RU2600926C2 - Method for modeling tuberculosis of female genital organs - Google Patents
Method for modeling tuberculosis of female genital organs Download PDFInfo
- Publication number
- RU2600926C2 RU2600926C2 RU2015111979/14A RU2015111979A RU2600926C2 RU 2600926 C2 RU2600926 C2 RU 2600926C2 RU 2015111979/14 A RU2015111979/14 A RU 2015111979/14A RU 2015111979 A RU2015111979 A RU 2015111979A RU 2600926 C2 RU2600926 C2 RU 2600926C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- tuberculosis
- female genital
- genital organs
- development
- modeling
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 206010061150 Female genital tract tuberculosis Diseases 0.000 title 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 claims abstract description 27
- 210000003101 oviduct Anatomy 0.000 claims abstract description 25
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims abstract description 22
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 12
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 claims abstract description 9
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 9
- 210000002151 serous membrane Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 230000002365 anti-tubercular Effects 0.000 claims abstract description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims abstract 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 14
- PBBGSZCBWVPOOL-ROUUACIJSA-N 4-[(3r,4r)-4-(4-hydroxyphenyl)hexan-3-yl]phenol Chemical compound C1([C@H](CC)[C@@H](CC)C=2C=CC(O)=CC=2)=CC=C(O)C=C1 PBBGSZCBWVPOOL-ROUUACIJSA-N 0.000 claims description 5
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 claims description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 claims description 2
- 208000005406 female genital tuberculosis Diseases 0.000 claims 1
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 16
- 210000001752 female genitalia Anatomy 0.000 abstract description 14
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 abstract description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 3
- NFDFQCUYFHCNBW-SCGPFSFSSA-N dienestrol Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1\C(=C/C)\C(=C\C)\C1=CC=C(O)C=C1 NFDFQCUYFHCNBW-SCGPFSFSSA-N 0.000 abstract description 2
- 229960003839 dienestrol Drugs 0.000 abstract description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 6
- 210000003815 abdominal wall Anatomy 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 6
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 4
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 206010015548 Euthanasia Diseases 0.000 description 3
- 241000762515 Hydrosalpinx Species 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 208000007893 Salpingitis Diseases 0.000 description 3
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 3
- 208000030843 hydrosalpinx Diseases 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 3
- BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N xylazine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LCSKNASZPVZHEG-UHFFFAOYSA-N 3,6-dimethyl-1,4-dioxane-2,5-dione;1,4-dioxane-2,5-dione Chemical group O=C1COC(=O)CO1.CC1OC(=O)C(C)OC1=O LCSKNASZPVZHEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 2
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 2
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010033733 Papule Diseases 0.000 description 2
- 208000002847 Surgical Wound Diseases 0.000 description 2
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 2
- 229940072185 drug for treatment of tuberculosis Drugs 0.000 description 2
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 2
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 2
- 238000002357 laparoscopic surgery Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000003533 narcotic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 2
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 2
- QAXBVGVYDCAVLV-UHFFFAOYSA-N tiletamine Chemical compound C=1C=CSC=1C1(NCC)CCCCC1=O QAXBVGVYDCAVLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 2
- UVITTYOJFDLOGI-UHFFFAOYSA-N (1,2,5-trimethyl-4-phenylpiperidin-4-yl) propanoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1(OC(=O)CC)CC(C)N(C)CC1C UVITTYOJFDLOGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010062271 Acute-Phase Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000011767 Acute-Phase Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 1
- 241000700112 Chinchilla Species 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 206010020565 Hyperaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000000330 anaesthesiologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- MLYYVTUWGNIJIB-BXKDBHETSA-N cefazolin Chemical compound S1C(C)=NN=C1SCC1=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@@H](NC(=O)CN3N=NN=C3)[C@H]2SC1 MLYYVTUWGNIJIB-BXKDBHETSA-N 0.000 description 1
- 229960001139 cefazolin Drugs 0.000 description 1
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 1
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 1
- 210000005088 multinucleated cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003158 myorelaxant agent Substances 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 150000002960 penicillins Chemical class 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 1
- 229960004523 tiletamine Drugs 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 210000000685 uterine artery Anatomy 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для моделирования и разработки способов лечения туберкулеза женских половых органов.The invention relates to medicine, namely to TB, and can be used to model and develop methods for the treatment of tuberculosis of the female genital organs.
