[go: up one dir, main page]

RU2519769C1 - Agent possessing antineoplastic and immunomodulatory action - Google Patents

Agent possessing antineoplastic and immunomodulatory action Download PDF

Info

Publication number
RU2519769C1
RU2519769C1 RU2013112710/15A RU2013112710A RU2519769C1 RU 2519769 C1 RU2519769 C1 RU 2519769C1 RU 2013112710/15 A RU2013112710/15 A RU 2013112710/15A RU 2013112710 A RU2013112710 A RU 2013112710A RU 2519769 C1 RU2519769 C1 RU 2519769C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
extract
tumor
avran
action
rats
Prior art date
Application number
RU2013112710/15A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Наталья Владимировна Полуконова
Никита Александрович Наволокин
Наталья Анатольевна Дурнова
Галина Никифоровна Маслякова
Алла Борисовна Бучарская
Original Assignee
Наталья Владимировна Полуконова
Никита Александрович Наволокин
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Наталья Владимировна Полуконова, Никита Александрович Наволокин filed Critical Наталья Владимировна Полуконова
Priority to RU2013112710/15A priority Critical patent/RU2519769C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2519769C1 publication Critical patent/RU2519769C1/en

Links

Images

Landscapes

  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: agent possessing antineoplastic and immunomodulatory action, representing a dry extract of drug hedge hyssop leaves and blossom, prepared by their milling, extracting in alcohol on a water bath until boils, and boiling, distillation, dilution of the distilled residue with distilled water first, adding chloroform, cooling to room temperature and centrifuging with separating a water fraction and drying under certain conditions.
EFFECT: prepared agent possesses high antineoplastic action, decreases the growth and development of the tumour, destroys the cancer cells, as well as increases a lymphocyte percentage that testifies to the immunopotentiating action.
3 dwg, 3 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, в частности к средствам для профилактики и лечения злокачественных новообразований, и может быть использовано как средство в комплексной терапии злокачественных новообразований.The invention relates to medicine, in particular to means for the prevention and treatment of malignant neoplasms, and can be used as a tool in the treatment of malignant neoplasms.

В настоящее время поиск новых лекарственных препаратов для борьбы со злокачественными новообразованиями является приоритетным направлением современной медицины. Особое значение имеют препараты на основе природного растительного сырья с низким токсическим эффектом. Схема лечения онкологических заболеваний строится по трем основным направлениям: прямое воздействие на опухоль (цитостатическое), иммуномодулирующее и антиоксидантное (неспецифическое усиление иммунных реакций и стимуляция антиоксидантной активности) и протекторное (защитное от токсического действия как самих цитостатиков, так и продуктов распада опухоли). Основными механизмами противоопухолевой цитокинотерапии служат запуск апоптоза раковой клетки - восстановление внутреннего механизма саморазрушения раковой клетки (цитотоксическое действие); арест клеточного цикла - остановка безостановочного деления раковой клетки на определенных стадиях клеточного цикла (цитостатическое действие); ангиогенный эффект - некроз опухолей и угнетение ангиогенеза опухоли (за счет разрушения внутренних кровеносных сосудов опухоли); активация клеток собственного противоопухолевого кластера иммунной системы (Балицкий К.Л. и др. <<Лекарственные растения в терапии злокачественных опухолей>> Киев. 1976: Lang I, Nekam K, Deak G, et al. Immunomodulatory and hepatoprotective effects of in vivo treatment with free radical scavengers. Ital J Gastronterol 22:283-7. 1990; Гольдберг Е.Д., Зуева Е.П. <<Препараты из растений в комплексной терапии злокачественных новообразований>> Томск, 2000).Currently, the search for new drugs to combat malignant neoplasms is a priority in modern medicine. Of particular importance are preparations based on natural plant materials with a low toxic effect. The cancer treatment regimen is structured in three main directions: direct effect on the tumor (cytostatic), immunomodulating and antioxidant (nonspecific enhancement of immune responses and stimulation of antioxidant activity) and protective (protective against toxic effects of both cytostatics and tumor decay products). The main mechanisms of antitumor cytokine therapy are the launch of cancer cell apoptosis - the restoration of the internal mechanism of cancer cell self-destruction (cytotoxic effect); cell cycle arrest - stopping non-stop division of a cancer cell at certain stages of the cell cycle (cytostatic effect); angiogenic effect - tumor necrosis and inhibition of tumor angiogenesis (due to destruction of the tumor’s internal blood vessels); activation of cells of the own antitumor cluster of the immune system (Balitsky K.L. et al. << Medicinal plants in the treatment of malignant tumors >> Kiev. 1976: Lang I, Nekam K, Deak G, et al. Immunomodulatory and hepatoprotective effects of in vivo treatment with free radical scavengers. Ital J Gastronterol 22: 283-7. 1990; Goldberg E.D., Zueva E.P. Plant preparations in the complex therapy of malignant neoplasms >> Tomsk, 2000).

