[go: up one dir, main page]

RU2625977C1 - Bacillus amyloliquefaciens ops-32 bacteria stain for the production of complete biopreparate for protection of agricultural plants from phytopathogenic mushrooms, stimulation of their growth and increase in yield - Google Patents

Bacillus amyloliquefaciens ops-32 bacteria stain for the production of complete biopreparate for protection of agricultural plants from phytopathogenic mushrooms, stimulation of their growth and increase in yield Download PDF

Info

Publication number
RU2625977C1
RU2625977C1 RU2016123126A RU2016123126A RU2625977C1 RU 2625977 C1 RU2625977 C1 RU 2625977C1 RU 2016123126 A RU2016123126 A RU 2016123126A RU 2016123126 A RU2016123126 A RU 2016123126A RU 2625977 C1 RU2625977 C1 RU 2625977C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
ops
strain
bacillus amyloliquefaciens
growth
plants
Prior art date
Application number
RU2016123126A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Анна Александровна Егоршина
Михаил Александрович Лукьянцев
Игорь Маратович Давлетбаев
Данис Дамирович Зиганшин
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "Органик парк"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "Органик парк" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "Органик парк"
Priority to RU2016123126A priority Critical patent/RU2625977C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2625977C1 publication Critical patent/RU2625977C1/en

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/10Animals; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/07Bacillus
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/10Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

FIELD: biotechnology.
SUBSTANCE: strain of bacteria Bacillus amyloliquefaciens OPS-32, which has antagonistic activity against phytopathogenic microorganisms, was deposited in the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms under the registration number RCIM V-12464. The strain can be used to create a biopreparation of complex action for use in crop production, including organic agriculturing.
EFFECT: invention allows to increase crop yields.
3 dwg, 5 tbl, 6 ex

Description

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и биотехнологии, касается биологических средств для защиты растений от фитопатогенных микроорганизмов и стимуляции их роста и представляет собой штамм бактерии Bacillus amyloliquefaciens OPS-32.The invention relates to agricultural microbiology and biotechnology, relates to biological agents for protecting plants from phytopathogenic microorganisms and stimulating their growth, and is a strain of the bacterium Bacillus amyloliquefaciens OPS-32.

Предложено и запатентовано множество различных штаммов микроорганизмов, предложенных для использования в производстве биопрепаратов в качестве основных действующих агентов биопестицидов и/или биоудобрений. Значительная часть таких микроорганизмов является представителями родов Bacillus и Pseudomonas. Согласно многочисленным исследованиям именно эти бактерии чаще всего встречаются в ризосфере и ризоплане растений и образуют с ними взаимовыгодные ассоциации. С точки зрения биологической активности и бациллы, и псевдомонады могут оказывать комплексное положительное воздействие на растения, но с точки зрения промышленного использования в качестве основы для биопрепаратов бактерии рода Bacillus имеют существенное преимущество, так как образуют устойчивые покоящиеся формы - споры, которые позволяют производить биопродукты с большим сроком годности (не менее 1 года) без каких-либо дополнительных производственных этапов и/или внесения стабилизирующих и консервирующих добавок.Many different strains of microorganisms have been proposed and patented, proposed for use in the manufacture of biological products as the main active agents of biopesticides and / or biological fertilizers. A significant part of such microorganisms are representatives of the genera Bacillus and Pseudomonas. According to numerous studies, it is these bacteria that are most often found in the rhizosphere and rhizoplan of plants and form mutually beneficial associations with them. From the point of view of biological activity, both bacilli and pseudomonads can have a comprehensive positive effect on plants, but from the point of view of industrial use as a basis for biological products, bacteria of the genus Bacillus have a significant advantage, since they form stable resting forms - spores that allow the production of biological products with a long shelf life (at least 1 year) without any additional production steps and / or stabilizing and preserving additives.

Известны штаммы Bacillus subtilis ВНИИСХМ 128 (Авторское свидетельство №1717156, опубл. 07.03.1992) и биопрепарат Фитоспорин, созданный на основе этого штамма (Патент РФ №2099947, опубл. 27.12.1997), В. subtilis №10, являющийся основой биопрепарата Алирин Б (Патент РФ №2081167, опубл. 10.06.1997), В. subtilis В-40 (Патент РФ №2094990, опубл. 10.11.1997), В. subtilis 11 В (ВКМ В-2218Д) (Патент РФ №2182172, опубл. 10.05.2002), Bacillus pumilus BKM CR-333Д (Патент РФ №1817875, опубл. 20.05.1995), В. pumilus А1.5 (Патент РФ №2551968, опубл. 10.06.2015), Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-7767 (Патент РФ №2242125, опубл. 20.12.2004), Bacillus atrophaeus ВКПМ-11474 (Патент РФ №2570624, опубл. 10.12.2015). Недостатком всех вышеперечисленных штаммов является недостаточная биологическая активность, проявляющаяся в антагонизме к фитопатогенным и не только микроорганизмам и защите растений от некоторых заболеваний, при этом их влияние на урожайность растений остается неизвестным. Не все из указанных штаммов обладают достаточно широким спектром антагонистической активности, что ограничивает их применение, а некоторые из них проявляют антагонизм также и к полезным представителям почвенной микрофлоры, например штамм В. subtilis В-40 подавляет рост энтомопатогенного гриба Beauveria bassiana.Known strains of Bacillus subtilis VNIISKHM 128 (Copyright certificate No. 1717156, publ. 07.03.1992) and the biological product Fitosporin, created on the basis of this strain (RF Patent No. 2099947, publ. 12/27/1997), B. subtilis No. 10, which is the basis of the biological product Alirin B (RF Patent No. 2081167, publ. 06/10/1997), B. subtilis B-40 (RF Patent No. 2094990, publ. 10.11.1997), B. subtilis 11 V (VKM V-2218D) (RF Patent No. 2182172, publ. 10.05.2002), Bacillus pumilus BKM CR-333D (RF Patent No. 1817875, publ. 05.20.1995), B. pumilus A1.5 (RF Patent No. 2551968, publ. 10.06.2015), Brevibacillus laterosporus VKPM B- 7767 (RF Patent No. 2242125, publ. 12/20/2004), Bacillus atrophaeus VKPM-11474 (RF Patent No. 2570624, publ. 10/12/2015). The disadvantage of all the above strains is the lack of biological activity, manifested in antagonism to phytopathogenic and not only microorganisms and the protection of plants from some diseases, while their effect on plant productivity remains unknown. Not all of these strains have a wide enough spectrum of antagonistic activity, which limits their use, and some of them also antagonize useful representatives of soil microflora, for example, B. subtilis B-40 strain inhibits the growth of the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana.