Туберкулез женских гениталий - одна из форм экстрагенитального туберкулеза, чаще всего развивается у женщин репродуктивного возраста от 20 до 45 лет [1, 2, 3, 4, 5]. Туберкулез женских гениталий составляет около 5% всех воспалительных заболеваний женской половой сферы [6] с исходом в трубно-перитонеальное бесплодие, частота которого достигает 97% клинических наблюдений [7]. После проведения комплексной противотуберкулезной терапии восстановление фертильности отмечается лишь у 7,2% женщин [8]. В связи с этим поиск надежных способов моделирования туберкулеза женских половых органов для последующей разработки новых методов лечения патологии чрезвычайно актуален.Tuberculosis of female genitalia is one of the forms of extragenital tuberculosis, most often develops in women of reproductive age from 20 to 45 years [1, 2, 3, 4, 5]. Tuberculosis of female genitalia accounts for about 5% of all inflammatory diseases of the female genital area [6] with outcome in tubal-peritoneal infertility, the frequency of which reaches 97% of clinical observations [7]. After a comprehensive anti-TB treatment, fertility recovery was noted in only 7.2% of women [8]. In this regard, the search for reliable methods of modeling tuberculosis of the female genital organs for the subsequent development of new methods of treating pathology is extremely relevant.
Известен способ моделирования туберкулеза женских половых органов в экспериментах на кроликах (А.с. 912147. Способ моделирования туберкулеза женских половых органов). При нем производится местное заражение животных культурой микобактерий туберкулеза, которая вводится под слизистую оболочку ампулярного отдела маточной трубы.A known method of modeling tuberculosis of the female genital organs in experiments on rabbits (A.S. 912147. A method of modeling tuberculosis of the female genital organs). With it, local infection of animals with a culture of mycobacterium tuberculosis is made, which is introduced under the mucous membrane of the ampulla of the fallopian tube.
Недостатки прототипа:The disadvantages of the prototype:
1. Возможность повторить осуществление способа ставится под сомнение, так как не указаны биологические свойства (вид, вирулентность, чувствительность к противотуберкулезным препаратам) культуры микобактерий, используемой для заражения животных. Некорректно представлен расчет заражающей дозы микобактерий, а именно: не указано количество КОЕ (колониеобразующих единиц) в 1 мг культуры микобактерий туберкулеза.1. The ability to repeat the implementation of the method is called into question, since the biological properties (species, virulence, sensitivity to anti-TB drugs) of the culture of mycobacteria used to infect animals are not indicated. The calculation of the infecting dose of mycobacteria is incorrectly presented, namely: the number of CFU (colony forming units) in 1 mg of the culture of mycobacterium tuberculosis is not indicated.
2. Обеспечить стандартные условия для выполнения технических и патофизиологических этапов предлагаемой авторами модели представляется спорным, поскольку введение расчетной заражающей дозы микобактерий туберкулеза непосредственно под слизистую оболочку маточной трубы под визуальным контролем проблемно и неизбежно сопровождается механической травмой ампулярного отдела с последующим развитием неспецифической воспалительной реакции.2. It is controversial to provide standard conditions for the technical and pathophysiological stages of the model proposed by the authors, since the introduction of a calculated infectious dose of mycobacterium tuberculosis directly under the mucous membrane of the fallopian tube under visual control is problematically and inevitably accompanied by a mechanical injury to the ampullar department with the subsequent development of a non-specific inflammatory reaction.
3. Целевая задача моделирования туберкулеза, поставленная авторами в приложении к половым органам, диктует необходимость учитывать анатомические особенности кровообращения в бассейне маточной артерии. В ампулярном отделе маточной трубы, рекомендуемом авторами в качестве зоны местного заражения культурой микобактерий туберкулеза, кровоток минимальный и, соответственно, наименее благоприятные условия для жизнедеятельности аэробных микобактерий туберкулеза.3. The target modeling of tuberculosis, set by the authors as an appendix to the genitals, dictates the need to take into account the anatomical features of blood circulation in the uterine artery basin. In the ampullar section of the fallopian tube, recommended by the authors as a zone of local infection with the culture of mycobacterium tuberculosis, the blood flow is minimal and, accordingly, the least favorable conditions for the life of aerobic mycobacterium tuberculosis.
4. Не позволяет наблюдать в динамике развитие патологического процесса, поскольку контроль за ходом развития туберкулезной инфекции осуществляется только при выведении животных из опыта. Последнее, в свою очередь, не позволяет выбрать тактику лечения и приводит к неоправданному завышению как количества животных, используемых в исследовании, так и финансовых затрат на их приобретение и содержание.4. It does not allow to observe the dynamics of the development of the pathological process, since monitoring the progress of the development of tuberculosis infection is carried out only when animals are withdrawn from experience. The latter, in turn, does not allow the choice of treatment tactics and leads to unjustified overstatement of both the number of animals used in the study and the financial costs of their acquisition and maintenance.
5. Необходимо использовать наркотические анальгетики (промедол 1 мл 1% р-ра на 1 кг) в качестве анестезиологического пособия.5. It is necessary to use narcotic analgesics (Promedol 1 ml of 1% solution per 1 kg) as an anesthetic aid.
