[go: up one dir, main page]

RU2611998C1 - Liposome composition for inflammatory joint diseases relief - Google Patents

Liposome composition for inflammatory joint diseases relief Download PDF

Info

Publication number
RU2611998C1
RU2611998C1 RU2016108541A RU2016108541A RU2611998C1 RU 2611998 C1 RU2611998 C1 RU 2611998C1 RU 2016108541 A RU2016108541 A RU 2016108541A RU 2016108541 A RU2016108541 A RU 2016108541A RU 2611998 C1 RU2611998 C1 RU 2611998C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
inflammatory
liposomes
temperature
relief
effect
Prior art date
Application number
RU2016108541A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Олег Александрович Розенберг
Андрей Алиевич Сейлиев
Андрей Геннадьевич Жуйков
Владимир Андреевич Волчков
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский научный центр радиологии и хирургических технологий" Министерства здравоохранения Российской / ФГБУ "РНЦРХТ" Минздрава России
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский научный центр радиологии и хирургических технологий" Министерства здравоохранения Российской / ФГБУ "РНЦРХТ" Минздрава России filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский научный центр радиологии и хирургических технологий" Министерства здравоохранения Российской / ФГБУ "РНЦРХТ" Минздрава России
Priority to RU2016108541A priority Critical patent/RU2611998C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2611998C1 publication Critical patent/RU2611998C1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/57Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
    • A61K31/573Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone substituted in position 21, e.g. cortisone, dexamethasone, prednisone or aldosterone
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66Phosphorus compounds
    • A61K31/683Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols
    • A61K31/685Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols one of the hydroxy compounds having nitrogen atoms, e.g. phosphatidylserine, lecithin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2121/00Preparations for use in therapy

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

FIELD: pharmacy.
SUBSTANCE: invention is represented by a liposome composition for inflammatory joint diseases relief, comprising dipalmitoylphosphatidylcholine, cholesterol, hydrocortisone acetate, prednisolone hemisuccinate and saline, at that, the components are in a certain ratio, in g.
EFFECT: high anti-inflammatory effect and rapid beneficial effect.
2 ex

Description

Изобретение относится к фармацевтическим средствам и может найти применение при лечении локальных воспалительных заболеваний, таких как обострение ревматоидного артрита, синовиит, тендовагинит, артроз.The invention relates to pharmaceuticals and may find application in the treatment of local inflammatory diseases, such as exacerbation of rheumatoid arthritis, synovitis, tendovaginitis, arthrosis.

В настоящее время для лечения локальных острых асептических воспалений наиболее широко используют нестероидные и стероидные противовоспалительные лекарственные препараты, препараты, модифицирующие антиревматоидные лекарственные средства, антибиотики, а также антагонисты цитокинов, такие как Фактор некроза опухолей, Итерлейкин-1, играющие существенную роль в патогенезе воспалительного процесса в суставе и разрушении хряща, покрывающего трущиеся внутрисуставные поверхности.Currently, nonsteroidal and steroidal anti-inflammatory drugs, drugs that modify antirheumatoid drugs, antibiotics, as well as cytokine antagonists such as Tumor Necrosis Factor, Itleukin-1, which play a significant role in the pathogenesis of the inflammatory process, are most widely used to treat local acute aseptic inflammations. in the joint and the destruction of the cartilage covering the rubbing intraarticular surfaces.

Нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) наиболее часто используют для лечения остеоартритов, ревматоидного артрита (РА) и мышечных болей. Они дают только симптоматический эффект, но не изменяют течение заболевания. Однако использование НПВП ограничивается высоким риском осложнений со стороны желудочно-кишечного тракта (ЖКТ). Эти осложнения вариабельны от желудочно-кишечного дискомфорта до жизни угрожающей пептидной язвы. Реже НПВП вызывают почечную и сердечно-сосудистую недостаточность, гипертензию, нарушения электролитного баланса, инфаркт миокарда и инсульт.Nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) are most commonly used to treat osteoarthritis, rheumatoid arthritis (RA), and muscle pain. They give only a symptomatic effect, but do not change the course of the disease. However, the use of NSAIDs is limited to a high risk of complications from the gastrointestinal tract (GIT). These complications range from gastrointestinal discomfort to life-threatening peptide ulcers. Less commonly, NSAIDs cause kidney and cardiovascular failure, hypertension, electrolyte imbalance, myocardial infarction, and stroke.

