[go: up one dir, main page]

RU2697828C1 - Method of producing a preparation for preventing and treating radiation damage of animals and a method for preventing and treating radiation damage of animals - Google Patents

Method of producing a preparation for preventing and treating radiation damage of animals and a method for preventing and treating radiation damage of animals Download PDF

Info

Publication number
RU2697828C1
RU2697828C1 RU2019117190A RU2019117190A RU2697828C1 RU 2697828 C1 RU2697828 C1 RU 2697828C1 RU 2019117190 A RU2019117190 A RU 2019117190A RU 2019117190 A RU2019117190 A RU 2019117190A RU 2697828 C1 RU2697828 C1 RU 2697828C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
cfu
animals
radiation
pcs
preparation
Prior art date
Application number
RU2019117190A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Рамзи Низамович Низамов
Константин Николаевич Вагин
Геннадий Владимирович Конюхов
Николай Михайлович Василевский
Рустам Наилевич Низамов
Гульназ Ильгизаровна Рахматуллина
Original Assignee
федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности" (ФГБНУ "ФЦТРБ-ВНИВИ")
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности" (ФГБНУ "ФЦТРБ-ВНИВИ") filed Critical федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности" (ФГБНУ "ФЦТРБ-ВНИВИ")
Priority to RU2019117190A priority Critical patent/RU2697828C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2697828C1 publication Critical patent/RU2697828C1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/06Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/56Materials from animals other than mammals
    • A61K35/63Arthropods
    • A61K35/64Insects, e.g. bees, wasps or fleas
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/744Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/745Bifidobacteria
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: radiation biology.
SUBSTANCE: group of inventions relates to radiation biology, namely prevention and treatment of radiation injuries of animals with using preparations based on substances of microbial, zoogenic and mineral origin. That is ensured by culturing cultures of probiotic microorganisms represented by Escherichia coli str. PL-6, bifidus bacteria B. bifidum str. 1 and B. subtilis str. 3. Then the culture liquid of the test strains is mixed at ratio of 0.5:0.3:0.2 and a mixture of microbial cells is added in amount of 1.5⋅109 CFU/mg (E. coli) 0.6⋅109 CFU/mg (B.bifidum 1) and 0.4⋅109 CFU/mg (B. subtilis 3). Highly dispersed bentonite in amount of 20–30 mg per 100 cm3 is added to the obtained mixture composition and apizane in amount of 7–10 mg per 100 cm3 composition. Radiation injures are treated by single subcutaneous administration of the preparation in doses of 7–10 cm3 small animals and 15–20 cm of large animals. Preparation is introduced in amount of 8.5–9.5 mg of dry substance per 1 kg of live weight: for prevention – 1–30 days prior to irradiation, and for treatment – 1–10 days after irradiation.
EFFECT: group of inventions provides formation of animal organism resistance with preventive and therapeutic application of the preparation.
4 cl, 6 ex

Description

Изобретение относится к радиационной биологии, в частности, к получению и применению многокомпонентных смесей радиозащитных препаратов на основе веществ микробного происхождения.The invention relates to radiation biology, in particular, to the production and use of multicomponent mixtures of radioprotective preparations based on substances of microbial origin.

Известен способ получения бактериального полиантигенного комплекса на основе протективного антигена, анатоксина и радиотоксина в соотношении 90:5:5 соответственно, используемого для специфической профилактики радиационных поражений организма (Патент RU 2226106, МПК А61К 39/108, - опубл. 27.01.2003 Бюл. №18). Недостатком способа является отсутствие лечебного эффекта препарата.A known method of producing a bacterial polyantigenic complex based on protective antigen, toxoid and radiotoxin in a ratio of 90: 5: 5, respectively, used for specific prophylaxis of radiation injuries of the body (Patent RU 2226106, IPC A61K 39/108, publ. January 27, 2003 Bull. No. 18). The disadvantage of this method is the lack of therapeutic effect of the drug.

Известен способ получения препарата для профилактики или лечения радиационных поражений организма противолучевой сывороткой, получаемой путем двукратного облучения крупных животных с использованием мощной радиационно-опасной гамма-установки (Патент RU 2169572, А61К 61К 35/28, - опубл. 27.06.2001).A known method of producing a drug for the prevention or treatment of radiation injuries of the body with anti-radiation serum obtained by double exposure of large animals using a powerful radiation-hazardous gamma installation (Patent RU 2169572, A61K 61K 35/28, publ. June 27, 2001).

Недостатком указанного способа является сложная технология получения препарата - двукратное облучение крупных животных (лошади), использование мощной радиационно-опасной гамма-установки и, самое главное - использование весьма высоких лечебных доз дорогостоящего препарата - противолучевой лечебной сыворотки, расходы которой для крупных животных (коров, ослов, свиней, лошадей) составляют 200-400 мл на 1 голову (100-250 мг/кг белка).The disadvantage of this method is the complex technology for the preparation of the drug — double irradiation of large animals (horses), the use of a powerful radiation-hazardous gamma unit and, most importantly, the use of very high therapeutic doses of an expensive drug - anti-radiation treatment serum, the cost of which for large animals (cows, donkeys, pigs, horses) are 200-400 ml per 1 head (100-250 mg / kg protein).

Известен способ получения препарата для профилактики и лечения радиационных поражений организма путем этанолового экстрагирования биологически активных веществ из натуральной кормовой добавки, содержащей следующее соотношение компонентов, мас. %: мед 1,5-2,0; прополис 2,0-2,5; перга - 30,0-35,0; обножка 15,0-17,0; пчелиный яд 0,5-1,0; пчелиный расплод в разных стадиях развития 5,5-6,0; маточное молочко 3,5-4,0; восковая моль и их личинки 2,5-3,0; воск 5,0-7,0; пчелиный подмор 7,0-8,0; травяная мука - остальное (Патент РФ 2338546, МПК A61K 36/00. - опубл. 20.11.2008. Бюл. №32).A known method of obtaining a drug for the prevention and treatment of radiation damage to the body by ethanol extraction of biologically active substances from a natural feed additive containing the following ratio of components, wt. %: honey 1.5-2.0; propolis 2.0-2.5; perga - 30.0-35.0; mice 15.0-17.0; bee venom 0.5-1.0; bee brood in different stages of development 5.5-6.0; royal jelly 3.5-4.0; wax moth and their larvae 2.5-3.0; wax 5.0-7.0; bee subpestilence 7.0-8.0; herbal flour - the rest (RF Patent 2338546, IPC A61K 36/00. - publ. 20.11.2008. Bull. No. 32).

Недостатком способа является использование в качестве исходного сырья для получения этанолового экстракта дорогостоящей кормовой добавки весьма сложного химического состава, что сдерживает (ограничивает) использование способа.The disadvantage of this method is the use of a very complex chemical composition as an initial raw material for the production of an ethanol extract of an expensive feed additive, which inhibits (limits) the use of the method.

Известен способ приготовления и применения бактериального препарата на основе продуктов метаболизма Bacillus subtilis и адсорбента токсинов-цеолита, связывающего и выводящего из организма токсины, тяжелые металлы и радионуклиды (см. статью Е.А. Ткаченко и др. Эрадикационная терапия // Клин. питание. - 2005 - №1. - С. 14-20).A known method of preparation and use of a bacterial preparation based on metabolic products of Bacillus subtilis and an adsorbent of zeolite toxins that binds and removes toxins, heavy metals and radionuclides from the body (see article by E.A. Tkachenko and other Eradication therapy // Clin. Nutrition. - 2005 - No. 1. - S. 14-20).

К недостаткам данного способа следует отнести использование в его составе неочищенного цеолита, содержащего значительное количество нерастворимых солей и кварца, не участвующих в процессе адсорбции токсинов, тяжелых металлов и радионуклидов.The disadvantages of this method include the use in its composition of crude zeolite containing a significant amount of insoluble salts and quartz that are not involved in the adsorption of toxins, heavy metals and radionuclides.

Для использования биопрепаратов на основе веществ микробного происхождения с лечебной и профилактической целью наиболее экономичным, эффективным и целесообразным является использование соматических клеток и продуктов метаболизма микроорганизмов, содержащих наиболее богатый набор биологически активных веществ (белков, аминокислот, ферментов, витаминов, минеральных веществ) бифидогенных и пробиотических веществ: лизоцима, бактериоцинов, колицинов, субтилинов и т.д.For the use of biological products based on substances of microbial origin for therapeutic and prophylactic purposes, the most economical, effective and appropriate is the use of somatic cells and metabolic products of microorganisms containing the richest set of biologically active substances (proteins, amino acids, enzymes, vitamins, minerals) bifidogenic and probiotic substances: lysozyme, bacteriocins, colicins, subtilins, etc.