Трава аврана лекарственного (Gratiola officinalis L.) в малых дозах в составе сырья других более 30 растений входит в сбор для приготовления микстуры Здренко, используемой ранее для лечения некоторых злокачественных новообразований (<<Библиотека лекарственных растений>>, том 2, составитель Зимин В.Н., Санкт-Петербург, АО <<Дорваль>>, 1992, с.181-182).Herb of medicinal avrana (Gratiola officinalis L.) in small doses in the raw materials of other more than 30 plants is included in the collection for the preparation of Zdrenko potion, previously used to treat some malignant neoplasms (<< Library of medicinal plants >>, volume 2, compiled by Zimin V. N., St. Petersburg, AO << Dorval >>, 1992, p.181-182).

Недостатком этого средства является то, что оно не воздействует на опухоли, a только устраняет симптомы. Кроме того, растение ядовито и водное извлечение травы аврана обладает высокой токсичностью, поэтому при внутреннем применении используется вместе со слизистыми отварами с большой осторожностью и под обязательным врачебным контролем (http://www.travolekar.ru/articles.php).The disadvantage of this tool is that it does not affect tumors, but only eliminates the symptoms. In addition, the plant is poisonous and the water extract of the avrana herb is highly toxic, therefore, when used internally, it is used with mucous decoctions with great care and under the mandatory medical supervision (http://www.travolekar.ru/articles.php).

Известна 10%-ная спиртовая настойка листьев аврана лекарственного, которая применяется в крайне малых дозах в связи со значительным количеством побочных эффектов и содержит ядовитые грациозид (грациолин), грациотоксин, кукурбитациновый гликозид - элатерицид, жирное масло, эфирное масло, сапонины, яблочную и бетулиновую кислоты, углеводы (стахиоза), терпеноиды (элатеризид, дезацетилэлатеринид, кукурбитации E и I), карденолиды, сапонины, флавоноиды (лигнозид, изолигнозид, апигенин, космосиин, лигнозид, аврозид, изоаврозид, неоаврозид, изонеоаврозид) и алкалоиды (0.2%) (Куркин В.А. Фармакогнозия: Учебник для студентов фармацевтических вузов. Самара: ООО <<Офорт>> СамГМУ, 2004, 1180 с.; Алефиров А.Н. Фитотерапия против онкологии. Издательство: Крылов. Серия: Медицина XXI века. 2010 г. 240 с.; http://www.travolekar.ru/articles.php; http://fitocenter.ru/). В научной медицине спиртовая настойка листьев аврана назначается при асците сердечного происхождения (за счет кукурбитацина элатеризида, кукурбитацинового гликозида). Настойка действует на сердце подобно дигиталису; малые дозы настойки повышают чувствительность зрения к зеленому цвету.Known 10% alcohol tincture of the leaves of Avrana officinalis, which is used in extremely small doses due to a significant number of side effects and contains poisonous gracioside (graciolin), graciotoxin, cucurbitacin glycoside - elatericide, fatty oil, essential oil, saponins, apple and betulin acids, carbohydrates (stachyose), terpenoids (elateriside, deacetyl elaterinide, cucurbitation E and I), cardenolides, saponins, flavonoids (lignoside, isolignoside, apigenin, cosmosyin, lignoside, avroside, isoauroside, neoauroside, isoneuroside ozide) and alkaloids (0.2%) (Kurkin VA Pharmacognosy: A textbook for students of pharmaceutical universities. Samara: OOO << Etching >> Samara State Medical University, 2004, 1180 pp .; Alefirov AN Phytotherapy against oncology. Publisher: Krylov Series: 21st Century Medicine, 2010 240 pp .; http://www.travolekar.ru/articles.php; http://fitocenter.ru/). In scientific medicine, alcohol tincture of Avrana leaves is prescribed for ascites of cardiac origin (due to cucurbitacin elateriside, cucurbitacin glycoside). Tincture acts on the heart like a digitalis; small doses of tincture increase the sensitivity of vision to green.

