[go: up one dir, main page]

RU2538686C1 - Using delta sleep inducing peptide for hepatoprotective effect in chronic immobilisation stress - Google Patents

Using delta sleep inducing peptide for hepatoprotective effect in chronic immobilisation stress Download PDF

Info

Publication number
RU2538686C1
RU2538686C1 RU2013154002/15A RU2013154002A RU2538686C1 RU 2538686 C1 RU2538686 C1 RU 2538686C1 RU 2013154002/15 A RU2013154002/15 A RU 2013154002/15A RU 2013154002 A RU2013154002 A RU 2013154002A RU 2538686 C1 RU2538686 C1 RU 2538686C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
stress
chronic
gly
delta
inducing peptide
Prior art date
Application number
RU2013154002/15A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Андрей Евгеньевич Белых
Алексей Анатольевич Крюков
Игорь Иванович Бобынцев
Ольга Михайловна Шепелева
Original Assignee
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Курский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Курский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации filed Critical Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Курский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Priority to RU2013154002/15A priority Critical patent/RU2538686C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2538686C1 publication Critical patent/RU2538686C1/en

Links

Landscapes

  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: hepatoprotective effect in a chronic immobilisation stress is ensured by delta sleep inducing peptide having formula (NH2)Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu(COOH).
EFFECT: using the invention enables improving the metabolic processes and promotes the hepatic functional recovery in the chronic immobilisation stress.
1 tbl, 1 ex

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, физиологии, патофизиологии, и может быть использовано для гепатопротекторного воздействия в условиях хронического иммобилизационного стресса.The invention relates to medicine, namely to hepatology, physiology, pathophysiology, and can be used for hepatoprotective effects in conditions of chronic immobilization stress.

Известно, что при стресс-реакции печень выступает в качестве одного из наиболее чувствительных органов-мишеней (Петрова, В.А. Ограничение стрессорной активации адренергической и гипофизарно-адреналовой систем с помощью альфа-токоферола / В.А. Петрова, В.В. Малышев, Б.Н. Манухин, Ф.З. Меерсон. // Вопр. мед. химии. - 1985. - №6. - С.115-118; Васильцов, М.К. Динамика морфофункциональных изменений в фибробластах очага воспаления / М.К. Васильцов // Арх. анат. гистол. и эмбриол. 1977. - №2. - С.80-83) и стрессорные воздействия вызывают развитие в ней различных форм патологии. Учитывая важнейшую роль печени в поддержании гомеостаза, данное обстоятельство может отрицательно сказываться и на состоянии других органов и систем.It is known that in a stress reaction, the liver acts as one of the most sensitive target organs (Petrova, V.A. Restriction of the stress activation of adrenergic and pituitary-adrenal systems using alpha-tocopherol / V.A. Petrova, V.V. Malyshev, BN Manukhin, FZ Meerson // Vopr.med. chemistry. - 1985. - No. 6. - P.115-118; Vasiltsov, MK Dynamics of morphofunctional changes in the fibroblasts of the focus of inflammation / M.K. Vasiltsov // Arch.Anat.Histol. And Embryol. 1977. - No. 2. - P.80-83) and stressful effects cause the development of various forms of pathologist in it ui. Given the crucial role of the liver in maintaining homeostasis, this circumstance may adversely affect the state of other organs and systems.

Как правило, среди нарушений обменных процессов при функциональной недостаточности печени особое значение имеют изменения структурной организации мембран гепатоцитов и метаболизма липидов (Иванов, Ю.В. Действие мексидола при токсическом поражении печени. / Ю.В. Иванов, И.А. Матюшин, О.Д. Мишнев и др. // Вестник новых медицинских технологий: периодический теоретический и научно-практический журнал. - 2003. - №3. - С.68-70). При этом процессы свободно-радикального окисления (СРО) с участием активных форм кислорода (АФК) и активных кислородных метаболитов (АКМ) играют особую роль среди механизмов деструкции клетки.As a rule, among metabolic disorders with functional liver failure, changes in the structural organization of hepatocyte membranes and lipid metabolism are of particular importance (Ivanov, Yu.V. The effect of mexidol in toxic liver damage. / Yu.V. Ivanov, I.A. Matyushin, O .D. Mishnev et al. // Bulletin of new medical technologies: a periodic theoretical and scientific-practical journal. - 2003. - No. 3. - P.68-70). Moreover, free radical oxidation (SRO) processes involving active oxygen species (ROS) and active oxygen metabolites (AKM) play a special role among the mechanisms of cell destruction.