Наиболее близким к предлагаемому является способ получения препарата для лечения радиационных поражений организма животных, предусматривающий выращивание споровой культуры Bacillus subtilis 3, получение культуральной жидкости микроба, добавление суспензиеобразующей фракции цеолита и гидролизата лактоальбумина, смешивание их в соотношении 1:1:05 соответственно. Для лечения облученных животных препарат вводят однократно подкожно в дозах 7-10 см3 (мелким) и 15-20 см3 (крупным) из расчета 6,5-7,5 мг/кг сухого вещества впервые 10 суток после облучения (патент RU 2366448, МКП А61К 38/01, опубл. 10.09.2009, Бюл №25).Closest to the proposed method is a preparation for the treatment of radiation injuries of an animal organism, which involves growing a spore culture of Bacillus subtilis 3, obtaining a microbe culture liquid, adding a suspension-forming fraction of zeolite and lactoalbumin hydrolyzate, mixing them in a ratio of 1: 1: 05, respectively. For the treatment of irradiated animals, the drug is administered once subcutaneously in doses of 7-10 cm 3 (small) and 15-20 cm 3 (large) at a rate of 6.5-7.5 mg / kg dry matter for the first 10 days after irradiation (patent RU 2366448 , MKP A61K 38/01, published on September 10, 2009, Bull No. 25).

Несмотря на достаточно высокую эффективность указанной композиции, ее недостатком является ограниченность применения - она используется только для лечения больных острой лучевой болезнью (ОЛБ) животных. Для профилактики ОЛБ данная композиция является неэффективной.Despite the rather high efficiency of this composition, its disadvantage is the limited use - it is used only for the treatment of patients with acute radiation sickness (ARS) of animals. For the prevention of ARS, this composition is ineffective.

При создании изобретения ставилась задача получить такую композицию для защиты организма от ионизирующей радиации, которая обладала бы высокой эффективностью как для профилактики, так и для лечения радиационных поражений организма.When creating the invention, the task was to obtain such a composition for protecting the body from ionizing radiation, which would be highly effective both for the prevention and treatment of radiation injuries of the body.

Поставленная задача решается тем, что в способ, включающий выращивание культур на питательных средах, добавление суспензиеобразующей монтмориллонитовой фракции, смешивание, стерилизацию и розлив во флаконы, в качестве культур используют отдельно выращенные на мясо-пептонном бульоне (МПБ) культуры E.coli шт. ПЛ-6 и споровые культуры В.subtilis шт. 3, и на среде Блаурокка - B.bifidum шт. 1, культуральные жидкости которых смешивают в соотношении 0,5:0,2:0,3 соответственно и в полученную смесь вносят 1,5*109 КОЕ/мл микробы E.coli шт. ПЛ-6; 0,6*109 КОЕ/мл B.bifidum шт. 1 и 0,4*109 КОЕ/мл В.subtilis 3, а в качестве суспензиеобразующей монтмориллонитовой фракции вносят высокодисперсный бентонит в количестве 20-30 мг на 100 см3 композиции. Кроме того, используют бентонит, предварительно подвергнутый обработке соляной кислотой с последующим удалением дистиллированной водой растворимых солей кварца, а из оставшихся частиц бентонита отмучивают частицы монтмориллонита величиной 60-90 мкм с последующим высушиванием полученной фракции. А апизан получают путем измельчения высушенного хитинсодержащего сырья (подмора пчел), депротеинирования в 30%-ном растворе гидроокиси натрия, взятом в соотношении 1:3 в течение 6 ч при температуре 75°C, причем перед фильтрацией смеси проводят активацию хитина путем радиолиза продукта в присутствии хлорной кислоты в соотношении 4:1 на гамма - установке «Пума» в дозе 10,0 Гр при мощности дозы 3,13*10-5 кл/кг.с, промывают дистиллированной водой, затем продукт подвергают лиофилизации.The problem is solved in that in a method that includes growing crops on nutrient media, adding a suspension-forming montmorillonite fraction, mixing, sterilizing and bottling, as cultures, E.coli cultures individually grown on meat-peptone broth (MPB) are used. PL-6 and spore cultures of B. subtilis pcs. 3, and on the Blaurock medium - B. bifidum pcs. 1, the culture fluids of which are mixed in a ratio of 0.5: 0.2: 0.3, respectively, and 1.5 * 10 9 CFU / ml of E.coli microbe are added to the resulting mixture. PL-6; 0.6 * 10 9 CFU / ml B. bifidum pcs. 1 and 0.4 * 10 9 CFU / ml of B. subtilis 3, and highly dispersed bentonite in the amount of 20-30 mg per 100 cm 3 of the composition is added as a suspension-forming montmorillonite fraction. In addition, bentonite is used, preliminarily treated with hydrochloric acid, followed by removal of soluble quartz salts with distilled water, and montmorillonite particles of 60-90 μm in size are elutriated from the remaining bentonite particles, followed by drying of the obtained fraction. Apisan is obtained by grinding dried chitin-containing raw materials (dead bees), deproteinating in a 30% sodium hydroxide solution taken in the ratio 1: 3 for 6 hours at a temperature of 75 ° C, and before filtering the mixture, chitin is activated by radiolysis of the product in the presence of perchloric acid in a ratio of 4: 1 on the Puma gamma unit at a dose of 10.0 Gy at a dose rate of 3.13 * 10 -5 cells / kg.s, washed with distilled water, then the product is lyophilized.

При этом полученный радиозащитный препарат вводят животным однократно подкожно в дозах 7-10 см3 (мелким) и 15-20 см3 (крупным) из расчета 8,5-9,5 мг сухого вещества на 1 кг живой массы за 1-30 сут до (с профилактической целью) и через 1-10 сут после облучения (с лечебной целью).In this case, the obtained radioprotective drug is administered to animals once subcutaneously in doses of 7-10 cm 3 (small) and 15-20 cm 3 (large) at the rate of 8.5-9.5 mg of dry matter per 1 kg of live weight for 1-30 days before (with a preventive purpose) and 1-10 days after irradiation (for therapeutic purposes).

Существенным отличием способа получения и применения пробиотического препарата для профилактики и лечения радиационных поражений организма животных является то, что предлагаемая композиция содержит три соматические антигены E.coli ПЛ-6, B.bifidum шт. 1 и В.subtilis шт. 3, растворимые антигены, экзо- и эндотоксины, ферменты (глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа - 8,7 усл. ед; глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа ГЛАФГД 10,9 усл. ед.; лактатдегидрогеназа ЛДГ - 8,9 усл. ед.; алкогольдегидрогеназа - АДГ - 9,7 усл. ед.; формиатдегидрогеназа - ФДГ - 0,5 усл. ед.; аминокислоты (лизин, 2,01%, гистидин - 1,75%, аргинин - 2,05; аспарагиновая кислота - 3,94; треонин - 1,39; серии - 1,41; глутаминовая кислота - 3,53; пролин - 1,96; цистин - 0,22; валин - 1,72; метионин - 0,46; изолейцин - 1,45; лейцин - 2,25; тирозин - 1,24; фениаланин - 1,91%), макроэлементы (калий - 14,0 г/л; натрий - 5,8; магний 1,38; железо - 1,02; медь - 0,32; цинк - 0,71; марганец - 3,42; хром - 0,11; калий 4,37; фосфор - 4,71 г/л); белки (35,3 г/л), углеводы (18,7 г/л), нуклеиновые кислоты - 8,9 г/л); витамины (мкг/мл): B1 - 5; В2 - 0,5; В3 - 20; В5 - 0,9; В6 - 3; В7 - 0,2; В9 - 0,3; В10 - 0,1; В12 - 0,7; витамин К - 0,9; витамин Е - 13.A significant difference in the method of obtaining and using a probiotic preparation for the prevention and treatment of radiation injuries of the animal organism is that the proposed composition contains three somatic antigens of E. coli PL-6, B. bifidum pcs. 1 and B. subtilis pcs. 3, soluble antigens, exo- and endotoxins, enzymes (glucose-6-phosphate dehydrogenase - 8.7 srvc; glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase GLAHFD 10.9 srvc .; lactate dehydrogenase LDH - 8.9 srvc .; alcohol dehydrogenase - ADH - 9.7 conventional units; formate dehydrogenase - FDH - 0.5 conventional units; amino acids (lysine, 2.01%, histidine - 1.75%, arginine - 2.05; aspartic acid - 3 94; threonine - 1.39; series - 1.41; glutamic acid - 3.53; proline - 1.96; cystine - 0.22; valine - 1.72; methionine - 0.46; isoleucine - 1, 45; leucine - 2.25; tyrosine - 1.24; phenialanin - 1.91%), macronutrients (potassium - 14.0 g / l; sodium - 5.8; magnesium 1.3 8; iron - 1.02; copper - 0.32; zinc - 0.71; manganese - 3.42; chromium - 0.11; potassium 4.37; phosphorus - 4.71 g / l); proteins (35 , 3 g / l), carbohydrates (18.7 g / l), nucleic acids - 8.9 g / l); vitamins (μg / ml): B 1 - 5; B 2 - 0.5; In 3 - 20; 5 - 0.9; B 6 - 3; B 7 - 0.2; B 9 - 0.3; B 10 - 0.1; B 12 - 0.7; vitamin K - 0.9; Vitamin E - 13.

