RU2662940C1 - Chlamydia diagnosis method - Google Patents
Chlamydia diagnosis method Download PDFInfo
- Publication number
- RU2662940C1 RU2662940C1 RU2017134936A RU2017134936A RU2662940C1 RU 2662940 C1 RU2662940 C1 RU 2662940C1 RU 2017134936 A RU2017134936 A RU 2017134936A RU 2017134936 A RU2017134936 A RU 2017134936A RU 2662940 C1 RU2662940 C1 RU 2662940C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- activity
- chlamydia
- cervix
- infection
- chronic
- Prior art date
Links
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 title claims abstract description 38
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims description 16
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 claims abstract description 38
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 37
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 claims abstract description 31
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 29
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims abstract description 26
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 claims abstract description 26
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims abstract description 22
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 102000019040 Nuclear Antigens Human genes 0.000 claims abstract description 15
- 108010051791 Nuclear Antigens Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 claims abstract description 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 9
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 6
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 claims description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 12
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 abstract description 8
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 abstract description 6
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 abstract description 5
- 230000007170 pathology Effects 0.000 abstract description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 abstract description 4
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 abstract description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 abstract description 3
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 abstract description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000003365 immunocytochemistry Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 19
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 206010061041 Chlamydial infection Diseases 0.000 description 14
- 201000000902 chlamydia Diseases 0.000 description 12
- 208000012538 chlamydia trachomatis infectious disease Diseases 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 208000009608 Papillomavirus Infections Diseases 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 5
- 208000037062 Polyps Diseases 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 4
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 4
- 241000498849 Chlamydiales Species 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 3
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- 102000009339 Proliferating Cell Nuclear Antigen Human genes 0.000 description 2
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010046914 Vaginal infection Diseases 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 229920000392 Zymosan Polymers 0.000 description 2
- SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N [4-(4-hydrazinylphenyl)phenyl]hydrazine Chemical compound C1=CC(NN)=CC=C1C1=CC=C(NN)C=C1 SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010008323 cervicitis Diseases 0.000 description 2
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 208000020082 intraepithelial neoplasia Diseases 0.000 description 2
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 206010008263 Cervical dysplasia Diseases 0.000 description 1
- 241000606069 Chlamydiaceae Species 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150101999 IL6 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 244000062730 Melissa officinalis Species 0.000 description 1
- 235000010654 Melissa officinalis Nutrition 0.000 description 1
- 206010054949 Metaplasia Diseases 0.000 description 1
- 206010030247 Oestrogen deficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 208000006374 Uterine Cervicitis Diseases 0.000 description 1
- 201000008100 Vaginitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 230000002520 cambial effect Effects 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 238000002573 colposcopy Methods 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000009193 crawling Effects 0.000 description 1
- 238000001804 debridement Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 201000010380 endocervicitis Diseases 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005802 health problem Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 238000012151 immunohistochemical method Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000002741 leukoplakia Diseases 0.000 description 1
- 239000000865 liniment Substances 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000015689 metaplastic ossification Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 238000009595 pap smear Methods 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000005000 reproductive tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
- C12Q1/689—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for bacteria
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и биологии и может быть использовано для дифференциальной диагностики представителей семейства Chlamydiaceae.The invention relates to medicine and biology and can be used for differential diagnosis of representatives of the Chlamydiaceae family.
Известен способ диагностики генетического риска развития осложненного клинического течения урогенитальной хламидийной инфекции у человека, для чего методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) определяют полиморфные варианты генов IL6 и TGFb1. При определении гомозиготного генотипа СС в позиции -174 гена IL6 у мужчин и женщин, а также гетерозиготного генотипа GC в позиции -915 гена TGFb1 у женщин, прогнозируют высокий риск развития осложненного клинического течения урогенитальной хламидийной инфекции (см. RU 2535724, МПК G01N 33/50, 2014 г.). Изобретение позволяет принимать обоснованные решения о выборе тактики терапии конкретного пациента, больного урогенитальным хламидиозом, чтобы предупредить развитие осложнений урогенитального хламидиоза и нарушений репродуктивной функции.There is a method for diagnosing the genetic risk of developing a complicated clinical course of urogenital chlamydial infection in humans, for which polymerase variants of the IL6 and TGFb1 genes are determined by polymerase chain reaction (PCR). When determining the homozygous CC genotype at position -174 of the IL6 gene in men and women, as well as the heterozygous GC genotype at position -915 of the TGFb1 gene in women, a high risk of developing a complicated clinical course of urogenital chlamydial infection is predicted (see RU 2535724, IPC G01N 33 / 50, 2014). The invention allows to make informed decisions about the choice of treatment tactics for a particular patient with urogenital chlamydia in order to prevent the development of complications of urogenital chlamydia and reproductive disorders.
Недостаток этого решения – только прогноз высокого риска развития осложненного клинического течения урогенитальной хламидийной инфекции, причем этот метод не позволяет оценить конкретную ситуацию состояния локального иммунного гомеостаза слизистой оболочки шейки матки (ШМ) у женщин в постменопаузе, чтобы принять решение о стратегии хирургического вмешательства, т.к. речь идёт о малигнизации или ответной реакции на хроническую и острую микробную контаминацию тканей. Кроме того, невозможно установить хронический и острый период заражения хламидийной инфекции в отсутствие клинической симптоматики.The drawback of this solution is only the prognosis of a high risk of developing a complicated clinical course of urogenital chlamydial infection, and this method does not allow us to assess the specific situation of the state of local immune homeostasis of the cervical mucosa (CMM) in postmenopausal women to decide on a strategy for surgical intervention, i.e. to. we are talking about malignancy or a response to chronic and acute microbial contamination of tissues. In addition, it is impossible to establish a chronic and acute period of infection of chlamydial infection in the absence of clinical symptoms.