Глюкокортикоиды (ГК), такие как преднизолон, метилпреднизолон, гидрокортизон, триамцинолон и дексаметазон используют для купирования воспаления при РА и при других аутоиммунных заболеваниях. ГК характеризуются множественными механизмами действия: подавление накопления макрофагов, уменьшение проницаемости капилляров и др. Несмотря на то, что они являются наиболее мощными противовоспалительными соединениями, с быстрым началом действия, все они характеризуются тяжелыми побочными эффектами, включая атрофию кожи, остеопороз, мышечную атрофию, развитие катаракты и глаукомы, пептической язвы, манифестацию латентного диабета и даже преждевременную смерть. Для снижения этих серьезных осложнений используют внутрисуставное введение ГК, но и такой путь введения обладает системным эффектом, хотя и меньшим в сравнении с пероральным или парентеральным введением.Glucocorticoids (HA), such as prednisone, methylprednisolone, hydrocortisone, triamcinolone and dexamethasone are used to relieve inflammation in RA and other autoimmune diseases. GCs are characterized by multiple mechanisms of action: suppression of macrophage accumulation, decrease in capillary permeability, etc. Despite the fact that they are the most powerful anti-inflammatory compounds with a fast onset of action, they are all characterized by severe side effects, including skin atrophy, osteoporosis, muscle atrophy, development cataracts and glaucoma, peptic ulcers, manifestation of latent diabetes and even premature death. To reduce these serious complications, intraarticular administration of HA is used, but this route of administration has a systemic effect, although less than in comparison with oral or parenteral administration.

Препараты, модифицирующие антиревматоидные лекарственные средства (ПМАРЛ) - это синтетические препараты, первым среди них был метотрексат, который позволил улучшить результаты лечения РА. Он проявляет быстрый эффект, хорошо переносится больными, кроме того, характеризуется низкой стоимостью. Однако использование ПМАРЛ сопровождается многими побочными эффектами, в том числе дисбактериозом, дисфункцией печени, почек, ЖКТ и миелосупрессией.Antirheumatoid drug modifying drugs (PMARL) are synthetic drugs, the first among them was methotrexate, which allowed to improve the results of treatment of RA. It shows a quick effect, is well tolerated by patients, in addition, it is characterized by low cost. However, the use of PMARL is accompanied by many side effects, including dysbiosis, liver, kidney, gastrointestinal, and myelosuppression.

В патогенезе обострений РА большую роль играет гиперпродукция цитокинов в суставной полости. Цитокины индуцируют деструкцию хряща на суставной поверхности. Поэтому в последнее время для лечения РА используют ингибиторы цитокинов, среди которых рассматривают этанерсепт (etanercept), инфликсмаб (infliximab), и другие. Используют и антагонист интерлейкина-6 - токилизумаб (tocilizumab). В целом можно утверждать, что использование перечисленных выше препаратов при пероральном и парентеральном применении требует больших доз, длительного применения и нередко сопровождается тяжелыми осложнениями, связанными с системными эффектами этих лекарственных соединений.In the pathogenesis of exacerbations of RA, the overproduction of cytokines in the joint cavity plays an important role. Cytokines induce cartilage destruction on the articular surface. Therefore, recently, cytokine inhibitors have been used to treat RA, among which etanercept (etanercept), inflixmab (infliximab), and others are considered. An antagonist of interleukin-6, tokylizumab (tocilizumab), is also used. In general, it can be argued that the use of the above drugs for oral and parenteral use requires large doses, prolonged use and is often accompanied by severe complications associated with the systemic effects of these drug compounds.

Одним из подходов, и на наш взгляд главным, к созданию лекарственных форм с новыми свойствами является инкапсулирование НПВП и ГК в микрокапсулы (липосомы, нанолипосомы, микросферы, наноэмульсии, наночастицы). Инкапсулирование предполагает две важные составляющие: существенное снижение системного эффекта этих препаратов за счет нахождения в месте введения (внутрисуставно) в виде депо и возможность снижения дозы за счет достижения высокой локальной концентрации вводимого в микрокапсулах вещества. Кроме того, эффект депонирования инкапсулированного соединения сочетается с медленным высвобождением действующего начала и соответствующей пролонгацией действия.One of the approaches, and in our opinion the main one, to the creation of dosage forms with new properties is the encapsulation of NSAIDs and HA in microcapsules (liposomes, nanoliposomes, microspheres, nanoemulsions, nanoparticles). Encapsulation involves two important components: a significant decrease in the systemic effect of these drugs due to being at the injection site (intraarticular) in the form of a depot and the possibility of reducing the dose by achieving a high local concentration of the substance introduced into the microcapsules. In addition, the effect of depositing the encapsulated compound is combined with a slow release of the active principle and a corresponding prolongation of action.

