплификации флуоресценции или хемилюминесценции, связан с первым антителом, а второй метящий компонент указанной метящей системы связан со вторым антителом таким образом, что после связывания обоих антител с указанным проАДМ или его фрагментами, подлежащими детекции, образуется измеряемый сигнал, который обеспечивает детекцию полученных сэндвич-комплексов в растворе для измерения.

В одном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, метящая система содержит криптат или хелат редкоземельного металла в комбинации с флуоресцентным или хемилюминесцентным красителем, в частности, цианинового типа.

В одном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, способ дополнительно включает сравнение определенного уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) с референтным уровнем, граничным значением и/или популяционным средним, соответствующими проАДМ или его фрагментам у пациентов, которые были диагностированы как критически больные и получающие медицинское лечение, при этом указанное сравнение осуществляется в процессоре компьютера с помощью выполняемого кода.

Способы по данному изобретению могут быть отчасти компьютеризированными. Например, стадия сравнения определяемого уровня маркера, например, проАДМ или его фрагментов с референтным уровнем может выполняться в компьютерной системе. В компьютерной системе определенный уровень маркер а(маркеров) можно комбинировать с уровнями других маркеров и/или параметрами субъекта с целью расчета шкалы оценки, которая указывает на диагноз, прогноз, оценку риска и/или стратификацию риска. Например, определенные значения могут быть введены (либо вручную медицинским работником, либо автоматически из устройства(устройств), в котором(которых) уровень(уровни) соответствующего маркера был/были определен(определены)) в компьютерную систему. Компьютерная система может находиться непосредственно в месте оказания медицинской помощи (например, первичная медицинская помощь, ОРИТ или ОЭП, отделение экстренной помощи) или может представлять собой удаленный пункт, соединенный с помощью компьютерной сети (например, с помощью Интернета или специализированный медицинской облачной системы, необязательно, комбинируемой с другими ИТ-системами или платформами, такими как больничные информационные системы (HIS)). В типичном случае компьютерная система будет хранить значения (например, уровень маркеров или параметры, такие как возраста, кровяное давление, вес тела, пол и т.д. или системы клинических шкал оценки, такие как SOFA, qSOFA, BMI и т.д.) на машиночитаемом носителе и рассчитывать шкалу оценки на основе предварительно определенных и/или предварительно хранящихся референтных уровней или референтных значений. Полученная шкала оценки будет отображаться и/или печататься для пользователя (в типичном случае медицинского работника, такого как врач). В качестве альтернативы или в качестве дополнения ассоциированный прогноз, диагноз, оценка, указания по лечению, указания по ведению пациента или стратификация будут отображаться и/или печататься для пользователя (в типичном случае медицинского работника, такого как врач).

В одном варианте осуществления может быть использована система программного обеспечения, в которой алгоритм машинного обучения является очевидным, предпочтительно для определения госпитализированных пациентов с риском сепсиса, тяжелого сепсиса и септического шока с применением данных из электронных медицинских карт (EHR). Подход на основе машинного обучения может быть отработан на классификаторе модели случайного леса с применением данных EHR (таких как, лабораторные анализы, экспрессия биомаркеров, показатели жизненно важных функций и демографические показатели), полученных от пациентов. Машинное обучение представляет собой тип искусственного интеллекта, который обеспечивает компьютеры способностью изучения сложных паттернов в данных без явного программирования, в отличие от более простых систем, основанных на правилах. В более ранних исследованиях использовали данные электронных медицинских карт с целью запуска готовности определения клинического ухудшения в целом. В одном варианте осуществления данного изобретения обработка уровней проАДМ может быть включена в подходящую компьютерную программу для сравнения с существующими наборами данных, например, уровни проАДМ также можно обрабатывать в компьютерной программе машинного обучения с целью облечения диагностики или прогноза возникновения нежелательного явления.

Комбинированное использование проАДМ или его фрагментов в комбинации с другим биомаркером, таким как ПКТ или CRP, может быть реализовано либо в одном мультиплексном анализе, либо в двух отдельных анализах, проводимых в отношении образца, полученного от пациента. Образец может относиться к тому же самому образцу или к различным образцам. Анализ, используемый для детекции и определения проАДМ и, например, ПКТ, может быть тем же самым или другим, например, иммунологический анализ может быть использован для определения одного из вышеуказанных маркеров. Более подробные описания подходящих анализов представлены ниже.

Граничные значения и другие референтные уровни проАДМ или его фрагментов у пациентов, которые были диагностированы как критически больные и получают лечение, могут быть определены с помощью ранее описанных способов. Например, способы известны специалисту в данной области техники для применения коэффициента вариации при оценке вариабельности количественных анализов с целью определения референтных значений и/или граничных значений (George F. Reed et al., Clin Diagn Lab Immunol.2002; 9(6): 1235-1239).

Кроме того, чувствительность функциональных анализов может быть определена с целью указания статически значимых значений для использования в качестве референтных уровней или граничных значений в соответствии с общепринятыми методиками. Лаборатории способны независимо определять чувствительность функциональных анализов с помощью клинически значимого протокола. «Функциональная чувствительность» может рассматриваться в качестве концентрации, которая приводит к коэффициенту вариации (CV), составляющему 20% (или некоторому другому предварительно определенному % CV), и, таким образом, представляет собой показатель прецизионности анализа при низких уровнях анализа. Таким образом, CV представляет собой стандартизацию стандартного отклонения (SD), которая позволяет проводить сравнение оценок вариабельности вне зависимости от величины концентрации аналитов, по меньшей мере в пределах большей части рабочего диапазона анализа.

Кроме того, способы, основанные на анализе ROC, могут быть использованы для определения статистически значимых различий между двумя клиническими группами пациентов. Кривые операционных характеристик приемника (ROC) измеряют эффективность сортировки подобранных к модели вероятностей с целью сортировки уровней ответа. Кривые ROC также могут облегчать установление точек критериев в диагностических тестах. Чем выше расположена кривая от диагонали, тем более эффективно она подобрана. Если логистическое соответствие имеет более двух уровней ответа, то оно приводит к образованию генерализированной кривой ROC. На таком графике присутствует кривая для каждого уровня ответа, которая представляет собой кривую ROC указанного уровня по отношению ко всем другим уровням. Доступно компьютерное обеспечение, обеспечивающее выполнение данного типа анализа с целью определения соответствующих референтных уровней и граничных значений, например, JMP 12, JMP 13, Statistical Discovery от SAS.

Граничные значения могут быть определены аналогичным образом для ПКТ. Специалисту в данной области техники доступна литература для определения соответствующего граничного значения, например, Philipp Schuetz et al. (BMC Medicine. 2011; 9:107) описывают что при граничном значении, составляющем 0,1 нг/мл, определение ПКТ имело очень высокую чувствительность для исключения инфекции. Terence Chan et al. (Expert Rev.Mol.Diagn.2011; 11(5), 487.496) описали, что показатели, такие как отношения правдоподобия положительного и отрицательного результата, которые рассчитываются на основе чувствительности и специфичности, также являются пригодными для оценки силы диагностического теста. Значения обычно представляют на графике для многочисленных граничных значений (CV) в виде кривой операционных характеристик приемника. Площадь под значением кривой используется для определения наилучшего диагностически значимого CV. В указанной литературе описывается вариация CV (граничные значения, которые зависят от анализа и схемы исследования) и соответствующие способы определения граничных значений. Уровни популяционных средних проАДМ или его фрагментов также могут быть использованы в качестве референтных значений, например, средних популяционных значений проАДМ, тем самым, пациентов, которые диагностированы как критически больные, можно сравнивать с контрольной популяцией, при этом контрольная группа предпочтительно содержит 10, 20, 30, 40, 50 или больше субъектов. В одном варианте осуществления данного изобретения граничный уровень для ПКТ может представлять собой значение в диапазоне от 0,01 до 100,00 нг/мл в образце сыворотки крови с применением, например, анализа MAC Pix E-Bioscience Luminex или анализа ПКТ-Kryptor BRAHMS. В предпочтительном варианте осуществления граничный уровень ПКТ может находиться в диапазоне от 0,01 до 100, от 0,05 до 50, от 0,1 до 20 или от 0,1 до 2 нг/мл, и наиболее предпочтительно от >0,05 до 0,5 нг/мл. Любое значение в пределах указанных диапазонов может рассматриваться в качестве соответствующего граничного значения. Например, может быть использовано 0,01, 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 или 100 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления уровни ПКТ для здоровых субъектов составляют примерно 0,05 нг/мл.

Варианты осуществления данного изобретения, связанные с осуществлением антибиотикотерапии, стратификацией и/или контролем пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего антибиотикотерапию

Один вариант осуществления данного изобретения относится к способу осуществления антибиотикотерапии, стратификации и/или контролю пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или несколькими антибиотическими средствами, при этом способ включает

- выделение первого образца из организма указанного пациента,

- выделение второго образца из организма указанного пациента во временной точке после выделения первого образца и начала антибиотикотерапии,

- определение уровней прокальцитонина (ПКТ) или его фрагмента(фрагментов) в первом и втором образце, и

- определение уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) в по меньшей мере втором образце,

- при этом уровни ПКТ или его фрагмента(фрагментов) в указанном первом и втором образцах, и уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце указывают на то, требуется ли изменение в лечении одним или несколькими антибиотическими средствами.

В предпочтительном варианте осуществления способа осуществления антибиотикотерапии, стратификации и/или контроля пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или несколькими антибиотическими средствами, описанными в данном документе, первый образец выделяют до, в момент временной точки или после определения симптомов инфекционного заболевания у указанного пациента. Дополнительный вариант осуществления данного изобретения относится к способу осуществления антибиотикотерапии, стратификации и/или контролю пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или несколькими антибиотическими средствами, при этом способ включает

- выделение первого образца из организма указанного пациента при определении симптомов инфекционного заболевания у указанного пациента,

- выделение второго образца из организма указанного пациента после изначального определения указанных симптомов и начала антибиотикотерапии,

Выделение при определении симптома инфекционного заболевания относится к выделению вскоре после определения симптомов инфекционного заболевания и также может обозначаться как временная точка определения симптомов инфекционного заболевания.

В одном варианте осуществления способ характеризуется тем, что указанный второй образец выделяют из организма указанного пациента в течение 30 минут после определения симптомов инфекционного заболевания и начала антибиотикотерапии, или через по меньшей мере 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов и/или 12 часов после определения симптомов инфекционного заболевания и начала антибиотикотерапии.

В одном варианте осуществления способ характеризуется тем, что указанный второй образец выделяют из организма указанного пациента через 12-36 часов и/или через 3-5 дней после определения симптомов инфекционного заболевания и начала антибиотикотерапии.

В одном варианте осуществления способ характеризуется тем, что пациента диагностируют как страдающего от сепсиса и/или септического шока.

В одном варианте осуществления способ включает определение уровня СФ-проАДМ.

В одном варианте осуществления способ характеризуется тем, что

- повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и

- промежуточный или высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце указывают на то, что требуется изменение одного или нескольких антибиотических средств, - при этом промежуточный уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) составляет более 4 нмоль/л, предпочтительно более 3 нмоль/л, более предпочтительно более 2,7 нмоль/л, и менее 6,5 нмоль/л, предпочтительно менее 6,95 нмоль/л, более предпочтительно 10,9 нмоль/л, а

- высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) составляет более 6,5 нмоль/л, предпочтительно более 6,95 нмоль/л, более предпочтительно более 10,9 нмоль/л.

В одном варианте осуществления способ включает дополнительно определение уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) в первом образце. Предпочтительно, повышенный уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом указывает на то, что требуется изменение одного или нескольких антибиотических средств. В одном варианте осуществления способ характеризуется тем, что

- более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и - более высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце, или повышенный уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, такие как повышение от низкого уровня тяжести до промежуточного или высокого уровня тяжести, или от промежуточного уровня тяжести до высокого уровня тяжести,

- указывают на то, что требуется изменение одного или нескольких антибиотических средств,

- при этом низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) составляет менее 4 нмоль/л, предпочтительно менее 3 нмоль/л, более предпочтительно менее 2,7 нмоль/л,

- промежуточный уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) составляет более 4 нмоль/л, предпочтительно более 3 нмоль/л, более предпочтительно более 2,7 нмоль/л, и менее 6,5 нмоль/л, предпочтительно менее 6,95 нмоль/л, более предпочтительно 10,9 нмоль/л, а

- более чем на 50 % более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и

- промежуточный уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с низким уровнем тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) в первом образце указывают на то, что требуется изменение одного или нескольких антибиотических средств.

- менее чем на 50 % более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и

- высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце по сравнению с промежуточным уровнем тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов) в первом образце указывают на то, что требуется изменение одного или нескольких антибиотических средств.

В одном варианте осуществления способ характеризуется тем, что первый и второй образец выбирают из группы, состоящей из образца крови, образца сыворотки крови, образца плазмы крови и/или образца мочи.

В одном варианте осуществления данное изобретение относится к способу осуществления антибиотикотерапии, стратификации терапии и/или контролю пациента; страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или несколькими антибиотическими средствами, описанными в данном документе, дополнительно включающему

- определение уровня по меньшей мере одного дополнительного биомаркера или его фрагмента(фрагментов) в первом и втором образце, при этом по меньшей мере один дополнительный биомаркер предпочтительно представляет собой лактат и/или С-реактивный белок,

- при этом уровни по меньшей мере одного дополнительного биомаркера в указанном первом и втором образцах, и уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце указывают на то, требуется ли изменение в текущей антибиотикотерапии.

В одном варианте осуществления данное изобретение относится к способу осуществления антибиотикотерапии, стратификации терапии и/или контролю пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или несколькими антибиотическими средствами, описанными в данном документе, дополнительно включающему

- определение по меньшей мере одной клинической шкалы оценки во временной точке выделения первого образца и во временной точке выделения второго образца, при этом по меньшей мере одна клиническая шкала оценки предпочтительно представляет собой SOFA, APACHE II и/или SAPS II,

- при этом по меньшей мере одна клиническая шкала оценки во временные точки выделения первого и второго образцов, и уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) во втором образце указывают на то, требуется ли изменение в текущей антибиотикотерапии.

В одном варианте осуществления данное изобретение относится к набору для осуществления способа, описанного в данном документе, содержащему:

- референтные данные, такие как референтный уровень, соответствующий уровням тяжести проАДМ по п. 6 и/или п. 9, и необязательно уровни ПКТ, при этом указанные референтные данные предпочтительно хранятся на машиночитаемом носителе и/или используются в форме компьютерного выполняемого кода, выполненного с возможностью сравнения определенных уровней проАДМ или его фрагмента(фрагментов) и необязательно определенных уровней ПКТ или его фрагмента(фрагментов) с указанными референтными данными.

Подробно описание изобретения

Данное изобретение относится к способу мониторинга терапии, включающему прогноз, оценку риска и/или стратификацию риска последующего нежелательного явления в состоянии здоровья пациента, включающему получение образца указанного пациента, при этом указанный пациент был диагностирован как критически больной и было начато медицинское лечение, при этом указанный образец выделен из организма пациента по меньшей мере через 30 минут после постановки диагноза и начала лечения; определения уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) в указанном образце, при этом указанный уровень проАДМ или его фрагмента(фрагментов) коррелирует с вероятностью последующего нежелательного явления в состоянии здоровья указанного пациента.

Как очевидно из данных, представленных в данном документе, вероятность наличия или отсутствия нежелательного явления в состоянии здоровья пациента указана с помощью уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов).

Данное изобретение имеет следующие преимущества по сравнению со стандартными способами: способы и наборы по данному изобретению являются быстрыми, объективными, легкими к применению и точными для мониторинга терапии критически больных пациентов. Способы и наборы по данному изобретению относятся к маркерам и клиническим шкалам оценки, которые являются легко измеримыми при применении стандартных способов в больницах, поскольку уровни проАДМ, ПКТ, лактата, С-реактивного белка, SOFA, APACHE II, SAPS II могут быть определены в стандартным образом полученных образцах крови или дополнительных биологических жидкостях, полученных от субъекта.

Используемый в данном документе термин «пациент» или «субъект» может представлять собой позвоночное. В контексте данного изобретения термин «субъект» включает в себя как людей, так и животных, в частности, млекопитающих, и другие организмы.