Известен способ диагностики хронического урогенительного хламидиоза, включающий определение уровня спонтанной и индуцированной зимозаном хемилюминесценции лейкоцитов, для чего используют лизат элементарных телец хламидий, рассчитывают индексы хемилюминесценции по зимозану и специфическому антигену как отношение стимулированной хемилюминесценции к спонтанной, при значениях 21,35≤ИХЛ-3≤31,41 и 0,53≤ИХЛ-aг≤1,00 диагностируют хроническую хламидийную инфекцию (см. RU № 2202787, МПК G01N 33/48, 2003 г.).There is a known method for the diagnosis of chronic urogenital chlamydia, including determining the level of spontaneous and zymosan-induced leukocyte chemiluminescence, for which a chlamydial elementary body lysate is used, chemiluminescence indices for zymosan and a specific antigen are calculated as the ratio of stimulated chemiluminescence to a spontaneous value of -3 with a value of 21 = 5, 31.41 and 0.53≤IHL-ag≤1.00 diagnose chronic chlamydial infection (see RU No. 2202787, IPC G01N 33/48, 2003).
Недостаток этого решения – узкий диагностический спектр, т.к. не позволяет определить потребную степень инвазивности хирургического вмешательства, не позволяет показать сроки заражения инфекцией.The disadvantage of this solution is the narrow diagnostic spectrum, because it does not allow to determine the required degree of invasiveness of surgical intervention, does not allow to show the timing of infection with the infection.
Известен также способ диагностики хламидиоза, включающий отбор клинического материала из шейки матки, при выявлении дисплазии эпителия шейки матки и проведение его иммуногистохимических исследований с выявлением диагностических признаков хламидиоза (см. RU № 2241042, МПК C12Q 1/68 G01N 33/569, 2004 г.).There is also known a method for the diagnosis of chlamydia, including the selection of clinical material from the cervix, when detecting dysplasia of the cervical epithelium and conducting immunohistochemical studies with the detection of diagnostic signs of chlamydia (see RU No. 2241042, IPC C12Q 1/68 G01N 33/569, 2004 )
Недостаток этого решения – оно обеспечивает только выявление наличия инфекции, не позволяет показать сроки заражения инфекцией и не обеспечивает возможность проведения дифференциальной диагностики процессов в эпителии, и решение вопроса, о причинах патологического состояния слизистой оболочки.The disadvantage of this solution is that it provides only the identification of the presence of infection, does not allow to show the timing of infection with the infection and does not provide the possibility of differential diagnosis of processes in the epithelium, and the solution of the question about the causes of the pathological condition of the mucous membrane.
Задачей, на решение которой направлено предлагаемое решение, является выявление сроков заражения инфекцией, обеспечение возможности проведения дифференциальной диагностики процессов в эпителии.The task to which the proposed solution is directed is to identify the timing of infection, providing the possibility of differential diagnosis of processes in the epithelium.
Технический результат - расширение диагностического спектра, включающее выявление сроков заражения инфекцией, обеспечение возможности проведения дифференциальной диагностики процессов в эпителии, и на фоне отсутствия клинической симптоматики, решение вопроса, с чем патологическое состояние слизистой оболочки связано, с инфекцией, или малигнизацией с уточнением стратегии хирургических вмешательств, касающихся удалять или оставить и сколько удалять. Это позволяет использовать заявленный способ в гинекологии, акушерстве, дерматовенерологии и судебно-медицинской экспертизе не только в возрастной группе женщин в постменопаузе, но и в случае неблагоприятного исхода беременности и вынашивания плода, прогнозирования патологии новорожденного.The technical result is the expansion of the diagnostic spectrum, including the identification of the timing of infection with the infection, the possibility of differential diagnosis of processes in the epithelium, and in the absence of clinical symptoms, the solution of the question of what the pathological condition of the mucous membrane is associated with infection, or malignancy with the refinement of the strategy of surgical interventions relating to delete or leave and how much to remove. This allows you to use the claimed method in gynecology, obstetrics, dermatovenerology and forensic examination, not only in the age group of postmenopausal women, but also in case of an unfavorable outcome of pregnancy and bearing a fetus, predicting the pathology of the newborn.
Для решения поставленной задачи способ диагностики хламидиоза, включающий отбор клинического материала из шейки матки, при выявлении дисплазии эпителия шейки матки и проведение его иммуногистохимических исследований с выявлением диагностических признаков хламидиоза, отличается тем, что клинический материал дополнительно отбирают из полости матки, при этом, клинические материалы оперативно фиксируют для иммуноцитохимического исследования, после чего препарат, полученный из шейки матки, вводят в контакт с первичными антителами к белку Ki-67, инкубируют и после окрашивания используют для выявления пролиферирующего клеточного ядерного антигена Ki-67, после чего, оценивают активность этого антигена в препаратах, полученных из материала, отобранного из шейки матки, по величине которой устанавливают хроническую или острую форму хламидиоза при показателях активности, соответственно, 2,4+0,09 или 5,9+0,25, причем при показателях его активности, соответствующих промежуточным значениям между названными, делают вывод об отсутствии хламидиоза в шейке матки и после этого оценивают активность пролиферирующего клеточного ядерного антигена Ki-67 в препаратах, полученных из материала, отобранного из полости матки, по величине которой устанавливают хроническую или острую форму хламидиоза при показателях активности соответственно 1,3+0,09 или 3,9+0,25, причем при показателях его активности, соответствующих промежуточным значениям между названными, делают заключение об отсутствии хламидиоза у пациентки, кроме того, при наличии диагноза хроническая форма сроки заражения инфекцией принимают как свыше 2 месяцев, а при острой форме заболевания - менее 2 месяцев. Кроме того, при оценке активности пролиферирующего клеточного ядерного антигена Ki-67 для получения общей морфологической картины используют классические гистологические методы исследования с окрашиванием гематоксилином и эозином.To solve the problem, a method for the diagnosis of chlamydia, including the selection of clinical material from the cervix, when detecting dysplasia of the cervical epithelium and conducting immunohistochemical studies with the detection of diagnostic signs of chlamydia, is characterized in that the clinical material is additionally taken from the uterine cavity, while the clinical materials operatively fixed for immunocytochemical studies, after which the drug obtained from the cervix is brought into contact with primary antibodies to protein Ki Ki-67, incubated and, after staining, used to identify the proliferating cellular nuclear antigen Ki-67, after which, the activity of this antigen in preparations obtained from the material selected from the cervix is evaluated, the value of which establishes a chronic or acute form of chlamydia with indicators activity, respectively, 2.4 + 0.09 or 5.9 + 0.25, and with indicators of its activity corresponding to the intermediate values between the above, they conclude that there is no chlamydia in the cervix and then the identity of the proliferating cellular nuclear antigen Ki-67 in preparations obtained from a material selected from the uterine cavity, the magnitude of which establishes a chronic or acute form of chlamydia with activity indices of 1.3 + 0.09 or 3.9 + 0.25, respectively with indicators of its activity corresponding to intermediate values between the above, a conclusion is made about the absence of chlamydia in the patient, in addition, with a diagnosis of a chronic form, the timing of infection with an infection is taken as more than 2 months, and in acute form for disease - less than 2 months. In addition, when assessing the activity of the proliferating cellular nuclear antigen Ki-67, classical histological methods with hematoxylin and eosin staining are used to obtain a general morphological picture.
