RU2768194C1 - Способ оценки степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов - Google Patents
Способ оценки степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2768194C1 RU2768194C1 RU2021122927A RU2021122927A RU2768194C1 RU 2768194 C1 RU2768194 C1 RU 2768194C1 RU 2021122927 A RU2021122927 A RU 2021122927A RU 2021122927 A RU2021122927 A RU 2021122927A RU 2768194 C1 RU2768194 C1 RU 2768194C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- phosphatidylserine
- externalization
- erythrocyte
- erythrocytes
- erythrocyte membranes
- Prior art date
Links
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 37
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 title claims abstract description 36
- 210000003617 erythrocyte membrane Anatomy 0.000 title claims abstract description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 39
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 14
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- ICAKDTKJOYSXGC-UHFFFAOYSA-K lanthanum(iii) chloride Chemical compound Cl[La](Cl)Cl ICAKDTKJOYSXGC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 7
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 abstract description 12
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 229910052746 lanthanum Inorganic materials 0.000 description 4
- FZLIPJUXYLNCLC-UHFFFAOYSA-N lanthanum atom Chemical compound [La] FZLIPJUXYLNCLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 3
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 3
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 2
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 2
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 238000007781 pre-processing Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- -1 anionic phospholipid Chemical class 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/02—Devices for withdrawing samples
- G01N1/10—Devices for withdrawing samples in the liquid or fluent state
- G01N1/20—Devices for withdrawing samples in the liquid or fluent state for flowing or falling materials
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pathology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hydrology & Water Resources (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к лабораторным методам исследования. Способ определения показателя экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов включает фиксацию эритроцитов глутаровым альдегидом в течение 30 мин. Затем один раз отмывают забуференным физиологическим раствором с рН 7.4, центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин. Добавляют хлористый лантан в финальной концентрации 15-25 мкМ, перемешивают. Агрегаты эритроцитов помещают в поле зрения светового микроскопа х200. С помощью цифровой камеры получают изображение, которое обрабатывают и анализируют с применением алгоритмов компьютерного зрения. Показатель экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов определяют как отношение площади агрегированных к площади не агрегированных клеток. Изобретение обеспечивает автоматизацию способа определения степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов, повышающую точность оценки их агрегации. 2 ил., 2 пр.
Description
Предлагаемое изобретение относится к биологии и медицине, а именно к лабораторным методам исследования и может использоваться для оценки степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов.
Известно, что в эритроцитах фосфолипиды расположены асимметрично. Фосфатидилхолин и сфингомиелин локализованы на внешней половине липидного бислоя, фосфатидилэтаноламин на внешней и внутренней половине мембраны (Op den Kamp J.A. Annu. Rev. Biochem.1979. Vol. 48. P.47-71). Отрицательно заряженный фосфолипид фосфатидилсерин локализован исключительно на внутренней стороне липидного бислоя (Zwaal R.F.A., Schroit A.J. Blood.1997. Vol. 89. P.1121-1132).
Выход фосфатидилсерина на поверхность мембран клеток крови при многих патологических состояниях ускоряет свертывание крови, приводит к тромботическим состояниям. Нарушение асимметричного расположения фосфолипидов в эритроцитах приводит к их апоптозу и исчезновению из кровотока (Zwaal R.F.A, Comfurius P., Bevers E.V. Cell.Mol.Life Sci. 2005. Vol. 62. P. 971-988).
Одним из ранних признаков апоптоза является экстернализация на поверхность плазматических мембран анионного фосфолипида – фосфатидилсерина, который, как известно, может регулировать поверхностный заряд и локализацию белков мембраны (Yeung T., Gilbert G.E., Shi J., Silvius J., Kapus A., Grinstein S. Science.2008. Vol. 319. P. 210-213).
Известен способ оценки экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов, который включает добавление к эритроцитам флуоресцентного белка аннексина V и последующее измерение флуоресценции с помощью проточного цитофлуориметра (Kuypers F.A., Lewis R.A., Hua M. et al. Blood. 1996.Vol. 87. P. 1179-1183). Аннексин V имеет высокое сродство для отрицательно заряженного фосфатидилсерина. Однако он связывается с фосфатидилсерином только в присутствии высоких концентраций кальция (2.5 мМ).
Для определения экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов требуется дорогостоящее оборудование (проточный цитофлуориметр) и дорогие флуоресцирующие реактивы.
