RU2538219C2 - Способ определения резистентности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте - Google Patents
Способ определения резистентности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте Download PDFInfo
- Publication number
- RU2538219C2 RU2538219C2 RU2013116658/15A RU2013116658A RU2538219C2 RU 2538219 C2 RU2538219 C2 RU 2538219C2 RU 2013116658/15 A RU2013116658/15 A RU 2013116658/15A RU 2013116658 A RU2013116658 A RU 2013116658A RU 2538219 C2 RU2538219 C2 RU 2538219C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- values
- points
- correspond
- aggregation
- asa
- Prior art date
Links
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 57
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 title claims abstract description 57
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 claims abstract description 31
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 claims abstract description 31
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims abstract description 22
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims abstract description 14
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 claims abstract description 12
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000012620 biological material Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 9
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims description 8
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 claims description 8
- 238000007422 luminescence assay Methods 0.000 claims description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 3
- 208000025870 aspirin resistance Diseases 0.000 abstract description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 3
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000411 inducer Substances 0.000 abstract description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract description 2
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 15
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 208000016988 Hemorrhagic Stroke Diseases 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 210000004623 platelet-rich plasma Anatomy 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- BSYNRYMUTXBXSQ-FOQJRBATSA-N 59096-14-9 Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1[14C](O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-FOQJRBATSA-N 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 208000012671 Gastrointestinal haemorrhages Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 201000007224 Myeloproliferative neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000002744 anti-aggregatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000702 anti-platelet effect Effects 0.000 description 1
- 238000013176 antiplatelet therapy Methods 0.000 description 1
- 229940127217 antithrombotic drug Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- GKTWGGQPFAXNFI-HNNXBMFYSA-N clopidogrel Chemical compound C1([C@H](N2CC=3C=CSC=3CC2)C(=O)OC)=CC=CC=C1Cl GKTWGGQPFAXNFI-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 230000008717 functional decline Effects 0.000 description 1
- 208000030304 gastrointestinal bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000010197 meta-analysis Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к способу определения резистентности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте (АСК) путем импедансного исследования агрегационной функции тромбоцитов in vitro, при котором исследуют агрегационную активность после инкубации образца биологического материала с АСК с использованием индуктора агрегации, причем агрегацию тромбоцитов индуцируют коллагеном в оптимальной концентрации 2 мг/мл и одновременно с измерением импеданса проводят определение динамики освобождения гранул тромбоцитов люминесцентным методом, где перед проведением агрегации пробы калибруются с помощью стандарта аденозинтрифосфата (АТФ), по полученным агрегатограммам определяют значения амплитуды агрегации в Омах и присваивают полученным значениям баллы: значения ≤6 соответствуют 0 баллов, значения 7-9 соответствуют 1 баллу, значения 10-12 соответствуют 2 баллам, значения >12 соответствуют 3 баллам; затем определяют интенсивность высвобождения АТФ из гранул тромбоцитов в нмолях и присваивают полученным значениям баллы: значения <0,5 соответствуют 0 баллам, значения 0,5-1,0 соответствуют 1 баллу, значения 1,0-1,5 соответствуют 2 баллам, значения >1,5 соответствуют 3 баллам, и далее рассчитывают индекс резистентности (ИР) по формуле, при этом значение показателя ИР более 4 указывает на наличие аспиринорезистентности тромбоцитов. Изобретение обеспечивает проведение быстрой комплексной диагностики резистентности тромбоцитов к АСК с оценкой функционального состояния гранул тромбоцитов до начала лечения и возможность предотвращения развития нежелательных тромботических или геморрагических осложнений. 2 ил., 1 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к актуальной проблеме современной клинической и профилактической персонифицированной медицины - определению индивидуальных особенностей реакции тромбоцитов на лекарственные средства, а именно к методам превентивной in vitro диагностики резистентности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте (АСК).
