RU2760499C9 - Способ прогнозирования неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями эмбриона - Google Patents
Способ прогнозирования неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями эмбриона Download PDFInfo
- Publication number
- RU2760499C9 RU2760499C9 RU2021106870A RU2021106870A RU2760499C9 RU 2760499 C9 RU2760499 C9 RU 2760499C9 RU 2021106870 A RU2021106870 A RU 2021106870A RU 2021106870 A RU2021106870 A RU 2021106870A RU 2760499 C9 RU2760499 C9 RU 2760499C9
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- embryo
- pregnancy
- patient
- partner
- pregnancy associated
- Prior art date
Links
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 title claims abstract description 65
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 title claims abstract description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 36
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 title abstract description 24
- 206010008805 Chromosomal abnormalities Diseases 0.000 title abstract description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 15
- 230000008826 genomic mutation Effects 0.000 claims abstract description 7
- 210000002229 urogenital system Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 206010001584 alcohol abuse Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 208000025746 alcohol use disease Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 230000035606 childbirth Effects 0.000 claims abstract description 3
- 101000587058 Homo sapiens Methylenetetrahydrofolate reductase Proteins 0.000 claims abstract 3
- 102100029684 Methylenetetrahydrofolate reductase Human genes 0.000 claims abstract 3
- 208000002312 Teratozoospermia Diseases 0.000 claims description 4
- 206010067477 Cytogenetic abnormality Diseases 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 21
- 208000015994 miscarriage Diseases 0.000 description 21
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 21
- 231100000005 chromosome aberration Toxicity 0.000 description 11
- 101150019913 MTHFR gene Proteins 0.000 description 6
- 108010030837 Methylenetetrahydrofolate Reductase (NADPH2) Proteins 0.000 description 6
- 102000005954 Methylenetetrahydrofolate Reductase (NADPH2) Human genes 0.000 description 6
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 206010055690 Foetal death Diseases 0.000 description 5
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000008899 Habitual abortion Diseases 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 208000034213 recurrent susceptibility to 1 pregnancy loss Diseases 0.000 description 3
- 206010067162 Asthenospermia Diseases 0.000 description 2
- 208000007799 Asthenozoospermia Diseases 0.000 description 2
- 101150106671 COMT gene Proteins 0.000 description 2
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 2
- 208000030373 chronic endometritis Diseases 0.000 description 2
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 231100000562 fetal loss Toxicity 0.000 description 2
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 2
- 229940014144 folate Drugs 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000021121 meiosis Effects 0.000 description 2
- 230000002175 menstrual effect Effects 0.000 description 2
- 208000012978 nondisjunction Diseases 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 2
- 201000009032 substance abuse Diseases 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012549 training Methods 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 230000036266 weeks of gestation Effects 0.000 description 2
- QDZOEBFLNHCSSF-PFFBOGFISA-N (2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-1-[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-1-[(2R)-2-amino-5-carbamimidamidopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-N-[(2R)-1-[[(2S)-1-[[(2R)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]pentanediamide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N)C1=CC=CC=C1 QDZOEBFLNHCSSF-PFFBOGFISA-N 0.000 description 1
- 101000840545 Bacillus thuringiensis L-isoleucine-4-hydroxylase Proteins 0.000 description 1
- 206010061452 Complication of pregnancy Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 230000007067 DNA methylation Effects 0.000 description 1
- 201000010374 Down Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- 101001037256 Homo sapiens Indoleamine 2,3-dioxygenase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000763537 Homo sapiens Toll-like receptor 10 Proteins 0.000 description 1
- 101000831567 Homo sapiens Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000033892 Hyperhomocysteinemia Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102100040061 Indoleamine 2,3-dioxygenase 1 Human genes 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 208000035752 Live birth Diseases 0.000 description 1
- WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N Malondialdehyde Chemical compound O=CCC=O WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010073310 Occupational exposures Diseases 0.000 description 1
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 1
- 102100024304 Protachykinin-1 Human genes 0.000 description 1
- 101001037255 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) Indoleamine 2,3-dioxygenase Proteins 0.000 description 1
- 101800003906 Substance P Proteins 0.000 description 1
- 102100027009 Toll-like receptor 10 Human genes 0.000 description 1
