RU2696099C1 - Хемоэнзиматический синтез производных 2,5-дикетоморфолина - Google Patents
Хемоэнзиматический синтез производных 2,5-дикетоморфолина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2696099C1 RU2696099C1 RU2019100644A RU2019100644A RU2696099C1 RU 2696099 C1 RU2696099 C1 RU 2696099C1 RU 2019100644 A RU2019100644 A RU 2019100644A RU 2019100644 A RU2019100644 A RU 2019100644A RU 2696099 C1 RU2696099 C1 RU 2696099C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- reaction mixture
- amino acid
- precipitate
- synthesis
- reaction
- Prior art date
Links
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title claims abstract description 26
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 25
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- JMRZMIFDYMSZCB-UHFFFAOYSA-N morpholine-2,5-dione Chemical class O=C1COC(=O)CN1 JMRZMIFDYMSZCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 108010073038 Penicillin Amidase Proteins 0.000 claims abstract description 13
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 29
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 25
- -1 CH 2 -aryl Chemical group 0.000 claims description 22
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 19
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 18
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 14
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 12
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 10
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 9
- 239000011942 biocatalyst Substances 0.000 claims description 9
- 150000001261 hydroxy acids Chemical class 0.000 claims description 7
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 7
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 claims description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 claims description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 claims description 4
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 4
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims description 4
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000010908 decantation Methods 0.000 claims description 3
- 238000004821 distillation Methods 0.000 claims description 3
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 3
- 125000004066 1-hydroxyethyl group Chemical group [H]OC([H])([*])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000000134 2-(methylsulfanyl)ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])SC([H])([H])C([H])([H])[*] 0.000 claims description 2
- 125000004042 4-aminobutyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 claims description 2
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000006302 indol-3-yl methyl group Chemical group [H]N1C([H])=C(C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12)C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- GJRQTCIYDGXPES-UHFFFAOYSA-N iso-butyl acetate Natural products CC(C)COC(C)=O GJRQTCIYDGXPES-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-M isocaproate Chemical compound CC(C)CCC([O-])=O FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- OQAGVSWESNCJJT-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid methyl ester Natural products COC(=O)CC(C)C OQAGVSWESNCJJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SKTCDJAMAYNROS-UHFFFAOYSA-N methoxycyclopentane Chemical compound COC1CCCC1 SKTCDJAMAYNROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 2
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 9
- 230000002210 biocatalytic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 abstract description 3
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 abstract description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 abstract description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 17
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 17
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 9
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 7
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 7
- 241000588813 Alcaligenes faecalis Species 0.000 description 6
- 229940005347 alcaligenes faecalis Drugs 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IVWWFWFVSWOTLP-YVZVNANGSA-N (3'as,4r,7'as)-2,2,2',2'-tetramethylspiro[1,3-dioxolane-4,6'-4,7a-dihydro-3ah-[1,3]dioxolo[4,5-c]pyran]-7'-one Chemical compound C([C@@H]1OC(O[C@@H]1C1=O)(C)C)O[C@]21COC(C)(C)O2 IVWWFWFVSWOTLP-YVZVNANGSA-N 0.000 description 5
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- QGEQUAKPYZZCDR-GJZGRUSLSA-N (3S,6S)-3-benzyl-6-phenylmorpholine-2,5-dione Chemical compound O=C1N[C@@H](Cc2ccccc2)C(=O)O[C@H]1c1ccccc1 QGEQUAKPYZZCDR-GJZGRUSLSA-N 0.000 description 4
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-Phenylalanine Natural products OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 239000005373 porous glass Substances 0.000 description 3
- UXRNROAIWPYVPP-IRXDYDNUSA-N (3S,6S)-3-(1H-indol-3-ylmethyl)-6-phenylmorpholine-2,5-dione Chemical compound O=C1N[C@@H](Cc2c[nH]c3ccccc23)C(=O)O[C@H]1c1ccccc1 UXRNROAIWPYVPP-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 2