Известен штамм Paenibacillus sp. ИБ-1 (BKM B-2823D) для получения биопрепарата против заболеваний пшеницы, вызываемых фитопатогенными грибами (Патент РФ №2539738, опубл. 27.01.2015). Штамм продуцирует цитокинины, способствует переводу труднорастворимых фосфатов в растворимую форму, фиксирует молекулярный азот и защищает проростки пшеницы от корневых гнилей в лабораторных условиях. Известен штамм бактерии Bacillus subtilis 1С-5 (ВКПМ В-7036), являющийся основой препарата «Фитоп» (Патент РФ №2086128, опубл. 10.08.1997), эффективно защищающий розы от мучнистой росы, огурцы - от ложной мучнистой росы, картофель - от фитофтороза, клевер - от пероноспороза. Известен штамм бактерии В. subtilis М-22, являющийся основой препарата Гамаир (Патент РФ №2084152, опубл. 20.07.1997), обладающий антагонистической активностью по отношению к фитопатогенным грибам и бактериям, защищающий растения томата от бактериальных инфекций в период вегетации. Однако известно о способности этих штаммов подавлять развитие лишь небольшого числа фитопатогенных грибов, и ничего неизвестно об их влиянии на урожайность растений.A known strain of Paenibacillus sp. IB-1 (BKM B-2823D) for obtaining a biological product against wheat diseases caused by phytopathogenic fungi (RF Patent No. 2539738, publ. 01.27.2015). The strain produces cytokinins, promotes the conversion of insoluble phosphates to a soluble form, fixes molecular nitrogen and protects wheat seedlings from root rot in the laboratory. A known bacterial strain Bacillus subtilis 1C-5 (VKPM B-7036), which is the basis of the drug "Fitop" (RF Patent No. 2086128, publ. 08/10/1997), effectively protects roses from powdery mildew, cucumbers - from downy mildew, potatoes - from late blight, clover - from peronosporosis. A known bacterial strain B. subtilis M-22, which is the basis of the drug Gamair (RF Patent No. 2084152, publ. 07.20.1997), which has antagonistic activity against phytopathogenic fungi and bacteria, protects tomato plants from bacterial infections during the growing season. However, the ability of these strains to inhibit the development of only a small number of phytopathogenic fungi is known, and nothing is known about their effect on plant productivity.

Известен штамм Bacillus subtilis M1 (Патент РФ №2307158, опубл. 27.09.2007). Указанный микроорганизм повышает всхожесть семян яровой пшеницы, стимулирует рост проростков, повышает их массу, снижает пораженность проростков возбудителями корневых гнилей, но практически не способствует повышению урожайности.The known strain of Bacillus subtilis M1 (RF Patent No. 2307158, publ. 09/27/2007). The specified microorganism increases the germination of spring wheat seeds, stimulates the growth of seedlings, increases their mass, reduces the damage of seedlings by root rot pathogens, but practically does not contribute to increased productivity.

Известны штаммы бактерий, которые не только проявляют антагонизм по отношению к различным фитопатогенам и защищают растения от болезней, но и достоверно повышают урожайность. В качестве примеров можно привести штаммы Bacillus sp.739 (Патент РФ №1743019, опубл. 30.05.1994), В. subtilis 4-13 - основа препарата «Экстрасол» (Патент РФ №2259397, опубл. 27.08.2005), Bacillus mycoides var. В.А. ВНИИСХМ Д138 - основа препарата «Экстрагран» (Патент РФ №2284353, опубл. 27.09.2006), Bacillus spp. KR-083 (Патент РФ №2295562, опубл. 20.03.2007), Bacillus licheniformis ВКПМ В-10561, В-10562, В-10563, В-10564 (Патент РФ №2440413, опубл. 20.01.2012), В. subtilis 8А (Патент РФ №2495119, опубл. 10.10.2013), Bacillus amyloliquefaciens ВКПМ В-11475 (Патент РФ №2528058). Однако ничего не известно об их антифунгальной активности в отношении таких фитопатогенов, как Claviceps purpurea (возбудитель спорыньи), Rhizopus stolonifer (возбудитель гнилей плодов у клубники, томатов и др., возбудитель сухой гнили, например, корзинок подсолнечника), Cercospora beticola (возбудитель церкоспороза сахарной свеклы), Passalora fulva (листовая гниль томатов). Кроме того, отсутствуют сведения об устойчивости этих штаммов к химическим пестицидам.Bacterial strains are known that not only show antagonism to various phytopathogens and protect plants from diseases, but also significantly increase productivity. As examples, we can cite the strains of Bacillus sp.739 (RF Patent No. 1743019, publ. 05/30/1994), B. subtilis 4-13 - the basis of the drug "Extrasol" (RF Patent No. 2259397, publ. 08/27/2005), Bacillus mycoides var. V.A. VNIISKHM D138 - the basis of the drug "Extragran" (RF Patent No. 2284353, publ. 09/27/2006), Bacillus spp. KR-083 (RF Patent No. 2295562, publ. 20.03.2007), Bacillus licheniformis VKPM B-10561, B-10562, B-10563, B-10564 (RF Patent No. 2440413, publ. 20.01.2012), B. subtilis 8A (RF Patent No. 2495119, publ. 10.10.2013), Bacillus amyloliquefaciens VKPM B-11475 (RF Patent No. 2528058). However, nothing is known about their antifungal activity against phytopathogens such as Claviceps purpurea (ergot pathogen), Rhizopus stolonifer (pathogen of fruit rot in strawberries, tomatoes, etc., the pathogen of dry rot, for example, sunflower baskets), Cercospora beticola (pathogen sugar beets), Passalora fulva (leaf rot of tomatoes). In addition, there is no evidence of the resistance of these strains to chemical pesticides.

Наиболее близкими к достигаемому результату и рассматриваемыми в качестве наиболее близких аналогов являются штаммы В. subtilis BZR 517 (Патент РФ №2552146, опубл. 10.06.2015) и В. subtilis BZR 336g (Патент РФ №2553518, опубл. 20.06.2015). Эти штаммы являются антагонистами фитопатогенных грибов, защищают растения озимой пшеницы и подсолнечника от болезней в полевых условиях, способствуют повышению их урожайности, и при этом совместимы с химическими гербицидами и инсектицидами. Однако для этих бактерий выявлен узкий спектр фитопатогенов, которых они подавляют, ничего неизвестно о механизмах стимуляции роста растений, а также об устойчивости указанных штаммов к химическим фунгицидам, и, кроме того, неизвестно их влияние на полезных представителей почвенной микрофлоры.The closest to the achieved result and considered as the closest analogues are the strains B. subtilis BZR 517 (RF Patent No. 2552146, publ. 06/10/2015) and B. subtilis BZR 336g (RF Patent No. 2553518, publ. 06/20/2015). These strains are antagonists of phytopathogenic fungi, protect winter wheat and sunflower plants from diseases in the field, increase their productivity, and are compatible with chemical herbicides and insecticides. However, for these bacteria a narrow spectrum of phytopathogens that they suppress was revealed, nothing is known about the mechanisms of stimulation of plant growth, as well as about the resistance of these strains to chemical fungicides, and, in addition, their effect on beneficial representatives of soil microflora is unknown.

