RU2614725C1 - Method for clinical pregnancy probability prediction for women with a body mass index of 18,5 to 28,49 in vitro fertilization programme based on assessment of leptin level in blood plasma and mitochondria transmembrane potential in peripheral blood mononuclear cells - Google Patents
Method for clinical pregnancy probability prediction for women with a body mass index of 18,5 to 28,49 in vitro fertilization programme based on assessment of leptin level in blood plasma and mitochondria transmembrane potential in peripheral blood mononuclear cells Download PDFInfo
- Publication number
- RU2614725C1 RU2614725C1 RU2016104313A RU2016104313A RU2614725C1 RU 2614725 C1 RU2614725 C1 RU 2614725C1 RU 2016104313 A RU2016104313 A RU 2016104313A RU 2016104313 A RU2016104313 A RU 2016104313A RU 2614725 C1 RU2614725 C1 RU 2614725C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- clinical pregnancy
- leptin
- mononuclear cells
- peripheral blood
- transmembrane potential
- Prior art date
Links
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 title claims abstract description 32
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 title claims abstract description 29
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 title claims abstract description 29
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 title claims abstract description 28
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 title claims abstract description 28
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 13
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 title claims abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims abstract description 4
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 title claims abstract 3
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 title claims description 14
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims abstract description 20
- 206010042573 Superovulation Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 claims abstract 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 238000009533 lab test Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 6
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 6
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 6
- 201000003511 ectopic pregnancy Diseases 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 4
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 3
- 206010033307 Overweight Diseases 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 3
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 229940071106 ethylenediaminetetraacetate Drugs 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 238000002357 laparoscopic surgery Methods 0.000 description 2
- 238000007477 logistic regression Methods 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- WPPDXAHGCGPUPK-UHFFFAOYSA-N red 2 Chemical compound C1=CC=CC=C1C(C1=CC=CC=C11)=C(C=2C=3C4=CC=C5C6=CC=C7C8=C(C=9C=CC=CC=9)C9=CC=CC=C9C(C=9C=CC=CC=9)=C8C8=CC=C(C6=C87)C(C=35)=CC=2)C4=C1C1=CC=CC=C1 WPPDXAHGCGPUPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- VFGZASZXLDMQJH-UHFFFAOYSA-N 2-[[4-(trifluoromethyl)phenyl]hydrazinylidene]propanedinitrile Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=C(NN=C(C#N)C#N)C=C1 VFGZASZXLDMQJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 1
- 102000014777 Adipokines Human genes 0.000 description 1
- 108010078606 Adipokines Proteins 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 241000762515 Hydrosalpinx Species 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 208000007893 Salpingitis Diseases 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000478 adipokine Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 1
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 239000000298 carbocyanine Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- QLBHNVFOQLIYTH-UHFFFAOYSA-L dipotassium;2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [K+].[K+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O QLBHNVFOQLIYTH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000003269 fluorescent indicator Substances 0.000 description 1
- 210000001733 follicular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000030843 hydrosalpinx Diseases 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002350 laparotomy Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 208000015994 miscarriage Diseases 0.000 description 1
- 230000004065 mitochondrial dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000004976 peripheral blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000009933 reproductive health Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 210000003660 reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
В настоящее время бесплодие среди супружеских пар достигает 10-15% и является одной и основных проблем современной медицины [1]. Одним из способов решения данной проблемы является лечение таких пациентов при помощи методов вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Одной из задач современной медицины является разработка и использование персонализированных подходов к лечению. Эта задача актуальна в том числе для репродуктивной медицины. В практических руководствах сообществ репродуктологов разных стран отмечено, что персонализированный подход к лечению женщин в программе ЭКО на основании разработки моделей прогнозирования успешности лечения повышает успешность исхода [2].At present, infertility among couples reaches 10-15% and is one of the main problems of modern medicine [1]. One way to solve this problem is to treat such patients using assisted reproductive technologies (ART). One of the tasks of modern medicine is the development and use of personalized approaches to treatment. This task is also relevant for reproductive medicine. In practical manuals of reproductive communities of different countries, it was noted that a personalized approach to treating women in the IVF program based on the development of models for predicting treatment success increases the success rate [2].
Стремительное развитие и активное внедрение современных биомедицинских технологий в широкую клиническую практику открывают новые возможности для диагностики и лечения супружеских пар с нарушениями репродуктивной функции. Принимая во внимание неуклонный рост числа женщин репродуктивного возраста, страдающих избыточной массой тела, все большую актуальность приобретает изучение молекулярных механизмов снижения фертильности у данной когорты женщин [3]. Появившиеся методы оценки состояния хронического воспаления и окислительного стресса, а также функционального состояния митохондрий открывают возможность более подробно изучить патогенез снижения фертильности.The rapid development and active introduction of modern biomedical technologies into wide clinical practice open up new opportunities for the diagnosis and treatment of couples with impaired reproductive function. Given the steady increase in the number of women of reproductive age who are overweight, the study of the molecular mechanisms of fertility reduction in this cohort of women is becoming increasingly relevant [3]. New methods for assessing the state of chronic inflammation and oxidative stress, as well as the functional state of mitochondria, open up the possibility of studying the pathogenesis of decreased fertility in more detail.