В контексте данного изобретения термин «нежелательное явление в состоянии здоровья пациента» относится к явлениям, которые указывают на осложнения или ухудшение состояния здоровья пациента. Такие нежелательные явления включают в себя, но не ограничиваясь ими, смерть пациента, смерть пациента в пределах 28-90 дней после постановки диагноза и начала лечения, возникновение инфекции или новая инфекция, органная недостаточность и ухудшение общих клинических признаков или симптомов пациента, например, гипотензия или гипертензия, тахикардия или брадикардия. Кроме того, примеры нежелательных явлений включают в себя ситуации, в которых ухудшение клинических симптомов указывает на потребность в терапевтических мероприятиях, таких как направленная процедура очистки, переливание препаратов крови, инфузия коллоидов, инвазивная механическая вентиляция легких, неинвазивная механическая вентиляция легких, неотложная хирургическая помощь, заместительная органная терапия, такая как почечная или печеночная заместительная терапии, а также терапия вазопрессорными средствами.

Пациент, описанный в данном документе как «критически больной» может быть диагностирован как пациент отделения реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ), пациент, который требует постоянного и/или тщательного наблюдения своего состояния здоровья, пациент, диагностированный сепсисом, тяжелым сепсисом или септическим шоком, пациент, диагностированный инфекционным заболеванием и одним или несколькими существующими органными недостаточностями, пациент до или после хирургического вмешательства, пациент после получения травмы, такой как пациент после аварии, пациент с ожогами, пациент с одним или несколькими повреждениями. Субъект, описанный в данном документе, может находиться в отделении экстренной помощи или отделении реанимации и интенсивной терапии, или в других условиях оказания медицинской помощи, таких как в транспортирующем средстве для оказания экстренной помощи, например, машине скорой помощи, или у врача общей практики, который столкнулся с пациентом с указанными симптомами. Пациенты с подозрением на SIRS необязательно считаются критически больными.

Термин «пациент ОРИТ» относится, но не ограничиваясь этим, к пациенту, который был помещен в отделение реанимации и интенсивной терапии. Отделение реанимации и интенсивной терапии также может называться отделением реанимации или отделением интенсивной терапии (ITU) или отделением интенсивного наблюдения и лечения (CCU), и представляет собой специальное отделение больницы или лечебного учреждения, которые обеспечивают получение препарата для интенсивной терапии. Пациенты ОРИТ обычно страдают от тяжелых и опасных для жизни заболеваний и повреждений, которые требуют постоянного тщательного мониторинга и поддержки с помощью специального оборудования и лекарственных препаратов с целью обеспечения нормальных функций организма. Распространенные состояния, которые лечат в ОРИТ, включают в себя, но не ограничиваясь ими, синдром острой дыхательной недостаточности у взрослых (ARDS), травму, органную недостаточность и сепсис.

Используемый в данном документе термин «постановка диагноза» в контексте данного изобретения относится к распознаванию и (раннему) выявлению клинического состояния субъекта, связанного с инфекционным заболеванием. Также оценка тяжести инфекционного заболевания может быть охвачена термином «постановка диагноза». Термин «прогноз» относится к прогнозу результата определенного риска для субъекта на основании инфекционного заболевания. Он также может включать в себя оценку вероятности выздоровления или вероятности нежелательного явления для указанного пациента.

Способы по данному изобретению также могут быть использованы для мониторинга. Термин «мониторинг» относится к отслеживанию уже диагностированного инфекционного заболевания, нарушения, осложнения или риска, например, с целью анализа прогрессирования заболевания или влияния определенного лечения или терапии на прогрессирование заболевания критически больного пациента или инфекционного заболевания у пациента.

Термин «мониторинг терапии» или «контроль терапии» в контексте данного изобретения относится к мониторингу и/или корректировке терапевтического лечения указанного субъекта, например, с помощью получения обратной связи об эффективности терапии.

В данном изобретении термины «оценка риска» и «стратификация риска» относятся к группировке субъектов в различные группы риска в соответствии с их дальнейшим прогнозом. Оценка риска также относится к стратификации с целью применения профилактических и/или терапевтических мероприятий. Примеры стратификации риска представляют собой низкие, промежуточные и высокие уровни риска, описанные в данном документе.

Используемый в данном документе термин «осуществление терапии» относится к применению определенных видов терапии или медицинских мероприятий на основе значения одного или нескольких биомаркеров и/или клинических параметров и/или клинических шкал оценки.

Необходимо понимать, что в контексте данного изобретения термин «определение уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов)» или т.п. относится к любым средствам определения проАДМ или его фрагмента. Фрагмент может быть любой длины, например, по меньшей мере приблизительно 5, 10, 20, 30, 40, 50 или 100 аминокислот, при условии, что указанный фрагмент обеспечивает однозначное определение уровня проАДМ или его фрагмента. В определенных предпочтительных аспектах данного изобретения термин «определение уровня проАДМ» относится к определению уровня среднерегионарного проадреномедуллина (СФ-проАДМ). СФ-проАДМ представляет собой фрагмент и/или участок проАДМ. Пептид адреномедуллин (ADM) был открыт в качестве гипотензивного пептида, содержащего 52 аминокислоты, которые были выделены из феохромоцитомы человека (Kitamura et al., 1993). Адреномедуллин (ADM) кодируется в качестве пептида-предшественника, содержащего 185 аминокислот («препроадреномедуллин» или «pre-проАДМ»). Иллюстративная аминокислотная последовательность АДМ приведена в SEQ ID NO: 1.

SEQ ID NO:1: аминокислотная последовательность pre-pro-ADM:

1 MKLVSVALMY LGSLAFLGAD TARLDVASEF RKKWNKWALS RGKRELRMSS

51 SYPTGLADVK AGPAQTLIRP QDMKGASRSP EDSSPDAARI RVKRYRQSMN

101 NFQGLRSFGC RFGTCTVQKL AHQIYQFTDK DKDNVAPRSK ISPQGYGRRR

151 RRSLPEAGPG RTLVSSKPQA HGAPAPPSGS APHFL

ADM содержит положения 95-146 аминокислотной последовательности pre-проАДМ и представляет собой его сплайс-продукт. Термин «проадреномедуллин» («проАДМ») относится к pre-проАДМ без сигнальной последовательности (аминокислоты 1-21), т.е., аминокислотным остаткам 22-185 pre-проАДМ. Термин «среднерегионарный проадреномедуллин» («СФ-проАДМ») относится к аминокислотам 42-95 pre-проАДМ.

Иллюстративная аминокислотная последовательность СФ-проАДМ приведена в SEQ ID NO: 2.

SEQ ID NO:2: аминокислотная последовательность СФ-проАДМ (AS 45-92 pre-pro-ADM):

ELRMSSSYPT GLADVKAGPA QTLIRPQDMK GASRSPEDSS PDAARIRV

В данном документе также предусмотрено, что пептид и его фрагмент пре-проАДМ или СФ-проАДМ могут быть использованы для описанных в данном документе способов. Например, пептид или его фрагмент могут содержать аминокислоты 22-41 пре-проАДМ (пептид РАМР) или аминокислоты 95-146 пре-проАДМ (зрелый адреномедуллин, в том числе биологически активная форма, также известная как bio-ADM). С-терминальный фрагмент проАДМ (аминокислоты 153-185 pre-проАДМ) называется адренотензин. Фрагменты пептидов проАДМ СФ-проАДМ могут содержать, например, по меньшей мере приблизительно 5, 10, 20, 30 или более аминокислот. Соответственно, фрагмент проАДМ, например, можно выбрать из группы, состоящей из СФ-проАДМ, РАМР, адренотензина и зрелого адреномедуллина, предпочтительно в данном документе указанный фрагмент представляет собой СФ-проАДМ.

Определение указанных различных форм АДМ или проАДМ и их фрагментов также охватывает измерение и/или выбор специфических подучастков указанных молекул, например, с помощью использования антител или других аффинных реагентов, направленных против определенной части молекул, или с помощью определения наличия и/или количества молекул путем измерения части белка с помощью масс-спектрометрии.

Любой один или более из «пептидов или фрагментов ADM», описанных в данном документе, могут быть использованы в данном изобретении. Соответственно, способы и наборы по данному изобретению также могут включать определение по меньшей мере одного дополнительного биомаркера, маркера, клинической шкалы оценки и/или параметра, помимо проАДМ.

Используемый в данном документе параметр представляет собой характеристику, свойство или подлежащий измерению фактор, которые могут облегчать определение определенной системы. Параметр представляет собой важный элемент для оценок, связанных с состоянием здоровья и физиологическим состоянием, таких как риск заболевания/нарушения/клинического патологического состояния, предпочтительно органной(органных) дисфункции(дисфункций). Кроме того, параметр определяют как характеристику, которая объективно измеряется и оценивается в виде показателя нормальных биологических процессов или фармакологических реакций на терапевтическое мероприятие. Иллюстративный пример можно выбрать из группы, состоящей из шкалы оценки острых и хронических функциональных изменений II (APACHE II), упрощенной шкалы оценки острых функциональных изменений (шкалы оценки SAPSII), динамической шкалы оценки органной недостаточности (шкалы оценки SOFA), быстрой динамической шкалы оценки органной недостаточности (qSOFA), индекса массы тела, веса, возраста, пола, IGS II, потребления жидкости, содержания лейкоцитов, содержания натрия, содержания калия, температуры, кровяного давления, уровня дофамина, уровня билирубина, частоты дыхания, парциального давления кислорода, шкалы оценки Всемирной федерации нейрохирургических обществ (WFNS) и шкалы комы Глазго (GCS).

Используемые в данном документе термины, такие как «маркер», «суррогат», «прогностический маркер», «фактор» или «биомаркер» используются взаимозаменяемо и относятся к подлежащим измерению и количественному определению биологическим маркерам (например, определенному белку или концентрации фермента или его фрагмента, концентрации определенного гормона или его фрагмента, или наличию биологических веществ или их фрагмента), которые выступают в качестве показателей для оценок состояния здоровья и физиологического состояния, таких как риск заболевания/нарушения/клинического патологического состояния, предпочтительно нежелательного явления. Маркер или биомаркер определяют как характеристику, которая может быть объективно измерена и оценена в виде показателя нормальных биологических процессов или фармакологических реакций на терапевтическое мероприятие. Биомаркеры могут быть измерены в образце (такой как кровь, плазма крови, моча или образец ткани).

По меньшей мере один дополнительный маркер и/или параметр указанного субъекта можно выбрать из группы, состоящей из уровня лактата в указанном образце, уровня прокальцитонина (ПКТ) в указанном образце, динамической шкалы оценки органной недостаточности (шкалы оценки SOFA) указанного субъекта, упрощенной шкалы оценки острых функциональных изменений (шкалы оценки SAPSII) указанного субъекта, шкалы оценки острых и хронических функциональных изменений II (APACHE II) указанного субъекта и уровня растворимой fins-подобной тирозинкиназы-1 (sFlt-1), гистона Н2А, гистона Н2В, гистона Н3, гистона Н4, кальцитонина, эндотелия-1 (ЕТ-1), аргинин-вазопрессина (AVP), предсердного натрийуретического пептида (ANP), липокалина, ассоциированного с желатиназой нейтрофилов (NGAL), тропонина, натрийуретического пептида головного мозга (BNP), С-реактивного белка (CRP), литостатина (PSP), триггерного рецептора, экспресируемого на миелоидных клетках 1 (TREM1), интерлейкина-6 (IL-6), интерлейкина-1, интерлейкина-24 (IL-24), интерлейкина-22 (IL-22), интерлейкина (IL-20), других IL, пресепсина (sCD14-ST), липополисахарид-связывающего белка (LBP), альфа-1 антитрипсина, матриксной металлопротеиназы 2 (ММР2), металлопротеиназы 2 (ММР8), матриксной металлопротеиназы 9 (ММР9), матриксной металлопротеиназы 7 (ММР7, плацентарного фактора роста (P1GF), хроматогранина А, белка S100A, белка S100B и фактора некроза опухоли α (TNFα), неоптерина, альфа-1 антитрипсина, про-аргинин-вазопрессина (AVP, proAVP или копептин), прокальцитонина, предсердного натрийуретического пептида (ANP, pro-ANP), эндотелина-1, CCL1/TCA3, CCL11, CCL12/MCP-5, CCL13/MCP-4, CCL14, CCL15, CCL16, CCL17/TARC, CCL18, CCL19, CCL2/MCP-1, CCL20, CCL21, CCL22/MDC, CCL23, CCL24, CCL25, CCL26, CCL27, CCL28, CCL3, CCL3L3, CCL4, CCL4L1/LAG-1, CCL5, CCL6, CCL7, CCL8, CCL9, CX3CL1, CXCL1, CXCL10, CXCL11, CXCL12, CXCL13, CXCL14, CXCL15, CXCL16, CXCL17, CXCL2/MIP-2, CXCL3, CXCL4, CXCL5, CXCL6, CXCL7/Ppbp, CXCL9, IL8/CXCL8, XCL1, XCL2, FAM19A1, FAM19A2, FAM19A3, FAM19A4, FAM19A5, CLCF1, CNTF, IL11, IL31, IL6, лептина, LIF, OSM, IFNA1, IFNA10, IFNA13, IFNA14, IFNA2, IFNA4, IFNA7, IFNB1, IFNE, IFNG, IFNZ, IFNA8, IFNA5/IFNaG, IFNω/IFNWl, BAFF, 4-1BBL, TNFSF8, CD40LG, CD70, CD95L/CD178, EDA-A1, TNFSF14, LTA/TNFB, LTB, TNFa, TNFSF10, TNFSF11, TNFSF12, TNFSF13, TNFSF15, TNFSF4, IL18, IL18BP, ILIA, IL1B, IL1F10, IL1F3/IL1RA, IL1F5, IL1F6, IL1F7, IL1F8, IL1RL2, IL1F9, IL33 или их фрагмента.

Используемый в данном документе термин «прокальцитонин» или «ПКТ» относится к пептиду, охватывающему аминокислотные остатки 1-116, 2-116, 3-116 или их фрагменты прокальцитонинового пептида. ПКТ представляет собой пептидный предшественник гормона кальцитонина. Таким образом, длина фрагментов прокальцитонина составляет по меньшей мере 12 аминокислот, предпочтительно более 50 аминокислот, более предпочтительно более 110 аминокислот. ПКТ может содержать посттрансляционные модификации, такие как гликозилирование, липозидирование и дериватизация. Прокальцитонин представляет собой предшественник кальцитонина и катакальцина. Таким образом, в нормальных условиях уровни ПКТ в кровотоке являются очень низкими (< приблизительно 0,05 нг/мл).

Уровень ПКТ в образце субъекта может быть определен с помощью иммунологических анализов, описанных в данном документе. Используемый в данном документе уровень рибонуклеиновой кислоты или дезоксирибонуклеиновой кислоты, кодирующих «прокальцитонин» или «ПКТ», также может быть определен. Способы определения ПКТ также известны специалисту в данной области техники, например, с помощью продуктов, полученных из Thermo Fisher Scientific/B-R-A-H-M-S GmbH.

Лактат, или молочная кислота, представляет собой органическое соединение с формулой СН₃СН(ОН)СООН, которое встречается в биологических жидкостях, в том числе крови. Исследования крови в отношении лактата выполняют для определения статуса кислотно-щелочного гомеостаза в организме. Молочная кислота представляет собой продукт клеточного метаболизма, которая может накапливаться, когда клетки испытывают недостаток кислорода (гипоксия) и должны обращаться к менее эффективному средству образования энергии, или когда патологическое состояние приводит к избыточной продуцированию или нарушенному выведению лактата. Молочный ацидоз может быть вызван недостаточным количеством кислорода в клетках и тканях (гипоксия), например, если индивидуум имеет патологическое состояние, которое может приводить к снижению количества кислорода, доставляемого к клеткам и тканям, такое как шок, септический шок или хроническая сердечная недостаточность, проба на лактат может быть использована для облегчения детекции и оценки тяжести гипоксии и молочного ацидоза.

С-реактивный белок (CRP) представляет собой пентамерный белок, который может быть обнаружен в биологических жидкостях, таких как плазма крови. Уровни CRP могут возрастать в ответ на воспаление. Измерение и составление диаграммы значений CRP может оказаться полезным при определении прогрессирования заболевания или эффективности видов лечения.

Используемый в данном документе термин «динамическая шкала оценки органной недостаточности» или «шкала оценки SOFA» представляет собой одну шкалу оценки, используемую для отслеживания статуса пациента во время пребывания в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). Шкала оценки SOFA представляет собой систему оценивания с целью определения степени функционирования органа или степени недостаточности органа индивидуума. Указанная шкала оценки основана на шести различных шкалах оценки, каждая из которых предназначена для дыхательной системы, сердечно-сосудистой системы, системы печени, системы свертывания крови, системы почек и нервной системы. Как средняя, так и максимальная шкала оценки SOFA представляют собой прогностические факторы результата лечения. Повышение шкалы оценки SOFA в течение первых 24-48 часов в ОРИТ предполагает процент смертности, составляющий по меньшей мере от 50 % до 95 %. Шкалы оценки, составляющие менее 9, предполагают смертность на уровне 33 %, в то время как более 14 может составлять около или более 95 %.