Недостатками 10%-ной спиртовой настойки являются ее высокая токсичность за счет присутствия ядовитых соединений, которые выходят в водную часть настойки, и недостаточное количество выхода целевых продуктов, в частности флавоноидов, а также трудность расчета точной дозировки для дальнейшего использования.The disadvantages of 10% alcohol tincture are its high toxicity due to the presence of toxic compounds that enter the water portion of the tincture, and the insufficient yield of the target products, in particular flavonoids, as well as the difficulty in calculating the exact dosage for future use.

Известно средство на основе полифенольных соединений из корней и корневищ кровохлебки лекарственной, повышающее работоспособность больных раком, обладающее антигипоксическим и стимулирующим эффектом, но не обладающее иммуномодулирующим действием (А.С. СССР 858833, A61K 33/78, 1980).Known drug based on polyphenolic compounds from the roots and rhizomes of the hemorrhagic drug, which increases the efficiency of cancer patients, has antihypoxic and stimulating effects, but does not have immunomodulatory effects (AS USSR 858833, A61K 33/78, 1980).

Известно средство на основе ксантоновых соединений и секоиридоидов из травы золототысячника с иммуномодулирующим действием, оказывающим влияние на T- и B-лимфоциты. Но такой фитокомплекс не обладает иммунопотенцирующим действием (Патент №2007178, A61K 35/78, 1994).A tool based on xanthon compounds and secoiridoids from centaury grass with an immunomodulating effect that affects T and B lymphocytes is known. But such a phytocomplex does not have an immunopotentiating effect (Patent No. 2007178, A61K 35/78, 1994).

Известно средство для профилактики рака - кламин, снижающее частоту и множественность индуцированных канцерогенами опухолей у лабораторных животных (крыс и мышей). Недостатком служит то, что кламин не обладает иммуномодулирующим действием.Known means for the prevention of cancer - clamin, reducing the frequency and multiplicity of carcinogen-induced tumors in laboratory animals (rats and mice). The disadvantage is that clamin does not have an immunomodulatory effect.

Известно средство на основе липидного комплекса хвои сосны или ели для профилактики и лечения рака. Однако противоопухолевая активность при раке молочной железы, толстой кишки у крыс статистически недостоверны. Кроме того, средство не обладает достаточной активностью для иммунопотенцирования при химиотерапии и облучении больных (Патент №2082423, A61K 35/78, 1994). К недостаткам этого средства относится то, что оно не обладает иммуномодулирующим действием.Known tool based on the lipid complex of pine or spruce needles for the prevention and treatment of cancer. However, the antitumor activity in breast cancer and colon cancer in rats is not statistically significant. In addition, the tool does not have sufficient activity for immunopotentiation during chemotherapy and irradiation of patients (Patent No. 2082423, A61K 35/78, 1994). The disadvantages of this tool include the fact that it does not have an immunomodulatory effect.

Известно средство для лечения больных раком, представляющее собой водно-спиртовую вытяжку из семян татарника колючего на 40%-ном спирте в соотношении 15:500 (Патент №2092171, А61К 35/78, 1997).Known tool for the treatment of cancer patients, which is a water-alcohol extract from the seeds of barbed thistle on 40% alcohol in a ratio of 15: 500 (Patent No. 2092171, A61K 35/78, 1997).

К недостаткам этого средства относится то, что оно не обладает иммуномодулирующим действием.The disadvantages of this tool include the fact that it does not have an immunomodulatory effect.

Задачей данного изобретения является расширение арсенала лекарственных средств за счет создания эффективного лекарственного средства, обладающего противоопухолевым и иммуномодулирующим действием.The objective of the invention is to expand the arsenal of drugs by creating an effective drug with antitumor and immunomodulatory effects.

Преимуществом предлагаемого лекарственного экстракта служит отсутствие токсичности, а также расширение функциональных возможностей средства для одновременного использования средства в онкологии и как самостоятельного иммуномодулятора.The advantage of the proposed medicinal extract is the absence of toxicity, as well as the expansion of the functionality of the drug for the simultaneous use of the drug in oncology and as an independent immunomodulator.