Лептин - белок, который участвует в регуляции энергетического обмена и контролирует массу тела, влияя на аппетит и порог насыщения при потреблении пищи, а также играет важную роль в репродуктивной функции, оказывая стимулирующее действие на гипоталамо-гипофизарно-яичниковую ось при нормальных его сывороточных концентрациях. Ранее в литературе были описаны различные однофакторные модели оценки эффективности лечения в программе ЭКО, основанные на измерении концентрации лептина в плазме крови [4, 5, 6]. Однако были отмечены противоречивость данных и низкая предиктивная способность этих моделей, которую можно объяснить тем, что авторы не учитывали показатели ИМТ исследуемых ими женщин, тем самым не принимая во внимание возможность развития у них резистентности к лептину.Leptin is a protein that is involved in the regulation of energy metabolism and controls body weight, affecting appetite and saturation threshold when eating food, and also plays an important role in reproductive function, providing a stimulating effect on the hypothalamic-pituitary-ovarian axis at its normal serum concentrations. Previously, various univariate models for assessing the effectiveness of treatment in an IVF program based on measuring plasma concentrations of leptin have been described in the literature [4, 5, 6]. However, inconsistency of data and a low predictive ability of these models were noted, which can be explained by the fact that the authors did not take into account the BMI of the women they studied, thereby not taking into account the possibility of developing leptin resistance in them.
Одним из механизмов, ведущих к репродуктивным неудачам при ожирении, является нарушение функционального состояния митохондриального ретикулума. В последние годы была разработана система оценки критериев состояния митохондриального аппарата в клетках периферической крови с использованием проточной цитометрии. Данный метод был апробирован для исследования влияния сепсиса или ВИЧ-инфекции на состояние митохондриального аппарата, а также взаимосвязи митохондриальной дисфункции и клинических исходов [7, 8, 9]. В связи с этим, нами было проведено пилотное исследование функционального состояния митохондрий в мононуклеарах периферической крови у пациенток с нормальным, избыточным весом и ожирением, позволившее охарактеризовать взаимосвязь избыточной массы тела, функциональной активности митохондрий и успешности имплантации. На основании полученных данных нами была разработана модель оценки вероятности наступления клинической беременности в программе ЭКО у женщин с индексом массы тела от 18,5 до 28,49.One of the mechanisms leading to reproductive failure in obesity is a violation of the functional state of the mitochondrial reticulum. In recent years, a system has been developed to assess the criteria for the state of the mitochondrial apparatus in peripheral blood cells using flow cytometry. This method has been tested to study the effect of sepsis or HIV infection on the state of the mitochondrial apparatus, as well as the relationship of mitochondrial dysfunction and clinical outcomes [7, 8, 9]. In this regard, we conducted a pilot study of the functional state of mitochondria in peripheral blood mononuclear cells in patients with normal, overweight and obesity, which allowed us to characterize the relationship between overweight, functional activity of mitochondria and the success of implantation. Based on the obtained data, we developed a model for assessing the probability of clinical pregnancy in the IVF program for women with a body mass index of 18.5 to 28.49.
Результат изобретения - создание модели предикции наступления клинической беременности у женщин с 18,5≤ИМТ<28,5 кг/м2 при лечении бесплодия в программе ЭКО.The result of the invention is the creation of a model for predicting the onset of clinical pregnancy in women with 18.5≤IMT <28.5 kg / m 2 in the treatment of infertility in the IVF program.
Результат достигается путем измерения уровня лептина в плазме крови и оценки трансмембранного потенциала мононуклеаров периферической крови (ΔΨ МПК после стимуляции суперовуляции) в день трансвагинальной пункции яичников (ТВП).The result is achieved by measuring the level of leptin in blood plasma and assessing the transmembrane potential of peripheral blood mononuclear cells (ΔΨ BMD after stimulation of superovulation) on the day of transvaginal ovarian puncture (TVP).
