RU2758064C1 - Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens - Google Patents
Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens Download PDFInfo
- Publication number
- RU2758064C1 RU2758064C1 RU2020135614A RU2020135614A RU2758064C1 RU 2758064 C1 RU2758064 C1 RU 2758064C1 RU 2020135614 A RU2020135614 A RU 2020135614A RU 2020135614 A RU2020135614 A RU 2020135614A RU 2758064 C1 RU2758064 C1 RU 2758064C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- donor
- chimerism
- antigens
- recipient
- abo
- Prior art date
Links
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 39
- 206010068051 Chimerism Diseases 0.000 title claims abstract description 37
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 25
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 25
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims 1
- 238000011134 hematopoietic stem cell transplantation Methods 0.000 abstract description 9
- 206010002965 Aplasia pure red cell Diseases 0.000 abstract description 6
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 abstract description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 5
- 101710098119 Chaperonin GroEL 2 Proteins 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 208000031951 Primary immunodeficiency Diseases 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 206010000830 Acute leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 208000024556 Mendelian disease Diseases 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101000874347 Streptococcus agalactiae IgA FC receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000588258 Taenia solium Paramyosin Proteins 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 238000011970 concomitant therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002559 cytogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000000925 erythroid effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6804—Nucleic acid analysis using immunogens
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, в частности к онкогематологии и может быть использовано для оценки динамики прироста донорских эритроцитов после трансплантации костного мозга и/или гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) от неидентичного по системе АВО донора. Определение количества эритроцитов, имеющих фенотип донора, осуществляется методом агглютинации в геле путем сравнения относительного количества эритроцитов, экспрессирующих и неэкспрессирующих информативный антиген, со шкалой-идентификатором донорского химеризма.The invention relates to medicine, in particular to hematology oncology and can be used to assess the dynamics of the increase in donor erythrocytes after transplantation of bone marrow and / or hematopoietic stem cells (HSC) from a donor that is not identical in the ABO system. Determination of the number of erythrocytes with the donor phenotype is carried out by the method of agglutination in a gel by comparing the relative number of erythrocytes expressing and non-expressing an informative antigen with the donor chimerism identifier scale.
Цель изобретения - разработка способа оценки посттрансплантационного химеризма при анализе экспрессии антигенов эритроцитов А и В.The purpose of the invention is to develop a method for assessing post-transplant chimerism when analyzing the expression of erythrocyte antigens A and B.
Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (аллоТГСК) - один из эффективных методов лечения тяжелых гематологических и онкологических заболеваний системы крови, а также ряда наследственных болезней. Результативность терапии доказана у пациентов с острыми лейкозами, хроническим миелолейкозом, злокачественными лимфомами, первичными иммунодефицитами [1, 2]. Потенциальный успех аллоТГСК, приводящий к долгосрочной выживаемости больных, зависит от функциональной активности гемопоэтических стволовых клеток и развития посттрансплантационных осложнений - отторжения трансплантата, реакции «трансплантат против хозяина», парциальной красноклеточной аплазии, рецидива основного заболевания, инфекционных осложнений [3, 4, 5]. Мониторинг приживления ГСК необходим для планирования сопроводительной терапии. Показателем, отражающим работу донорской кроветворной ткани, является посттрансплантационный химеризм. Существует ряд методов отслеживания донорского химеризма.Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (alloHSCT) is one of the effective methods of treating severe hematological and oncological diseases of the blood system, as well as a number of hereditary diseases. The effectiveness of therapy has been proven in patients with acute leukemia, chronic myeloid leukemia, malignant lymphomas, primary immunodeficiencies [1, 2]. The potential success of alloHSCT, leading to long-term survival of patients, depends on the functional activity of hematopoietic stem cells and the development of post-transplant complications - graft rejection, graft versus host reaction, partial red cell aplasia, recurrence of the underlying disease, infectious complications [3, 4, 5]. Monitoring of HSC engraftment is essential for planning concomitant therapy. An indicator reflecting the work of donor hematopoietic tissue is post-transplant chimerism. There are a number of methods for tracking donor chimerism.
Известны способы оценки присутствия в организме различных клеточных линий на основании генетических маркеров. К ним относятся цитогенетический и FISH-анализ, которые могут применяться для определения химеризма только в тех ситуациях, когда донор и реципиент разного пола или пациент имеет хромосомные особенности. Такие ограничения приводят к редкому использованию данных методов [1, 6, 8].Known methods for assessing the presence in the body of various cell lines on the basis of genetic markers. These include cytogenetic and FISH analysis, which can be used to determine chimerism only in situations where the donor and recipient are of different sexes or the patient has chromosomal characteristics. Such restrictions lead to the rare use of these methods [1, 6, 8].