- 102100024333 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 208000037280 Trisomy Diseases 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 1
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 206010003883 azoospermia Diseases 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000008711 chromosomal rearrangement Effects 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 description 1
- 230000002650 habitual effect Effects 0.000 description 1
- 230000003225 hyperhomocysteinemia Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 229940118019 malondialdehyde Drugs 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 238000013178 mathematical model Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000009247 menarche Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003533 narcotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 231100000675 occupational exposure Toxicity 0.000 description 1
- 208000008634 oligospermia Diseases 0.000 description 1
- 230000036616 oligospermia Effects 0.000 description 1
- 231100000528 oligospermia Toxicity 0.000 description 1
- 230000008775 paternal effect Effects 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012502 risk assessment Methods 0.000 description 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 238000009612 semen analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 230000019100 sperm motility Effects 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 210000001325 yolk sac Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B5/00—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons
- A61B5/145—Measuring characteristics of blood in vivo, e.g. gas concentration or pH-value ; Measuring characteristics of body fluids or tissues, e.g. interstitial fluid or cerebral tissue
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
- C12Q1/686—Polymerase chain reaction [PCR]
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Surgery (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и касается способа прогнозирования неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями эмбриона, заключающегося в том, что определяют анамнестические данные женщины и мужчины, планирующих деторождение: возраст пациентки и ее партнера, наличие у пациентки хронических заболеваний мочеполовой системы, злоупотребление алкоголем партнером, осуществляют анализ полиморфизма MTHFR С677Т у женщины и параметров спермограммы у мужчины, после чего вычисляют прогностический индекс Y; и при Y>0 прогнозируют высокий риск неразвивающейся беременности, ассоциированной с ХА у эмбриона, а при Y<0 - низкий риск неразвивающейся беременности, связанной с геномными мутациями у эмбриона. Изобретение обеспечивает повышение эффективности определения риска неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями у эмбриона. 1 ил., 3 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и касается способа прогнозирования неразвивающейся беременности, ассоциированной с наличием хромосомных аномалий у эмбриона.
От 10 до 20% клинически диагностируемых беременностей прерывается самопроизвольно, и невынашиванием беременности, в том числе неразвивающейся (НБ) представляет самое частое осложнение беременности. Этот вопрос давно уже вышел за рамки медицинских проблем. Есть все основания сегодня считать проблему невынашивания беременности серьезной социально-демографической проблемой.
Несмотря на большое число исследований, вопрос об этиологии, патогенезе и прогнозировании невынашивания беременности находится в стадии научного поиска [1, 20]. На протяжении последних 40-50 лет основной причиной невынашивания беременности ранних сроков считают хромосомные аберрации (ХА), которые регистрируются у 50-70% аборту сов ранних стадий развития [1, 5]. При этом традиционно геномные мутации преимущественно связывают со спорадическим невынашиванием беременности [1, 13]. Однако в последние годы начали появляться сообщения о том, что при сравнительном анализе хромосомного набора у эмбриона или плода при спорадическом и привычном невынашивании беременности, достоверной разницы по частоте встречаемости хромосомной патологии не получено. Ряд авторов утверждает, что это самая частая причина невынашивания беременности в первом триместре, независимо от акушерского анамнеза пациентки [4, 15, 22]. Некоторые исследователи выдвигают гипотезу, что по каким-то причинам у части пациенток с собственным нормальным кариотипом имеется больший риск нерасхождения хромосом в процессе мейоза или митоза, чем у других женщин того же возраста и сходными клиническими характеристиками. Причем в данной ситуации при каждом случае неразвивающейся беременности в продуктах зачатия могут быть обнаружены совершенно разные хромосомные перестройки [3, 14].
Недостаточная изученность причин формирования геномных мутаций (хромосомных аберраций) у эмбриона затрудняет возможность целенаправленного прогнозирования невынашивания беременности у здоровых женщин. Известно, что риск ХА у эмбриона возрастает с возрастом матери [20]. Grande и др. (2012) показали, что женский возраст (старше 35 лет) был единственным статистически значимым предиктором риска хромосомных аномалий при спорадической потере беременности и привычном невынашивании беременности [16]. Однако и среди молодых женщин с нормальным кариотипом частота неразвивающейся беременности достаточно высока, и ХА эмбриона при этом выявляются более чем в половине случаев [4, 5].