Для выделения мононуклеарных клеток периферической крови (МПК) использовали периферическую венозную кровь, взятую у пациенток в цикле стимуляции суперовуляции натощак в день проведения ТВП в пробирки с этилендиаминтетраацетатом (ЭДТА) (Sarstedt). Использовали стандартную методику выделения МПК на градиенте фиколла (Sigma) плотностью 1,077 г/мл. Для оценки трансмембранного потенциала митохондрий выделенные МПК окрашивали флуоресцентным индикатором трансмембранного потенциала митохондрий 5,5',6,6'-тетрахлор-1,1'3,3'-тетраэтилбензимидазол-карбоцианином (JC1) (Life technologies) по протоколу, рекомендованному производителем, и методом проточной цитометрии оценивали распределение клеток по интенсивности окраски в зеленом и красном канале. JC-1 представляет собой катионный краситель, поглощение которого митохондриями напрямую связано с уровнем их трансмембранного потенциала. Большая концентрация JC-1 коррелирует с большим его поглощением, излучая при этом красное свечение, в то время как зеленое свечение указывает на присутствие JC-1 в качестве мономера. Показатель соотношения красного и зеленого спектров указывает на степень поляризации внутренней мембраны митохондрий.In order to isolate peripheral blood mononuclear cells (MPC), peripheral venous blood was taken from patients in the fasting superovulation stimulation cycle on the day of TVP in tubes with ethylenediaminetetraacetate (EDTA) (Sarstedt). A standard method for isolating IPC on a ficoll gradient (Sigma) with a density of 1.077 g / ml was used. To assess the transmembrane potential of mitochondria, the isolated MPCs were stained with a fluorescent indicator of the transmembrane potential of mitochondria 5.5 ', 6.6'-tetrachloro-1,1'3,3'-tetraethylbenzimidazole-carbocyanine (JC1) (Life technologies) according to the protocol recommended by the manufacturer, and the method of flow cytometry assessed the distribution of cells by color intensity in the green and red channels. JC-1 is a cationic dye whose uptake by mitochondria is directly related to their transmembrane potential. A high concentration of JC-1 correlates with a large absorption, emitting a red glow, while a green glow indicates the presence of JC-1 as a monomer. The ratio of the red and green spectra indicates the degree of polarization of the inner mitochondrial membrane.
Для оценки жизнеспособнсти клеток использовали краситель пропидий йодид (Life technologies).Propidium iodide dye (Life technologies) was used to assess cell viability.
Измерение проводили на проточном цитофлуориметре (BD FACS Calibur). Для каждой пробы измеряли два показателя: долю МПК с высокополяризованными митохондриями и величину, характеризующую потенциал митохондрий в МПК. Показатель, характеризующий потенциал митохондрий в клетках крови, рассчитывали как:The measurement was carried out on a flow cytometer (BD FACS Calibur). For each sample, two indicators were measured: the proportion of IPC with highly polarized mitochondria and a value characterizing the potential of mitochondria in IPC. An indicator characterizing the potential of mitochondria in blood cells was calculated as:
(М красный 1/М зеленый 1) - (М красный 2/М зеленый 2),(M red 1 / M green 1) - (M red 2 / M green 2),
где М красный 1 и М зеленый 1 - медианы интенсивности свечения МПК с высокополяризованными митохондриями в интактной пробе на длинах волн 590 и 529 нм соответственно, а М красный 2 и М зеленый 2 - медианы интенсивности свечения МПК с высокополяризованными митохондриями в контрольной пробе, в которую был добавлен разобщитель дыхания карбонилцианид-4-(трифторметил)-фенилгидразон (Sigma) в конечной концентрации 7 μМ. В дальнейшем данный показатель будет обозначен как ΔΨ.where M red 1 and M green 1 are the medians of the luminescence intensity of the IPC with highly polarized mitochondria in the intact sample at wavelengths of 590 and 529 nm, respectively, and M red 2 and M green 2 are the medians of the luminescence intensity of the IPC with highly polarized mitochondria in the control sample, into which a respiratory disconnector carbonyl cyanide-4- (trifluoromethyl) phenylhydrazone (Sigma) was added at a final concentration of 7 μM. In the future, this indicator will be designated as ΔΨ.
Измерение концентрации лептина в плазме проводили при помощи набора для анализа Human Adipokine Panel (измерение белков ИЛ- и лептина) на мультиплексном анализаторе Luminex 200 (Luminex Corporation, США).Plasma leptin concentration was measured using the Human Adipokine Panel analysis kit (measurement of IL- and leptin proteins) on a Luminex 200 multiplex analyzer (Luminex Corporation, USA).
Пробы венозной крови отбирали натощак в пробирки с калием-ЭДТА (Sarstedt, Германия). Для получения плазмы кровь центрифугировали при 3000 g в течение 10 мин при +4°С (4000 об/мин в роторе А 4-44 на центрифуге Eppendorf 5810R, Германия). Аликвоты плазмы (4×200 мкл) отбирали в чистые промаркированные пробирки и хранили при температере -80°С до момента проведения измерений.Venous blood samples were taken on an empty stomach in test tubes with potassium EDTA (Sarstedt, Germany). To obtain plasma, the blood was centrifuged at 3000 g for 10 min at + 4 ° С (4000 rpm in the A 4-44 rotor on an Eppendorf 5810R centrifuge, Germany). Aliquots of plasma (4 × 200 μl) were collected in clean, labeled tubes and stored at -80 ° C until measurements.