Лантан, являясь трехвалентным катионом, также имеет высокое сродство к фосфатидилсерину и в низких концентрациях избирательно связывается с отрицательно заряженным фосфатидилсерином (Bentz J., Alford O., Cohen J., Duzgunes N. Biophys. J. 1988. Vol.5. P. 593-607).
Принцип предлагаемого способа оценки степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов основан на электростатическом взаимодействии положительно заряженного трехвалентного лантана (в низких концентрациях) с отрицательным фосфатидилсерином. В результате взаимодействия лантана с фосфатидилсерином происходит агрегация эритроцитов. Чем больше фосфатидилсерина на поверхности мембран эрироцитов, тем сильнее степень агрегации клеток.
В качестве прототипа выбран способ оценки степени присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов (Шереметьев Ю.А., Успенский А.Н. Способ оценки степени присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов. Патент RU 2701520. 2019), который включает фиксацию эритроцитов с помощью раствора глутарового альдегида в течение 30 минут, их отмывание забуференным физиологическим раствором, помещение в кювету агрегометра, добавление хлористого лантана в финальных концентрациях 15-25 мкМ, включение перемешивающего устройства, перемешивание в кювете агрегометра в течение 30 с, остановку перемешивания, процесс оседания агрегатов эритроцитов регистрирует в виде агрегатограммы, о степени присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов судят по максимальной амплитуде агрегатограммы.
Однако этот способ требует наличия высокочувствительного агрегометра. Кроме этого, существенным недостатком способа является то, что для процесса оседания эритроцитов требуется сильная агрегация клеток. Слабая агрегация эритроцитов не приводит к быстрому оседанию эритроцитов.
Этих недостатков лишен предлагаемый способ оценки степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов.
Задача предполагаемого изобретения - совершенствование способа.
Техническим результатом является автоматизация способа определения степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов, повышающая точность оценки их агрегации.
Технический результат достигается за счет того, что в способе оценки степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов, включающем фиксацию эритроцитов глутаровым альдегидом, для оценки степени экстернализации фосфатидилсерина эритроциты фиксируют глутаровым альдегидом в течение 30 минут, затем один раз отмывают забуференным физиологическим раствором с рН 7.4, центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 минут, добавляют хлористый лантан в финальной концентрации 15-25 мкМ, перемешивают, агрегаты эритроцитов помещают в поле зрения светового микроскопа (х200) и с помощью цифровой камеры получают изображение, которое обрабатывают и анализируют с применением алгоритмов компьютерного зрения, о степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов судят по показателю, равному отношению площади агрегированных к площади не агрегированных клеток.
Способ осуществляется следующим образом. Эритроциты фиксируют в 0.25% растворе глутарового альдегида, приготовленного на фосфатном буфере, в течение 30 минут при комнатной температуре. После фиксации эритроциты один раз отмывают забуференным физиологическим раствором (10 мМ трис-НCI, 150 мМ NaCI, рН 7.4) с помощью центрифугирования при 3000 об/мин в течение 5 минут. К 0.9 мл 0.5 % суспензии фиксированных эритроцитов в забуференном физиологическом растворе добавляют 0.1 мл хлористого лантана в финальных концентрациях 15-25 мкМ, перемешивают, агрегаты эритроцитов помещают в поле зрения светового микроскопа (х200) и с помощью цифровой камеры получают изображение, которое обрабатывают и анализируют с применением алгоритмов компьютерного зрения, о степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов судят по показателю агрегации, равному отношению площади агрегированных к площади не агрегированных клеток.
Автоматизированный анализ изображения включает в себя предобработку изображения для устранения шумов, бинаризацию изображения для поиска объектов, определение границ найденных объектов, классификацию объектов на два класса –одиночные клетки (эритроциты) и агрегаты, а также расчет значения показателя, отражающего степень агрегации эритроцитов.
На этапе предобработки изображения для устранения импульсного шума применяется медианный фильтр и выполняется адаптивное выравнивание гистограммы для повышения контрастности и качества изображения.
Для бинаризации изображения применяется метод Оцу. В связи с цветовой неоднородностью искомых объектов в результате бинаризации изображения внутри объектов образуются разрывы, снижающие качество распознавания объектов на изображении. С целью устранения разрывов и улучшения качества бинаризации для каждого пикселя изображения исследуется окрестность в форме круга, рассчитывается процентное отношение черных и белых пикселей в этой окрестности. Если полученное значение отношения больше порогового значения, равного 80%, то считается, что найден объект, внутри которого есть разрыв, и все пиксели внутри исследуемой окрестности закрашиваются черным цветом.