В связи с несомненной профилактической эффективностью при сердечнососудистых заболеваниях и ценовой доступностью АСК является самым часто назначаемым антитромботическим препаратом [Волков В.И., Рябуха В.В., Запровальная О.Е., Ладный А.И. Диагностика резистентности к аспирину у больных ишемической болезнью сердца. Укр. кардиол. журн., 6 января 2006 г. [он-лайн]. Найдено в Интернет: <URL: http://rq1.net.ua/cardio_j/2006/3/IMAG306/volkkov.gif>]. Однако известно, что достичь адекватного снижения агрегации тромбоцитов и предотвратить повторный тромбоз и возникновение сердечно-сосудистых катастроф удается не у всех пациентов, принимающих АСК [Ашихмин, Я.И. Феномен резистентности к антитромботическому действию аспирина и пути его преодоления / Я.И. Ашихмин О.М. Драпкина // Российские медицинские вести, 2008. - Т.13. - №2]. По данным ряда авторов такое явление, называемое «резистентностью» к АСК, распространено среди населения с частотой встречаемости от 5 до 48% [Hankey, G. Aspirin resistance / G. Hankey, J. Eikelboom // Lancet, 2006 - Vol.367]. Одной из важнейших проблем, возникающих при попытке каким-либо образом измерить (оценить) степень ингибирования функции тромбоцитов после воздействия фармакологических агентов состоит в том, что ни один из существующих лабораторных тестов не включает в себя оценку всей многогранности функции тромбоцитов [Бугаенко, В.В. Современные принципы антитромбоцитарной терапии у больных с ишемической болезнью сердца. Часть 2. Переносимость и возможные побочные эффекты / В.В. Бугаенко // Кардиологический журнал, 2009. - №5]. При этом in vitro диагностика эффективности АСК не оценивает механизмы снижения функции тромбоцитов, которые могут обусловливаться дефектами такого важного структурно-функционального компонента тромбоцитов как гранулы [Воробьев А.И. Руководство по гематологии / А.И. Воробьев. - М.: Медицина, 1985]. Нарушенное функционирование этих специфических органелл тромбоцитов является патогенетической основой ряда заболеваний, при которых прием АСК противопоказан. Известно, что при некоторых патологических состояниях кроветворения наблюдается неадекватная реакция тромбоцитов на прием ацетилсалициловой кислоты, выражающаяся в появлении геморрагии [Avram, S., Lupu, A. Abnormalities of platelet aggregation in chronic myeloproliferative disorders / S. Avram, A. Lupu // J. Cell. Mol. Med., 2001 - Vol 5]. Использование АСК вызывает повышенный риск желудочно-кишечных кровотечений и геморрагических инсультов [He J., Whelton P.К. Aspirin and risk of haemorrhagic stroke: a meta-analysis of randomized controlled trials // JAMA. 1998. Vol.280. P.1930-1935]. В связи с этим весьма актуальным является разработка диагностических тестов проводимых до начала приема препарата пациентом с целью прогноза индивидуальной реактивности тромбоцитов к действию АСК, в том числе включающей оценку секреторной активности.
Известен способ определения резистентности к АСК посредством измерения параметров светопропускания при индуцированной агрегации тромбоцитов в плазме крови [Патент РФ №2413953C1, G01N 33/86 (2006.01). Опубл. 10.03.2011. Бюл. №7]. Метод позволяет количественно оценивать амплитуду процесса агрегации in vitro. Для изучения антиагрегационных свойств в пробирку с обогащенной тромбоцитами плазмой предварительно вносили раствор АСК и инкубировали. Затем вносился индуктор - АДФ и регистрировалась амплитуда агрегации. Результаты сравнивались с показателями агрегации, вызванной индуктором без предварительного воздействия АСК, с вычислением коэффициента ингибирования агрегации (КИА).
Диагностическая ценность этого способа ограничена очевидными недостатками: 1) длительность, трудоемкость и недостаточная стандартизация процесса приготовления богатой тромбоцитами плазмы; 2) в ходе центрифугирования кровяные пластинки подвергаются значительным механическим воздействиям, которые существенно изменяют их функциональную состоятельность; 3) на этапе пробоподготовки нарушается естественное окружение тромбоцитов, что не позволяет учитывать влияние на них других форменных элементов крови, модулирующих функции тромбоцитов; 4) увеличивается вероятность значительного снижения концентрации лабильных медиаторов к моменту измерения. Все это не позволяет создать оптимальные стандартные условия, необходимые для обеспечения полной реализации функций тромбоцитов после стимулирования индуктором. Существенным недостатком оптической агрегатометрии является также невозможность исследовать кровь больных с выраженной гиперлипидемией, часто встречающейся в кардиологической практике. Кроме того, измерение вышеуказанным методом пропускает 67% пациентов с дефектом накопления гранул и угрозой геморрагических осложнений при терапии [Научное общество "Клиническая гемостазиология". Диагностика [он-лайн]. Найдено в Интернет: <URL:http://www.hemostas.ru/society/diagnostics/ecomeds/index.shtml>].