Процедуру измерения проводили в соответствии с инструкцией производителя наборов. Расчет концентрации белков в плазме крови осуществляли по калибровочной кривой в программе Luminex 100 IS 2.3 (Luminex Corporation, США).The measurement procedure was carried out in accordance with the instructions of the kit manufacturer. The concentration of protein in blood plasma was calculated according to the calibration curve in the Luminex 100 IS 2.3 program (Luminex Corporation, USA).
Бинарная логистическая регрессия рассчитывает вероятность наступления события (в данном случае наступление клинической беременности) в зависимости от значений независимых переменных (концентрация лептина в плазме крови, трансмембранный потенциал мононуклеаров периферической крови, измеренный после стимуляции суперовуляции).Binary logistic regression calculates the probability of an event (in this case, clinical pregnancy) depending on the values of independent variables (plasma leptin concentration, transmembrane potential of peripheral blood mononuclear cells, measured after stimulation of superovulation).
Вероятность наступления события (вероятность наступления клинической беременности) (р) рассчитывается по формуле, имеющей общий вид:The probability of an event (the likelihood of a clinical pregnancy) (p) is calculated by the formula having the general form:
p=exp(logit)/(1+exp(logit))p = exp (logit) / (1 + exp (logit))
где р - искомая вероятность наступления события;where p is the desired probability of the event;
При значениях р менее 0,5 можно предположить, что измеряемое событие не наступит; в противном случае предполагается наступление события.With p values less than 0.5, it can be assumed that the measured event does not occur; otherwise, an event is expected.
Согласно результатам логистической регрессии построено уравнение для предсказания вероятности наступления клинической беременности:According to the results of logistic regression, an equation is constructed to predict the likelihood of a clinical pregnancy:
logit=3,39-(0,337*ΔΨ МПК после стимуляции)-(0,08*[Лептин])logit = 3.39- (0.337 * ΔΨ IPC after stimulation) - (0.08 * [Leptin])
Построенная модель является статистически значимой (χ2(2)=8,51, р=0,014).The constructed model is statistically significant (χ2 (2) = 8.51, p = 0.014).
Средняя точность прогнозирования вероятности наступления клинической беременности составляет 76,7%, ОШ равно 9,33.The average accuracy of predicting the likelihood of a clinical pregnancy is 76.7%, the OS is 9.33.
Таким образом, можно оценить вероятность наступления клинической беременности в программе ЭКО на основании оценки представленных независимых переменных (ΔΨ МПК и уровень лептина, измеренные после стимуляции суперовуляции).Thus, it is possible to assess the likelihood of a clinical pregnancy in the IVF program based on the assessment of the presented independent variables (ΔΨ IPC and leptin level, measured after stimulation of superovulation).
ПримерExample
I. Прогнозирование вероятности наступления клинической беременности провели у пациентки N 30 лет, обратившейся для проведения программы ЭКО и ПЭ по поводу трубно-перитонеального фактора бесплодия. Из анамнеза: 1 внематочная беременность, в 2011 г. проведена лапароскопия, правосторонняя тубэктомия по поводу внематочной беременности, в 2013 г. - лапароскопия, тубэктомия слева по поводу левостороннего гидросальпинкса. Данная попытка ЭКО вторая. Перед началом программы ЭКО проводилось измерение веса и роста, на основании которого расчитывался показатель индекса массы тела (ИМТ).I. Prediction of the likelihood of clinical pregnancy was carried out in a patient N 30 years old, who applied for an IVF and PE program for tubal peritoneal infertility factor. From the anamnesis: 1 ectopic pregnancy, in 2011 a laparoscopy was performed, right-sided tubectomy for an ectopic pregnancy, in 2013 - a laparoscopy, left tubectomy for a left-side hydrosalpinx. This IVF attempt is the second. Before starting the IVF program, a measurement of weight and height was carried out, based on which the index of body mass index (BMI) was calculated.
Вес - 61,8 кгWeight - 61.8 kg
Рост - 1,6 мHeight - 1.6 m
ИМТ - 24,14 кг/м2 BMI - 24.14 kg / m 2
Кровь для исследования концентрации лептина и трансмембранного потенциала мононуклеаров периферической крови у пациентки N брали натощак из локтевой вены в стерильную пробирку в цикле стимуляции суперовуляции в день проведения ТВП.Blood to study the concentration of leptin and the transmembrane potential of peripheral blood mononuclear cells from patient N was taken on an empty stomach from the ulnar vein into a sterile tube in the superovulation stimulation cycle on the day of TVP.