- OZGMODDEIHYPRY-UHFFFAOYSA-N 2-bromopropanoyl chloride Chemical compound CC(Br)C(Cl)=O OZGMODDEIHYPRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-Asparagine Natural products OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 238000006058 Ugi-reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- VXIVSQZSERGHQP-UHFFFAOYSA-N chloroacetamide Chemical compound NC(=O)CCl VXIVSQZSERGHQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N tryptophan Chemical compound C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FUHGSOAURCZWCC-VIFPVBQESA-N (2s)-2-[(2-chloroacetyl)amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound ClCC(=O)N[C@H](C(=O)O)CC1=CC=CC=C1 FUHGSOAURCZWCC-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- ATCFYQUZTYQTJN-AXDSSHIGSA-N (2s)-2-amino-4-benzylpentanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ATCFYQUZTYQTJN-AXDSSHIGSA-N 0.000 description 1
- RBMGJIZCEWRQES-UHFFFAOYSA-N 4-amino-2-azaniumyl-4-oxobutanoate;hydrate Chemical compound O.OC(=O)C(N)CC(N)=O RBMGJIZCEWRQES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N Alanine Chemical compound CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000194107 Bacillus megaterium Species 0.000 description 1
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588773 Kluyvera cryocrescens Species 0.000 description 1
- 229920002614 Polyether block amide Polymers 0.000 description 1
- 241000588777 Providencia rettgeri Species 0.000 description 1
- 241000185992 Rhizobium viscosum Species 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 231100001261 hazardous Toxicity 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 150000002527 isonitriles Chemical class 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical class [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000010891 toxic waste Substances 0.000 description 1
- 238000006276 transfer reaction Methods 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
- A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D265/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
- C07D265/28—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines
- C07D265/30—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines not condensed with other rings
- C07D265/32—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines not condensed with other rings with oxygen atoms directly attached to ring carbon atoms
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к новому способу синтеза производных 2,5-дикетоморфолинов. Технический результат: разработан новый способ получения 2,5-дикетоморфолинов, который включает биокаталитическую стадию образования амидной связи между карбоксильной группой оксикислоты и аминогруппой аминокислоты с последующей химической стадией внутримолекулярной этерификации. Использование фермента пенициллинацилазы на стадии образования амидной связи позволяет добиться высокого выхода и высокой энантиомерной чистоты целевого продукта. 5 з.п. ф-лы, 6 пр.
Description
Область техники
Изобретение относится к синтезу производных 2,5-дикетоморфолина, представляющих собой мономеры для получения биоразлагаемых полимеров полидепсипептидов (полиэфирамидов). Полимеры этого типа находят применение в медицине и могут быть использованы при хирургическом сшивании тканей, в качестве костных пластин, а также носителей для контролируемого высвобождения лекарственных веществ. Производные 2,5-дикетоморфолина представляют интерес как биологически активные соединения: они обладают антибиотической, антиоксидантной, антикоагулянтной, а также иммуностимулирующей активностью, проявляют ингибиторное действие по отношению к различным ферментам.
Уровень техники
В научной и патентной литературе известны способы получения производных 2,5-дикетоморфолина методами классического органического многостадийного синтеза, включающие стадии постановки и снятия защитных групп и использующие активированные производные амино- и оксикислот. Все известные способы можно свести к двум основным подходам: первоначальное образование амидной связи, а затем циклизация в лактон, и наоборот, этерификация с последующей циклизацией в лактам [Smelcerovic A. et al. J. of Amino Acids. 2014, 46, P. 825.]. Чаще всего авторами используются альфа-галогензамещенные производные галогенангидридов карбоновых кислот [CN 108299332, 20-07-2018; Cook A. et al. J. Chem. Soc. 1949, P. 2347.; Smelcerovic A et al. J. Mol. Struct. 2011, 985, P. 397.], N-защищенные производные аминокислот [Pedras M. et al. Org. Lett. 2004, 6, P. 4615.; Kagamizono T. et al. J. Antibiot. 1995, 48, P. 1407.], O-защищенные производные аминокислот [Hughes A. et al. J. Org. Chem. 2005, 70, P. 3079.]. В патентном документе [US 005817751, 06-10-1998] сообщается о применении для синтеза предшественника производного 2,5-дикетоморфолина реакции Уги, заключающейся в создании N-замещенной амидной связи путем конденсации четырех компонентов: оксикислоты, аминокислоты, альдегида или кетона и изонитрила, причем аминокислота ковалентно связана сложноэфирной связью через карбоксигруппу с твердой подложкой, содержащей гидроксильные группы. Последующая циклизация предшественника приводит к образованию целевого продукта с регенерацией подложки.
Известные способы получения производных 2,5-дикетоморфолина имеют существенные ограничения. При необходимости получения энантиомерно чистых соединений нужно использовать оптически чистые исходные вещества. Для региоселективного превращения необходимы активированные реагенты. В связи с полифункциональностью исходных реагентов возникает необходимость использования защитных групп, что значительно усложняет синтез и делает его многостадийным, вследствие чего общий выход конечного продукта не превышает 50%, несмотря на довольно высокие выходы конкретных стадий синтеза. Применение биокатализа для синтеза подобных соединений позволяет преодолеть указанные ограничения и получить конечный продукт со значительно более высоким выходом и энантиомерной чистотой более 99,9%.