Задачей заявленного изобретения является выделение нового природного штамма, обладающего антагонистической активностью по отношению к фитопатогенным микроорганизмам, защищающего растения от болезней, стимулирующего их рост и повышающего урожайность, способного к мобилизации труднорастворимых соединений фосфора, устойчивого к химическим средствам защиты растений и не угнетающего полезную почвенную микрофлору.The objective of the claimed invention is the selection of a new natural strain with antagonistic activity against phytopathogenic microorganisms, protecting plants from diseases, stimulating their growth and increasing productivity, capable of mobilizing sparingly soluble phosphorus compounds that are resistant to chemical plant protection products and do not inhibit beneficial soil microflora.

Эта задача решается благодаря выделению и использованию штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32, депонированного во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под номером В-12464. Штамм был выделен из ризосферы яровой пшеницы, произраставшей в Гафурийском районе республики Башкортостан. Видовая принадлежность культуры была определена на основании результатов секвенирования гена 16S рРНК в ГНУ ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии Россельхозакадемии и подтверждена во ФГУП ГосНИИГенетика посредством повторного секвенирования и идентификации с помощью видоспецифичных праймеров.This problem is solved thanks to the isolation and use of the strain Bacillus amyloliquefaciens OPS-32, deposited in the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms under the number B-12464. The strain was isolated from the rhizosphere of spring wheat, which grew in the Gafuri region of the Republic of Bashkortostan. The species affiliation of the culture was determined based on the results of sequencing of the 16S rRNA gene at the State Scientific Research Institute of Agricultural Microbiology of the Russian Agricultural Academy and confirmed at the State Research Institute of Genetics and Genetics by repeated sequencing and identification using species-specific primers.

Заявленный штамм имеет следующие характеристики.The claimed strain has the following characteristics.

Культурально-морфологические признакиCultural and morphological features

Клетки штамма представляют собой грамположительные аэробные спорообразующие прямые палочки с закругленными концами размером 1,5-2,5×0,5-0,7 мкм; располагаются, как правило, парами или одиночно, цепочки встречаются реже. При спорообразовании клетки не раздуваются, споры эллипсовидные, расположены центрально.The cells of the strain are gram-positive aerobic spore-forming straight bacilli with rounded ends with a size of 1.5-2.5 × 0.5-0.7 microns; usually arranged in pairs or singly, chains are less common. When spore formation, the cells do not swell, the spores are ellipsoidal, located centrally.

На мясо-пептонном агаре (МПА) через 2 суток образует округлые колонии с фестончатым краем и кратерообразным центром, 6-7 мм в диаметре; с преимущественно складчато-бороздчатой поверхностью (у «кратера» поверхность гладкая), матовые, непрозрачные, цвет - в основном молочно-белый, в бороздах - серовато-бежевый. Колонии имеют выпуклое основание, рельефные складки и значительно приподнятый центральный кратер; обладают вязкой, тягучей консистенцией, при этом имеют наружный мягкий кожистый слой, в агар не врастают.On meat-peptone agar (MPA) after 2 days it forms rounded colonies with a scalloped edge and a crater-shaped center, 6-7 mm in diameter; with a predominantly folded-furrowed surface (the “crater” has a smooth surface), opaque, opaque, the color is mainly milky white, and in the furrows it is grayish-beige. The colonies have a convex base, relief folds and a significantly elevated central crater; they have a viscous, viscous consistency, while they have an external soft leathery layer, they do not grow into agar.

На картофельно-глюкозном агаре (КГА) через 2 суток образует круглые колонии с фестончатым краем и центром в виде узкого конуса, 5-10 мм в диаметре, складчатые, матовые, непрозрачные, молочно-белого цвета. Колонии имеют плоское основание, рельефные складки и приподнимающийся центр; обладают вязкой, тягучей консистенцией, при этом имеют наружный мягкий кожистый слой, в агар не врастают.On potato-glucose agar (KGA) after 2 days it forms round colonies with a scalloped edge and a center in the form of a narrow cone, 5-10 mm in diameter, folded, opaque, opaque, milky white in color. Colonies have a flat base, embossed folds and a rising center; they have a viscous, viscous consistency, while they have an external soft leathery layer, they do not grow into agar.

Физиолого-биохимические свойстваPhysiological and biochemical properties

Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 является аэробной, хемоорганогетеротрофной бактерией, не нуждающейся в факторах роста. Растет в диапазоне температур от 10 до 47°C с оптимальным диапазоном 28-32°C, при значениях рН среды от 4,5 до 8,5 с оптимумом 7,0-7,5, при концентрации хлорида натрия до 7%.Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 is an aerobic, chemo-organo-heterotrophic bacterium that does not require growth factors. It grows in the temperature range from 10 to 47 ° C with an optimal range of 28-32 ° C, at pH values from 4.5 to 8.5 with an optimum of 7.0-7.5, at a concentration of sodium chloride up to 7%.

Проявляет активность триптофандеаминазы и желатиназы. Активность β-галактозидазы (ортонитрофенил-βD-галактопиранозидазы), аргининдигидролазы, лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы, уреазы не выявлена. Не продуцирует индол и сероводород и не восстанавливает нитраты. Реакция Фогес-Проскауэра (продукция ацетоина) положительная.It shows the activity of tryptofandeaminase and gelatinase. The activity of β-galactosidase (ortonitrophenyl-βD-galactopyranosidase), arginine dihydrolase, lysine decarboxylase, ornithine decarboxylase, urease was not detected. Does not produce indole and hydrogen sulfide and does not reduce nitrates. The Voges-Proskauer reaction (production of acetoin) is positive.

В качестве источника углерода и энергии утилизирует D-глюкозу, D-фруктозу, D-ксилозу, D-рибозу, L-арабинозу, D-маннозу, D-маннит, инозит, D-сорбит, метил-αD-маннопиранозид, метил-αD-глюкопиранозид, D-мальтозу, D-целлобиозу, D-лактозу, амигдалин, арбутин, эскулин, салицин, D-мелибиозу, D-сахарозу, D-трегалозу, D-раффинозу, крахмал, гликоген, гентибиозу, глицерин, цитрат.It utilizes D-glucose, D-fructose, D-xylose, D-ribose, L-arabinose, D-mannose, D-mannitol, inositol, D-sorbitol, methyl-αD-mannopyranoside, methyl-αD as a source of carbon and energy -glucopyranoside, D-maltose, D-cellobiose, D-lactose, amygdalin, arbutin, esculin, salicin, D-melibiosis, D-sucrose, D-trehalose, D-raffinose, starch, glycogen, gentibiosis, glycerin, citrate.

