[go: up one dir, main page]

RU2651047C1 - Drug composition of cytoprotective action and method for production thereof - Google Patents

Drug composition of cytoprotective action and method for production thereof Download PDF

Info

Publication number
RU2651047C1
RU2651047C1 RU2017116038A RU2017116038A RU2651047C1 RU 2651047 C1 RU2651047 C1 RU 2651047C1 RU 2017116038 A RU2017116038 A RU 2017116038A RU 2017116038 A RU2017116038 A RU 2017116038A RU 2651047 C1 RU2651047 C1 RU 2651047C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
succinate
dimeglumine
water
injection
nicotinamide
Prior art date
Application number
RU2017116038A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Алексей Леонидович Коваленко
Андрей Юрьевич Петров
Original Assignee
Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Технологическая Фармацевтическая Фирма "Полисан"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=61976736&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2651047(C1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Технологическая Фармацевтическая Фирма "Полисан" filed Critical Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Технологическая Фармацевтическая Фирма "Полисан"
Priority to RU2017116038A priority Critical patent/RU2651047C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2651047C1 publication Critical patent/RU2651047C1/en
Priority to PCT/RU2018/000261 priority patent/WO2018203774A1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/205Amine addition salts of organic acids; Inner quaternary ammonium salts, e.g. betaine, carnitine
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/395Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/455Nicotinic acids, e.g. niacin; Derivatives thereof, e.g. esters, amides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/395Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/525Isoalloxazines, e.g. riboflavins, vitamin B2
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08Solutions

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FIELD: medicine; pharmaceuticals.
SUBSTANCE: invention relates to the pharmaceutical industry and medicine and is a medicinal composition of cytoprotective action in the form of an aqueous solution containing inosine, nicotinamide, riboflavin mononucleotide sodium, succinic acid and a biologically active compound. According to the invention, as its biologically active compound, it comprises dimeglumine succinate of formula [HOCH2(CHOH)4CH2NH2CH3]+2[OOC(CH2)2COO]2-, wherein the components in the composition are in a certain ratio, in mass%.
EFFECT: invention provides a composition having a high biological activity, safety and stability.
2 cl, 7 tbl, 27 ex

Description

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и медицине, в частности, к лекарственной композиции в виде водного раствора, обладающей цитопротекторным действием и содержащей в качестве активных компонентов: димеглюмина сукцинат, никотинамид, инозин и рибофлавина мононуклеотид, а также к способу ее получения. Композиция обладает безопасностью и стабильностью и может быть использована для лечения широкого спектра заболеваний, связанных с нарушениями энергетического обмена.The invention relates to the pharmaceutical industry and medicine, in particular, to a medicinal composition in the form of an aqueous solution having a cytoprotective effect and containing as active components: dimeglumine succinate, nicotinamide, inosine and riboflavin mononucleotide, as well as a method for its preparation. The composition has safety and stability and can be used to treat a wide range of diseases associated with impaired energy metabolism.

Известно большое количество комбинированных лекарственных средств для парентерального введения, содержащих янтарную кислоту и/или ее соли - сукцинаты и обладающих широким спектром цитопротекторного действия.A large number of combined drugs for parenteral administration are known containing succinic acid and / or its salts, succinates and having a wide spectrum of cytoprotective action.

Так, известны инъекционные лекарственные препараты нейротропного и антигипоксического действия, содержащие янтарную кислоту в комбинации с витаминами и витаминоподобными компонентами (ЕА 00879, KP 20130035514, RU 2380089, RU 2331414, RU 2497522, RU 2108095, RU 2383331, RU 2205640, RU 2440115), а также комбинированные ноотропные (RU 2372913, RU 2359669), иммунотропные (RU 2526184, RU 2395278, RU 2527329, RU 2411944) и гепатопротекторные препараты (JP 09/188.664, ЕА 007865).For example, injectable drugs of neurotropic and antihypoxic action are known containing succinic acid in combination with vitamins and vitamin-like components (EA 00879, KP 20130035514, RU 2380089, RU 2331414, RU 2497522, RU 2108095, RU 2383331, RU 2205640, RU 2440115), as well as combined nootropic (RU 2372913, RU 2359669), immunotropic (RU 2526184, RU 2395278, RU 2527329, RU 2411944) and hepatoprotective drugs (JP 09 / 188.664, EA 007865).

Известен также препарат на основе янтарной кислоты для лечения нарушений минерального (RU 2481831) и метаболического обмена (JP 2013189437, RU 2404761, RU 2351323), а также коррекции микроциркуляции (RU 2549448).A succinic acid-based preparation is also known for the treatment of mineral (RU 2481831) and metabolic metabolic disorders (JP 2013189437, RU 2404761, RU 2351323), as well as microcirculation correction (RU 2549448).

Кроме того, сукцинаты применяются в качестве вспомогательных компонентов для стабилизации офтальмологических капель (RU 25113997), растворов солей кальция для внутривенного введения (RU 2481831), антибиотиков и антисептиков (CN 105287371, CN 104414965, RU 2339730, RU 2526184, RU 2327453, RU 2114617, RU 2333003, RU 2361579), противораковых (RU 2478370), противотуберкулезных препаратов (WO 2014014434), а также широко используются в качестве компонентов инфузионных растворов для диализа (JP 2010-042124, RU 2536994, RU 2549448, RU 2311202, RU 2521361).In addition, succinates are used as auxiliary components for the stabilization of ophthalmic drops (RU 25113997), solutions of calcium salts for intravenous administration (RU 2481831), antibiotics and antiseptics (CN 105287371, CN 104414965, RU 2339730, RU 2526184, RU 2327453, RU 2114617 , RU 2333003, RU 2361579), anti-cancer drugs (RU 2478370), anti-TB drugs (WO 2014014434), and are also widely used as components of dialysis infusion solutions (JP 2010-042124, RU 2536994, RU 2549448, RU 2311202, RU 2521361) .

Наиболее близким по составу к заявляемой композиции, является комплексный лекарственный препарат цитопротекторного действия, взятый в качестве прототипа, содержащий смесь метаболитов в виде соли янтарной кислоты, инозина и комплекса витаминов (ЕА 001099 «Инъекционное лекарственное средство «Цитофлавин», обладающий цитопротекторным действием») следующего состава, масс. %:The closest in composition to the claimed composition is a complex drug of cytoprotective action, taken as a prototype, containing a mixture of metabolites in the form of a salt of succinic acid, inosine and a complex of vitamins (EA 001099 “Injectable drug“ Cytoflavin with a cytoprotective effect ”) of the following composition, mass. %:

Янтарная кислотаsuccinic acid 9,5-10,59.5-10.5 ИнозинInosine 1,9-2,11.9-2.1 НикотинамидNicotinamide 0,95-1,050.95-1.05 Рибофлавина мононуклеотид натрияRiboflavin Sodium Mononucleotide 0,19-0,210.19-0.21 Натрия гидроокисьSodium hydroxide 3,3-3,73.3-3.7 N-метилглюкаминN-methylglucamine 15,7-17,315.7-17.3 Вода для инъекцийWater for injections до 100,0up to 100.0

Необходимо отметить, что указанная композиция имеет ряд существенных недостатков. Так, она содержит 8,5 ммоль ионов натрия в одной ампуле и при введении рекомендованных разовых дозировок прототипа до 40 мл в виде инфузий, приготовленных в 500 мл 0,9% физиологического раствора, может привести к увеличению содержания ионов натрия до 220 ммоль/л в приготовленном растворе (при физиологической норме 135-150 ммоль/л) и формированию нарушений ионного баланса организма - гипернатриемии с развитием возможной гипергидратации органов и тканей и формированию побочных эффектов -нарушения сознания, очаговой неврологической симптоматики, отеков.It should be noted that this composition has a number of significant disadvantages. So, it contains 8.5 mmol of sodium ions in one ampoule and with the introduction of the recommended single doses of the prototype up to 40 ml in the form of infusions prepared in 500 ml of 0.9% saline solution, it can lead to an increase in the content of sodium ions to 220 mmol / l in the prepared solution (with a physiological norm of 135-150 mmol / l) and the formation of violations of the ionic balance of the body - hypernatremia with the development of possible hyperhydration of organs and tissues and the formation of side effects - impaired consciousness, focal neurological symptoms, s.

Кроме того, известный лекарственный препарат производят с использованием технологии асептического розлива. При этом существует достаточно высокая вероятность контаминации микроорганизмами в процессе приготовлении препарата, так как стерилизующая фильтрация с использованием стандартного фильтра с размером пор 0,22 мкм хотя и создает надежный барьер для бактерий, но часто не удерживает споры, вирусы и микоплазмы.In addition, a known drug is produced using aseptic filling technology. At the same time, there is a rather high probability of contamination by microorganisms during the preparation of the drug, since sterilizing filtration using a standard filter with a pore size of 0.22 μm, although it creates a reliable barrier to bacteria, often does not retain spores, viruses, and mycoplasmas.

Более того, содержащиеся в составе прототипа янтарная кислота, инозин, никотинамид и рибофлавина мононуклеотид являются субстратами и факторами роста микроорганизмов, что дополнительно повышает возможность микробной контаминации. Несмотря на высокий риск микробной контаминации, очевидно, что отказ в процессе производства такого препарата от термической стерилизации, обусловлен наличием в композиции термолабильного рибофлавина мононуклеотида и неустойчивых к гидролизу инозина и никотинамида (Справочник биохимика. Доссон Р., Эллиот Д. и др. М.: Мир, 1991).Moreover, the succinic acid, inosine, nicotinamide and riboflavin mononucleotide contained in the prototype are substrates and growth factors of microorganisms, which further increases the possibility of microbial contamination. Despite the high risk of microbial contamination, it is obvious that the refusal in the production process of such a drug from thermal sterilization is due to the presence of a thermolabile riboflavin mononucleotide in the composition and unstable hydrolysis of inosine and nicotinamide (Biochemist Handbook. Dosson R., Elliot D. et al. : World, 1991).

Ввиду того, что предлагаемая лекарственная композиция может быть использована в терапии критических состояний и в педиатрической практике, требуется минимизация микробной контаминации и рисков возникновения побочных эффектов в результате образования продуктов разложения ее компонентов.Due to the fact that the proposed medicinal composition can be used in the treatment of critical conditions and in pediatric practice, minimization of microbial contamination and the risks of side effects resulting from the formation of decomposition products of its components is required.

На практике часто используют способы получения лекарственных препаратов, которые содержат термолабильные лекарственные вещества, включающие этап растворения активных компонентов без нагревания, с последующей стерилизующей фильтрацией и асептическим розливом, не позволяющие применить стандартные режимы термической стерилизации.In practice, methods are often used to obtain drugs that contain thermolabile drugs, including the step of dissolving the active components without heating, followed by sterilizing filtration and aseptic filling, which do not allow the use of standard thermal sterilization modes.