Таким образом, предложенная композиция, состоит из консорциума 3 видов пробиотических микроорганизмов (E.coli ПЛ-6- 1,5*109 КОЕ/мл; B.bifidum1 - 0,6*109 КОЕ/мл и B.subtilis3-0,4*109KOE/W), содержит в своем составе соматические антигены, продукты метаболизма указанных микроорганизмов с целым набором биологически активных веществ, представленных экзо- и эндотоксинами, моно- и полисахаридами, аминокислотами, нуклеиновыми кислотами (ДНК,РНК), окислительно-восстановительными, сульфгидрильными и антиоксидантными (каталаза, пероксидаза) ферментами, антибактериальными (колицины, субтилины) веществами, макро- и микроэлементами и витаминами группы В, К и Е.Thus, the proposed composition consists of a consortium of 3 types of probiotic microorganisms (E. coli PL-6 - 1.5 * 10 9 CFU / ml; B. bifidum1 - 0.6 * 10 9 CFU / ml and B.subtilis3-0 , 4 * 10 9 KOE / W), contains somatic antigens, metabolic products of these microorganisms with a whole set of biologically active substances represented by exo and endotoxins, mono and polysaccharides, amino acids, nucleic acids (DNA, RNA), oxidatively -reduction, sulfhydryl and antioxidant (catalase, peroxidase) enzymes, antibacterial ( olitsiny, subtilin) substances, macro- and trace elements and vitamins of group B, R and E.

Следовательно, благодаря поликомпонентному составу предлагаемой композиции и взаимоусиливающему действию этих компонентов в условиях in vivo, она может обеспечить формирование радиорезистентности при предварительном (профилактическом) и пострадиационном (лечебном) применении препарата.Therefore, due to the multicomponent composition of the proposed composition and the mutually reinforcing effect of these components under in vivo conditions, it can ensure the formation of radioresistance during preliminary (preventive) and post-radiation (therapeutic) use of the drug.

Выбор 3 таксономических отдаленных микроорганизмов в качестве основных микробных компонентов в предлагаемой композиции обусловлен тем, что кишечная палочка E.coli ПЛ-6 и продукты ее жизнедеятельности (метаболизма) стимулируют рост бифидобактерий, обладают колициногенностью (способностью синтезировать и экспрессировать в культуральную жидкость колицины - высокоактивные антибактериальные агенты, угнетающие патогенную и условно-патогенную микрофлору кишечника-источника аутоинфекции при радиационном поражении организма), оказывая тем самым радиозащитный эффект; бифидумбактерии (B.bifidum шт. 1) и продукты их метаболизма подавляют жизнедеятельность патогенной и условно-патогенной микрофлоры, особенно токсических штаммов кишечной палочки, усиленно размножающихся после облучения организма и вызывающих пострадиационную аутоинфекцию; выбор в качестве третьего компонента предлагаемой радиозащитной композиции (РЗК) - пробиотического микроорганизма - сенной палочки (В.subtilis 3) обусловлен тем, что он оказывает коррегирующее действие в сочетании с адсорбентом (цеолитом, бентонитом), связывающим и выводящим тяжелые металлы, радионуклиды, радиотоксины, способствует улучшению микроэкологических параметров в кишечнике: В.subtilis 3 - синтезирует различные ферменты (каталазу, амилазу, целлюлозу, липазу, лизоцим, протеазу) и коферменты, аминокислоты (L-изолейцин, L-лейцин, L-гистидин, L-цистеин, L-лизин, L- и D-аспарагиновую кислоту, D-глутаминовую кислоту, D-аргинин), полипептиды, пребиотические компоненты, способствующие улучшению микроэкологических условий в кишечнике, влияющие на обменные процессы и оказывающие иммуномодулирующее действие; в процессе роста на жидких питательных средах В.subtilis 3 вырабатывает антибактериальные субстанции (бактериоцины, лизоцим), наиболее высокой биологической активностью из которых обладают антибиотики бацитрацин-10,-20,-30t, субтилин, амилокабактин, протосубтилин, бацитрацины, А, В, С, Д, Е, F-F3, которые губительно действуют на анаэробные и аэробные грамположительные микроорганизмы (см. кн. Н.П. Блинов, Общие закономерности строения и развития микробов продуцентов биологически активных веществ. - М., Медицина, 1977. - С. 184-185). Выбранные штаммы микроорганизмов в консорциуме, в отдельности обладают радиозащитными свойствами: микробный полиантиген E.coli (патент RU 2226106, A61K 39/108, 2003) при профилактическом (за 1-3 сут до облучения) применения препарата, B.bifidum (см. Хафизов, А.Р. Изыскание радиозащитных средств из класса веществ микробного происхождения: автореф. дис… канд. биол. наук / А.Р. Хафизов. - Казань, 2007. - 19 с.), В.subtilis (патент RU 2366448, - опубл. 20.09.2008) - при лечебном (через 1-10 сут после облучения) применении указанных препаратов соответственно.The choice of 3 taxonomic distant microorganisms as the main microbial components in the proposed composition is due to the fact that E. coli E. coli PL-6 and its metabolic products stimulate the growth of bifidobacteria, have colicinogenicity (the ability to synthesize and express colicins in the culture fluid are highly active antibacterial agents that inhibit pathogenic and conditionally pathogenic microflora of the intestine, the source of autoinfection during radiation damage to the body), thereby by direct radioprotective effect; bifidumbacteria (B. bifidum pcs. 1) and their metabolic products suppress the vital activity of pathogenic and conditionally pathogenic microflora, especially toxic strains of Escherichia coli, which multiply intensely after irradiation of the body and cause post-radiation autoinfection; the choice of the third component of the proposed radioprotective composition (REK) - a probiotic microorganism - hay bacillus (B. subtilis 3) due to the fact that it has a corrective effect in combination with an adsorbent (zeolite, bentonite), which binds and removes heavy metals, radionuclides, radiotoxins helps to improve microecological parameters in the intestine: B. subtilis 3 - synthesizes various enzymes (catalase, amylase, cellulose, lipase, lysozyme, protease) and coenzymes, amino acids (L-isoleucine, L-leucine, L-histidine, L-qi Thein, L-lysine, L- and D-aspartic acid, D-glutamic acid, D-arginine), polypeptides, prebiotic components that improve microecological conditions in the gut, affecting the metabolism and providing immunomodulatory effects; during growth on liquid nutrient media, B. subtilis 3 produces antibacterial substances (bacteriocins, lysozyme), the highest biological activity of which are antibiotics bacitracin-10, -20, -30t, subtilin, amylocabactin, protosubtilin, bacitracin, A, B, C, D, E, FF 3 , which have a detrimental effect on anaerobic and aerobic gram-positive microorganisms (see Prince N.P. Blinov, General laws of the structure and development of microbes of producers of biologically active substances. - M., Medicine, 1977. - C . 184-185). The selected strains of microorganisms in the consortium individually have radioprotective properties: the microbial polyantigen E.coli (patent RU 2226106, A61K 39/108, 2003) during prophylactic (1-3 days before irradiation) use of the drug, B. bifidum (see Khafizov , A.R. Search for radioprotective agents from the class of substances of microbial origin: Abstract of thesis ... Candidate of Biological Sciences / A.R. Hafizov. - Kazan, 2007. - 19 pp.), B. subtilis (patent RU 2366448, - publ. September 20, 2008) - with the therapeutic (1-10 days after irradiation) use of these drugs, respectively.

В качестве антитоксического сорбента и антиоксиданта, обеспечивающего связывание и выведение низкомолекулярных токсинов (хиноидного и липидного радиотоксинов), тяжелых металлов и радионуклидов, в предлагаемом способе применяют высокоактивную, очищенную от кварца и растворимых солей, легкую (высокодисперсную) фракцию бентонита, которая в консорциуме образует невыпадающую в осадок стабильную суспензию микрочастиц бентонита-адсорбента, обеспечивающего постепенное высвобождение иммобилизованных на нем компонентов композиции: микробных клеток и пробиотических веществ, растворенных в культуральной жидкости биологически активных молекул (наночастиц): растворимых антигенов, белков, углеводов, пептидов, аминокислот, нуклеиновых кислот, ферментов; бентониты обладают сорбционными, ионообменными, молекулярно-ситовыми и каталитическими свойствами. Наличие в составе композиции уникального природного минерала-бентонита, обуславливает нормализацию моторно-эвакуаторную функцию кишечника, сорбцию токсических соединений, не вступая в соединение с витаминами, аминокислотами, белками, оставляя их в организме. Ионы токсинов, радионуклиды, содержащиеся в организме, могут включаться в кристаллическую структуру минерала, и, наоборот, из минерала организм получает те неорганические элементы, в которых испытывает потребность. Происходит так называемый селективный ионообмен. Бентонит способствует у животных, подвергнутых ионизирующей радиации, нормализации жирового, белкового, углеводного обменов, повышению иммунитета, устойчивости к стрессу. Постепенное высвобождение иммобилизованных на бентоните биологически активных компонентов радиозащитной композиции ведет к увеличению срока фармакологического действия препарата.As an antitoxic sorbent and antioxidant, which provides the binding and elimination of low molecular weight toxins (quinoid and lipid radiotoxins), heavy metals and radionuclides, the proposed method uses a highly active, purified from quartz and soluble salts, light (highly dispersed) fraction of bentonite, which forms a non-dispersing bentonite in a consortium a stable suspension of bentonite adsorbent microparticles precipitating a gradual release of the components of the composition immobilized on it: microbe s cells and probiotic substances dissolved in the culture liquid biologically active molecules (nanoparticles): soluble antigens, proteins, carbohydrates, peptides, amino acids, nucleic acids, enzymes; bentonites have sorption, ion exchange, molecular sieve and catalytic properties. The presence of a unique natural mineral bentonite in the composition determines the normalization of the motor-evacuation function of the intestine, the sorption of toxic compounds without entering into a connection with vitamins, amino acids, proteins, leaving them in the body. Ions of toxins, radionuclides contained in the body, can be included in the crystalline structure of the mineral, and, conversely, from the mineral the body receives those inorganic elements that it needs. The so-called selective ion exchange occurs. Bentonite helps animals exposed to ionizing radiation, normalize fat, protein, carbohydrate metabolism, increase immunity, and resistance to stress. The gradual release of biologically active components of the radioprotective composition immobilized on bentonite leads to an increase in the duration of the pharmacological action of the drug.