Установлено, что различные виды стресса сопровождаются активацией процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в печени (Нестеров, Ю.В. Влияние стресс-индуцированных воздействий разной модальности и антиоксиданта на свободнорадикальные процессы в легких и печени белых крыс / Ю.В. Нестеров, А.С.Чумакова, Н.В. Гурченко // Естественные науки. - 2010. - №3. - С.122-126; Чумакова, А.С. Изменение свободнорадикальных процессов в различных органах крыс разного возраста при остром стрессе / А.С. Чумакова, Д.Л. Теплый, Ю.В. Нестерова // Биологические исследования. - 2009. - №4. - С.34-37). В процессе эволюции в организме сложилась достаточно сложная многокомпонентная система антиоксидантной защиты, включающая в себя, в том числе, и ряд ферментных систем. В частности, важную роль в антиоксидантных механизмах играют супероксиддисмутаза (СОД) и каталаза (Чеснокова, Н.П. Молекулярно-клеточные механизмы инактивации свободных радикалов в биологических системах / Н.П. Чеснокова, Е.В. Понукалина, М.Н. Бизенкова // Успехи современного естествознания. - 2006. - №7. - С.29-36). Накопление конечных продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ), и прежде всего малонового диальдегида (МДА), может запускать необратимую инактивацию ферментов, структурную перестройку клеточных мембран с увеличением их проницаемости и крайне отрицательно сказываться на функционировании клеток, вплоть до их гибели (Чмырев, И.В. Влияние ультразвуковой некрэктомии на содержание малонового диальдегида в плазме крови обожженных. / И.В. Чмырев // Вестник российской военно-медицинской академии. - Т.3 - С.23-26).It was established that various types of stress are accompanied by activation of lipid peroxidation (LP) processes in the liver (Nesterov, Yu.V. Influence of stress-induced effects of different modality and antioxidant on free radical processes in the lungs and liver of white rats / Yu.V. Nesterov, A .S. Chumakova, N.V. Gurchenko // Natural Sciences. - 2010. - No. 3. - P.122-126; Chumakova, A.S. Change in free radical processes in various organs of rats of different ages under acute stress / A. S. Chumakova, D.L. Teply, Yu.V. Nesterova // Biological studies. - 2009. - No. 4. - S.34-37). In the process of evolution, a rather complex multicomponent antioxidant defense system has developed in the body, including, among other things, a number of enzyme systems. In particular, superoxide dismutase (SOD) and catalase (Chesnokova, N.P., Molecular-cell mechanisms of inactivation of free radicals in biological systems) play an important role in antioxidant mechanisms / N.P. Chesnokova, E.V. Ponukalina, MN Bizenkova // Successes of modern natural sciences. - 2006. - No. 7. - P.29-36). The accumulation of end products of lipid peroxidation (LPO), and primarily malondialdehyde (MDA), can trigger irreversible inactivation of enzymes, structural rearrangement of cell membranes with an increase in their permeability, and extremely negatively affect the functioning of cells, up to their death (Chmyrev, I. B. The effect of ultrasonic necrectomy on the content of malondialdehyde in the blood plasma of the burned. / I.V. Chmyrev // Bulletin of the Russian Military Medical Academy. - T.3 - S.23-26).

Вышеизложенные факты позволяют полагать, что фармакологические вещества, угнетающие процессы СРО, могут обладать и гепатопротекторными свойствами (Иванов, Ю.В. Действие мексидола при токсическом поражении печени / Ю.В. Иванов, И.А. Матюшин, О.Д. Мишнев и др. // Вестник новых медицинских технологий: периодический теоретический и научно-практический журнал. - 2003. - №3. - С.68-70).The above facts suggest that pharmacological substances that inhibit SRO processes may also have hepatoprotective properties (Ivanov, Yu.V. The effect of mexidol in toxic liver damage / Yu.V. Ivanov, I.A. Matyushin, O.D. Mishnev and etc. // Bulletin of new medical technologies: a periodic theoretical and scientific-practical journal. - 2003. - No. 3. - P.68-70).

Известно, что гепатопротекторы - это лекарственные средства, которые улучшают метаболические процессы в печени, повышают ее устойчивость к патогенным воздействиям, а также способствуют восстановлению ее функций при различных повреждениях (Новиков, В.Е. Фармакология гепатопротекторов // В.Е. Новиков, Е.И. Климкина // Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. - 2005. - Т.4, №1. - С.2-20).It is known that hepatoprotectors are drugs that improve the metabolic processes in the liver, increase its resistance to pathogenic effects, and also contribute to the restoration of its functions in various injuries (Novikov, V.E. Pharmacology of hepatoprotectors // V.E. Novikov, E . I. Klimkin // Reviews on Clinical Pharmacology and Drug Therapy. - 2005. - T.4, No. 1. - C.2-20).