В настоящее время для таких препаратов используются технологии стерилизации с применением комбинированных способов воздействия на микроорганизмы: температурные, химические, гамма-излучение, ультразвук и другие методы, позволяющие сохранить фармакологическую активность и качество препарата.Currently, sterilization technologies are used for such drugs using combined methods of influencing microorganisms: temperature, chemical, gamma radiation, ultrasound and other methods that allow preserving the pharmacological activity and quality of the drug.

Так, в заявке RU 2001117337 предлагается вариант радиационной стерилизации растворов, в патенте RU 2519841 - стерилизация СВЧ - сверхвысокочастотным излучением. В заявке RU 2006142783 стерилизация осуществляется за счет обработки импульсными высоковольтными разрядами, генерирующими стерилизующее УФ излучение, а в заявке RU 2000130091 предлагается способ электрохимической стерилизации жидкостей.So, in the application RU 2001117337, a variant of radiation sterilization of solutions is proposed, in the patent RU 2519841 - sterilization of microwave - microwave radiation. In the application RU 2006142783 sterilization is carried out by treatment with pulsed high-voltage discharges generating sterilizing UV radiation, and in the application RU 2000130091 a method for electrochemical sterilization of liquids is proposed.

В настоящее время для стерилизации нестабильных водных растворов используются также комбинации режимов термической и физической стерилизации, так в патенте RU 2238108 нагрев осуществляют воздействием электромагнитного поля СВЧ, а стерилизацию осуществляют электромагнитным полем КВЧ. В заявке RU 2003115619 предложен оригинальный комбинированный способ стерилизации, путем воздействия электрического поля и акустической вибрации.Currently, for sterilization of unstable aqueous solutions, combinations of thermal and physical sterilization modes are also used, so in the patent RU 2238108 heating is carried out by the influence of the microwave electromagnetic field, and sterilization is carried out by the EHF electromagnetic field. In the application RU 2003115619 proposed an original combined method of sterilization, by exposure to an electric field and acoustic vibration.

Однако, поскольку многие комбинированные нестандартные методы стерилизации не дают высокой гарантии отсутствия микробной контаминации лекарственного препарата, дополнительно в раствор часто добавляют разрешенные международными фармакопеями антимикробные консерванты: бензиловый спирт (RU 2209070, RU 210550, RU 2326669, RU 2192855, US 20150126466, UA 26343), бензалкония хлорид (RU 2419417, UA 26343), хлор-бутанол (UA 26343), метакрезол (RU 2093144), крезол (RU 2020954), фенол (RU 2111012). Такой способ позволяет стерилизовать термолабильные лекарственные препараты при нестандартных температурных режимах, но имеет весьма существенный недостаток - ограничение к медицинскому применению, особенно в педиатрической практике (ГФ XIII, ОФС.1.1.0016.15 Стерилизация) ввиду добавления в состав препарата консерванта.However, since many combined non-standard sterilization methods do not provide a high guarantee of the absence of microbial contamination of the drug, antimicrobial preservatives permitted by international pharmacopoeias are often added to the solution: benzyl alcohol (RU 2209070, RU 210550, RU 2326669, RU 2192855, US 20150126466, UA 26343) , benzalkonium chloride (RU 2419417, UA 26343), chlorobutanol (UA 26343), metacresol (RU 2093144), cresol (RU 2020954), phenol (RU 2111012). This method allows you to sterilize thermolabile drugs at non-standard temperature conditions, but has a very significant drawback - the limitation to medical use, especially in pediatric practice (GF XIII, OFS.1.1.0016.15 Sterilization) due to the addition of a preservative to the composition of the drug.

В настоящее время наиболее широко используемым методом финишной стерилизации в промышленном производстве инъекционных и инфузионных лекарственных препаратов является термическая стерилизация насыщенным водяным паром под давлением (автоклавирование). Параметры этого процесса регламентированы в международных фармакопеях (ГФ XIII, ЕР 9.0, USP 39). Стандартную стерилизацию насыщенным паром водных растворов лекарственных препаратов осуществляют при температуре 120-122°С под давлением в течение 8-15 минут в зависимости от физико-химических свойств и других параметров объекта термической стерилизации, позволяющий получить стабильный и качественный продукт.Currently, the most widely used method of finish sterilization in the industrial production of injection and infusion drugs is thermal sterilization with saturated steam under pressure (autoclaving). The parameters of this process are regulated in international pharmacopoeias (GF XIII, EP 9.0, USP 39). Standard sterilization with saturated steam of aqueous solutions of drugs is carried out at a temperature of 120-122 ° C under pressure for 8-15 minutes depending on the physicochemical properties and other parameters of the thermal sterilization object, which allows to obtain a stable and high-quality product.

Известно, что для композиций, содержащих термолабильные компоненты при производстве стерильных растворов лекарственных препаратов одним из наиболее критических процессов, приводящих к образованию неприемлемого уровня нежелательных примесей (продуктов разложения), снижающих безопасность применения препарата, является процесс финишной термической стерилизации, задачей которого является полное уничтожение всех видов микроорганизмов и их спор.It is known that for compositions containing thermolabile components in the manufacture of sterile drug solutions, one of the most critical processes leading to the formation of an unacceptable level of undesirable impurities (decomposition products) that reduce the safety of the drug is the final thermal sterilization process, the task of which is to completely destroy all types of microorganisms and their spores.

Разработка эффективных многокомпонентных препаратов в виде раствора для внутривенного введения является важной задачей современной медицины. Создание лекарственных композиций существенно затрудняется тем, что часто используются достаточно нестабильные в водных растворах и чувствительные к стрессовым факторам (температура, рН, окислители, свет) компоненты, что обычно приводит к разложению и химическому взаимодействию их между собой, автокатализу химических превращений, с образованием нежелательных продуктов разложения на всех стадиях производства лекарственного препарата.The development of effective multicomponent preparations in the form of a solution for intravenous administration is an important task of modern medicine. The creation of medicinal compositions is significantly hampered by the fact that components that are quite unstable in aqueous solutions and sensitive to stress factors (temperature, pH, oxidizing agents, light) are often used, which usually leads to their decomposition and chemical interaction, autocatalysis of chemical transformations, with the formation of undesirable decomposition products at all stages of drug production.

Задачей изобретения является создание лекарственной композиции цитопротекторного действия в виде водного раствора, обладающего высокой биологической активностью, безопасностью и стабильностью, а также разработка способа получения композиции.The objective of the invention is the creation of a medicinal composition with a cytoprotective effect in the form of an aqueous solution having high biological activity, safety and stability, as well as the development of a method for producing the composition.

Поставленная задача решается тем, что лекарственная композиция цитопротекторного действия в виде водного раствора, содержащая инозин, никотинамид, рибофлавина мононуклеотид натрия, согласно изобретению, дополнительно содержит в качестве активного компонента соединение димеглюмина сукцинат формулы:The problem is solved in that the medicinal composition of the cytoprotective action in the form of an aqueous solution containing inosine, nicotinamide, riboflavin sodium mononucleotide, according to the invention, additionally contains as an active component a compound of dimeglumine succinate of the formula:

[НОСН2(СНОН)4CH2NH2CH3]+ 2[ООС(СН2)2СОО]2- при следующем соотношении компонентов, масс. %:[NOSH 2 (CHON) 4 CH 2 NH 2 CH 3 ] + 2 [OOS (CH 2 ) 2 COO] 2- in the following ratio of components, mass. %:

Димеглюмина сукцинатDimeglumine Succinate 38,76-47,3738.76-47.37 ИнозинInosine 1,80-2,201.80-2.20 НикотинамидNicotinamide 0,90-1,100.90-1.10 Рибофлавина мононуклеотид натрияRiboflavin Sodium Mononucleotide 0,18-0,220.18-0.22 Вода для инъекцийWater for injections до 100,0up to 100.0

Также поставленная задача решается тем, что в способе получения лекарственной композиции цитопротекторного действия путем растворения активных компонентов воде для инъекций с последующей стерилизующей фильтрацией, согласно изобретению, в композицию дополнительно вводят янтарную кислоту до получения стабильного раствора со значением рН в диапазоне от 6,0 до 7,0 и проводят термическую стерилизацию при температуре от 100 до 116°С.The problem is also solved by the fact that in the method for producing a medicinal composition of a cytoprotective effect by dissolving the active components with water for injection followed by sterilizing filtration, according to the invention, succinic acid is additionally introduced into the composition to obtain a stable solution with a pH value in the range from 6.0 to 7 , 0 and carry out thermal sterilization at a temperature of from 100 to 116 ° C.

Заявленная лекарственная композиция содержит новое биологически активное соединение на основе янтарной кислоты - димеглюмина сукцинат (ди-N-(1-дезокси-D-глюцитол-1-ил)-N-метиламмония сукцинат) формулы:The claimed medicinal composition contains a new biologically active compound based on succinic acid - dimeglumine succinate (di-N- (1-deoxy-D-glucitol-1-yl) -N-methylammonium succinate) of the formula:

[НОСН2(СНОН)4CH2NH2CH3]+ 2[ООС(СН2)2СОО]2-.[NOSH 2 (CHOH) 4 CH 2 NH 2 CH 3 ] + 2 [OOS (CH 2 ) 2 COO] 2- .

Синтез соединения осуществляют согласно схеме химической реакции, представленной на рисунке 1:The synthesis of compounds is carried out according to the chemical reaction scheme shown in Figure 1:

Figure 00000001
Figure 00000001

Пример 1. Для получения димеглюмина сукцината в реактор емкостью 1000 л загружают 150 кг (0,7684 кг/моль) меглюмина (Р N002809/01-241212) и 500 л спирта метилового (ГОСТ 2222-95, марка А). Массу нагревают при перемешивании до полного растворения меглюмина. К полученному раствору при дальнейшем перемешивании в течение 30 минут добавляют 45,4 кг (0,3842 кг/моль) янтарной кислоты (Р N002810/01-130612). Перемешивание продолжают в течение одного часа, при этом происходит образование белых кристаллов целевого продукта. После выдержки в течение одного часа кристаллы отфильтровывают на центрифуге и сушат под вакуумом 0,085-0,09 МПА, при температуре 50-55°С. Всего получают 190,5 кг димеглюмина сукцината (выход - 97,5%).Example 1. To obtain dimeglumine succinate, 150 kg (0.7684 kg / mol) of meglumine (P N002809 / 01-241212) and 500 l of methyl alcohol (GOST 2222-95, grade A) are loaded into a 1000-liter reactor. The mass is heated with stirring until complete dissolution of meglumine. To the resulting solution with further stirring over 30 minutes, 45.4 kg (0.3842 kg / mol) of succinic acid (P N002810 / 01-130612) are added. Stirring is continued for one hour, with the formation of white crystals of the target product. After exposure for one hour, the crystals are filtered off in a centrifuge and dried under vacuum at 0.085-0.09 MPa, at a temperature of 50-55 ° C. A total of 190.5 kg of dimeglumine succinate is obtained (yield - 97.5%).