Сопоставительный анализ признаков заявленного решения с признаками прототипа и аналогов свидетельствует о соответствии заявленного решения критерию «новизна».A comparative analysis of the features of the claimed solution with the signs of the prototype and analogues indicates the conformity of the claimed solution to the criterion of "novelty."
Совокупность признаков изобретения обеспечивает возможность проведения дифференциальной диагностики процессов в эпителии, и на фоне отсутствия клинической симптоматики, решение вопроса, с чем патологическое состояние слизистой оболочки связано, с инфекцией, или малигнизацией с уточнением стратегии хирургических вмешательств, касающихся удалять или оставить и сколько удалять.The combination of features of the invention provides the possibility of differential diagnosis of processes in the epithelium, and against the background of the absence of clinical symptoms, the solution of the question of what the pathological condition of the mucous membrane is associated with infection or malignancy with the specification of the strategy of surgical interventions regarding to remove or leave and how much to remove.
При этом признаки отличительной части формулы изобретения обеспечивают решение следующих функциональных задач.Moreover, the features of the characterizing part of the claims provide the solution to the following functional tasks.
Признак «…клинический материал дополнительно отбирают из полости матки…» позволяет уточнить диагноз при отсутствии признаков острой или хронической формы хламидиоза по исследованиям клинического материала из шейки матки.The sign "... clinical material is additionally taken from the uterine cavity ..." allows you to clarify the diagnosis in the absence of signs of acute or chronic form of chlamydia according to studies of clinical material from the cervix.
Признак «…клинические материалы оперативно фиксируют для иммуноцитохимического исследования…» обеспечивает возможность сохранения материала для реализации иммуногистохимических исследований с выявлением индикатора хламидиоза.The sign "... clinical materials are operatively recorded for immunocytochemical studies ..." provides the ability to save material for the implementation of immunohistochemical studies with the detection of an indicator of chlamydia.
Признак, указывающий что, полученный препарат «вводят в контакт с первичными антителами к белку Ki-67» обеспечивает возможность получения индикатора хламидиоза, позволяющего провести дифференциальную диагностику процессов в эпителии матки и в ее шейке.A sign indicating that the resulting preparation "is brought into contact with primary antibodies to the Ki-67 protein" provides the possibility of obtaining an indicator of chlamydia, which allows differential diagnosis of processes in the uterine epithelium and in its cervix.
Признаки указывающие, что препарат, полученный из шейки матки, вводят в контакт с первичными антителами к белку Ki-67, «инкубируют и после окрашивания используют для выявления пролиферирующего клеточного ядерного антигена Ki-67» обеспечивают возможность получения индикатора хламидиоза, позволяющего провести дифференциальную диагностику процессов в эпителии шейки матки.Signs indicating that the preparation obtained from the cervix is brought into contact with primary antibodies to the Ki-67 protein, “incubate and, after staining, are used to detect the proliferating cellular nuclear antigen Ki-67” provide the possibility of obtaining an indicator of chlamydia, allowing differential diagnosis of processes in the epithelium of the cervix.
Признаки указывающие, что после инкубации и окрашивания препарата «оценивают активность этого антигена (пролиферирующего клеточного ядерного антигена Ki-67) в препаратах, полученных из материала, отобранного из шейки матки» позволяют получить количественные значения индикатора хламидиоза и установить его форму, как хроническую или острую и/или срок давности заражения.Signs indicating that after incubation and staining of the drug "evaluate the activity of this antigen (proliferating cell nuclear antigen Ki-67) in preparations obtained from material selected from the cervix" allow to obtain quantitative values of the indicator of chlamydia and establish its form as chronic or acute and / or limitation period of infection.
Признаки указывающие, что хроническую или острую формы хламидиоза в шейке матки «устанавливают при показателях активности, соответственно, 2,4+0,09 или 5,9+0,25» задают количественные показатели активности антигена соответствующие хронической или острой формам.Signs indicating that chronic or acute forms of chlamydia in the cervix are “established with activity indicators, respectively, 2.4 + 0.09 or 5.9 + 0.25” give quantitative indicators of antigen activity corresponding to chronic or acute forms.
Признаки указывающие, что «при показателях активности ядерного антигена Ki-67 соответствующих промежуточным значениям между показатели его активности соответствующими хронической или острой формам, делают вывод об отсутствии хламидиоза в шейке матки» обеспечивают получение промежуточного результата, инициирующего работу с препаратом, полученным из полости матки.Signs indicating that "when the Ki-67 nuclear antigen activity indicators correspond to intermediate values between its activity indicators corresponding to chronic or acute forms, they conclude that there is no chlamydia in the cervix" provide an intermediate result that initiates work with the drug obtained from the uterine cavity.