Не утилизирует эритритол, D-арабинозу, D-адонитол, D-галактозу, L-ксилозу, L-сорбозу, L-рамнозу, метил-βD-ксилопиранозид, дульцитол, N-ацетилглюкозамин, инулин, D-мелецитозу, ксилит, D-туранозу, D-ликсозу, D-тагатозу, D-фукозу, D-арабит, L-арабит, глюконат калия, 2-кетоглюконат калия, 5-кетоглюконат калия.Does not utilize erythritol, D-arabinose, D-adonitol, D-galactose, L-xylose, L-sorbose, L-rhamnose, methyl-βD-xylopyranoside, dulcitol, N-acetylglucosamine, inulin, D-melecitose, xylitol, D- turanose, D-lyxose, D-tagatose, D-fucose, D-arabitol, L-arabitol, potassium gluconate, potassium 2-ketogluconate, potassium 5-ketogluconate.

Штамм хранится при 4-6°C в пробирках под ватно-марлевыми пробками со скошенным МПА или среде Громыко (состав: мясо-пептонный бульон и сусло пивное неохмеленное с концентрацией сахаров 7% (7° Баллинга), взятых в соотношении 1:1, с добавлением 2,0% агар-агара, рН среды 7,0-7,2) под вазелиновым маслом, которое наливается в пробирки по истечению 2-х суток роста культуры. В таких условиях срок хранения штамма без пересева составляет не менее 1 года.The strain is stored at 4-6 ° C in test tubes under cotton-gauze corks with beveled MPA or Gromyko medium (composition: meat-peptone broth and beer wort un hopped with a sugar concentration of 7% (7 ° Balling), taken in a 1: 1 ratio, with the addition of 2.0% agar-agar, pH 7.0-7.2) under liquid paraffin, which is poured into test tubes after 2 days of culture growth. Under such conditions, the shelf life of the strain without reseeding is at least 1 year.

Штамм хорошо растет на МПА, КГ А, питательном агаре, среде LB, сусло-агаре (состав: концентрат сусла пивного неохмеленного, разбавленный дистиллированной водой до общей концентрации сахаров 10% (10° Баллинга), рН 7,0-7,2 с добавлением 2,0% агар-агара), среде Громыко, среде Гаузе №2 (состав: триптон - 2,5 г; пептон - 5,0 г; NaCI - 5,0 г; глюкоза - 10,0 г; агар-агар - 20 г; вода водопроводная - 1000 мл; рН - 7,0-7,4). Ферментация осуществляется на смеси равных объемов мясо-пептонного бульона и 6°Б неохмеленного пивного сусла (рН 6,9-7,2) при 30°C до 95% спорообразования. Количество КОЕ составляет не менее 5×109 в 1 мл.The strain grows well on MPA, KG A, nutrient agar, LB medium, wort agar (composition: unsweetened beer wort concentrate diluted with distilled water to a total sugar concentration of 10% (10 ° Balling), pH 7.0-7.2 s the addition of 2.0% agar-agar), Gromyko medium, Gause medium No. 2 (composition: tryptone - 2.5 g; peptone - 5.0 g; NaCI - 5.0 g; glucose - 10.0 g; agar- agar - 20 g; tap water - 1000 ml; pH - 7.0-7.4). Fermentation is carried out on a mixture of equal volumes of meat-peptone broth and 6 ° B of un hopped beer wort (pH 6.9-7.2) at 30 ° C to 95% spore formation. The amount of CFU is at least 5 × 10 9 in 1 ml.

Исследование патогенности заявляемого штамма для теплокровных животных были проведены в ГБОУ ВПО Башкирском государственном медицинском университете, в результате которых было получено заключение о том, что по показателям вирулентности, диссеминации, токсичности и токсигенности штамм Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 не патогенен для теплокровных животных и удовлетворяет требованиям, предъявляемым к промышленным микроорганизмам.A study of the pathogenicity of the claimed strain for warm-blooded animals was carried out in the SBEI HPE of Bashkir State Medical University, which resulted in the conclusion that, in terms of virulence, dissemination, toxicity and toxigenicity, the strain Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 is not pathogenic for warm-blooded animals and meets the requirements presented to industrial microorganisms.

Более подробно сущность описываемого изобретения раскрывается в приведенных ниже примерах.In more detail the essence of the described invention is disclosed in the examples below.

Пример 1. Исследование антагонистической активности штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32Example 1. The study of the antagonistic activity of the strain of Bacillus amyloliquefaciens OPS-32

Для выявления антагонизма изучаемого штамма к фитопатогенным микроорганизмам использовали метод агаровых блоков. На чашки Петри с КГА высевали сплошным газоном суспензию спор и фрагментов мицелия фитопатогенов. Одновременно в отдельную чашку Петри с той же средой сеяли газоном споровую культуру Bacillus amyloliquefaciens OPS-32, полученную на среде для ферментации. Всех микроорганизмов помещали на 3-5 часов в термостаты при температуре 25°C и 30°C для того, чтобы конидии и споры проросли. По прошествии указанного времени из среды, на которой росли бациллы, стерильным пробочным сверлом вырезали агаровые блоки и посредством микробиологической иглы помещали их в чашки Петри с фитопатогенами так, чтобы та сторона блока, на которой находились бактерии, оказалась непосредственно прилегающей к поверхности среды с развивающейся культурой фитопатогена. Контролем служили газоны фитопатогенов, посеянные одновременно с экспериментальными, но к которым не помещали агаровые блоки с бациллами. Контрольные и опытные чашки с культурами помещали в термостат при 27°C. Наблюдения проводили на 2-5 сутки в зависимости от скорости роста фитопатогена.To identify the antagonism of the studied strain to phytopathogenic microorganisms, the agar block method was used. A suspension of spores and phytopathogenic mycelial fragments was sown on a Petri dish with KHA. At the same time, a spore culture of Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 obtained on a fermentation medium was sown in a separate Petri dish with the same medium. All microorganisms were placed for 3-5 hours in thermostats at 25 ° C and 30 ° C so that conidia and spores germinated. After this time, the agar blocks were cut out from the medium on which the bacilli grew, using a microbiological needle and placed into Petri dishes with phytopathogens so that the side of the block on which the bacteria were located was directly adjacent to the surface of the medium with a developing culture phytopathogen. The control was lawns of phytopathogens sown simultaneously with experimental ones, but to which no agar blocks with bacilli were placed. Control and experimental plates with cultures were placed in a thermostat at 27 ° C. Observations were carried out on days 2-5, depending on the growth rate of the phytopathogen.

Этот способ определения антагонистической активности принято считать полуколичественным, и представление результатов в виде площади зон подавления роста тест-объектов является не совсем корректным. Это связано с тем, что при такой постановке опыта антагонизм между микроорганизмами реализуется за счет продукции ими различных антимикробных метаболитов. В свою очередь, эти метаболиты диффундируют в питательную среду, поэтому накопление их в конкретной точке питательной среды и, соответственно, размер области, где наблюдаются проявления антагонизма, зависит от объема среды, а также от качества и плотности агара. В связи с этим результаты определения антагонистической активности штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 представлены в виде фотографий на фиг. 1.This method of determining antagonistic activity is considered to be semi-quantitative, and the presentation of the results in the form of the area of zones of inhibition of growth of test objects is not entirely correct. This is due to the fact that with this formulation of experience, antagonism between microorganisms is realized due to the production of various antimicrobial metabolites by them. In turn, these metabolites diffuse into the nutrient medium, therefore, their accumulation at a specific point in the nutrient medium and, accordingly, the size of the region where manifestations of antagonism are observed depends on the volume of the medium, as well as on the quality and density of agar. In this regard, the results of determining the antagonistic activity of the strain Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 are presented in the form of photographs in FIG. one.