Известен другой способ диагностики резистентности к АСК, который заключается в исследовании функциональной активности тромбоцитов до и после инкубации образца биологического материала с ацетилсалициловой кислотой, при этом агрегационную активность тромбоцитов определяют в цельной крови импедансным методом с вычислением ингибирующей способности АСК в процентах [Патент РФ №2379684 C2, G01N 33/48 (2006.01). Опубл. 20.01.2010. (прототип)]. Данный способ позволяет прогнозировать резистентность к АСК до начала терапии, однако не дает информации о состоянии гранулярного аппарата тромбоцитов, важного для их функционирования в системе гемостаза.
Технический результат предлагаемого изобретения заключается в проведении быстрой комплексной диагностики резистентности тромбоцитов к АСК с оценкой функционального состояния гранул тромбоцитов до начала лечения и возможности предотвращении развития нежелательных тромботических или геморрагических осложнений.
Технический результат достигается тем, что в способе определения резистентности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте (АСК) путем импедансного исследования агрегационной функции тромбоцитов in vitro, при котором исследуют агрегационную активность после инкубации образца биологического материала с АСК с использованием индуктора агрегации новым является то, что агрегацию тромбоцитов индуцируют коллагеном в оптимальной концентрации 2 мг/мл и одновременно с измерением импеданса проводят определение динамики освобождения гранул тромбоцитов люминесцентным методом, где перед проведением агрегации пробы калибруются с помощью стандарта аденозинтрифосфата (АТФ), по полученным агрегатограммам определяют значения амплитуды агрегации в Омах и присваивают полученным значениям баллы: значения <6 соответствуют 0 баллов, значения 7-9 соответствуют 1 баллу, значения 10-12 соответствуют 2 баллам, значения >12 соответствуют 3 баллам; затем определяют интенсивность высвобождения АТФ из гранул тромбоцитов в нмолях и присваивают полученным значениям баллы: значения <0,5 соответствуют 0 баллам, значения 0,5-1.0 соответствуют 1 баллу, значения 1,0-1,5 соответствуют 2 баллам, значения >1,5 соответствуют 3 баллам, и далее рассчитывают индекс резистивности (ИР) по формуле:
ИР=Би+Бл,
где Би и Бл - степень чувствительности к АСК в баллах в импедансном и люминесцентном тестах соответственно, при этом значение показателя ИР более 4 указывает на наличие аспиринорезистентности тромбоцитов.
Предложенный способ отличается от прототипа тем, что определение резистентности к АСК проводят in vitro путем исследования функциональной активности тромбоцитов только после инкубации образца биологического материала с АСК, при этом агрегационную активность тромбоцитов и состояние их гранул определяют в цельной крови комплексным импеданс-люминесцентным методом, что позволяет получать дополнительный диагностический параметр - степень влияния АСК на показатели высвобождения содержимого тромбоцитарных гранул и позволяет более объективно подходить к оценке индивидуальной чувствительности пациента к препарату АСК.
Таким образом, перечисленные выше отличительные от прототипа признаки позволяют сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию «новизна». Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, не выявлены в других технических решениях и, следовательно, обеспечивают заявляемому решению соответствие критерию «изобретательский уровень».
Сущность изобретения поясняется с помощью графических материалов:
На фиг. 1 представлены кривые коллаген-индуцированной агрегации и кривые высвобождения гранул тромбоцитов в цельной крови до (1-2) и после (3-4) инкубации проб с АСК для индивидуума, чувствительного к АСК.
На фиг. 2 представлены кривые коллаген-индуцированной агрегации и кривые высвобождения гранул тромбоцитов в цельной крови до (1-2) и после (3-4) инкубации проб с АСК для индивидуума, резистентного к АСК (1 - исходная кривая агрегации, 2 - исходная кривая интенсивности высвобождения гранул, 3 - кривая агрегации после инкубирования с АСК, 4 - кривая интенсивности высвобождения гранул после инкубации проб крови с АСК).
Способ осуществляется следующим образом.
Образцы крови получают из локтевой вены и стабилизируются 3,8% раствором цитрата натрия в объемном отношении 9:1. В процессе исследования кровь сохраняют в закрытых пластиковых пробирках при комнатной температуре с соблюдением общепринятых мер предосторожности при работе с клетками крови.
Анализ функциональной активности тромбоцитов осуществляют не ранее чем через 15 минут и не позднее чем через 3 часа после получения крови с помощью люми-агрегометра при 37°C и перемешивании содержимого кювет со скоростью вращения мешалки 1000 об/мин. Соотношение объемов пробы крови и индуктора при этом составляет 100:1.