Признаки указывающие, что «оценивают активность пролиферирующего клеточного ядерного антигена Ki-67 в препаратах, полученных из материала, отобранного из полости матки, по величине которой устанавливают хроническую или острую форму хламидиоза при показателях активности, соответственно, 1,3+0,09 или 3,9+0,25» позволяют дополнительно выявить хроническую или острую форму хламидиоза в материале полости матки.Signs indicating that “they evaluate the activity of the proliferating cellular nuclear antigen Ki-67 in preparations obtained from material selected from the uterine cavity, the magnitude of which establishes a chronic or acute form of chlamydia with activity indices of 1.3 + 0.09 or 3, respectively , 9 + 0.25 "allow to additionally identify a chronic or acute form of chlamydia in the material of the uterine cavity.
Признаки, указывающие, что при отрицательном диагнозе на хламидиоз, полученном при исследовании материала из шейки матки, и при показателях активности пролиферирующего клеточного ядерного антигена Ki-67 «соответствующих промежуточным значениям между названными, делают заключение об отсутствии хламидиоза у пациентки» описывают вариант диагностического заключения об отсутствии хламидиоза.Signs indicating that with a negative diagnosis of chlamydia obtained by examining material from the cervix uteri and with activity indicators of the proliferating cellular nuclear antigen Ki-67 “corresponding to the intermediate values between the above, they conclude that the patient does not have chlamydia” describe a diagnostic conclusion about lack of chlamydia.
Признаки указывающие, что «при наличии диагноза хроническая форма сроки заражения инфекцией принимают как свыше 2 месяцев, а при острой форме заболевания - менее 2 месяцев» обеспечивают временную привязку сроков заражения.Signs indicating that “with a diagnosis of a chronic form, the timing of infection with the infection is taken as more than 2 months, and in the acute form of the disease less than 2 months” provide a temporary link to the timing of infection.
Признаки, указывающие, что «при оценке активности пролиферирующего клеточного ядерного антигена Ki-67 для получения общей морфологической картины используют классические гистологические методы исследования с окрашиванием гематоксилином и эозином» обеспечивают возможность подсчета активности пролиферирующего клеточного ядерного антигена Ki-67.Signs indicating that “when evaluating the activity of the proliferating cellular nuclear antigen Ki-67, classical histological methods with hematoxylin and eosin staining are used to obtain a general morphological picture” provide the ability to calculate the activity of the proliferating cellular nuclear antigen Ki-67.
Изобретение иллюстрируется чертежами, где на фиг. 1 и фиг. 2 показано состояние слизистой оболочки при хламидийной инфекции (Микрофото. Иммунная гистохимия с докраской гематоксилином. Ув. х 400), при этом на фиг. 1, показано состояние слизистой оболочки шейки матки; на фиг. 2, показано состояние слизистой оболочки полости матки; на фиг. 3 и 4 показано состояние слизистой оболочки в зоне перехода многослойного плоского эпителия шейки матки в однослойный цилиндрический эпителий полости матки женщин в постменопаузе (локализация белка гена в норме) (Микрофото. Иммунная гистохимия с докраской гематоксилином. Фиг. 3 - Ув. х200, фиг. 4 - Ув. х100); на фиг. 5 показана локализация белка гена Ki -67 в слизистой оболочке в зоне перехода многослойного плоского эпителия шейки матки в однослойный цилиндрический эпителий полости матки женщин в постменопаузе при наличии полипов. (Микрофото. Иммунная гистохимия с докраской гематоксилином Ув. х400); на фиг. 6 показана локализация белка гена Ki-67 в слизистой оболочке однослойного цилиндрического эпителия полости матки женщин в постменопаузе при наличии полипов. (Микрофото. Иммунная гистохимия с докраской гематоксилином Ув. х200); на фиг. 7 и 8 показана локализация белка гена Ki-67 в слизистой оболочке шейки матки в зоне перехода многослойного плоского эпителия шейки матки в однослойный цилиндрический эпителий полости матки женщин в постменопаузе при хламидийной инфекции. (Микрофото. Иммунная гистохимия с докраской гематоксилином Ув. х400); на фиг. 9 и 10 показана локализация белка гена Ki-67 в слизистой оболочке полости матки в зоне перехода многослойного плоского эпителия шейки матки в однослойный цилиндрический эпителий полости матки женщин в постменопаузе, при хламидийной инфекции. (Микрофото. Иммунная гистохимия с докраской гематоксилином. Ув. х400).The invention is illustrated by drawings, where in FIG. 1 and FIG. 2 shows the state of the mucous membrane during chlamydial infection (Microphoto. Immune histochemistry with additional hematoxylin. Uv. X 400), while in FIG. 1, shows the condition of the mucous membrane of the cervix; in FIG. 2, the condition of the mucous membrane of the uterine cavity is shown; in FIG. Figures 3 and 4 show the state of the mucous membrane in the transition zone of the stratified squamous epithelium of the cervix into the single-layered cylindrical epithelium of the uterus of women in postmenopausal women (localization of the gene protein is normal) (Microphoto. Immune histochemistry with additional hematoxylin. Fig. 3 - Uv. X200, Fig. 4 - Uv. X100); in FIG. Figure 5 shows the localization of the Ki -67 gene protein in the mucosa in the transition zone of the stratified squamous epithelium of the cervix into the single-layered cylindrical epithelium of the uterine cavity of women in postmenopausal women with polyps. (Microphoto. Immune histochemistry with dokraska hematoxylin Uv. X400); in FIG. Figure 6 shows the localization of the Ki-67 gene protein in the mucous membrane of a single-layer cylindrical epithelium of the uterine cavity of women in postmenopausal women in the presence of polyps. (Microphoto. Immune histochemistry with dokraska hematoxylin Uv. X200); in FIG. Figures 7 and 8 show the localization of the Ki-67 gene protein in the cervical mucosa in the transition zone of the stratified squamous epithelium of the cervix into the single-layered cylindrical epithelium of the uterine cavity of postmenopausal women with chlamydial infection. (Microphoto. Immune histochemistry with dokraska hematoxylin Uv. X400); in FIG. Figures 9 and 10 show the localization of the Ki-67 gene protein in the mucous membrane of the uterine cavity in the transition zone of the stratified squamous epithelium of the cervix into the single-layered cylindrical epithelium of the uterine cavity of postmenopausal women with chlamydial infection. (Microphoto. Immune histochemistry with dokraska hematoxylin. Uv. X400).