Согласно представленной информации, штамм Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 является мощным антагонистом и обладает широким спектром активности; все использованные в исследовании тест-объекты проявили чувствительность к антагонистичному штамму.According to the information presented, the strain of Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 is a powerful antagonist and has a wide spectrum of activity; all test objects used in the study showed sensitivity to the antagonistic strain.

Пример 2. Лабораторные испытания эффективности штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32Example 2. Laboratory tests of the effectiveness of the strain of Bacillus amyloliquefaciens OPS-32

В качестве объекта исследования использовали семена озимой пшеницы сорта Айвина. Семена обрабатывали полусухим способом жидкой споровой культурой штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 с титром 5×109 КОЕ/мл, полученной в результате глубинного культивирования штамма на среде для ферментации. Контрольные семена обрабатывали водой, а в качестве стандарта использовали биофунгицид Бактофит, Ж (на основе бактерии Bacillus subtilis, штамм ИПМ 215) с нормой расхода 3 л/т, рекомендованной производителем. Расход рабочего раствора - 10 л/т. Через сутки после обработки семена помещали во влажную камеру и выдерживали при 25°C. Учет развития гриба на семенах проводили через 3 суток, а измерение длины корня и ростка - через 6 суток после размещения во влажной камере. Результаты представлены в таблице 1.The seeds of winter wheat of the Ivina variety were used as an object of study. The seeds were treated semi-dry with a liquid spore culture of a strain of Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 with a titer of 5 × 10 9 CFU / ml, obtained by deep cultivation of the strain on a fermentation medium. The control seeds were treated with water, and Bactofit, B (based on the Bacillus subtilis bacterium, strain IPM 215) with a flow rate of 3 l / t recommended by the manufacturer was used as a standard. The flow rate of the working solution is 10 l / t. A day after treatment, the seeds were placed in a moist chamber and kept at 25 ° C. The development of the fungus on the seeds was taken into account after 3 days, and the length of the root and sprout was measured 6 days after being placed in a moist chamber. The results are presented in table 1.

Figure 00000001
Figure 00000001

Согласно приведенным данным оптимальной нормой расхода жидкой культуры В. amyloliquefaciens OPS-32 с титром 5×109 КОЕ/мл была 0,5 л/т. Стимулирующее и фунгицидное действие обработки семян в этом случае достоверно превышало показатели в контроле. Также стимуляция роста корней и фунгицидная активность проявлялись в случае использования штамма В. amyloliquefaciens OPS-32 сильнее, чем при воздействии Бактофита, Ж.According to the data presented, the optimal rate of liquid culture consumption of B. amyloliquefaciens OPS-32 with a titer of 5 × 10 9 CFU / ml was 0.5 l / t. The stimulating and fungicidal effect of seed treatment in this case was significantly higher than in the control. Also, stimulation of root growth and fungicidal activity were manifested in the case of the use of strain B. amyloliquefaciens OPS-32 stronger than when exposed to Bactofit, J.

Пример 3. Выявление способности к мобилизации труднорастворимых соединений фосфораExample 3. Identification of the ability to mobilize insoluble phosphorus compounds

Одним из аспектов положительного влияния микроорганизмов на растения является улучшение их минерального питания. Поэтому способность к переводу труднорастворимых соединений макро- и микроэлементов в растворимую форму, пригодную для поглощения корнями, является важным фактором стимуляции роста и развития растений.One aspect of the positive effect of microorganisms on plants is to improve their mineral nutrition. Therefore, the ability to convert sparingly soluble compounds of macro- and microelements into a soluble form suitable for root absorption is an important factor in stimulating plant growth and development.

Оценку способности штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 мобилизовать труднодоступные соединения фосфора оценивали на среде Пиковской (состав: глюкоза - 10 г/л, сульфат аммония - 0,5 г/л, хлорид калия - 0,2 г/л, сульфат магния - 0,1 г/л, сульфат марганца - 0,0001 г/л, сульфат железа (II) - 0,0001 г/л) с добавлением труднорастворимого трехзамещенного ортофосфата кальция в количестве 5 г/л. Культуру штамма помещали на среду в виде агарового блока так же, как описано в примере 1, и инкубировали при 30°С в течение трех суток. О наличии у штамма выявляемой способности судили по появлению вокруг агарового блока зон просветления среды. Поскольку метод является полуколичественным, результаты представлены на фиг. 2.The ability of the Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 strain to mobilize hard-to-reach phosphorus compounds was evaluated on Pikovskaya medium (composition: glucose - 10 g / l, ammonium sulfate - 0.5 g / l, potassium chloride - 0.2 g / l, magnesium sulfate - 0 , 1 g / l, manganese sulfate - 0.0001 g / l, iron (II) sulfate - 0.0001 g / l) with the addition of sparingly soluble trisubstituted calcium orthophosphate in an amount of 5 g / l. The strain culture was placed on the medium in the form of an agar block in the same manner as described in example 1, and incubated at 30 ° C for three days. The presence of a detectable ability of the strain was judged by the appearance of medium enlightenment zones around the agar block. Since the method is semi-quantitative, the results are presented in FIG. 2.

На фотографии хорошо заметно, что зоны просветления среды намного обширнее, чем площадь, занятая бактериальными клетками. В связи с этим можно сделать вывод о ярко выраженной способности штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 к мобилизации труднорастворимых фосфатов.The photograph clearly shows that the zones of enlightenment of the medium are much wider than the area occupied by bacterial cells. In this regard, it can be concluded that the Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 strain has a pronounced ability to mobilize insoluble phosphates.