Перед проведением агрегации люминесцентным методом пробы калибруются с помощью стандарта АТФ. При этом устанавливается индивидуальное для пациента усиление (в %) реакции люминесценции. Далее регистрируется интенсивность высвобождения АДФ из гранул тромбоцитов (в нмоль) с одновременной регистрацией параметров импеданса индуцированной агрегации тромбоцитов в этой же кювете.
Для индуцирования агрегации используют раствор коллагена в конечной концентрации 2,0 мг/мл, поставляющийся готовым к использованию.
Исследования функциональной активности тромбоцитов у каждого пациента проводят в одной пробе - после предварительной инкубации крови с АСК.
Инкубацию проводят в течение 15 минут при температуре 37°C. При этом в опытную пробу цельной крови добавляют 40 мкл 3,36 мМ раствора АСК.
Обработка агрегатограмм производится по общепринятым характерным точкам кривых агрегации с определением максимальной амплитуды нарастания импеданса в Омах к 5-й минуте от момента внесения в измерительную ячейку индуктора - коллагена и с определением интенсивности люминесценции при высвобождении АТФ из гранул тромбоцитов в нмолях. Выявление исходно низких показателей высвобождения гранул может свидетельствовать о патологии тромбоцитов и противопоказании к назначению АСК. Наряду с рутинными параметрами оценки агрегатограммы рассчитывается индекс резистентности (ИР). Данный параметр представляет собой сумму баллов, характеризующих степень чувствительности пациента в импедансном тесте и люминесцентном тесте по максимальным амплитудам агрегации и высвобождения гранул, и рассчитывается по формуле: ИР=Би+Бл, где Би и Бл - степень чувствительности к АСК в баллах в импедансном и люминесцентном тесте соответственно. Этот параметр характеризует итоговую степень индивидуальной чувствительности к АСК и включает в себя совокупную оценку ингибирующего действия АСК на процесс накопления АТФ, интенсивности высвобождения гранул, динамику мембранного потенциала тромбоцитов и агрегационно-адгезивную способность. ИР позволяет определить индивидуальную чувствительность пациента к АСК в абсолютных единицах шкалы, что может служить критерием для выявления лиц как с повышенной, так и с пониженной реакцией на препарат. Это позволит назначать терапию аспирином, обоснованную своевременной предиктивной лабораторной оценкой, и избежать нежелательных последствий неадекватного лечения.
Примеры получаемых агрегатограмм с оценкой индивидуальной резистентности к АСК приведены на фиг. 1-2.
Степень резистентности определяют в соответствии с предложенной шкалой:
В таблице 1 представлены результаты обследования 13 клинически здоровых людей, проведенного на базе Красноярского филиала ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава России. По предлагаемому способу определяли величину ИР. В пробах десяти пациентов значение этого показателя было ниже 4. У трех человек по результатам тестирования ИР был равен или более 4.
Поскольку у здоровых лиц, не принимавших АСК, значения ИР исходно без проведения инкубации с АКС были равны или более 4, то данный уровень значений ИР был принят как критерий резистентности. После того, как пациентами была принята per os разовая доза АСК в количестве 125 мг/сут, на следующий день вновь определяли показатели агрегации в пробе свежей крови без предварительных инкубаций. У трех пациентов выявленных по результатам предварительного тестирования с инкубацией in vitro ИР вновь был более 4, как и до приема препарата. Это подтверждает, что предлагаемое техническое решение позволяет выявлять пациентов с резистентностью к антитромбоцитарному действию АСК. Напротив, среди лиц, имеющих показатель ИР менее 4, разовый прием 125 мг АСК вызывал существенное ингибирование показателей агрегации, что свидетельствует об их чувствительности к данному препарату.
Полученный результат свидетельствует о высоких диагностических возможностях предлагаемого способа и клинической пользе использования превентивного определения антитромботического действия АСК in vitro комплексным импеданс-люминисцентным методом.