Ежегодно во всем мире рак шейки матки выявляется у 600 000 женщин в возрасте от 35 до 55 лет, при этом у половины пациенток онкологический процесс выявляется уже на поздних стадиях. Инфицированность папиломавирусной инфекцией (ПВИ) увеличивает риск развития дисплазии в 10 раз.Every year, around the world, cervical cancer is detected in 600,000 women aged 35 to 55 years, while in half of the patients, the oncological process is already detected in the late stages. Papillomavirus infection (PVI) infection increases the risk of dysplasia by 10 times.
Полученные нами данные свидетельствуют о невысокой диагностической значимости данных о пролиферативной активности в диагностике канцерогенеза, но дают исчерпывающее представление о состоянии регенераторного потенциала эпителия шейки матки в физиологической и репаративной регенерации. В случае папилломавирусной инфекции утрата клетками способности к реституции и нарушение пролиферативной активности является более значимым признаком ранней малигнизации ткани шейки матки.Our data indicate a low diagnostic significance of data on proliferative activity in the diagnosis of carcinogenesis, but give an exhaustive idea of the state of the regenerative potential of the cervical epithelium in physiological and reparative regeneration. In the case of papillomavirus infection, the loss of cells' ability to restitution and the violation of proliferative activity is a more significant sign of early malignancy of cervical tissue.
Реализации заявленного способа предшествует диагностика изменений на шейке матки известными способами (осмотр в зеркалах, простая и расширенная кольпоскопия, оценка влагалищного микробиоценоза, цитологическое исследование мазков-отпечатков (так называемые ПАП-мазки) и прицельная биопсия с последующим гистологическим исследованием.The implementation of the claimed method is preceded by the diagnosis of changes in the cervix by known methods (examination in the mirrors, simple and advanced colposcopy, assessment of vaginal microbiocenosis, cytological examination of smears-prints (the so-called PAP smears) and targeted biopsy followed by histological examination.
Учитывая, что воспаление экзо- и эндоцервикса может симулировать картину клеточной атипии при проведении цитологического исследования, все морфологические исследования проводили после санации влагалища. Нами было отмечено, что эктопия наблюдается у 7,3% женщин в возрасте 46 лет и старше.Considering that inflammation of exo- and endocervix can simulate the picture of cell atypia during cytological examination, all morphological studies were performed after vaginal debridement. We noted that ectopia is observed in 7.3% of women aged 46 years and older.
Кольпоскопические картины при эктопии отличались многообразием. Разнообразие клинических проявлений эктопии определяет врачебную тактику. Неосложненная эктопия относится не к болезням и проблемам здоровья, а к гистофизиологическим особенностям шейки матки и не нуждается в терапевтических местных мероприятиях. Морфологические изменения на шейке матки однозначно трактуются как патологические и требуют лечения. Осложненная эктопия на фоне нарушения эпителиально-стромальных взаимоотношений, инфекционного процесса или в сочетании с другими фоновыми и предраковыми процессами (полип, лейкоплакия, дисплазия) подлежит лечению с целью профилактики восходящих воспалительных процессов и рака шейки матки.Colposcopic pictures with ectopia were manifold. A variety of clinical manifestations of ectopia determines medical tactics. Uncomplicated ectopia does not refer to diseases and health problems, but to the histophysiological features of the cervix and does not need therapeutic local measures. Morphological changes on the cervix are clearly interpreted as pathological and require treatment. Complicated ectopia against the background of a violation of epithelial-stromal relationships, an infectious process, or in combination with other background and precancerous processes (polyp, leukoplakia, dysplasia) should be treated to prevent ascending inflammatory processes and cervical cancer.
Диагностика экзо- и эндоцервицита с верификацией инфекционного агента, чаще при наличии эктопии, очень важна, так как в этом случае нередко, особенно при вирусной и хламидийной инфекции, возникают предраковые процессы и рак. Это связано с тем, что хронический воспалительный процесс в шейке матки влияет на процессы метаплазии при эктопиях (пролиферации и дифференцировки резервных клеток) и в ряде случаев может привести к развитию дисплазии. Многими авторами дисплазия шейки матки рассматривается как предрак. Она сопровождается патологическим процессом, начинающимся в переходном метапластическом эпителии, который выражается в появлении атипичных клеток на фоне повышенной пролиферации базальных и парабазальных клеток. Различают дисплазию легкой, средней и тяжелой степени. Кольпоскопические маркеры дисплазии — аномальные кольпоскопические картины. Особенно важным для диагностики дисплазии является наличие ацетобелого эпителия. По мнению различных исследователей, частота эпителиальных дисплазий неодинакова. При профилактических осмотрах шейки матки дисплазия выявляется в 0,2—2,2% случаев (Прилепская В.Н. 1997, 2001). По нашим данным, частота эпителиальной дисплазии на фоне эктопии зависит от возраста: максимальное число дисплазии (8,5%) отмечено в возрастной группе 35—49 лет. По данным ряда авторов, при дисплазии средней и тяжелой степени тяжести в 62% случаев диагностируется вирусное поражение (Новиков А.И. и др. 2002). Известно, что инфицированность папиломавирусной инфекцией (ПВИ) увеличивает риск развития дисплазии в 10 раз. Анализ результатов показал, что при эктопиях дисплазия чаше выявляется на фоне хламидийной и вирусной инфекции.Diagnosis of exo- and endocervicitis with verification of an infectious agent, more often in the presence of ectopia, is very important, since in this case often, especially with viral and chlamydial infections, precancerous processes and cancer occur. This is due to the fact that a chronic inflammatory process in the cervix affects the processes of metaplasia during ectopia (proliferation and differentiation of reserve cells) and in some cases can lead to the development of dysplasia. Many authors consider cervical dysplasia as a precancer. It is accompanied by a pathological process that begins in a transitional metaplastic epithelium, which is expressed in the appearance of atypical cells against the background of increased proliferation of basal and parabasal cells. There are mild, moderate and severe dysplasia. Colposcopic markers of dysplasia - abnormal colposcopic pictures. Especially important for the diagnosis of dysplasia is the presence of acetabular epithelium. According to various researchers, the incidence of epithelial dysplasia is not the same. During preventive examinations of the cervix, dysplasia is detected in 0.2–2.2% of cases (Prilepskaya VN 1997, 2001). According to our data, the frequency of epithelial dysplasia against ectopia depends on age: the maximum number of dysplasia (8.5%) was noted in the age group of 35–49 years. According to some authors, with dysplasia of moderate and severe severity in 62% of cases, viral damage is diagnosed (Novikov A.I. et al. 2002). Infection with papillomavirus infection (PVI) is known to increase the risk of dysplasia by 10 times. Analysis of the results showed that with ectopia, dysplasia more often is detected against the background of chlamydial and viral infections.