Используемая в данном документе шкала оценки SOFA (qSOFA) представляет собой шкалу оценивания, которая указывает на дисфункцию органа или риск смертности пациента. Указанная шкала оценивания основана на трех критериях: 1) изменении психического статуса, 2) снижении систолического кровяного давления менее чем до 100 мм рт. ст., 3) частоте дыхания, составляющей более 22 вдохов в минуту. Пациенты с двумя или более из этих состояний имеют более высокий риск наличия дисфункции органа или смерти.

Используемый в данном документе термин «APACHE II» или «шкала оценки острых и хронических функциональных изменений II» представляет собой классификационную систему оценивания тяжести заболевания (Knaus et al., 1985). Она может быть применена в пределах 24 часов после помещения пациента в отделение реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ) и может определена на основании 12 различных физиологических параметров: AaDO2 или PaO2 (в зависимости от FiO2), температуры (ректальной), среднего артериального давления, рН артериальной крови, частоты сердечных сокращений, частоты дыхания, содержания натрия (в сыворотке крови), содержания калия (в сыворотке крови), содержания креатинина, гематокрита, содержания лейкоцитов и шкалы комы Глазго.

Используемый в данном документе термин «SAPS II» или «упрощенная шкала оценки острых функциональных изменений II» относится к системе классификации тяжести заболевания или нарушения (см. Le Gall JR et al., A new Simplified Acute Physiology Score (SAPS II) based on a European/North American multicenter study. JAMA. 1993;270(24):2957-63.). Шкала оценки SAPS II состоит из 12 физиологических переменных и 3 переменных, связанных с заболеваниями. Балльная шкала оценки рассчитывается на основании 12 стандартных физиологических измерений, информации о предыдущем состоянии здоровья и некоторой информации, полученной при помещении в ОРИТ. Шкала оценки SAPS II может быть определена в любой время, предпочтительно, в день 2. Термин «наихудшее» измерение определяется как показатель, который коррелирует с наибольшим количеством баллов. Шкала оценки SAPS II находится в диапазоне от 0 до 163 баллов. Система классификации включает в себя следующие параметры: возраст, частоту сердечных сокращений, систолическое кровяное давление, температуру, шкалу комы Глазго, механическую вентиляцию легких или СРАР, PaO2, FiO2, диурез, содержание азота мочевины в крови, содержание натрия, содержание калия, содержание бикарбоната, содержание билирубина, содержание лейкоцитов, хронические заболевания и тип введения. Имеет место сигмоидальная зависимость между смертностью и общей шкалой оценки SAPS II. Смертность субъекта составляет 10 % при шкале оценки SAPSII, составляющей 29 баллов, смертность составляет 25 % при шкале оценки SAPSII, составляющей 40 баллов, смертность составляет 50 % при шкале оценки SAPSII, составляющей 52 балла, смертность составляет 75 % при шкале оценки SAPSII, составляющей 64 балла, смертность составляет 90 % при шкале оценки SAPSII, составляющей 77 баллов (Le Gall, там же).

Используемый в данном документе термин «образец» представляет собой биологический образец, который получен или выделен из организма пациента или субъекта. Термин «образец», используемый в данном документе, например, может относиться к образцу биологической жидкости или ткани, полученному с целью постановки диагноза, прогноза или оценки субъекта, представляющего интерес, такого как пациент. В данном документе предпочтительно, указанный образец представляет собой образец биологической жидкости, такой как кровь, сыворотка крови, плазма крови, спинномозговая жидкость, моча, слюна, мокрота, плевральный выпот, клетки, клеточный экстракт, биоптат ткани, образец кала и т.п. В частности, указанный образец представляет собой кровь, плазму крови, сыворотку крови или мочу.

Варианты осуществления данного изобретения относятся к выделению первого образца и выделению второго образца. В контексте способа данного изобретения термины «первый образец» и «второй образец» относятся к относительному определению порядка выделения образцов, используемых в способе по данному изобретению. Когда термины первый образец и второй образец используются в описании способа по данному изобретению, то указанные образцы не рассматриваются в качестве абсолютных определений количества отобранных образцов. Таким образом, дополнительные образцы могут быть выделены из организма пациента до, во время или после выделения первого и/или второго образца, или между первым и вторыми образцами, при этом указанные дополнительные образцы могут быть или не могут быть использованы в способе по данному изобретению. Таким образом, первый образец может рассматриваться в качестве любого ранее полученного образца. Второй образец может рассматриваться в качестве любого дополнительного или последующего образца.

Термин «плазма» в контексте данного изобретения представляет собой по сути бесклеточный супернатант крови, содержащий антикоагулянт, полученный после центрифугирования. Иллюстративные антикоагулянты включают в себя соединения, связывающие ионы кальция, такие как ЭДТК или цитрат, и ингибиторы тромбина, такие как гепаринаты или гирудин. Бесклеточная плазма крови может быть получена с помощью центрифугирования антикоагулированной крови (например, цитратной, ЭДТК или гепаризированной крови), например, в течение по меньшей мере 15 минут при 2000-3000 g.

Термин «сыворотка крови» в контексте данного изобретения представляет собой жидкую фракцию цельной крови, которую собирают после свертывания крови. Когда коагулированную кровь (свернувшуюся кровь) центрифугируют, сыворотка крови может быть получена в виде супернатанта.

Используемый в данном документе термин «моча» представляет собой жидкий продукт организма, секретируемый почками путем процесса, называемого мочевыделение (или мочеиспускание), и экскретируемый через уретру.

В предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения пациент был диагностирован как имеющий сепсис. Более конкретно, пациент мог быть диагностирован как имеющий тяжелый сепсис и/или септический шок.

Термин «сепсис» в контексте данного изобретения относится к системному ответу на инфекцию. В качестве альтернативы, сепсис может наблюдаться в виде комбинации SIRS с подтвержденным инфекционным процессом или инфекцией. Сепсис может быть охарактеризован в виде клинического синдрома, определенного как наличием инфекции, так и системного воспалительного ответа (Levy MM et al. 2001 SCCM/ESICM/ACCP/ATS/SIS International Sepsis Definitions Conference. Crit Care Med. 2003 Apr;31(4): 1250-6). Термин «сепсис», используемый в данном документе, включает в себя, но не ограничиваясь этим, сепсис, тяжелый сепсис, септический шок.

Термин «сепсис», используемый в данном документе, включает в себя, но не ограничиваясь этим, сепсис, тяжелый сепсис, септический шок. Тяжелый сепсис относится к сепсису, ассоциированному с дисфункцией органа, нарушением, проявляющимся недостаточной перфузией, или индуцированной сепсисом гипертензии. Нарушения, проявляющиеся недостаточной перфузией, включат в себя молочный ацидоз, олигурию и остро возникшее изменение психического статуса. Индуцированная сепсисом гипотензия определяется наличием систолического кровяного давления, составляющего менее приблизительно 90 мм рт. ст., или его снижением на приблизительно 40 мм. рт. ст. или более от исходного уровня в отсутствие других причин гипотензии (например, кардиогенного шока). Септический шок определяется как тяжелый сепсис с индуцированной сепсисом гипотензией, персистирующей, несмотря на достаточную инфузионную терапию, наряду с наличием нарушений, проявляющихся недостаточной перфузией, или дисфункцией органов (Bone et al., CHEST 101(6): 1644-55, 1992).

Термин сепсис может в качестве альтернативы быть определен как опасная для жизни дисфункция органа, вызванная разрегулированным ответом хозяина на инфекцию. Для клинического практического применения дисфункция органа может быть представлена повышением динамической шкалы оценки органной недостаточности (SOFA) на 2 балла или более, что ассоциируется с внутрибольничной смертностью, составляющей более 10 %. Септический шок может быть определен как разновидность сепсиса, при котором особенно выраженные циркуляторные, клеточные и метаболические нарушения ассоциированы с более высоким риском смертности, чем в случае сепсиса в отдельности. Пациенты с септическим шоком могут быть клинически определены в результате потребности в вазопрессорах для поддержания среднего артериального давления, составляющего 65 мм рт. ст. или более, и уровне лактата в сыворотке крови, составляющем более 2 ммоль/л (>18 мг/дл) в отсутствие гиповолемии.

Термин «сепсис», используемый в данном документе, относится ко всем возможным стадия в развитии сепсиса.

Термин «сепсис» также включает в себя тяжелый сепсис или септический шок на основании определения SEPSIS-2 (Bone et al., 2009). Термин «сепсис» также включает в себя субъектов, подпадающих под определение SEPSIS-3 (Singer et al., 2016). Термин «сепсис», используемый в данном документе, относится ко всем возможным стадия в развитии сепсиса.

Используемый в данном документе термин «инфекция» в объеме данного изобретения означает патологический процесс, вызванный инвазией обычно стерильной ткани или жидкости патогенными или потенциально патогенными агентами/патогенами, организмами и/или микроорганизмами, и относится предпочтительно к инфекции(инфекциям), вызванной(вызванными) бактериями, вирусами, грибами и/или паразитами. Соответственно, инфекция может представлять собой бактериальную инфекцию, вирусную инфекцию и/или грибковую инфекцию. Инфекция может представлять собой локальную или системную инфекцию. Для целей данного изобретения вирусная инфекция может рассматриваться в качестве инфекции, вызванной микроорганизмом.

Кроме того, субъект, имеющий инфекцию, может иметь более одного источника инфекции одновременно. Например, субъект, имеющий инфекцию, может иметь бактериальную инфекцию и вирусную инфекцию; вирусную инфекцию и грибковую инфекцию; бактериальную и грибковую инфекцию, а также бактериальную инфекцию, грибковую инфекцию и вирусную инфекцию, или иметь смешанную инфекцию, включающую в себя одну или более из инфекций, приведенных в данном документе, в том числе потенциально суперинфекцию, например, одну или более бактериальных инфекций, помимо одной или более вирусных инфекций и/или одной или более грибковых инфекций.

Используемый в данном документе термин «инфекционное заболевание» включает в себя все заболевания или нарушения, которые ассоциированы с бактериальными и/или вирусными и/или грибковыми инфекциями.

В одном варианте осуществления инфекция, подлежащая детекции или исследованию, может быть выбрана из видов Bordetella, таких как Bordetella pertussis, Borrelia, таких как Borrelia burgdorferi, Brucella, таких как Brucella abortus, Brucella canis, Brucella melitensis или Brucella suis, Campylobacter, таких как Campylobacter jejuni, Chlamydia и Chlamydophila, таких как Chlamydia pneumonia, Chlamydia trachomatis, Chlamydophila psittaci, Clostridium, таких как Clostridium botulinum, Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Corynebacterium, таких как Corynebacterium diphtheria, Enterococcus, таких как Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Escherichia, таких как Escherichia coli, Francisella, таких как Francisella tularensis, Haemophilus, таких как Haemophilus influenza, Helicobacter, таких как Helicobacter pylori, Legionella, таких как Legionella pneumophila, Leptospira, таких как Leptospira interrogans, Listeria, таких как Listeria monocytogenes, Mycobacterium, таких как Mycobacterium leprae, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium ulcerans, Mycoplasma, таких как Mycoplasma pneumonia, Neisseria, таких как Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitides, Pseudomonas, таких как Pseudomonas aeruginosa, Rickettsia, таких как Rickettsia rickettsia. Salmonella, таких как Salmonella typhi. Salmonella typhimurium, Shigella, таких как Shigella sonnei, Staphylococcus, таких как Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus. Streptococcus, таких как Streptococcus agalactiae, Streptococcus pneumonia. Streptococcus pyogenes, Treponema, таких как Treponema pallidum, Vibrio, таких как Vibrio cholera, Yersinia, таких как Yersinia pestis, Yersinia enterocolitica или Yersinia pseudotuberculosis.

Патогенные грибы представляют собой грибы, которые вызывают заболевание у людей или других организмов. Виды Candida представляют собой важные патогены человека, которые наиболее известны в связи с их способностью вызывать оппортунистические инфекции у хозяев с ослабленными иммунитетом (например, пациентов после трансплантации, лиц, страдающих СПИДом, пациентов, страдающих раком). Инфекции сложно подвергаются лечению и могут быть очень серьезными: 30-40 % системных инфекций приводят к смерти. Аспергиллез представляет собой другое потенциальное заболевание, вызываемое патогенным грибом. Aspergillus может вызывать заболевание в трех основных направлениях: в результате продуцирования микотоксинов; в результате индукции аллергических реакций; и в результате локализованных или системных инфекций. В случае последних двух категорий иммунный статус хозяина имеет определяющее значение. Наиболее распространенными патогенными видами являются Aspergillus fumigatus и Aspergillus flavus. Aspergillus flavus продуцирует афлатоксин, который представляет собой как токсин, так и канцероген, и который потенциально может приводить к контаминации пищевых продуктов. Aspergillus fumigatus и Aspergillus clavatus могут вызывать заболевание. Cryptococcus neofbrmans может вызывать заболевание у людей. Cryptococcus neofbrmans представляет собой основной патоген человека и животных. Известно, что Cryptococcus laurentii и Cryptococcus albidus случайно вызывали умеренное или тяжелое заболевание у пациентов-людей с ослабленным иммунитетом. Cryptococcus gattii является эндемическим для тропических областей континента Африка и Австралия и может вызывать заболевание. Histoplasma capsulatum может вызывать гистоплазмоз у людей, собак и кошек. Pneumocystisjirovecii (или Pneumocystis carinii) может вызывать форму пневмонии у людей с ослабленными иммунными системами, такими как недоношенные дети, лица пожилого возраста и пациенты, больные СПИДом. Stachybotrys chartarum или «черная плесень» может вызывать повреждение дыхательной системы и тяжелые головные боли.

В одном варианте осуществления инфекция, подлежащая детекции или исследованию, может быть выбрана из Acinetobacter baumannii, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter Iwoffii, Listeria monocytogenes, Aeromonas caviae, Morganella morganii, Aeromonas hydrophila, Neisseria gonorrhoeae, Aspergillus flavus, Neisseria meningitidis, Aspergillus nidulans, Pasteurella multocida, Aspergillus niger, Pasteurella pneumotropica, Aspergillus terreus, Propionibacterium acnes, Bacillus anthracis, Proteus mirabillis, Bacillus cereus, Providencia rettgeri, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa, Bacteroides fragilis, Salmonella choleraesuis, Brucella melitensis, Serratia liquefaciens, Burkholderia cepacia, Serratia marcescens, Candida albicans, Staphylococcus aureus, Candida dubliniensis, Staphylococcus epidermidis, Candida glabrata, Staphylococcus haemolyticus, Candida krusei, Staphylococcus hominis, Candida parapsilosis, Staphylococcus saccharolyticus, Candida tropicalis, Staphylococcus wameri, Capnocytophaga canimorsus, Stenotrophomonas maltophilia, Citrobacter braakii. Streptococcus agalactiae, Citrobacter freundii. Streptococcus anginosus, Clostridium perfringens, Streptococcus bovis, Corynebacterium jeikeium, Streptococcus constellatus, Enterobacter aerogenes, Streptococcus dysgalactiae, Enterobacter cloacae. Streptococcus mutans, Enterobacter sakazakii. Streptococcus pneumoniae, Enterococcus faecalis, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecium, Streptococcus salivarius, Escherichia coli, Streptococcus sanguinis, Shigella sp., Streptococcus suis, Gemella haemolysans. Vibrio vulnificus, Gemella morbillorum, Yersinia enterocolitica, Haemophilus influenzae, Yersinia pestis, Kingella kingae, Yersinia pseudotuberculosis и Klebsiella oxytoca. В соответствии с данным изобретением критически больные пациенты, такие как пациенты с сепсисом могут нуждаться в очень строгом контроле в отношении жизненно важных функций и/или мониторинга защиты органов и могут получать медицинское лечение.

В контексте данного изобретения термин «медицинское лечение» или «лечение» включает в себя различные виды лечения и терапевтические стратегии, которые включат в себя, но не ограничиваясь ими, противовоспалительные стратегии, введение ADM-антагонистов, таких как терапевтические антитела, si-RNA или ДНК, экстр акорпоральную очистку крови или удаление вредных соединений путем афереза, диализ, адсорбенты для предупреждения цитокинового шторма, удаление медиаторов воспаления, плазмаферез, введение витаминов, таких как витамин С, вентиляцию легких, например, механическую вентиляцию легких и неинвазивную вентиляцию легких с целью обеспечения организма достаточным количеством кислорода, например, направленные процедуры очистку, переливание препаратов крови, инфузию коллоидов, заместительную почечную или печеночную терапию, антибиотикотерапию, инвазивную механическую вентиляцию легких, неинвазивную механическую вентиляцию легких, применение вазопрессоров, инфузионную терапию, аферез и мероприятия для защиты органов.