В последние годы в генезе невынашивания беременности отмечено возрастание роли «мужского» фактора. Например, Ruixue et al. (2013) провели исследование спермограмм мужчин из пар с неразвивающейся беременностью в анамнезе и здоровых мужчин и выявили, что в первой группе показатели были значительно хуже: сниженная жизнеспособность, патологическая морфология и подвижность сперматозоидов [21]. Несколько групп исследователей независимо друг от друга сделали вывод, что в парах с НБ качество спермы, профессиональные вредности и образ жизни супруга (курение, употребление алкоголя и легких наркотических препаратов) обязательно следует учитывать [12, 18, 19].
Ряд авторов говорят о возможной генетической предрасположенности к невынашиванию беременности у женщины. Например, в научной литературе отмечено, что полиморфизмы в гене MTHFR (метилентетрагидрофолат редуктазы) ассоциированы с геномными мутациями у плода и эмбриона, и, следовательно, с неразвивающейся беременностью [17].
Безусловно, важную роль в развитии невынашивания беременности играют и хронические инфекции, особенно инфекции мочеполовой системы. Токсические продукты, вырабатываемые микроорганизмами, могут приводить не только к нарушению состояния эндометрия и развитию хронического эндометрита, но и к повреждению эмбриона [9].
Разработка новых методов прогнозирования невынашивания беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями у эмбриона, является своевременной и актуальной. При этом необходимо учитывать клинико-анамнестические параметры как самой женщины, так и ее партнера. На наш взгляд именно подобные математические модели, учитывающие множественные как материнские, так и отцовские факторы риска, могут быть эффективными для прогнозирования неразвивающейся беременности. Мы считаем важным прогнозировать не просто потерю беременности, а именно неразвивающуюся беременность, связанную с ХА у эмбриона, поскольку если у пациентки высок риск геномных мутаций у эмбриона, то при наличии угрозы выкидыша в первом триместре сохраняющая терапия не показана. Если же риск потери беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями у эмбриона, низкий, и тем не менее возникает угрожающий выкидыш при беременности, проведение сохраняющей терапии оправдано, так как высоковероятен нормальный хромосомный набор у эмбриона. Уровень техники
Аналогами прогнозирования аномалий родовой деятельности явились:
1. Способ прогнозирования неразвивающейся беременности (пат. РФ №2689165, 2019). В 6-10 недель беременности в эпителиальных клетках цервикального канала определяется экспрессия TLR2, TLR10 и IDO методом ПЦР, а также оценивается возраст менархе.
Недостатки метода: риск неразвивающейся беременности оценивается уже при наступившей беременности, а не при преконцепционной подготовке.
В формулу изобретения включены параметры, для которых F-критерий <3,84, а р>0,05, то есть не доказано наличие дискриминирующих особенностей этих переменных.
2. Способ ранней диагностики риска потери плода в семейной паре при наличии урогенитальной инфекции у мужчин (пат. РФ №2660557, 2018). На этапе прегравидарной подготовки определяется ряд показателей в сыворотке крови и в эякуляте у мужчины из семейной пары, планирующей беременность.
Недостатки метода: учитываются только показатели здоровья мужчины, изолированно от клинико-анамнестических и лабораторных параметров самой женщины, планирующей беременность, акцент сделан преимущественно на показателях активности урогенитальной инфекции, которая является лишь одним из возможных факторов риска неразвивающейся беременности.
3. Способ прогнозирования невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации (пат. РФ №2627472, 2017). В сыворотке крови беременных в сроке 6-11 недель гестации определяют уровень цитокина IL-288.
Недостатки метода: прогноз невынашивания беременности основывается только на 1 показателе, оценка риска проводится уже в период беременности. Такой подход позволяет установить риск именно инфекционного генеза потери беременности, но в целом для оценки риска невынашивания беременности, в генезе которого играет роль множество факторов, такой способ будет иметь низкую эффективность.
4. Способ прогнозирования невынашивания первой половины беременности (пат. РФ №2566728, 2015). Пациенткам проводят генотипирование: анализ полиморфизма rs-4680 гена СОМТ.
Недостатки метода: способ прогнозирования основан лишь на частоте встречаемости генотипов гена СОМТ в основной и контрольной группе, не учитывается влияние других возможных факторов риска, что снижает чувствительность и специфичность способа.
5. Способ прогнозирования невынашивания беременности в первом триместре беременности (пат. РФ №2341800, 2008). В первом триместре беременности в сыворотке крови определяют уровень субстанции Р и фактор некроза опухоли а, значение которых подставляют в формулу и рассчитывают прогностический коэффициент.