Пример 4. Оценка эффективности обработки растений штаммом Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 в полевых условияхExample 4. Evaluation of the effectiveness of processing plants with a strain of Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 in the field

Для проведения эксперимента использовали жидкую споровую культуру Bacillus amyloliquefaciens OPS-32, выращенную на среде для ферментации, с титром 5×109 КОЕ/мл. Оценку проводили в полевом мелкоделяночном эксперименте на растениях яровой пшеницы сорта Экада 66. Схема опыта была следующая: 1) контроль (протравливание семян водой + опрыскивание вегетирующих растений водой); 2) В. amyloliquefaciens OPS-32 (протравливание семян 0,2 л/т + опрыскивание вегетирующих растений 0,2 л/га); 3) В. amyloliquefaciens OPS-32 (протравливание семян 0,2 л/т + опрыскивание вегетирующих растений 0,3 л/га); 4) В. amyloliquefaciens OPS-32 (протравливание семян 0,2 л/т + опрыскивание вегетирующих растений 0,4 л/га).For the experiment, a Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 liquid spore culture grown on a fermentation medium with a titer of 5 × 10 9 CFU / ml was used. The evaluation was carried out in a small-plot field experiment on Ekada 66 spring wheat plants. The experimental design was as follows: 1) control (seed treatment with water + spraying vegetative plants with water); 2) B. amyloliquefaciens OPS-32 (seed dressing 0.2 l / t + spraying of vegetative plants 0.2 l / ha); 3) B. amyloliquefaciens OPS-32 (seed treatment 0.2 l / t + spraying vegetative plants 0.3 l / ha); 4) B. amyloliquefaciens OPS-32 (seed dressing 0.2 l / t + spraying vegetative plants 0.4 l / ha).

В таблице 2 представлены наблюдения за развитием корневых гнилей в фазу третьего листа и в конце цветения.Table 2 presents observations of the development of root rot in the phase of the third leaf and at the end of flowering.

Figure 00000002
Figure 00000002

Как видно из таблицы, заявляемый бактериальный штамм сдерживал распространение болезни по посевам, но еще в большей степени снижал ее развитие. Также обработка растений В. amyloliquefaciens OPS-32 уменьшала развитие на листьях мучнистой росы (таблица 3).As can be seen from the table, the claimed bacterial strain restrained the spread of the disease in crops, but even more reduced its development. Also, the treatment of B. amyloliquefaciens OPS-32 plants reduced the development on powdery mildew leaves (Table 3).

Figure 00000003
Figure 00000003

Figure 00000004
Figure 00000004

Результаты обработки растений культурой штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 представлены в таблице 4.The results of processing plants with a culture of a strain of Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 are presented in table 4.

Figure 00000005
Figure 00000005

Представленные данные свидетельствуют о высокой биологической эффективности штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32, выражающейся в снижении заболеваемости и повышении урожайности сельскохозяйственных культур, в частности яровой пшеницы.The data presented indicate the high biological effectiveness of the strain of Bacillus amyloliquefaciens OPS-32, which is manifested in a decrease in the incidence and increase in crop yields, in particular spring wheat.

Пример 5. Оценка совместимости штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 с химическими средствами защиты растенийExample 5. Evaluation of the compatibility of the strain of Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 with chemical plant protection products

В настоящее время невозможно представить полный отказ производства растениеводческой продукции от химических средств защиты растений. Поэтому при внедрении в эту область биологических препаратов на основе живых микроорганизмов всегда следует учитывать то, что обработка растений будет проводиться биологическими и химическими агентами совместно. Производить обработки каждым необходимым препаратом в отдельности экономически невыгодно, а в случае предпосевной обработки семян - бесполезно, так как до посева семена должны быть обработаны всеми необходимыми препаратами. В связи с этим нами была проведена оценка выживаемости штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 в рабочих растворах некоторых фунгицидов и гербицидов. Для этого готовили рабочие растворы пестицидов согласно инструкциям производителей, в которые добавляли жидкую споровую культуру штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32. В контрольном варианте ту же культуру штамма добавляли в стерильную водопроводную воду. Оценку жизнеспособности спор штамма проводили через 4 часа и через 24 часа после внесения бактерий в рабочие растворы пестицидов. Результаты представлены в таблице 5.At present, it is impossible to imagine a complete rejection of crop production from chemical plant protection products. Therefore, when introducing biological preparations based on living microorganisms into this area, one should always take into account that the treatment of plants will be carried out by biological and chemical agents together. It is economically unprofitable to treat each necessary preparation separately, and in the case of pre-sowing seed treatment it is useless, since before sowing the seeds must be processed with all necessary preparations. In this regard, we evaluated the survival of the strain Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 in working solutions of some fungicides and herbicides. For this, working solutions of pesticides were prepared according to the instructions of the manufacturers, to which a liquid spore culture of the Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 strain was added. In a control, the same strain culture was added to sterile tap water. Assessment of the viability of the spores of the strain was carried out after 4 hours and 24 hours after the introduction of bacteria into the working solutions of pesticides. The results are presented in table 5.

Figure 00000006
Figure 00000006

* - действующее вещество (ДВ) - тебуконазол, 60 г/л (ООО НПО «РосАгроХим»);* - active substance (DV) - tebuconazole, 60 g / l (LLC NPO RosAgroChem);

** - ДВ - тебуконазол, 250 г/л (ЗАО Фирма «Август»);** - DV - tebuconazole, 250 g / l (ZAO August Company);

*** - ДВ - пропиконазол 300 г/л + тебуконазол 200 г/л (ЗАО Фирма «Август»);*** - DV - propiconazole 300 g / l + tebuconazole 200 g / l (CJSC August Company);

**** - ДВ - флутриафол, 250 г/л (АРИСТА ЛАЙФСАЙЕНС САС);**** - DV - flutriafol, 250 g / l (ARISTA LIFE SCIENCE SAS);

***** - ДВ - глифосат (изопропиламинная соль), 360 г/л (ЗАО Фирма «Август»);***** - DV - glyphosate (isopropylamine salt), 360 g / l (ZAO August Company);

****** - ДВ - метсульфурон-метил, 600 г/кг (Дюпон де Немур Интернэшнл С.А.);****** - DV - Metsulfuron-methyl, 600 g / kg (Dupont de Nemour International S.A.);

******* - ДВ хлорсульфурон, 750 г/кг (ООО «Дюпон Наука и Технологии»);******* - DV chlorosulfuron, 750 g / kg (Dupont Science and Technology LLC);

******** - ДВ - 2,4-Д (ООО «Агрусхим»).******** - DV - 2,4-D (LLC Agruskhim).

Согласно приведенным данным, в рабочих растворах исследованных пестицидов штамм сохраняет жизнеспособность не хуже, чем в воде даже после 24 часов инкубации. Единственным исключением стал гербицид на основе 2,4-Д, в рабочем растворе которого число жизнеспособных спор через сутки инкубации существенно снижалось. Однако гибель спор происходит относительно медленно (через 3 часа инкубации их число на уровне контрольного варианта), поэтому при оперативном использовании можно совмещать этот гербицид и культуру штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 в общем рабочем растворе.According to the data presented, in working solutions of the studied pesticides, the strain remains viable no worse than in water even after 24 hours of incubation. The only exception was a 2,4-D-based herbicide, in the working solution of which the number of viable spores decreased significantly after a day of incubation. However, spore death occurs relatively slowly (after 3 hours of incubation, their number is at the level of the control variant), therefore, with operational use, this herbicide and the culture of the Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 strain can be combined in a common working solution.