Наиболее близким к заявленному решению является способ, описанный в патентном документе [CN 108299332, 20-07-2018], авторы которого синтезировали (3R,6R и 3S,6S)-3-(бензилоксикарбонил-этилен)-6-метил-морфолин-2,5-дион в две стадии исходя из 2-бромпропионилхлорида и гамма-бензил-глутаминовой кислоты, причем в зависимости от способа очистки общий выход продукта оказался невелик и составил 3,4-34,8%. Кроме того, получение 2-бромпропионилхлорида также потребует проведения реакций с участием опасных и агрессивных реагентов. Способ синтеза 2,5-дикетоморфолинов, указанный в патентном документе [US 005817751, 06-10-1998], с применением реакции Уги описан выше и имеет сходные ограничения.
Раскрытие изобретения
Технической проблемой, на решение которой направлено изобретение, является разработка простого в исполнении способа синтеза производных 2,5-дикетоморфолина, обеспечивающего высокий выход целевого продукта и его энантиомерную чистоту.
Заявлен способ синтеза производных 2,5-дикетоморфолина, общей формулы
где R1=Н, СН3, арил; R2=Н, СН3, арил, CH2-арил, изопропил, пропил, бутил, оксиметил, меткаптометил, 1-оксиэтил, 1-метилпропил, 2-метилпропил, индол-3-ил-метил, карбамоилметил, карбамоилэтил, карбоксиметил, карбоксиэтил, 4-аминобутил, 3-гуанидилпропил, 2-(метилсульфанил)-этил исходя из аминокислот и амидов оксикислот, включающий стадию образования амидной связи с использованием пенициллинацилазы и последующую циклизацию под действием активирующего агента, например, N,N'-дициклогексилкарбодиимида. Способ заключается в том, что готовят насыщенные водные растворы аминокислоты, являющейся нуклеофилом, и амида оксикислоты, являющегося ацильным донором, в мольном соотношении компонентов от 5:1 до 1:3, доводят рН до 9-11, добавляют биокатализатор - растворимую, иммобилизованную или мутантную форму пенициллинацилазы для обеспечения необходимого превращения, выдерживают реакционную смесь при 10-35°С до достижения максимального выхода N-оксиацил-аминокислоты, доводят рН до 2-3, полученную N-оксиацил-аминокислоту экстрагируют органическим растворителем, добавляют эквимолярное количество N,N'-дициклогексилкарбодиимида, смесь выдерживают до образования осадка N,N'-дициклогексилмочевины, осадок отделяют, оставшийся раствор упаривают и выделяют твердый остаток целевого продукта. При этом количество биокатализатора для оптимального превращения определяют эмпирически при отборе проб реакционной смеси в модельном эксперименте, проводимом в малом объеме с соблюдением аналогичных экспериментальных условий и концентраций, и слежении за накоплением целевого продукта. Время, необходимое для достижения максимального выхода N-оксиацил-аминокислоты определяют эмпирически в модельном эксперименте, проводимом в малом объеме с соблюдением аналогичных экспериментальных условий и концентраций, при слежении за накоплением целевого продукта. Для осуществления синтеза в качестве органического растворителя используют этилацетат, бутилацетат, изобутилацетат, гептан, четыреххлористый углерод, хлороформ, дихлорметан, ацетонитрил, циклопентилметиловый эфир или их смеси, при этом удаление растворителя осуществляют отгонкой или в вакууме. Отделение осадка проводят фильтрацией через фильтровальную бумагу, ткань или пористый фильтр, а также декантацией.