Впервые установлены свойства средства, представляющего собой упаренный экстракт листьев и цветков аврала лекарственного, полученного путем измельчения травы аврана лекарственного, экстракцией спиртом 96%, выпаривания экстракта, добавления хлороформа, удаления хлороформа, причем экстракцию спиртом проводят на водяной бане до кипения и кипятят в течение 14-15 минут, выпаривают при температуре 55-600°С, выпаренный экстракт разводят сначала дистиллированной водой 40-500°С, затем добавляют хлороформ в пропорции 4/5 части воды и 1/5 часть хлороформа, охлаждают до комнатной температуры и центрифугируют со скоростью 1500 оборотов в минуту в течение 15 минут, далее отделяют водную фракцию и высушивают ее, полученная биологически активная композиция обладает новыми свойствами: противоопухолевым и иммуномодулирующим [Заявка на изобретение №2012105384/15(008220), решение о выдаче от 7.02.2013 г.].For the first time, the properties of a product consisting of an evaporated extract of the leaves and flowers of medicinal Avral obtained by grinding herbs of Avran officinalis, extraction with 96% alcohol, evaporation of the extract, adding chloroform, removing chloroform were established for the first time, and extraction with alcohol is carried out in a water bath to a boil and boiled for 14 -15 minutes, evaporated at a temperature of 55-600 ° C, the evaporated extract is diluted first with distilled water at 40-500 ° C, then chloroform is added in a proportion of 4/5 parts of water and 1/5 part of chloroform, cooled to room temperature and centrifuged at a speed of 1500 rpm for 15 minutes, then the aqueous fraction is separated and dried, the obtained biologically active composition has new properties: antitumor and immunomodulating [Application for invention No. 2012105384/15 (008220), decision about extradition dated February 7, 2013].

Средство, полученное данным способом, имеет следующий химический состав полученной композиции из аврана лекарственного: 4-винил-2-метоксифенол; 2,3-дигидро-3,5-дигидрокси-6-метил-4Н-пиран-4-он: 2,3-дигидробензофуран; 3-фуранкарбоновая кислота; 5-гидроксиметил-2-фуральдегид; этил-α-d-рибозид; 4-пропилфенол; пирокатехин; L-луксоза (пентоза); 6-деоксигексоза L-галактоза; бензоилуксусной кислоты этиловый эфир; гексадекановая кислота (пальмитиновая кислота); гомованилиновая кислота; глюкоза; 1,4-ангидро-d-маннитол; бензойная кислота; кверцетин.The agent obtained by this method has the following chemical composition of the obtained composition from the drug Avran: 4-vinyl-2-methoxyphenol; 2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-4H-pyran-4-one: 2,3-dihydrobenzofuran; 3-furancarboxylic acid; 5-hydroxymethyl-2-furaldehyde; ethyl α-d-riboside; 4-propylphenol; catechol; L-Luxose (pentose); 6-deoxyhexose L-galactose; benzoyl acetic acid ethyl ester; hexadecanoic acid (palmitic acid); homovanilinic acid; glucose; 1,4-anhydro-d-mannitol; benzoic acid; quercetin.

По сравнению с получаемыми ранее водными и спиртовыми извлечениями из травы аврана полученный сухой экстракт травы аврана нетоксичен, а также обладает противоопухолевым и иммуномодулирующим действием, что может быть использовано при лечении больных со злокачественными новообразованиями.Compared to previously obtained water and alcohol extracts from the avrana herb, the obtained dry extract of the avrana herb is non-toxic, and also has an antitumor and immunomodulating effect, which can be used in the treatment of patients with malignant neoplasms.

Была проведена экспериментальная работа на лабораторных крысах по определению класса токсичности полученного сухого экстракта аврана по установлению LD50. Перед началом эксперимента, который предусматривал введение экстракта лабораторным животным (белым лабораторным крысам), сухой экстракт разводили до концентрации экстракта 45 мг/мл для перорального введения, 90 мг/мл для внутримышечного введения и для внутрибрюшинного введения. Полученный водный раствор сухого экстракта аврана вводили крысам перорально, внутримышечно и внутрибрюшинно. Состояние животных оценивалась по четырехбалльной шкале по таким показателям, как: состояние шерсти, двигательная активность, болевая реакция, изменение мышечного тонуса, почесывания за 1 минуту, температура тела (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, Хабриев Р.У., Москва, 2005).Experimental work was carried out on laboratory rats to determine the toxicity class of the obtained dry extract of Avran to establish LD 50 . Before the start of the experiment, which involved the administration of the extract to laboratory animals (white laboratory rats), the dry extract was diluted to a concentration of the extract of 45 mg / ml for oral administration, 90 mg / ml for intramuscular administration and for intraperitoneal administration. The resulting aqueous solution of dry extract of Avran was administered to rats orally, intramuscularly and intraperitoneally. The condition of the animals was evaluated on a four-point scale by such indicators as: coat condition, motor activity, pain reaction, change in muscle tone, scratching in 1 minute, body temperature (Guide to the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances, Khabriev R.U., Moscow, 2005).