Дельта-сон индуцирующей пептид (ДСИП) является эндогенным пептидом с уникальной аминокислотной последовательностью (Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu) молекулярной массой 848.98 Да.The peptide-inducing delta sleep (DSIP) is an endogenous peptide with a unique amino acid sequence (Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu) with a molecular weight of 848.98 Da.

Известно, что ДСИП выступает в роли программинг-фактора, в связи с чем встречающиеся в литературе описания эффектов данного пептида особенно ярко выражены при экстремальных воздействиях и патологических состояниях организма (Михалева И.И., Свиряев В.И. // Тез. докл. VI Всесоюз. симпоз. «Химия белков и пептидов». Рига, 1983. С.328). Так, у мышей при шестичасовой иммобилизации антистрессорный эффект пептида проявлялся в активации Т-клеток-киллеров (Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца. - М.: Медицина, 1984. - С.290). Обладая иммуностимулирующим действием, ДСИП уменьшает инволюцию тимуса при стресс-реакциях, влияет на процессы репарации (Салиева, P.M. Пептид, вызывающий дельта-сон, как фактор повышающий содержание вещества Р в гипоталамусе и устойчивости крыс к эмоциональному стрессу / P.M. Салиева, К. Яновский, Р. Ратсан, Я.П. Трофимова // Журн. высш. нерв. деятельности им. Н.П. Павлова. - 1991. - Т.41, №3. - С.558-563), обладает антиметастатическим эффектом (Шмалько, В.П. Антиметастатический эффект пептида дельта-сна при стрессе у мышей с карциномой легкого Льюиса / В.П. Шмалько, И.И. Михалева // Эксперим. онкология. - 1988. - Т.10, №2. - С.57-60) и цитопротективной активностью (Балицкий, К.П. Стресс и опухолевый процесс / К.П. Балицкий, Ю.П. Шмалько // Эксперим. онкология. - 1983. - Т.5, №1. - С.7-13). Восполняя возникающий в организме недостаток эндогенных нейропротекторов, пептид лимитирует негативное действие перенесенного эмоционального стресса и предотвращает отрицательные последствия при развитии последующей церебральной ишемии. Способствуя развитию компенсаторного коллатерального кровообращения в области ишемии в острейшем периоде и увеличивая средний показатель обеспеченности кровоснабжения ЭЭГ-активности, пептид нормализует электрическую активность головного мозга (Коплик, Е.В. Дельта-сон индуцирующий пептид и препарат дельтаран: потенциальные пути антистрессорной протекции / Е.В. Коплик, П.Е. Умрюхин, И.Л. Конорова, О.Л. Терехина, И.И. Михалева, И.В. Ганнушкина, К.В. Судаков // Журнал невр. и психиатрии. - 2007. - №12. - С.50-54).It is known that DSIP acts as a programming factor, in connection with which the descriptions of the effects of this peptide found in the literature are especially pronounced under extreme influences and pathological conditions of the body (Mikhaleva I.I., Sviryaev V.I. // Thesis. VI All-Union Symposium “The Chemistry of Proteins and Peptides”, Riga, 1983. P.328). So, in mice with six-hour immobilization, the antistress effect of the peptide was manifested in the activation of killer T cells (Meerson F.Z. Pathogenesis and prevention of stress and ischemic damage to the heart. - M .: Medicine, 1984. - P.290). Possessing an immunostimulating effect, DSIP reduces thymic involution in stress reactions, affects repair processes (Salieva, PM, Peptide that causes delta sleep, as a factor increasing the content of substance P in the hypothalamus and resistance of rats to emotional stress / PM Salieva, K. Yanovsky, R. Ratsan, J.P. Trofimova // Journal of Higher Nervous Activity named after N.P. Pavlov. - 1991. - T.41, No. 3. - P.558-563), has an antimetastatic effect (Shmalko V.P. Antimetastatic effect of delta-sleep peptide under stress in mice with Lewis lung carcinoma / V.P. Shma '' I.I. Mikhaleva // Experimental Oncology. - 1988. - T. 10, No. 2. - P. 57-60) and cytoprotective activity (Balitsky, K.P. Stress and tumor process / K.P. Balitsky, Yu.P. Shmalko // Experimental Oncology. - 1983. - V. 5, No. 1. - S.7-13). Compensating for the deficiency of endogenous neuroprotectors arising in the body, the peptide limits the negative effect of the transferred emotional stress and prevents the negative consequences during the development of subsequent cerebral ischemia. Promoting the development of compensatory collateral circulation in the field of ischemia in the acute period and increasing the average blood supply for EEG activity, the peptide normalizes the electrical activity of the brain (Koplik, E.V. Delta-son inducing peptide and drug deltaran: potential ways of antistress protection / E. V. Koplik, P.E. Umryukhin, I.L. Konorova, O.L. Terekhina, I.I. Mikhaleva, I.V. Gannushkina, K.V. Sudakov // Journal of Neurology and Psychiatry. - 2007. - No. 12. - S.50-54).