Результат проведенных измерений у пациентки N:The result of the measurements in patient N:
Концентрация лептина - 5,8 пг/млLeptin concentration - 5.8 pg / ml
ΔΨ МПК, измеренный после стимуляции суперовуляции, - 14,77 у.е.ΔΨ IPC, measured after stimulation of superovulation, - 14.77 cu
Вероятность (р) наступления клинической беременности у данной пациентки расчитывали по вышеописанной формуле:The probability (p) of the onset of clinical pregnancy in this patient was calculated by the above formula:
logit=3,39-(0,337* ΔΨ МПК после стимуляции)-(0,08*[Лептин])=3,39-(0,337*14,77)-(0,08*5,8)=-2,05logit = 3.39- (0.337 * ΔΨ IPC after stimulation) - (0.08 * [Leptin]) = 3.39- (0.337 * 14.77) - (0.08 * 5.8) = - 2, 05
p=exp(logit)/(1+exp(logit))=0,82p = exp (logit) / (1 + exp (logit)) = 0.82
Рассчитанная вероятность р указывает на возможность того, что истинное значение результативного показателя попадет в расчетный прогнозируемый исход, в данном случае - на наступление клинической беременности в данной попытке ЭКО.The calculated probability p indicates the possibility that the true value of the effective indicator will fall into the calculated predicted outcome, in this case, the onset of clinical pregnancy in this IVF attempt.
В результате проведения программы ЭКО у пациентки наступила клиническая беременность.As a result of the IVF program, the patient has a clinical pregnancy.
II. Прогнозирование вероятности наступления клинической беременности провели у пациентки X 30 лет, обратившейся для проведения программы ЭКО и ПЭ по поводу трубно-перитонеального фактора бесплодия. В анамнезе 2 беременности: 1 самопроизвольный выкидыш на позднем сроке беременности в 2009 г. и 1 - левосторонняя внематочная беременность в 2010 г. В 2010 г проведена лапаротомия, левосторонняя тубэктомия по поводу внематочной беременности, в 2009 и 2013 гг. - гистероскопия, РДВ. Данная попытка ЭКО первая. Перед началом программы ЭКО проводилось измерение веса и роста, на основании которого был рассчитан показатель индекса массы тела (ИМТ).II. Prediction of the likelihood of clinical pregnancy was carried out in a patient X 30 years old, who applied for an IVF and PE program for tubal peritoneal infertility factor. A history of 2 pregnancies: 1 miscarriage in late pregnancy in 2009 and 1 - left-sided ectopic pregnancy in 2010. In 2010, a laparotomy and left-sided tubectomy for an ectopic pregnancy were performed in 2009 and 2013. - hysteroscopy, RDF. This is the first IVF attempt. Before starting the IVF program, weight and height were measured, based on which the index of body mass index (BMI) was calculated.
Вес - 72 кгWeight - 72 kg
Рост - 1,7 мHeight - 1.7 m
ИМТ - 24,91 кг/м2 BMI - 24.91 kg / m 2
Кровь для исследования концентрации лептина и трансмембранного потенциала мононуклеаров периферической крови у пациентки X брали натощак из локтевой вены в стерильную пробирку в цикле стимуляции суперовуляции в день проведения ТВП.Blood to study the concentration of leptin and the transmembrane potential of peripheral blood mononuclear cells from patient X was taken on an empty stomach from the ulnar vein into a sterile tube in the superovulation stimulation cycle on the day of TVP.
Результат проведенных измерений у пациентки X:The result of the measurements in patient X:
Концентрация лептина - 15,84 пг/млLeptin concentration - 15.84 pg / ml
ΔΨ МПК, измеренный после стимуляции суперовуляции, - 11,70 у.е.ΔΨ IPC, measured after stimulation of superovulation, - 11.70 cu
Вероятность (р) наступления клинической беременности у данной пациентки расчитывали по вышеописанной формуле:The probability (p) of the onset of clinical pregnancy in this patient was calculated by the above formula:
logit=3,39-(0,337* ΔΨ МПК после стимуляции)-(0,08*[Лептин])=3,39-(0,337*11,7)-(0,08*15,84)=-1,82logit = 3.39- (0.337 * ΔΨ IPC after stimulation) - (0.08 * [Leptin]) = 3.39- (0.337 * 11.7) - (0.08 * 15.84) = - 1, 82
p=exp(logit)/(1+exp(logit))=0,14p = exp (logit) / (1 + exp (logit)) = 0.14
Рассчитанная вероятность р указывает на низкую вероятность наступления беременности в данном цикле лечения.The calculated probability p indicates a low probability of pregnancy in this treatment cycle.
В результате проведения программы ЭКО у пациентки беременность не наступила.As a result of the IVF program, the patient did not become pregnant.