Недостатки метода: способ используется уже при наступившей беременности, а не при планировании беременности, для расчета прогностического индекса используются показатели, не использующиеся в рутинной клинической практике. Не указана эффективность способа.
Прототипом предлагаемого метода является описанный в литературе способ прогнозирования неразвивающейся беременности, при котором оцениваются такие показатели как иммуноглобулины М и G к цитомегаловирусу, морфологический элемент «токсические бляшки» в сыворотке крови, уровень малонового диальдегида в менструальных выделениях, показатель уровня карбонильных групп белков в менструальных выделениях (пат. РФ №2560694, 2015).
Недостатки метода: способ оценивает риск неразвивающейся беременности в целом, не дифференцируя неразвивающуюся беременность, связанную с ХА у эмбриона и неразвивающуюся беременность, при которой кариотип эмбриона в норме. При этом методы лечения и профилактики данной патологии должны быть совершенно различны в зависимости от того, нормальный хромосомный набор у эмбриона, либо присутствуют ХА, несовместимые с живорождением. Кроме того, в предложенной формуле используются показатели только состояния здоровья женщины, не учитывается мужской фактор невынашивания беременности. Поставленная задача - разработка способа прогнозирования неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями у эмбриона.
Технический результат - повышение эффективности оценки риска неразвивающейся беременности за счет учета данных анамнестических, молекулярно-генетических и лабораторных исследований как женщины, планирующей беременность, так и мужчины - ее партнера при расчете прогностического индекса.
Сущность изобретения.
Способ основан на сборе анамнеза и выявлении факторов риска при преконцепционной подготовке, молекулярно-генетическом исследовании (анализ полиморфизма гена MTHFR С677Т у пациентки, планирующей беременность) и анализе спермограммы партнера с последующим подсчетом прогностического индекса. В предлагаемом способе прогнозирования неразвивающейся беременности впервые в акушерстве использованы данные как женщины, так и мужчины, планирующих деторождение, впервые рассчитывается риск неразвивающейся беременности именно ассоциированной с хромосомными аномалиями у эмбриона (которые являются самой частой причиной неразвивающейся беременности в 1 триместре), и которые ранее в большинстве исследований трактовались как «случайные». Таким образом, предлагаемый способ соответствует критерию «изобретательский уровень».
Способ осуществляется следующим образом:
При преконцепционной подготовке проводится сбор анамнеза, для расчета прогностического индекса необходимы следующие анамнестические данные: возраст пациентки и ее партнера, наличие у пациентки хронических заболеваний мочеполовой системы (МПС), злоупотребление алкоголем партнером.
Далее пациентке проводится анализ полиморфизма С677Т гена MTHFR. Материалом для исследования служит венозная и периферическая кровь, полученная из локтевой вены и пальца пациентки стандартизированным способом, в количестве 5 мл. Полученный материал подвергается ПЦР-амплификации в режиме реального времени с использованием реагентов и протоколов фирмы НПО «ДНК-Технология» (РФ) на приборе ДТ-96 той же фирмы.
Ген MTHFR кодирует фермент - Метилентетрагидрофолатредуктаза (MTHFR), который является основным ферментом фолатного цикла. Снижение активности этого фермента из-за носительства полиморфного варианта гена MTHFR может приводить к нарушению пути реметилирования гомоцистеина (перехода гомоцистеина в метионин) и к гипергомоцистеинемии. Также нарушение фолатного метаболизма приводит к нарушению процессов метилирования ДНК, что повышает риск нерасхождения хромосом в мейозе. На Фиг. 1 представлено распределение генотипов гена MTHFR С677Т в исследуемых группах.
Генотипы СТ и ТТ в группе пациенток с неразвивающейся беременностью, при которой были выявлены ХА у эмбриона, встречались чаще, чем среди пациенток с благоприятным исходом беременности. Генотип СС, напротив, чаще встречался у пациенток, не имеющих проблем с вынашиванием беременности (различия статистически значимы).
Для подготовки к сбору эякулята для анализа спермограммы рекомендовалось половое воздержание в течение 2-5 дней. Сбор эякулята пациент осуществлял после мочеиспускания путем мастурбации в стерильный контейнер, избегая касания стенок и крышки контейнера руками.