Включение в состав предлагаемой радиозащитной композиции природного биополимера-хитозана (апизана), обосновано тем, что он обладает уникальными свойствами (биосовместимость, нетоксичность, метоболизм - стимуляция, бактерицидность, содержание в составе белков, углеводов, аминокислот, макро- и микроэлементов); проникая в клетки макроорганизма взаимодействует с рибосомами, усиливает синтез РНК и ДНК, ферментов, регулирует деятельность желудочно-кишечного тракта, стимулирует рост Bifidobacteria - полезной микрофлоры кишечника, нарушенной в следствие пострадиационного дисбактериоза. Хитозан (апизан) обладает рядом биологических эффектов: антиоксидантный, антибактериальный, противовирусный, регенерирующий, имуностиму-лирующий, антитоксический, радиопротекторный, радиодекорпорирующий, иммуномодулирующий и т.д.The inclusion in the composition of the proposed radioprotective composition of a natural biopolymer-chitosan (apisan) is justified by the fact that it has unique properties (biocompatibility, nontoxicity, metabolism - stimulation, bactericidal activity, the content of proteins, carbohydrates, amino acids, macro- and microelements); penetrating into the cells of a macroorganism interacts with ribosomes, enhances the synthesis of RNA and DNA, enzymes, regulates the activity of the gastrointestinal tract, stimulates the growth of Bifidobacteria, a useful intestinal microflora, disturbed as a result of post-radiation dysbiosis. Chitosan (apisan) has a number of biological effects: antioxidant, antibacterial, antiviral, regenerating, immunostimulating, antitoxic, radioprotective, radio-decoding, immunomodulating, etc.

Все вышесказанное позволяет получить высокоэффективный препарат, который можно использовать как для профилактики, так и для лечения радиационных поражений организма животных.All of the above allows you to get a highly effective drug that can be used both for prevention and for the treatment of radiation injuries of the animal organism.

Способ получения препарата для профилактики и лечения радиационных поражений осуществляется нижеуказанным образом.A method of obtaining a drug for the prevention and treatment of radiation injuries is carried out as follows.

На первом этапе получают биомассу консорциума штаммов кишечной палочки E.coli «ПЛ-6», бифидобактерий B.bifidum шт. 1 и сенной палочки В.subtilis шт. 3. Для этого указанные тест-штаммы подвергают раздельному культивированию, причем культуры штаммов «ПЛ-6» и шт. 3 культивируют на мясо-пептонном бульоне (МПБ), а шт. 1 - на среде Блаурокка. В указанные питательные среды засевают 24-часовую культуру E.coli «ПЛ-6» и 48-часовую B.bifidum шт. 1 и 7-суточную споровую культуру В.subtilis шт. 3 с посевной дозой 1*107, 1*108, 1*109 м.к./мл соответственно для каждой культуры. Штаммы термостатируют в течение 24 ч (E.coli и В.subtilis 3) - 72 ч (B.bifidum 1) (логарифмическая фаза роста соответствующих культур) при температуре 37-38°C. По истечении указанных экспозиций, выросшие культуры фракционируют на биомассу (центрифугат) и культуральную жидкость (супернатант) путем центрифугирования взвеси при 3500 об/мин в течение 10 минут. В полученных центрифугатах каждой культуры определяют количество микробных клеток.At the first stage, the biomass of a consortium of E. coli Escherichia coli strains "PL-6", bifidobacteria B.bifidum pcs. 1 and hay bacillus B. subtilis pcs. 3. To do this, the indicated test strains are subjected to separate cultivation, moreover, the culture of strains "PL-6" and pcs. 3 are cultivated on meat-peptone broth (BCH), and pcs. 1 - in the environment of Blaurock. A 24-hour E.coli PL-6 culture and a 48-hour B. bifidum 1 and 7-day spore culture of B. subtilis pcs. 3 with a sowing dose of 1 * 10 7 , 1 * 10 8 , 1 * 10 9 m.k. / ml, respectively, for each culture. The strains are incubated for 24 hours (E. coli and B. subtilis 3) - 72 hours (B. bifidum 1) (logarithmic growth phase of the respective cultures) at a temperature of 37-38 ° C. After the expositions indicated, the grown cultures are fractionated into biomass (centrifugate) and culture fluid (supernatant) by centrifuging the suspension at 3500 rpm for 10 minutes. In the resulting centrifugates of each culture, the number of microbial cells is determined.

На втором этапе получают высокодисперсную фракцию бентонита путем его кислотной обработки (Пручкина З.В. и др. АС СССР №952260, опубл. 23.08.82). Для разрушения карбонатов, бентонитовую глину обрабатывают 1 н. соляной кислотой, а затем - 0,1 н. Образовавшиеся растворимые соли и кварц удаляют путем отмывания дистиллированной водой. Для этого глину с помощью воды переносят в вегетационные стаканы (20×12 см). На каждый стакан наносят метки: первая - на высоте 3 см от дна, вторая - на 7 см выше, третья - на 7 см выше второй. Дистиллированную воду доливают до третьей метки, взмучивают в ней цеолит и оставляют на 12 ч для отстаивания. Когда твердая часть глины оседает, а над ней остается прозрачная жидкость, то последнюю удаляют сифоном и вновь наливают дистиллированной воды до верхней метки. Когда суспензия остается во взвешенном состоянии, приступают к отмучиванию частиц величиной 60-90 мкм. Для этого в стакан наливают дистиллированную воду до верхней метки, содержимое перемешивают, через 24 ч погружают сифон на глубину 7 см и с его помощью суспензию переливают в стакан приемник. Отмучивание продолжают до просветления суспензии. В стаканы-приемники к каждой новой порции суспензии добавляют 3-4 капли концентрированной соляной кислоты для коагуляции и осаждения суспензии. Фракцию отмывают дистиллированной водой, а затем высушивают в водяной бане и используют в качестве сорбционного компонента в иммунопробиотическом препарате.At the second stage, a finely dispersed fraction of bentonite is obtained by its acid treatment (Pruchkina Z.V. and other USSR AS No. 952260, publ. 23.08.82). To destroy carbonates, bentonite clay is treated with 1 N. hydrochloric acid, and then 0.1 N. The resulting soluble salts and quartz are removed by washing with distilled water. To do this, clay with water is transferred into vegetation glasses (20 × 12 cm). Labels are applied to each glass: the first is at a height of 3 cm from the bottom, the second is 7 cm higher, the third is 7 cm higher than the second. Distilled water is added to the third mark, zeolite is stirred up in it and left for 12 hours to settle. When the solid part of the clay settles, and a clear liquid remains above it, the latter is removed by a siphon and distilled water is poured again to the top mark. When the suspension remains in suspension, proceed to the elutriation of particles with a size of 60-90 microns. To do this, distilled water is poured into the glass to the top mark, the contents are mixed, after 24 hours the siphon is immersed to a depth of 7 cm and with its help the suspension is poured into the receiver glass. Elutriation is continued until the suspension is clarified. For each new portion of the suspension, 3-4 drops of concentrated hydrochloric acid are added to the receiver glasses to coagulate and precipitate the suspension. The fraction is washed with distilled water, and then dried in a water bath and used as a sorption component in an immunoprobiotic preparation.