Физико-химические свойства димеглюмина сукцината приведены в таблице 1, структурная формула представлена на рисунке 2.Physico-chemical properties of dimeglumine succinate are shown in table 1, the structural formula is presented in figure 2.

Figure 00000002
Figure 00000002

Figure 00000003
Figure 00000003

Хорошая растворимость димеглюмина сукцината в воде и физиологически приемлемое значение рН водных растворов (7,1-7,2), делает его пригодным для лекарственных препаратов для внутривенного введения.The good solubility of dimeglumine succinate in water and the physiologically acceptable pH of aqueous solutions (7.1-7.2) makes it suitable for intravenous drugs.

В настоящем изобретении впервые показано, что новое химическое соединение формулы: [НОСН2(СНОН)4CH2NH2CH3]+ 2[ООС(СН2)2СОО]2- может быть использовано в качестве биологически активного компонента лекарственной композиции цитопротекторного действия.The present invention was shown for the first time that a new chemical compound of the formula: [HOSN 2 (CHOH) 4 CH 2 NH 2 CH 3 ] + 2 [OOS (CH 2 ) 2 COO] 2- can be used as a biologically active component of the cytoprotective drug composition actions.

Включение в состав лекарственной композиции нового активного компонента - димеглюмина сукцината, не содержащего ионы натрия, позволяет снизить токсичность композиции и, следовательно, минимизировать риск развития побочных явлений, связанных гипернатриемией, и тем самым расширить область ее использования в медицинской практике.The inclusion of a new active component in the composition of the medicinal composition, dimeglumine succinate, which does not contain sodium ions, can reduce the toxicity of the composition and, therefore, minimize the risk of side effects associated with hypernatremia, and thereby expand its field of use in medical practice.

Оптимальное количественное содержание димеглюмина сукцината и других компонентов в заявленной композиции определено опытным путем и описано в примерах 2-4.The optimal quantitative content of dimeglumine succinate and other components in the claimed composition was determined empirically and described in examples 2-4.

Биологическая активность и безопасность заявленной композиции исследована в опытах 1 и 2.The biological activity and safety of the claimed composition was investigated in experiments 1 and 2.

В способе получения заявленной композиции, авторами предложено использовать в качестве стабилизатора янтарную кислоту, которая позволяет наряду с получением стабильного раствора с физиологически приемлемым диапазоном показателя рН, применить термическую стерилизацию раствора в широком диапазоне температур, что минимизирует микробную контаминацию и риски возникновения побочных эффектов в результате образования продуктов разложения ее компонентов. В результате повышена безопасность готового раствора и, следовательно, лекарственная композиция может быть использована в терапии критических состояний и в педиатрической практике.In the method of obtaining the claimed composition, the authors proposed to use succinic acid as a stabilizer, which, along with obtaining a stable solution with a physiologically acceptable range of pH, apply thermal sterilization of the solution in a wide temperature range, which minimizes microbial contamination and the risks of side effects resulting from the formation of decomposition products of its components. As a result, the safety of the finished solution is increased and, therefore, the drug composition can be used in the treatment of critical conditions and in pediatric practice.

Оптимальное количественное содержание стабилизатора при получении заявленной композиции определено опытным путем и описано в примерах: 6-21 и 22-27.The optimal quantitative content of the stabilizer upon receipt of the claimed composition was determined empirically and described in examples: 6-21 and 22-27.

Изобретение осуществляют следующим образом.The invention is as follows.

Для получения лекарственных композиций, включающих димеглюмина сукцинат, приготавливают водные растворы согласно примерам 2-4.To obtain medicinal compositions comprising dimeglumine succinate, aqueous solutions are prepared according to examples 2-4.

Пример 2. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 38,76 кг димеглюмина сукцината, 1,8 кг инозина, 0,9 кг никотинамида, 0,18 кг рибофлавина мононуклеотида, доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л. Полученный раствор фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, в асептических условиях композицию разливают в стерильные ампулы по 10 мл, запаивают. Каждая ампула содержит - 3876 мг димеглюмина сукцината (38,76 масс. %), инозина 180 мг (1,8 масс. %), никотинамида 90 мг (0,9 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 18 мг (0,18 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 2. In a tank apparatus with a stirrer with a capacity of 100 l, load 50.0 l of water for injection, 38.76 kg of dimeglumine succinate, 1.8 kg of inosine, 0.9 kg of nicotinamide, 0.18 kg of riboflavin mononucleotide, the solution volume is adjusted with water for injection up to 100 liters. The resulting solution is filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, under aseptic conditions, the composition is poured into sterile ampoules of 10 ml, sealed. Each ampoule contains 3876 mg of dimeglumine succinate (38.76 wt.%), Inosine 180 mg (1.8 wt.%), Nicotinamide 90 mg (0.9 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 18 mg (0.18 wt.%), water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 3. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 43,0 кг димеглюмина сукцината, 2,0 кг инозина, 1,0 кг никотинамида, 0,2 кг рибофлавина мононуклеотида, доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л. Полученный раствор фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, в асептических условиях композицию разливают в стерильные ампулы по 10 мл, запаивают. Каждая ампула содержит - 4300 мг димеглюмина сукцината (43,0 масс. %), инозина 200 мг (2,0 масс. %), никотинамида 100 мг (1,0 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 20 мг (0,2 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 3. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l, load 50.0 l of water for injection, 43.0 kg of dimeglumine succinate, 2.0 kg of inosine, 1.0 kg of nicotinamide, 0.2 kg of riboflavin mononucleotide, the solution volume is adjusted with water for injection up to 100 liters. The resulting solution is filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, under aseptic conditions, the composition is poured into sterile ampoules of 10 ml, sealed. Each ampoule contains - 4300 mg of dimeglumine succinate (43.0 wt.%), Inosine 200 mg (2.0 wt.%), Nicotinamide 100 mg (1.0 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 20 mg (0.2 wt.%), water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 4. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 47,37 кг димеглюмина сукцината, 2,2 кг инозина, 1,1 кг никотинамида, 0,22 кг рибофлавина мононуклеотида, доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л. Полученный раствор фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, в асептических условиях композицию разливают в стерильные ампулы по 10 мл, запаивают. Каждая ампула содержит -4737 мг димеглюмина сукцината (47,37 масс. %), инозина 220 мг (2,2 масс. %), никотинамида 110 мг (1,1 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 22 мг (0,22 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 4. In a tank apparatus with a stirrer with a capacity of 100 l, load 50.0 l of water for injection, 47.37 kg of dimeglumine succinate, 2.2 kg of inosine, 1.1 kg of nicotinamide, 0.22 kg of riboflavin mononucleotide, the solution volume is adjusted with water for injection up to 100 liters. The resulting solution is filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, under aseptic conditions, the composition is poured into sterile ampoules of 10 ml, sealed. Each ampoule contains -4737 mg of dimeglumine succinate (47.37 wt.%), Inosine 220 mg (2.2 wt.%), Nicotinamide 110 mg (1.1 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 22 mg (0.22 wt.%), water for injection up to 100.0 wt. %

Полученный раствор (примеры 2-4), содержащий в качестве активного компонента соединение димеглюмина сукцинат, содержит существенно меньшее количество ионов натрия по сравнению с составом по прототипу (около 0,04 ммоль на ампулу 10 мл против 8,5 в прототипе в пересчете на ампулу 10 мл), что снижает токсичность лекарственной композиции.The resulting solution (examples 2-4) containing the dimeglumine succinate compound as the active component contains a significantly lower amount of sodium ions compared to the composition of the prototype (about 0.04 mmol per ampoule of 10 ml versus 8.5 in the prototype in terms of ampoule 10 ml), which reduces the toxicity of the drug composition.

Для изучения стабильности заявляемой композиции, состав, полученный по примеру 3, закладывали в климатическое оборудование Binder KBF 720 при различных условиях хранения (40±2)°С и (25±2)°С. Результаты представлены в таблице 2.To study the stability of the claimed composition, the composition obtained according to example 3, was laid in the climatic equipment Binder KBF 720 under various storage conditions (40 ± 2) ° C and (25 ± 2) ° C. The results are presented in table 2.

Figure 00000004
Figure 00000004

Figure 00000005
Figure 00000005

Количественное содержание димеглюмина сукцината, никотинамида, инозина, неидентифицированных примесей и гипоксантина определяли методом ВЭЖХ при следующих условиях: спектрофотометрический детектор, длина волны 254 нм, рефрактометрический детектор, хроматографическая колонка Phenomenex Luna Phenyl-Hexyl длиной 250 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная сорбентом зернением 5 мкм, или аналогичная; скорость потока элюента 0,7 мл/мин, температура колонки 25°С; время хроматографирования 30 мин. Количественное содержание рибофлавина мононуклеотида определяли спектрофотометрическим методом в кювете с толщиной слоя 1 см в максимуме поглощения при длине волны 445±2 нм.The quantitative content of dimeglumine succinate, nicotinamide, inosine, unidentified impurities and hypoxanthine was determined by HPLC under the following conditions: spectrophotometric detector, wavelength 254 nm, refractometric detector, chromatographic column Phenomenex Luna Phenyl-Hexyl with a length of 250 mm with an internal diameter of 4.6 mm, sorbent with a grain size of 5 microns, or similar; flow rate of eluent 0.7 ml / min; column temperature 25 ° C; chromatography time 30 minutes The quantitative content of riboflavin mononucleotide was determined spectrophotometrically in a cuvette with a layer thickness of 1 cm at the maximum absorption at a wavelength of 445 ± 2 nm.

Композиция считалась безопасной для внутривенного введения, если по истечении срока наблюдения в различных условиях хранения концентрации активных компонентов составляли не менее 95,0% от исходного значения, а содержание неидентифицированных примесей не превышало 2,0%.The composition was considered safe for intravenous administration if, after the observation period under various storage conditions, the concentrations of active components were at least 95.0% of the initial value, and the content of unidentified impurities did not exceed 2.0%.