Липосомы представляют собой микрокапсулы из природных фосфолипидов, из которых формируются клеточные мембраны про- и эукариот, в том числе млекопитающих. В связи с этим одно из важнейших преимуществ липосом заключается в том, что их материал подвергается расщеплению или реутилизации по обычным циклам обмена и не накапливается в организме. Фосфолипиды используют в различных комбинациях с дополнением различных природных или синтетических соединений. В зависимости от технологии получения липосомы варьируют по величине (от 0,02 мкм до 2-3 мкм) и структуре. Они могут быть многослойными (мультиламеллярными), малыми униламеллярными величиной вплоть до 0,02 мкм и большими (0,2-3,0 мкм) - олигослойными. В мультиламеллярных липосомах, получаемых способом эмульгирования сухой липидной пленки водным раствором, содержащим инкапсулируемое водорастворимое соединение, захват вещества в водную фазу мал (до 2-3%), так как водное пространство между липидными слоями составляет от 24 до 140 ангстрем в зависимости от фосфолипидного состава. В больших олигослойных липосомах, получаемых, например, методом обращения фаз, водное пространство достаточно велико (0,2-2,8 мкм) и захват вещества в них может достигать 50-60%.Liposomes are microcapsules from natural phospholipids, from which the cell membranes of pro- and eukaryotes, including mammals, are formed. In this regard, one of the most important advantages of liposomes is that their material undergoes cleavage or re-utilization according to normal metabolic cycles and does not accumulate in the body. Phospholipids are used in various combinations with the addition of various natural or synthetic compounds. Depending on the technology for producing liposomes, they vary in size (from 0.02 μm to 2-3 μm) and structure. They can be multilayer (multilamellar), small unilamellar in size up to 0.02 microns and large (0.2-3.0 microns) - oligolayer. In multilamellar liposomes obtained by emulsifying a dry lipid film with an aqueous solution containing an encapsulated water-soluble compound, the capture of the substance into the aqueous phase is small (up to 2-3%), since the water space between the lipid layers is from 24 to 140 angstroms depending on the phospholipid composition . In large oligolayer liposomes obtained, for example, by phase reversal, the water space is quite large (0.2-2.8 microns) and the capture of matter in them can reach 50-60%.

Имеется достаточно большое число экспериментальных исследований по оценке эффективности внутривенного и внутрисуставного введения липосомных форм НПВП, содержащих индометацин, кетанол, диклофенак и гидрокортизон (ГН).There is a fairly large number of experimental studies evaluating the effectiveness of intravenous and intraarticular administration of liposome forms of NSAIDs containing indomethacin, ketanol, diclofenac and hydrocortisone (GN).

Во всех случаях публикации касались исследований индуцированного у мышей или кроликов асептического артрита.In all cases, publications dealt with studies of aseptic arthritis induced in mice or rabbits.

Наиболее перспективными для целей пролонгирования противовоспалительного эффекта и снижения дозы НПВП и ГК нам представляются температурно-чувствительные липосомы, так как они могут представлять собой депо, активирующееся многократно, циклически в зависимости от температуры в суставе или зоне воспаления (периартрально). Настоящее изобретение касается исследования эффективности именно температурно-чувствительных липосомных форм противовоспалительных средств с целью использования их для внутрисуставного введения.The most promising for the purpose of prolonging the anti-inflammatory effect and lowering the dose of NSAIDs and HA are temperature-sensitive liposomes, since they can be a depot that is activated repeatedly, cyclically depending on the temperature in the joint or area of inflammation (peri-arthral). The present invention relates to the study of the effectiveness of temperature-sensitive liposome forms of anti-inflammatory drugs in order to use them for intraarticular administration.

В ряде случаев такие липосомы конструируют из смесей фосфолипидов, характеризующихся различной температурой фазовых переходов. Например, липосомы из дипальмитоилфосфатидилхолина (ДПФХ), характеризующегося температурой фазового перехода Тс=41,5°С, смеси ДПФХ и димиристоилфосфатидилхолина (Тс=12°С)-28°-34°С, а ДПФХ и дистеароилфосфатидилхолина (Тс=58°С)-44°С-56°С. Однако фосфолипиды (фосфоглицериды - ДМФХ и ДСФХ) достаточно дороги.In some cases, such liposomes are constructed from mixtures of phospholipids characterized by different phase transition temperatures. For example, liposomes from dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC), characterized by a phase transition temperature Tc = 41.5 ° C, a mixture of DPPC and dimyristoylphosphatidylcholine (Tc = 12 ° C) -28 ° -34 ° C, and DPPC and distearoylphosphatidylcholine = 58 ° ( ) -44 ° С-56 ° С. However, phospholipids (phosphoglycerides - DMPC and DPPC) are quite expensive.

Известны экспериментальные исследования по изучению противовоспалительного эффекта НПВП и ГК в липосомах из различных смесей липидов, таких как дипальмитоилфосфатидилхолин (ДППС) и фосфатидная кислота (ФК), дистеароилфосфатидилхолин (ДСФХ) и ФК, димиристоилфосфатидилхолин (ДМФХ), ДСФХ и ФК.Experimental studies are known to study the anti-inflammatory effect of NSAIDs and HA in liposomes from various lipid mixtures, such as dipalmitoylphosphatidylcholine (DPS) and phosphatidic acid (FC), distearoylphosphatidylcholine (DPCH), and FC, dimyristoylphosphine dichloride.