Исследование проводили в соответствии с Руководством ВОЗ по исследованию эякулята. После разжижения проводили подсчет количества сперматозоидов, их концентрацию и подвижность с помощью спермоанализатора Biola SCA, морфологию сперматозоидов и количество лейкоцитов (сегментоядерных нейтрофилов) определяли при 100х увеличении микроскопа в окрашенных препаратах. Образцы с концентрацией сперматозоидов более 14 млн/мл, прогрессивной подвижностью (а+b) более 32% и/или общей подвижностью (a+b+с) более 40%, количеством лейкоцитов менее 1 млн/мл, соответствовали критериям нормозооспермии. Согласно рекомендациям ВОЗ (2010) за астенозооспермию принималось количество сперматозоидов с прогрессивным движением (PR) менее 32%, за тератозооспермию - количество сперматозоидов с нормальной морфологией менее 4%, за олигоспермию - концентрацию сперматозоидов менее 14 млн/мл.
Дискриминантные переменные для оценки риска неразвивающейся беременности вследствие ХА у эмбриона представлены в таблице 1.
Использовался пошаговый дискриминантный анализ, основанный на минимизации коэффициента Уилкса (к) после включения в уравнение регрессии каждого нового предиктора. В уравнение регрессии включались предикторы для которых значение F (F-статистика) было>3,84. Переменные, для которых р было>0,05 были исключены из анализа.
Результаты пошагового включения переменных в разделяющие функции представлены в таблице 2.
Сущность способа заключается в определении прогностического индекса Y по формуле:
Y=0,08Х1+0,02Х2+0,4Х3+Х4+1,3Х5-0,7Х6-4,6,
где X1 - возраст пациентки, лет;
Х2 - возраст партнера, лет;
Х3 - наличие у пациентки хронических заболеваний мочеполовой системы (имеются - 1, отсутствуют - 0);
Х4 - генотип MTHFR С677Т(СС-0, СТ- 1, ТТ- 1);
Х5 - злоупотребление алкоголем партнером (да - 1, нет - 0);
Х6 - тератозооспермия у партнера (по результатам анализа спермограммы спермотозоидов с нормальной морфологией >4% - 0, <4%- 1);
4,6 - константа (const). И если Y>0, то прогнозируют высокий риск неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями у эмбриона, при Y<0 - низкий риск неразвивающейся беременности, связанной с геномными мутациями у эмбриона.
Для оценки эффективности разработанного правила прогноза проведена его проверка на экзаменационной выборке, подобранной методом «скользящего» подбора. В результате проведенного анализа установлено, что чувствительность решающего правила составила 67,74%, специфичность 74,6%, эффективность 71,17%. Матрица классификации дискриминантного анализа представлена в таблице 3.
Ниже приведены примеры практического использования заявляемого способа.
Пример 1. Пациентка М., 26 лет. обратилась с целью преконцепционной подготовки. У сестры пациентки - привычное невынашивание беременности. Соматический анамнез спокоен. Супругу пациентки 45 лет, алкоголем не злоупотребляет. Пациентке проведен анализ полиморфизма С677Т гена MTHFR, выявлен генотип СС. Супругу пациентки проведен анализ спермограммы: концентрация сперматозоидов сперматозоидов 45 млн/мл, общее количество - 112,5 млн, прогрессивно подвижных - 25%, количество сперматозоидов с нормальной морфологией - 11%, заключение: астенозооспермия.
Проведен расчет прогностического индекса Y для оценки риска неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями у эмбриона. Индекс Y=-1,62, низкий риск неразвивающейся беременности, ассоциированной с ХА у эмбриона.
Рекомендована стандартная преконцепционная подготовка, прием фолиевой кислоты обоим супругам 400 мкг/сут. Через 3 месяца наступила беременность, которая завершилась срочными родами в 39-40 недель рождением живой доношенной девочки.
Пример 2. Пациентка О., 35 лет. обратилась с целью преконцепционной подготовки. Наследственность не отягощена, соматический анамнез не отягощен. Супругу пациентки 40 лет, алкоголем не злоупотребляет. Пациентке проведен анализ полиморфизма С677Т гена MTHFR, выявлен генотип ТТ. Супругу пациентки проведен анализ спермограммы: концентрация сперматозоидов 75 млн/мл, общее количество - 225 млн, прогрессивно подвижных - 34%, количество сперматозоидов с нормальной морфологией - 3%, заключение: тератозооспермия. При расчете прогностический индекс Y=0,7 - высокий риск неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями у эмбриона.