При хранении в условиях ускоренного старения при (40±2)°С происходит незначительное снижение количества активных компонентов, но наблюдается образование неидентифицированных примесей в количестве более 2,0% (табл. 2), что свидетельствует о потенциальном риске возникновения побочных эффектов.When stored under accelerated aging at (40 ± 2) ° С, a slight decrease in the amount of active components occurs, but the formation of unidentified impurities in an amount of more than 2.0% is observed (Table 2), which indicates a potential risk of side effects.

В условиях естественного хранения заявленная композиция стабильна в течение 2 лет, однако, как и препарат по прототипу, она получена в условиях асептического розлива без финишной стерилизации, т.е. с потенциальной высокой вероятностью контаминации микроорганизмами.In conditions of natural storage, the claimed composition is stable for 2 years, however, like the preparation according to the prototype, it was obtained under aseptic filling without finishing sterilization, i.e. with a high potential for microbial contamination.

Попытка уменьшить риск контаминации микроорганизмами в условиях асептического розлива лекарственной композиции и путем введения в состав вспомогательных компонентов, являющихся химическими консервантами, таких как бензиловый спирт, бензалкония хлорид, крезол, пропиленгликоль в концентрации 0,5-5,0 масс. % оказалась неудачной, так как при их добавлении происходило изменение цвета раствора и выпадение осадка, что свидетельствовало о химическом взаимодействии активных компонентов со вспомогательными.An attempt to reduce the risk of contamination by microorganisms under conditions of aseptic filling of the drug composition and by introducing into the composition of auxiliary components that are chemical preservatives, such as benzyl alcohol, benzalkonium chloride, cresol, propylene glycol in a concentration of 0.5-5.0 mass. % turned out to be unsuccessful, since when they were added, the color of the solution and precipitation changed, which indicated the chemical interaction of the active components with the auxiliary ones.

Попытка стерилизации предлагаемой композиции альтернативными методами стерилизации (радиационная, СВЧ) также оказалась неудачной вследствие быстрой деградации активных компонентов и в первую очередь рибофлавина мононуклеотида натрия с изменением окраски раствора от желтого до темно-коричневого, критическим увеличением неидентифицированных примесей (продуктов разложения) и осадка.An attempt to sterilize the proposed composition with alternative sterilization methods (radiation, microwave) has also been unsuccessful due to the rapid degradation of the active components and primarily riboflavin sodium mononucleotide with a change in the color of the solution from yellow to dark brown, a critical increase in unidentified impurities (decomposition products) and sediment.

На следующем этапе проводились исследования влияния различных режимов термической стерилизации препарата на его стабильность. Для этого готовили композицию в ампулах по примеру 5.At the next stage, studies were carried out on the effect of various modes of thermal sterilization of the drug on its stability. For this, the composition was prepared in ampoules according to example 5.

Пример 5. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 43,0 кг димеглюмина сукцината, 2,0 кг инозина, 1,0 кг никотинамида, 0,2 кг рибофлавина мононуклеотида, доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л. Полученный раствор фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы по 10 мл. Каждая ампула содержит - 4300 мг димеглюмина сукцината (43,0 масс. %), инозина 200 мг (2,0 масс. %), никотинамида 100 мг (1,0 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 20 мг (0,2 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %. Далее ампулы с композицией, были разделены на 3 части и подвергнуты термической стерилизации водяным паром под давлением в следующих режимах: 121±1°С, 8 минут; 110±1°С, 8 минут и 100±1°С, 8 минут.Example 5. In a tank apparatus with a stirrer with a capacity of 100 l, load 50.0 l of water for injection, 43.0 kg of dimeglumine succinate, 2.0 kg of inosine, 1.0 kg of nicotinamide, 0.2 kg of riboflavin mononucleotide, the solution volume is adjusted with water for injection up to 100 liters. The resulting solution is filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into ampoules of 10 ml. Each ampoule contains - 4300 mg of dimeglumine succinate (43.0 wt.%), Inosine 200 mg (2.0 wt.%), Nicotinamide 100 mg (1.0 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 20 mg (0.2 wt.%), water for injection up to 100.0 wt. % Further, the ampoules with the composition were divided into 3 parts and subjected to thermal sterilization with water vapor under pressure in the following modes: 121 ± 1 ° C, 8 minutes; 110 ± 1 ° С, 8 minutes and 100 ± 1 ° С, 8 minutes.

Количественное содержание димеглюмина сукцината, никотинамида, инозина и примесей до и после стерилизации определяли методом ВЭЖХ при следующих условиях: спектрофотометрический детектор, длина волны 254 нм, рефрактометрический детектор, хроматографическая колонка Phenomenex Luna Phenyl-Hexyl длиной 250 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная сорбентом зернением 5 мкм, или аналогичная; скорость потока элюента 0,7 мл/мин, температура колонки 25°С; время хроматографирования 30 мин. Количественное содержание рибофлавина мононуклеотида определяли спектрофотометрическим методом в кювете с толщиной слоя 1 см в максимуме поглощения при длине волны 445±2 нм.The quantitative content of dimeglumine succinate, nicotinamide, inosine and impurities before and after sterilization was determined by HPLC under the following conditions: spectrophotometric detector, wavelength 254 nm, refractometric detector, chromatographic column Phenomenex Luna Phenyl-Hexyl 250 mm long with an inner diameter of 4.6 mm, filled with a sorbent with a grain size of 5 microns, or similar; flow rate of eluent 0.7 ml / min; column temperature 25 ° C; chromatography time 30 minutes The quantitative content of riboflavin mononucleotide was determined spectrophotometrically in a cuvette with a layer thickness of 1 cm at the maximum absorption at a wavelength of 445 ± 2 nm.

Условия проведения термической стерилизации образцов композиции считались приемлемыми для безопасного лекарственного препарата для внутривенного введения, если после процесса термической стерилизации концентрации активных компонентов составляли не менее 95,0% от исходного значения, а содержание неидентифицированных примесей не превышало 2,0%.The conditions for thermal sterilization of the samples of the composition were considered acceptable for a safe drug for intravenous administration, if after the thermal sterilization process the concentrations of active components were not less than 95.0% of the initial value, and the content of unidentified impurities did not exceed 2.0%.

Результаты анализа композиции, полученной по примеру 5 и подвергнутой термической стерилизации в различных режимах, представлены в таблице 3, где показано, что она не выдерживает стандартный режим термической стерилизации (121±1°С, 8 мин) - происходит снижение концентраций активных компонентов инозина, никотинамида с образованием продуктов деградации никотиновой кислоты и гипоксантина соответственно, кроме того происходит существенное снижение концентрации рибофлавина мононуклеотида натрия (на 7,9%) по отношению к его исходному содержанию и образование неидентифицированных примесей более 2,0%. Режимы 110±1°С и 100±1°С также не обеспечивают приемлемый уровень неидентифицированных примесей в растворе, 3,5 и 2,2 соответственно.The results of the analysis of the composition obtained in example 5 and subjected to thermal sterilization in various modes are presented in table 3, where it is shown that it does not withstand the standard thermal sterilization mode (121 ± 1 ° C, 8 min) - the concentrations of the active inosine components decrease, nicotinamide with the formation of degradation products of nicotinic acid and hypoxanthine, respectively, in addition, there is a significant decrease in the concentration of riboflavin sodium mononucleotide (by 7.9%) in relation to its initial content and the formation of an unidentified impurity greater than 2.0%. The modes 110 ± 1 ° С and 100 ± 1 ° С also do not provide an acceptable level of unidentified impurities in the solution, 3.5 and 2.2, respectively.

Figure 00000006
Figure 00000006

Таким образом, композиция, полученная по примеру 5, представляет собой водный раствор химически активных, термолабильных и подверженных гидролизу компонентов.Thus, the composition obtained in example 5 is an aqueous solution of chemically active, thermolabile and hydrolyzable components.

Для получения стабильных растворов необходимо устранить факторы, способствующие деструкции лекарственных веществ, что достигается путем применения вспомогательных веществ - стабилизаторов, а также использования комплекса технологических приемов в процессе приготовления лекарственных форм.To obtain stable solutions, it is necessary to eliminate the factors contributing to the destruction of medicinal substances, which is achieved through the use of auxiliary substances - stabilizers, as well as the use of a set of technological methods in the process of preparing dosage forms.

Стабилизаторы должны быть безопасными как в чистом виде, так и в сочетании с компонентами лекарственного препарата (фармакологическая индифферентность), разрешены к применению в медицинской практике, эффективными в применяемых концентрациях (выполнять свое функциональное назначение), химически чистыми, коммерчески доступными.Stabilizers must be safe both in pure form and in combination with the components of the drug (pharmacological indifference), approved for use in medical practice, effective in applied concentrations (to fulfill its functional purpose), chemically pure, and commercially available.

Для стабилизации композиции авторы предлагают использовать янтарную кислоту, которая соответствует требованиям, предъявляемым к стабилизаторам для лекарственных препаратов для парентерального введения.To stabilize the composition, the authors propose the use of succinic acid, which meets the requirements for stabilizers for drugs for parenteral administration.

Результаты изучения влияния количества янтарной кислоты на значение рН раствора и стабильность композиций, полученных по примерам 6-21, представлены в таблице 4.The results of the study of the effect of the amount of succinic acid on the pH of the solution and the stability of the compositions obtained in examples 6-21 are presented in table 4.