III. Прогнозирование вероятности наступления клинической беременности провели у пациентки Z 32 лет, обратившейся для проведения программы ЭКО и ПЭ по поводу трубно-перитонеального фактора бесплодия. В анамнезе оперативных вмешательств и беременностей не было. Данная попытка ЭКО первая. Перед началом программы ЭКО проводилось измерение веса и роста, на основании которого был рассчитан показатель индекса массы тела (ИМТ).III. Prediction of the likelihood of clinical pregnancy was carried out in a 32-year-old patient Z, who applied for an IVF and PE program for tubal-peritoneal infertility factor. There was no history of surgical interventions or pregnancies. This is the first IVF attempt. Before starting the IVF program, weight and height were measured, based on which the index of body mass index (BMI) was calculated.
Вес - 54,8 кгWeight - 54.8 kg
Рост - 1,58 мHeight - 1.58 m
ИМТ - 21,95 кг/м2 BMI - 21.95 kg / m 2
Кровь для исследования концентрации лептина и трансмембранного потенциала мононуклеаров периферической крови у пациентки Z брали натощак из локтевой вены в стерильную пробирку в цикле стимуляции суперовуляции в день проведения ТВП.Blood to study the concentration of leptin and the transmembrane potential of peripheral blood mononuclear cells from patient Z was taken on an empty stomach from the ulnar vein into a sterile tube in the superovulation stimulation cycle on the day of TVP.
Результат проведенных измерений у пациентки X:The result of the measurements in patient X:
Концентрация лептина - 3,09 пг/млLeptin concentration - 3.09 pg / ml
ΔΨ МПК, измеренный после стимуляции суперовуляции, - 6,09 у.е.ΔΨ IPC, measured after stimulation of superovulation, - 6.09 cu
Вероятность (р) наступления клинической беременности у данной пациентки расчитывали по вышеописанной формуле:The probability (p) of the onset of clinical pregnancy in this patient was calculated by the above formula:
logit=3,39-(0,337* ΔΨ МПК после стимуляции)-(0,08*[Лептин])=3,39-(0,337*6,09)-(0,08*3,09)=1,09logit = 3.39- (0.337 * ΔΨ BMD after stimulation) - (0.08 * [Leptin]) = 3.39- (0.337 * 6.09) - (0.08 * 3.09) = 1.09
p=exp(logit)/(1+exp(logit))=0,75p = exp (logit) / (1 + exp (logit)) = 0.75
Рассчитанная вероятность р указывает на высокую вероятность наступления клинической беременности в данном цикле лечения.The calculated probability p indicates a high probability of clinical pregnancy in this treatment cycle.
В результате лечения в программе ЭКО у пациентки наступила клиническая беременность.As a result of treatment in the IVF program, the patient has a clinical pregnancy.
Согласно полученным данным прогноз оценки вероятности наступления клинической беременности при проведении программ ЭКО носит достоверный характер. Следовательно, способ прогнозирования вероятности положительного исхода лечения в программе ЭКО с использованием оценки функционального состояния митохондрий в мононуклеарах периферической крови, а также измерения концентрации лептина в плазме крови, может быть использован в клинико-лабораторной практике с целью предикции исходов программы ЭКО.According to the data obtained, the prognosis of assessing the likelihood of clinical pregnancy during IVF programs is reliable. Therefore, a method for predicting the probability of a positive outcome of treatment in an IVF program using an assessment of the functional state of mitochondria in peripheral blood mononuclear cells, as well as measuring the concentration of leptin in blood plasma, can be used in clinical and laboratory practice to predict the outcome of an IVF program.
Список использованной литературыList of references
1) Lifestyle factors and reproductive health: taking control of your fertility / R. Sharma [et al.] // Reprod Biol Endocrinol. - 2013. - Vol. 16, №11. - P. 66.1) Lifestyle factors and reproductive health: taking control of your fertility / R. Sharma [et al.] // Reprod Biol Endocrinol. - 2013 .-- Vol. 16, No. 11. - P. 66.
2) Choi В., Bosch E., Lannon B.M., Leveille M.C., Wong W.H., Leader A., Pellicer A., Penzias A.S., Yao M.W. / Personalized prediction of first-cycle in vitro fertilization success // Fertil Steril. // - 2013. - Vol. 99. - №7. - P. 1905-1911.2) Choi B., Bosch E., Lannon B.M., Leveille M.C., Wong W.H., Leader A., Pellicer A., Penzias A.S., Yao M.W. / Personalized prediction of first-cycle in vitro fertilization success // Fertil Steril. // - 2013. - Vol. 99. - No. 7. - P. 1905-1911.