Известен способ оценки донорского химеризма, основанный на выявлении индивидуальных отличий в структуре ДНК с применением ПЦР в реальном времени. В настоящее время для определения химеризма у больных после аллоТГСК данный метод считается наиболее востребованным, так как обладает возможностью ранней диагностики химеризма [7, 8]. Недостатком исследования структур ДНК является невозможность оценки функциональной состоятельности эритроидного ростка кроветворения и диагностики парциальной красноклеточной аплазии - тяжелого осложнения ТГСК.A known method for assessing donor chimerism, based on identifying individual differences in the structure of DNA using real-time PCR. Currently, for the determination of chimerism in patients after alloHSCT, this method is considered the most popular, since it has the ability to early diagnosis of chimerism [7, 8]. The disadvantage of studying DNA structures is the impossibility of assessing the functional viability of the erythroid hematopoietic lineage and diagnosing partial red cell aplasia, a severe complication of HSCT.
Наиболее близким к предполагаемому изобретению является модифицированный микрометод дифференциальной агглютинации по Эшби, оценивающий количество эритроцитов в крови реципиента, экспрессирующих донорские антигены, с помощью камеры Горяева [9]. Данное исследование позволяет оценить работу эритроцитарного ростка донорского костного мозга, диагностировать парциальную красноклеточную аплазию. Недостатком этого метода является отсутствие автоматизации, необходимость дополнительных манипуляций, выходящих за рамки стандартных иммуногематологических исследований.Closest to the proposed invention is a modified Ashby differential agglutination micromethod, which estimates the number of erythrocytes in the blood of a recipient expressing donor antigens using a Goryaev camera [9]. This study makes it possible to evaluate the work of the erythrocyte lineage of the donor bone marrow, to diagnose partial red cell aplasia. The disadvantage of this method is the lack of automation, the need for additional manipulations that go beyond the scope of standard immunohematological studies.
Техническим результатом заявляемого изобретения является создание способа диагностики донорского химеризма при исследовании антигенов системы АВО методом агглютинации в геле с моноклональными антителами анти-А, анти-В. Технология анализа экспрессии антигенов позволяет определить относительное количество эритроцитов, имеющих происхождение из донорского ростка кроветворения, отследить динамику прироста донорского химеризма после трансплантации ГСК, установить парциальную красноклеточную аплазию костного мозга. Преимущества данного метода заключаются в высокой скорости исполнения и использовании стандартных иммуногематологических методов исследования.The technical result of the claimed invention is the creation of a method for the diagnosis of donor chimerism in the study of antigens of the ABO system by agglutination in a gel with monoclonal antibodies anti-A, anti-B. The technology for analyzing the expression of antigens makes it possible to determine the relative number of erythrocytes originating from the donor hematopoietic germ, to track the dynamics of the increase in donor chimerism after HSC transplantation, and to establish partial red cell aplasia of the bone marrow. The advantages of this method are the high speed of execution and the use of standard immunohematological research methods.
Для достижения поставленной цели в соответствии с аналогом [9] проводят типирование антигенов АВО донора и реципиента и выявляют различия экспрессии антигенов, позволяющие дифференцировать эритроциты, происходящие из ростков кроветворения донора и реципиента. В отличие от прототипа, в котором проводится подсчет количества связанных с антиэритроцитарными антителами клеток в камере Горяева с последующим расчетом % эритроцитов донора, в предлагаемом способе осуществляется анализ донорского химеризма на основании сопоставления результатов АВО-тестирования в гелевой карте со шкалой-идентификатором. Анализ химеризма проводится методом агглютинации в геле.To achieve this goal, in accordance with the analogue [9], the ABO antigens of the donor and the recipient are typed and the differences in the expression of antigens are identified, which make it possible to differentiate erythrocytes originating from the hematopoietic germs of the donor and the recipient. Unlike the prototype, in which the number of cells associated with anti-erythrocyte antibodies is counted in the Goryaev chamber with the subsequent calculation of the% of donor erythrocytes, the proposed method analyzes donor chimerism based on comparing the results of ABO testing in a gel card with an identifier scale. The analysis of chimerism is carried out by the method of agglutination in a gel.