При использовании температурно-чувствительных липосом, содержащих НПВП или ГК, реализуется циклически изменяющаяся структура липосом с жидкокристаллического на твердокристаллическое состояние при переходе через температуру фазового перехода (Тс). В зоне такого перехода мембрана липосом нестабильна, эффективно взаимодействует с клетками воспаления (моноцитами, нейтрофилами), а находящееся в мембране липосом противовоспалительное соединение подавляет активность этих клеток. При подавлении воспалительной реакции температура в суставе (или зоне воспаления) падает, например, до 36°С, и липосомы переходят в твердокристаллическое состояние, и в этом состоянии НПВП или ГК не активны. Новый подъем температуры переводит температурно-чувствительные липосомы в метастабильное состояние и действующее начало вновь оказывает противовоспалительный эффект. Несколько таких циклов приводят к полному купированию обострения ревматоидного артрита.When using temperature-sensitive liposomes containing NSAIDs or HA, a cyclically changing structure of liposomes is realized from liquid-crystalline to solid-crystalline state upon transition through the phase transition temperature (Tc). In the zone of such a transition, the liposome membrane is unstable, effectively interacts with inflammatory cells (monocytes, neutrophils), and the anti-inflammatory compound located in the liposome membrane inhibits the activity of these cells. When the inflammatory reaction is suppressed, the temperature in the joint (or the inflammation zone) drops, for example, to 36 ° C, and liposomes turn into a crystalline state, and in this state NSAIDs or HA are not active. A new rise in temperature transfers temperature-sensitive liposomes to a metastable state and the active principle again has an anti-inflammatory effect. Several such cycles lead to a complete relief of exacerbation of rheumatoid arthritis.

Ранее нами был изучен препарат термочувствительных липосом, состоящий из ДПФХ и холестерина в молярном отношении 1:0,2-1:0,25, содержащий в мембране липосом гидрокортизон-ацетат (ГН-ац) для лечения ревматоидного артрита [Розенберг О.А., Патент РФ №2078564, A51K /127], взятый нами в качестве прототипа.We previously studied a thermosensitive liposome preparation, consisting of DPPC and cholesterol in a molar ratio of 1: 0.2-1: 0.25, containing hydrocortisone acetate (GN-ac) in the liposome membrane for the treatment of rheumatoid arthritis [Rosenberg O.A. , RF Patent No. 2078564, A51K / 127], taken by us as a prototype.

Препарат на модели асептического артрита у кроликов показал возможность пролонгирования экспериментального артрита коленного сустава на 5 суток в сравнении со свободным ГН-ац, причем в дозе, в 10 раз меньшей, чем обычно применяющаяся форма гидрокортизон-ацетата, дающая кратковременный противовоспалительный эффект на этой же модели.The drug on the model of aseptic arthritis in rabbits showed the possibility of prolonging experimental knee arthritis for 5 days in comparison with free GN-ac, and at a dose 10 times lower than the commonly used form of hydrocortisone acetate, which gives a short-term anti-inflammatory effect in the same model .

Этот препарат имеет следующий состав в г:This drug has the following composition in g:

ДПФХDPPC 1,6-2,01.6-2.0 ХолестеринCholesterol 0,2-0,250.2-0.25 Гидрокортизон-ацетатHydrocortisone acetate 1,8-2,21.8-2.2 Физиологический растворSaline до 100 млup to 100 ml

В пилотных ограниченных клинических испытаниях у 20 больных было показано, что этот препарат позволяет путем однократной внутрисуставной инъекции купировать симптомы обострения ревматоидного артрита, причем доза ГН-ац составляла одну пятую от обычно применяемой дозы его в свободном виде.In pilot limited clinical trials in 20 patients, it was shown that this drug allows one-time intraarticular injection to stop the symptoms of exacerbation of rheumatoid arthritis, and the dose of GN-ac was one fifth of the commonly used dose in its free form.

Однако такой препарат, как оказалось, имел один серьезный недостаток: медленное начало его действия. Снижение температуры над суставом кролика с индуцированным асептическим артритом наступало только на вторые сутки после инъекции препарата в сустав (то же самое наблюдалось и у больных людей), что снижало его эффективность.However, such a drug, as it turned out, had one serious drawback: the slow onset of its action. A decrease in temperature over the rabbit joint with induced aseptic arthritis occurred only on the second day after injection of the drug into the joint (the same was observed in sick people), which reduced its effectiveness.