Задачей предлагаемого способа является разработка способа моделирования туберкулеза женских половых органов с возможностью мониторинга развития специфического воспалительного процесса и разработки способов лечения.The objective of the proposed method is to develop a method for modeling tuberculosis of the female genital organs with the ability to monitor the development of a specific inflammatory process and the development of treatment methods.
Поставленная задача решается за счет того, что кроликам вводят суспензию культуры Mycobacterium tuberculosis Erdman в дозе 107 КОЕ/0,2 мл инъекционной иглой под серозную оболочку левой маточной трубы (не входя в ее просвет) снаружи на расстоянии 5 см от левого маточного рога.The problem is solved due to the fact that rabbits are injected with a suspension of Mycobacterium tuberculosis Erdman culture at a dose of 10 7 CFU / 0.2 ml with an injection needle under the serous membrane of the left fallopian tube (without entering its lumen) outside at a distance of 5 cm from the left uterine horn.
Предлагаемый способ моделирования туберкулеза женских половых органов позволяет:The proposed method for modeling tuberculosis of the female genital organs allows:
1. Получить модель локального туберкулезного процесса в женских половых органах, доступную к воспроизводству за счет введения интраоперационно стандартизированной культуры М. tuberculosis Erdman с заданной инфицирующей дозой и обеспечения благоприятных условий для жизнедеятельности аэробных микобактерий туберкулеза за счет выбора зоны с оптимальным кровоснабжением маточной трубы (на расстоянии 5 см от маточного рога), а также улучшения васкуляризации и микроциркуляции маточных труб у эстрогенизированных кроликов.1. To obtain a model of the local tuberculosis process in the female genital organs, accessible for reproduction by introducing an intraoperatively standardized culture of M. tuberculosis Erdman with a given infectious dose and providing favorable conditions for the life of aerobic tuberculosis mycobacteria by choosing a zone with optimal blood supply to the fallopian tube (at a distance 5 cm from the uterine horn), as well as improving vascularization and microcirculation of the fallopian tubes in estrogenized rabbits.
2. Максимально приблизить экспериментальную модель развития специфического процесса к естественному, а также осуществлять прижизненный мониторинг развития и течения специфического воспалительного процесса от момента заражения до эвтаназии каждого животного, включенного в исследование, по результатам кожной пробы - Диаскинтеста (аллерген туберкулезный рекомбинантный, ДСТ), комплекса лабораторных (гематологических и биохимических показателей периферической крови) и лучевых (гистеросальпингография и лапароскопия) исследований.2. To bring the experimental model of development of the specific process to the natural one as close as possible, as well as to carry out intravital monitoring of the development and course of the specific inflammatory process from the moment of infection to euthanasia of each animal included in the study, according to the results of a skin test - Diaskintest (recombinant tuberculous allergen, DST), complex laboratory (hematological and biochemical parameters of peripheral blood) and radiation (hysterosalpingography and laparoscopy) studies.
4. Выбрать тактику лечения.4. Choose a treatment strategy.
5. Исключить использование наркотических анальгетиков.5. To exclude the use of narcotic analgesics.
6. Сократить количество экспериментальных животных.6. Reduce the number of experimental animals.
Способ поясняется чертежами, где на: Фиг. 1 - Эритема через 72 часа после внутрикожного введения Диаскинтеста. А - интактный, Б - зараженный кролик; Фиг. 2 - Инфицированная левая маточная труба через 60 дней. А - интактный, Б - зараженный кролик; Фиг. 3 - Гидросальпинкс инфицированной левой маточной трубы через 120 дней. А - интактный, Б - зараженный кролик; Фиг. 4 - Гистеросальпингография. А - интактный кролик, Б - зараженный кролик; Фиг. 5 - Гистологическая картина слизистой оболочки инфицированного маточного рога кролика. Окраска гематоксилином и эозином ×400.The method is illustrated by drawings, where in: FIG. 1 - Erythema 72 hours after intradermal administration of Diaskintest. A - intact, B - infected rabbit; FIG. 2 - Infected left fallopian tube after 60 days. A - intact, B - infected rabbit; FIG. 3 - Hydrosalpinx of the infected left fallopian tube after 120 days. A - intact, B - infected rabbit; FIG. 4 - Hysterosalpingography. A - intact rabbit, B - infected rabbit; FIG. 5 - Histological picture of the mucous membrane of the infected uterine rabbit horn. Hematoxylin and eosin stain × 400.
Способ осуществляется следующим образом:The method is as follows:
1-й этап - эстрогенизация животных синестролом - вводят 0,1% раствора синэстрола по 0,5 мл внутримышечно через день курсом 4 процедуры в пред- и послеоперационном периодах.Stage 1 - estrogenization of animals with synestrol - is administered 0.1% sinestrol solution of 0.5 ml intramuscularly every other day with a course of 4 procedures in the pre- and postoperative periods.