В процессе проведения патентно-информационного поиска не выявлено источников, порочащих новизну предполагаемого изобретения.In the course of the patent information search, no sources discrediting the novelty of the proposed invention have been identified.
Заявляемое изобретение разработано в лаборатории иммуногематологии ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России в соответствии с планом научно-исследовательской работы.The claimed invention was developed in the laboratory of immunohematology of FGBUN KNIIGiPK FMBA of Russia in accordance with the research plan.
Способ осуществляется следующим образом.The method is carried out as follows.
Этап 1. Создают шкалу-идентификатор процента донорского химеризма. С этой целью эритроциты из образцов крови доноров О, А и В трижды отмывают от плазмы в физиологическом растворе и ресуспензируют в растворе низкой ионной силы в соотношении 1:1. Перемешивают на вортексе. Маркируют пробирки с ЭДТА от 1 до 12. В соответствии с таблицей 1 в пробирки вносят заданный объем взвеси эритроцитов О и А группы (или О и В группы, в зависимости от установленного информативного маркера). Полученную смесь эритроцитов из каждой пробирки вносят в гелевые карты с соответствующими по специфичности моноклональными антителами. Центрифугируют и фотодокументируют результат. Формируют шкалу-идентификатор, отражающий различное процентное соотношение эритроцитов О и А (или О и В) в образце (рисунок 1, 2, 3, 4).Step 1. Create a scale identifying the percentage of donor chimerism. For this purpose, erythrocytes from blood samples of donors O, A and B are washed three times from plasma in physiological saline and resuspended in a solution of low ionic strength in a 1: 1 ratio. Mix on a vortex. Tubes with EDTA from 1 to 12 are labeled. In accordance with Table 1, a predetermined volume of suspension of erythrocytes of O and A groups (or O and B groups, depending on the established informative marker) is added to the tubes. The resulting mixture of erythrocytes from each tube is introduced into gel cards with monoclonal antibodies corresponding in specificity. Centrifuge and photograph the result. An identifier scale is formed, reflecting the different percentage of red blood cells O and A (or O and B) in the sample (Figure 1, 2, 3, 4).
Этап 2. До трансплантации ГСК проводят типирование антигенов АВО эритроцитов донора и реципиента. Определяют информативные антигены, позволяющие установить различия эритроцитов донора и реципиента по системе АВО. Антиген считается информативным, если он выявлен в фенотипе реципиента и отсутствует в фенотипе донора или наоборот. Прогнозируют вектор донорского химеризма - появление или исчезновение эритроцитов, экспрессирующих информативный антиген.Stage 2. Before HSC transplantation, typing of ABO antigens of donor and recipient erythrocytes is performed. Determine informative antigens that allow to establish the differences between donor and recipient erythrocytes according to the ABO system. An antigen is considered informative if it is detected in the phenotype of the recipient and is absent in the phenotype of the donor, or vice versa. The vector of donor chimerism is predicted - the appearance or disappearance of erythrocytes expressing an informative antigen.
Этап 3. После трансплантации ГСК исследование гемопоэтического химеризма проводят с 21 дня каждую неделю до +50 дня и далее по показаниям. Выполняют стандартное иммуногематологическое определение АВО-принадлежности крови реципиента. Анализируют процентное соотношение эритроцитов, экспрессирующих и не экспрессирующих информативные антигены. Оценку количественных значений химеризма осуществляют путем визуального сравнения результата исследования со шкалой-идентификатором процента донорского химеризма.
Представленные ниже клинические примеры подтверждают возможность использования заявляемого способа при оценке эритроцитарного химеризма после аллоТГСК.The clinical examples presented below confirm the possibility of using the proposed method in assessing erythrocyte chimerism after alloHSCT.