Животным весом 220±12,3 г перорально вводился раствор сухого экстракта в дозировке 205 мг/кг экстракта. После чего в течение суток проводилось наблюдение за состоянием животных. Животным весом 220±12,3 г внутримышечно вводился раствор сухого экстракта в дозировке 1323 мг/кг, после чего в течение суток проводилось наблюдение за состоянием животных. Животным весом 220±12,3 г внутрибрюшинно вводился раствор сухого экстракта в дозировке 1663 мг/кг, после чего в течение суток проводилось наблюдение за состоянием животных.For animals weighing 220 ± 12.3 g, a dry extract solution was administered orally at a dosage of 205 mg / kg of extract. After that, the state of the animals was monitored during the day. For animals weighing 220 ± 12.3 g, a dry extract solution was administered intramuscularly at a dosage of 1323 mg / kg, after which monitoring of the condition of the animals was carried out during the day. For animals weighing 220 ± 12.3 g, a dry extract solution was administered intraperitoneally at a dose of 1663 mg / kg, after which monitoring of the condition of the animals was carried out during the day.

Через сутки ни одно животное не умерло, а состояние животных изменилось по значению таких показателей, как состояние шерсти (увеличилось на два балла до четырех к экспериментальной группе по сравнению с контрольной), двигательная активность (увеличилось на один балл до четырех в экспериментальной группе по сравнению с контрольной), болевая реакция (снизилась на один балл до одного в экспериментальной группе по сравнению с контрольной), мышечный тонус (увеличился на один балл до четырех в экспериментальной группе по сравнению с контрольной), почесывания за 1 минуту (увеличилось на один балл до двух в экспериментальной группе по сравнению с контрольной), температура тела (снизилась в среднем с 36,9 до 35,8°C).A day later, no animal died, and the state of the animals changed in terms of indicators such as the state of the coat (increased by two points to four to the experimental group compared to the control), motor activity (increased by one point to four in the experimental group compared control), pain response (decreased by one point to one in the experimental group compared to the control), muscle tone (increased by one point to four in the experimental group compared to the control ), Scratching for 1 minute (increased by one to two points in the experimental group compared to the control), body temperature (decreased on average from 36,9 up to 35,8 ° C).

В результате для экстракта аврана не были определены LD50, так как при указанных дозировках раствор сухого экстракта не вызвал гибели ни одной из крыс, получавших его перорально внутримышечно и внутрибрюшинно, что свидетельствует о нетоксичности экстракта в дозировках, в два раза превышающих терапевтические.As a result, LD 50 was not determined for the avran extract, since at the indicated dosages, the dry extract solution did not cause death of any of the rats that received it orally intramuscularly and intraperitoneally, which indicates the nontoxicity of the extract in dosages twice as high as therapeutic.

Была проведена экспериментальная работа с использованием перевиваемой опухоли рака печени РС-1 для определения противоопухолевой активности сухого экстракта из аврана лекарственного.Experimental work was carried out using the transplantable tumor of liver cancer RS-1 to determine the antitumor activity of the dry extract from the drug Avran.

Исследовался водный раствор сухого экстракта аврана лекарственного. В работе использованы самцы белых лабораторных крыс массой 150±50 г, которым имплантировали подкожно в области лопатки по 0,5 мл 25%-ной опухолевой взвеси в растворе Хэнкса штамма альвеолярного рака печени РС-1, развившегося из эпителия желчных ходов печени крыс. Штаммы перевиваемых опухолей получены из банка опухолевых штаммов ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. Работа с лабораторными животными осуществлялась согласно протоколу исследований и не противоречила распоряжению Президиума АН СССР №120002496 от 02.04.1980 г. «Правила проведения научных исследований с использованием экспериментальных животных» и Женевской Конвенции 1985 г. о «Международных принципах биомедицинских исследований с использованием животных». Протоколы экспериментов одобрены этической комиссией ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им В.И. Разумовского Минздравсоцразвития России (протокол №13 от 3 мая 2011 г.).We studied an aqueous solution of dry extract of Avran officinalis. We used male white laboratory rats weighing 150 ± 50 g, which were implanted subcutaneously in the scapular area with 0.5 ml of a 25% tumor suspension in the Hanks solution of the RS-1 liver alveolar cancer strain developed from the epithelium of the bile ducts of rat liver. Strains of transplantable tumors were obtained from a bank of tumor strains of the GU RONTs im. N.N. Blokhina RAMS. Work with laboratory animals was carried out in accordance with the research protocol and did not contradict the order of the Presidium of the USSR Academy of Sciences No. 120002496 of 04/02/1980, "Rules for scientific research using experimental animals" and the 1985 Geneva Convention on "International principles of biomedical research using animals." The experimental protocols were approved by the ethics committee of the SBEI HPE Saratov State Medical University named after V.I. Razumovsky Ministry of Health and Social Development of Russia (Minutes No. 13 of May 3, 2011).