| Таблица 1 | |||||||
| Результаты исследования степени резистентности к АСК | |||||||
| № п/п | В тесте IN VITRO | В тесте IN VIVO | Прогноз | ||||
| Амплитуда, Ом | Высвобождение гранул, нмоль | Би | Бл | ИР | ИР | ||
| 1 | 2 | 0,3 | 0 | 0 | 0 | чувствительный | |
| 2 | 4 | 0,66 | 0 | 1 | 1 | чувствительный | |
| 3 | 4 | 0,64 | 0 | 1 | 1 | чувствительный | |
| 4 | 6 | 0,92 | 0 | 1 | 1 | чувствительный | |
| 5 | 7 | 0,34 | 1 | 0 | 1 | чувствительный | |
| 6 | 9 | 0,69 | 1 | 1 | 2 | чувствительный | |
| 7 | 6 | 1,08 | 0 | 2 | 2 | чувствительный | |
| 8 | 10 | 0,92 | 1 | 1 | 2 | 1 | чувствительный |
| 9 | 10 | 0,75 | 1 | 1 | 2 | 1 | чувствительный |
| 10 | 6 | 1,7 | 0 | 3 | 3 | чувствительный | |
| 11 | 16 | 0,58 | 3 | 1 | 4 | 6 | резистентный |
| 12 | 13 | 0,73 | 3 | 1 | 4 | 6 | резистентный |
| 13 | 16 | 2,24 | 3 | 3 | 6 | 6 | резистентный |
Claims (1)
- Способ определения резистентности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте (АСК) путем импедансного исследования агрегационной функции тромбоцитов in vitro, при котором исследуют агрегационную активность после инкубации образца биологического материала с АСК с использованием индуктора агрегации, отличающийся тем, что агрегацию тромбоцитов индуцируют коллагеном в оптимальной концентрации 2 мг/мл и одновременно с измерением импеданса проводят определение динамики освобождения гранул тромбоцитов люминесцентным методом, где перед проведением агрегации пробы калибруются с помощью стандарта аденозинтрифосфата (АТФ), по полученным агрегатограммам определяют значения амплитуды агрегации в Омах и присваивают полученным значениям баллы: значения ≤6 соответствуют 0 баллов, значения 7-9 соответствуют 1 баллу, значения 10-12 соответствуют 2 баллам, значения >12 соответствуют 3 баллам; затем определяют интенсивность высвобождения АТФ из гранул тромбоцитов в нмолях, и присваивают полученным значениям баллы: значения <0,5 соответствуют 0 баллам, значения 0,5-1,0 соответствуют 1 баллу, значения 1,0-1,5 соответствуют 2 баллам, значения >1,5 соответствуют 3 баллам, и далее рассчитывают индекс резистивности (ИР) по формуле:
ИР=Би+Бл,
где Би и Бл - степень чувствительности к АСК в баллах в импедансном и люминесцентном тестах соответственно, при этом значение показателя ИР более 4 указывает на наличие аспиринорезистентности тромбоцитов.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013116658/15A RU2538219C2 (ru) | 2013-04-11 | 2013-04-11 | Способ определения резистентности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013116658/15A RU2538219C2 (ru) | 2013-04-11 | 2013-04-11 | Способ определения резистентности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013116658A RU2013116658A (ru) | 2014-11-10 |
| RU2538219C2 true RU2538219C2 (ru) | 2015-01-10 |
Family
ID=53288389
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013116658/15A RU2538219C2 (ru) | 2013-04-11 | 2013-04-11 | Способ определения резистентности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2538219C2 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2686700C1 (ru) * | 2018-08-01 | 2019-04-30 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Способ определения резистентности тромбоцитов к антиагрегантным препаратам у пациентов с ишемической болезнью сердца |
| RU2710272C1 (ru) * | 2019-07-05 | 2019-12-25 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Способ определения резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии у пациентов с ишемической болезнью сердца |
| RU2743808C1 (ru) * | 2020-07-06 | 2021-02-26 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Способ определения высокой остаточной реактивности тромбоцитов у пациентов с ишемической болезнью сердца, находящихся на антиагрегантной терапии |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2379684C2 (ru) * | 2007-11-29 | 2010-01-20 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр сердца, крови и эндокринологии имени В.А. Алмазова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" | Способ определения антитромботического эффекта ацетилсалициловой кислоты |
| RU2413953C1 (ru) * | 2009-08-17 | 2011-03-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" | Способ диагностики резистентности к ацетилсалициловой кислоте |
| UA64437U (ru) * | 2011-04-04 | 2011-11-10 | Государственное Учреждение "Институт Геронтологии Им. Д.Ф. Чеботарева" Намн Украины | Способ диагностики вторичной резистентности к ацетилсалициловой кислоте у лиц пожилого возраста страдающих ишемической болезнью сердца |
-
2013