Пример 6. Оценка влияния штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 на представителей полезной почвенной микрофлорыExample 6. Evaluation of the effect of the strain of Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 on representatives of beneficial soil microflora

Поскольку штамм Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 существенно подавляет рост фитопатогенной микрофлоры, следовало также оценивать его воздействие и на дружественных растениям представителей почвенного микробиоценоза. В качестве представителей «полезной» почвенной микрофлоры в исследовании были использованы азотфиксирующие бактерии Rhizobium sp., Azospirillum sp., Azotobacter sp., выделенные и идентифицированные в научно-исследовательской лаборатории ООО «Органик парк» по культурально-морфологическим и физиолого-биохимическим признакам, а также штамм Pseudomonas fluorescens Е4, предоставленный сотрудниками кафедры биохимии Казанского Федерального Университета.Since the strain of Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 significantly inhibits the growth of phytopathogenic microflora, its effect on plant-friendly representatives of soil microbiocenosis should also be evaluated. Nitrogen-fixing bacteria Rhizobium sp., Azospirillum sp., Azotobacter sp., Isolated and identified in the research laboratory of Organic Park LLC according to cultural-morphological and physiological-biochemical characteristics, were used as representatives of the “beneficial” soil microflora in the study. also the strain Pseudomonas fluorescens E4 provided by the staff of the Department of Biochemistry of Kazan Federal University.

Вероятный антагонизм по отношению к указанным бактериям выявляли методом агаровых блоков так же, как описано в примере 1. Результаты представлены на фиг.3.Probable antagonism in relation to these bacteria was detected by the method of agar blocks in the same way as described in example 1. The results are presented in figure 3.

Как видно из рисунка, клетки Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 и тест-культур вплотную соприкасаются в условиях двойной культуры, при этом признаков угнетения роста какой-либо из культур не наблюдается. Исходя из этого можно сделать, что Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 не проявляет антагонизма по отношению к различным представителям «полезной» почвенной микрофлоры.As can be seen from the figure, Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 cells and test cultures are in close contact in a double culture, and no signs of growth inhibition are observed in any of the cultures. Based on this, we can conclude that Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 does not show antagonism with respect to various representatives of “useful” soil microflora.

Таким образом, технический результат заявляемого изобретения - стимуляция роста сельскохозяйственных растений и защита их от фитопатогенов, следствием чего является повышение их урожайности. Он достигается тем, что в качестве средства для обработки растений используется штамм бактерии Bacillus amyloliquefaciens OPS-32, обладающий комплексом полезных свойств, таких как способность подавлять рост фитопатогенных грибов и защищать растения от болезней, стимулировать рост проростков, мобилизовать труднорастворимые соединения фосфора, повышать урожайность, при этом устойчивый к химическим пестицидам и не угнетающий развитие полезных для растений представителей почвенной микрофлоры.Thus, the technical result of the claimed invention is to stimulate the growth of agricultural plants and protect them from phytopathogens, which results in an increase in their productivity. It is achieved by the fact that the bacterial strain Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 is used as a plant treatment agent, which has a range of useful properties, such as the ability to inhibit the growth of phytopathogenic fungi and protect plants from diseases, stimulate the growth of seedlings, mobilize insoluble phosphorus compounds, and increase productivity, it is resistant to chemical pesticides and does not inhibit the development of soil microflora useful for plants.

Claims (1)

Штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens OPS-32, депонированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под номером В-12464, для получения биопрепарата комплексного действия для защиты сельскохозяйственных растений от фитопатогенных грибов, стимуляции их роста и повышения урожайности.The bacterial strain Bacillus amyloliquefaciens OPS-32, deposited in the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms under the number B-12464, to obtain a biological product of complex action to protect agricultural plants from phytopathogenic fungi, stimulate their growth and increase productivity.
RU2016123126A 2016-06-10 2016-06-10 Bacillus amyloliquefaciens ops-32 bacteria stain for the production of complete biopreparate for protection of agricultural plants from phytopathogenic mushrooms, stimulation of their growth and increase in yield RU2625977C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2016123126A RU2625977C1 (en) 2016-06-10 2016-06-10 Bacillus amyloliquefaciens ops-32 bacteria stain for the production of complete biopreparate for protection of agricultural plants from phytopathogenic mushrooms, stimulation of their growth and increase in yield

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2016123126A RU2625977C1 (en) 2016-06-10 2016-06-10 Bacillus amyloliquefaciens ops-32 bacteria stain for the production of complete biopreparate for protection of agricultural plants from phytopathogenic mushrooms, stimulation of their growth and increase in yield

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2625977C1 true RU2625977C1 (en) 2017-07-20

Family

ID=59495533

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016123126A RU2625977C1 (en) 2016-06-10 2016-06-10 Bacillus amyloliquefaciens ops-32 bacteria stain for the production of complete biopreparate for protection of agricultural plants from phytopathogenic mushrooms, stimulation of their growth and increase in yield

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2625977C1 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2701500C1 (en) * 2018-09-28 2019-09-26 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Национального исследовательского центра "Курчатовский институт" (НИЦ "Курчатовский институт" - ГосНИИгенетика) Strain of spore-forming bacteria bacillus amyloliquefaciens, having fungicidal action against phytopathogenic fungi, causing diseases of vegetable plants, a biological preparation based thereon
RU2736424C1 (en) * 2019-12-13 2020-11-17 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Казанский государственный аграрный университет" (ФГБОУ ВО Казанский ГАУ) Bacterial strain bacillus amyloliquefaciens recb-95 for production of biopreparation for protection of agricultural plants from stresses, stimulation of their growth and increase of crop capacity
RU2846734C1 (en) * 2024-11-06 2025-09-12 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии" Bacillus atrophaeus bacteria strain ad22 as soya plant productivity increasing agent and their protection against phytopathogenic fungi

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2528058C1 (en) * 2013-06-04 2014-09-10 Федеральное государственное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") Strains of bacteria bacillus amyloliquefaciens, having fungicidal and bactericidal action, and biological product on its basis for protection of grain plants against diseases caused by phytopathogenic fungi
RU2552146C1 (en) * 2013-11-20 2015-06-10 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт биологической защиты растений Российской академии сельскохозяйственных наук STRAIN OF BACTERIUM Bacillus subtilis BZR 517 FOR OBTAINING BIOPREPARATION AGAINST PHYTOPATHOGENIC FUNGI
RU2553518C1 (en) * 2013-11-20 2015-06-20 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт биологической защиты растений Российской академии сельскохозяйственных наук STRAIN OF BACTERIA Bacillus subtilis FOR OBTAINING BIOPREPARATION AGAINST PHYTOPATHOGENIC FUNGI