В качестве биокатализатора могут быть использованы различные формы (растворимые, иммобилизованные, мутантные) бактериального фермента пенициллинацилазы из Escherichia coli, Alcaligenes faecalis, Kluyvera citrophila, Providencia rettgeri, Arthrobacter viscosus, Bacillus megaterium и других источников сходные по свойствам и способные катализировать образование амидной связи между аминогруппой аминокислоты и карбоксильной группой оксикислоты (схема 1). Известно, что многочисленные методы иммобилизации пенициллинацилаз, как и других ферментов, позволяют сохранить каталитические свойства фермента, а также делают возможным повторное применение биокатализатора, часто приводят к его стабилизации, а также позволяют улучшить эффективность процесса и его экономические показатели [R.A. Sheldon et al. Chem. Soc. Rev. 2013, 42, P. 6223; A.I. Kallenberg et al. Adv. Synth. Catal. 2005, 347, P. 905; N.A. Pchelintsev et al. J. Mol. Catal. B: Enzymatic 2009, 56, Р. 202]. Биокаталитическая реакция ацильного переноса протекает стереоселективно: ацилированию преимущественно подвергается L-энантиомер аминокислоты, что позволяет включать в реакцию рацемическую смесь аминокислоты, а не индивидуальный энантиомер. Кроме того, биокаталитическая реакция протекает в диапазоне температур от 10 до 35°С в мягких условиях в водной среде, без использования органических растворителей и образования токсичных отходов. В качестве ацильного донора используется амид оксикислоты в виде рацемической смеси или индивидуального энантиомера, в качестве нуклеофила - аминокислота в виде рацемической смеси или индивидуального энантиомера, мольное соотношение ацильного донора и нуклеофила варьируется от 1:5 до 3:1, соответственно. Значение рН реакционной смеси варьируется от 9 до 11. Время проведения реакции пропорционально содержанию фермента в реакционной смеси и обеспечивается использованием определенного количества биокатализатора, которое подбирается эмпирически для каждой пары реагентов исходя из потребности провести реакцию за необходимый промежуток времени по технологическим, экономическим или иным соображениям, например, по результатам предварительного кинетического эксперимента, проводимого в тех же условиях, что и препаративный синтез, но в небольшом масштабе, например, в 1-2 мл реакционной смеси со слежением за кинетикой реакции, заключающимся в отборе проб и определении концентрации компонентов в каждый момент времени, например, с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии. Выбор оптимальных условий, концентраций реагентов и количества биокатализатора возможен также при использовании других подходов, например, микрореакторов или расчетов, основанных на фундаментальном понимании кинетических закономерностей процесса [R. Wohlgemuth et al. Trends Biotechnol. 2015, 33, P. 302; J.L. van Roon et al. Biotechnol. Adv. 2007, 25, Р. 137]. Применение биокатализа позволяет достичь очень высокого выхода N-оксиацил-аминокислоты. Продукт реакции выделяется из реакционной смеси экстракцией органическим растворителем, например, этилацетатом в кислой среде, например, при рН 2-3. При необходимости отделения непрореагировавшего ацильного донора после биокаталитического превращения, например, в случае проведения процесса при соотношениях ацильного донора по отношению к нуклеофилу больше чем 1:1, рН реакционной смеси доводят до 12±1 и извлекают непрореагировавший ацильный донор экстракцией органическим растворителем.
На второй стадии N-оксиацил-аминокислота подвергается реакции внутримолекулярной этерификации с образованием производного 2,5-дикетоморфолина. Циклизация протекает в органическом растворителе при добавлении активирующего реагента, например, N,N'-дициклогексилкарбодиимида в количестве эквимолярном N-оксиацил-аминокислоте. В процессе реакции образуется N,N'-дициклогексилмочевина, выпадающая в осадок. Выход реакции циклизации также очень высокий, поскольку образуется термодинамически устойчивый шестичленный цикл. Очистка целевого продукта заключается в отделении осадка N,N'-дициклогексилмочевины, например, декантацией, центрифугированием или фильтрованием через фильтровальную бумагу, ткань или пористый фильтр и последующем удалении (отгонкой) растворителя, например, в вакууме или с помощью роторного испарителя.
Структура и состав всех синтезированных соединений подтверждены методами 1Н ЯМР и масс-спектрометрии, химическая чистота подтверждена методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Техническим результатом заявленного способа является производное 2,5-дикетоморфолина, синтезированное с участием пенициллинацилазы как высокоэффективного биокатализатора, позволяющего стереоселективно создавать амидную связь в одну стадию. Последующая циклизация приводит к получению целевого продукта с общим выходом не менее 80 масс. % по отношению к исходному компоненту (нуклеофилу или ацильному донору), взятому в меньшем количестве. Прикладным аспектом настоящего изобретения является то, что производные 2,5-дикетоморфолина являются мономерами для получения полидепсипептидов - перспективных биоразлагаемых полимеров биомедицинского назначения [Feng Y. et al. Int. J. Mol. Sci. 2009, 10, P. 589], а также обладают биологической активностью.
Осуществление изобретения
Ниже представлено более детальное описание заявляемого способа, которое не ограничивает объем притязаний заявляемого изобретения, а демонстрирует возможность осуществления изобретения с достижением заявляемого технического результата.
Все используемые реагенты являются коммерчески доступными, все процедуры, если не оговорено особо, осуществляли в диапазоне температур от 10 до 35°С.