Для ДСИП установлен анальгетический эффект за счет усиления связывания мет-энкефалина с опиатными рецепторами (Schoenenberger G.A. Characterization, properties and multivariate functions of delta-sleep-inducing peptide (DSIP) // Eur. Neurol. 1984. V.23. P.321-345; Yehuda S., Carasso R. DSIP-a tool for investigating the sleep onset mechanism: a review // Int. J. Neu-rosc. 1988. V.38. P.345-353; Eds. Inoue S., Kruger J., Endogenous Sleep Factors. The Hague: SPB Acad. Publ., 1990; Прудченко И.А. Проблема эндогенности пептида дельта-сна / И.А. Прудченко, И.И. Михалева // Успехи совр. биологии. - 1994. - T.114, вып.6. - С.727-740; Лысенко А.В. Свойства и механизмы реализации биологических эффектов пептида, индуцирующего дельта-сон / А.В. Лысенко, A.M. Менджерицкий // Успехи совр. биологии. - 1995. - Т.115, вып.6. - С.729-735; Стрекалова Т.В. Дельта-сон индуцирующий пептид (ДСИП): проблемы эндогенного происхождения и биологической активности / Т.В. Стрекалова // Нейрохимия - 1998. - Т.15, №3 - С.227-239; Pollard B.J., Pomfrett C.J.D. Delta sleep-inducing peptide // Eur. J. Aneasthesiol. 2001. V.18. P.419-422), противосудорожной активностью (Прудченко, И.А. Синтез и антиэпилептические свойства аналогов пептида дельта-сна / И.А. Прудченко, Л.В. Сташевская, И.И. Михалева, В.Т. Иванов // Биоорган. химия. 1993. Т.19. С.43-55; Stanojlovic О., Zivanovic D., Mirkovic S., Mikhaleva I. Delta sleep-inducing peptide and its tetrapeptide analogue alleviate severity of metaphit seizures // Pharmacol. Biochem. Behav. 2004. V.77, №2. P.227-234; Stanojlovic O.P., Zivanovic D.P., Suzic V.T. The effects of delta sleep-inducing peptide on incidence and severity in metaphit-induced epilepsy in rats // Pharmacol. Res. 2002. V.45. №3. P.241-247).For DSIP, an analgesic effect was established due to increased binding of met-enkephalin to opiate receptors (Schoenenberger GA Characterization, properties and multivariate functions of delta-sleep-inducing peptide (DSIP) // Eur. Neurol. 1984. V.23. P.321- 345; Yehuda S., Carasso R. DSIP-a tool for investigating the sleep onset mechanism: a review // Int. J. Neurosc. 1988. V.38. P.345-353; Eds. Inoue S., Kruger J., Endogenous Sleep Factors. The Hague: SPB Acad. Publ., 1990; Prudchenko I.A. The problem of the endogenousity of the delta-sleep peptide / I.A. Prudchenko, I.I. Mikhaleva // Successes of modern biology .-- 1994. - T.114, issue 6. - S.727-740; Lysenko A.V. Properties and mechanisms for the implementation of the biological effects of the delta inducing peptide -son / A.V. Lysenko, AM Menzheritsky // Successes in modern biology. - 1995. - T.115, issue 6. - S.729-735; Strekalova T.V. Delta-sleep inducing peptide (DSIP) : problems of endogenous origin and biological activity / T.V. Strekalova // Neurochemistry - 1998. - T.15, No. 3 - S.227-239; Pollard B.J., Pomfrett C.J.D. Delta sleep-inducing peptide // Eur. J. Aneasthesiol. 2001. V.18. P.419-422), anticonvulsant activity (Prudchenko, I.A. Synthesis and antiepileptic properties of delta-sleep peptide analogues / I.A. Prudchenko, L.V. Stashevskaya, I.I. Mikhaleva, V.T. Ivanov / / Bioorgan.Chemistry. 1993. V. 19. S. 43-55; Stanojlovic O., Zivanovic D., Mirkovic S., Mikhaleva I. Delta sleep-inducing peptide and its tetrapeptide analogue alleviate severity of metaphit seizures // Pharmacol. Biochem. Behav. 2004. V.77, No. 2. P.227-234; Stanojlovic OP, Zivanovic DP, Suzic VT The effects of delta sleep-inducing peptide on incidence and severity in metaphit-induced epilepsy in rats // Pharmacol. Res. 2002. V.45. No. 3. P.241-247).