3) Talmor, A. Female Obesity and Infertility / A. Talmor, B. Dunphy // Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol. - 2015. - Vol. 29, №4. - P. 498-5063) Talmor, A. Female Obesity and Infertility / A. Talmor, B. Dunphy // Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol. - 2015. - Vol. 29, No. 4. - P. 498-506
4) Llaneza-Suarez D., Llaneza P., Gonzalez C, De-La-Fuente P., Garcia-Ochoa C, Garrido P., Castanon V., Perez-Lopez F.R. / Assessment of follicular fluid leptin levels and insulin resistance as outcome predictors in women undergoing in vitro fertilization-intracytoplasmic sperm injection // Fertil Steril.// -2014. - Vol. 102. - №6. - P. 1619-1625.4) Llaneza-Suarez D., Llaneza P., Gonzalez C, De-La-Fuente P., Garcia-Ochoa C, Garrido P., Castanon V., Perez-Lopez F.R. / Assessment of follicular fluid leptin levels and insulin resistance as outcome predictors in women undergoing in vitro fertilization-intracytoplasmic sperm injection // Fertil Steril.//-2014. - Vol. 102. - No. 6. - P. 1619-1625.
5) Asimakopoulos В., Koster F., Felberbaum R., Tripsiannis G., Caglar G.S., Nikolettos N., Al-Hasani S., Diedrich K. / Intrafollicular and circuk ing concentrations of leptin do not predict the outcome inlVF-ICSI cycles // Reprod Sci. // - 2009. - Vol. 16. - №1. - P. 113-119.5) Asimakopoulos B., Koster F., Felberbaum R., Tripsiannis G., Caglar GS, Nikolettos N., Al-Hasani S., Diedrich K. / Intrafollicular and circuk ing concentration of leptin do not predict the outcome inlVF-ICSI cycles // Reprod Sci. // - 2009. - Vol. 16. - No. 1. - P. 113-119.
6) Anifandis G., Koutselini E., Louridas K., Liakopoulos V., Leivaditis K., Mantzavinos Т., Sioutopoulou D., Vamvakopoulos N. / Estradiol and leptin as conditional prognostic IVF markers // Reproduction // - 2005. - Vol. 129. - №4. - P. 531-534.6) Anifandis G., Koutselini E., Louridas K., Liakopoulos V., Leivaditis K., Mantzavinos T., Sioutopoulou D., Vamvakopoulos N. / Estradiol and leptin as conditional prognostic IVF markers // Reproduction // - 2005. - Vol. 129. - No. 4. - P. 531-534.
7) Weiss S.L., Selak M.A., Tuluc F., Perales Villarroel J., Nadkarni V.M., Deutschman C.S., Becker L.B. / Mitochondrial dysfunction in peripheral blood mononuclear cells in pediatric septic shock // Pediatr Crit Care Med. // - 2015. - Vol. 16. - №1. - P. e4-e12.7) Weiss S.L., Selak M.A., Tuluc F., Perales Villarroel J., Nadkarni V.M., Deutschman C.S., Becker L. B. / Mitochondrial dysfunction in peripheral blood mononuclear cells in pediatric septic shock // Pediatr Crit Care Med. // - 2015. - Vol. 16. - No. 1. - P. e4-e12.
8) Chiu H.Y., Tsao L.Y., Yang R.C. / Heat-shock response protects peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from hydrogen peroxide-induced mitochondrial disturbance // Cell Stress Chaperones. // - 2009. - Vol. 14. - №2. - P. 207-217.8) Chiu H.Y., Tsao L.Y., Yang R.C. / Heat-shock response protects peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from hydrogen peroxide-induced mitochondrial disturbance // Cell Stress Chaperones. // - 2009. - Vol. 14. - No. 2. - P. 207-217.
9) Garrabou G et al. The effects of sepsis on mitochondria. J Infect Dis. 2012 Feb 1; 205(3): 392-400.9) Garrabou G et al. The effects of sepsis on mitochondria. J Infect Dis. 2012 Feb 1; 205 (3): 392-400.