Технический результат настоящего изобретения состоит в повышении эффективности липосомного препарата за счет дополнительного введения в водную фазу липосом преднизолона гемисукцината и увеличения содержания липидов в объеме эмульсии.The technical result of the present invention is to increase the effectiveness of the liposome preparation due to the additional introduction into the aqueous phase of the liposomes of prednisolone hemisuccinate and increase the lipid content in the volume of the emulsion.

Этот результат достигается тем, что известный липосомный препарат для купирования асептического воспаления, содержащий ДПФХ, холестерин и гидрокортизон-ацетат, согласно изобретению дополнительно содержит преднизолона гемисукцинат при следующем соотношении ингредиентов, г:This result is achieved by the fact that the known liposome preparation for stopping aseptic inflammation, containing DPPC, cholesterol and hydrocortisone acetate, according to the invention additionally contains prednisolone hemisuccinate in the following ratio of ingredients, g:

ДПФХDPPC 2,40-3,752.40-3.75 ХолестеринCholesterol 0,3-0,3750.3-0.375 Гидрокортизон-ацетатHydrocortisone acetate 1,2-1,81.2-1.8 Преднизолона гемисукцинатPrednisolone hemisuccinate 1,5-2,01.5-2.0 Физиологический растворSaline до 100,0 млup to 100.0 ml

Занимаясь профессионально в течение многих лет изучением свойств липосомных препаратов и имея опыт создания липосом различного состава с получением при этом положительных свойств их, мы попробовали сконструировать липосомы с введением в их состав дополнительного противовоспалительного препарата, причем введением его в водную фазу.Having been professionally studying the properties of liposome preparations for many years and having experience in creating liposomes of various compositions with obtaining their positive properties, we tried to construct liposomes with the introduction of an additional anti-inflammatory drug, and its introduction into the aqueous phase.

В качестве такого препарата мы выбрали гидрофильное противовоспалительное соединение - преднизолона гемисукцинат, который, как показали наши экспериментальные наблюдения, проявлял противовоспалительный эффект уже через 6 часов после внутрисуставного введения. Такой ускоренный противовоспалительный эффект связан, на наш взгляд, с тем, что липосомы сразу при попадании в полость сустава взаимодействуют с клетками иммунологического ряда (лейкоцитами, моноцитами), что могло привести к увеличению проницаемости мембраны липосом и выходу преднизолона гемисукцината в полость сустава, с чем, по-видимому, и связан быстро наступающий противовоспалительный эффект. Этот феномен нам удалось зафиксировать с помощью тепловизора. Температура над суставом начала снижаться уже через 6-8 часов после введения препарата в сустав.As such a drug, we chose a hydrophilic anti-inflammatory compound - prednisone hemisuccinate, which, as shown by our experimental observations, showed an anti-inflammatory effect within 6 hours after intraarticular injection. Such an accelerated anti-inflammatory effect is associated, in our opinion, with the fact that liposomes immediately after entering the joint cavity interact with immunological cells (leukocytes, monocytes), which could lead to an increase in the permeability of the liposome membrane and the release of prednisolone hemisuccinate into the joint cavity, with which , apparently, is associated with a rapidly onset anti-inflammatory effect. We managed to fix this phenomenon with the help of a thermal imager. The temperature above the joint began to decrease already 6-8 hours after the drug was injected into the joint.

Поскольку соотношение ДПФХ и холестерина 1:0,2 молярное в готовом препарате обеспечивает циклическое изменение свойств мембраны липосом, при изменении температуры в суставе (или периартикулярно) с повышенной, 39-40°С, на нормальную - 37-38°С для кролика, в этот момент температурно-чувствительные липосомы переходят в твердокристаллическое состояние. Мембранная составляющая противовоспалительного препарата (гидрокортизон-ацетат) при этом, на наш взгляд, не взаимодействует с клетками и потому не влияет на изменение температуры. В то же время гидрофильное (водорастворимое) соединение - преднизолона гемисукцинат, по-видимому, продолжает вытекать из липосом по градиенту концентрации, подавляя активность нейтрофилов и замедляя активацию воспаления. Когда температура в суставе все же достигает температуры выше 37-38°С и мембрана липосом вновь перейдет в метастабильное состояние, гидрофобное противовоспалительное соединение (гидрокортизон-ацетат) тоже начинает подавлять активность нейтрофилов и температура вновь падает. А содержащийся в липосомах преднизолона гемисукцинат продолжает вытекать и дополнительно подавлять воспаление.Since the ratio of DPPC and cholesterol 1: 0.2 molar in the finished product provides a cyclic change in the properties of the liposome membrane, with a change in temperature in the joint (or periarticular) from elevated, 39-40 ° C, to normal - 37-38 ° C for the rabbit, at this moment, temperature-sensitive liposomes become solid crystalline. In our opinion, the membrane component of the anti-inflammatory drug (hydrocortisone acetate) does not interact with cells and therefore does not affect the temperature change. At the same time, the hydrophilic (water-soluble) compound, prednisone hemisuccinate, apparently continues to flow out of liposomes along a concentration gradient, suppressing the activity of neutrophils and slowing down the activation of inflammation. When the temperature in the joint nevertheless reaches a temperature above 37-38 ° C and the liposome membrane returns to a metastable state, the hydrophobic anti-inflammatory compound (hydrocortisone acetate) also begins to suppress the activity of neutrophils and the temperature drops again. And the hemisuccinate contained in the prednisolone liposomes continues to leak and further suppress inflammation.