Дополнительные виды лечения по данному изобретению включают в себя введение клеток или клеточных продуктов, например, стволовых клеток, крови или плазмы крови, а также стабилизацию кровотока пациентов и защиту гликокаликса эндотелия, например, с помощью оптимальных стратегий инфузионной терапии, например, для достижения нормоволемии и предупреждения или лечения гиперволемии или гиповолемии. Кроме того, вазопрессоры или, например, катехоламин, а также альбумин, или ингибирование гепараназы с помощью нефракционированного гепарина или N-десульфатированного pe-N-ацетилированного гепарина представляют собой пригодные виды лечения для поддержания кровотока и эндотелиального слоя.

Кроме того, медицинские виды лечения по данному изобретению включают в себя, но не ограничиваясь этим, стабилизацию свертывания крови, ингибиторы iNOS, противовоспалительные средства, например, гидрокортизон, седативные и анальгетические средства, а также инсулин.

Термин «почечная заместительная терапия» (RRT) относится к терапии, которая используется для замещения нормальной функции почек, заключающейся в фильтрации крови. Почечная заместительная терапия может относиться к диализу (например, гемодиализу или перитонеальному диализу), гемофильтрации и гемодиафильтрации. Такие методики представляют собой различные способы направления крови в устройство, ее очистки и затем возврата в организм. Почечная заместительная терапия также может относиться к трансплантации почек, что представляет собой конечную форму замещения, при которой старая почка замещается донорской почкой. Гемодиализ, гемо фильтрация и гемодиафильтрация могут быть непрерывными или прерывистыми и могут использовать артериовенозный путь (при котором кровь выходит из артерии и возвращается через вену) или веновенозный путь (при котором кровь выходит из вены и возвращается в вену). Это приводит к различным типам RRT. Например, почечная заместительная терапия может быть выбрана из группы, но не ограничиваясь этим, непрерывной почечной заместительной терапии (CRRT), непрерывного гемодиализа (CHD), непрерывного артериовенозного гемодиализа (CAVHD), непрерывного веновенозного гемодиализа (CVVHD), непрерывной гемофильтрации (CHF), непрерывной артериовенозной гемофильтрации (CAVH или CAVHF), непрерывной веновенозной гемофильтрации (CVVH или CVVHF), непрерывной гемодиафильтрации (CHDF), непрерывной артериовенозной гемодиафильтрации (CAVHDF), непрерывной веновенозной гемодиафильтрации (CVVHDF), прерывистой почечной заместительной терапии (IRRT), прерывистого гемодиализа (IHD), прерывистого веновенозного гемодиализа (IWHD), прерывистой гемофильтрации (IHF), прерывистой веновенозной гемофильтрации (IVVH или IVVHF), прерывистой гемодиафильтрации (IHDF) и прерывистой веновенозной гемодиафильтрации (IVVHDF).

Искусственная и механическая вентиляция легких представляют собой эффективные подходы для усиления соответствующего обмена газами и вентиляции и облегчения спасения жизни во время тяжелой гипоксемии. Искусственная вентиляция легких относится к облегчению или стимуляции дыхания субъекта. Искусственная вентиляция легких может быть выбрана из группы, состоящей из механической вентиляции легких, искусственной вентиляции легких с помощью ручных приспособлений, экстр акорпоральной мембранной оксигенации (ЕСМО) и неинвазивной вентиляции легких (NIV). Механическая вентиляция легких относится к способу механического облечения или замещения спонтанного дыхания. Она может включать в себя устройство, называемой вентилятор. Механическая вентиляция легких может представлять собой высокочастотную осцилляторную вентиляцию легких или частичную жидкостную вентиляцию легких.

Термин «инфузионная терапия» относится к мониторингу и контролю статуса жидкости субъекта и введения жидкостей для стабилизации кровотока или поддержания жизнеспособности органов, например, путем перорального, энтерального или внутривенного введения жидкости. Она включает в себя стабилизацию жидкости и баланса электролитов или предупреждение или коррекцию гипер- или гиповолемии, а также снабжения препаратами крови.

Экстренные хирургические вмешательства/неотложная хирургическая помощь необходимы, если субъект имеет неотложное состояние и немедленное хирургическое мероприятие может потребоваться для сохранения выживания или состояния здоровья. Субъект, нуждающийся в неотложной хирургической помощи, может быть выбран из группы, состоящей из субъектов, имеющих острую травму, активную неконтролируемую инфекцию, трансплантацию органов, хирургическое вмешательство, направленное на профилактику органов или стабилизацию органов, или рак.

Процедуры очистки представляют собой гигиенические способы предупреждения субъектов от инфекций, особенно нозокомиальных инфекций, включающие дезинфекцию всех органических и неорганических поверхностей, которые могли вступать в контакт с пациентом, таких как, например, кожа, объекты в палате, медицинские приборы, диагностические приборы или комнатный воздух. Процедуры очистки включают в себя применение защитной одежды и устройств, таких как маски, халаты, перчатки или гигиенический шлюз, и действия, например, ограничение визитов к пациентам. Кроме того, процедуры очистки включают в себя очистку самого пациента и одежды пациента.

В случае критического заболевания, такого как сепсис или тяжелые инфекции, очень важно иметь раннюю постановку диагноза, а также прогноз и оценку риска для результата лечения пациента с целью поиска оптимальной терапии и контроля. Терапевтические подходы должны быть очень индивидуальными и отличаться от случая к случаю. Мониторинг терапии необходим для терапии на основе передовых методов и находится под влиянием времени лечения, применения комбинированных видов терапии и оптимизации дозирования лекарственных средств. Неправильная или упущенная терапия или контроль будут приводить к повышению смертности в любой момент.

Медицинское лечение по данному изобретению может представлять собой антибиотикотерапию, при этом один или более «антибиотиков» или «антибиотических средств» могут быть введены, если инфекция была диагностирована или симптомы инфекционного заболевания были определены.

Антибиотики или антибиотические средства в соответствии с данным изобретением также потенциально охватывают противогрибковые или противовирусные соединения, используемые для лечения диагностированной инфекции или сепсиса. Антибиотические средства, широко применяемые в лечении той или иной инфекции, при разделении на классы патогена, представлены ниже.

Действие в отношении грамположительных бактерий: пенициллины (ампициллин, амоксициллин), резистентные в отношении пенициллиназы (диклоксациллин, оксациллин), цефалоспорины (1-е и 2-е поколение), макролиды (эритромицин, кларитромицин, азитромицин), хинолоны (гатифлоксацин, моксифлоксацин, левофлоксацин), ванкомицин, сульфонамид/триметоприм, клиндамицин, тетрациклины, хлорамфеникол, линезолид, синерцид.

Действие в отношении грамотрицательных бактерий: пенициллины широкого спектра действия (тикарциллин, клавуланат, пиперациллин, тазобактам), цефалоспорины (2-е, 3-е и 4-е поколение), аминогликозиды, макролиды, азитромицин, хинолоны, (ципрофлоксацин), монобактамы (азетреонам), сульфонамид/триметоприм, карбапенемы (имипенем), хлорамфеникол.

Действие в отношении Pseudomonas: ципрофлоксацин, аминогликозиды, некоторые цефалоспорины 3-го поколения, цефалоспорины 4-го поколения, пенициллины широкого спектра действия, карбапенемы.

Противогрибковые препараты: аллиамины, амфотерицин В, флуконазол и другие азолы, итраконазол, вориконазол, позаконазол, равуконазол, эхинокандины, флуцитозин, сордарины, ингибиторы хитинсинтетазы, ингибиторы топоизомеразы, липопептиды, прадимицины, липосомальный нистатин, вориконазол, эхиноканидины, имидазол, триазол, тиазол, полиен.

Противовирусные препараты: абакавир, ацикловир (ацикловир), активируемый олигомеризатор каспазы, адефовир, амантадин, ампренавир(агенераза), амплиген, арбидол, атазанавир, атрипла, балавир, цидофовир, комбивир, долутегравир, дарунавир, делавирдин, диданозин, двухцепочечная РНК, докозанол, эдоксудин, эфавиренц, эмтрицитабин, энфувиртид, энтекавир, эколиевер, фамцикловир, комбинация фиксированной дозы (антиретровирусная), фомивирсен, фосампренавир, фоскарнет, фосфонет, ингибитор слияния, ганцикловир, ибацитабин, имуновир, идоксуридин, имиквимод, индавир, инозин, ингибитор интегразы, интерферон III типа, интерферон II типа, интерферон I типа, интерферон, ламивудин, лопинавир, ловирид, маравирок, мороксидин, метисазон, морфолинос, нелфинавир, невирапин, нексавир, нитазоксанид, аналоги нуклеозидов, новир, озелтамивир (тамифлю), пэгинтерферон альфа-2а, пенцикловир, перамивир, плеконарил, подофиллотоксин, ингибитор протеаз (фармакология), ралтеглавир, ингибитор обратной транскриптазы, рибавирин, рибозимы, рифампицин, римантадин, ритонавир, РНКаза Н, ингибиторы протеаз, пирамидин, саквинавир, софосбувир, ставудин, синергический энхансер (антиретровирусный), телапревир, тенофовир, тенофовир дизопроксил, типранавир, трифлуридин, тризивир, тромантадин, трувада, валацикловир (валтрекс), валганцикловир, викривирок, видарабин, вирамидин, зальцитабин, занамивир (реленза), зидовудин.

Кроме того, антибиотические средства включают в себя бактериофаги для лечения бактериальных инфекций, синтетические противомикробные пептиды или антагонисты железа/хелаторы железа. Кроме того, терапевтические антитела или антагонисты против патогенных структур, например, анти-VAP-антитела, вакцинация против резистентных клонов, введение иммунных клеток, таких как in vitro примированные или модулированные Т-эффекторные клетки, представляют собой антибиотические средства, которые представляют виды лечения критически больных пациентов, таких как пациентов с сепсисом. Дополнительные антибиотические средства/виды лечения или терапевтические стратегии против инфекции или для предупреждения новых инфекций включают в себя применение антисептиков, продуктов деконтаминации, антивирулентных агентов, например, липосом, санацию, уход за раной, хирургическое вмешательство.

Также возможно комбинировать несколько из вышеупомянутых антибиотических средств или стратегий лечения.

В соответствии с данным изобретением проАДМ и необязательно ПКТ и/или другие маркеры или клинические шкалы оценки используют в качестве маркеров для мониторинга терапии, включающей в себя постановку диагноза, прогноз, оценку риска и стратификацию риска последующего нежелательного явления в состоянии здоровья пациента, который был диагностирован как критически больной.

Специалист в данной области техники способен получать или разрабатывать средства для выявления, измерения, определения и/или количественной оценки любой из вышеуказанных молекул проАДМ или их фрагментов или их вариантов, а также других маркеров по данному изобретению в соответствии со стандартной практикой молекулярной биологии.

Уровень проАДМ или его фрагментов, а также уровни других маркеров по данному изобретению могут быть определены с помощью любого анализа, который надежно определяет концентрацию маркера. В частности, масс-спектрометрия (MS) и/или иммунологические анализы могут быть использованы в качестве иллюстративных в прилагаемых примерах. Используемый в данном документе иммунологический анализ представляет собой биохимический тест, который измеряет наличие или концентрацию макромолекулы/полипептида в растворе с помощью применения антитела или связывающего фрагмента антитела или иммуноглобулина.

Способы определения проАДМ или других маркеров, таких как ПКТ, используемых в контексте данного изобретения, предусмотрены в данном изобретении. В качестве примера может быть применен способ, выбранный из группы, состоящей из масс-спектрометрии (MS), иммунолюминесцентного анализа (LIA), радиоиммунологического анализа (RIA), хемилюминесцентного и флуоресцентного иммунологических анализов, иммуноферментного анализа (EIA), твердофазных иммуноферментных анализов (ELISA), люминесцентных чипов с использованием гранул, чипов с использованием магнитных гранул, анализов на основе белковых микрочипов, форматов экспресс-тестов, таких как, например, иммунохроматографические тест-полоски, анализ с использованием криптатов редкоземельных металлов и автоматизированные системы/анализаторы. Определение проАДМ и необязательно других маркеров на основе распознавания антител представляет собой предпочтительный вариант осуществления данного изобретения. Используемый в данном документе термин «антитело» относится к иммуноглобулиновым молекулам и иммунологически активным частям иммуноглобулиновых (Ig) молекул, т.е., молекулам, которые содержат антигенсвязывающий сайт, который специфически связывает (реагирует в иммунологическом отношении) антиген. В соответствии с данным изобретением антитела могут представлять собой как моноклональные, так и поликлональные антитела. В частности, используют антитела, которые специфически связываются по меньшей мере с проАДМ или его фрагментами.

Антитело считается специфическим, если его аффинность в отношении молекулы, представляющей интерес, например, проАДМ или его фрагмента, составляет по меньшей мере в 50 раз больше, предпочтительно в 100 раз больше, наиболее предпочтительно по меньшей мере в 1000 раз больше, чем в отношении других молекул, содержащихся в образце, содержащем молекулу, представляющую интерес.В данной области техники хорошо известно, как разрабатывать и отбирать антитела с определенной специфичностью. В контексте данного изобретения моноклональные антитела являются предпочтительными. Антитело или связывающий фрагмент антитела специфически связывается с определенными в данном документе маркерами или их фрагментами. В частности, антитело или связывающий фрагмент антитела связывается с определенными в данном документе пептидами АДМ или проАДМ. Таким образом, определенные в данном документе пептиды также могут представлять собой эпитопы, с которыми антитела специфически связываются. Кроме того, антитело или связывающий фрагмент антитела используют в способах и наборах по данному изобретению, которые специфически связываются с АДМ или проАДМ, в частности, с СФ-проАДМ.

Кроме того, антитело или связывающий фрагмент антитела используют в способах и наборах по данному изобретению, которые специфически связываются с проАДМ или его фрагментами и необязательно с другими маркерами по данному изобретению, такими как ПКТ. Иллюстративные иммунологические анализы могут представлять собой иммунолюминесцентный анализ (LIA), радиоиммунологический анализ (RIA), хемилюминесцентный и флуоресцентный иммунологические анализы, иммуноферментный анализ (EIA), твердофазные иммуноферментные анализы (ELISA), люминесцентные чипы с использованием гранул, чипы с использованием магнитных гранул, анализы на основе белковых микрочипов, форматы экспресс-тестов, анализ с использованием криптатов редкоземельных металлов. Кроме того, могут использоваться анализы, подходящие для тестирования в месте оказания медицинской помощи, и форматы экспресс-тестов, такие как, например, иммунохроматографические тест-полоски. Также предусмотрены автоматизированные иммунологические анализы, такие как анализ KRYPTOR.

В качестве альтернативы, вместо антител другие молекулы захвата или молекулярные каркасы, которые специфически и/или избирательно распознают проАДМ, могут быть включены в объем данного изобретения. В данном документе термин «молекулы захвата» или «молекулярные каркасы» включает в себя молекулы, которые можно использовать для связывания целевых молекул или молекул, представляющих интерес, т.е., аналитов (например, проАДМ, СФ-проАДМ и ПКТ) из образца. Таким образом, молекулы захвата должны иметь соответствующую форму, как пространственно, так и с точки зрения поверхностных характеристик, таких как поверхностный заряд, гидрофобность, гидрофильность, наличие или отсутствие доноров и/или акцепторов Льюиса для того, чтобы специфически связывать целевые молекулы или молекулы, представляющие интерес. Таким образом, связывание может, например, быть опосредовано ионными, ван-дер-ваальсовыми, пи-пи, сигма-пи, гидрофобными или водородными взаимодействиями или комбинацией из двух или более вышеупомянутых взаимодействий или ковалентных взаимодействий между молекулами захвата или молекулярными каркасами и целевыми молекулы или молекулами, представляющими интерес. В контексте данного изобретения молекулы захвата или молекулярные каркасы, например, могут быть выбраны из группы, состоящей из молекулы нуклеиновой кислоты, молекулы углевода, молекулы PNA, белка, пептида и гликопротеина. Молекулы захвата или молекулярные каркасы включают в себя, например, аптамеры, DARpin (разработанные белки с анкириновым повтором). Включены аффимеры и т.п.

В определенных аспектах данного изобретения способ представляет собой иммунологический анализ, включающий стадии:

а) приведения образца в контакт с

i. первым антителом или его антигенсвязывающим фрагментом или его производным, специфическим по отношению к первому эпитопу указанного проАДМ, и

ii. вторым антителом или его антигенсвязывающим фрагментом или его производным, специфическим по отношению ко второму эпитопу указанного проАДМ, и

b) детекции связывания двух антител или антигенсвязывающих фрагментов или их производных с указанным проАДМ.