Тем не менее, применение ДСИП для гепатопротекторго воздействия в условиях хронического иммобилизационного стресса не известно.However, the use of DSIP for hepatoprotectoral exposure under conditions of chronic immobilization stress is not known.

Техническим результатом изобретения является применение по новому назначению дельта-сон индуцирующего пептида, имеющего формулу (NH2)Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu(COOH) для гепатопротекторного воздействия при хроническом иммобилизационном стрессе.The technical result of the invention is the use for a new purpose of the delta-sleep inducing peptide having the formula (NH 2 ) Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu (COOH) for hepatoprotective effects in chronic immobilization stress.

Технический результат изобретения достигается путем применения дельта-сон индуцирующего пептида, имеющего формулу Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu для гепатопротекторного воздействия при хроническом иммобилизационном стрессе.The technical result of the invention is achieved by the use of a delta-sleep inducing peptide having the formula Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu for hepatoprotective effects in chronic immobilization stress.

В настоящее время, поскольку точно известна химическая формула этого пептида, он может быть синтезирован в любой лаборатории синтеза пептидов либо закуплен у фирм, занимающихся поставкой биологически активных соединений (Sigma, ICN, Merk, Bachim и др.). Нами был использован препарат, синтезированный в НИИ химии Санкт-Петербургского государственного университета. Растворенный в изотоническом растворе хлорида натрия дельта-сон индуцирующий пептид вводят экспериментальным животным (крысы) парентерально (внутрибрюшинно) в дозе 40 мкг/кг массы тела за 60 минут до начала иммобилизации в течение 5 суток.Currently, since the chemical formula of this peptide is precisely known, it can be synthesized in any laboratory for the synthesis of peptides or purchased from companies engaged in the supply of biologically active compounds (Sigma, ICN, Merk, Bachim, etc.). We used a preparation synthesized at the Research Institute of Chemistry of St. Petersburg State University. The inducing peptide dissolved in an isotonic sodium chloride solution, delta-son, is administered to experimental animals (rats) parenterally (intraperitoneally) at a dose of 40 μg / kg body weight 60 minutes before the start of immobilization for 5 days.

Пример конкретного выполнения.An example of a specific implementation.

Экспериментальные животные (крысы-самцы Вистар) массой 290-340 г были разделены на группы по 7-10 особей в каждой (таблица). Животные содержались при температуре воздуха в помещении 22-24°C, световом режиме: 12 часов - свет, 12 часов - темнота, относительной влажность воздуха 40-50% и получали стандартный гранулированный корм и воду в свободном доступе с соблюдением всех правил и Международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях (1997), «Руководства по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (Москва, 2005). На момент проведения экспериментов животные были здоровыми, изменений поведения, аппетита, режима сна и бодрствования обнаружено не было.Experimental animals (male Wistar rats) weighing 290-340 g were divided into groups of 7-10 individuals in each (table). The animals were kept at a room temperature of 22-24 ° C, light mode: 12 hours - light, 12 hours - darkness, relative humidity 40-50% and received standard granular food and water in the public domain in compliance with all rules and International recommendations European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used in Experimental Research (1997), “Guidelines for the Experimental (Preclinical) Study of New Pharmacological Substances” (Moscow, 2005). At the time of the experiments, the animals were healthy, no changes in behavior, appetite, sleep and wakefulness were found.