2-й этап - предоперационная подготовка и осуществление хирургического доступа. Выполняется анестезиологическое пособие: внутримышечное введение препарата для анестезии золетила (золозепам + тилетамин Вирбак СА, Франция) в дозе 25 мг/кг и 2% раствора миорелаксанта рометар (Xylazinum, Биовет, Чехия) в объеме 1,0 мл. Положение кролика - «на спине», конечности фиксируются на специальном станке в максимально вытянутом положении. Шерсть на передней брюшной стене выстригается, кожные покровы обрабатываются 5% раствором йода дважды. Операционное поле обкладывается стерильными салфетками. Разрез кожи длиной 5 см производится по средней линии. Передняя брюшная стенка вскрывается послойно. После вскрытия брюшины, маточные трубы и маточные рога выводятся в операционную рану и со всех сторон отгораживаются стерильным материалом от брюшной полости.2nd stage - preoperative preparation and implementation of surgical access. An anesthesiological aid is performed: intramuscular injection of the drug for anesthesia of zoletil (zolozepam + tiletamine Virbach CA, France) at a dose of 25 mg / kg and 2% solution of muscle relaxant rometar (Xylazinum, Biovet, Czech Republic) in a volume of 1.0 ml. The position of the rabbit is “on the back”, the limbs are fixed on a special machine in the most extended position. The hair on the anterior abdominal wall is trimmed, the skin is treated with a 5% iodine solution twice. The surgical field is covered with sterile wipes. 5 cm skin incision is made along the midline. The anterior abdominal wall is opened in layers. After opening the peritoneum, the fallopian tubes and uterine horns are discharged into the surgical wound and fenced off from the abdominal cavity with sterile material.
3-й этап - приготовление микобактериальной суспензии и инокуляция инфекта. Используют 2-недельный (вторая генерация) стандартный лабораторный вирулентный тест-штамм микобактерий туберкулеза М. tuberculosis Erdman, чувствительный к противотуберкулезным препаратам (из коллекции ФГБУН «Государственного НИИ стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А. Тарасевича» ФМБА России). Микобактериальную суспензию готовят экстемпорально в стерильном физиологическом растворе в заданной концентрации - 10 КОЕ/0,2 мл. Для инокуляции суспензии культуры микобактерий туберкулеза в дозе 107 КОЕ/0,2 мл инъекционная игла вводится под серозную оболочку левой маточной трубы снаружи (не входя в ее просвет) в точке, отстоящей от маточного рога на 5 см. В месте введения образуется папула до 0,3 см.Stage 3 - preparation of mycobacterial suspension and inoculation of infect. A 2-week (second generation) standard laboratory virulent test strain of M. tuberculosis tuberculosis M. tuberculosis Erdman is used, which is sensitive to anti-TB drugs (from the collection of the Federal State Budget Scientific Institution of the State Scientific and Research Institute for Standardization and Control of Medical Biological Preparations named after L. Tarasevich of the FMBA of Russia). Mycobacterial suspension is prepared extemporaneously in sterile physiological saline in a predetermined concentration of 10 CFU / 0.2 ml. To inoculate a suspension of culture of mycobacterium tuberculosis at a dose of 10 7 CFU / 0.2 ml, an injection needle is inserted under the serous membrane of the left fallopian tube outside (without entering its lumen) at a point 5 cm away from the uterine horn. At the injection site, a papule forms 0.3 cm
4-й этап - ушивание брюшины непрерывным викриловым швом, наложение отдельных викриловых швов на апоневроз, мышцы и кожу передней брюшной стенки. Обработка послеоперационного шва 5% раствором йода.Stage 4 - suturing the peritoneum with a continuous vikrilovy seam, the imposition of individual vikrilovy seams on the aponeurosis, muscles and skin of the anterior abdominal wall. Postoperative suture treatment with 5% iodine solution.