Параллельно получают природный биополимер - апизан, используемый в способе в качестве иммуномодулятора - стимулятора роста бифидобактерий, антиоксиданта, антитоксического и радиопротекторного компонента. Получают апизан согласно Патенту РФ 2649360 - опубл. 02.04.2018. Бюл. №10, для чего хитинсодержащее сырье (подмор пчел) подсушивают до влажности 4-6% и измельчают на кофемолке, затем проводят депротеинирование измельченного порошка подмора пчел с использованием 30%-ного раствора гидроокиси натрия, фильтрацию, промывку дистиллированной водой до нейтрального значения pH. Депротеирование измельченного порошка подмора пчел с использованием гидроокиси натрия в соотношении 1:3 проводят в течение 6 ч при температуре 75°C, а перед фильтрацией дополнительно осуществляют активацию хитина путем радиолиза продукта в присутствии хлорной кислоты в соотношении 4:1 на гамма - установке «Пума» в дозе 10,0 Гр при мощности экспозиционной дозы 3,13×10-5 Кл/кг.с, а после промывки дистиллированной водой продукт подвергают лиофилизации и получают биополимер - апизан - порошок светло-коричневого цвета, растворимый в воде и содержащий 40-43% белка, 20-22% хитина, 2-3% минеральных веществ, 10-20% меланина, 8-10% влаги, 1-2% золы, с вязкостью 5-10 с ПЭ и степенью дэацетиллирования 80-85%.In parallel, a natural biopolymer, apisan, is used, which is used in the method as an immunomodulator — a growth stimulator of bifidobacteria, an antioxidant, an antitoxic and radioprotective component. Get apisan according to the RF Patent 2649360 - publ. 04/02/2018. Bull. No. 10, for which chitin-containing raw materials (dead bees) are dried to a moisture content of 4-6% and ground in a coffee grinder, then deproteinization of the ground bees dead dead powder using a 30% sodium hydroxide solution, filtration, washing with distilled water to a neutral pH value. The deproteinization of the crushed powder of dead bees using sodium hydroxide in a ratio of 1: 3 is carried out for 6 hours at a temperature of 75 ° C, and before filtration, chitin is additionally activated by radiolysis of the product in the presence of perchloric acid in a ratio of 4: 1 on the Puma gamma - installation "At a dose of 10.0 Gy with an exposure dose rate of 3.13 × 10 -5 C / kg.s, and after washing with distilled water, the product is lyophilized and a biopolymer, apisan, is a light brown powder, soluble in water and containing 40-43% protein, 20-22% chitin, 2-3% minerals, 10-20% melanin, 8-10% moisture, 1-2% ash, with a viscosity of 5-10 with PE and a degree of deacetylation of 80-85 %

На следующем этапе готовят радиозащитную композицию на основе культуральной жидкости и биомассы E.coli, B.bifidum и В.subtilis, высокодисперсной фракции бентонита - (ВДФБ) и природного биополимера -апизана.At the next stage, a radioprotective composition is prepared on the basis of the culture fluid and biomass of E. coli, B. bifidum and B. subtilis, a finely dispersed fraction of bentonite - (VFB) and a natural biopolymer of apisan.

Для составления радиозащитной композиции берут определенное количество (0,5 частей) культуральной жидкости (КЖ) E.coli ПЛ-6; 0,3 части КЖ B.bifidum 1 и 0,2 части КЖ B.subtilis3, смешивают и в полученную смесь вносят тест микробы консорциума: E.coli - 1,5*109 КОЕ/мл; B.bifidum - 0,6*109 КОЕ/мл и B.subtilis - 0,4*109 КОЕ/мл, в нее вносят порошок высокодисперсной фракции бентонита в количестве 0,02-0,03% (20-30 мг на 100 см3 композиции) и порошок апизана - 0,007-0,010% (7-10 мг на 100 см3 композиции), определяют в ней содержание биологически активных веществ (сухого вещества), которое колеблется в пределах 78,5-79,5 мг на 1 см3 композиции, затем композицию подвергают стерилизации путем фильтрации через фильтр миллипор (размер пор 0,2 мкм) и разливают во флаконы, хранят при температуре 4-6°C.To compose a radioprotective composition, a certain amount (0.5 parts) of the culture fluid (CL) of E. coli PL-6 is taken; 0.3 parts QoL B.bifidum 1 and 0.2 parts QoQ B.subtilis3 are mixed and the microbial test of the consortium is introduced into the mixture: E. coli - 1.5 * 10 9 CFU / ml; B. bifidum - 0.6 * 10 9 CFU / ml and B.subtilis - 0.4 * 10 9 CFU / ml, a powder of finely divided bentonite fraction in the amount of 0.02-0.03% (20-30 mg per 100 cm 3 composition) and apisan powder - 0.007-0.010% (7-10 mg per 100 cm 3 composition), determine the content of biologically active substances (dry matter) in it, which ranges from 78.5-79.5 mg per 1 cm 3 of the composition, then the composition is sterilized by filtration through a millipore filter (pore size 0.2 μm) and poured into bottles, stored at a temperature of 4-6 ° C.

Полученный по вышеуказанному способу радиозащитный препарат на основе соматических клеток пробиотических микроорганизмов, их продуктов метаболизма (метаболитов), высокодисперсной фракции бентонита и природного биополимера, позволяет использовать его в качестве как профилактическое, так и лечебное средство на облученных в летальных дозах лабораторных и сельскохозяйственных животных.Obtained by the above method, a radioprotective drug based on somatic cells of probiotic microorganisms, their metabolic products (metabolites), a finely divided fraction of bentonite and a natural biopolymer, allows it to be used as a prophylactic and therapeutic agent in laboratory and farm animals irradiated in lethal doses.

Радиозащитное действие предложенного многокомпонентного пробиотического препарата осуществляется путем антигенного действия соматических клеток E.coli ПЛ-6, B.bifidum 1 и B.subtilis3, иммуномодифицирующего действия синтезируемых указанными микроорганизмами биологически активных веществ (различных классов ферментов, аминокислот, пептидов, пробиотических компонентов), способствующих антигенному раздражению иммунокомпетентных клеток системы иммуногемопоэза, улучшению микроэкологических условий в кишечнике, нарушенных пострадиационным дисбактериозом, оказывающих бактериостатическое, бактерицидное действие по отношению к условно-патогенной и патогенной микрофлоре, обеспечивая питательные потребности нормальной микрофлоры кишечника и клеток макроорганизма, благодаря входящему в состав культуральных жидкостей, полученных от трех пробиотических микроорганизмов (аминокислот, нуклеиновых кислот, белка, протеинов т.д.), оказывая антитоксическое действие за счет восокоактивной фракции бентонита и апизана, связывающих и выводящих низкомолекулярные токсины (метан, сероводород, аммиак), радиотоксины (супероксидные радикалы, эпоксиды, 0-фенолы, малоновый диальдегид, продукты липопероксидации липидов, продукты распада белков и радионуклиды), нормализуя и пополняя резерв антиоксидантной системы и усиления антиоксидантной активности крови, путем перехвата и дезактивации детерминантов радиационных поражений клеток - радиомодифицированных макромолекул - супероксидных радикалов.The radioprotective effect of the proposed multicomponent probiotic preparation is carried out by the antigenic effect of somatic cells of E. coli PL-6, B. bifidum 1 and B.subtilis3, the immunomodifying action of biologically active substances synthesized by these microorganisms (various classes of enzymes, amino acids, peptides, probiotic components), contributing to antigenic stimulation of immunocompetent cells of the immunohemopoiesis system, improvement of microecological conditions in the intestine, disturbed by post-radiation disbac theriosis, which have a bacteriostatic, bactericidal effect against opportunistic and pathogenic microflora, providing the nutritional needs of the normal intestinal microflora and macroorganism cells, due to the culture fluids obtained from three probiotic microorganisms (amino acids, nucleic acids, protein, proteins, etc.). d.), exerting an antitoxic effect due to the highly active fraction of bentonite and apisan, binding and eliminating low molecular weight toxins (methane, hydrogen sulfide, ammonia), radiotoxins (superoxide radicals, epoxides, 0-phenols, malondialdehyde, lipid lipid peroxidation products, protein breakdown products and radionuclides), normalizing and replenishing the antioxidant system reserve and enhancing blood antioxidant activity, by intercepting and deactivating the determinants of radiation damage to cells - macromolecules - superoxide radicals.

Способ получения и применения композиции препарата для лечения и профилактики радиационных поражений организма иллюстрируется следующими примерами.The method of obtaining and using the composition of the drug for the treatment and prevention of radiation damage to the body is illustrated by the following examples.