Супругу пациентки была рекомендована консультация андролога с целью проведения лечения и коррекции показателей спермограммы. Однако, через месяц у пациентки наступила спонтанная беременность. Учитывая высокий риск неразвивающейся беременности, пациентке было рекомендовано проведение УЗИ в 7 недель беременности. При УЗИ был выявлен увеличенный желточный мешок, копчико-теменной размер эмбриона - 10 мм, сердцебиение отсутствовало. Диагностирована неразвивающаяся беременность. После вакуум-аспирации было проведено кариотипирование абортивного материала, у эмбриона выявлен аномальный хромосомный набор: кариотип 47,ХХ,+16 (трисомия 16 хромосомы).
Таким образом, предлагаемый способ прогнозирования дает возможность своевременного выявления пациенток группы риска неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями у эмбриона еще до беременности. В случае если у пациентки уже случилась неразвивающаяся беременность, и не было проведено кариотипирование эмбриона, также возможен расчет прогностического Y.
Если Y>0, вероятно, неразвивающаяся беременность произошла по причине наличия ХА у эмбриона. Если Y<0, вероятно, неразвивающаяся беременность ассоциирована с другими причинами - требуется подробное обследование пациентки. Данный способ может использоваться и при вспомогательных репродуктивных технологиях - в случае, если у пациентки выявлен высокий риск неразвивающейся беременности, ассоциированной с ХА у эмбриона, следует предложить пациентке предимплантационное генетическое тестирование эмбриона с целью выбора эуплоидного эмбриона.
Использованная литература:
1. Выкидыш в ранние сроки беременности: диагностика и тактика ведения. Клинические рекомендации. Москва. 2016.
2. Ганковская Л.В., Свитич О.А., Доброхотова Ю.Э., Бахарева И.В., Ритчер О.В., Малушенко С.В. Способ прогнозирования невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации. Патент RU 2627472 С1, опубл. 08.08.2017.
3. Карп Г.Д., ред. Привычное невынашивание беременности: причины, версии и контраверсии, лечение; пер. с англ. под ред. В. Е. Радзинского. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2017. - 592 с.: ил.
4. Кудрявцева Е.В. "Большие акушерские синдромы": патогенез, прогнозирование, тактика. Дисс...доктора медицинских наук. Москва, 2020.
5. Кудрявцева Е.В., Ковалев В.В., Канивец И.В., Коростелев С.А. Современные возможности выявления хромосомных аномалий в абортивном материале. Уральский медицинский журнал. 2016; 11: 5-8.
6. Лебедева О.П., Козаренко О.Н., Пахомов С.П., Жукова И.О., Дюмина Ю.В., Саушкина Т.И. Способ прогнозирования неразвивающейся беременности. Патент RU 2689165 С1, опубл. 24.05.2019.
7. Левченко М.В., Орлов В.И. Способ прогнозирования невынашивания беременности в первом триместре беременности. Патент RU 2341800 С1, опубл. 20.12.2008.
8. Макаров О.В., Морозова К.В., Луценко Н.Н., Сальникова Л.Е., Хаджиева М.Б. Способ прогнозирования невынашивания первой половины беременности. Патент RU 2627472 С1, опубл. 08.08.2017.
9. Манухин И.Б., Колесов А.А., Семенцова Н.А., Чабонян А.Г. Профилактика привычного невынашивания у пациенток с неразвивающейся беременностью на фоне хронического эндометрита // Акушерство и гинекология. - 2013. - №5. - С.76-80.
10. Маркелова Е.В., Чепурнова Н.С., Тулупова М.С. Способ ранней диагностики риска потери плода в семейной паре при наличии урогенитальной инфекции у мужчин. Патент RU 2660557 С1, опубл. 06.07.2018.
11. Тишкова О.Г., Дикарева Л.В., Воронина Л.П. Способ прогнозирования неразвивающейся беременности. Патент RU 26560694 С1, опубл. 20.08.2015.
12. Anifandis G., Bounartzi Т., Messini СЛ., Dafopoulos К., Sotiriou S., Messinis I.E. The impact of cigarette smoking and alcohol consumption on sperm parameters and sperm DNA fragmentation (SDF) measured by Halosperm(®). Arch Gynecol Obstet. 2014; 290(4): 777-82.
13. Berghella V. Early pregnancy loss: in book Obstetric Evidence Based Guidelines. 2nd ed. 2012. P. 142-149
14. Burada F., Sosoi S., Ilescu D., Ioana M., Cernea D., Tudorache S. A rare occurrence of three consecutive autosomal trisomic pregnancies in a couple without offspring. Clin Exp Obstet Gynecol. 2016; 43(2): 287-90.