5 этап - послеоперационный период. В послеоперационном периоде со 2 по 6 сутки через день продолжается курс эстрогенизации кроликов 0,1% раствором синэстрола (внутримышечно, 0,5 мл), а также профилактика инфекционных осложнений с помощью антибиотиков широкого спектра действия, не обладающих противотуберкулезной активностью (пенициллины, цефалоспорины 1 или 2 поколения, курсом 5 дней).Stage 5 - postoperative period. In the postoperative period, from 2 to 6 days a day, the course of estrogenization of rabbits continues with a 0.1% sinestrol solution (intramuscularly, 0.5 ml), as well as the prevention of infectious complications using broad-spectrum antibiotics that do not have anti-tuberculosis activity (penicillins,
Оценка развития и активности туберкулезного процесса в женских половых органах подтверждается путем:Assessment of the development and activity of the tuberculosis process in the female genital organs is confirmed by:
- постановки кожной пробы с препаратом "ДИАСКИНТЕСТ®" (аллерген туберкулезный рекомбинантный) при внутрикожном введении препарата в концентрации 2 мкг/мл в количестве 0,1 мл на одну кожную пробу;- staging a skin test with the drug "DIASKINTEST®" (recombinant tuberculosis allergen) with intradermal administration of the drug at a concentration of 2 μg / ml in an amount of 0.1 ml per skin test;
- проведения компьютерной томографии легких для исключения генерализации специфического процесса;- computed tomography of the lungs to exclude generalization of a specific process;
- выполнения диагностической лапароскопии;- performing diagnostic laparoscopy;
- исследования взятой из краевой ушной вены крови: подсчет лейкоцитарной формулы, определение СОЭ, белков острой фазы;- studies of blood taken from the marginal ear vein: counting the leukocyte formula, determination of ESR, acute phase proteins;
- проведения гистеросальпингографии;- conducting hysterosalpingography;
- бактериологического исследования биоптатов или гомогенатов серозной оболочки маточного рога и маточной трубы (посев на плотную питательную среду Левенштейна-Йенсена);- bacteriological examination of biopsies or homogenates of the serous membrane of the uterine horn and fallopian tube (seeding on a dense nutrient medium of Levenshtein-Jensen);
- гистологического исследования препаратов стенки маточного рога и маточной трубы.- histological examination of preparations of the walls of the uterine horn and fallopian tube.
Положительный результат кожного теста ДСТ и повышение величины С-реактивного белка в периферической крови (с 3,86±2,58 мг/л до 6,057±2,83 мг/л, р<0,05) на 30 сутки от момента заражения, а также отсутствие патологических изменений в легких является доказательством развития изолированной формы туберкулезного воспаления в женских половых органах кроликов.A positive result of the DST skin test and an increase in the value of C-reactive protein in the peripheral blood (from 3.86 ± 2.58 mg / L to 6.057 ± 2.83 mg / L, p <0.05) on the 30th day from the moment of infection, and the absence of pathological changes in the lungs is evidence of the development of an isolated form of tuberculous inflammation in the female genital organs of rabbits.
Пример.Example.
Кролику №9 породы шиншилла (пол - самка, исходная масса - 4,2 кг, температура +39,0°C) предварительно проводилась внутримышечная эстрогенизация 0,5 мл 0,1% раствора синестрола с седьмых суток до заражения через день. Накануне заражения проведен биохимический и клинический анализ крови.Rabbit No. 9 of chinchilla breed (gender - female, initial weight - 4.2 kg, temperature + 39.0 ° C) was preliminarily administered intramuscularly by estrogenization of 0.5 ml of 0.1% sinestrol solution from the seventh day before infection every other day. On the eve of infection, a biochemical and clinical blood test was performed.
С целью обезболивания внутримышечно введены раствор золетила 0,3 мл и раствор Рометара 2% - 1,0 мл. Кролик зафиксирован на станке в положении на спине, конечности - в максимально вытянутом положении. Шерсть на передней брюшной стене выстрижена, кожные покровы обработаны дважды 5% раствором йода. Произведен разрез кожи длиной 5 см по средней линии, послойное вскрытие передней брюшной стенки. Маточные трубы и маточные рога выведены в операционную рану и отгорожены стерильным материалом от брюшной полости. Затем осуществлено введение суспензии микобактерий М. tuberculosis Erdman в дозе 107 КОЕ/0,2 мл под серозную оболочку левой маточной трубы путем ее наружного прокола инъекционной иглой на расстоянии 5 см от маточного рога. В месте введения инфекта визуализируется папула 0,3 см. Брюшина ушита непрерывным викриловым швом, апоневроз, мышцы и кожа передней брюшной стенки - отдельными викриловыми швами. Послеоперационный шов обработан 5% раствором йода.In order to anesthetize, intramuscularly administered a solution of zoletil 0.3 ml and a solution of
В раннем послеоперационном периоде животное ежедневно наблюдалось, производился осмотр, взвешивание, эстрогенизация 0,1% раствором 0,5 мл синэстрола со 2 по 6 сутки через день, а также профилактика инфекционных осложнений р-ром цефазолина внутримышечно по 1,5 мл (из расчета 50 тыс. ЕД/кг) в течение 5 дней. В дальнейшем клинический осмотр осуществлялся 1-3 раза в неделю.In the early postoperative period, the animal was observed daily, examination, weighing, estrogenization with a 0.1% solution of 0.5 ml sinestrol from 2 to 6 days a day, as well as the prevention of infectious complications with cefazolin solution intramuscularly in a dose of 1.5 ml were performed (based on 50 thousand units / kg) for 5 days. Further clinical examination was carried out 1-3 times a week.