Заявленный способ диагностики хламидиоза включает отбор клинического материала из шейки и полости матки после выявлении дисплазии эпителия шейки матки, при этом клинические материалы оперативно фиксируют для иммуноцитохимического исследования. Далее препарат, полученный из шейки матки, вводят в контакт с первичными антителами к белку Ki-67, инкубируют и окрашивают гематоксилином и эозином. После этого препарат используют для выявления пролиферирующего клеточного ядерного антигена Ki-67 и оценивают активность этого антигена в данном препарате. При этом по величине активности антигена устанавливают хроническую форму хламидиоза (если активность антигена равна 2,4+0,09) или острую его форму (при показателях активности, равных 5,9+0,25), причем при показателях его активности, соответствующих промежуточным значениям между названными, делают вывод об отсутствии хламидиоза в шейке матки. В последнем случае начинают (вышеописанным образом) оценку активности пролиферирующего клеточного ядерного антигена Ki-67 в препаратах, полученных из материала, отобранного из полости матки, по величине которой устанавливают хроническую или острую форму хламидиоза при показателях активности соответственно 1,3+0,09 или 3,9+0,25, причем при показателях его активности, соответствующих промежуточным значениям между названными, делают заключение об отсутствии хламидиоза у пациентки. При наличии диагноза хроническая форма, сроки заражения инфекцией принимают - свыше 2 месяцев, а при острой форме заболевания - менее 2 месяцев.The claimed method for the diagnosis of chlamydia includes the selection of clinical material from the cervix and uterine cavity after detecting dysplasia of the cervical epithelium, while the clinical materials are operatively recorded for immunocytochemical studies. Next, the preparation obtained from the cervix is contacted with primary antibodies to the Ki-67 protein, incubated and stained with hematoxylin and eosin. After that, the drug is used to detect the proliferating cellular nuclear antigen Ki-67 and evaluate the activity of this antigen in this drug. In this case, the chronic form of chlamydia (if the activity of the antigen is 2.4 + 0.09) or its acute form (with activity indices of 5.9 + 0.25) is established by the value of antigen activity, moreover, with its activity corresponding to the intermediate the values between the above, conclude that there is no chlamydia in the cervix. In the latter case, they begin (in the manner described above) an assessment of the activity of the proliferating cellular nuclear antigen Ki-67 in preparations obtained from material selected from the uterine cavity, the magnitude of which establishes a chronic or acute form of chlamydia with activity indices of 1.3 + 0.09 or 3.9 + 0.25, moreover, with indicators of its activity corresponding to intermediate values between the above, a conclusion is made about the absence of chlamydia in the patient. In the presence of a diagnosis, the chronic form, the timing of infection with the infection take - over 2 months, and in the acute form of the disease - less than 2 months.
Пример реализации способаAn example implementation of the method
Биоптаты слизистой оболочки шейки матки и ее полости были получены в соответствии с приказом Минздравмедпрома РФ от 29.04.94 N 82 «О порядке проведения патологоанатомических вскрытий» и в соответствии с номенклатурой клинических лабораторных исследований МЗ РФ (приказ 21 февраля 2000 г. № 64).Biopsies of the mucous membrane of the cervix and its cavity were obtained in accordance with the order of the Ministry of Health of the Russian Federation dated 04.29.94 N 82 “On the procedure for postmortem autopsy” and in accordance with the nomenclature of clinical laboratory studies of the Ministry of Health of the Russian Federation (order of February 21, 2000 No. 64).
Биопсийный материал фиксировался по прописи для подготовки к иммуногистохимическим исследованиям сразу после забора. Использованы классические гистологические методы исследования с окрашиванием гематоксилином и эозином для получения общей морфологической картины, а также иммуногистохимический метод выявления маркера пролиферации клеток - пролиферирующий клеточный ядерный антиген Ki-67.Biopsy material was recorded according to the recipe to prepare for immunohistochemical studies immediately after collection. Classical histological research methods with hematoxylin and eosin staining were used to obtain a general morphological picture, as well as an immunohistochemical method for detecting a cell proliferation marker, the Ki-67 proliferating cell nuclear antigen.