Для создания иммобилизационного стресса применялась модификация методик Chen H. et al., Wang S.W. и Zheng J. et al. (Chen H., Fu Y., Sharp B.M. Chronic nicotine self-administration augments hypothalamic-pituitary-adrenal responses to mild acute stress. // Neuropsychopharmacology. - 2008 Mar. - 33(4). - P.721-730. - Epub 2007 Jun 6.; Wang S.W. Effects of restraint stress and serotonin on macronutrient selection: a rat model of stress-induced anorexia. // Eat Weight Disord. - 2002 Mar. - 7(1). - P.23-31; Zheng J., Dobner A., Babygirija R., Ludwig K., Takahashi T. Effects of repeated restraint stress on gastric motility in rats. // Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. - 2009 May. - 296(5). - R1358-65. - doi: 10.1152/ajpregu.90928.2008. - Epub 2009 Mar 4.). Устройство для иммобилизации было создано из пластиковой бутылки из-под напитков емкостью 0,5 литра путем удаления колпачка и нижней трети емкости. Каждое из животных помещали в получившийся индивидуальный бокс и фиксировали в положении на спине в течение 2 часов ежедневно в течение 5 суток. Дельта-сон индуцирующий пептид растворяли в изотоническом растворе хлорида натрия и вводили экспериментальному животному парентерально (внутрибрюшинно) в дозе 40 мкг/кг массы тела каждый раз за 60 минут до начала иммобилизации в объеме, полученном из расчета 1 мл на 1 кг массы тела (в 0,1 мл). Контрольные животные получали эквивалентные объемы физиологического раствора. Интактные животные на протяжении всего эксперимента находились в аналогичных условиях, что и контрольные, однако стрессирования не получали.To create immobilization stress, a modification of the techniques of Chen H. et al., Wang S.W. was used. and Zheng J. et al. (Chen H., Fu Y., Sharp BM Chronic nicotine self-administration augments hypothalamic-pituitary-adrenal responses to mild acute stress. // Neuropsychopharmacology. - 2008 Mar. - 33 (4). - P.721-730. - Epub 2007 Jun 6 .; Wang SW Effects of restraint stress and serotonin on macronutrient selection: a rat model of stress-induced anorexia. // Eat Weight Disord. - 2002 Mar. - 7 (1). - P.23-31; Zheng J., Dobner A., Babygirija R., Ludwig K., Takahashi T. Effects of repeated restraint stress on gastric motility in rats. // Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. - 2009 May. - 296 (5). - R1358-65. - doi: 10.1152 / ajpregu.90928.2008. - Epub 2009 Mar 4.). The immobilization device was created from a 0.5-liter plastic beverage bottle by removing the cap and the lower third of the container. Each of the animals was placed in the resulting individual box and fixed in position on the back for 2 hours daily for 5 days. The delta-sleep inducing peptide was dissolved in an isotonic sodium chloride solution and was administered to the experimental animal parenterally (intraperitoneally) at a dose of 40 μg / kg body weight every 60 minutes before the start of immobilization in a volume obtained from 1 ml per 1 kg of body weight (in 0.1 ml). Control animals received equivalent volumes of saline. Throughout the experiment, intact animals were in similar conditions as the control ones, but did not receive stress.

Животных выводили из эксперимента путем обескровливания под эфирным наркозом, после чего сразу же забирали навеску части печени, которую помещали в холодный физиологичесй раствор и гомогенизировали.The animals were removed from the experiment by bleeding under ether anesthesia, after which a portion of the liver was immediately taken, which was placed in cold physiological saline and homogenized.

Функциональное состояние печени оценивали по значениям в гомогенате печени содержания супероксиддисмутазы (СОД) (Костюк В.А., Потапов А.Н., Ковалева Ж.В. // Вопр. мед. химии. 1990. №2. С.88-91), каталазы (Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. // Лаб. дело. 1988. №1. С.16-19), малонового диальдегида (МДА) (Рагино Ю.И., Душкин М.И. Резистентность к окислению гепаринрезистентных В-липопротеидов сыворотки крови при ишемической болезни сердца // Клин. Лаб. Диагностика. 1998. №11. С.3-5.) с использованием спектрофотометра «Apel 330 PD» (Япония), а также общей антиокислительной активности (ОАА) (Галактионова Л.П., Молчанов А.В., Ельчанинова С.А, Варшавский Б.Я. Состояние перекисного окисления у больных с язвенной болезнью желудка и 12-перстной кишки // Клинич. лаб. диагностика. - 1998. - №6. - с.10-14) на программируемом полуавтоматическом биохимическом анализаторе «БТС-330» (Испания).The functional state of the liver was evaluated by the values in the liver homogenate of the content of superoxide dismutase (SOD) (Kostyuk V.A., Potapov A.N., Kovaleva Zh.V. // Vopr. Medical Chemistry. 1990. No. 2. P.88-91 ), catalase (Korolyuk M.A., Ivanova L.I., Mayorova I.G., Tokarev V.E. // Lab. business. 1988. No. 1. P.16-19), malondialdehyde (MDA) (Ragino Yu.I., Dushkin MI, Oxidation resistance of heparin-resistant serum B-lipoproteins in coronary heart disease // Klin. Lab. Diagnostics. 1998. No. 11. C.3-5.) Using the Apel spectrophotometer 330 PD "(Japan), as well as general antioxidant activity activity (OAA) (Galaktionova L.P., Molchanov A.V., Elchaninova S.A., Warsaw B.Ya. Peroxidation state in patients with gastric ulcer and 12 duodenal ulcer // Clinical laboratory diagnosis. - 1998. - No. 6. - pp. 10-14) on the BTS-330 programmable semi-automatic biochemical analyzer (Spain).

Статистическую обработку результатов производили с использованием критерия Манна-Уитни.Statistical processing of the results was carried out using the Mann-Whitney test.