Через 30 дней после инокуляции МБТ осуществляли постановку кожной пробы путем внутрикожного введения Диаскинтеста в концентрации 2 мкг/мл в количестве 0,1 мл на одну кожную пробу. Установлено, что в ответ на введение аллергена в области спины у инфицированного кролика регистрировали появление эритемы размером 15,7±3,5 мм, что свидетельствует о наличии сенсибилизации и подтверждает развитие туберкулезного процесса (Фиг. 1). В периферической крови инфицированного кролика определяли увеличение уровня С-реактивного белка в периферической крови (с 3,86±2,58 до 6,057±2,83 мг/л, р<0,05).30 days after inoculation of the MBT, a skin test was performed by intradermal injection of Diaskintest at a concentration of 2 μg / ml in an amount of 0.1 ml per skin test. It was found that in response to the introduction of an allergen in the back of an infected rabbit, the appearance of erythema of 15.7 ± 3.5 mm was recorded, which indicates the presence of sensitization and confirms the development of the tuberculosis process (Fig. 1). An increase in the level of C-reactive protein in the peripheral blood was determined in the peripheral blood of an infected rabbit (from 3.86 ± 2.58 to 6.057 ± 2.83 mg / L, p <0.05).
Через 60 дней после заражения ревизия брюшной полости с помощью лапароскопической техники показала прогрессирующую отечность, гиперемию и расширение инфицированного левого маточного рога и левой маточной трубы (Фиг. 2). В посевах биоптатов серозной оболочки инфицированного маточного рога определяли рост МБТ. При компьютерной томографии легких у кролика специфические патологические изменения не обнаружены.60 days after infection, revision of the abdominal cavity using laparoscopic techniques showed progressive swelling, hyperemia, and expansion of the infected left uterine horn and left fallopian tube (Fig. 2). The growth of MBT was determined in the cultures of biopsy samples of the serous membrane of the infected uterine horn. When computed tomography of the lungs in a rabbit, specific pathological changes were not detected.
При визуальной ревизии брюшной полости через 120 дней после заражения выявляли рыхлые и плоскостные спайки, облитерацию маточных труб с образованием гидросальпинкса в инфицированной левой маточной трубе (Фиг. 3). При гистеросальпингографии кролика №9 отмечена полная задержка выхода контрастного вещества в брюшную полость, что говорит о непроходимости как инфицированной, так и коллатеральной маточных труб (Фиг. 4). Выполнена эвтаназия животного. При макроскопическом осмотре отмечалась деформация левой маточной трубы, облитерация участка в месте инокуляции суспензии культуры МБТ. В других органах грудной и брюшной полости туберкулезных изменений не обнаружено. При гистологическом исследовании в центральных отделах мышечного слоя инфицированного маточного рога сохранялись признаки специфического воспаления в виде единичных продуктивных туберкулезных эпителиодноклеточных гранулем с гигантскими многоядерными клетками со слабо выраженной лимфоплазмоцитарной инфильтрацией (Фиг. 5).When visual inspection of the abdominal cavity after 120 days after infection revealed loose and planar adhesions, obliteration of the fallopian tubes with the formation of hydrosalpinx in the infected left fallopian tube (Fig. 3). When hysterosalpingography of rabbit No. 9, there was a complete delay in the release of contrast medium into the abdominal cavity, which indicates obstruction of both infected and collateral fallopian tubes (Fig. 4). Performed euthanasia of the animal. Macroscopic examination revealed deformation of the left fallopian tube, obliteration of the site at the site of inoculation of a suspension of MBT culture. In other organs of the thoracic and abdominal cavity, tuberculous changes were not detected. Histological examination in the central sections of the muscle layer of the infected uterine horn showed signs of specific inflammation in the form of single productive tuberculous epithelio-unicellular granulomas with giant multinucleated cells with weakly expressed lymphoplasmacyte infiltration (Fig. 5).
Способ применен на 25 (5 из них интактные) половозрелых кроликах-самках. Эффективность способа. Время наблюдения составило 120 дней. Результаты проведенных опытов свидетельствуют, что инокуляция под серозную оболочку левой маточной трубы суспензии стандартного лабораторного вирулентного тест-штамма М. tuberculosis Erdman в дозе 107 КОЕ/0,2 мл при дополнительной эстрогенизации приводит к развитию у подопытных животных на фоне спаечного процесса специфических воспалительных изменений в матке и маточных трубах с облитерацией просвета маточных труб и/или образованием гидросальпинксов.The method was applied on 25 (5 of them intact) sexually mature female rabbits. The effectiveness of the method. The observation time was 120 days. The results of the experiments indicate that inoculation under the serous membrane of the left fallopian tube with a suspension of a standard laboratory virulent test strain of M. tuberculosis Erdman at a dose of 10 7 CFU / 0.2 ml with additional estrogenization leads to the development of specific inflammatory changes in experimental animals against the background of adhesions in the uterus and fallopian tubes with obliteration of the lumen of the fallopian tubes and / or the formation of hydrosalpinxes.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет воспроизвести в экспериментах на кроликах туберкулезное поражение матки и маточных труб, а также осуществлять прижизненный мониторинг развития и оценку тяжести течения специфического воспалительного процесса от момента заражения до эвтаназии у конкретного животного, включенного в исследование. Это дает возможность разрабатывать тактику лечения туберкулеза женских половых органов на разных этапах развития заболевания.Thus, the proposed method allows to reproduce in experiments on rabbits tuberculous lesions of the uterus and fallopian tubes, as well as carry out intravital monitoring of the development and assessment of the severity of a specific inflammatory process from the moment of infection to euthanasia in a particular animal included in the study. This makes it possible to develop tactics for treating tuberculosis of the female genital organs at different stages of the development of the disease.