Claims (7)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016104313A RU2614725C1 (en) | 2016-02-10 | 2016-02-10 | Method for clinical pregnancy probability prediction for women with a body mass index of 18,5 to 28,49 in vitro fertilization programme based on assessment of leptin level in blood plasma and mitochondria transmembrane potential in peripheral blood mononuclear cells |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016104313A RU2614725C1 (en) | 2016-02-10 | 2016-02-10 | Method for clinical pregnancy probability prediction for women with a body mass index of 18,5 to 28,49 in vitro fertilization programme based on assessment of leptin level in blood plasma and mitochondria transmembrane potential in peripheral blood mononuclear cells |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2614725C1 true RU2614725C1 (en) | 2017-03-28 |
Family
ID=58505612
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016104313A RU2614725C1 (en) | 2016-02-10 | 2016-02-10 | Method for clinical pregnancy probability prediction for women with a body mass index of 18,5 to 28,49 in vitro fertilization programme based on assessment of leptin level in blood plasma and mitochondria transmembrane potential in peripheral blood mononuclear cells |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2614725C1 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2430379C1 (en) * | 2010-01-27 | 2011-09-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО РГМУ Росздрава) | Method of predicting pregnancy in programme of extracorporal fertilisation and transfer of embryos in standard long protocol of superovulation stimulation |
| RU2476142C1 (en) * | 2011-07-12 | 2013-02-27 | Федеральное государственное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГУ "НИИ ОММ" Минздравсоцразвития России) | Method of predicting result of extracorporal fertilisation and embryo transfer (ecf and et) |
| RU2550965C1 (en) * | 2014-06-23 | 2015-05-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for prediction of pregnancy rate through in vitro fertilisation with selective embryo transfer by real-time pcr evaluation of molecular genetic gamete profile |
-
2016
- 2016-02-10 RU RU2016104313A patent/RU2614725C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2430379C1 (en) * | 2010-01-27 | 2011-09-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО РГМУ Росздрава) | Method of predicting pregnancy in programme of extracorporal fertilisation and transfer of embryos in standard long protocol of superovulation stimulation |
| RU2476142C1 (en) * | 2011-07-12 | 2013-02-27 | Федеральное государственное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГУ "НИИ ОММ" Минздравсоцразвития России) | Method of predicting result of extracorporal fertilisation and embryo transfer (ecf and et) |
| RU2550965C1 (en) * | 2014-06-23 | 2015-05-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for prediction of pregnancy rate through in vitro fertilisation with selective embryo transfer by real-time pcr evaluation of molecular genetic gamete profile |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Г. М. Савельева и др. Способ прогнозирования наступления беременности у пациенток, включенных в программу экстракорпорального оплодотворения, в стандартном длинном протокол / Лечащий врач, N 3, 2013 [Найдено в интернете 08.12.2016. Найдено он-лайн: http://www.lvrach.ru/2013/03/15435655/]. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Agarwal et al. | Oxidation-reduction potential as a new marker for oxidative stress: Correlation to male infertility | |
| Kolesnikova et al. | Integral indicator of oxidative stress in human blood | |
| Jedrzejczak et al. | Prediction of spontaneous conception based on semen parameters | |
| Agarwal et al. | Determination of seminal oxidation–reduction potential (ORP) as an easy and cost‐effective clinical marker of male infertility | |
| Anderson et al. | The clinical value and interpretation of anti-Müllerian hormone in women with cancer | |
| shahed Shoarishoar et al. | Assessment of decreased ovarian reserve and systemic inflammatory markers | |
| US11726100B2 (en) | Method of treating large vessel occlusion stroke | |
| JP2019518225A (en) | Method and composition for predicting preterm birth | |
| Panner Selvam et al. | Evaluation of seminal oxidation–reduction potential in male infertility | |
| JP2025131649A (en) | Endometriosis biomarkers | |
| RU2664455C1 (en) | Method for assessing risk of developing complications in the long-term postoperative period in patients with signs of connective tissue dysplasia | |
| Dwiningsih et al. | Brain derived neurotrophic factor as a non-invasive biomarker for detection of endometriosis | |
| US20180195124A1 (en) | Method for the diagnosis of disorders caused by fetal alcohol syndrome | |
| Kumar et al. | Dynamic alteration in the vaginal secretory proteome across the early and mid-trimesters of pregnancy | |
| CN112946274B (en) | Intracranial aneurysm diagnosis serum marker and intracranial aneurysm rupture potential prediction serum marker | |
| RU2614725C1 (en) | Method for clinical pregnancy probability prediction for women with a body mass index of 18,5 to 28,49 in vitro fertilization programme based on assessment of leptin level in blood plasma and mitochondria transmembrane potential in peripheral blood mononuclear cells | |
| JP2007509331A (en) | Rapid testing for the diagnosis of Alzheimer's disease | |
| RU2440027C1 (en) | Method for prediction of reproductive disorders in girls suffering pubertal hypothalamic syndrome by regression analysis technique | |
| JP6158825B2 (en) | Tenascin C and its use in rheumatoid arthritis | |
| KR20230086499A (en) | Biomarker of preeclampsia and uses thereof | |
| CN113832222A (en) | Use of biomarkers in the preparation of a kit for diagnosing miscarriage | |
| RU2581027C1 (en) | Method for prediction of clinical outcomes of ef and et programs | |
| JP6436777B2 (en) | Test method and test kit for psychiatric disorders | |
| EP3011344B1 (en) | Biomarkers for inflammatory response | |
| RU2438133C1 (en) | Method for prediction of clinical effectiveness in glucocorticoids treated multiple sclerosis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180211 |