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2528058C1 (en) * 2013-06-04 2014-09-10 Федеральное государственное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") Strains of bacteria bacillus amyloliquefaciens, having fungicidal and bactericidal action, and biological product on its basis for protection of grain plants against diseases caused by phytopathogenic fungi
RU2552146C1 (en) * 2013-11-20 2015-06-10 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт биологической защиты растений Российской академии сельскохозяйственных наук STRAIN OF BACTERIUM Bacillus subtilis BZR 517 FOR OBTAINING BIOPREPARATION AGAINST PHYTOPATHOGENIC FUNGI
RU2553518C1 (en) * 2013-11-20 2015-06-20 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт биологической защиты растений Российской академии сельскохозяйственных наук STRAIN OF BACTERIA Bacillus subtilis FOR OBTAINING BIOPREPARATION AGAINST PHYTOPATHOGENIC FUNGI

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ДРАГОВОЗ И.В., ЛЕОНОВА Н.О., ЛАПА С.В., АВДЕЕВА Л.В., Экзометаболиты штамма Bacillus amyloliquefaciens ИМВ В-7100, определяющте его фитостимулирующую активнсоть, Физиология растений и генетика, 2014, т. 46, N6, с.516-524. *
ДРАГОВОЗ И.В., ЛЕОНОВА Н.О., ЛАПА С.В., АВДЕЕВА Л.В., Экзометаболиты штамма Bacillus amyloliquefaciens ИМВ В-7100, определяющте его фитостимулирующую активнсоть, Физиология растений и генетика, 2014, т. 46, N6, с.516-524. ЛЕЛЯК А.А., ШТЕРНШИС М.В., Антагонистический потенциал сибирских штаммов Bacillus spp. в отношении возбудителей болезней животных и растений, Вестник Томского государственного университета. Биология, 2014, N1 (25), с. 42-55. *
ЛЕЛЯК А.А., ШТЕРНШИС М.В., Антагонистический потенциал сибирских штаммов Bacillus spp. в отношении возбудителей болезней животных и растений, Вестник Томского государственного университета. Биология, 2014, N1 (25), с. 42-55. *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2701500C1 (en) * 2018-09-28 2019-09-26 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Национального исследовательского центра "Курчатовский институт" (НИЦ "Курчатовский институт" - ГосНИИгенетика) Strain of spore-forming bacteria bacillus amyloliquefaciens, having fungicidal action against phytopathogenic fungi, causing diseases of vegetable plants, a biological preparation based thereon
RU2736424C1 (en) * 2019-12-13 2020-11-17 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Казанский государственный аграрный университет" (ФГБОУ ВО Казанский ГАУ) Bacterial strain bacillus amyloliquefaciens recb-95 for production of biopreparation for protection of agricultural plants from stresses, stimulation of their growth and increase of crop capacity
RU2846734C1 (en) * 2024-11-06 2025-09-12 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии" Bacillus atrophaeus bacteria strain ad22 as soya plant productivity increasing agent and their protection against phytopathogenic fungi
RU2850674C1 (en) * 2025-09-20 2025-11-12 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кемеровский государственный университет" Biopreparation for stimulating growth and protection of wheat from phytopathogens based on ensifer and rhizobium strains

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Jung et al. Isolation of Burkholderia cepacia JBK9 with plant growth-promoting activity while producing pyrrolnitrin antagonistic to plant fungal diseases
JP5331010B2 (en) A pure culture of Bacillus berecensis strain AH2 and a biological control organism that biologically controls phytopathogenic fungi
RU2478290C2 (en) Biological preparation for stimulation of growth and protection of plants from diseases, increase in productivity and soil fertility
KR101569737B1 (en) Novel endophytic bacteria Bacillus oryzicola isolated from rice rhizosphere and development of a natural biopesticide and plant strengthener using same
RU2599416C1 (en) Bacillus amyloliquefaciens subsp.plantarum BS89 STRAIN AS AGENT FOR INCREASING PRODUCTIVITY OF PLANTS AND PROTECTION THEREOF FROM DISEASES
KR20140127670A (en) Endophytic bacteria Bacillus Methylotrophicus YC7007 and development of a multifunctional biopesticide and microbial fertilizer using same
RU2595405C1 (en) STRAINS OF BACTERIA Bacillus, Pseudomonas, Rahnella, Serratia HAVING PHYTOPROTECTIVE AND GROWTH-STIMULATING ACTIVITY, AND PREPARATION BASED ON SAID STRAINS
CN107075459B (en) Novel bacterium belonging to the genus Bacillus and use thereof
RU2495119C1 (en) STRAIN OF BACTERIA Bacillus subtilis 8A AS AGENT TO INCREASE PRODUCTIVITY OF PLANTS AND THEIR PROTECTION AGAINST PHYTOPATHOGENIC MICROORGANISMS
JP3665295B2 (en) Microbial preparation for biological control using novel Trichoderma microbial strain and method for producing the same
RU2603281C1 (en) PHOSPHATE-DISSOLVING STRAIN Pseudomonas chlororaphis ssp chlororaphis Vsk-26a3, WITH FUNGICIDAL AND BACTERICIDAL ACTIVITY
RU2625977C1 (en) Bacillus amyloliquefaciens ops-32 bacteria stain for the production of complete biopreparate for protection of agricultural plants from phytopathogenic mushrooms, stimulation of their growth and increase in yield
RU2529958C1 (en) Strain of nitrogen-fixing bacteria pseudomonas sp for obtaining biological product against diseases of wheat caused by phytopathogenic fungi, and increase in productivity
RU2757123C1 (en) Bacterial strain pantoea agglomerans f19 to increase the productivity of grain crops
Kim et al. Comparison of microbial fungicides in antagonistic activities related to the biological control of phytophthora blight in chili pepper caused by Phytophthora capsici
JP3132195B2 (en) New microorganism and plant disease control agent
RU2690420C1 (en) Bacterial plant growth stimulator
RU2558291C2 (en) Polyfunctional means for plant growing
KR102075073B1 (en) Serratia sp. KUDC3025 strain having antifungal activity against pathogens and plant growth promoting effect, and uses thereof
RO127514B1 (en) Strain of bacillus subtilis with an activity of fighting soil phytopathogenic agents, stimulating plant growth and for controlled biodegradation of vegetable material
RU2551968C2 (en) Bacillus pumilus A 1.5 BACTERIA STRAIN AS AGENT FOR INCREASING PLANT PRODUCTIVITY AND PLANT PROTECTION FROM DISEASES CAUSED BY PHYTOPATHOGENIC MICROORGANISMS
KR20060021162A (en) New antifungal crop growth promoting microorganisms Bacillus amyloliquifaciens MV-3 and microbial soil using the same
CN115725457A (en) Bacillus amyloliquefaciens for soil-borne disease control and soil remediation and application thereof
RU2245918C1 (en) Strain of microorganism azotobacter vinelandii for preparing biopreparation for control of wheat root rots and enhancing quality and yield of harvest
KR20090129181A (en) Streptomyces mizonensis CKS-70 strain having antimicrobial activity against plant pathogens and microbial preparation for plant pathogen control using same

Legal Events

Date Code Title Description
PD4A Correction of name of patent owner
QB4A Licence on use of patent

Free format text: PLEDGE FORMERLY AGREED ON 20190315

Effective date: 20190315