Пример 1. Определение концентрации микробов и продуктов метаболизма тест-штаммов в культуральной жидкости. Учитывая, что существующие методы определения концентрации микробов в биомассе (титрация микробных клеток, микроскопирование, измерение сухой или сырой биомассы, определение ДНК, РНК, белка и т.д.) являются сложными, длительными и трудоемкими, мы использовали метод абсорбциометрии (определение концентрации клеток и продуктов их метаболизма в культуральной жидкости по оптической плотности микробной суспензии, измеренной на ФЭКе при длине волны 590 нм). Контролем при определении оптической плотности служил стерильный мясо-пептонный бульон (МПБ) и среда Блаурокка. Для этой цели тест микробы высевали на МПБ (E.coli, В.subtilis) и среду Блаурокка (B.bifidum), выращивали 24,48 и 72 ч и в динамике (через указанные экспозиции) брали пробы культуральной жидкости с выросшими в ней микробами и проводили измерение оптической плотности проб из каждой среды. Полученные значения оптической плотности культуральной жидкости + микробной биомассы соответствовали концентрации микробов и продуктов их метаболизма, поскольку, согласно закону Пауэлла (Powell Е.О. Continuous Cultivation of Micro-organismus / Ed.I. Malek et al. -Prague: Czechoslovae Academy of Sciences, 1964 - P. 45), между микробной биомассой (концентрацией микробов в культуральной жидкости) и количеством образовавшихся продуктов метаболизма существует прямая зависимость:Example 1. Determination of the concentration of microbes and metabolic products of test strains in the culture fluid. Given that the existing methods for determining the concentration of microbes in biomass (titration of microbial cells, microscopy, measuring dry or raw biomass, determination of DNA, RNA, protein, etc.) are complex, lengthy and time-consuming, we used the method of absorptiometry (determination of cell concentration and products of their metabolism in the culture fluid according to the optical density of the microbial suspension, measured at FEK at a wavelength of 590 nm). The control in determining the optical density was sterile meat-peptone broth (BCH) and Blaurock medium. For this purpose, the test microbes were sown on BCH (E. coli, B. subtilis) and Blaurock medium (B. bifidum), grown for 24.48 and 72 hours and in the dynamics (through these exposures) samples of the culture fluid with microbes grown in it were taken and measured the optical density of the samples from each medium. The obtained values of the optical density of the culture fluid + microbial biomass corresponded to the concentration of microbes and their metabolic products, since, according to Powell's law (Powell E.O. Continuous Cultivation of Micro-organismus / Ed.I. Malek et al.-Prague: Czechoslovae Academy of Sciences , 1964 - P. 45), between the microbial biomass (concentration of microbes in the culture fluid) and the amount of metabolic products formed there is a direct relationship:

X=(1/q)(dy/dt), гдеX = (1 / q) (dy / dt), where

Х - количество биомассы, q - метаболический коэффициент, y - количество продукта метаболизма, t - время культивирования микроорганизмаX is the amount of biomass, q is the metabolic coefficient, y is the amount of metabolic product, t is the time of cultivation of the microorganism

Результаты определения оптической плотности культуральной жидкости с биомассой, полученных в результате культивирования тест-штаммов на соответствующих средах показали, что максимальное накопление биомассы E.coli ПЛ-6 (1,5*109 КОЕ/мл) достигалось через 24 ч культивирования, оптическая плотность = 0,317 ед., вес сухой биомассы микробов и продуктов метаболизма 0,75 мг/мл; максимальное накопление биомассы B.subtilis3 - 0,4*109 КОЕ/мл оптическая плотность - 0,301 ед. достигалась через 24 ч, максимальное накопление биомассы и продуктов метаболизма, B.bifidum1 (0,6*109 КОЕ/мл) оптическая плотность 0,298 ед. достигалась через 72 ч соответственно.The results of determining the optical density of the culture fluid with biomass obtained by culturing test strains on appropriate media showed that the maximum accumulation of E. coli PL-6 biomass (1.5 * 10 9 CFU / ml) was achieved after 24 hours of cultivation, optical density = 0.317 units, the weight of dry biomass of microbes and metabolic products of 0.75 mg / ml; the maximum biomass accumulation of B.subtilis3 is 0.4 * 10 9 CFU / ml and the optical density is 0.301 units. achieved after 24 hours, the maximum accumulation of biomass and metabolic products, B. bifidum1 (0.6 * 10 9 CFU / ml), the optical density of 0.298 units. reached after 72 hours, respectively.

Таким образом, при использовании абсорбциометрического метода определения концентрации микробов и продуктов их метаболизма в культуральной жидкости отпадает необходимость титрации микробов, их микроскопирования и определения концентрации продуктов метаболизма путем измерения сухой или сырой биомассы продуктов метаболизма.Thus, when using the absorptiometric method for determining the concentration of microbes and their metabolic products in the culture fluid, there is no need for titration of microbes, their microscopy and determination of the concentration of metabolic products by measuring dry or crude biomass of metabolic products.

Пример 2. Определение оптимального соотношения компонентов в предлагаемой композиции. Для этой цели получали композиции, содержащие разные объемные соотношения культуральной жидкости 1:1:1; 1:0,9:0,1; 1:0,8:0,2; 1:0,7:0,3; 1:0,6:0,4; 1:0,5:0,5; 0,5:0,5:0,05; 0,5:0,3:0,2; 0,5:0,4:0,1; 0,4:0,5:0,1; содержащие микробные клетки 0,4⋅109, 0,5⋅109, 0,6⋅109, 0,7⋅109, 0,8⋅109, 0,9⋅109, 1,0⋅109, 1,1⋅109, 1,2⋅109, 1,3⋅109, 1,4⋅109, 1,5⋅109, 1,6⋅109, КОЕ/мл Е. coli ПЛ-6, В. Bifidum1, В. Subtilis3, содержащие 10, 15, 20, 24, 30 мг/мл высокодисперсной фракции бентонита и 0,003; 0,005; 0,007; 0,009; 0,010; 0,015; 0,020; 0,025 мг/мл апизана. Полученные варианты композиции испытывали на радиозащитную активность в in vitro тест-системе на летально облученных лимфоцитах путем внесения их в среду культивирования летально облученных лимфоцитов в количестве 1 мг на 10 мл культуральной среды. Установлено, что наиболее высокая выживаемость (70%) летально облученных лимфоцитов достигнута в культуральной среде после внесения в нее композиции, содержащей 0,5 частей культуральной жидкости и 1,5⋅109 КОЕ/мл Е. Coli ПЛ-6; 0,3 части КЖ 0,6⋅109 КОЕ/мл В. Bifidum1; 0,2 части КЖ и 0,4⋅109 КОЕ/мл В. Subtilis3, 25 мг высокодисперсной фракции бентонита и 0,020 мг апизана. Любые изменения соотношений компонентов (объема культуральной жидкости, количества микробных клеток, бентонита и апизана) ведут к снижению выживаемости летально облученных лимфоцитов.Example 2. Determination of the optimal ratio of components in the proposed composition. For this purpose, compositions were obtained containing different volumetric ratios of the culture fluid 1: 1: 1; 1: 0.9: 0.1; 1: 0.8: 0.2; 1: 0.7: 0.3; 1: 0.6: 0.4; 1: 0.5: 0.5; 0.5: 0.5: 0.05; 0.5: 0.3: 0.2; 0.5: 0.4: 0.1; 0.4: 0.5: 0.1; containing microbial cells 0.4⋅10 9 , 0.5⋅10 9 , 0.6⋅10 9 , 0.7⋅10 9 , 0.8⋅10 9 , 0.9⋅10 9 , 1.0⋅10 9 , 1.1⋅10 9 , 1.2⋅10 9 , 1.3⋅10 9 , 1.4⋅10 9 , 1.5⋅10 9 , 1.6⋅10 9 , CFU / ml E. coli PL-6, B. Bifidum1, B. Subtilis3, containing 10, 15, 20, 24, 30 mg / ml of a finely divided fraction of bentonite and 0.003; 0.005; 0.007; 0.009; 0.010; 0.015; 0.020; 0.025 mg / ml apisan. The obtained variants of the composition were tested for radioprotective activity in an in vitro test system on lethally irradiated lymphocytes by adding them to the culture medium of lethally irradiated lymphocytes in an amount of 1 mg per 10 ml of culture medium. It was found that the highest survival rate (70%) of lethally irradiated lymphocytes was achieved in the culture medium after the composition containing 0.5 parts of the culture fluid and 1.5 × 10 9 CFU / ml E. Coli PL-6 was added to it; 0.3 parts of QOL 0.6⋅10 9 CFU / ml B. Bifidum1; 0.2 parts of QOL and 0.4 × 10 9 CFU / ml B. Subtilis3, 25 mg of a finely divided fraction of bentonite and 0.020 mg of apisan. Any changes in the ratios of the components (the volume of the culture fluid, the number of microbial cells, bentonite and apisan) lead to a decrease in the survival of lethally irradiated lymphocytes.

Пример 3. Определение оптимальной лечебно-диагностической дозы препарата при парентеральном (подкожном) введении.Example 3. Determination of the optimal therapeutic and diagnostic dose of the drug for parenteral (subcutaneous) administration.

Для определения оптимальной лечебной и профилактической дозы композиции готовили разные концентрации препарата по содержанию биологически активных веществ (БАВ), т.е. по содержанию сухого вещества. Для этого препарат подвергали лиофилизации и полученный сухой порошок разводили в стерильной кипяченой воде в концентрациях 100,0; 90,0; 80,0; 70,0; 60,0; 50,0; 25,0; 12,5; 6,25; 3,12; 1,56; 0,78; 0,39; 0,19 мг/мл. Перечисленные концентрации препарата подкожно вводили белым мышам за 24 ч до облучения (профилактический вариант) и через 24 ч - после облучения (лечебный вариант) в количестве по 0,1 мл на животное.To determine the optimal therapeutic and prophylactic dose of the composition, different concentrations of the preparation were prepared according to the content of biologically active substances (BAS), i.e. by dry matter content. For this, the preparation was lyophilized and the resulting dry powder was diluted in sterile boiled water at concentrations of 100.0; 90.0; 80.0; 70.0; 60.0; 50.0; 25.0; 12.5; 6.25; 3.12; 1.56; 0.78; 0.39; 0.19 mg / ml. The listed concentrations of the drug were subcutaneously administered to white mice 24 hours before irradiation (prophylactic option) and 24 hours after irradiation (treatment option) in an amount of 0.1 ml per animal.