Пример 1Example 1
Пациент Г., 31 год с диагнозом: Острый лимфобластный лейкоз. Группа крови A ccDEE К- Cw-, анти-В антитела IgM - 1:8, IgG - не выявлены. Донор ГСК HLA-идентичный сиблинг с группой крови В ccDEe Κ- Cw-, анти-А антитела IgM - 1:32, IgG - не выявлены. Информативными были признаны антигены А и В, предполагалось появление клеток, экспрессирующих антиген В (B↑) и исчезновение эритроцитов, несущих антиген A (A↓) после трансплантации. АллоТГСК выполнена 26.07.2019. Трансфузионная тактика предусматривала трансфузии отмытых облученных эритроцитов О ccDEEK-. Исследования эритроцитарного химеризма выполнены на 17, 48, 67, 81, 102, 130, 360 дни после пересадки (таблица 2). Донорский химеризм 5% зарегистрирован на +17 день. Донорский химеризм 100% по антигену А установлен на +102 день, по антигену В - на +130 день. При обследовании через 1 год после трансплантации подтверждена полная ремиссия заболевания, донорский эритроцитарный химеризм - 100%. Больной ведет полноценную жизнь хорошего качества.Patient G., 31 years old with a diagnosis of Acute lymphoblastic leukemia. Blood group A ccDEE К- Cw-, anti-B antibodies IgM - 1: 8, IgG - not detected. HSC donor HLA-identical sibling with blood group B ccDEe Κ- Cw-, anti-A IgM antibodies - 1:32, IgG - not detected. The A and B antigens were recognized as informative, the appearance of cells expressing the B antigen (B ↑) and the disappearance of erythrocytes carrying the A antigen (A ↓) after transplantation were assumed. AlloHSC was performed on July 26, 2019. Transfusion tactics included the transfusion of washed irradiated erythrocytes O ccDEEK-. Erythrocyte chimerism studies were performed at 17, 48, 67, 81, 102, 130, 360 days after transplantation (Table 2).
Пример 2Example 2
Пациентка П., 46 лет с диагнозом острый миелоцитарный лейкоз. Группа крови О CcDee К- Cw- (анти-А IgM - 1:8, IgG - 1:4). Донор ГСК родственный идентичный по системе HLA - A ccdee К- Cw-. Информативным признан антиген А, который экспрессировался на донорских эритроцитах и не экспрессировался на клетках реципиента. Предполагалось отслеживать появление клеток, имеющих в фенотипе антиген А (А↑). Аллогенная трансплантация ГСК выполнена 18.12.2019. При необходимости трансфузий эритроцитов переливались отмытые облученные эритроциты О ccdee К- Cw-. В течение 200 дней после ТГСК у реципиента не выявлялись эритроциты с фенотипом донора (таблица 3). Установлен диагноз: красноклеточная аплазия после аллогенной родственной совместимой ТГСК, ремиссия на основании трепанобиопсии +50 день после ТГСК. Скорректирована терапия. В течение 6 месяцев после трансплантации у пациентки наблюдалось постепенное снижение титров антиэритроцитарных анти-А антител. 06.07.20 (+201 день) было зафиксировано появление эритроцитов, характерных для донора ГСК, и последующее быстрое нарастание донорского химеризма. Анти-А антитела не выявлены. При обращении пациентки на +271 день после ТГСК выявлено 80% посттрансплантационных донорских эритроцитов. Пациентка активна, чувствует себя хорошо.Patient P., 46 years old, diagnosed with acute myelocytic leukemia. Blood group O CcDee K-Cw- (anti-A IgM - 1: 8, IgG - 1: 4). HSC related donor, identical in the HLA system - A ccdee K-Cw-. Antigen A, which was expressed on donor erythrocytes and was not expressed on the cells of the recipient, was recognized as informative. It was supposed to track the appearance of cells with antigen A (A ↑) in the phenotype. Allogeneic HSC transplantation was performed on December 18, 2019. If necessary, erythrocyte transfusions were transfused washed irradiated erythrocytes O ccdee K-Cw-. Within 200 days after HSCT, no erythrocytes with the donor phenotype were detected in the recipient (Table 3). Diagnosed with red cell aplasia after allogeneic related compatible HSCT, remission based on trepanobiopsy +50 days after HSCT. Therapy has been adjusted. Within 6 months after transplantation, the patient showed a gradual decrease in anti-erythrocyte anti-A antibody titers. On July 6, 20 (+201 days), the appearance of erythrocytes characteristic of the HSC donor was recorded, followed by a rapid increase in donor chimerism. Anti-A antibodies were not detected. When the patient applied for +271 days after HSCT, 80% of post-transplant donor erythrocytes were detected. The patient is active and feels well.
Список литературыBibliography
1. Блау О.В. Химеризм после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. // Клиническая онкогематология 2013; 6(1): 34-39.1. Blau OV Chimerism after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. // Clinical hematology oncology 2013; 6 (1): 34-39.
2. Лавритенко В.А., Майренко Ю.Е., Березовская Е.Ю. и др. Становление донорского химеризма у пациентов с первичными иммунодефицитами после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. // Клиническая онкогематология 2018; 13(2): 82-92.2. Lavritenko V.A., Mayrenko Yu.E., Berezovskaya E.Yu. et al. Formation of donor chimerism in patients with primary immunodeficiency after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. // Clinical hematology oncology 2018; 13 (2): 82-92.