Предпочтительно одно из антител может быть меченым, а другое антитело может быть связано с твердой фазой или может быть селективно связано с твердой фазой. В особенно предпочтительном аспекте данного анализа одно из антител является меченым, в то время как другое либо связано с твердой фазой, либо может быть селективно связано с твердой фазой. Первое антитело и второе антитело могут присутствовать диспергированными в жидкой реакционной смеси, и при этом первый метящий компонент, который представляет собой часть метящей системы, основанной на гашении или амплификации флуоресценции или хемилюминесценции, связан с первым антителом, а второй метящий компонент указанной метящей системы связан со вторым антителом таким образом, что после связывания обоих антител с указанным проАДМ или его фрагментами, подлежащими детекции, образуется измеряемый сигнал, который обеспечивает детекцию полученных сэндвич-комплексов в растворе для измерения. Метящая система может содержать криптат или хелат редкоземельного металла в комбинации с флуоресцентным или хемилюминесцентным красителем, в частности, цианинового типа.

В предпочтительном варианте осуществления способ осуществляют в виде гетерогенного иммунологического сэндвич-анализа, в котором одно из антител иммобилизовано на произвольно выбранной твердой фазе, например, стенках пробирок с покрытием (например, полистирольных пробирок; пробирок с покрытием; СТ) или микротитровальных планшетах, например, состоящие из полистирола или частиц, таких как, например, магнитные частицы, при этом другое антитело имеет группу, напоминающую детектируемую метку или обеспечивающую селективное прикрепление к метке, и которая выступает для детекции образованных сэндвич-структур. Также возможна временная задержка или последующая иммобилизация с использованием соответствующих твердых фаз.

Способ в соответствии с данным изобретением может дополнительно осуществляться в виде гомогенного способа, при этом сэндвич-комплексы, образованные антителом/антителами и маркером, проАДМ или его фрагментом, которые подлежат детекции, остаются суспендированными в жидкой фазе. В этом случае предпочтительным является применение двух антител, при этом оба антитела метят с помощью частей системы детектирования, что приводит к образованию сигнала или активации сигнала, если оба антитела интегрированы в один сэндвич. Такие методики осуществляются, в частности, в виде способов детекции на основе усиления флуоресценции или гашения флуоресценции. Особенно предпочтительный аспект относится к применению реагентов для детекции, которые необходимо использовать попарно, таких как, например, реагентов, которые описаны в US 4882733, ЕР 0180492 или ЕР 0539477 и предшествующем уровне техники, цитируемом в данном документе. В этом отношении становятся возможными измерения, в которых выявляют только продукты реакции, содержащие оба метящие компонента в одном иммунном комплексе в реакционной смеси. Например, такие технологии предлагаются под торговыми названиями TRACE® (Time Resolved Amplified Cryptate Emission усиленное излучения криптата с временным разрешением) или KRYPTOR®, воплощающие идеи упомянутых выше заявок. Таким образом, в определенных предпочтительных аспектах используется диагностическое устройство для осуществления предложенного в данном документе способа. Например, определяют уровень белка проАДМ или его фрагментов и/или уровень любого дополнительного маркера предложенного в данном документе способа, такого как РСТ. В определенных предпочтительных аспектах диагностическое устройство представляет собой KRYPTOR®.

Уровень маркера по данному изобретению, например, проАДМ или его фрагментов, ПКТ или его фрагментов или других маркеров также могут быть определены с помощью способов на основе масс-спектрометрии (MS). Такой способ может включать детекцию присутствия, количества или концентрации одного или более пептидов модифицированных или немодифицированных фрагментов, например проАДМ или ПКТ в указанном биологическом образце или расщепление белка (например, триптическое расщепление) из указанного образца и необязательно отделение образца с помощью хроматографических способов и обработку полученного и необязательно отделенного образца MS анализу. Например, мониторинг селективных реакций (SRM), мониторинг множественных реакций (MRM) или масс-спектрометрия мониторинга параллельных реакций (PRM) могут быть использованы в MS анализе, в частности, для определения количества проАДМ или его фрагментов.

В данном документе термин «масс-спектрометрия» или «МС» относится к аналитической методике, позволяющему определять соединения по их массе. Чтобы улучшить возможности масс-спектрометрии по разрешению массы и определению массы, образцы могут быть обработаны перед МС анализом. Соответственно, данное изобретение относится к способам МС детекции, которые можно комбинировать с технологиями иммунологического обогащения, способами, связанными с приготовлением образцов и/или хроматографическими способами, предпочтительно с жидкостной хроматографией (ЖХ), более предпочтительно с высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ) или ультравысокоэффективной жидкостной хроматографией (УВЭЖХ). Способы приготовления образцов включают методики лизиса, фракционирования, расщепления образца до пептидов, истощения, обогащения, диализа, обессоливания, алкилирования и/или восстановления пептидов. В то же время, эти стадии являются необязательными. Селективная детекция ионов аналитов может проводиться с помощью тандемной масс-спектрометрии (МС/МС). Тандемная масс-спектрометрия характеризуется стадией выбора массы (используемый в данном документе термин «выбор массы» обозначает выделение ионов, имеющих определенное значение m/z или узкий диапазон m/z) с последующей фрагментацией выбранных ионов и анализом массы ионов полученного продукта (фрагментов). Специалисту в данной области техники известно, как количественно оценить уровень маркера в образце с помощью масс-спектрометрических способов. Например, относительная количественная оценка «rSRM» или абсолютная количественная оценка могут быть использованы, как описано выше.

Кроме того, уровни (в том числе референтные уровни) могут быть определены с помощью способов на основе масс-спектрометрии, таких как способы, определяющие относительное количественное содержание или определяющие абсолютное количественное содержание белка или его фрагмента, представляющих интерес. Относительная количественная оценка «rSRM» может быть достигнута следующим образом.

1. Определение повышенного или сниженного присутствия целевого белка путем сравнения площади пика характеристик SRM (мониторинга селективных реакций) от определенного пептида целевого фрагмента, выявленного в образце, с той же площадью пика характеристик SRM пептида целевого фрагмента в, по меньшей мере, втором, третьем, четвертом или более биологических образцах.

2. Определение повышенного или сниженного присутствия целевого белка путем сравнения площади пика характеристик SRM от данного целевого пептида, выявленного в образце, с площадями пика характеристик SRM, полученными на основании пептидов фрагментов из других белков в других образцах, полученных из разных и отдельных биологических источников, при этом сравнение площади пика характеристик SRM между двумя образцами для пептидного фрагмента нормализуют, например, на количество белка, анализируемого в каждом образце.

3. Определение повышенного или сниженного присутствия целевого белка путем сравнения площади пика характеристик SRM для определенного целевого пептида с площадями пика характеристик SRM от других пептидов фрагментов, полученных из разных белков в одном и том же биологическом образце с целью нормализации изменяющихся уровней гистоновых белков на уровни других белков, которые не изменяют свои уровни экспрессии в различных клеточных условиях.

4. Указанные анализы могут быть применены как к пептидам немодифицированных фрагментов, так и к пептидам модифицированных фрагментов целевых белков, при этом модификации включают в себя, но не ограничиваясь этим, фосфорилирование и/или гликозилирование, ацетилирование, метилирование (моно, ди, три), цитруллинирование, убиквитинилирование, и при этом относительные уровни модифицированных пептидов определяют таким же образом, как и определение относительных количеств немодифицированных пептидов.

Абсолютная количественная оценка определенного пептида может быть достигнута следующим образом.

1. Сравнение площади пика характеристик SRM/MRM для пептида определенного фрагмента из целевых белков в отдельном биологическом образце с площадью пика характеристик SRM/MRM внутреннего стандарта фрагмента пептида, введенного в лизат белка из биологического образца. Внутренний стандарт может представлять собой меченую синтетическую версию пептида фрагмента из исследуемого целевого белка, который изучается, или меченого рекомбинантного белка. Указанный стандарт добавляют в образец в известных количествах до (обязательно для рекомбинантного белка) или после расщепления, и площадь пика характеристик SRM/MRM может быть определена как для внутреннего стандарта пептида фрагмента, так и для пептида нативного фрагмента в биологическом образце отдельно с последующим сравнением обеих площадей пиков. Это можно применить как к пептидам немодифицированных фрагментов, так и к пептидам модифицированных фрагментов, при этом модификации включают в себя, но не ограничиваясь этим, фосфорилирование и/или гликозилирование, ацетилирование, метилирование (например, моно-, ди- или три-метилирование), цитруллинирование, убиквитинилирование, и при этом абсолютные уровни модифицированных пептидов могут быть определены таким же образом, как и определение абсолютных уровней немодифицированных пептидов.

2. Пептиды также могут быть количественно оценены с помощью внешних калибровочных кривых. Подход с применением нормальной кривой использует постоянное количество тяжелого пептида в качестве внутреннего стандарта и варьирующее количество легкого синтетического пептида, добавленного в образец. Иллюстративную матрицу, аналогичную матрице исследуемых образцов, необходимо использовать для построения стандартных кривых с целью учета эффекта матрицы. Помимо этого, способ обратной кривой позволяет преодолеть проблему эндогенного аналита в матрице, при этом постоянное количество легкого пептида добавляется сверху эндогенного аналита для создания внутреннего стандарта, а варьирующие количества тяжелого пептида добавляются для создания совокупности стандартов концентрации. В исследуемые образцы для сравнения с нормальными или обратными кривыми добавляли то же самое количество стандартного пептида, что и внутренний стандарт, добавленный в матрицу, используемую для создания калибровочной кривой. Данное изобретение также относится к наборам, использованию наборов и способам, в которых используются такие наборы. Данное изобретение относится к наборам для осуществления описанных в данном документе выше и ниже предложенных способов. Предложенные в данном документе определения, например, предложенные в отношении способов, также применимы к наборам по данному изобретению. В частности, данное изобретение относится к наборам для мониторинга терапии, включающего прогноз, оценку риска или стратификацию риска последующего неблагоприятного явления в состоянии здоровья пациента, при этом указанный набор содержит

- реагенты для детекции для определения уровня проАДМ или его фрагмента(фрагментов) и необязательно для определения уровня ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка или их фрагмента(фрагментов) в образце, полученном от субъекта, и реагенты для детекции для определения указанного уровня проАДМ в указанном образце, полученном от указанного субъекта, и

Используемый в данном документе термин «референтные данные» включает в себя референтный(референтные) уровень(уровни) проАДМ и необязательно ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка. Уровни проАДМ и необязательно РСТ, лактата и/или С-реактивного белка в образце, полученном от субъекта, можно сравнить с референтными уровнями, содержащимися в справочных данных набора. Референтные уровни описаны в данном документе выше и также проиллюстрированы в прилагаемых примерах. Референтные данные также могут включать в себя референтный образец, с которым сравнивается уровень проАДМ и необязательно РСТ, лактата и/или С-реактивного белка. Референтные данные также могут включать в себя руководство по использованию наборов по данному изобретению.

Набор может дополнительно содержать объекты, пригодные для получения образца, такого как образец крови, например, набор может содержать контейнер, при этом указанный контейнер содержит устройство для прикрепления указанного контейнера к канюле или шприцу, представляет собой шприц, пригодный для выделения крови, имеет внутреннее давление ниже атмосферного давления, такое, которое подходит для вытягивания предварительно определенного объема образца в указанный контейнер, и/или содержит дополнительно детергенты, хаотропные соли, ингибиторы рибонуклеазы, хелатирующие средства, такие как гуанидина изотиоцианат, гуанидина гидрохлорид, додецилсульфат натрия, полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат, белки-ингибиторы РНКазы и их смеси, и/или фильтрующая система, содержащая нитроцеллюлозу, кремнеземную матрицу, ферромагнитные сферы, емкость для удаления избытка, трегалозу, фруктозу, лактозу, маннозу, полиэтиленгликоль, глицерин, ЭДТК, ТРИС, лимонен, ксилол, бензоил, фенол, минеральное масло, анилин, пиррол, цитрат и их смеси.

Используемый в данном документе термин «реагент для детекции» или т.п.представляет собой реагенты, которые пригодны для определения о писанного (о писанных) в данном документе маркера(маркеров), например, проАДМ, РСТ, лактата и/или С-реактивного белка. Такие иллюстративные реагенты для детекции представляют собой, например, лиганды, например, антитела или их фрагменты, которые специфически связываются с пептидом или эпитопами описанного в данном документе маркера(маркеров). Такие лиганды могут быть использованы в иммунологических анализах, как описано выше. Дополнительные реагенты, которые используются в иммунологических анализах для определения уровня маркера(маркеров), также могут содержаться в наборе и рассматриваются в данном документе в качестве реагентов для детекции. Реагенты для детекции также могут относиться к реагентам, которые используются для детекции маркеров или их фрагментов с помощью способов на основе MS. Таким образом, такой реагент для детекции также может представлять собой реагенты, например, ферменты, химические вещества, буферы и т.д., которые используются для подготовки образца для MS анализа. Масс-спектрометр также можно рассматривать в качестве реагента для детекции. Реагенты для детекции в соответствии с данным изобретением также могут представлять собой калибровочный(калибровочные) раствор(растворы), например, который(которые) можно использовать для определения и сравнения уровня маркера(маркеров).

Чувствительность и специфичность диагностического и/или прогностического исследования зависит от большего, чем просто аналитическое «качество» исследования, они также зависят от определения того, что составляет отклоняющийся от нормы результат. На практике кривые операционных характеристик приемника (кривые ROC) в типичном случае рассчитываются путем построения графика зависимости значения переменной от ее относительной частоты у «нормальных» (т.е., внешне здоровых) индивидуумов, не имеющих инфекции, и в популяциях «больных», например, субъектов, имеющих инфекцию. В случае любого определенного маркера (такого как ADM) распределение уровней маркеров для субъектов с заболеванием/патологическим состоянием и без него, вероятно, будет перекрываться. В таких условиях исследование не позволяет абсолютно точно отличить норму от заболевания со 100% точностью, и область перекрытия может указывать на то, где с помощью исследования нельзя отличить норму от заболевания. Граничное значение выбирают таким образом, что ниже него исследование считается отклоняющимся от нормы, а выше него исследование считается нормальным, или ниже или выше него исследование указывает на определенное патологическое состояние, например, инфекцию. Площадь под кривой ROC представляет собой значение вероятности того, что предполагаемое измерение позволит правильно определить патологическое состояние. Кривые ROC могут использоваться, даже если результаты исследований не обязательно дают точное количество. До тех пор, пока можно ранжировать результаты, можно строить кривую ROC. Например, результаты исследования «патологических» образцов можно ранжировать в соответствии со степенью (например, 1=низкий, 2=нормальный и 3=высокий). Указанное ранжирование может коррелировать с результатами в «нормальной» популяции, и строится кривая ROC. Указанные способы хорошо известны в данной области техники; см., например, Hanley et al. 1982. Radiology 143: 29-36. Предпочтительно, граничное значение выбирают так, чтобы обеспечить площадь кривой ROC, составляющую более приблизительно 0,5, более предпочтительно более приблизительно 0,7, еще более предпочтительно более приблизительно 0,8, еще более предпочтительно более приблизительно 0,85 и наиболее предпочтительно более приблизительно 0,9. Термин «приблизительно» в данном контексте относится к +/- 5% определенного измерения.

Горизонтальная ось кривой ROC представляет (1 специфичность), которая увеличивается в зависимости от скорости ложно-положительных результатов. Вертикальная ось кривой представляет собой чувствительность, которая увеличивается в зависимости от скорости истинно-положительных результатов. Таким образом, для определенного выбранного граничного значения может быть определено значение (1 специфичность) и может быть получена соответствующая чувствительность. Площадь под кривой ROC представляет собой значение вероятности того, что измеряемый уровень маркера позволит правильно определить заболевание или патологическое состояние. Таким образом, площадь под кривой ROC может использоваться для определения эффективности исследования.

Соответственно, данное изобретение включает введение антибиотика, пригодного для лечения, на основании информации, полученной с помощью способа, описанного в данном документе.

Используемые в данном документе термины «содержащий» и «включающий» или их грамматические варианты следует понимать как описывающие указанные свойства, целые числа, стадии или компоненты, но не исключающие добавления одного или более дополнительных свойств, целых чисел, стадий, компонентов, или их групп. Указанный термин охватывает термины «состоящий из» и «состоящий по сути из». Таким образом, термины «содержащий»/«включающий»/«имеющий» означают, что может присутствовать любой дополнительный компонент (или аналогичные свойства, целые числа, стадии и т.п.). Термин «состоящий из» означает, что дополнительный компонент (или аналогичные свойства, целые числа, стадии и т.п.) не присутствует. Термин «состоящий по сути из» или его грамматические варианты при использовании в данном документе следует понимать как описывающий указанные свойства, целые числа, стадии или компоненты, но не исключающие добавления одного или более дополнительных свойств, целых чисел, стадий, компонентов или их групп, но только в том случае, если дополнительные свойства, целые числа, стадии, компоненты или их группы существенно не изменяют основные и новые характеристики заявленной композиции, устройства или способа.