Пример 6. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 38,76 кг димеглюмина сукцината, 1,8 кг инозина, 0,9 кг никотинамида, 0,18 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,010 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=7,0 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, затем фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3876 мг димеглюмина сукцината (38,76 масс. %), инозина 180 мг (1,8 масс. %), никотинамида 90 мг (0,9 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 18 мг (0,18 масс. %), 1,0 мг янтарной кислоты (0,01 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 6. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 38.76 kg of dimeglumine succinate, 1.8 kg of inosine, 0.9 kg of nicotinamide, 0.18 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.010 kg of succinic acid is added until a solution with a pH of 7.0 is obtained and the volume of the solution is adjusted to 100 L with water for injection, then it is filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 3876 mg of dimeglumine succinate (38.76 wt.%), Inosine 180 mg (1.8 wt.%), Nicotinamide 90 mg (0.9 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 18 mg (0.18 wt. .%), 1.0 mg of succinic acid (0.01 wt.%), Water for injection up to 100.0 mass. %

Пример 7. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 47,37 кг димеглюмина сукцината, 2,2 кг инозина, 1,1 кг никотинамида, 0,22 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,016 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=7,0 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 4737 мг меглюмина (47,37 масс. %), инозина 220 мг (2,2 масс. %), никотинамида 110 мг (1,1 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 22 мг (0,22 масс. %), 1,6 мг янтарной кислоты (0,016 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 7. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l, load 50.0 l of water for injection, 47.37 kg of dimeglumine succinate, 2.2 kg of inosine, 1.1 kg of nicotinamide, 0.22 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.016 kg of succinic acid is added until a solution with pH = 7.0 is obtained and the solution volume is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 4737 mg of meglumine (47.37 wt.%), Inosine 220 mg (2.2 wt.%), Nicotinamide 110 mg (1.1 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 22 mg (0.22 wt. %), 1.6 mg of succinic acid (0.016 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 8. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 38,76 кг димеглюмина сукцината, 1,8 кг инозина, 0,9 кг никотинамида, 0,18 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,031 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,8 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3876 мг димеглюмина сукцината (38,76 масс. %), инозина 180 мг (1,8 масс. %), никотинамида 90 мг (0,9 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 18 мг (0,18 масс. %), 3,1 мг янтарной кислоты (0,031 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 8. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 38.76 kg of dimeglumine succinate, 1.8 kg of inosine, 0.9 kg of nicotinamide, 0.18 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.031 kg of succinic acid is added until a solution with a pH of 6.8 is obtained and the volume of the solution is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 3876 mg of dimeglumine succinate (38.76 wt.%), Inosine 180 mg (1.8 wt.%), Nicotinamide 90 mg (0.9 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 18 mg (0.18 wt. .%), 3.1 mg of succinic acid (0.031 wt.%), Water for injection up to 100.0 mass. %

Пример 9. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 47,37 кг димеглюмина сукцината, 2,2 кг инозина, 1,1 кг никотинамида, 0,22 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,042 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,8 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 4737 мг димеглюмина сукцината (47,37 масс. %), инозина 220 мг (2,2 масс. %), никотинамида 110 мг (1,1 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 22 мг (0,22 масс. %), 4,2 мг янтарной кислоты (0,042 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 9. In a tank apparatus with a stirrer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 47.37 kg of dimeglumine succinate, 2.2 kg of inosine, 1.1 kg of nicotinamide, 0.22 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.042 kg of succinic acid is added until a solution with a pH of 6.8 is obtained and the volume of the solution is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 4737 mg of dimeglumine succinate (47.37 wt.%), Inosine 220 mg (2.2 wt.%), Nicotinamide 110 mg (1.1 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 22 mg (0.22 wt. .%), 4.2 mg of succinic acid (0.042 wt.%), Water for injection up to 100.0 mass. %

Пример 10. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 38,76 кг димеглюмина сукцината, 1,8 кг инозина, 0,9 кг никотинамида, 0,18 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,095 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,6 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 38,76 мг димеглюмина сукцината (38,76 масс. %), инозина 180 мг (1,8 масс. %), никотинамида 90 мг (0,9 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 18 мг (0,18 масс. %), 9,5 мг янтарной кислоты (0,095 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 10. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 38.76 kg of dimeglumine succinate, 1.8 kg of inosine, 0.9 kg of nicotinamide, 0.18 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.095 kg of succinic acid is added until a solution with a pH of 6.6 is obtained and the solution volume is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 38.76 mg of dimeglumine succinate (38.76 wt.%), Inosine 180 mg (1.8 wt.%), Nicotinamide 90 mg (0.9 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 18 mg (0, 18 wt.%), 9.5 mg of succinic acid (0.095 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 11. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 47,37 кг димеглюмина сукцината, 2,2 кг инозина, 1,1 кг никотинамида, 0,22 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,120 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,6 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 4737 мг димеглюмина сукцината (47,37 масс. %), инозина 220 мг (2,2 масс. %), никотинамида 110 мг (1,1 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 22 мг (0,22 масс. %), 12,0 мг янтарной кислоты (0,12 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 11. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 47.37 kg of dimeglumine succinate, 2.2 kg of inosine, 1.1 kg of nicotinamide, 0.22 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.120 kg of succinic acid is added until a solution with pH = 6.6 is obtained and the volume of the solution is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 4737 mg of dimeglumine succinate (47.37 wt.%), Inosine 220 mg (2.2 wt.%), Nicotinamide 110 mg (1.1 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 22 mg (0.22 wt. .%), 12.0 mg of succinic acid (0.12 wt.%), Water for injection up to 100.0 mass. %

Пример 12. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 38,76 кг димеглюмина сукцината, 1,8 кг инозина, 0,9 кг никотинамида, 0,18 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,184 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,4 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3876 мг димеглюмина сукцината (38,76 масс. %), инозина 180 мг (1,8 масс. %), никотинамида 90 мг (0,9 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 18 мг (0,18 масс. %), 18,4 мг янтарной кислоты (0,184 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 12. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 38.76 kg of dimeglumine succinate, 1.8 kg of inosine, 0.9 kg of nicotinamide, 0.18 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.184 kg of succinic acid is added until a solution with a pH of 6.4 is obtained and the solution volume is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 3876 mg of dimeglumine succinate (38.76 wt.%), Inosine 180 mg (1.8 wt.%), Nicotinamide 90 mg (0.9 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 18 mg (0.18 wt. .%), 18.4 mg of succinic acid (0.184 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 13. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 47,37 кг димеглюмина сукцината, 2,2 кг инозина, 1,1 кг никотинамида, 0,22 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,226 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,4 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 4737 мг димеглюмина сукцината (47,37 масс. %),инозина 220 мг (2,2 масс. %), никотинамида 110 мг (1,1 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 22 мг (0,22 масс. %), 22,6 мг янтарной кислоты (0,226 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 13. In a tank apparatus with a stirrer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 47.37 kg of dimeglumine succinate, 2.2 kg of inosine, 1.1 kg of nicotinamide, 0.22 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.226 kg of succinic acid is added until a solution with a pH of 6.4 is obtained and the volume of the solution is adjusted to 100 l with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 4737 mg of dimeglumine succinate (47.37 wt.%), Inosine 220 mg (2.2 wt.%), Nicotinamide 110 mg (1.1 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 22 mg (0.22 wt. .%), 22.6 mg of succinic acid (0.226 wt.%), Water for injection up to 100.0 mass. %

Пример 14. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 38,76 кг димеглюмина сукцината, 1,8 кг инозина, 0,9 кг никотинамида, 0,18 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,311 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,2 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3876 мг димеглюмина сукцината (38,76 масс. %), инозина 180 мг (1,8 масс. %), никотинамида 90 мг (0,9 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 18 мг (0,18 масс. %), 31,1 мг янтарной кислоты (0,311 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 14. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 38.76 kg of dimeglumine succinate, 1.8 kg of inosine, 0.9 kg of nicotinamide, 0.18 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.311 kg of succinic acid is introduced until a solution with pH = 6.2 is obtained and the solution volume is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 3876 mg of dimeglumine succinate (38.76 wt.%), Inosine 180 mg (1.8 wt.%), Nicotinamide 90 mg (0.9 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 18 mg (0.18 wt. .%), 31.1 mg of succinic acid (0.311 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 15. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 47,37 кг димеглюмина сукцината, 2,2 кг инозина, 1,1 кг никотинамида, 0,22 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,383 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,2 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 4737 мг димеглюмина сукцината (47,37 масс. %), инозина 220 мг (2,2 масс. %), никотинамида 110 мг (1,1 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 22 мг (0,22 масс. %), 38,3 мг янтарной кислоты (0,383 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 15. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 47.37 kg of dimeglumine succinate, 2.2 kg of inosine, 1.1 kg of nicotinamide, 0.22 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.383 kg of succinic acid is added until a solution with pH = 6.2 is obtained and the volume of the solution is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 4737 mg of dimeglumine succinate (47.37 wt.%), Inosine 220 mg (2.2 wt.%), Nicotinamide 110 mg (1.1 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 22 mg (0.22 wt. %), 38.3 mg of succinic acid (0.383 mass%), water for injection up to 100.0 mass. %

Пример 16. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 38,76 кг димеглюмина сукцината, 1,8 кг инозина, 0,9 кг никотинамида, 0,18 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,504 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,0 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3876 мг димеглюмина сукцината (38,76 масс. %), инозина 180 мг (1,8 масс. %), никотинамида 90 мг (0,9 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 18 мг (0,18 масс. %), 50,4 мг янтарной кислоты (0,504 масс. %),воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 16. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l, load 50.0 l of water for injection, 38.76 kg of dimeglumine succinate, 1.8 kg of inosine, 0.9 kg of nicotinamide, 0.18 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.504 kg of succinic acid is added until a solution with pH = 6.0 is obtained and the volume of the solution is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 3876 mg of dimeglumine succinate (38.76 wt.%), Inosine 180 mg (1.8 wt.%), Nicotinamide 90 mg (0.9 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 18 mg (0.18 wt. .%), 50.4 mg of succinic acid (0.504 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 17. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 47,37 кг димеглюмина сукцината, 2,2 кг инозина, 1,1 кг никотинамида, 0,22 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,620 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,0 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 4737 мг димеглюмина сукцината (47,37 масс. %), инозина 220 мг (2,2 масс. %), никотинамида 110 мг (1,1 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 22 мг (0,22 масс. %), 62,0 мг янтарной кислоты (0,62 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 17. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 47.37 kg of dimeglumine succinate, 2.2 kg of inosine, 1.1 kg of nicotinamide, 0.22 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.620 kg of succinic acid is added until a solution with a pH of 6.0 is obtained and the volume of the solution is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 4737 mg of dimeglumine succinate (47.37 wt.%), Inosine 220 mg (2.2 wt.%), Nicotinamide 110 mg (1.1 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 22 mg (0.22 wt. .%), 62.0 mg of succinic acid (0.62 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 18. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 38,76 кг димеглюмина сукцината, 1,8 кг инозина, 0,9 кг никотинамида, 0,18 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,795 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=5,8 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3876 мг димеглюмина сукцината (38,76 масс. %), инозина 180 мг (1,8 масс. %), никотинамида 90 мг (0,9 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 18 мг (0,18 масс. %), 79,5 мг янтарной кислоты (0,795 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 18. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 38.76 kg of dimeglumine succinate, 1.8 kg of inosine, 0.9 kg of nicotinamide, 0.18 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.795 kg of succinic acid is added until a solution with pH = 5.8 is obtained and the solution volume is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 3876 mg of dimeglumine succinate (38.76 wt.%), Inosine 180 mg (1.8 wt.%), Nicotinamide 90 mg (0.9 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 18 mg (0.18 wt. .%), 79.5 mg of succinic acid (0.795 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 19. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 47,37 кг димеглюмина сукцината, 2,2 кг инозина, 1,1 кг никотинамида, 0,22 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,971 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=5,8 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 4737 мг димеглюмина сукцината (47,37 масс. %),инозина 220 мг (2,2 масс. %), никотинамида 110 мг (1,1 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 22 мг (0,22 масс. %), 97,1 мг янтарной кислоты (0,97 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 19. In a capacitive apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 47.37 kg of dimeglumine succinate, 2.2 kg of inosine, 1.1 kg of nicotinamide, 0.22 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.971 kg of succinic acid is added until a solution with pH = 5.8 is obtained and the solution volume is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 4737 mg of dimeglumine succinate (47.37 wt.%), Inosine 220 mg (2.2 wt.%), Nicotinamide 110 mg (1.1 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 22 mg (0.22 wt. .%), 97.1 mg of succinic acid (0.97 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 20. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 38,76 кг димеглюмина сукцината, 1,8 кг инозина, 0,9 кг никотинамида, 0,18 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 1,231 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=5,6 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3876 мг димеглюмина сукцината (38,76 масс. %), инозина 180 мг (1,8 масс. %), никотинамида 90 мг (0,9 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 18 мг (0,18 масс. %), 123,1 мг янтарной кислоты (1,231 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 20. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 38.76 kg of dimeglumine succinate, 1.8 kg of inosine, 0.9 kg of nicotinamide, 0.18 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 1.231 kg of succinic acid are added until a solution with pH = 5.6 is obtained and the solution volume is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 3876 mg of dimeglumine succinate (38.76 wt.%), Inosine 180 mg (1.8 wt.%), Nicotinamide 90 mg (0.9 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 18 mg (0.18 wt. %), 123.1 mg of succinic acid (1.231 wt.%), Water for injection up to 100.0 mass. %