3. Lion F., Watzinger S., Preuner Η. et al. The EuroChimerism concept for a standardized approach to chimerism analysis after allogeneic stem cell transplantation// Leukemia, 2012, 26(8): 1821-1828.3. Lion F., Watzinger S., Preuner A. et al. The EuroChimerism concept for a standardized approach to chimerism analysis after allogeneic stem cell transplantation // Leukemia, 2012, 26 (8): 1821-1828.
4. Schäfer S.H., Finke J. Mismatched unrelated alternative donors for hematological malignancies. Semin Hematol 2016; 53 (2): 77-81.4. Schäfer S.H., Finke J. Mismatched unrelated alternative donors for hematological malignancies. Semin Hematol 2016; 53 (2): 77-81.
5. Менделеева Л.П., Мишин Η.Ε., Клясова Γ.Α., Любимова Л.С. и др. Инфекции в течение первых 100 дней после трансплантации гемопоэтических клеток. // Гематология и трансфузиология 2007; 52 (4):8-15.5. Mendeleeva LP, Mishin Η.Ε., Klyasova Γ.Α., Lyubimova L.S. et al. Infections during the first 100 days after hematopoietic cell transplantation. // Hematology and Transfusiology 2007; 52 (4): 8-15.
6. Fehse В., Chuchlovin Α., Kuhcke К. et al. Real-time quantitative Y chromosome-specific PCR (QYCS-PCR) for monitoring hematopoietic chimerism after sex-mismatched allogeneic stem cell transplantatoin// J. Hematother. Cell Res., 2001, 10(3): 419-425.6. Fehse B., Chuchlovin A., Kuhcke K. et al. Real-time quantitative Y chromosome-specific PCR (QYCS-PCR) for monitoring hematopoietic chimerism after sex-mismatched allogeneic stem cell transplantatoin // J. Hematother. Cell Res. 2001,10 (3): 419-425.
7. Bader P., Niethammer D., Willasch Α., Kreyenberg H., Klingebiel T. How and when should we monitor chimerism after allogeneic stem cell transplantation? Bone Marrow Transplant. 2005; 35(2): 107-19.7. Bader P., Niethammer D., Willasch Α., Kreyenberg H., Klingebiel T. How and when should we monitor chimerism after allogeneic stem cell transplantation? Bone Marrow Transplant. 2005; 35 (2): 107-19.
8. Лавриненко Β.Α., Савицкая Т.В., Волочник Ε.В. и др. Количественный анализ химеризма после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток молекулярно-генетическими методами // Онкогематология 2014; 9(2): 29-36.8. Lavrinenko Β.Α., Savitskaya TV, Volochnik Ε.V. et al. Quantitative analysis of chimerism after allogeneic transplantation of hematopoietic stem cells by molecular genetic methods // Oncohematology 2014; 9 (2): 29-36.
9. Порешина Л.П. Эритроцитарный химеризм при аллогенной близкородственной трансплантации костного мозга // Автореферат дис... док. Биол. наук. - М., 2004. - 35 с.9. Poreshina L.P. Erythrocytic chimerism in allogeneic closely related bone marrow transplantation // Abstract of dis ... doc. Biol. sciences. - M., 2004 .-- 35 p.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020135614A RU2758064C1 (en) | 2020-10-28 | 2020-10-28 | Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020135614A RU2758064C1 (en) | 2020-10-28 | 2020-10-28 | Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2758064C1 true RU2758064C1 (en) | 2021-10-26 |
Family
ID=78289580
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2020135614A RU2758064C1 (en) | 2020-10-28 | 2020-10-28 | Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2758064C1 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2193197C1 (en) * | 2001-07-20 | 2002-11-20 | Башкирский государственный медицинский университет | Method for estimating biological compatibility of erythrocytic mass of donated and recipient's blood |
| RU2667006C1 (en) * | 2017-06-07 | 2018-09-13 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" | Method for determining posttransplantation chimerism in analysis of point mutations of base substitution in genes f2, f5, f7, f13, fgb, itga2, itgb3, pai-1 |
| RU2667127C1 (en) * | 2017-06-28 | 2018-09-14 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" | Method for determining hematopoietic chimerism in the study of single nucleotide polymorphisms of genes mther: 677, mther: 1298, mtr: 2756, mtrr: 66 |
-
2020
- 2020-10-28 RU RU2020135614A patent/RU2758064C1/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2193197C1 (en) * | 2001-07-20 | 2002-11-20 | Башкирский государственный медицинский университет | Method for estimating biological compatibility of erythrocytic mass of donated and recipient's blood |