Полученные результаты показали, что при хроническом иммобилизационном стрессе у контрольной группы по сравнению с показателями интактных животных в печени наблюдалось достоверное повышение уровня антиоксидантных ферментов (каталаза, СОД) и продуктов перекисного окисления липидов (МДА) на фоне снижения общей антиокислительной активности (ОАА). Введение ДСИП в дозе 40 мкг/кг сопровождалось снижением уровня антиоксидантных ферментов с повышением общей антиокислительной активности и уменьшением концентрации малонового диальдегида. Кроме того, вследствие ослабления активности процессов свободнорадикального окисления при введении дельта-сон индуцирующего пептида в печени наблюдалось некоторое снижение активности каталазы по сравнению с аналогичным показателем у интактных животных, сопровождающееся полной нормализацией остальных показателей (в частности, СОД, интегративного показателя антиоксидантной системы - ОАА, и одного из основных продуктов перекисного окисления - МДА) и приведением их к соответствующим уровням группы, не подвергавшихся стрессорному воздействию (достоверные различия между животными, получавшими ДСИП, и интактными животными отсутствуют).The results showed that in case of chronic immobilization stress in the control group, in comparison with the indices of intact animals, a significant increase in the level of antioxidant enzymes (catalase, SOD) and lipid peroxidation products (MDA) was observed against a background of a decrease in total antioxidant activity (OAA). The introduction of DSIP at a dose of 40 μg / kg was accompanied by a decrease in the level of antioxidant enzymes with an increase in total antioxidant activity and a decrease in the concentration of malondialdehyde. In addition, due to the weakening of the activity of free radical oxidation with the introduction of the delta son-inducing peptide in the liver, there was a slight decrease in catalase activity compared to the same indicator in intact animals, accompanied by a complete normalization of the remaining parameters (in particular, SOD, an integrative indicator of the antioxidant system - OAA and one of the main products of peroxidation - MDA) and bringing them to the appropriate levels of the group not exposed to stress action (significant differences between animals treated with DSIP, and intact animals are absent).

Представленные данные свидетельствуют о стресс-лимитирующем и гепатопротекторном действии ДСИП (таблица).The data presented indicate a stress-limiting and hepatoprotective effect of DSIP (table).

Figure 00000001
Figure 00000001

Таким образом, результаты проведенных экспериментальных исследований показывают, что использование дельта-сон индуцирующего пептида в дозе 40 мкг/кг оказывает выраженное гепатопротекторное действие при хроническом иммобилизационном стрессе. Данный способ основан на применении регуляторного пептида, относящегося к классу биологически активных веществ, обладающих выраженным модуляторным эффектом и полифункциональностью, не является трудоемким и не требует использования сложного оборудования.Thus, the results of experimental studies show that the use of a delta-sleep inducing peptide at a dose of 40 μg / kg has a pronounced hepatoprotective effect in chronic immobilization stress. This method is based on the use of a regulatory peptide belonging to the class of biologically active substances with a pronounced modulatory effect and polyfunctionality, is not time-consuming and does not require the use of sophisticated equipment.

Claims (1)

Применение дельта-сон индуцирующего пептида, имеющего формулу (NH2)Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu(COOH), для гепатопротекторного воздействия при хроническом иммобилизационном стрессе. Use of a delta-sleep inducing peptide having the formula (NH 2 ) Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu (COOH) for hepatoprotective effects in chronic immobilization stress.
RU2013154002/15A 2013-12-04 2013-12-04 Using delta sleep inducing peptide for hepatoprotective effect in chronic immobilisation stress RU2538686C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2013154002/15A RU2538686C1 (en) 2013-12-04 2013-12-04 Using delta sleep inducing peptide for hepatoprotective effect in chronic immobilisation stress

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2013154002/15A RU2538686C1 (en) 2013-12-04 2013-12-04 Using delta sleep inducing peptide for hepatoprotective effect in chronic immobilisation stress

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2538686C1 true RU2538686C1 (en) 2015-01-10

Family

ID=53288162

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2013154002/15A RU2538686C1 (en) 2013-12-04 2013-12-04 Using delta sleep inducing peptide for hepatoprotective effect in chronic immobilisation stress

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2538686C1 (en)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2286794C1 (en) * 2005-04-27 2006-11-10 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Agent for stimulation of reparative regeneration of liver and correction of immune reactivity in experimental toxic hepatopathy
WO2007030035A1 (en) * 2005-09-08 2007-03-15 Obschestvo S Ogranichenoy Otvetstvennostju Issledovatelsky Tsentr 'komkon' Agent for correcting stress-inducing neuro-mediator, neuro- endocrine and metabolic disturbances and method for preventing and treating concomitant pathological conditions