Пример 21. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 47,37 кг димеглюмина сукцината, 2,2 кг инозина, 1,1 кг никотинамида, 0,22 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 1,498 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=5,6 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 4737 мг димеглюмина сукцината (47,37 масс. %),инозина 220 мг (2,2 масс. %), никотинамида 110 мг (1,1 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 22 мг (0,22 масс. %), 149,8 мг янтарной кислоты (1,498 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 21. In a tank apparatus with a stirrer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 47.37 kg of dimeglumine succinate, 2.2 kg of inosine, 1.1 kg of nicotinamide, 0.22 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 1.498 kg of succinic acid is added until a solution with pH = 5.6 is obtained and the solution volume is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 4737 mg of dimeglumine succinate (47.37 wt.%), Inosine 220 mg (2.2 wt.%), Nicotinamide 110 mg (1.1 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 22 mg (0.22 wt. %), 149.8 mg of succinic acid (1.498 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Figure 00000007
Figure 00000007

Проведенное исследование показало, что для получения стабильной композиции интервал рН должен составлять от 6,0 до 7,0, при котором не наблюдается существенного снижения количественного содержания активных компонентов и превышения неидентифицированных примесей более 2,0 масс. %. При этом содержание стабилизатора - янтарной кислоты составляет 0,01-0,62 масс. %. Если содержание янтарной кислоты в растворе более 0,62% при значениях рН=5,8 и ниже, происходит частичное разрушение активных компонентов с образованием неидентифицированных примесей свыше 2,0 масс. %.The study showed that to obtain a stable composition, the pH range should be from 6.0 to 7.0, at which there is no significant decrease in the quantitative content of active components and the excess of unidentified impurities of more than 2.0 mass. % The content of the stabilizer is succinic acid is 0.01-0.62 mass. % If the succinic acid content in the solution is more than 0.62% at pH values of 5.8 and lower, partial destruction of the active components occurs with the formation of unidentified impurities in excess of 2.0 mass. %

Для обеспечения гарантированной стерильности композиции со стабилизатором янтарной кислотой проведено исследование влияния режимов стерилизации препарата водяным паром под давлением на стабильность при хранении. Для этого использовали композиции по примерам 22-27 с различным содержанием янтарной кислоты в диапазоне рН от 7,0 до 6,0.To ensure guaranteed sterility of the composition with a stabilizer of succinic acid, a study was made of the influence of sterilization regimen of the drug with steam under pressure on storage stability. For this, the compositions of Examples 22-27 were used with different succinic acid contents in the pH range from 7.0 to 6.0.

Пример 22. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 43,0 кг димеглюмина сукцината, 1,0 кг никотинамида, 2,0 кг инозина, 0,2 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,013 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=7,0 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3300,0 мг димеглюмина сукцината (33,0 масс. %),инозина 200 мг (2,0 масс. %), никотинамида 100 мг (1,0%), рибофлавина мононуклеотида натрия 20 мг (0,2 масс. %), 1,3 мг янтарной кислоты (0,013 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 22. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l, load 50.0 l of water for injection, 43.0 kg of dimeglumine succinate, 1.0 kg of nicotinamide, 2.0 kg of inosine, 0.2 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.013 kg of succinic acid is added until a solution with pH = 7.0 is obtained and the volume of the solution is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 3300.0 mg of dimeglumine succinate (33.0 wt.%), Inosine 200 mg (2.0 wt.%), Nicotinamide 100 mg (1.0%), riboflavin sodium mononucleotide 20 mg (0.2 wt. .%), 1.3 mg of succinic acid (0.013 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 23. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 43,0 кг димеглюмина сукцината, 1,0 кг никотинамида, 2,0 кг инозина, 0,2 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,035 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,8 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3300,0 мг димеглюмина сукцината (33,0 масс. %), инозина 200 мг (2,0 масс. %), никотинамида 100 мг (1,0%), рибофлавина мононуклеотида натрия 20 мг (0,2 масс. %), 3,5 мг янтарной кислоты (0,035 масс. %), воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 23. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 liters, 50.0 liters of water for injection, 43.0 kg of dimeglumine succinate, 1.0 kg of nicotinamide, 2.0 kg of inosine, 0.2 kg of riboflavin mononucleotide are completely dissolved, 0.035 kg of succinic acid is added until a solution with pH = 6.8 is obtained and the solution volume is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 3300.0 mg of dimeglumine succinate (33.0 wt.%), Inosine 200 mg (2.0 wt.%), Nicotinamide 100 mg (1.0%), riboflavin sodium mononucleotide 20 mg (0.2 wt. .%), 3.5 mg of succinic acid (0.035 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 24. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 43,0 кг димеглюмина сукцината, 1,0 кг никотинамида, 2,0 кг инозина, 0,2 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,106 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,6 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3300,0 мг димеглюмина сукцината (33,0 масс. %), инозина 200 мг (2,0 масс. %), никотинамида 100 мг (1,0%), рибофлавина мононуклеотида натрия 20 мг (0,2 масс. %), 10,6 мг янтарной кислоты (0,106 масс. %),воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 24. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 liters, 50.0 liters of water for injection, 43.0 kg of dimeglumine succinate, 1.0 kg of nicotinamide, 2.0 kg of inosine, 0.2 kg of riboflavin mononucleotide are completely dissolved, 0.106 kg of succinic acid is introduced to obtain a solution with a pH value of 6.6 and the solution volume is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 3300.0 mg of dimeglumine succinate (33.0 wt.%), Inosine 200 mg (2.0 wt.%), Nicotinamide 100 mg (1.0%), riboflavin sodium mononucleotide 20 mg (0.2 wt. .%), 10.6 mg of succinic acid (0.106 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 25. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 43,0 кг димеглюмина сукцината, 1,0 кг никотинамида, 2,0 кг инозина, 0,2 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,204 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,4 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3300,0 мг димеглюмина сукцината (33,0 масс. %), инозина 200 мг (2,0 масс. %), никотинамида 100 мг (1,0 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 20 мг (0,2 масс. %), 20,4 мг янтарной кислоты (0,204 масс. %),воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 25. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 43.0 kg of dimeglumine succinate, 1.0 kg of nicotinamide, 2.0 kg of inosine, 0.2 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, inject 0.204 kg of succinic acid to obtain a solution with a pH of 6.4 and adjust the volume of the solution with water for injection to 100 l, filter through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, pour it into 10 ml ampoules and seal it. Each ampoule contains 3300.0 mg of dimeglumine succinate (33.0 wt.%), Inosine 200 mg (2.0 wt.%), Nicotinamide 100 mg (1.0 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 20 mg (0, 2 wt.%), 20.4 mg of succinic acid (0.204 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 26. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 43,0 кг димеглюмина сукцината, 1,0 кг никотинамида, 2,0 кг инозина, 0,2 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,346 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=6,2 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3300,0 мг димеглюмина сукцината (33,0 масс. %), инозина 200 мг (2,0 масс. %), никотинамида 100 мг (1,0 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 20 мг (0,2 масс. %), 34,6 мг янтарной кислоты (0,346 масс. %),воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 26. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 43.0 kg of dimeglumine succinate, 1.0 kg of nicotinamide, 2.0 kg of inosine, 0.2 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.346 kg of succinic acid is added until a solution with a pH of 6.2 is obtained and the solution volume is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 3300.0 mg of dimeglumine succinate (33.0 wt.%), Inosine 200 mg (2.0 wt.%), Nicotinamide 100 mg (1.0 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 20 mg (0, 2 wt.%), 34.6 mg of succinic acid (0.346 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Пример 27. В емкостной аппарат с мешалкой вместимостью 100 л загружают 50,0 л воды для инъекций, 43,0 кг димеглюмина сукцината, 1,0 кг никотинамида, 2,0 кг инозина, 0,2 кг рибофлавина мононуклеотида до полного растворения компонентов, вводят 0,560 кг янтарной кислоты до получения раствора с показателем рН=б,0 и доводят объем раствора водой для инъекций до 100 л, фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мкм, разливают в ампулы объемом 10 мл и запаивают. Каждая ампула содержит 3300,0 мг димеглюмина сукцината (33,0 масс. %), инозина 200 мг (2,0 масс. %), никотинамида 100 мг (1,0 масс. %), рибофлавина мононуклеотида натрия 20 мг (0,2 масс. %), 56,0 мг янтарной кислоты (0,56 масс. %),воду для инъекций до 100,0 масс. %.Example 27. In a tank apparatus with a mixer with a capacity of 100 l load 50.0 l of water for injection, 43.0 kg of dimeglumine succinate, 1.0 kg of nicotinamide, 2.0 kg of inosine, 0.2 kg of riboflavin mononucleotide until the components are completely dissolved, 0.560 kg of succinic acid is injected to obtain a solution with pH = b, 0, and the solution volume is adjusted to 100 L with water for injection, filtered through a sterilizing filter with a pore diameter of 0.22 μm, poured into 10 ml ampoules and sealed. Each ampoule contains 3300.0 mg of dimeglumine succinate (33.0 wt.%), Inosine 200 mg (2.0 wt.%), Nicotinamide 100 mg (1.0 wt.%), Riboflavin sodium mononucleotide 20 mg (0, 2 wt.%), 56.0 mg of succinic acid (0.56 wt.%), Water for injection up to 100.0 wt. %

Ампулы с композициями, полученными по примерам 22-27 были разделены на 4 части и подвергнуты термической стерилизации водяным паром в следующих режимах: стандартном фармакопейном 121±1°С 8 минут и альтернативных 116±1°С, 110±1°С и 100±1°С 8 минут. Для исследования стабильности полученных образцов препарата их выдерживали в климатическом оборудовании при температуре 25°С течение 2-х лет. Количественное содержание димеглюмина сукцината, никотинамида, инозина и примесей определяли методом ВЭЖХ. Количественное содержание рибофлавина мононуклеотида определяли спектрофотометрическим методом. Результаты представлены в таблице 5.Ampoules with the compositions obtained according to examples 22-27 were divided into 4 parts and subjected to thermal sterilization with steam in the following modes: standard pharmacopoeial 121 ± 1 ° C for 8 minutes and alternative 116 ± 1 ° C, 110 ± 1 ° C and 100 ± 1 ° C for 8 minutes. To study the stability of the obtained samples of the drug, they were kept in climatic equipment at a temperature of 25 ° C for 2 years. The quantitative content of dimeglumine succinate, nicotinamide, inosine and impurities was determined by HPLC. The quantitative content of riboflavin mononucleotide was determined spectrophotometrically. The results are presented in table 5.