Список литературыBibliography
1. Gatongi D.K., Gitau G., Kay V., Ngwenya S., Lafong C, Hasan A. Female genital tuberculosis // The Obstetrician & Gynaecologist. - 2005. - Vol. 7. P. 75-79.1. Gatongi D.K., Gitau G., Kay V., Ngwenya S., Lafong C, Hasan A. Female genital tuberculosis // The Obstetrician & Gynaecologist. - 2005. - Vol. 7. P. 75-79.
2. Hatami M. Tuberculosis of the female genital tract in Iran // Arch Iran Med. - 2005. - Vol.8. - P. 32-35.2. Hatami M. Tuberculosis of the female genital tract in Iran // Arch Iran Med. - 2005 .-- Vol.8. - P. 32-35.
3. Mondal S.K. Histopathologic analysis of female genital tuberculosis: a fifteen-year retrospective study of 110 cases in eastern India // Turk Patoloji Derg. - 2013. - Vol. 29, 1. - P. 41-5.3. Mondal S.K. Histopathologic analysis of female genital tuberculosis: a fifteen-year retrospective study of 110 cases in eastern India // Turk Patoloji Derg. - 2013 .-- Vol. 29, 1. - P. 41-5.
4. Mondal S.K., Dutta Т.К. A ten year clinicopathological study of female genital tuberculosis and impact on fertility // JNMA J Nepal Med Assoc. - 2009. - Jan-Mar. - Vol. 48, N173. - P. 52-7.4. Mondal S.K., Dutta T.K. A ten year clinicopathological study of female genital tuberculosis and impact on fertility // JNMA J Nepal Med Assoc. - 2009. - Jan-Mar. - Vol. 48, N173. - P. 52-7.
5. Crochet J.R., Hawkins K.C., Holland D.P., Copland S.D. Diagnosis of pelvic tuberculosis in a patient with tubal infertility // Fertil Steril. - 2011. - Vol. 95. - P. 289.5. Crochet J.R., Hawkins K.C., Holland D.P., Copland S.D. Diagnosis of pelvic tuberculosis in a patient with tubal infertility // Fertil Steril. - 2011 .-- Vol. 95. - P. 289.
6. Duggal S., Duggal N., Hans C, Mahajan R.K. Female genital ТВ and HIV co-infection // Indian J Med Microbiol. - 2009. - Vol. 27,4. - P. 361-363.6. Duggal S., Duggal N., Hans C, Mahajan R.K. Female genital TV and HIV co-infection // Indian J Med Microbiol. - 2009. - Vol. 27.4. - P. 361-363.
7. Sharma J.B., Roy K.K., Pushparaj M., Kumar S., Malhotra N., Mittal S. Laparoscopic findings in female genital tuberculosis // Arch Gynecol Obstet. - 2008. - Oct. - Vol. 278, N4. - P. 359-64.7. Sharma J.B., Roy K.K., Pushparaj M., Kumar S., Malhotra N., Mittal S. Laparoscopic findings in female genital tuberculosis // Arch Gynecol Obstet. - 2008. - Oct. - Vol. 278, N4. - P. 359-64.