15. Goldstein M., Svirsky R., Reches A., Yaron Y. Does the number of previous miscarriages influence the incidence of chromosomal aberrations in spontaneous pregnancy loss? J Matern Fetal Neonatal Med. 2017; 24: 2956-2960.
16. Grande M., Borrell A., Garcia-Posada R., Borobio V., Munoz M., Creus M. et al. The effect of maternal age on chromosomal anomaly rate and spectrum in recurrent miscarriage. Hum Reprod. 2012; 27(10): 3109-17.
17. Jackson, R. A. Synthetic combinations of missense polymorphic genetic changes underlying Down Syndrome susceptibility / R. A. Jackson, M. L. Nguyan, A. N. Barrett [et al.] // Cell Mol Life Sci. - 2016. - Vol. 73, №21. - P. 4001-17.
18. MacDonald A.A., Herbison G.P., Showell M., Farquhar СМ.. The impact of body mass index on semen parameters and reproductive hormones in human males: a systematic review with meta-analysis. Hum Reprod Update. 2010; 16(3): 293-311.
19. Pacey A.A. Environmental and lifestyle factors associated with sperm DNA damage. Hum Fertil (Camb). 2010; 13: 189-93.
20. Recurrent pregnancy loss. Guideline of the European Society of Reproducrion and Embryology (ESHRE). 2017.
21. Ruixue W., Hongli Z., Zhihong Z., Rulin D., Dongfeng G., Ruizhi L. The impact of semen quality, occupational exposure to environmental factors and lifestyle on recurrent pregnancy loss. J Assist Reprod Genet. 2013; 30(11): 1513-8.
22. Zhang L.M., Yang Y.N., Zhang R.X., Luo L., Tan J.F., Zhou L. et al. Comparison of the etiological constitution of two and three or more recurrent miscarriage. Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi. 2018; 53(12): 855-859.
Claims (10)
- Способ прогнозирования неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями эмбриона, заключающийся в том, что определяют анамнестические данные женщины и мужчины, планирующих деторождение: возраст пациентки и ее партнера, наличие у пациентки хронических заболеваний мочеполовой системы, злоупотребление алкоголем партнером, осуществляют анализ полиморфизма MTHFR С677Т у женщины и параметров спермограммы у мужчины, после чего вычисляют прогностический индекс по формуле:
- Y=0,08X1+0,02X2+0,4X3+X4+1,3X5+0,7X6-4,6,
- где Y - прогностический индекс;
- X1 - возраст пациентки, лет;
- Х2 - возраст партнера, лет;
- Х3 - наличие у пациентки хронических заболеваний мочеполовой системы (имеются - 1, отсутствуют - 0);
- Х4 - генотип MTHFR С677Т(СС - 0, СТ- 1, ТТ - 1);
- Х5 - злоупотребление алкоголем партнером (да - 1, нет - 0);
- Х6 - тератозооспермия у партнера (по результатам анализа спермограммы сперматозоидов с нормальной морфологией >4% - 0, <4% - 1);
- 4,6 - константа (const); и при Y>0 прогнозируют высокий риск неразвивающейся беременности, ассоциированной с ХА у эмбриона, а при Y<0 - низкий риск неразвивающейся беременности, связанной с геномными мутациями у эмбриона.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021106870A RU2760499C9 (ru) | 2021-03-15 | 2021-03-15 | Способ прогнозирования неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями эмбриона |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021106870A RU2760499C9 (ru) | 2021-03-15 | 2021-03-15 | Способ прогнозирования неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями эмбриона |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2760499C1 RU2760499C1 (ru) | 2021-11-25 |
| RU2760499C9 true RU2760499C9 (ru) | 2021-12-24 |
Family
ID=78719436
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021106870A RU2760499C9 (ru) | 2021-03-15 | 2021-03-15 | Способ прогнозирования неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями эмбриона |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2760499C9 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2566728C2 (ru) * | 2014-03-21 | 2015-10-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России) | Способ прогнозирования риска невынашивания первой половины беременности |
| WO2016149759A1 (en) * | 2015-03-23 | 2016-09-29 | Adelaide Research & Innovation Pty Ltd | Methods and systems for determining risk of a pregnancy complication occurring |
| RU2611358C1 (ru) * | 2016-02-03 | 2017-02-21 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Южный федеральный университет" | Способ прогнозирования высокого риска репродуктивных потерь в первом триместре беременности |
-
2021