Figure 00000008
Figure 00000008

- композиция стабильна- composition is stable

+ композиция нестабильна+ composition is unstable

Исследования показали, что композиции, полученные по примерам 22-27, не выдерживают стандартный режим термической стерилизации (121±1°С, 8 мин) - происходит снижение содержания рибофлавина мононуклеотида натрия более чем на 5% по отношению к исходному содержанию. Наблюдается рост образования продуктов деградации никотинамида и инозина - никотиновой кислоты и гипоксантина соответственно и неидентифицированных примесей более 2,0 масс. %. Режимы 110±1°С и 100±1°С, 8 минут обеспечивает сохранение активных компонентов в пределах спецификации и приемлемый уровень примесей в растворе во всем диапазоне рН от 7,0 до 6,0. Режим стерилизации 116±1°С обеспечивает стабильность только композиций 23-25 с рН от 6,8-6,4. Композиции, полученные по примерам 22, 26, 27 не выдерживают этот режим стерилизации ввиду существенного снижения количественного содержания рибофлавина мононуклеотида.Studies have shown that the compositions obtained in examples 22-27 do not withstand the standard regime of thermal sterilization (121 ± 1 ° C, 8 min) - there is a decrease in the content of riboflavin sodium mononucleotide by more than 5% with respect to the initial content. There is an increase in the formation of degradation products of nicotinamide and inosine — nicotinic acid and hypoxanthine, respectively, and unidentified impurities of more than 2.0 masses. % The modes 110 ± 1 ° С and 100 ± 1 ° С, 8 minutes ensure the preservation of active components within the specification and an acceptable level of impurities in the solution over the entire pH range from 7.0 to 6.0. The sterilization mode 116 ± 1 ° C provides stability only compositions 23-25 with a pH of 6.8-6.4. The compositions obtained in examples 22, 26, 27 do not withstand this sterilization mode due to a significant decrease in the quantitative content of riboflavin mononucleotide.

Для сравнительного изучения биологической активности и безопасности композиций использовали состав, полученный по примеру, приведенному в описании патента ЕА 001099 (прототип) и заявленную лекарственную композицию, полученную по примеру 24.For a comparative study of the biological activity and safety of the compositions used the composition obtained according to the example described in the description of patent EA 001099 (prototype) and the claimed medicinal composition obtained according to example 24.

Опыт 1. Изучение острой токсичности заявленной композиции в сравнении с композицией по прототипу.Experience 1. The study of acute toxicity of the claimed composition in comparison with the composition of the prototype.

Учитывая, что значение острой токсичности является одним из ключевых клинико-фармакологических показателей лекарственного препарата, используемого при лечении неотложных состояний, необходимо прежде всего оценить острую токсичность предложенной композиции. Изучение острой токсичности проводили в соответствии с рекомендациями [Guide to experimental (preclinical) studying of new pharmacological substances. Moscow, ZAOIIA Remedium Publ., 2004. 398 p. (InRussian).]Given that the importance of acute toxicity is one of the key clinical and pharmacological parameters of the drug used in the treatment of emergency conditions, it is necessary first of all to assess the acute toxicity of the proposed composition. The study of acute toxicity was carried out in accordance with the recommendations of [Guide to experimental (preclinical) studying of new pharmacological substances. Moscow, ZAOIIA Remedium Publ., 2004.398 p. (InRussian).]

Опыт проводили на самцах нелинейных крыс WISTAR средним весом 160-190 г. Всего было сформировано 10 парных групп по 12 животных. Композицию и прототип вводили болюсно внутривенно нарастающими дозами с определением ключевых параметров острой токсичности. По методу Литчфилда и Уилкоксона определялась доза ЛД50, вызывающая гибель 50 масс. % животных и расчетные параметры LD16 и LD84. Сравнительные данные острой токсичности заявляемой композиции и прототипа представлены в таблице 6.The experiment was carried out on male non-linear WISTAR rats with an average weight of 160-190 g. In total, 10 paired groups of 12 animals were formed. The composition and prototype were administered bolus intravenously in increasing doses to determine the key parameters of acute toxicity. According to the method of Litchfield and Wilcoxon, the dose of LD 50 was determined, causing the death of 50 mass. % of animals and design parameters LD 16 and LD 84 . Comparative data on the acute toxicity of the claimed composition and prototype are presented in table 6.

Figure 00000009
Figure 00000009

Примечание: а - достоверно при р≤0.05Note: a - significantly at p≤0.05

Проведенные исследования показали, что при болюсном внутривенном введении значение ключевого параметра токсичности LD50 меньше на 18,27%, у заявленной композиции, чем у состава по прототипу. Полученные расчетные значения параметров острой токсичности при болюсном внутривенном введении LD84 и LD16 также подтверждают меньшую токсичность LD100 композиции в сравнении с прототипом.Studies have shown that with a bolus intravenous administration, the value of the key toxicity parameter LD 50 is lower by 18.27% in the claimed composition than in the composition of the prototype. The calculated values of the parameters of acute toxicity during bolus intravenous administration of LD 84 and LD 16 also confirm the lower toxicity of the LD 100 composition in comparison with the prototype.

Опыт 2. Исследование цитопротекторного действия заявленной композиции при ишемии в культуре фибробластов человека.Experience 2. The study of the cytoprotective effects of the claimed composition for ischemia in a culture of human fibroblasts.

Для сравнительного исследования цитопротекторного действия заявленной композиции по сравнению с составом прототипа и контрольной группой была использована модифицированная модель ишемии реперфузии в культуре клеток фибробластов.For a comparative study of the cytoprotective effect of the claimed composition compared with the composition of the prototype and the control group, a modified model of reperfusion ischemia in a fibroblast cell culture was used.

Фибробласты, полученные из десны здорового донора стандартным методом (Патент РФ 2320720) культивировали общепринятым методом в пластиковых флаконах Карреля (SIGMA, USA) в полноценной ростовой питательной среде MEM (фирмы Биолот, РФ), содержащей 12% сыворотки эмбрионов телят (GIBCO, USA), 100 ед./мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина (GIBCO, USA) и 0,3 мг/мл L-глутамина (Биолот, РФ). Питательную среду меняли каждые семь дней. Для исследования на модели ишемии-реперфузии применяли только клетки после 6-7 пассажей.Fibroblasts obtained from the gums of a healthy donor by the standard method (RF Patent 2320720) were cultured by the generally accepted method in Carrel plastic bottles (SIGMA, USA) in a complete growth medium MEM (Biolot, RF) containing 12% of calf embryo serum (GIBCO, USA) , 100 units / ml penicillin, 100 μg / ml streptomycin (GIBCO, USA) and 0.3 mg / ml L-glutamine (Biolot, RF). Culture medium was changed every seven days. For research on a model of ischemia-reperfusion, only cells after 6-7 passages were used.

Было сформировано две группы клеток фибробластов по 60 пластиковых флаконов Карреля. Выращенные клетки дважды отмывали от среды культивирования MEM фосфатно-солевым буфером (PBS) при 37°С и помещали в ростовую среду DMEM (GIBCO, USA), предварительно барботированную азотом для удаления остатков растворенного кислорода. Для моделирования ишемии культуру фибробластов подвергали часовому (группа А - 60 флаконов) или трехчасовому культивированию (группа В - 60 флаконов) при 37°С путем замещения кислородной атмосферы азотом. После окончания культивирования в условиях ишемии для оценки цитопротекторного эффекта предложенной композиции в сравнении с прототипом, во флаконы Карреля групп А и В соответственно добавляли 2,0 мкг/мл (первая подгруппа, 18 флаконов) заявляемой композиции или 2,0 мкл/мл (вторая подгруппа, 18 флаконов) прототипа, а третью подгруппу (24 флакона) продолжали культивировать без добавления цитопротекторов и использовали в качестве контроля. Образцы фибробластов всех трех групп для моделирования процесса реперфузии далее подвергали процессу реоксигенации в нормоксических условиях в течение 24 часов. Далее полученную культуру фибробластов дважды отмывали от среды культивирования MEM фосфатно-солевым буфером (PBS) при 37°С и далее исследовали витальность клеток после ишемии-реперфузии. Витальность образцов культивированных фибробластов во всех исследуемых группах после суточной реперфузии фиксировали, добавляя к клеточной суспензии культивированных фибробластов 0,5% раствор трипанового синего с объемным коэффициентом разведения 1:1. Далее одну каплю тщательно перемешанной суспензии клеток помещали в камеру Горяева и выполняли визуальный подсчет количества окрашенных и неокрашенных фибробластов используя пять больших квадратов камеры.Two groups of fibroblast cells of 60 plastic Carrel vials were formed. The grown cells were washed twice from the MEM culture medium with phosphate-buffered saline (PBS) at 37 ° C and placed in DMEM growth medium (GIBCO, USA), previously sparged with nitrogen to remove residual oxygen. To simulate ischemia, the fibroblast culture was subjected to sentinel (group A - 60 bottles) or three-hour cultivation (group B - 60 bottles) at 37 ° C by replacing the oxygen atmosphere with nitrogen. After cultivation under ischemic conditions, to evaluate the cytoprotective effect of the proposed composition in comparison with the prototype, 2.0 μg / ml (first subgroup, 18 bottles) of the claimed composition or 2.0 μl / ml (second subgroup, 18 vials) of the prototype, and the third subgroup (24 vials) was continued to cultivate without the addition of cytoprotectors and was used as a control. Fibroblast samples of all three groups to simulate the reperfusion process were further subjected to reoxygenation under normoxic conditions for 24 hours. Next, the obtained fibroblast culture was washed twice from the MEM culture medium with phosphate-buffered saline (PBS) at 37 ° C, and then the vitality of the cells after ischemia-reperfusion was examined. The vitality of cultured fibroblast samples in all the studied groups after daily reperfusion was fixed by adding a 0.5% trypan blue solution with a dilution factor of 1: 1 to the cell suspension of cultured fibroblasts. Then, one drop of a thoroughly mixed cell suspension was placed in a Goryaev chamber and visual counts of the number of stained and unpainted fibroblasts were performed using five large squares of the chamber.