Таким образом, термин «состоящий по сути из» означает, что могут присутствовать такие определенные дополнительные компоненты (или аналогичные свойства, целые числа, стадии и т.п.), а именно компоненты, которые не оказывают существенного влияния на основные характеристики композиции, устройства или способа. Другими словами, термин «состоящий по сути из» (который может использоваться в данном документе взаимозаменяемо с термином «содержащий по сути»), допускает присутствие других компонентов в композиции, устройстве или способе в дополнение к обязательным компонентам (или аналогичным свойствам, целым числам, стадиям и т.п.), при условии, что на существенные характеристики устройства или способа существенное влияние не оказывает присутствие других компонентов. Термин «способ» относится к приемам, средствам, методиками и процедурам для выполнения определенной задачи, в том числе, но не ограничиваясь этим, такие приемы, средства, методики и процедуры, либо известные, либо легко разрабатываемые исходя из известных приемов, средств, методик и процедур специалистами-практиками химических, биологических и биофизических областей. Данное изобретение дополнительно описано с помощью отсылки на следующие неограничивающие примеры.

Примеры

Способы примеров

Схема исследования и пациенты

Данное исследование представляет собой вторичный анализ плацебо-контролируемого исследования противомикробной терапии с применением селенита натрия и прокальцитонина при тяжелом сепсисе (SISPCT), которое проводилась в 33 многопрофильных отделениях реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ) по всей Германии с ноября 2009 года по февраль 2013 года (26). Критерии включения включали в себя взрослых пациентов в возрасте ≥18 лет с впервые выявленным тяжелым сепсисом или септическим шоком (≤24 часа), в соответствии с определением SEPSIS-1 комитета консенсусной конференции ACCP/SCCM ACCP/SCCM, и далее их классифицировали в соответствии с определениями 2016 года (сепсис-3 и септический шок-3) (4). Подробности схемы исследования, сбора данных и лечения описывали ранее (26). Комитет по этике Университетской больницы Йены и все другие центры одобрили данное исследование, и при необходимости получали письменное информированное согласие.

Измерения биомаркеров

Пациентов включали в исследование в течение 24 часов после постановки диагноза тяжелого сепсиса или септического шока, и непосредственно после этого измеряли уровень ПКТ, CRP и лактата. Уровень ПКТ измеряли на приборах с диапазоном измерения 0,02-5000 нг/мл и чувствительностью функционального анализа и нижним пределом обнаружения, составляющими по меньшей мере 0,06 нг/мл и 0,02 нг/мл соответственно. Дополнительные образцы крови от всех пациентов собирали и хранили в центральной исследовательской лаборатории в Йене при -80°С. Концентрации СФ-проАДМ в плазме крови измеряли ретроспективно (Kryptor®, Thermo Fisher Scientific, Германия) с пределом обнаружения, составляющим 0,05 нмоль/л. Клинические шкалы оценки тяжести, в том числе динамическую шкалу оценки органной недостаточности (SOFA), шкалу оценки острых и хронических функциональных изменений (APACHE) II и упрощенную шкалу оценки острых функциональных изменений (SAPS) II определяли при включении в исследование.

Статистический анализ

Различия в демографических и клинических характеристиках в отношении 28-дневной смертности оценивали с использованием критерия χ2 для категориальных переменных и t-критерия Стьюдента или U-критерия Манна-Уитни для непрерывных переменных в зависимости от нормальности распределения. Нормально и ненормально распределенные переменные выражали в виде среднего (стандартного отклонения) и медианы [первый квартиль - третий квартиль] соответственно. Ассоциацию между смертностью и каждым биомаркером и клинической шкалой оценки во всех временных точках оценивали с использованием площади под кривыми операционных характеристик приемника (AUROC) и регрессионного анализа Кокса, с многовариантным анализом с поправкой на возраст и наличие сопутствующих заболеваний и септического шока. Пациентов дополнительно разделяли на три подгруппы тяжести (низкая, промежуточная и высокая) на основании расчета двух порогов AUROC по всей популяции для каждого биомаркера и клинической шкалы оценки в каждой временной точке с предварительно определенной чувствительностью и специфичностью, близкой к 90%. Подгруппу клинически стабильных пациентов впоследствии определяли как пациентов с отсутствием каких-либо процедур или осложнений, связанных с ОРИТ (в том числе направленных процедур очистки, экстренного хирургического вмешательства, появления новых инфекций, переливания препаратов крови, инфузии коллоидов, инвазивной механической вентиляции легких, почечной/печеночной заместительной терапии или вазопрессорной терапии и ухудшения общих клинических признаков и симптомов у пациента), и дополнительную группу определяли как пациентов с соответствующими низкими концентрациями СФ-проАДМ, которые не показали какого-либо увеличения со времени предыдущего измерения. Смертность и среднюю продолжительность пребывания рассчитывали в обеих группах и сравнивали с группой пациентов, которых выписывали в каждой конкретной временной точке.

В конечном итоге создавали две модели, стратифицирующие пациентов с изменениями уровня ПКТ, составляющими 20% (от исходного уровня до дня 1, на основании среднего снижения уровня ПКТ, наблюдаемого в течение указанного периода времени) и 50% (от исходного уровня до дня 4, на основании ранее созданной модели (26)). Подгруппы пациентов впоследствии определяли на основании уровней тяжести СФ-проАДМ и рассчитывали соответствующие показатели смертности. Риск смертности в каждой подгруппе рассчитывали с помощью регрессионного анализа Кокса и иллюстрировали кривыми Каплана-Мейера. Прогнозируемый риск развития новых инфекций и потребность в направленных процедурах очистки и экстренного хирургического вмешательства в течение 4-7 дней впоследствии исследовали модели от исходного уровня до дня 4. Все данные анализировали с использованием статистического программного обеспечения R (версия 3.1.2).

Пример 1 Характеристики пациентов

Характеристики пациентов при включении в исследование представлены в Табл. 1. В общей сложности проанализировали 1089 пациентов с тяжелым сепсисом (13,0%) или септическим шоком (87,0%), при этом 445 (41,3%) и 633 (58,7%) пациентов также соответствовали критериям сепсиса-3 и септического шока-3 соответственно. Включенные в исследование пациенты имели средний возраст, составляющий 65,7 (13,7) лет, и среднюю шкалу оценки SOFA, составляющую 10,0 (3,3) баллов. Показатель смертности от всех причин за 28 дней (N=1076) составил 26,9% (сепсис-3: 20,0%; септический шок-3: 32,1%), при этом показатель больничной смертности составил 33,4% (сепсис-3: 24,4%; септический шок-3: 40,4%). Инфекции, возникающие из одного очага, обнаруживали у 836 пациентов (77,7%), при этом легочное (N=324; 30,1%), внутрибрюшинное (N=252; 23,4%), урогенитальное (N=57; 5,3%) и костное/мягко-тканное (N=50; 4,6%) происхождение было наиболее распространенным. Соответствующие показатели смертности составили 26,5%, 24,6%, 22,8% и 28,0% соответственно. Множественное происхождение инфекции обнаруживали у 240 (22,3%) пациентов. Наиболее распространенные причины смертности включали вызванную сепсисом полиорганную недостаточность (N=132; 45,7%), рефрактерный септический шок (N=54; 18,7%), смерть от ранее существовавшего заболевания (N=35; 12,1%) и острую дыхательную недостаточность (N=17; 5,9%). Другие причины, такие как кардиогенный и геморрагический шок, тромбоэмболия легочной артерии, отек головного мозга, инфаркт миокарда и аритмия сердца, были причиной общего показателя смертности, составляющего 8,6%. Ограничение терапии применяли в отношении 3,4% пациентов.

Пример 2 Ассоциация биомаркеров исходного уровня и клинических шкал оценки со смертностью

Одномерный и многомерный регрессионный анализ Кокса показал, что СФ-проАДМ имел наиболее сильную связь с 28-дневной смертностью во всей популяции пациентов, а также в подгруппах с сепсисом-3 и септическим шоком-3 (Табл. 2). Соответствующий анализ AUROC обнаружил существенные различия во всех сравнениях биомаркеров и клинических шкал оценки с СФ-проАДМ, за исключением APACHE II (подгруппа пациентов с сепсисом-3).

Аналогичные результаты также получали для 7-дневного, 90-дневного прогноза смертности в ОРИТ и больничной смертности (Табл. 3), с добавлением СФ-проАДМ ко всем потенциальным биомаркерам и комбинациям клинических шкал оценки (N=63), значительно увеличивающим прогностические возможности (Табл. 4).

Пример 3 Определение пациентов с высоким риском

Общую популяцию пациентов дополнительно стратифицировали в соответствии с существующими уровнями тяжести SOFA, а также характеристиками биомаркеров и клинических шкал оценки при прогнозировании 28-дневной смертности, оцениваемой в каждой подгруппе. Уровень СФ-проАДМ показал наиболее высокую точность среди всех параметров в подгруппах низкой (SOFA ≤7) и умеренно (8≤ SOFA ≤13) тяжести SOFA (Табл. 5; Табл. 6).

Впоследствии рассчитывали две соответствующие граничные величины СФ-проАДМ для определения подгрупп низкой (≤2,7 нмоль/л) и высокой (>10,9 нмоль/л) тяжести на исходном уровне. По сравнению с SOFA, более точную повторную классификацию могли выполнять как при низких (СФ-проАДМ по сравнению с SOFA: N=265 по сравнению с 232; 9,8% по сравнению с 13,8% смертности), так и при высоких (СФ-проАДМ по сравнению с SOFA: N=161 по сравнению с 155; 55,9% по сравнению с 41,3%) граничных значения тяжести (Табл. 7).

Подгруппа из 94 пациентов (9,3%) с высокими концентрациями СФ-проАДМ и соответствующими низкими или промежуточными значениями SOFA имела 28- и 90-дневные показатели смертности, составляющие 57,4% и 68,9% соответственно по сравнению с 19,8% и 30,8% в оставшейся популяции пациентов с низкими и промежуточными значения SOFA. Аналогичные закономерности могли обнаруживать в случае SAPS II, APACHE II и уровня лактата соответственно (Табл. 8-10).

Пример 4 Определение пациентов с низким риском во время пребывания в ОРИТ

Исследуемая когорта включает подгруппу клинически стабильных пациентов, которые не сталкивались с процедурами или осложнениями, связанными с ОРИТ, такими как направленные процедуры очистки, экстренное хирургическое вмешательство, новые инфекции, переливание препаратов крови, инфузия коллоидов, инвазивная механическая вентиляция легких, почечная/печеночная заместительная терапия, ухудшение общих клинических признаков и симптомов у пациента. Эту группу клинически стабильных пациентов относили к категории пациентов с низким риском.

Уровень СФ-проАДМ показал наиболее сильную ассоциацию с 28-дневной смертностью во всех последующих временных точках (Табл. 11) и могла обеспечить стабильное граничное значение, составляющее ≤2,25 нмоль/л при определении популяции пациентов с низким риском, что приводило к классификации большего количества пациентов с более низкими показателями смертности по сравнению с другими биомаркерами и клиническими шкалами оценки (Табл. 12). Соответственно, в день 4 могли определить 290 пациентов с низкой степенью тяжести СФ-проАДМ, из которых 79 (27,2%) были клинически стабильны и не имели увеличения концентраций СФ-проАДМ по сравнению с последним измерением (Табл. 13). Постоянно низкую концентрацию СФ-проАДМ могли обнаруживать у 51 (64,6%) пациента, в то время как снижение от промежуточного до низкого уровня тяжести могли наблюдать у 28 (35,4%) пациентов. Средняя продолжительность пребывания в ОРИТ составила 8 [7-10] дней, а 28- и 90- дневный показатель смертности составил 0,0% и 1,4% соответственно. Для сравнения, только 43 пациентов выписывали фактически из ОРИТ в день 4, при этом 28- и 90-дневный показатель смертности составил 2,3% и 10,0%. Анализ концентраций СФ-проАДМ в этой группе пациентов показал диапазон значений, при этом 20 (52,6%), 16 (42,1%) и 2 (5,3%) пациентов были низкие, промежуточные и высокие концентрации тяжести соответственно. Аналогичные результаты получали в случае пациентов, остававшихся в ОРИТ в дни 7 и 10. Уровень СФ-проАДМ со стабильным граничным значением, составляющим ≤2,25 нмоль/л, мог определять большее число пациентов с низким риском с более низкими показателями смертности по сравнению с другими биомаркерами и клиническими шкалами оценки. Исходя из этого, большее количество пациентов могли выписывать из ОРИТ по сравнению с классификациями без использования ADM. В результате выписывания большего количества пациентов больница может более эффективно распределять койко-места в ОРИТ и получать выгоду от затрат, которых можно избежать.

Пример 5 Дополнительное влияние СФ-проАДМ на терапию с применением прокальцитонина

Зависимый от времени регрессионный анализ Кокса показал, что самое раннее значительное дополнительное увеличение прогностической информации по отношению к значениям СФ-проАДМ исходного уровня могли наблюдать в день 1, при этом имели место последующие единичные или кумулятивные измерения, приводящие к значительно более сильным ассоциациям с 28-дневной смертностью (Табл. 14).

Таким образом, создавали две модели алгоритмов с применением ПКТ, изучающие изменения ПКТ от исходного уровня либо до дня 1, либо до дня 4, при этом соответствующий анализ подгрупп проводили на основании классификаций тяжести СФ-проАДМ.

Было обнаружено, что пациенты с уменьшением концентрации РСТ на ≥20% от исходного уровня до дня 1 (Табл. 15 и Табл. 16) или на ≥50% от исходного уровня до дня 4 (Табл. 17 и Табл. 18) имели 28-дневный показатель смертности, составляющий 18,3% (N=458) и 17,1% (N=557) соответственно. Этот показатель снижался до 5,6% (N=125) и 1,8% (N=111), если у пациентов наблюдали постоянно низкий уровень СФ-проАДМ, однако повышался до 66,7% (N=27) и 52,8% (N=39) у пациентов с постоянно высокими значениями СФ-проАДМ (ЧСС [95% ДИ]: 19,1 [8,0-45,9] и 43,1 [10,1-184,0]).

Кроме того, пациенты со снижением значений ПКТ на ≥50% (от исходного уровня до дня 4), но постоянно высокими или промежуточными концентрациями СФ-проАДМ, имели значительно более высокий риск развития последующих нозокомиальных инфекций (ЧСС [95% ДИ]): высокие концентрации: 3,9 [1,5-10,5]; промежуточные концентрации: 2,4 [1,1-5,1] по сравнению с пациентами с постоянно низкими концентрациями; промежуточные концентрации: 2,9 [1,2-6,8]) или снижение от промежуточных до низких концентраций) или потребность в экстренном хирургическом вмешательстве (ЧСС [95% ДИ]: промежуточные концентрации: 2,0 [1,1-3,7] по сравнению со снижением от промежуточных до низких концентраций). В отличие от этого, пациенты с повышением от промежуточных до высоких концентраций с большей вероятностью нуждались в очистке инфекционного очага по сравнению с пациентами с постоянно промежуточными (ЧСС [95% ДИ]: 3,2 [1,3-7,6]) или снижающимися значениями (ОР [95% ДИ]: от промежуточных до низких: 8,7 [3,1-24,8]); от высоких до промежуточных: 4,6 [1,4-14,5]). Если уровни ПКТ не снижались на ≥50%, то значительно возрастал риск потребности в экстренном хирургическом вмешательстве, если концентрации СФ-проАДМ были либо на постоянно высоком (ЧСС [95% ДИ]: 5,7 [1,5-21,9]), либо промежуточном (ОР [95% ДИ]: 4,2 [1,3-13,2]) уровне, в отличие от постоянно низкого.

Пример 6 Ассоциация биомаркеров исходного уровня и клинических шкал оценки со смертностью

Уровень СФ-проАДМ продемонстрировал наиболее сильную ассоциацию у пациентов с легочными и внутрибрюшинными инфекциями, а также у пациентов с грамположительными инфекциями, независимо от инфекционного очага (Табл. 19-20). Если пациентов сгруппировали в соответствии с анамнезом хирургической неотложной помощи, неоперативной неотложной помощи и планового хирургического вмешательства, приводящего к помещению в ОРИТ, уровень СФ-проАДМ обеспечил наиболее сильную и наиболее сбалансированную ассоциацию с 28-дневной смертностью во всех группах (Табл. 21).