Установлено, что введение препарата белым мышам как до, так и после облучения в концентрациях 100,0-60,0 мг/мл выживаемость животных составляла 75-80%. Введение менее концентрированных растворов препарата сопровождается снижением радиозащитной активности препарата, которая не превышало 50%. Следовательно, оптимальной лечебной и профилактической дозой препарата является 6,0-10,0 мг/кг живой массы, что в среднем составляет 7,5-8,0 мг/кг животного.It was found that administration of the drug to white mice, both before and after irradiation at concentrations of 100.0-60.0 mg / ml, the survival rate of animals was 75-80%. The introduction of less concentrated solutions of the drug is accompanied by a decrease in the radioprotective activity of the drug, which did not exceed 50%. Therefore, the optimal therapeutic and prophylactic dose of the drug is 6.0-10.0 mg / kg body weight, which averages 7.5-8.0 mg / kg animal.

Пример 4. Определение ареактогенности и безвредности композиционного препарата. Для этой цели полученный препарат в различных дозах (1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0; 6,0; 7,0; 8,0; 90 и 10,0 мг/кг живой массы) перорально, внутримышечно, внутривенно подкожно одно-, двух- и трехкратно с интервалом 30, 45, 60, 120 мин вводили белым мышам по 5 животных на каждый вариант опыта, учитывая также отсутствие адекватной или неадекватной реакции на препарат. Установлено, что использование препарата при всех вариантах опыта побочных реакций не вызывало: животные были активны, охотно принимали корм и воду, адекватно реагировали на естественные раздражители, что свидетельствует об ареактогенности препарата и переносимости ими использованного диапазона доз, не зависимо от пути и кратности введения.Example 4. Determination of areactogenicity and harmlessness of a composite preparation. For this purpose, the resulting preparation in various doses (1.0; 2.0; 3.0; 4.0; 5.0; 6.0; 7.0; 8.0; 90 and 10.0 mg / kg live masses) 5 animals were administered orally, intramuscularly, intravenously, subcutaneously once, twice and three times with an interval of 30, 45, 60, 120 minutes to white mice for each experimental variant, taking into account the absence of an adequate or inadequate reaction to the drug. It was established that the use of the drug in all variants of the experience of adverse reactions did not cause: the animals were active, willingly took food and water, adequately responded to natural stimuli, which indicates the areactogenicity of the drug and their tolerance to the used dose range, regardless of the route and frequency of administration.

Пример 5. Определение длительности радиозащитного действия при профилактическом применении препарата. Для этой цели на 60 белых мышах, разделенных на 6 групп по 10 животных в каждой, за 3, 7, 14, 28, 35 и 40 сут до облучения однократно подкожно вводили используемый препарат в оптимальной профилактической дозе (по 0,1 мл, 7,5 мг/кг живой массы). Через указанные сроки после введения препарата животных облучали в дозе ЛД100/30 (7.7 Гр). В течение 30 сут после облучения за животными вели наблюдение, регистрировали кол-во павших и выживших животных. Установлено, что выживаемость животных по срокам иммунизации составляла: у иммунизированных за 3,7 и 14 сут до облучения - 80%; у иммунизированных за 28,35 и 40 сут - 70%.Example 5. Determination of the duration of radioprotective action in the prophylactic use of the drug. For this purpose, on white mice, divided into 6 groups of 10 animals each, 3, 7, 14, 28, 35, and 40 days before irradiation, the drug used was administered subcutaneously in the optimal prophylactic dose (0.1 ml, 7 5 mg / kg body weight). At the indicated times after drug administration, the animals were irradiated with a dose of LD 100/30 (7.7 Gy). Within 30 days after irradiation, animals were monitored, and the number of dead and surviving animals was recorded. It was found that the survival rate of animals by the timing of immunization was: immunized for 3.7 and 14 days before irradiation - 80%; 70% of those immunized for 28.35 and 40 days.

Пример 6. Определение длительности радиозащитного действия при лечебном применении препарата. Опыты проводили согласно примеру 4, с той разницей, что испытуемый препарат применяли через 1, 3, 5, 7, 9, 10, 12, 14 и 16 сут после летального облучения животных. Установлено, что применение испытуемого препарата на фоне (после) облучения оказывало радиозащитный эффект, обеспечивая 80%-ную выживаемость в течение 10 сут после облучения. Отсроченное применение препарата на фоне облучения было менее эффективным - выживаемость животных снизилась, и она не превышала 50-15% (срок наблюдения - 11, 12, 13, 14, 15 и 16 сут после облучения и применения препарата).Example 6. Determination of the duration of radioprotective action in the therapeutic use of the drug. The experiments were carried out according to example 4, with the difference that the test drug was used 1, 3, 5, 7, 9, 10, 12, 14 and 16 days after lethal exposure of animals. It was established that the use of the test drug against the background of (after) irradiation had a radioprotective effect, providing 80% survival for 10 days after irradiation. The delayed use of the drug against the background of irradiation was less effective - the survival of the animals decreased, and it did not exceed 50-15% (observation period was 11, 12, 13, 14, 15, and 16 days after irradiation and use of the drug).

Таким образом, предлагаемый препарат для профилактики и лечения радиозащитных поражений организма животных, обладает выраженным радиозащитным лечебно-профилактическим и биологическим эффектом и может быть использован в ветеринарной медицине для лечения и профилактики острой лучевой болезни, а так же для регуляции деятельности желудочно-кишечного тракта, стимуляции роста Bifidobacteria в кишечнике после пострадиационного дисбактериоза, в качестве антиоксидантного, антибактериального, противовирусного, иммуностимулирующего, радиодикорпорирующего средства, которое отсутствует у прототипа.Thus, the proposed drug for the prevention and treatment of radioprotective lesions of animals, has a pronounced radioprotective therapeutic and biological effect and can be used in veterinary medicine for the treatment and prevention of acute radiation sickness, as well as for regulating the activity of the gastrointestinal tract, stimulation the growth of Bifidobacteria in the intestine after post-radiation dysbiosis, as an antioxidant, antibacterial, antiviral, immunostimulating, radio dicorp a generating agent, which is absent in the prototype.

Claims (4)