Пример 1. Синтез (3S,6S)-3-бензил-6-фенил-морфолин-2,5-диона.
Амид (S)-миндальной кислоты и D,L-фенилаланин (до конечных концентраций 0,2 и 0,1 М соответственно) растворили в дистиллированной воде, 5 М раствором гидроксида калия довели рН до 11 и начали реакцию добавлением аликвоты исходного концентрированного раствора пенициллинацилазы из Alcaligenes faecalis, создавая концентрацию активных центров фермента в реакционной смеси 1 мкМ. Реакцию проводили в термостатируемой ячейке рН-стата Titrino 719 (Metrohm, Швейцария) при 15°С. По истечении 25 минут рН реакционной смеси довели 5 М раствором KOH до 12, экстрагировали три раза этилацетатом непрореагировавший амид (S)-миндальной кислоты, при этом объем этилацетата при каждой экстракции был равен объему реакционной смеси. Для извлечения N-(S)-манделил-(S)-фенилаланина концентрированной HCl рН довели до 2, продут экстрагировали три раза этилацетатом, при этом объем этилацетата при каждой экстракции был равен объему реакционной смеси. Этилацетат упарили на роторном испарителе до образования 0,5 М раствора, добавили N,N'-дициклогексилкарбодиимид до конечной концентрации 0,5 М. Осадок N,N'-дициклогексилмочевины отфильтровали через пористый фильтр с диаметром пор 40 мкм, фильтрат упарили на роторном испарителе, твердый остаток высушили в вакууме до постоянной массы. Выход (3S,6S)-3-бензил-6-фенил-морфолин-2,5-диона составил 94% в пересчете на L-энантиомер фенилаланина. Структура и состав синтезированного соединения подтверждены методами 1Н ЯМР и масс-спектрометрии, химическая чистота по результатам анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии составила 99,1%.
Пример 2. Синтез (3S,6S)-3-бензил-6-фенил-морфолин-2,5-диона.
Амид (S)-миндальной кислоты и D,L-фенилаланин (до конечных концентраций 0,1 и 0,3 М соответственно) растворили в дистиллированной воде, 5 М раствором гидроксида калия довели рН до 10 и начали реакцию добавлением аликвоты исходного концентрированного раствора пенициллинацилазы из Alcaligenes faecalis, создавая концентрацию активных центров фермента в реакционной смеси 1 мкМ. Реакцию проводили в термостатируемой ячейке рН-стата Titrino 719 (Metrohm, Швейцария) при 20°С. По истечении 30 минут рН реакционной смеси довели до 2, экстрагировали продукт бути л ацетатом, при этом объем бутилацетата был равен одной трети объема реакционной смеси, добавили эквимолярное N-(S)-манделил-(S)-фенилаланину количество N,N'-дициклогексилкарбодиимида, после образования осадка N,N'-дициклогексилмочевины его отделили при помощи пористого фильтра, фильтрат упарили на роторном испарителе, твердый остаток высушили в вакууме до постоянной массы. Выход (3S,6S)-3-бензил-6-фенил-морфолин-2,5-диона составил 91% в пересчете на амид (S)-миндальной кислоты. Структура и состав синтезированного соединения подтверждены методами 1Н ЯМР и масс-спектрометрии, химическая чистота по результатам анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии составила 99%.
Пример 3. Синтез (3S,6R)-3-метил-6-фенил-морфолин-2,5-диона
Амид (R)-миндальной кислоты и D,L-аланин (до конечных концентраций 0,2 и 0,5 М соответственно) растворили в дистиллированной воде, 5 М раствором гидроксида калия довели рН до 9,0 и начали реакцию добавлением аликвоты исходного концентрированного раствора мутантной формы бeтaD484N пенициллинацилазы из Escherichia coli, создавая концентрацию активных центров фермента в реакционной смеси 1 мкМ. Реакцию проводили в термостатируемой ячейке рН-стата Titrino 719 (Metrohm, Швейцария) при 10°С. По истечении 40 минут рН реакционной смеси концентрированной HCl довели до 2 и экстрагировали два раза этилацетатом продукт, при этом объем этилацетата при каждой экстракции был равен объему реакционной смеси. Этил ацетат упарили на роторном испарителе до образования 0,5 М раствора, добавили N,N'-дициклогексилкарбодиимид до конечной концентрации 0,5 М. Осадок N,N'-дициклогексилмочевины отфильтровали через стеклянный пористый фильтр с диаметром пор 40 мкм, фильтрат упарили на роторном испарителе, твердый остаток высушили в вакууме до постоянной массы. Выход (3S,6R)-3-метил-6-фенил-морфолин-2,5-диона составил 86% в пересчете на амид (R)-миндальной кислоты. Структура и состав синтезированного соединения подтверждены методами 1Н ЯМР и масс-спектрометрии, химическая чистота по результатам анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии составила 99,5%.