- 2013-04-11 RU RU2013116658/15A patent/RU2538219C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2379684C2 (ru) * | 2007-11-29 | 2010-01-20 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр сердца, крови и эндокринологии имени В.А. Алмазова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" | Способ определения антитромботического эффекта ацетилсалициловой кислоты |
| RU2413953C1 (ru) * | 2009-08-17 | 2011-03-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" | Способ диагностики резистентности к ацетилсалициловой кислоте |
| UA64437U (ru) * | 2011-04-04 | 2011-11-10 | Государственное Учреждение "Институт Геронтологии Им. Д.Ф. Чеботарева" Намн Украины | Способ диагностики вторичной резистентности к ацетилсалициловой кислоте у лиц пожилого возраста страдающих ишемической болезнью сердца |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ашихмин Я.И. Феномен резистентности к антитромботическому действию аспирина и пути его преодоления. Российские медицинские вести, 2008. - Т.13. - N2 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2686700C1 (ru) * | 2018-08-01 | 2019-04-30 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Способ определения резистентности тромбоцитов к антиагрегантным препаратам у пациентов с ишемической болезнью сердца |
| RU2710272C1 (ru) * | 2019-07-05 | 2019-12-25 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Способ определения резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии у пациентов с ишемической болезнью сердца |
| RU2743808C1 (ru) * | 2020-07-06 | 2021-02-26 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Способ определения высокой остаточной реактивности тромбоцитов у пациентов с ишемической болезнью сердца, находящихся на антиагрегантной терапии |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2013116658A (ru) | 2014-11-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2386231T3 (es) | Herramienta de diagnóstico y terapéuticas para enfermedades que alteran la función vascular | |
| Gattas et al. | Procalcitonin as a diagnostic test for sepsis: health technology assessment in the ICU | |
| JP5916130B2 (ja) | 病気の重症度の検査方法 | |
| Sahin et al. | Association of red blood cell distribution width levels with severity of coronary artery disease in patients with non-ST elevation myocardial infarction | |
| RU2538219C2 (ru) | Способ определения резистентности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте | |
| BORAS et al. | The significance of red cell distribution width and homocysteine values in STEMI patients undergoing PCI in the population of Bosnia and Herzegovina. | |
| RU2379684C2 (ru) | Способ определения антитромботического эффекта ацетилсалициловой кислоты | |
| RU2486523C1 (ru) | Способ оценки клинической эффективности антиагрегантной терапии у больных острым коронарным синдромом | |
| Majoy et al. | Platelet activation in a population of critically ill dogs as measured with whole blood flow cytometry and thromboelastography | |
| RU2275640C1 (ru) | Способ выбора метода лечения тромбоцитопатии при метаболическом синдроме | |
| CN103210312A (zh) | 通过软骨酸性蛋白1 检测脑梗塞的方法 | |
| RU2419800C1 (ru) | Способ оценки риска повторных тромботических событий у больных острым коронарным синдромом | |
| WO2022255348A1 (ja) | 可溶型ｃｌｅｃ２を用いた急性脳血管障害のリスク評価方法 | |
| RU2706537C1 (ru) | Способ оценки риска развития осложнений в раннем послеоперационном периоде у больных с дисплазией соединительной ткани | |
| RU2393475C1 (ru) | Способ оценки реологических свойств крови | |
| RU2699569C1 (ru) | Способ определения чувствительности тромбоцитов к ацетилсалициловой кислоте | |
| RU2639772C1 (ru) | Способ индивидуального прогнозирования клинической эффективности двойной антитромбоцитарной терапии у больных острым коронарным синдромом | |
| Weber | The progression of carotid intima-media thickness in healthy men | |
| RU2761138C1 (ru) | Способ оценки риска развития тяжелого течения коронавирусной инфекции у женщин | |
| RU2768598C1 (ru) | Способ оценки эффективности химиотерапии рака печени | |
| Halil et al. | Sundari, Analysis of RDW and PDW Levels as Predictors of Severity in Acute Coronary Syndrome Patients | |
| RU2310196C2 (ru) | Способ определения функциональной активности симпато-адреналовой системы | |
| El-Zayyadi et al. | Interleukin-6 as a reliable biomarker for inflammatory bowel diseases | |
| Kebede | MAGNITUDE OF SELECTED HEMATOLOGICAL ABNORMALITIES AND ASSOCIATED FACTORS AMONG TYPE 2 DIABETIC PATIENTS AT MIZAN TEPI UNIVERSITY TEACHING HOSPITAL, SOUTH WEST ETHIOPIA, 2023 GC | |
| Hidalgo Rivera et al. | Elevated Serum Triglyceride Levels in Acute Pancreatitis: A Parameter to be Measured and Considered Early |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190412 |