Для расчета витальности образцов использовали данные полученные отдельно для каждого большого квадрата камеры Горяева. Данные полученные для каждого квадранта считали как одно определение. Витальность клеток определяли по формуле для каждого образца, V=(1-(Q1:Q2))×100%, где V - витальность, Q1 - количество окрашенных трипановым синим фибробластов, Q2 - общее количество фибробластов. Результаты исследования витальности фибробластов при ишемии-реперфузии представлены в таблице 7.To calculate the vitality of the samples, we used data obtained separately for each large square of the Goryaev chamber. Data obtained for each quadrant was considered as one definition. Vitality of the cells was determined by the formula for each sample, V = (1- (Q1: Q2)) × 100%, where V is vitality, Q1 is the number of trypan blue-stained fibroblasts, Q2 is the total number of fibroblasts. The results of a study of the vitality of fibroblasts in ischemia-reperfusion are presented in table 7.

Figure 00000010
Figure 00000010

Примечание:Note:

а - разница достоверна по сравнению с контрольной группой a - the difference is significant compared with the control group

b - разница достоверна между прототипом и заявляемой композицийb - the difference is significant between the prototype and the claimed compositions

Проведенные исследования цитопротекторного действия заявленной композиции показали, что при шестидесятиминутной ишемии и композиция и прототип оказывают достоверное защитное действие, повышая выживаемость фибробластов на 8,58% и 3,06% соответственно по сравнению с контрольной группой. При более продолжительной ишемии в культуре фибробластов заявленная композиция показывает в два раза более выраженный защитный эффект по сравнению с прототипом, достоверно повышая выживаемость фибробластов на 66,7%, прототип - на 33,3%.Studies of the cytoprotective effect of the claimed composition showed that with sixty-minute ischemia, both the composition and the prototype have a reliable protective effect, increasing the survival of fibroblasts by 8.58% and 3.06%, respectively, compared with the control group. With more prolonged ischemia in a fibroblast culture, the claimed composition shows a twice as pronounced protective effect compared to the prototype, significantly increasing the survival of fibroblasts by 66.7%, the prototype by 33.3%.

Таким образом, лекарственная композиция цитопротекторного действия в виде водного раствора, содержащая в качестве активного компонента новое соединение димеглюмина сукцинат, обладает высокой биологической активностью и безопасностью. При этом способ получения композиции обеспечивает ее стабильность при хранении, снижение риска образования токсичных примесей и микробной контаминации.Thus, a cytoprotective drug composition in the form of an aqueous solution containing a new dimeglumine succinate compound as an active component has high biological activity and safety. Moreover, the method of obtaining the composition ensures its storage stability, reducing the risk of the formation of toxic impurities and microbial contamination.

Claims (3)

1. Лекарственная композиция цитопротекторного действия в виде водного раствора, содержащая инозин, никотинамид, рибофлавина мононуклеотид натрия, янтарную кислоту и биологически активное соединение, отличающаяся тем, что в качестве биологически активного соединения она содержит димеглюмина сукцинат формулы [HOCH2(CHOH)4CH2NH2CH3]+2[OOC(CH2)2COO]2-, при следующем соотношении компонентов, масс. %:1. A cytoprotective drug composition in the form of an aqueous solution containing inosine, nicotinamide, riboflavin sodium mononucleotide, succinic acid and a biologically active compound, characterized in that it contains dimeglumine succinate of the formula [HOCH2 (CHOH) 4CH2NH2CH3] +2 as a biologically active compound [OOC (CH2) 2COO] 2-, in the following ratio of components, mass. %: Димеглюмина сукцинатDimeglumine Succinate 38,76-47,3738.76-47.37 ИнозинInosine 1,80-2,201.80-2.20 НикотинамидNicotinamide 0,90-1,100.90-1.10 Рибофлавина мононуклеотид натрияRiboflavin Sodium Mononucleotide 0,18-0,220.18-0.22 Янтарная кислотаsuccinic acid 0,01-0,62 0.01-0.62 Вода для инъекцийWater for injections до 100up to 100
2. Способ получения лекарственной композиции по п. 1, заключающийся в растворении в воде для инъекций димеглюмина сукцината, инозина, никотинамида, рибофлавина мононуклеотида натрия, добавлении к полученному раствору янтарной кислоты до получения стабильного раствора со значением pH в диапазоне от 6,0 до 7,0 и стерилизующей фильтрацией, с последующим проведением термической стерилизации полученного раствора при температуре от 100 до 116°С.2. The method of obtaining a medicinal composition according to claim 1, which consists in dissolving in water for injection dimeglumine succinate, inosine, nicotinamide, riboflavin sodium mononucleotide, adding succinic acid to the resulting solution to obtain a stable solution with a pH in the range from 6.0 to 7 , 0 and sterilizing filtration, followed by thermal sterilization of the resulting solution at a temperature of from 100 to 116 ° C.
RU2017116038A 2017-05-04 2017-05-04 Drug composition of cytoprotective action and method for production thereof RU2651047C1 (en)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2017116038A RU2651047C1 (en) 2017-05-04 2017-05-04 Drug composition of cytoprotective action and method for production thereof
PCT/RU2018/000261 WO2018203774A1 (en) 2017-05-04 2018-04-24 Medicinal composition of cytoprotective effect and method for obtaining same

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2017116038A RU2651047C1 (en) 2017-05-04 2017-05-04 Drug composition of cytoprotective action and method for production thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2651047C1 true RU2651047C1 (en) 2018-04-18

Family

ID=61976736

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017116038A RU2651047C1 (en) 2017-05-04 2017-05-04 Drug composition of cytoprotective action and method for production thereof

Country Status (2)

Country Link
RU (1) RU2651047C1 (en)
WO (1) WO2018203774A1 (en)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999053920A1 (en) * 1998-04-22 1999-10-28 Klinge Pharma Gmbh Use of vitamin pp compounds
EA001099B1 (en) * 1999-06-10 2000-10-30 Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Технологическая Фармацевтическая Фирма "Полисан" Injecting medical preparation "citoflavin" possessing cito-pretecting effect
WO2015066382A1 (en) * 2013-10-30 2015-05-07 ChromaDex Inc. Nicotinamide riboside compositions for topical use in treating skin conditions
RU2629204C1 (en) * 2016-09-29 2017-08-25 Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Технологическая Фармацевтическая Фирма "Полисан" Method for obtaining of stabilized pharmaceutical composition as aqueous solution

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2096043C1 (en) * 1993-04-23 1997-11-20 Томчин Александр Биняминович Antihypoxic agent and method of its preparing
RU2327453C2 (en) * 2006-03-28 2008-06-27 Управление ветеринарии Курской области Composition applied for animals' infectious diseases prevention

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999053920A1 (en) * 1998-04-22 1999-10-28 Klinge Pharma Gmbh Use of vitamin pp compounds
EA001099B1 (en) * 1999-06-10 2000-10-30 Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Технологическая Фармацевтическая Фирма "Полисан" Injecting medical preparation "citoflavin" possessing cito-pretecting effect
WO2015066382A1 (en) * 2013-10-30 2015-05-07 ChromaDex Inc. Nicotinamide riboside compositions for topical use in treating skin conditions
RU2629204C1 (en) * 2016-09-29 2017-08-25 Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Технологическая Фармацевтическая Фирма "Полисан" Method for obtaining of stabilized pharmaceutical composition as aqueous solution

Also Published As

Publication number Publication date
WO2018203774A1 (en) 2018-11-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2148400C1 (en) Pharmaceutically stable preparation of oxalyplatinum
JP6159567B2 (en) Ready-made gemcitabine infusion solution
RU2380089C2 (en) Pharmaceutical composition for injections
US20250170151A1 (en) Low-sorbing glyburide kit, formulation and methods
EP2854765B1 (en) Pharmaceutical pemetrexed solution
US20250262227A1 (en) Low-sorbing glyburide formulation and methods
US20180028498A1 (en) A pharmaceutical composition for the parenteral administration of melatonin, and a process for its preparation
DE60215129T3 (en) ESMOLOL-CONTAINING PREPARATIONS
KR20020059637A (en) Formulation of Substituted Benzimidazoles
EA036258B1 (en) Stable formulation for parenteral administration of tapentadol
RU2651047C1 (en) Drug composition of cytoprotective action and method for production thereof
RU2271800C2 (en) NEW PREPARATIONS OF α-2,4-DISYLFOPHENYL-N-TERTIARY-BUTYLNITRONE
CN112402371B (en) Rudesiwei injection and preparation method thereof
EP1166773B1 (en) Solution of N- O(p-pivaloyloxbenzenesulfonylamino)benzoyl glycine monosodium salt tetra-hydrate and drug product thereof
EP3746077A1 (en) Parenteral formulations and uses thereof
JP2021138649A (en) Liquid formulation including sugammadex and production method thereof
RU2410094C1 (en) Pharmaceutical agent
RU2635759C1 (en) Pharmaceutical composition for parenteral introduction and method of its production
JPH03130226A (en) Stable pharmaceutical combination and its method for use in anti-biological compound newly-produced having at least one ethylene imine group
WO2023072714A1 (en) Phytonadione for parenteral administration
RU2524651C1 (en) Pharmaceutical composition in form of solution for injection and method for production thereof
RU2504376C1 (en) High-stable pharmaceutical formulation of lyophilisate of 3-oxypyridine and methylpyridine derivatives and pharmaceutically acceptable salts thereof
EA030458B1 (en) Pharmaceutical composition with cytoprotective action in the form of an aqueous solution for intravenous administration and method for preparation thereof
JP2015189739A (en) Ascorbic acid-containing liquid drug
WO2005077376A1 (en) A stable parental formulation of levomepromazine and a method for stabilizing said formulation