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2286794C1 (en) * 2005-04-27 2006-11-10 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Agent for stimulation of reparative regeneration of liver and correction of immune reactivity in experimental toxic hepatopathy
WO2007030035A1 (en) * 2005-09-08 2007-03-15 Obschestvo S Ogranichenoy Otvetstvennostju Issledovatelsky Tsentr 'komkon' Agent for correcting stress-inducing neuro-mediator, neuro- endocrine and metabolic disturbances and method for preventing and treating concomitant pathological conditions

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ВОЙТЕНКОВ В. Б., и др. Влияние пептида дельта-сна на свободно-радикальные процессы в головном мозгу и печени мышей при различных световых режимах, Успехи геронтол. 2007, Т. 21,N 1, С. 53-55. Найдено из Интернета [он-лайн] 17.09.2014 на сайте http://www.gerontology.ru/PDF_YG/AG_2008-21-01-1.pdf. RIKHIREVA G.T, et al., Changes in the intensity of free-radical reactions in the organs of rats under hypokinetic stress and with protection by the delta sleep-inducing peptide and its tyrosine-containing analog, Izv Akad Nauk Ser Biol. 1993 Mar-Apr;(2):243-56 - реферат. Найдено из Интернета [он-лайн] 17.09.2014 на сайте http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8471976 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Doblado et al. Mitophagy in human diseases
Vainshtein et al. Signaling pathways that control muscle mass
Zhao et al. Elamipretide (SS-31) improves mitochondrial dysfunction, synaptic and memory impairment induced by lipopolysaccharide in mice
Gureev et al. Regulation of mitochondrial biogenesis as a way for active longevity: interaction between the Nrf2 and PGC-1α signaling pathways
Ma et al. Inhibition of AMP-activated protein kinase signaling alleviates impairments in hippocampal synaptic plasticity induced by amyloid β
Xu et al. Quercetin‐3‐O‐glucuronide alleviates cognitive deficit and toxicity in Aβ1‐42‐induced AD‐like mice and SH‐SY5Y cells
Jalan et al. Ammonia produces pathological changes in human hepatic stellate cells and is a target for therapy of portal hypertension
Robison et al. Behavioral and structural responses to chronic cocaine require a feedforward loop involving ΔFosB and calcium/calmodulin-dependent protein kinase II in the nucleus accumbens shell
Dong et al. Ischemia/reperfusion-induced CHOP expression promotes apoptosis and impairs renal function recovery: the role of acidosis and GPR4
Chen et al. 14, 15-epoxyeicosatrienoic acid alleviates pathology in a mouse model of Alzheimer's disease
Swarnkar et al. Ectopic expression of the striatal-enriched GTPase Rhes elicits cerebellar degeneration and an ataxia phenotype in Huntington's disease
Bavley et al. Rescue of learning and memory deficits in the human nonsyndromic intellectual disability cereblon knock-out mouse model by targeting the AMP-activated protein kinase–mTORC1 translational pathway
Schmöhl et al. CNDP1 knockout in zebrafish alters the amino acid metabolism, restrains weight gain, but does not protect from diabetic complications
Gandhi et al. Dysfunction of glutamate delta-1 receptor-cerebellin 1 trans-synaptic signaling in the central amygdala in chronic pain
Wang et al. Inhibition of inflammatory mediator release from microglia can treat ischemic/hypoxic brain injury★
Lee et al. Influence of age on skeletal muscle hypertrophy and atrophy signaling: established paradigms and unexpected links
Serradas et al. Therapeutic targets in innate immunity to tackle alzheimer’s disease
Qiu et al. ROS acted as an initial role in selenium nanoparticles alleviating insecticide chlorpyrifos-induced oxidative stress, pyroptosis, and intestinal barrier dysfunction in porcine intestinal epithelial cells
RU2582963C1 (en) USE OF PEPTIDE Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (SELANC) HEPATOPROTECTIVE FOR EXPOSURE IN ACUTE IMMOBILISATION STRESS
RU2538686C1 (en) Using delta sleep inducing peptide for hepatoprotective effect in chronic immobilisation stress
Hoyles et al. Regulation of blood–brain barrier integrity and cognition by the microbiome-associated methylamines trimethylamine-N-oxide and trimethylamine
Milewski et al. What we know: the inflammatory basis of hepatic encephalopathy
Ji et al. Two Phase Modulation of NH 4+ Entry and Cl−/HCO 3-Exchanger in Submandibular Glands Cells by Dexmedetomidine
Krauze et al. Assessment of neurodegenerative changes in turkeys fed diets with different proportions of arginine and methionine relative to lysine
RU2537032C2 (en) Using delta-sleep inducing peptide for hepatoprotective action in chronic emotional pain stress

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20151205