Пример 7 Корреляция биомаркеров и клинических шкал оценки со значением SOFA на исходном уровне и в день 1

Уровень СФ-проАДМ имел наиболее высокую корреляцию из всех биомаркеров со шкалой оценки SOFA на исходном уровне, которая значительно возрастала, когда значения исходного уровня коррелировали со шкалами оценки SOFA в день 1. Наиболее высокую корреляцию могли обнаруживать между уровнем СФ-проАДМ и значением SOFA в день 10, при этом различия между отдельными подшкалами оценки SOFA обнаруживали повсюду (Табл. 22-24).

Пример 8 Определение пациентов с высоким риском

Аналогичные результаты могли встречаться в подгруппе из 124 пациентов (12,0%) с высокими концентрациями СФ-проАДМ и низкими или промежуточными значениями SAPS II (подгруппа с высоким уровнем СФ-проАДМ: [смертность 54,8% и 65,6%]; оставшаяся популяция с SAPS II [смертность 19,7% и 30,0%]), а также у 109 (10,6%) пациентов с низкими или промежуточными значениями APACHE II (подгруппа с высоким уровнем СФ-проАДМ: [смертность 56,9% и 66,7%]; оставшаяся популяция с APACHE II: [смертность 19,5% и 30,3%]).

Пример 9 Улучшенная терапия с применением прокальцитонина (ПКТ) в результате комбинирования ПКТ и АДМ

Создавали две модели алгоритмов с применением ПКТ, изучающие изменения ПКТ от исходного уровня либо до дня 1, либо до дня 4, при этом соответствующий анализ подгрупп проводили на основании классификаций тяжести СФ-проАДМ (Табл. 25-30). Предыдущие примеры показывают дополнительную ценность для АДМ у пациентов, имеющих снижение уровня ПКТ на <20% или <50%, а также у пациентов, у которых уровень ПКТ уменьшился на ≥20% или ≥50%. Тем не менее, дополнительный анализ показывает, что АДМ может представлять собой дополнительный элемент независимо от % снижения или даже повышения ПКТ. Снижение значений ПКТ могло отражать пациентов, у которых, по-видимому, антибиотикотерапия была эффективной, в связи с чем врач считал, что они находятся на пути к выживанию (т.е., устранение основной причины сепсиса, бактерий, должно приводить к улучшению состояния пациента). Например, некоторые пациенты имели сниженные уровни ПКТ от исходного уровня (день поступления) до дня 1, при этом 28-дневный показатель смертности составлял 19%. При дополнительном измерении АДМ на основании пациентов с низким уровнем АДМ можно сделать вывод о гораздо более высокой вероятности выживания или гораздо более низкой вероятности смерти (Табл. 25; сравн. снижение только уровня ПКТ на 19% и снижение уровня ПКТ на 5% + низкий уровень ADM). В результате снижения риска смерти пациентов можно было выписывать из ОРИТ с большей уверенностью, или требовалось меньше диагностических исследований (т.е., при наличии информации о том, что они находились на пути к выздоровлению).

С другой стороны, новые мероприятия необходимо рассматривать в случае пациентов с высоким значением ADM. Они подвержены гораздо более высокому риску в отношении смертности (сравн. только снижение РСТ при 19% показателе смертности с уровнем РСТ + высокий АДМ при 58,8% показателе смертности). По мнению врача состояние пациента улучшается из-за снижения значения ПКТ, однако на самом деле концентрация АДМ остается неизменной. Поэтому можно сделать вывод, что лечение не является эффективным, и его необходимо адаптировать как можно скорее. Аналогичным образом, уровень АДМ может облегчать стратификацию пациентов с повышенными значениями ПКТ (Табл. 25).

Развитие новых инфекций

Изменения уровней ПКТ и СФ-проАДМ анализировали в двух моделях, либо от исходного уровня до дня 1, либо от исходного уровня до дня 4. Пациентов сгруппировали в соответствии с общими изменениями уровня ПКТ и уровнями тяжести СФ-проАДМ.

Количество новых инфекций в течение дней 1, 2, 3 и 4 (Табл. 26) и дней 4, 5, 6 и 7 (Табл. 27) впоследствии рассчитывали для каждого пациента, который присутствовал в день 1 или день 4 соответственно. В некоторых случаях пациентов выписывали во время периода наблюдения. Предполагается, что после выписки новых инфекций не развивалось. Пациенты с множественными инфекциями в течение дней наблюдения рассматривали как имеющих одну новую инфекцию.

В качестве клинического результата, пациентов с высокими концентрациями СФ-проАДМ должны потенциально лечить антибиотиком широкого спектра действия при поступлении в ОРИТ, в сочетании с другими, с целью остановки развития новых инфекций. К указанным пациентам следует проявлять особую осторожность из-за их высокой восприимчивости к новым инфекциям.

Потребность в направленной очистке

Количество явлений направленной очистки в течение дней 1, 2, 3 и 4 (Табл. 28) и дней 4, 5, 6 и 7 (Табл. 29) впоследствии рассчитывали для каждого пациента, который присутствовал в день 1 или день 4 соответственно. В некоторых случаях пациентов выписывали во время периода наблюдения.

Потребность в экстренном хирургическом вмешательстве

Количество потребностей/явлений экстренного хирургического вмешательства в течение дней 1, 2, 3 и 4 (Табл. 30) впоследствии рассчитывали для каждого пациента, который присутствовал в день 1. В некоторых случаях пациентов выписывали во время периода наблюдения.

Пример 10 Потребность в изменении или модификации антибиотиков

При сочетании с алгоритмом антибиотикотерапии с применением уровня ПКТ уровень СФ-проАДМ может способствовать стратификации таких пациентов, которые будут требовать дальнейшего изменения или модификации антибиотикотерапии, от пациентов, которые не будут нуждаться в этом.

В последствии рассчитывали процент изменений антибиотиков в день 4, необходимый для каждой группы пациентов (Табл. 31 и 32).

У пациентов со снижением значений ПКТ на >50%

Пациенты с повышением концентраций СФ-проАДМ, от низкого до промежуточного среднего уровня тяжести, с большей вероятностью требовали модификации антибиотикотерапии в день 4, чем пациенты, которые имели постоянно низкие уровни (отношение рисков [95% ДИ]: 1,5 [0,6-4,1]).

У пациентов со снижением значений ПКТ на <50%

Пациенты либо с повышением концентрации СФ-проАДМ, от промежуточного до высокого уровня тяжести, либо с постоянно высокими концентрациями, также с большей вероятностью требовали изменений антибиотикотерапии в день 4, чем пациенты с постоянно низкими концентрациями СФ-проАДМ (отношение рисков [95% ДИ]: 5,9 [1,9-18,1] и 2,9 [0,8-10,4] соответственно).

Вывод

Несмотря на повышение концентраций ПКТ, либо от исходного уровня до дня 1, либо от исходного уровня до дня 4, пациенты с постоянно низкими концентрациями СФ-проАДМ имели значительно меньшие модификации, вносимые в назначенную им антибиотикотерапию, чем пациенты с постоянно промежуточными или высокими концентрациями.

В качестве клинического результата, при наличии повышения концентраций РСТ, врач должен проверить уровни СФ-проАДМ пациента, прежде чем принимать решение об изменении антибиотиков. Для пациентов с низкими концентрациями СФ-проАДМ необходимо рассматривать либо повышенную дозу, либо повышенную концентрацию того же антибиотика, прежде чем рассматривать изменения. Для пациентов с более высокими концентрациями СФ-проАДМ необходимо рассматривать более ранние изменения антибиотиков (т.е., в дни с 1 по 3, в отличие от дня 4).

Обсуждение примеров

Точная и быстрая оценка тяжести заболевания имеет решающее значение для начала наиболее подходящего лечения при первой же возможности. Действительно, задержанное или недостаточное лечение может приводить к общему ухудшению клинического состояния пациента, приводя к тому, что дальнейшее лечение станет менее эффективным и увеличит вероятность менее эффективного общего результата (8, 27). В результате было предложено множество биомаркеров и клинической шкал оценки тяжести для удовлетворения этой неудовлетворенной клинической потребности, при этом динамическая шкала оценки органной недостаточности (SOFA) в настоящее время выделена в качестве наиболее подходящего средства, в результате чего ей была отведена центральная роль в определении сепсиса-3 2016 года (4). В указанном вторичном анализе исследования SISPCT (26) впервые сравнили последовательные измерения стандартных биомаркеров и клинических шкал оценки, таких как уровень лактата, уровень прокальцитонина (ПКТ) и значение SOFA, с показателями маркера микроциркуляторной дисфункции, СФ-проАДМ, в большой популяции пациентов с тяжелым сепсисом и септическим шоком.

Наши результаты показывают, что первоначальное использование СФ-проАДМ в пределах первых 24 часов после постановки диагноза сепсиса приводило к наиболее сильной ассоциации с краткосрочной, среднесрочной и долгосрочной смертностью по сравнению со всеми другими биомаркерами или шкалами оценки. Предыдущие исследования в значительной степени подтверждают наши выводы (17, 28, 29), однако противоречивые результаты (30) могут быть частично объяснены меньшим размером анализируемой выборки, а также другими факторами, отмеченными в указанном исследовании, такими как виды микроорганизмов, происхождение инфекции и предыдущий хирургический анамнез, предшествующий развитию сепсиса, все из которых могут влиять на эффективность биомаркера, таким образом увеличивая потенциальную вариабельность результатов в небольших исследуемых популяциях. Кроме того, наше исследование также значительно подтверждает результаты предыдущего исследования (17), указывая на наиболее высокую эффективность СФ-проАДМ у пациентов с низкой и промежуточной тяжестью дисфункции органов. Действительно, Andaluz-Ojeda et al. (17) придают большое значение группе пациентов с низкими уровнями дисфункции органов, поскольку «эта группа представляет собой либо самое раннее проявление клинического течения сепсиса, и/либо менее тяжелую форму заболевания». Тем не менее, приемлемые показатели могут быть сохранены во всех группах тяжести в отношении прогнозирования смертности, что также имело место в обеих группах пациентов, определенных в соответствии с критериями сепсиса-3 и септического шока-3.

Анализ последовательных измерений, проведенных после начала сепсиса, позволил выявить определенные группы пациентов на основании степени тяжести заболевания. Определение пациентов с низким и высоким риском представляло значительный интерес в нашем анализе. Во многих ОРИТ потребность в койко-местах может периодически превышать доступность, что может привести к недостаточной сортировке, нормированию ресурсов и последующему снижению вероятности правильного поступления в ОРИТ (32-35). Следовательно, точная оценка пациентов с низким риском больничной смертности, которые могут претендовать на раннюю выписку из ОРИТ в послеоперационное отделение, может иметь существенную пользу. В каждой временной точке, измеряемой в рамках нашего исследования, уровень СФ-проАДМ мог определять более высокое количество пациентов с низкой степенью тяжести с наименьшими сроком пребывания в ОРИТ, больничной и 28-дневной показателями смертности. Дальнейший анализ группы пациентов с низкой степенью тяжести и отсутствием дополнительной специфической терапии для ОРИТ указывал на то, что дополнительные 4 дня пребывания в ОРИТ наблюдали в каждой временной точке после проведения измерений биомаркера. По сравнению с популяцией пациентов, которые были фактически выписаны в каждой временной точке, биомаркерный подход для точного определения пациентов с низкой степенью тяжести привел к снижению 28- и 90-дневных показателей смертности. Действительно, пациенты, которые были выписаны, имели ряд низких, промежуточных и высоких концентраций тяжести СФ-проАДМ, что впоследствии отразилось на более высокой смертности. В то же время неизвестно, требовалось ли еще нескольким пациентам в этой группе дальнейшее лечение в ОРИТ по поводу немикроциркуляторных, не угрожающих жизни проблем, или же эти койко-места в послеоперационном отделении были доступными. Тем не менее, такой биомаркерный подход для выписки из ОРИТ в дополнение к клинической оценке врача может улучшить правильную стратификацию пациента с сопутствующими клиническими преимуществами и потенциальной экономией затрат.

В противоположном случае, определение пациентов с высоким риском, которым может потребоваться раннее и целенаправленное лечение для предотвращения последующего клинического ухудшения, может иметь еще большую клиническую значимость. Значительную экономию затрат и сокращение применения антибиотиков уже наблюдали в соответствии с алгоритмом с применением ПКТ в исследовании SISPCT и других исследованиях (26, 36, 37), однако относительно высокие показатели смертности все еще можно наблюдать, даже когда значения ПКТ, по-видимому, постоянно снижаются. Наше исследование показало, что добавление СФ-проАДМ к модели снижения ПКТ в последующие дни пребывания в ОРИТ, позволяло определять группы пациентов с низким, средним и высоким риском, при этом повышение и снижение уровней тяжести СФ-проАДМ от исходного уровня до дня 1 обеспечивало чувствительный и ранний показатель в отношении эффективности лечения. Кроме того, прогнозирование потребности в будущей направленной очистке или экстренном хирургическом вмешательстве, а также восприимчивости к развитию новых инфекций может быть существенным преимуществом в инициировании дополнительных терапевтических и интервенционных стратегий, тем самым, предпринимая попытку предотвратить любые последующие клинические осложнения на ранней стадии. Потенциал нашего исследования включает тщательное изучение нескольких различных подгрупп с низкой и высокой тяжестью заболевания из базы данных рандомизированных исследований, с учетом возможных факторов, вызывающих затруднения, и включая наибольший размер выборки пациентов с сепсисом, характеризуемым как определениями SEPSIS 1 и 3, так и информацией о кинетике СФ-проАДМ.

В заключение следует отметить, что СФ-проАДМ превосходит другие биомаркеры и клинические шкалы оценки способности идентифицировать риск смертности у пациентов с сепсисом как при первоначальной постановке диагноза, так и в ходе лечения в ОРИТ. Соответственно, СФ-проАДМ может быть использован в качестве средства для определения пациентов с высокой тяжестью заболевания, которые могут нуждаться в альтернативных диагностических и терапевтических мероприятиях, и пациентов с низкой тяжестью заболевания, которые потенциально могут подлежать ранней выписке из ОРИТ в сочетании с отсутствием специфических для ОРИТ видов терапии.

Таблицы

ОРИТ: отделение реанимации и интенсивной терапии; ХОБЛ: хроническая обструктивная болезнь легких; СФ-проАДМ, среднерегионарный проаднеромедуллин; ПКТ: прокальцитонин; CRP: С-реактивный белок; SOFA: динамическая шкала оценки органной недостаточности; SAPS II: упрощенная шкала оценки острых функциональных изменений; APACHE II: шкала оценки острых и хронических функциональных изменений. Данные представлены в виде абсолютного количества и процентов в скобках, указывая на пропорцию выживших и невыживших пациентов через 28 дней.

N: количество; AUROC: площадь под кривой операционных характеристик приемника; LR у2: ОР: отношение рисков; IQR: интерквартальный диапазон. Все мультивариантные анализы были ассоциированы при р < 0,0001 с 28-дневной смертностью.

OP IQR [95% ДИ] указывает на отношение вероятностей в случае СФ-проАДМ в каждой двумерной и многомерной модели. 2 степени свободы в каждой двумерной модели по сравнению с II в каждой многомерной модели.

N: количество; AUROC: площадь под кривой операционных характеристик приемника; LR χ2: ОР: отношение рисков; IQR: интерквартильный диапазон.

СФ-проАДМ: среднерегионарный проадреномедуллин; SOFA: динамическая шкала оценки органной недостаточности

СФ-проАДМ: среднерегионарный проадреномедуллин; SAPS II: упрощенная шкала оценки острых функциональных изменений II

СФ-проАДМ: среднерегионарный проадреномедуллин; APACHE II: шкала оценки острых и хронических функциональных изменений II

СФ-проАДМ: среднерегионарный проадреномедуллин

СФ-проАДМ: среднерегионарный проадреномедуллин; DF: степени свободы

Отношение рисков для пациентов с * постоянно промежуточными по сравнению с низкими значениями; ** постоянно высокими по сравнению с промежуточными значениями***, постоянно высокими по сравнению с низкими значениями;

повышение от низких до промежуточных по сравнению с постоянно низкими значениями;

повышение от промежуточных до высоких по сравнению с постоянно промежуточными значениями;

снижение с высоких до промежуточных значения по сравнению с постоянно высокими значениями;

снижение с промежуточных до низких значений по сравнению с повышением от промежуточных до высоких значений.

На графиках Каплана-Мейера показаны либо отдельные подгруппы пациентов, либо сгруппированы подгруппы с повышением или снижением.