Для выделения и визуализации найденных объектов на изображении выполняется построение контуров связных областей, в которых у каждого пикселя имеется минимум один сосед, принадлежащий данному множеству пикселей.
Для классификации найденных объектов на одиночные клетки и агрегаты выполняется следующее: определяются центры масс каждого объекта, рассчитываются расстояния от центра масс до каждой точки контура объекта и вычисляются отклонения полученных расстояний от их среднего значения. Если отклонение близко к 0, объект считается одиночным эритроцитом (объект в форме круга – форме одиночного эритроцита), в противном случае – агрегатом клеток (объект сложной формы).
Рассчитывается значение показателя, характеризующего степень агрегации эритроцитов, определяемое отношением площади агрегированных клеток к площади одиночных клеток.
По показателю степени агрегации эритроцитов судят о степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов. Связано это с тем, что, чем больше фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов, тем больше отрицательных участков для связывания положительно заряженного лантана. Результатом этого взаимодействия является агрегация эритроцитов. Чем сильнее агрегация клеток, тем большее количество фосфатидилсерина появилось на поверхности мембран эритроцитов.
Известно, что инкубация отмытых эритроцитов при 370°С в течение 24 ч приводит к экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов (Klarl B.A. et al. Am.J. Physiol. Cell Physiol. 2006. Vol. 290.P.244-253).
Пример 1. Нормальные эритроциты фиксировали глутаровым альдегидом. К 0.9 мл 0.5% суспензии нормальных фиксированных эритроцитов добавляли 0.1 мл хлористого лантана в финальной концентрации 20 мкМ, перемешивали, агрегаты эритроцитов помещали в поле зрения светового микроскопа (х200) и с помощью цифровой камеры получали изображение, которое обрабатывали с применением алгоритмов компьютерного зрения (фиг. 1). Показатель экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран нормальных эритроцитов составил 2.1.
Пример 2. Суспензию эритроцитов инкубировали при 37°С в течение 24 ч. После этого эритроциты фиксировали глутаровым альдегидом. К 0.9 мл 0.5% суспензии фиксированных эритроцитов добавляли 0.1 мл хлористого лантана в финальной концентрации 20 мкМ, перемешивали, агрегаты эритроцитов помещали в поле зрения светового микроскопа (х200) и с помощью цифровой камеры получали изображение, которое обрабатывали с применением алгоритмов компьютерного зрения (фиг. 2). Показатель экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов составил 11. Содержание фосфатилсерина эритроцитов на поверхности мембран увеличилось в 5 раз по сравнению с контролем.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет определить степень экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов человека и может найти применение для изучения эритроцитов при различных патологических состояниях, в опытах in vitro по изучению механизмов эриптоза.
Claims (1)
- Способ определения показателя экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов, включающий фиксацию эритроцитов глутаровым альдегидом, отличающийся тем, что для определения показателя экстернализации фосфатидилсерина эритроциты фиксируют глутаровым альдегидом в течение 30 мин, затем один раз отмывают забуференным физиологическим раствором с рН 7.4, центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин, добавляют хлористый лантан в финальной концентрации 15-25 мкМ, перемешивают, агрегаты эритроцитов помещают в поле зрения светового микроскопа х200 и с помощью цифровой камеры получают изображение, которое обрабатывают и анализируют с применением алгоритмов компьютерного зрения, а показатель экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов определяют как отношение площади агрегированных к площади не агрегированных клеток.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021122927A RU2768194C1 (ru) | 2021-08-02 | 2021-08-02 | Способ оценки степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021122927A RU2768194C1 (ru) | 2021-08-02 | 2021-08-02 | Способ оценки степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2768194C1 true RU2768194C1 (ru) | 2022-03-23 |
Family
ID=80819281
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021122927A RU2768194C1 (ru) | 2021-08-02 | 2021-08-02 | Способ оценки степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2768194C1 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2665171C2 (ru) * | 2016-08-15 | 2018-08-28 | Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Нижегородская Государственная Сельскохозяйственная Академия" (ФГБОУ ВО НГСХА) | Способ оценки присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов |
| RU2701520C1 (ru) * | 2019-05-06 | 2019-09-27 | Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Нижегородская Государственная Сельскохозяйственная Академия" (ФГБОУ ВО НГСХА) | Способ оценки степени присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов |
| RU2731507C1 (ru) * | 2013-03-15 | 2020-09-03 | Гладиатор Байосайенсиз, Инк. | Gla домены в качестве нацеливающих агентов |
-
2021
- 2021-08-02 RU RU2021122927A patent/RU2768194C1/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2731507C1 (ru) * | 2013-03-15 | 2020-09-03 | Гладиатор Байосайенсиз, Инк. | Gla домены в качестве нацеливающих агентов |
| RU2665171C2 (ru) * | 2016-08-15 | 2018-08-28 | Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Нижегородская Государственная Сельскохозяйственная Академия" (ФГБОУ ВО НГСХА) | Способ оценки присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов |
| RU2701520C1 (ru) * | 2019-05-06 | 2019-09-27 | Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Нижегородская Государственная Сельскохозяйственная Академия" (ФГБОУ ВО НГСХА) | Способ оценки степени присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| J. KAPTY et al. Evaluation of Phosphatidylserine-Binding Peptides Targeting Apoptotic Cells / Journal of Biomolecular Screening, 2012, 17 (10), pages 1293- 1301. * |
| K. BALASUBRAMANIAN et al. Regulated externalization of phosphatidylserine at the cell surface: implications for apoptosis / THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 2017, vol. 282, N 25, pages 18357-18364. * |
| K. BALASUBRAMANIAN et al. Regulated externalization of phosphatidylserine at the cell surface: implications for apoptosis / THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 2017, vol. 282, N 25, pages 18357-18364. J. KAPTY et al. Evaluation of Phosphatidylserine-Binding Peptides Targeting Apoptotic Cells / Journal of Biomolecular Screening, 2012, 17 (10), pages 1293- 1301. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102149318B1 (ko) | 소량 응집 검정 | |
| Arraud et al. | A simple flow cytometry method improves the detection of phosphatidylserine‐exposing extracellular vesicles | |
| Larson et al. | Calcium‐phosphate microprecipitates mimic microparticles when examined with flow cytometry | |
| US20250334579A1 (en) | Nanoplasmonic quantification of tumor-derived extracellular vesicles in plasma microsamples for detection and treatment monitoring | |
| CN109596841B (zh) | 外泌体TβRII蛋白作为标志物在制备乳腺癌检测试剂盒中的应用 | |
| JP2001004625A (ja) | 血液の分析方法および血液分析キット | |
| NO162094B (no) | Fremgangsm te for bestemmelse av lavdensitetslipoprldl) og reagens for gjennomfoering av den. | |
| CN110376387A (zh) | 血液crp质控物及其质控方法 | |
| WO2002025280A1 (en) | Method for monitoring resting and activated platelets in unfixed blood samples | |
| JP2020535426A (ja) | デジタルホログラフィック顕微鏡検査を用いた特異的マラリア検出 | |
| CN114487399A (zh) | 一种粒径与表面标志物联合分析的方法 | |
| US20160327555A1 (en) | Method for avoiding influence of endogenous lipoprotein and reagent | |
| Martel et al. | Serology for automated cytotoxicity assays: contrast fluorescence test | |
| JP7444386B2 (ja) | ヒト尿からのマイクロベシクルの分離方法及び分析方法 | |
| RU2768194C1 (ru) | Способ оценки степени экстернализации фосфатидилсерина на поверхность мембран эритроцитов | |
| WO2016125243A1 (ja) | エクソソーム測定方法及びエクソソーム抽出方法 | |
| RU2547573C2 (ru) | Способ оценки присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов | |
| RU2665171C2 (ru) | Способ оценки присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов | |
| RU2701520C1 (ru) | Способ оценки степени присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов | |
| Koulov et al. | Biophysical studies of a synthetic mimic of the apoptosis‐detecting protein annexin v | |
| Shtam et al. | Aggregation by lectins as an approach for exosome isolation from biological fluids: Validation for proteomic studies | |
| Ginevri et al. | Peroxidative damage of the erythrocyte membrane in children with nephrotic syndrome | |
| WO2009118551A1 (en) | Ultrasound method for analysis of blood for blood typing, antibody detection and flow cytometry | |
| EP4377671A1 (en) | Detection of cell aggregates using quantitative phase-contrast microscopy | |
| Jones et al. | Detection of proteins in human amniotic fluid using two-dimensional gel electrophoresis |