1. Способ получения препарата для профилактики и лечения радиационных поражений организма животных, включающий выращивание культур на питательной среде, добавление суспензиеобразующей монтмориллонитовой фракции, смешивание, стерилизацию и розлив во флаконы, отличающийся тем, что в качестве культур используют отдельно выращенные на мясопептонном бульоне (МПБ) культуры Е. coli шт. ПЛ-6 и споровые культуры В. subtilis шт. 3, и на среде Блаурокка бифидобактерий (В. bifidum шт. 1), культуральные жидкости которых смешивают в соотношении 0,5:0,2:0,3 соответственно, и в полученную смесь вносят 1,5⋅109 КОЕ/мл микробы Е. coli ПЛ-6, 0,6⋅109 КОЕ/мл В. bifidum шт. 1 и 0,4⋅109 КОЕ/мл В. subtilis шт. 3, а в качестве суспензиеобразующей монтмориллонитовой фракции вносят высокодисперсный бентонит в количестве 20-30 мг на 100 см3 композиции и апизан в количестве 7-10 мг на 100 см3 композиции.1. A method of obtaining a preparation for the prevention and treatment of radiation injuries of an animal organism, including growing crops on a nutrient medium, adding a suspension-forming montmorillonite fraction, mixing, sterilizing and bottling into vials, characterized in that the cultures are used separately grown on meat and peptone broth (BCH) culture E. coli pcs. PL-6 and spore cultures of B. subtilis pcs. 3, and on Blaurock's medium of bifidobacteria (B. bifidum pcs. 1), the culture fluids of which are mixed in a ratio of 0.5: 0.2: 0.3, respectively, and 1.5 × 10 9 CFU / ml of microbes are added to the resulting mixture E. coli PL-6, 0.6⋅10 9 CFU / ml B. bifidum pcs. 1 and 0.4⋅10 9 CFU / ml B. subtilis pcs. 3, and highly dispersed bentonite in the amount of 20-30 mg per 100 cm 3 of the composition and apisan in the amount of 7-10 mg per 100 cm 3 of the composition are added as a suspension-forming montmorillonite fraction. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют бентонит, предварительно подвергнутый обработке соляной кислотой с последующим удалением растворимых солей кварца дистиллированной водой, а из оставшихся частиц бентонита отмучивают частицы монтмориллонита величиной 60-90 мкм с последующим высушиванием полученной фракции.2. The method according to p. 1, characterized in that use of bentonite, previously subjected to treatment with hydrochloric acid followed by removal of soluble quartz salts with distilled water, and montmorillonite particles of 60-90 μm in size are elutriated from the remaining particles of bentonite, followed by drying of the obtained fraction. 3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что апизан получают путем измельчения высушенного хитинсодержащего сырья (подмора пчел), депротеинирования с использованием 30%-ного раствора гидроокиси натрия, взятого в соотношении 1:3, в течение 6 ч при температуре 75°C, причем перед фильтрацией смеси проводят активацию хитина путем радиолиза продукта в присутствии хлорной кислоты в соотношении 4:1 на гамма-установке «Пума» в дозе 10,0 Гр при мощности дозы 3,13⋅10-5 Кл/кг⋅с, промывают дистиллированной водой, затем продукт подвергают лиофилизации.3. The method according to p. 1, characterized in that apisan is obtained by grinding dried chitin-containing raw materials (dead bees), deproteinization using a 30% sodium hydroxide solution, taken in a ratio of 1: 3, for 6 hours at a temperature of 75 ° C, moreover, before filtering the mixture, chitin is activated by radiolysis of the product in the presence of perchloric acid in a ratio of 4: 1 on a Puma gamma installation at a dose of 10.0 Gy with a dose rate of 3.13⋅10 -5 C / kg⋅s, washed with distilled water, then the product is subjected to lyophilization. 4. Способ профилактики и лечения радиационных поражений организма животных осуществляют путем однократного подкожного введения препарата, полученного по пп. 1-3, в дозах 7-10 см3 (мелким) и 15-20 см3 (крупным) из расчета 8,5-9,5 мг сухого вещества на 1 кг живой массы за 1-30 сут до (с профилактической целью) и через 1-10 сут после облучения (с лечебной целью).4. The method of prevention and treatment of radiation injuries of the animal organism is carried out by a single subcutaneous injection of the drug obtained according to paragraphs. 1-3, in doses of 7 -10 cm 3 (small) and 15-20 cm 3 (large) at the rate of 8.5-9.5 mg of dry matter per 1 kg of live weight 1-30 days before (with prophylactic purpose) and 1-10 days after irradiation (for therapeutic purposes).
RU2019117190A 2019-06-03 2019-06-03 Method of producing a preparation for preventing and treating radiation damage of animals and a method for preventing and treating radiation damage of animals RU2697828C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019117190A RU2697828C1 (en) 2019-06-03 2019-06-03 Method of producing a preparation for preventing and treating radiation damage of animals and a method for preventing and treating radiation damage of animals

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019117190A RU2697828C1 (en) 2019-06-03 2019-06-03 Method of producing a preparation for preventing and treating radiation damage of animals and a method for preventing and treating radiation damage of animals

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2697828C1 true RU2697828C1 (en) 2019-08-21

Family

ID=67733612

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019117190A RU2697828C1 (en) 2019-06-03 2019-06-03 Method of producing a preparation for preventing and treating radiation damage of animals and a method for preventing and treating radiation damage of animals

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2697828C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2760551C1 (en) * 2020-06-17 2021-11-29 федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности" (ФГБНУ "ФЦТРБ-ВНИВИ") Method for treating radiation damage to the body and method for producing a biological product for treating radiation damage to the body
RU2824268C2 (en) * 2021-09-14 2024-08-06 ООО "ПК Ижсинтез-Химпром" Radioprotective agent

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2226106C2 (en) * 2001-09-20 2004-03-27 Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт Method for specific prophylaxis of radiation-caused body lesions and method for obtaining preparation for preventing radiation-caused body lesions
RU2366448C2 (en) * 2007-03-13 2009-09-10 Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных" (ФГУ "ФЦТРБ-ВНИВИ") Method for making preparation used for treatment of radiation injuries in animals and treatment method of radiation injuries in animals
RU2549451C2 (en) * 2013-05-20 2015-04-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный Центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности" (ФГБУ "ФЦТРБ-ВНИВИ") Method of treating combined radiation-thermal injury

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2226106C2 (en) * 2001-09-20 2004-03-27 Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт Method for specific prophylaxis of radiation-caused body lesions and method for obtaining preparation for preventing radiation-caused body lesions
RU2366448C2 (en) * 2007-03-13 2009-09-10 Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных" (ФГУ "ФЦТРБ-ВНИВИ") Method for making preparation used for treatment of radiation injuries in animals and treatment method of radiation injuries in animals
RU2549451C2 (en) * 2013-05-20 2015-04-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный Центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности" (ФГБУ "ФЦТРБ-ВНИВИ") Method of treating combined radiation-thermal injury

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ВАГИН К.Н., Разработка радиозащитного препарата на основе метаболитов E. coli, авт. дисс. к.б.н., Казань, 2012, стр. 8-10, найдено в Интернете 25.06.2019 [on line] на сайте http://earthpapers.net/preview/440248/a#?page=1. *
ВАГИН К.Н., Разработка радиозащитного препарата на основе метаболитов E. coli, авт. дисс. к.б.н., Казань, 2012, стр. 8-10, найдено в Интернете 25.06.2019 [on line] на сайте http://earthpapers.net/preview/440248/a#?page=1. НИЗАМОВ Р.Н. и др., Использование апизана в качестве иммуностимулятора при стимуляции поствакцинального иммунитета, Вестник Владикавказского научного центра, 2013, стр. 235-239, найдено в Интернете 25.06.2019 [on line] на сайте https://cyberleninka.ru/article/v/ispolzovanie-apizana-v-kachestve-immunomodulyatora-pri-stimulyatsii-postvaktsinalnogo-immuniteta. *
НИЗАМОВ Р.Н. и др., Использование апизана в качестве иммуностимулятора при стимуляции поствакцинального иммунитета, Вестник Владикавказского научного центра, 2013, стр. 235-239, найдено в Интернете 25.06.2019 [on line] на сайте https://cyberleninka.ru/article/v/ispolzovanie-apizana-v-kachestve-immunomodulyatora-pri-stimulyatsii-postvaktsinalnogo-immuniteta. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2760551C1 (en) * 2020-06-17 2021-11-29 федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности" (ФГБНУ "ФЦТРБ-ВНИВИ") Method for treating radiation damage to the body and method for producing a biological product for treating radiation damage to the body
RU2824268C2 (en) * 2021-09-14 2024-08-06 ООО "ПК Ижсинтез-Химпром" Radioprotective agent

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109414447A (en) Compositions comprising HMOs, their preparation and use for the prevention and/or treatment of viral and/or bacterial infections
CN1057563C (en) Bacterial stain of bacillus subtilis and application thereof
JPH0779684B2 (en) Bifidobacteria growth promoting composition
KR20060109452A (en) Dry biotherapeutic compositions, uses, devices for administration thereof and methods of administration
RU2697828C1 (en) Method of producing a preparation for preventing and treating radiation damage of animals and a method for preventing and treating radiation damage of animals
RU2627669C1 (en) Method for biofidobacterium metabolism products obtaining for treatment of combined radiation-thermal body damage and method for treatment of combined radiation-thermal body damage
WO2012108347A1 (en) Method for producing innate immunity activator having enhanced innate immunity promoting activity, and royal jelly-derived innate immunity activator which is produced by the production method
RU2166322C2 (en) Biopreparation for bee productivity enhancement
CN1059235C (en) Preparation of living bacillus subtilis and preparation method thereof
RU2366448C2 (en) Method for making preparation used for treatment of radiation injuries in animals and treatment method of radiation injuries in animals
CN101167760B (en) Mushroom fermentation oral liquid with anti-tumor activity and preparation method
JP2011126831A (en) Agent for improving intestinal flora balance and method for producing the same
KR20240083149A (en) New strain Bacillus amyloliquefaciens PTG-124(S4) and method for production of 1-deoxynojirimycin by its strain
RU2101020C1 (en) Preparation showing immunostimulating effect
RU2543353C1 (en) Prophylaxis method of toxicoses of farm animals and poultry
JP2002104979A (en) Therapeutic agent for diabetes using kefir, method for producing the same, protectant for radiation damage using kefir and healthy food using kefir
RU2831360C1 (en) Method of feeding newborn calves
RU2819785C1 (en) Preparation for prevention of associated gastrointestinal and respiratory diseases in calves and method for use thereof
JP4294326B2 (en) Agents for preventing and / or treating seafood infections
CN113559256B (en) Nocardia immunopotentiator and application thereof in preparation of pig vaccine
TWI574696B (en) Novel protein material
RU2717941C1 (en) Group dehelminthization method using fodder mixture and anthelminthic preparation in horses of herd keeping in extreme north
WO1997034010A1 (en) Producer of an anti-tumour melanin-containing preparation 'astromelanin'
JPH06263649A (en) Immunopotenitator
RU2648156C1 (en) Metabiotic immunomodulatory agent containing cellular walls of symbiotic corinebacteria, for strengthening congenital immunity and method of its preparation