Используемое высокое содержание липидов в эмульсии, а именно ДПФХ (2,40-3,75 г) и холестерина (0,3-0,375 г), в предлагаемом нами липосомном составе обеспечивает максимально возможное количество липосом (везикул) в вводимом в сустав объеме эмульсии, что определяет высокий депонирующий эффект инкапсулированного преднизолона гемисукцината в нем, обеспечивая постепенное выделение его в полость сустава и придавая липосомному составу дополнительный пролонгированный противовоспалительный эффект.The high lipid content used in the emulsion, namely DPPC (2.40-3.75 g) and cholesterol (0.3-0.375 g), in our liposome composition provides the maximum possible number of liposomes (vesicles) in the volume of emulsion introduced into the joint , which determines the high deposition effect of encapsulated prednisolone hemisuccinate in it, providing its gradual release into the joint cavity and giving the liposome composition an additional prolonged anti-inflammatory effect.

Получение и противовоспалительный эффект предлагаемого липосомного состава поясняется примерами.Obtaining and anti-inflammatory effect of the proposed liposome composition is illustrated by examples.

Пример 1.Example 1

Содержание ингредиентов следующее, г:The content of the ingredients is as follows, g:

ДПФХDPPC 2,402.40 ХолестеринCholesterol 0,30.3 Гидрокортизон-ацетатHydrocortisone acetate 1,21,2 Преднизолона гемисукцинатPrednisolone hemisuccinate 1,01,0 Физиологический растворSaline до 100,0 млup to 100.0 ml

В круглодонную колбу вносили 2,4 г ДППС, 0,3 г дважды перекристаллизованного холестерина и 1,2 г гидрокортизон-ацетата в хлороформе. Хлороформ удаляли на ротационном испарителе. Далее помещали колбу в эксикатор и выдерживали под вакуумом при остаточном давлении 0,5 мм рт.ст. в течение 2 ч для удаления следов органических растворителей. Затем растворяли липиды пленки, содержащие гидрофобный гидрокортизон-ацетат, в 150 мл свежеперегнанного диэтилового эфира, переносили в колбу на 0,5 литра (шлиф №14), вносили 1,0 г преднизолона гемисукцината в 100 мл физиологического раствора, обрабатывали систему ультразвуком на приборе УЗДН-1 с мощностью 22 кГц в течение 15 секунд при температуре +4°С под защитой нейтрального газа аргона (ХЧ). Процедуру повторяли 4 раза (суммарная обработка ультразвуком - 1 минута). Полученную обратную эмульсию (вода в масле) переводили в прямую путем удаления органического растворителя (диэтилового эфира) на ротационном испарителе. Расфасовывали полученную эмульсию по 2 мл во флаконе и укупоривали в атмосфере аргона резиновыми пробками и завальцовывали алюминиевыми колпачками. Срок хранения составил 1 год при 4°С.2.4 g of DPSA, 0.3 g of twice recrystallized cholesterol and 1.2 g of hydrocortisone acetate in chloroform were added to a round-bottom flask. Chloroform was removed on a rotary evaporator. Next, the flask was placed in a desiccator and kept under vacuum at a residual pressure of 0.5 mm Hg. within 2 hours to remove traces of organic solvents. Then, the lipids of the film containing hydrophobic hydrocortisone acetate were dissolved in 150 ml of freshly distilled diethyl ether, transferred to a 0.5 liter flask (thin section No. 14), 1.0 g of hemisuccinate prednisolone was added to 100 ml of physiological saline, the system was treated with ultrasound on a device UZDN-1 with a power of 22 kHz for 15 seconds at a temperature of + 4 ° C under the protection of neutral argon gas (CG). The procedure was repeated 4 times (total sonication - 1 minute). The resulting inverse emulsion (water in oil) was converted directly by removing the organic solvent (diethyl ether) on a rotary evaporator. The resulting emulsion was packaged in 2 ml vials and corked in an argon atmosphere with rubber stoppers and rolled with aluminum caps. Shelf life was 1 year at 4 ° C.