Животные с перевитой опухолью печени методом случайной выборки были разделены на две группы - опытную (10 крыс), получавшую экстракт аврана лекарственного в дозировке 65 мг/кг, и контрольную интактную группу (10 крыс). Опытной группе крыс раствор вводился перорально в объеме 1 мл один раз в двое суток в течение трех недель с момента трансплантации опухоли. Динамика роста опухоли оценивалась по объему опухоли в определенные периоды времени после трансплантации опухолевой взвеси и высчитывалась по формуле V=a×b×c, где а - ширина, в - толщина, с - высота опухоли. Измерения проводились штангенциркулем.Animals with an inoculated liver tumor by random sampling were divided into two groups - experimental (10 rats), which received the drug Avrana extract at a dosage of 65 mg / kg, and the control intact group (10 rats). In the experimental group of rats, the solution was administered orally in a volume of 1 ml once every two days for three weeks from the moment of tumor transplantation. The growth dynamics of the tumor was estimated by the volume of the tumor at certain periods of time after transplantation of the tumor suspension and was calculated by the formula V = a × b × c, where a is the width, b is the thickness, and c is the height of the tumor. The measurements were carried out with a caliper.

На 26 сутки животных выводили из эксперимента и производили забор образцов ткани органов, опухоли, крови для морфологического и биохимического исследования. Для оценки патоморфоза опухоли были использованы следующие цитоморфологические показатели: диаметр раковой клетки, диаметр ядра раковой клетки, ядерно-цитоплазматический индекс (ЯЦИ) раковой клетки, рассчитываемый как отношение диаметра ядра к диаметру клетки. Анализировалось 100 опухолевых клеток с каждого препарата. Лейкоцитарная формула крови анализировалась по следующим показателям: количеству палочек, сегментов, базофилов, моноцитов, лимфоцитов, по которым высчитывается индекс эндогенной интоксикации Каль-Калифа и модификации Б.А. Рейса и соавторов (Гриц и др., 2009). Все результаты были обсчитаны в программе Statistika 6,0.On the 26th day, the animals were taken out of the experiment and samples of organ tissue, tumor, blood were sampled for morphological and biochemical studies. The following cytomorphological indicators were used to evaluate tumor pathomorphism: cancer cell diameter, cancer cell nucleus diameter, nuclear cytoplasmic index (NRC) of the cancer cell, calculated as the ratio of the diameter of the nucleus to the diameter of the cell. 100 tumor cells from each preparation were analyzed. The leukocyte blood count was analyzed by the following indicators: the number of rods, segments, basophils, monocytes, lymphocytes, which are used to calculate the index of endogenous intoxication Cal-Caliph and B.A. modifications Reis et al. (Grits et al., 2009). All results were calculated in the Statistika 6.0 program.

В группе крыс, получавших экстракт аврана, на 26 сутки после трансплантации в структуре опухоли отмечено уменьшение слизистого компонента по сравнению с контрольной группой, a также атрофические и дистрофические изменения опухолевых клеток, о чем свидетельствует появление клеток по типу «клеток теней». Митозы не выявлялись. На фигуре 1 представлены атрофические и дистрофические изменения опухолевых клеток рака печени РС-1, окрашенных гематоксилином и эозином (увеличение 100), уменьшение слизистого компонента и отсутствие фигур митоза в опухоли в группе животных, получавших экстракт аврана. Также в опухолях опытной группы животных было обнаружено появление четких зон некроза, представленное на фигуре 2.In the group of rats treated with avran extract, on the 26th day after transplantation, a decrease in the mucous component in the tumor structure was noted in comparison with the control group, as well as atrophic and dystrophic changes in the tumor cells, as evidenced by the appearance of cells as “shadow cells”. Mitoses were not detected. The figure 1 presents atrophic and dystrophic changes in tumor cells of liver cancer of the RS-1, stained with hematoxylin and eosin (increase of 100), a decrease in the mucous component and the absence of mitosis figures in the tumor in the group of animals treated with avran extract. Also in the tumors of the experimental group of animals, the appearance of clear zones of necrosis, shown in figure 2, was detected.