Пример 4. Синтез (3S,6S)-3-(индол-3-ил-метил)-6-фенил-морфолин-2,5-диона.
Амид (S)-миндальной кислоты и D,L-триптофан (до конечных концентраций 0,2 и 0,1 М соответственно) растворили в дистиллированной воде, 5 М раствором гидроксида калия довели рН до 10,6 и начали реакцию добавлением аликвоты исходного концентрированного раствора пенициллинацилазы из Alcaligenes faecalis, создавая концентрацию активных центров фермента в реакционной смеси 1 мкМ. Реакцию проводили в термостатируемой ячейке рН-стата Titrino 719 (Metrohm, Швейцария) при 25°С. По истечении 25 минут рН реакционной смеси довели 5 М раствором KOH до 12, экстрагировали два раза бутилацетатом непрореагировавший амид (S)-миндальной кислоты, при этом объем бутилацетата при каждой экстракции был равен объему реакционной смеси. Для извлечения N-(S)-манделил-(S)-триптофана концентрированной HCl рН довели до 2, выпавшее масло центрифугировали 5 мин при 5000 об/мин, декантировали, растворили в ацетонитриле до образования 0,5 М раствора, добавили N,N'-дициклогексилкарбодиимид до конечной концентрации 0,5 М. Осадок N,N'-дициклогексилмочевины отфильтровали через стеклянный пористый фильтр с диаметром пор 40 мкм, фильтрат упарили на роторном испарителе, твердый остаток высушили в вакууме до постоянной массы. Выход (3S,6S)-3-(индол-3-ил-метил)-6-фенил-морфолин-2,5-диона составил 91% в пересчете на L-энантиомер триптофана. Структура и состав синтезированного соединения подтверждены методами 1Н ЯМР и масс-спектрометрии, химическая чистота по результатам анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии составила 99,2%.
Пример 5. Синтез (3S,6S)-3-карбамоилметил-6-фенил-морфолин-2,5-диона.
Амид (S)-миндальной кислоты и D,L-аспарагин моногидрат (до конечных концентраций 0,2 и 0,1 М соответственно) растворили в дистиллированной воде, 5 М раствором гидроксида калия довели рН до 10 и начали реакцию добавлением аликвоты исходного иммобилизованного препарата пенициллинацилазы из Alcaligenes faecalis, чтобы обеспечить необходимую скорость реакции, создавая концентрацию активных центров фермента в реакционной смеси 1 мкМ. Реакцию проводили в термостатируемой ячейке рН-стата Titrino 719 (Metrohm, Швейцария) при 30°С. По истечении 30 минут фильтрованием отделили препарат иммобилизованного фермента, рН реакционной смеси (супернатанта) довели 5 М раствором KOH до 12, экстрагировали три раза этилацетатом не прореагировавший амид (S)-миндальной кислоты, при этом объем этилацетата при каждой экстракции был равен объему реакционной смеси. Для извлечения N-(S)-манделил-(S)-аспарагина концентрированной HCl рН довели до 7, упарили в вакууме водную фазу до сухого остатка, который промыли 2 раза этилацетатом. Продукт извлекли из твердого остатка ацетонитрилом до образования 0,5 М раствора, добавили N,N'-дициклогексилкарбодиимид до конечной концентрации 0,5 М. Осадок N,N'-дициклогексилмочевины отфильтровали через стеклянный пористый фильтр с диаметром пор 40 мкм, фильтрат упарили на роторном испарителе, твердый остаток высушили в вакууме до постоянной массы. Выход (3S,6S)-3-карбамоилметил-6-фенил-морфолин-2,5-диона составил 82% в пересчете на L-энантиомер аспарагина. Структура и состав синтезированного соединения подтверждены методами 1Н ЯМР и масс-спектрометрии, химическая чистота по результатам анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии составила 99,0%.
Пример 6. Синтез (6S)-фенил-морфолин-2,5-диона.