Воспалительную реакцию в суставе регистрировали с помощью тепловизора ТВ-03 "Кольцо" с черно-белым изображением видеоконтрольного устройства, с температурной разрешающей способностью 0,2°С, с диапазоном возможного улавливания температуры от 20 до 200°С и выносным эталоном +32°С.An inflammatory reaction in the joint was recorded using a TV-03 “Ring” thermal imager with a black and white image of a video monitoring device, with a temperature resolution of 0.2 ° C, with a range of possible capture of temperature from 20 to 200 ° C and an external standard of + 32 ° C .

Препарат вводили кролику внутрисуставно в коленный сустав в объеме 0,4 мл на высоте асептического воспаления через трое суток после индукции артрита смесью поли-D-лизина и гиалуроновой кислоты. Температура над областью сустава на высоте воспаления составляла 39,5°С. Через 6 часов после введения препарата температура упала до 37,5°С и держалась на этом уровне в течение 10 суток (до 13 суток от начала введения препарата) с подъемами до 38°С на 6, 8 и 11 сутки.The drug was injected into the rabbit intraarticularly into the knee joint in a volume of 0.4 ml at the height of aseptic inflammation three days after the induction of arthritis with a mixture of poly-D-lysine and hyaluronic acid. The temperature over the joint at the height of inflammation was 39.5 ° C. 6 hours after drug administration, the temperature dropped to 37.5 ° C and remained at that level for 10 days (up to 13 days from the start of drug administration) with rises to 38 ° C on days 6, 8 and 11.

Пример 2.Example 2

Состав липосом, г:The composition of liposomes, g:

ДПФХDPPC 3,753.75 ХолестеринCholesterol 0,3750.375 Гидрокортизон-ацетатHydrocortisone acetate 1,81.8 Преднизолона гемисукцинатPrednisolone hemisuccinate 2,02.0 Физиологический растворSaline до 100,0 млup to 100.0 ml

Получение состава проводилось аналогично примеру 1. Полученные результаты испытания его на кроликах аналогичны.The composition was obtained analogously to example 1. The obtained results of testing it on rabbits are similar.

Таким образом, созданный нами липосомный состав обладает высоким противовоспалительным действием и по сравнению с прототипом имеет ряд преимуществ, основным из которых является быстрое (через 6 часов от начала введения в сустав) наступление противовоспалительного эффекта и пролонгирование его до 10 суток, что дает нам уверенность на получение таких результатов и при проведении клинических испытаний. Липосомный препарат по прототипу (также на кроликах) начинал действовать лишь на вторые сутки и противовоспалительный эффект удерживался в течение 6 суток. Это свидетельствует о значительных преимуществах предлагаемого нами нового препарата.Thus, the liposome composition created by us has a high anti-inflammatory effect and has several advantages compared to the prototype, the main of which is the rapid (after 6 hours from the start of the introduction into the joint) anti-inflammatory effect and its prolongation to 10 days, which gives us confidence obtaining such results during clinical trials. The prototype liposome preparation (also on rabbits) began to act only on the second day and the anti-inflammatory effect was retained for 6 days. This indicates the significant advantages of our new drug.

Предлагаемый липосомный состав в настоящее время проходит широкие доклинические исследования эффективности и безопасности и готовится документация для подачи ее в Росздрав для получения разрешения на проведение клинических испытаний.The proposed liposome composition is currently undergoing extensive preclinical studies of efficacy and safety and documentation is being prepared for submission to Roszdrav for obtaining permission to conduct clinical trials.

Препарат разработан в лаборатории медицинской биотехнологии РНЦ РХТ, к настоящему времени прошел экспериментальное изучение его свойств в сравнении с прототипом и выявил значительное повышение противовоспалительного действия с быстрым наступлением положительного эффекта.The drug was developed in the laboratory of medical biotechnology of the Russian Science Center RCH, so far it has been experimentally studied its properties in comparison with the prototype and has revealed a significant increase in anti-inflammatory effects with a rapid onset of positive effect.

Claims (2)

Липосомный состав для купирования воспалительных заболеваний суставов, состоящий из дипальмитоилфосфатидилхолина (ДПФХ), холестерина, гидрокортизон-ацетата, преднизолона гемисукцината и физиологического раствора при следующем соотношении ингредиентов, г:Liposomal composition for the relief of inflammatory joint diseases, consisting of dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC), cholesterol, hydrocortisone acetate, prednisolone hemisuccinate and physiological saline in the following ratio of ingredients, g: ДПФХDPPC 2,40-3,752.40-3.75 ХолестеринCholesterol 0,3-0,3750.3-0.375 Гидрокортизон-ацетатHydrocortisone acetate 1,2-1,81.2-1.8 Преднизолона гемисукцинатPrednisolone hemisuccinate 1,5-2,01.5-2.0 Физиологический растворSaline до 100,0 млup to 100.0 ml
RU2016108541A 2016-03-09 2016-03-09 Liposome composition for inflammatory joint diseases relief RU2611998C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2016108541A RU2611998C1 (en) 2016-03-09 2016-03-09 Liposome composition for inflammatory joint diseases relief