Парафиновые срезы толщиной 5 мкм монтировали на стекла, предварительно обработанные в течение 5 минут 0,01 %-ным раствором поли-л-лизина (Poly-l-Lizinesolution 0/01%, SigmaUSA) и высушенные в термостате при 56˚С в течение часа. После стандартной процедуры депарафинирования в толуолах и спиртах срезы для восстановления антигенной структуры подвергали термической обработке в специальном растворе (TargetRetrievalSolution, DAKO, Denmark) на водяной бане при температуре 95 – 97С˚ в течение 30 минут. Затем стекла охлаждали до комнатной температуры, промывали 5 минут 3%-ным раствором перекиси водорода для подавления эндогенной пероксидазы, после чего промывали в 3 сменах 0,02 М фосфатного буфера рН 7,5 по 5 минут в каждой. После этого наносили первичные антитела к белку Ki-67 (DAKO, Denmark), инкубировали в течение 30 минут во влажной камере в термостате при 37оС, промывали в 3 сменах 0,02 М фосфатного буфера рН 7,5 по 5 минут в каждой. Наносили стрептавидин, конъюгированный с пероксидазой хрена (StreptavidinPeroxidaseConjugated, DAKO, Denmark). Интенсивность окрашивания контролировали под микроскопом (инкубировали с диаминобензидином (ДАБ) в течение 3 – 5 минут). После появления коричневого окрашивания ядер срезы промывали в дистиллированной воде 5 минут, докрашивали гематоксилином, заключали в бальзам. В результате обработки препаратов выявляются ядра пролиферирующих клеток, находящихся в S-периоде, когда наблюдается максимум синтеза белка гена Ki-67, коррелирующего с концентрацией ДНК.5 μm thick paraffin sections were mounted on glass pretreated for 5 minutes with a 0.01% solution of poly-l-lysine (Poly-l-Lizinesolution 0/01%, SigmaUSA) and dried in an oven at 56 ° C for hours. After the standard dewaxing procedure in toluene and alcohols, sections to restore the antigenic structure were subjected to heat treatment in a special solution (Target RetrievalSolution, DAKO, Denmark) in a water bath at a temperature of 95 - 97С˚ for 30 minutes. Then the glasses were cooled to room temperature, washed for 5 minutes with a 3% hydrogen peroxide solution to suppress endogenous peroxidase, and then washed in 3 shifts of 0.02 M phosphate buffer pH 7.5 for 5 minutes each. After that, primary antibodies to the Ki-67 protein were applied (DAKO, Denmark), incubated for 30 minutes in a humid chamber in a thermostat at 37 ° C, washed in 3 shifts of 0.02 M phosphate buffer pH 7.5 for 5 minutes each. A streptavidin conjugated with horseradish peroxidase (Streptavidin Peroxidase Conjugated, DAKO, Denmark) was applied. The staining intensity was monitored under a microscope (incubated with diaminobenzidine (DAB) for 3 to 5 minutes). After the appearance of brown staining of the nuclei, the sections were washed in distilled water for 5 minutes, stained with hematoxylin, enclosed in a balm. As a result of processing the preparations, nuclei of proliferating cells located in the S-period are detected, when the maximum protein synthesis of the Ki-67 gene is observed, which correlates with the DNA concentration.
Анализ материала проведён с помощью микроскопа Olympus – Bx82 и цифровой камеры CDх82 с фирменным программным обеспечением.Analysis of the material was carried out using an Olympus - Bx82 microscope and a digital camera CDx82 with proprietary software.
В случае хронического течения заболевания нами отмечены нарушения структуры эпителиальной и собственной пластинок слизистой оболочки (СО), дезорганизация базальной мембраны, при этом дочерние клетки выступают на поверхности слизистой оболочки (см. фиг. 1 и фиг. 2).In the case of a chronic course of the disease, we noted violations of the structure of the epithelial and intrinsic plates of the mucous membrane (CO), disorganization of the basement membrane, while daughter cells protrude on the surface of the mucous membrane (see Fig. 1 and Fig. 2).
Данные по пролиферативной активности в структурах слизистой оболочки ШМ и ПМ представлены в табл. 1.Data on proliferative activity in the structures of the mucous membrane of CM and PM are presented in table. one.
Таблица 1Table 1
Пролиферативная активность в норме и при патологии слизистой оболочки шейки и полости маткиProliferative activity is normal and in the pathology of the mucous membrane of the cervix and uterine cavity
*P<0,05* P <0.05
При остром воспалительном процессе пролиферативная активность эпителия увеличивается почти в 2 раза (р<0,05), что связано с повреждением эпителия, утратой контактов между эпителиоцитами, свойством эпителия в случае повреждения к реституции (закрытию дефекта путём наползания дочерних клеток на дефект). Более низкая пролиферативная активность в структуре эпителиальной пластинки при хламидийной инфекции находится в соответствии с данными литературы о воспалительных процессах и эрозиях, не поддающихся лечению на фоне этой патологии, а также свидетельствует о наличии хронической запущенной инфекции, при которой повреждаются камбиальные клетки, соответственно, снижается регенераторный потенциал.In the acute inflammatory process, the proliferative activity of the epithelium increases almost 2 times (p <0.05), which is associated with damage to the epithelium, loss of contacts between epithelial cells, and the property of the epithelium in case of damage to restitution (closing the defect by crawling daughter cells onto the defect). The lower proliferative activity in the structure of the epithelial plate in case of chlamydial infection is in accordance with the literature on inflammatory processes and erosions that cannot be treated against this pathology, and also indicates the presence of a chronic advanced infection in which cambial cells are damaged, and accordingly, regenerative potential.
Анализ пролиферативной активности эпителия слизистой шейки матки позволил установить, что, несмотря на продолжительность постменопаузы, в этот период могут наблюдаться слабые пролиферативные явления в многослойном плоском и цилиндрическом эпителии шейки матки и, соответственно, в первый год постменопаузы пролиферативные типы мазков составляют 75% (фиг. 3-4).An analysis of the proliferative activity of the epithelium of the cervical mucosa made it possible to establish that, despite the duration of postmenopause, weak proliferative phenomena can be observed in the multilayer flat and cylindrical epithelium of the cervix and, accordingly, in the first year of postmenopause, proliferative types of smears make up 75% (Fig. 3-4).
При наличии полипов и воспалительных процессов вследствие хламидийной инфекции в слизистой оболочке шейки матки пролиферативная активность возрастает не только в эпителиальной пластинке, но и регистрируется в собственной пластинке (фиг. 5-6).In the presence of polyps and inflammatory processes due to chlamydial infection in the mucous membrane of the cervix, proliferative activity increases not only in the epithelial plate, but is also recorded in its own plate (Fig. 5-6).
Нами были отмечены нарушения структуры эпителиальной и собственной пластинок слизистой оболочки, дезорганизация базальной мембраны, при этом дочерние клетки выступают на поверхности слизистой оболочки.We noted violations of the structure of the epithelial and intrinsic plates of the mucous membrane, disorganization of the basement membrane, while daughter cells protrude on the surface of the mucous membrane.