повышение от низких до промежуточных значений по сравнению с постоянно низкими значениями;

повышение от промежуточных до высоких значений по сравнению с постоянно низкими значениями;

снижение с высоких до промежуточных значений по сравнению с постоянно высокими значениями;

снижение с промежуточных значений до низких значения по сравнению с промежуточными значениями.

Значения AUROC СФ-проАДМ значимо выше, чем все другие параметры, кроме значения APACHE II при инфекции легочного происхождения.

Литературные источники

1. Martin GS, Mannino DM, Eaton S, Moss M. The epidemiology of sepsis in the United States from 1979 through 2000. N Engl J Med. Apr 17 2003;348(16): 1546-1554.

2. Kaukonen KM, Bailey M, Suzuki S, Pilcher D, Bellomo R. Mortality related to severe sepsis and septic shock among critically ill patients in Australia and New Zealand, 2000-2012. JAMA. Apr 02 2014;311(13):1308-1316.

3. Vincent JL, Sakr Y, Sprung CL, et al. Sepsis in European intensive care units: results of the SOAP study. Crit Care Med. Feb 2006;34(2):344-353.

4. Singer M, Deutschman CS, Seymour CW, et al. The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3). JAMA. Feb 23 2016;315(8):801-810.

5. Kopterides P, Siempos, II, Tsangaris I, Tsantes A, Armaganidis A. Procalcitonin-guided algorithms of antibiotic therapy in the intensive care unit: a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Crit Care Med. Nov 2010;38(11):2229-2241.

6. de Jong E, van Oers JA, Beishuizen A, et al. Efficacy and safety of procalcitonin guidance in reducing the duration of antibiotic treatment in critically ill patients: a randomised, controlled, open-label trial. Lancet Infect Dis. Jul 2016;16(7):819-827.

7. Harbarth S, Holeckova K, Froidevaux C, et al. Diagnostic value of procalcitonin, interleukin-6, and interleukin-8 in critically ill patients admitted with suspected sepsis. Am J Respir Crit Care Med. Aug 1 2001;164(3):396-402.

8. Andriolo BN, Andriolo RB, Salomao R, Atallah AN. Effectiveness and safety of procalcitonin evaluation for reducing mortality in adults with sepsis, severe sepsis or septic shock. Cochrane Database Syst Rev. Jan 18 2017;1:CD010959.

9. Temmesfeld-Wollbruck B, Brell B, David I, et al. Adrenomedullin reduces vascular hyperpermeability and improves survival in rat septic shock. Intensive Care Med. Apr 2007;33(4):703-710.

10. Muller-Redetzky HC, Will D, Hellwig K, et al. Mechanical ventilation drives pneumococcal pneumonia into lung injury and sepsis in mice: protection by adrenomedullin. Crit Care. 2014;18(2):R73.

11. Vallet B. Endothelial cell dysfunction and abnormal tissue perfusion. Crit Care Med. May 2002;30(5 Suppl):S229-234.

12. Gonzalez-Rey E, Chorny A, Varela N, Robledo G, Delgado M. Urocortin and adrenomedullin prevent lethal endotoxemia by down-regulating the inflammatory response. Am J Pathol. Jun 2006; 168(6): 1921-1930.

13. Carrizo GJ, Wu R, Cui X, Dwivedi AJ, Simms HH, Wang P. Adrenomedullin and adrenomedullin-binding protein-1 downregulate inflammatory cytokines and attenuate tissue injury after gut ischemia-reperfusion. Surgery. Feb 2007;141(2):245-253.

14. Brell B, Hippenstiel S, David I, et al. Adrenomedullin treatment abolishes ileal mucosal hypoperfusion induced by Staphylococcus aureus alpha-toxin~an intravital microscopic study on an isolated rat ileum. Crit Care Med. Dec 2005;33(12):2810-2016.

15. Brell B, Temmesfeld-Wollbruck B, Altzschner I, et al. Adrenomedullin reduces Staphylococcus aureus alpha-toxin-induced rat ileum microcirculatory damage. Crit Care Med. Apr 2005;33(4):819-826.

16. Vigue B, Leblanc PE, Moati F, et al. Mid-regional pro-adrenomedullin (MR-proADM), a marker of positive fluid balance in critically ill patients: results of the ENVOL study. Crit Care. Nov 09 2016;20(1):363.

17. Andaluz-Ojeda D, Cicuendez R, Calvo D, et al. Sustained value of pro adrenomedullin as mortality predictor in severe sepsis. J Infect. Jul 2015;71(1): 136-139.

18. Hartmann O, Schuetz P, Albrich WC, Anker SD, Mueller B, Schmidt T. Time-dependent Cox regression: serial measurement of the cardiovascular biomarker proadrenomedullin improves survival prediction in patients with lower respiratory tract infection. Int J Cardiol. Nov 29 2012; 161(3): 166-173.

19. Albrich WC, Dusemund F, Ruegger K, et al. Enhancement of CURB65 score with proadrenomedullin (CURB65-A) for outcome prediction in lower respiratory tract infections: derivation of a clinical algorithm. BMC Infect Dis. 2011;11:112.

20. Albrich WC, Ruegger K, Dusemund F, et al. Optimised patient transfer using an innovative multidisciplinary assessment in Kanton Aargau (OPTIMA I): an observational survey in lower respiratory tract infections. Swiss Med Wkly. 2011;141:wl3237.

21. Albrich WC, Ruegger K, Dusemund F, et al. Biomarker-enhanced triage in respiratory infections: a proof-of-concept feasibility trial. Eur Respir J. Oct 2013;42(4): 1064-1075.

22. Riera J, Senna A, Cubero M, Roman A, Rello J, Study Group Investigators TV. Primary Graft Dysfunction and Mortality Following Lung Transplantation: A Role for Proadrenomedullin Plasma Levels. Am J Transplant. Oct 13 2015.

23. Schoe A, Schippers EF, Struck J, et al. Postoperative pro-adrenomedullin levels predict mortality in thoracic surgery patients: comparison with Acute Physiology and Chronic Health Evaluation IV Score*. Crit Care Med. Feb 2015;43(2):373-381.

24. Tyagi A, Sethi AK, Girotra G, Mohta M. The microcirculation in sepsis. Indian J Anaesth. Jun 2009;53(3):281-293.

25. Hernandez G, Bruhn A, Irice C. Microcirculation in sepsis: new perspectives. Curr Vase Pharmacol. Mar 01 2013;11(2):161-169.

26. Bloos F, Trips E, Nierhaus A, et al. Effect of Sodium Selenite Administration and Procalcitonin-Guided Therapy on Mortality in Patients With Severe Sepsis or Septic Shock: A Randomized Clinical Trial. JAMA Intern Med. Sep 01 2016;176(9): 1266-1276.

27. Bloos F, Ruddel H, Thomas-Ruddel D, et al. Effect of a multifaceted educational intervention for anti-infectious measures on sepsis mortality: a cluster randomized trial. Intensive Care Med. May 02 2017.

28. Enguix-Armada A, Escobar-Conesa R, La Torre AG, De La Torre-Prados MV. Usefulness of several biomarkers in the management of septic patients: C-reactive protein, procalcitonin, presepsin and mid-regional pro-adrenomedullin. Clin Chem Lab Med. Jun 17 2015.

29. Christ-Crain M, Morgenthaler NG, Struck J, Harbarth S, Bergmann A, Muller B. Mid-regional pro-adrenomedullin as a prognostic marker in sepsis: an observational study. Crit Care. 2005;9(6):R816-824.

30. Suberviola B, Castellanos-Ortega A, Ruiz Ruiz A, Lopez-Hoyos M, Santibanez M. Hospital mortality prognostication in sepsis using the new biomarkers suPAR and proADM in a single determination on ICU admission. Intensive Care Med. Nov 2013;39(11):1945-1952.

31. Gillmann HJ, Meinders A, Larmann J, et al. Adrenomedullin Is Associated With Surgical Trauma and Impaired Renal Function in Vascular Surgery Patients. J Intensive Care Med. Jan 01 2017:885066616689554.

32. Garrouste-Orgeas M, Montuclard L, Timsit JF, Misset B, Christias M, Carlet J. Triaging patients to the ICU: a pilot study of factors influencing admission decisions and patient outcomes. Intensive Care Med. May 2003;29(5):774-781.

33. Garrouste-Orgeas M, Montuclard L, Timsit JF, et al. Predictors of intensive care unit refusal in French intensive care units: a multiple-center study. Crit Care Med. Apr 2005;33(4):750-755.

34. Mery E, Kahn JM. Does space make waste? The influence of ICU bed capacity on admission decisions. Crit Care. May 08 2013;17(3):315.

35. Orsini J, Blaak C, Yeh A, et al. Triage of Patients Consulted for ICU Admission During Times of ICU-Bed Shortage. J Clin Med Res. Dec 2014;6(6):463-468.

36. Kip MM, Kusters R, MJ IJ, Steuten LM. A PCT algorithm for discontinuation of antibiotic therapy is a cost-effective way to reduce antibiotic exposure in adult intensive care patients with sepsis. J Med Econ. 2015; 18(11):944-953.

37. Wilke MH, Grube RF, Bodmann KF. The use of a standardized PCT-algorithm reduces costs in intensive care in septic patients - a DRG-based simulation model. Eur J Med Res. Dec 02 2011;16(12):543-548.

Claims

1. Способ прогноза последующего нежелательного явления в состоянии здоровья пациента, включающий

предоставление образца от указанного пациента, при этом пациент был диагностирован как критически больной и было начато медицинское лечение, при этом образец был выделен из организма пациента после постановки диагноза и начала лечения,

определение уровня проадреномедуллина (проАДМ) или его фрагмента (фрагментов) в указанном образце,

при этом низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента (фрагментов), определенный в образце, составляющий менее 4 нмоль/л, указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, или

при этом высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента (фрагментов), определенный в образце, составляющий более 6,5 нмоль/л, указывает на последующее нежелательное явление.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанный образец выделяют из организма указанного пациента в пределах 10 дней после указанной постановки диагноза и начала лечения.

3. Способ по любому из пп. 1 или 2, отличающийся тем, что критически больной пациент представляет собой пациента с инфекционным заболеванием, пациента с диагностированным инфекционным заболеванием и одной или более имеющимися органными недостаточностями, пациента с диагностированным сепсисом или септическим шоком, при этом пациент может иметь травму и/или подвергаться хирургическому вмешательству.

4. Способ по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что нежелательное явление в состоянии здоровья указанного пациента представляет собой смерть в пределах 28 дней или смерть в пределах 90 дней после постановки диагноза и начала лечения, новую инфекцию, органную недостаточность и/или ухудшение клинических симптомов, требующих направленной процедуры очистки, переливания препаратов крови, инфузии коллоидов, неотложной хирургической помощи, инвазивной механической вентиляции легких и/или заместительной почечной или печеночной терапии.

5. Способ по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что лечение, получаемое пациентом, включает в себя один или более из видов антибиотикотерапии, инвазивную механическую вентиляцию легких, неинвазивную механическую вентиляцию легких, заместительную почечную терапию, применение вазопрессорных средств, инфузионную терапию, экстракорпоральную очистку крови и/или защиту органов.

6. Способ по любому из пп. 1-5, отличающийся тем, что указанный образец выбирают из группы, состоящей из образца крови, образца сыворотки крови, образца плазмы крови и/или образца мочи.

7. Способ по любому из пп. 1-6, отличающийся тем, что определение уровня проАДМ или его фрагмента (фрагментов) включает определение уровня среднерегионарного проадреномедуллина (СФ-проАДМ) в образце.

8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что пациенты представляют собой пациентов отделения реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ), при этом

низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента (фрагментов) указывает на выписку указанного пациента из ОРИТ или

высокий уровень тяжести проАДМ или фрагмента (фрагментов) указывает на модификацию лечения пациента в ОРИТ.

9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что низкий уровень тяжести проАДМ составляет менее 2,25 нмоль/л и указанный образец выделяют из организма пациента через 1 день или более после указанной постановки диагноза и начала лечения.

10. Способ по любому из пп. 1-9, включающий дополнительно определение уровня ПКТ или его фрагмента (фрагментов) в образце, выделенном из организма пациента.

11. Способ по любому из пп. 1-10, включающий дополнительно:

определение уровня ПКТ или фрагмента (фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец выделяют в момент или до временной точки постановки диагноза и начала лечения,

определение уровня ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце, соответствующем образцу по п. 1, выделенном из организма указанного пациента в пределах 10 дней после постановки указанного диагноза и начала лечения, и

определение того, является ли разница в уровне ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце очевидной по сравнению с уровнем ПКТ или его фрагментом (фрагментами) в первом образце.

12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что

более низкий уровень ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом и низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента (фрагментов), при этом низкий уровень тяжести составляет меньше 4 нмоль/л, указывают на отсутствие последующего нежелательного явления или

более низкий уровень ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом и высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента (фрагментов), при этом высокий уровень тяжести составляет больше 6,5 нмоль/л, указывают на последующее нежелательное явление.

13. Способ по п. 11, отличающийся тем, что

повышенный уровень ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом и низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента (фрагментов), при этом низкий уровень тяжести составляет меньше 4 нмоль/л, указывают на отсутствие последующего нежелательного явления или

повышенный уровень ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом и высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента (фрагментов), при этом высокий уровень тяжести составляет больше 6,5 нмоль/л, указывают на последующее нежелательное явление.

14. Способ по любому из пп. 1-13, включающий дополнительно

определение уровня проАДМ или фрагмента (фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец выделяют в или до момента постановки диагноза и начала лечения, и

определение уровня проАДМ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце, выделенном из организма указанного пациента, при этом указанный второй образец был выделен после первого образца и после временной точки постановки диагноза и в пределах 10 дней после выделения первого образца, и

определение того, является ли разница в уровне проАДМ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с уровнем проАДМ или его фрагмента (фрагментов) в первом образце очевидной.

15. Способ по любому из пп. 1-14, включающий дополнительно

определение уровня проАДМ или его фрагмента (фрагментов) и необязательно ПКТ или его фрагмента (фрагментов) в первом образце, выделенном из организма пациента, при этом указанный первый образец выделяют в момент или до временной точки постановки диагноза и начала лечения, и

определение уровня проАДМ или его фрагмента (фрагментов) и необязательно ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце, соответствующем образцу по п. 1, выделенном из организма указанного пациента в пределах 10 дней после постановки указанного диагноза и начала лечения, и

определение разницы в уровне проАДМ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с уровнем проАДМ или его фрагментом (фрагментами) в первом образце.

16. Способ по п. 15, отличающийся тем, что повышенный уровень проАДМ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом указывает на последующее нежелательное явление.

17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что

повышенный уровень проАДМ или его фрагмента (фрагментов) и повышенный уровень ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом указывают на последующее нежелательное явление и/или

повышенный уровень проАДМ или его фрагмента (фрагментов) и более низкий уровень ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом указывают на последующее нежелательное явление.

18. Способ по п. 10, отличающийся тем, что пациенты представляют собой пациентов отделения реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ), и при этом:

более низкий уровень ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом и низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента (фрагментов), при этом низкий уровень тяжести составляет меньше 4 нмоль/л, указывают на выписку указанного пациента из ОРИТ;

более низкий уровень ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом и высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента (фрагментов), при этом высокий уровень тяжести составляет больше 6,5 нмоль/л, указывают на необходимость модификации лечения пациента в ОРИТ;

повышенный уровень ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом и низкий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(фрагментов), при этом низкий уровень тяжести составляет меньше 4 нмоль/л, указывают на выписку указанного пациента из ОРИТ; или

повышенный уровень ПКТ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом и высокий уровень тяжести проАДМ или его фрагмента (фрагментов), при этом высокий уровень тяжести составляет больше 6,5 нмоль/л, указывают на необходимость модификации лечения пациента в ОРИТ.

19. Набор для осуществления способа по любому из пп. 1-18, содержащий:

реагенты для детекции для определения уровня проАДМ или его фрагмента (фрагментов) и необязательно для определения уровня ПКТ или его фрагмента (фрагментов) в образце, полученном от субъекта, при этом реагентами для детекции являются антитела, специфические для соответствующих проАДМ и ПКТ, и

референтные уровни, соответствующие высоким и низким уровням тяжести проАДМ, при этом низкий уровень тяжести составляет менее 4 нмоль/л, а высокий уровень тяжести составляет более 6,5 нмоль/л, и необязательно уровни ПКТ, при этом указанные референтные уровни хранятся на машиночитаемом носителе и/или используются в форме компьютерного выполняемого кода, выполненного с возможностью сравнения определенных уровней проАДМ или его фрагмента (фрагментов) и необязательно определенных уровней ПКТ или его фрагмента (фрагментов) с указанными референтными уровнями.