Амид хлоруксусной кислоты и D,L-фенилаланин (до конечных концентраций 0,3 и 0,1 М соответственно) растворили в дистиллированной воде, 5 М раствором гидроксида калия довели рН до 10 и начали реакцию добавлением аликвоты исходного концентрированного раствора пенициллинацилазы из Alcaligenes faecalis, создавая концентрацию активных центров фермента в реакционной смеси 8 мкМ. Реакцию проводили в термостатируемой ячейке рН-стата Titrino 719 (Metrohm, Швейцария) при 35°С. По истечении 40 минут рН реакционной смеси довели 5 М раствором KOH до 12, экстрагировали три раза бутилацетатом не прореагировавший амид хлоруксусной кислоты, при этом объем бутилацетата при каждой экстракции был равен объему реакционной смеси. Для извлечения N-хлорацетил-(S)-фенилаланина концентрированной HCl значение рН довели до 2 и экстрагировали три раза бутилацетатом продукт, при этом объем бутилацетата при каждой экстракции был равен объему реакционной смеси. Бутилацетат упарили на роторном испарителе, остаток растворили в 5 М KOH и нагревали в течение 1 часа при 80°С. Концентрированной HCl значение рН довели до 2, экстрагировали три раза бутилацетатом N-оксиацетил-(S)-фенилаланин. Бутилацетат упарили на роторном испарителе до образования 0,5 М раствора, добавили N,N'-дициклогексилкарбодиимид до конечной концентрации 0,5 М. Осадок N,N'-дициклогексилмочевины отфильтровали через стеклянный пористый фильтр с диаметром пор 40 мкм, фильтрат упарили на роторном испарителе, твердый остаток высушили в вакууме до постоянной массы. Выход (6S)-фенил-морфолин-2,5-диона составил 87% в пересчете на L-энантиомер фенилаланина. Структура и состав синтезированного соединения подтверждены методами 1Н ЯМР и масс-спектрометрии, химическая чистота по результатам анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии составила 99,6%.
Claims (8)
1. Способ синтеза производных 2,5-дикетоморфолина общей формулы
где R1=Н, СН3, арил; R2=Н, СН3, арил, СH2-арил, изопропил, пропил, бутил, оксиметил, меткаптометил, 1-оксиэтил, 1-метилпропил, 2-метилпропил, индол-3-ил-метил, карбамоилметил, карбамоилэтил, карбоксиметил, карбоксиэтил, 4-аминобутил, 3-гуанидилпропил, 2-(метилсульфанил)-этил, характеризующийся тем, что готовят насыщенные водные растворы аминокислоты, являющейся нуклеофилом, и амида оксикислоты, являющегося ацильным донором, в мольном соотношении компонентов от 5:1 до 1:3, доводят рН до 9-11, добавляют биокатализатор - растворимую, иммобилизованную или мутантную форму бактериальной пенициллинацилазы для обеспечения необходимого превращения, выдерживают реакционную смесь при 10-35°С до достижения максимального выхода N-оксиацил-аминокислоты, доводят рН до 2-3, полученную N-оксиацил-аминокислоту экстрагируют органическим растворителем, добавляют эквимолярное количество N,N'-дициклогексилкарбодиимида, смесь выдерживают до образования осадка N,N'-дициклогексилмочевины, осадок отделяют, оставшийся раствор упаривают и выделяют твердый остаток целевого продукта.
2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что количество биокатализатора для оптимального превращения определяют эмпирически при отборе проб реакционной смеси в модельном эксперименте, проводимом в малом объеме с соблюдением аналогичных экспериментальных условий и концентраций, и слежении за накоплением целевого продукта.
3. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что время, необходимое для достижения максимального выхода N-оксиацил-аминокислоты, определяют эмпирически в модельном эксперименте, проводимом в малом объеме с соблюдением аналогичных экспериментальных условий и концентраций, при слежении за накоплением целевого продукта.
4. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что в качестве органического растворителя используют этилацетат, бутилацетат, изобутилацетат, гептан, четыреххлористый углерод, хлороформ, дихлорметан, ацетонитрил, циклопентилметиловый эфир или их смеси.
5. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что отделение осадка проводят фильтрацией через фильтровальную бумагу, ткань или пористый фильтр, а также декантацией.
6. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что удаление растворителя осуществляют отгонкой или в вакууме.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019100644A RU2696099C1 (ru) | 2019-01-14 | 2019-01-14 | Хемоэнзиматический синтез производных 2,5-дикетоморфолина |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019100644A RU2696099C1 (ru) | 2019-01-14 | 2019-01-14 | Хемоэнзиматический синтез производных 2,5-дикетоморфолина |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2696099C1 true RU2696099C1 (ru) | 2019-07-31 |
Family
ID=67586914
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019100644A RU2696099C1 (ru) | 2019-01-14 | 2019-01-14 | Хемоэнзиматический синтез производных 2,5-дикетоморфолина |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2696099C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114315866A (zh) * | 2020-09-30 | 2022-04-12 | 烟台药物研究所 | 一种盐酸左旋咪唑的合成方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2404169C2 (ru) * | 2005-11-17 | 2010-11-20 | Синклэр Фармасьютикалс Лимитед | Способ получения делмопинола и его производных |
| CN108299332A (zh) * | 2018-02-26 | 2018-07-20 | 南开大学 | (3r,6r和3s,6s)-吗啉-2,5-二酮的合成方法 |
-
2019
- 2019-01-14 RU RU2019100644A patent/RU2696099C1/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2404169C2 (ru) * | 2005-11-17 | 2010-11-20 | Синклэр Фармасьютикалс Лимитед | Способ получения делмопинола и его производных |
| CN108299332A (zh) * | 2018-02-26 | 2018-07-20 | 南开大学 | (3r,6r和3s,6s)-吗啉-2,5-二酮的合成方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Tsuji, Hideto; Sato, Shotaro; Masaki, Noriaki; Arakawa, Yuki; Kuzuya, Akinori; Ohya, Yuichi, Synthesis, stereocomplex crystallization and homo-crystallization of enantiomeric poly(lactic acid-co-alanine)s with ester and amide linkages. Polymer Chemistry, 9(5), 565-575, 2018. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114315866A (zh) * | 2020-09-30 | 2022-04-12 | 烟台药物研究所 | 一种盐酸左旋咪唑的合成方法 |
| CN114315866B (zh) * | 2020-09-30 | 2023-10-31 | 烟台药物研究所 | 一种盐酸左旋咪唑的合成方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5096435B2 (ja) | 光学活性α−メチルシステイン誘導体の製造方法 | |
| JP2676568B2 (ja) | Ｒ（−）−マンデル酸およびその誘導体の製造法 | |
| JP3174171B2 (ja) | 光学的に活性なシアノヒドリンのエナンチオ選択的、酵素による製造方法 | |
| RU2696099C1 (ru) | Хемоэнзиматический синтез производных 2,5-дикетоморфолина | |
| US20090030210A1 (en) | Process for Producing Optically Active 2-Alkylcysteine, Derivative Thereof, and Processes for Production | |
| KR102157917B1 (ko) | 키랄 γ-아릴-β-아미노부티르산 유도체의 제조를 위한 효소 경로 | |
| CA2124783A1 (en) | Enzymic process for preparing aliphatic s-cyanohydrins | |
| JPH0859517A (ja) | 光学分割剤およびそれを用いた光学活性テトラヒドロフランカルボン酸類の製造法 | |
| JP4577513B2 (ja) | ２−アルキルシステインアミド又はその塩、並びに、それらの製造方法及び用途 | |
| JP3665976B2 (ja) | 光学分割剤およびそれを用いた光学活性Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ピペラジンカルボキシアミドの製造法 | |
| JP3888402B2 (ja) | 光学活性Ｎ−カルボベンゾキシ−ｔｅｒｔ−ロイシンの製造法 | |
| KR100442040B1 (ko) | 암피실린회수방법 | |
| ES2211662T3 (es) | Procedimiento para la produccion de cianohidrinas activas opticamente utilizando r-oxinitrilasa. | |
| JP4492765B2 (ja) | Ｌ−アリシンアセタールの製造法 | |
| JP3078599B2 (ja) | Ｌ−３，４−ジヒドロキシフェニルセリン誘導体の製造法 | |
| JP3078597B2 (ja) | Ｌ−スレオ−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）セリン誘導体の製造法 | |
| JPH0751090A (ja) | 光学活性３−アミノブタン酸の製造法及びそのエステル中間体 | |
| JP2005501561A (ja) | アミノ酸の鏡像体分割のための酵素的方法 | |
| JP5307721B2 (ja) | （Ｓ）−β−フェニルアラニンの製造方法 | |
| CN106811491B (zh) | 光学活性的β-羟基酯类化合物的制备方法及其中间体 | |
| CN1928102B (zh) | 一种拆分β-氨基酸的方法 | |
| EP1311700B1 (en) | Production process of l-phenylalanine derivatives by microorganisms | |
| WO2004009829A1 (ja) | メチオニンの製造法 | |
| JP4544385B2 (ja) | 光学活性２，６−ジアミノヘプタン酸の製造法 | |
| JP3951126B2 (ja) | 光学活性（４ｒ）−１，３−チアゾリジン−４−カルボン酸の製造方法 |