- 2021-03-15 RU RU2021106870A patent/RU2760499C9/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2566728C2 (ru) * | 2014-03-21 | 2015-10-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России) | Способ прогнозирования риска невынашивания первой половины беременности |
| WO2016149759A1 (en) * | 2015-03-23 | 2016-09-29 | Adelaide Research & Innovation Pty Ltd | Methods and systems for determining risk of a pregnancy complication occurring |
| RU2611358C1 (ru) * | 2016-02-03 | 2017-02-21 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Южный федеральный университет" | Способ прогнозирования высокого риска репродуктивных потерь в первом триместре беременности |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| AL-ACHKAR W., et al., Chromosomal aberration leads to recurrent pregnancy loss and partial trisomy of 5p12-15.3 in the offspring: report of a Syrian couple and review of the literature. Zhonghua Nan Ke Xue. 2015 Mar; 21(3): 219-24. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2760499C1 (ru) | 2021-11-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Jakobsen et al. | High levels of fetal DNA are associated with increased risk of spontaneous preterm delivery | |
| Dewan et al. | Y-chromosome microdeletions and recurrent pregnancy loss | |
| Sullivan et al. | Recurrent fetal aneuploidy and recurrent miscarriage | |
| McLennan et al. | Noninvasive prenatal testing in routine clinical practice–an audit of NIPT and combined first‐trimester screening in an unselected Australian population | |
| Wu et al. | Sperm mitochondrial DNA measures and semen parameters among men undergoing fertility treatment | |
| CN109891239B (zh) | 用于提供子痫前期评估和预测早产的方法和试剂盒 | |
| Pang et al. | Clinical application of noninvasive prenatal testing in the detection of fetal chromosomal diseases | |
| Zahed et al. | Prevalence of factor V Leiden, prothrombin and methylene tetrahydrofolate reductase mutations in women with adverse pregnancy outcomes in Lebanon | |
| Chaabouni et al. | Prenatal diagnosis of chromosome disorders in Tunisian population | |
| Hill et al. | Prediction of preterm birth in symptomatic women using decision tree modeling for biomarkers | |
| Gabby et al. | Chronic villitis as a distinctive feature of placental injury in maternal SARS-CoV-2 infection | |
| WO2024182491A1 (en) | Polygenic risk estimator for cervical length change during pregnancy | |
| Buhimschi et al. | Multidimensional system biology: genetic markers and proteomic biomarkers of adverse pregnancy outcome in preterm birth | |
| Cheng et al. | Performance of non-invasive prenatal testing for foetal chromosomal abnormalities in 1048 twin pregnancies | |
| Perni et al. | Fetal interleukin-1 receptor antagonist gene polymorphism, intra-amniotic interleukin-1β levels, and history of spontaneous abortion | |
| RU2760499C9 (ru) | Способ прогнозирования неразвивающейся беременности, ассоциированной с хромосомными аномалиями эмбриона | |
| Serrano et al. | Factor V Leiden and prothrombin G20210A in Portuguese women with recurrent miscarriage: is it worthwhile to investigate? | |
| Mesoraca et al. | Cell-free DNA screening for aneuploidies in 7113 pregnancies: single Italian centre study | |
| Elenis et al. | The histidine-rich glycoprotein A1042G polymorphism and recurrent miscarriage: a pilot study | |
| Rochdi et al. | Epidemiology and occupational risk factors of male infertility based on 3,025 patients in Eastern Morocco during 2021-2023: a cohort study | |
| Miller et al. | Defining a role for Interferon Epsilon in normal and complicated pregnancies | |
| Cho et al. | A history of recurrent pregnancy loss is associated with increased perinatal complications, but not necessarily a longer birth interval: a population study spanning 18 years | |
| Mantzaris et al. | Potential of syncytiotrophoblasts isolated from the cervical mucus for early non-invasive prenatal diagnosis: evidence of a vanishing twin | |
| Zhao et al. | The influence of fetal gender and maternal characteristics on fetal cell-free DNA in maternal plasma | |
| RU2766750C1 (ru) | Способ прогнозирования неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TK4A | Correction to the publication in the bulletin (patent) |
Free format text: CORRECTION TO CHAPTER -FG4A- IN JOURNAL 33-2021 FOR INID CODE(S) (72) |
|
| TH4A | Reissue of patent specification |