Диаметр ядер опухолевых клеток в группе крыс, получавших авран, составил 3,4±0,15, что на 13,5% меньше диаметра ядер клеток в контроле (4,05±0,15). Диаметр самих клеток в экспериментальной группе (5,025±0,22) был достоверно меньше на 32,7% по сравнению с диаметром клеток в контроле (7,45±0,15) (табл.1). Полученные различия достоверны при р<0,05.The diameter of the nuclei of tumor cells in the group of rats treated with Avran was 3.4 ± 0.15, which is 13.5% less than the diameter of the nuclei of cells in the control (4.05 ± 0.15). The diameter of the cells themselves in the experimental group (5.025 ± 0.22) was significantly lower by 32.7% compared with the diameter of the cells in the control (7.45 ± 0.15) (Table 1). The differences obtained are significant at p <0.05.

Таблица 1Table 1 Изменение метрических показателей клеток опухолей в контроле и под действием экстрактовChanges in the metric parameters of tumor cells in the control and under the action of extracts Под действием экстракта авранаUnder the action of Avrana extract Показатели клеток опухолиTumor cell counts В контролеIn control разряд ядра (у.е.)core discharge (c.u.) 4,05±0,154.05 ± 0.15 3,4±0,153.4 ± 0.15 размер клетки (у.е.)cell size (c.u.) 7,45±0,157.45 ± 0.15 5,025±0,225.025 ± 0.22 ЯЦИYaCI 0,54±0,030.54 ± 0.03 0,68±0,030.68 ± 0.03

Отмеченное значительное уменьшение диаметра клетки и диаметра ядра по сравнению с контрольной группой, наряду с отсутствием митозов в клетках опухоли группы крыс, получавших авран, указывает на низкую митотическую активность опухоли, что в целом свидетельствует о цитостатическом действии биологически активной композиции экстракта аврана лекарственного. Полученные данные об отсутствии фигур митоза в группе крыс, получавших экстракт аврана, позволяют сделать вывод о его цитостатической активности и торможении клеточного цикла в период S и G2 фазы и задерживанию пролиферации клеток.The noted significant decrease in cell diameter and core diameter compared with the control group, along with the absence of mitosis in the tumor cells of the rat group treated with Avran, indicates a low mitotic activity of the tumor, which generally indicates the cytostatic effect of the biologically active composition of the drug Avran extract. The data on the absence of mitosis figures in the group of rats treated with avran extract allow us to conclude its cytostatic activity and inhibition of the cell cycle during the S and G phase 2 and delayed cell proliferation.

В группе крыс, получавших экстракт аврана, отмечалось замедление роста опухоли по сравнению с контрольной группой. На фигуре 3 в см3 представлена динамика увеличения объема опухоли в контрольной группе крыс и в группе крыс, получавших экстракт аврана. Полученные нами данные о заметном замедлении роста опухоли в группе крыс, получавших экстракт аврана, вполне согласуется с гистологическими изменениями опухоли у крыс этой группы.In the group of rats treated with avran extract, a slowdown in tumor growth was observed compared with the control group. The figure 3 in cm 3 presents the dynamics of the increase in tumor volume in the control group of rats and in the group of rats treated with avran extract. Our data on a noticeable slowdown in tumor growth in the group of rats treated with avran extract are consistent with the histological changes in the tumor in rats of this group.

Об иммуномодулирующем действии сухого экстракта аврана свидетельствует выявленное нами положительное влияние экстракта аврана на состав лейкоцитарной формулы крови белых лабораторных крыс с перевитым раком печени РС-1. В лейкоцитарной формуле животных под действием экстракта аврана достоверно уменьшалось количество сегментоядерных нейтрофилов на 22,3% и увеличивалось количество лимфоцитов на 55% по сравнению с контролем (табл.2), а также по индексу эндогенной интоксикации Каль-Калифа.The immunomodulating effect of dry avran extract is evidenced by the positive effect of avran extract found on the composition of the white blood cell count of white laboratory rats with transplanted liver cancer RS-1. In the leukocyte formula of animals, under the influence of the avran extract, the number of segmented neutrophils significantly decreased by 22.3% and the number of lymphocytes increased by 55% compared with the control (Table 2), as well as by the Cal-Caliph endogenous intoxication index.