| RU2667006C1 (en) * | 2017-06-07 | 2018-09-13 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" | Method for determining posttransplantation chimerism in analysis of point mutations of base substitution in genes f2, f5, f7, f13, fgb, itga2, itgb3, pai-1 |
| RU2667127C1 (en) * | 2017-06-28 | 2018-09-14 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" | Method for determining hematopoietic chimerism in the study of single nucleotide polymorphisms of genes mther: 677, mther: 1298, mtr: 2756, mtrr: 66 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Mehdi Alizadeh et al. Quantitative assessment of hematopoietic chimerism after bone marrow transplantation by real-time quantitative polymerase chain reaction. Blood, 2002, 99(12) p. 4618-4625. doi: 10.1182/blood.v99.12.4618. * |
| Mehdi Alizadeh et al. Quantitative assessment of hematopoietic chimerism after bone marrow transplantation by real-time quantitative polymerase chain reaction. Blood, 2002, 99(12) p. 4618-4625. doi: 10.1182/blood.v99.12.4618. R.L. Niece A Differential Hemolysis Technique Using a Coulter Counter to Assay Erythrocyte Chimerism. Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine, 1968, 128(1), p. 36-38. doi: 10.3181/00379727-128-32936. * |
| R.L. Niece A Differential Hemolysis Technique Using a Coulter Counter to Assay Erythrocyte Chimerism. Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine, 1968, 128(1), p. 36-38. doi: 10.3181/00379727-128-32936. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Grisendi et al. | Detection of microparticles from human red blood cells by multiparametric flow cytometry | |
| Kularatne et al. | Monitoring tumour cells in the peripheral blood of small cell lung cancer patients | |
| US5830679A (en) | Diagnostic blood test to identify infants at risk for sepsis | |
| Gjurich et al. | Flow cytometric analysis of immune cells within murine aorta | |
| CN105122067B (en) | Method for judging acute graft versus host disease risk | |
| Petsiou et al. | A modified flow cytometry method for objective estimation of human CD4+ regulatory T cells (CD4+ Tregs) in peripheral blood, via CD4/CD25/CD45RO/FoxP3 labeling | |
| CN101484586A (en) | Methods and reagents for detecting susceptibility to graft versus host disease or transplant related mortality | |
| US20100203058A1 (en) | Diagnostics and therapeutics based on circulating progenitor cells | |
| RU2758064C1 (en) | Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens | |
| Rimac et al. | Role of flow cytometry in evaluation of the cellular therapy products used in haematopoietic stem cell transplantation | |
| Ruscher et al. | Intravenous labeling and analysis of the content of thymic perivascular spaces | |
| CN106199005A (en) | The method using CD137 expression detection lymphocyte anti-colorectal cancer activity | |
| Greve et al. | Flow cytometry in transfusion medicine: development, strategies and applications | |
| RU2761100C1 (en) | Method for determining the level of post-transplant chimerism by assessing the expression of rhesus and kell antigens in gel cards | |
| RU2080061C1 (en) | Method of cattle selection for resistance to tuberculosis | |
| Wada et al. | Method of separation and concentration of fetal nucleated red blood cells in maternal blood and its application to fetal diagnosis | |
| ES2428920T3 (en) | Flow cytometry procedure for the determination of the total number of leukocytes and the number of thrombocytes, as well as for the differentiation of leukocytes in bird blood samples | |
| JP2553606B2 (en) | Method for separating and using density-specific blood cells | |
| JP7368678B1 (en) | Methods for measuring the relative abundance of specific cell subpopulations in a CD4+ T cell population | |
| RU2581925C2 (en) | Method for assessing allogenic immune response in short-term mixed mononuclear culture of unrelated donors | |
| JP2007105037A (en) | Examination for stem cell transplantation using chimerism | |
| RU2723164C1 (en) | Method for calculating the dose of haematopoiesis precursor cells in a leukocytapheresis product by taking into account the change in the integrity of cell membranes during storage | |
| Chesney et al. | Clinical utility of flow cytometry in the study of erythropoiesis and nonclonal red cell disorders | |
| Lee et al. | Splenic granulopoiesis and S100A9 drive resistance to checkpoint inhibitors conferred by liver metastases | |
| US20160223557A1 (en) | Method of isolating circulating tumor cells |