8. Parikh F.R., Nadkarni S.G., Kamat S.A., Naik N., Soonawala S.B., Parikh R.M. Genital tuberculosis-a major pelvic factor causing infertility in Indian women // Fertil Steril. - 1997. - Mar. - Vol. 67, N3. - P. 497-500.8. Parikh F.R., Nadkarni S.G., Kamat S.A., Naik N., Soonawala S.B., Parikh R.M. Genital tuberculosis-a major pelvic factor causing infertility in Indian women // Fertil Steril. - 1997. - Mar. - Vol. 67, N3. - P. 497-500.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015111979/14A RU2600926C2 (en) | 2015-04-01 | 2015-04-01 | Method for modeling tuberculosis of female genital organs |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015111979/14A RU2600926C2 (en) | 2015-04-01 | 2015-04-01 | Method for modeling tuberculosis of female genital organs |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2015111979A RU2015111979A (en) | 2016-10-20 |
| RU2600926C2 true RU2600926C2 (en) | 2016-10-27 |
Family
ID=57138216
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015111979/14A RU2600926C2 (en) | 2015-04-01 | 2015-04-01 | Method for modeling tuberculosis of female genital organs |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2600926C2 (en) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU912147A1 (en) * | 1980-07-15 | 1982-03-15 | Ленинградский Научно-Исследовательский Институт Хирургического Туберкулеза | Female genital organs tuberculosis simulating method |
| JP3740094B2 (en) * | 2002-06-13 | 2006-01-25 | 独立行政法人科学技術振興機構 | Mycobacterial lipoprotein / lipopeptide non-responsive animal model |
| RU2421823C1 (en) * | 2009-10-29 | 2011-06-20 | Федеральное государственное учреждение "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" | Method of simulating tubercular osteitis of various severities |
| RU2533739C2 (en) * | 2012-07-11 | 2014-11-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта" Северо-Западного отделения Российской академии медицинских наук | Method for simulating chronic inflammatory diseases of female genital organs experimentally |
-
2015
- 2015-04-01 RU RU2015111979/14A patent/RU2600926C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU912147A1 (en) * | 1980-07-15 | 1982-03-15 | Ленинградский Научно-Исследовательский Институт Хирургического Туберкулеза | Female genital organs tuberculosis simulating method |
| JP3740094B2 (en) * | 2002-06-13 | 2006-01-25 | 独立行政法人科学技術振興機構 | Mycobacterial lipoprotein / lipopeptide non-responsive animal model |
| RU2421823C1 (en) * | 2009-10-29 | 2011-06-20 | Федеральное государственное учреждение "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" | Method of simulating tubercular osteitis of various severities |
| RU2533739C2 (en) * | 2012-07-11 | 2014-11-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта" Северо-Западного отделения Российской академии медицинских наук | Method for simulating chronic inflammatory diseases of female genital organs experimentally |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| РЕКЕЛЬ Ю. И. Экспериментальная модель туберкулеза женских половых органов и ее использование во фтизиогинекологии. Автореферат, 1985. BLOKHIN NN et al. Experimental model of genital tuberculosis in rabbits Probl Tuberk. 1973;51(9):86-7. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2015111979A (en) | 2016-10-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Carton et al. | Neurosurgical aspects of cryptococcosis | |
| Montori et al. | Intra-abdominal actinomycosis, the great mime: case report and literature review | |
| RU2600926C2 (en) | Method for modeling tuberculosis of female genital organs | |
| RU2714949C2 (en) | Method for simulating local circumscribed peritonitis in rats | |
| WEBB et al. | Pulmonary cryptococcosis | |
| RU2832685C1 (en) | Method for simulating pleural tuberculosis | |
| RU2397771C2 (en) | Method of treating complicated forms of inflammatory diseases of uterine appendages | |
| Chernopolsky et al. | Gastric Actinomycosis Case Report and Literature Review | |
| Максименко et al. | METHOD OF STUDYING THE GREATER OMENTUM OF WHITE RATS IN SEPTIC PERITONITIS | |
| Khamdamov | CLASSIFICATION OF LIVER ECHINOCOCCOSIS AND METHODS OF ITS SURGICAL TREATMENT | |
| Bababeyli | COMPARATIVE FEATURES OF SURGICAL TREATMENT OF AMOEBIC LIVER ABSCESS | |
| Panuciak et al. | Abscesses and cysts of Bartholin's gland-contemporary problems of active women | |
| Barnoevich et al. | RESULTS OF TREATMENT OF PATIENTS WITH LIVER CAVITIES | |
| Shirtaev et al. | Diagnostics and treatment of lung echinococcosis | |
| Guo et al. | Tetracycline treatment of type III prostatitis nanobacteria infection of 100 cases report | |
| Nurmetova | The Indisputable Value of Ultrasound Diagnostics in Acute Small Bowel Obstruction | |
| He et al. | A Rat Model of Pouchitis Following Proctocolectomy and Ileal Pouch-Anal Anastomosis Using Dextran Sulfate Sodium | |
| Yin et al. | Laparoscopic surgery treatment of children with appendiceal abscess | |
| HUNTER | EPITOME OF CURRENr MEDICAL LITERATURE. | |
| Rakhimov | The experimental model of acute pancreatitis | |
| RU2547697C1 (en) | Method for simulating acute destructive infected pancreonecrosis | |
| RU2289853C2 (en) | Method for modeling candidiasis infection in experimental animals | |
| CN112586445A (en) | Construction method of animal ureter calculus model | |
| Kreibich | AN EPITOME OF CUJRRENT MIED [ICAL UTERATURE | |
| Megías et al. | Endoscopic Therapy with Argon Plasma for Radiation Proctitis: Factors Associated to the Number of Therapeutic Sessions |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180402 |