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2016108541A RU2611998C1 (en) 2016-03-09 2016-03-09 Liposome composition for inflammatory joint diseases relief

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2611998C1 true RU2611998C1 (en) 2017-03-01

Family

ID=58459249

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016108541A RU2611998C1 (en) 2016-03-09 2016-03-09 Liposome composition for inflammatory joint diseases relief

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2611998C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112972387A (en) * 2021-03-12 2021-06-18 广州新济药业科技有限公司 Lyotropic liquid crystal precursor and preparation method and application thereof

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2078564C1 (en) * 1996-01-30 1997-05-10 Олег Александрович Розенберг Liposome composition for aseptic inflammation arresting
WO2005063213A1 (en) * 2003-12-19 2005-07-14 Biodelivery Sciences International, Inc. Rigid liposomal cochleate and methods of use and manufacture
EP2638896A1 (en) * 2012-03-14 2013-09-18 Bioneer A/S Cationic liposomal drug delivery system for specific targeting of human cd14+ monocytes in whole blood

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2078564C1 (en) * 1996-01-30 1997-05-10 Олег Александрович Розенберг Liposome composition for aseptic inflammation arresting
WO2005063213A1 (en) * 2003-12-19 2005-07-14 Biodelivery Sciences International, Inc. Rigid liposomal cochleate and methods of use and manufacture
EP2638896A1 (en) * 2012-03-14 2013-09-18 Bioneer A/S Cationic liposomal drug delivery system for specific targeting of human cd14+ monocytes in whole blood
WO2013135800A1 (en) * 2012-03-14 2013-09-19 Bioneer A/S Cationic liposomal drug delivery system for specific targeting of human cd14+ monocytes in whole blood

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112972387A (en) * 2021-03-12 2021-06-18 广州新济药业科技有限公司 Lyotropic liquid crystal precursor and preparation method and application thereof
CN112972387B (en) * 2021-03-12 2022-12-13 广州新济药业科技有限公司 Lyotropic liquid crystal precursor and preparation method and application thereof

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5965156A (en) Amphotericin B liposome preparation
Kuo et al. Optimized liposomes with transactivator of transcription peptide and anti-apoptotic drugs to target hippocampal neurons and prevent tau-hyperphosphorylated neurodegeneration
EP0287198B1 (en) Mixtures of polar and neutral lipids for protecting the gastronointestinal tract
Fathi-Azarbayjani et al. Lipid vesicles for the skin delivery of diclofenac: cerosomes vs. other lipid suspensions
WO2011159635A1 (en) Lysophosphatidic acid receptor antagonist for the treatment of dermal conditions
JP2014531460A (en) PH-dependent carriers for targeted release of drugs along the gastrointestinal tract, compositions thereby, and their manufacture and use
JP2021054853A (en) Combination hiv therapeutics
CA2828971A1 (en) Liposome formulation comprising an anti-tumour active substance, method for its preparation and pharmaceutical compositions comprising it
Dandekar et al. Intravenous infusion of xenon-containing liposomes generates rapid antidepressant-like effects
Younes et al. Augmented local skin accumulation efficiency of sertaconazole nitrate via glycerosomal hydrogel: Formulation, statistical optimization, ex vivo performance and in vivo penetration
KR100658436B1 (en) External preparation composition for treatment of adenosyl cobalamin-containing skin disease
RU2611998C1 (en) Liposome composition for inflammatory joint diseases relief
US20060008517A1 (en) Treatment of age-related memory impairment
PT726763E (en) METHODS OF TREATMENT USING UNILAMELLARY LIPOSOMIC FORMULATIONS OF METABOLITES OF ARAQUIDONIC ACID
Sreelaya et al. A Mini-review Based on Multivesicular Liposomes: Composition, Design, Preparation, Characteristics, and Therapeutic Importance as DEPOFOAM® Technology
CN114652683B (en) Mdivi-1 nanometer long circulating liposome and preparation method and application thereof
CA3189192A1 (en) Immunomodulation formulations and related methods
JPH03176425A (en) Fat emulsion
RU2133122C1 (en) Composition exhibiting property for biological membrane repairing
CA2508166A1 (en) Compositions and methods related to lipid:emodin formulations
BRPI0619565A2 (en) liposome compositions
KR20130113494A (en) Liposomal formulation of dalcetrapib
US20250025479A1 (en) Transpore delivery of steroids and large molecules
US20040175417A1 (en) Amphotericin B liposome preparation
CN1650846A (en) Elemene liposome and preparation method thereof

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20190310