Отмечено, что при хламидийной инфекции наиболее выражена атрофия цилиндрического эпителия, при этом наблюдается самая низкая его пролиферативная активность (фиг. 7-10).It was noted that with chlamydial infection, the atrophy of the cylindrical epithelium is most pronounced, while its lowest proliferative activity is observed (Fig. 7-10).
На фоне возрастного дефицита эстрогенов и присоединения хламидийной и других инфекций, происходят более выраженные морфологические изменения, связанные с повреждением эпителия, проявляющиеся по типу атрофических кольпитов (вагинитов) и неспецифических цервицитов. Одновременно развиваются дистрофические изменения в подлежащей строме, связанные с ухудшением трофики, снижением микроциркуляции кровотока и процессов транссудации стромы и всех слоев слизистых оболочек репродуктивного тракта женщин в постменопаузе.Against the background of age-related estrogen deficiency and the addition of chlamydial and other infections, more pronounced morphological changes occur associated with damage to the epithelium, manifested by the type of atrophic colpitis (vaginitis) and nonspecific cervicitis. At the same time, dystrophic changes in the underlying stroma develop, associated with a deterioration of trophism, a decrease in microcirculation of the bloodstream and transudation of the stroma and all layers of the mucous membranes of the reproductive tract of postmenopausal women.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017134936A RU2662940C1 (en) | 2017-10-05 | 2017-10-05 | Chlamydia diagnosis method |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017134936A RU2662940C1 (en) | 2017-10-05 | 2017-10-05 | Chlamydia diagnosis method |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2662940C1 true RU2662940C1 (en) | 2018-07-31 |
Family
ID=63142384
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017134936A RU2662940C1 (en) | 2017-10-05 | 2017-10-05 | Chlamydia diagnosis method |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2662940C1 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2251112C1 (en) * | 2003-07-30 | 2005-04-27 | Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт | Method for diagnosing clamidiosis cases |
| RU2458139C1 (en) * | 2010-12-30 | 2012-08-10 | Татьяна Анатольевна Кучменко | Diagnostic technique for clamidiosis, gardnerellosis, trichomoniasis, ureaplasmosis, mycoplasmosis by composition of equilibrium gas phase over cervical mucus |
| WO2013177329A1 (en) * | 2012-05-23 | 2013-11-28 | Cepheid | Methods of detecting chlamydia and gonorrhea and of screening for infection/inflammation based on genomic copy number |
-
2017
- 2017-10-05 RU RU2017134936A patent/RU2662940C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2251112C1 (en) * | 2003-07-30 | 2005-04-27 | Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт | Method for diagnosing clamidiosis cases |
| RU2458139C1 (en) * | 2010-12-30 | 2012-08-10 | Татьяна Анатольевна Кучменко | Diagnostic technique for clamidiosis, gardnerellosis, trichomoniasis, ureaplasmosis, mycoplasmosis by composition of equilibrium gas phase over cervical mucus |
| WO2013177329A1 (en) * | 2012-05-23 | 2013-11-28 | Cepheid | Methods of detecting chlamydia and gonorrhea and of screening for infection/inflammation based on genomic copy number |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tremellen et al. | The distribution of immune cells and macrophages in the endometrium of women with recurrent reproductive failure. II: adenomyosis and macrophages | |
| PT2049906E (en) | Assay and kit for predicting implantation success in assisted fertilisation | |
| Atla et al. | Cytological patterns of cervical pap smears with histopathological correlation. | |
| KR20140034124A (en) | Method for the diagnosis of a carcinoma and uses thereof | |
| Bai et al. | Oncological and reproductive outcomes of adenocarcinoma in situ of the cervix managed with the loop electrosurgical excision procedure | |
| RU2724381C1 (en) | Method for assessing endometrial receptiveness in endometriosis-associated infertility | |
| RU2127429C1 (en) | Method of diagnosing hyperplastic processes and endometrium cancer | |
| RU2662940C1 (en) | Chlamydia diagnosis method | |
| RU2310197C1 (en) | Method for predicting pre-cancer diseases of uterine cervix in women with papilloma-viral infection | |
| CN115873940A (en) | Biomarker for diagnosing and/or prognostically evaluating azoospermia and application thereof | |
| CN115389764A (en) | Application of protein FBXO7 in the preparation of endometrial cancer diagnostic markers | |
| Rajabova | DIAGNOSTICS AND TREATMENT OF CERVICAL INTRAEPITHELIAL NEOPLASIA IN PREGNANT WOMEN | |
| RU2704798C1 (en) | Method for determining management of patients with moderate dysplastic changes in cervix uteri | |
| ORR Jr et al. | Cervical intraepithelial neoplasia associated with exposure to diethylstilbestrol in utero: a clinical and pathologic study | |
| Mantoani et al. | CIN Extension at Colposcopy: Relation to Treatment and Blood Parameters | |
| CN101498725B (en) | A detection reagent for endometriosis | |
| CN112946269A (en) | Application of ABCA1 and CD68 as prognosis markers in preparation of liver cancer prognosis prediction kit | |
| RU2841835C1 (en) | Method for prediction of risk of recurrence of deep endometriosis after surgical treatment of women of reproductive age | |
| CN106383230B (en) | A kind of pulmonary cancer diagnosis kit | |
| MASHARIPOVA | A MODERN APPROACH TO THE PREVENTION OF CERVICAL PATHOLOGY | |
| KR101693190B1 (en) | Prediction and diagnosis method of cervical cancer using HPV test and MKRN1 expression pattern | |
| Aslani et al. | Re-evaluation of Negative Cone Biopsy Results with Ki-67 and p16 Immunostaining following Positive Cervical Biopsy | |
| RU2830413C1 (en) | Method for diagnosing chronic endometritis of various severity in patients with abnormal uterine bleeding, with no history of endometriopathy, by immunohistochemical study of cellular immunity disorder in endometrium | |
| WO2019129144A1 (en) | Grading model for detecting degree of malignancy of esophageal neoplasm and/or gastric neoplasm and use thereof | |
| RU2732431C1 (en) | Method for prediction of pregnancy in females with uterine infertility caused by endometrial hyperplasia |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191006 |