Таблица 2table 2 Изменения лейкоцитарной формулы крови крыс с перевитым раком печени РС-1 в контрольной группе и группе, получавшей экстрактыChanges in the leukocyte blood count of rats with transplanted liver cancer RS-1 in the control group and the group treated with extracts Показатели лейкоцитарной формулыLeukocyte counts В контролеIn control Под действием экстракта авранаUnder the action of Avrana extract палочкиsticks 3±0,673 ± 0.67 3±0,43 ± 0.4 сегментыsegments 60,3±2,8960.3 ± 2.89 46,8±4,1646.8 ± 4.16 базофилыbasophils 1,67±0,891.67 ± 0.89 2,75±0,882.75 ± 0.88 моноцитыmonocytes 10,67±1,5610.67 ± 1.56 10,4±3,4410.4 ± 3.44 лимфоцитыlymphocytes 24,67±1,1124.67 ± 1.11 38,2±2,5638.2 ± 2.56

Степень интоксикации определяли по лейкоцитарному интоксикационному индексу (ЛИИ) Каль-Калифа в модификации Б.А. Рейса и соавторов (Гриц и др., 2009):The degree of intoxication was determined by the leukocyte intoxication index (LII) of Cal-Calif in the modification of B.A. Reis et al. (Grits et al., 2009):

Л И И = с е г м е н т о я д е р н ы е + п а л о ч к о я д е р н ы е + ю н ы е + м и е л о ц и т ы м о н о ц и т ы + л и м ф о ц и т ы + э о з и н о ф и л ы

Figure 00000001
; L AND AND = from e g m e n t about I am d e R n s e + P but l about h to about I am d e R n s e + Yu n s e + m and e l about c and t s m about n about c and t s + l and m f about c and t s + uh about s and n about f and l s
Figure 00000001
;

В результате было выявлено, что животные в контрольной группе испытывали высокую эндогенную интоксикацию за счет развития опухолевого процесса, а под действием экстракта уровень интоксикации снижался в 2,5 раза по сравнению с контрольной группой, соответствуя литературным значениям умеренной интоксикации (табл.3).As a result, it was found that the animals in the control group experienced high endogenous intoxication due to the development of the tumor process, and under the action of the extract the level of intoxication decreased by 2.5 times compared to the control group, corresponding to the literary values of moderate intoxication (Table 3).

Таблица 3Table 3 Степень интоксикации в контрольной группе крыс и крыс, получавших средство на основе авранаThe degree of intoxication in the control group of rats and rats treated with Avrana Группа животныхGroup of animals ЛИИLII Степень интоксикацииDegree of intoxication КонтрольнаяControl 2,582,58 выраженнаяpronounced Под действием экстрактаUnder the action of the extract 1,021,02 умереннаяmoderate

Увеличение количества лимфоцитов в лейкоцитарной формуле у животных с перевитым раком печени РС-1 под действием экстракта аврана на фоне развивающейся опухоли свидетельствует о включении иммунных механизмов специфической защиты организма в целом, а также возможной активации естественных NK-киллеров, активирующих апоптоз в атипичных клетках.The increase in the number of lymphocytes in the leukocyte formula in animals with transplanted liver cancer RS-1 under the action of an avran extract against the background of a developing tumor indicates the inclusion of immune mechanisms of specific protection of the body as a whole, as well as the possible activation of natural NK killers that activate apoptosis in atypical cells.

Изменения во внутренних органах лабораторных животных под действием экстракта аврана носили слабовыраженный характер. Кроме того, состояние животных изменилось по значению таких показателей, как состояние шерсти (увеличилось на два балла до четырех в экспериментальной группе по сравнению с контрольной), двигательная активность (увеличилось на один балл до четырех в экспериментальной группе по сравнению с контрольной), болевая реакция (снизилась на один балл до одного в экспериментальной группе по сравнению с контрольной), мышечный тонус (увеличился на один балл до четырех в экспериментальной группе по сравнению с контрольной), почесывания за 1 минуту (увеличилось на один балл до двух в экспериментальной группе по сравнению с контрольной), температура тела (снизилась в среднем с 36,9 до 35,8°C). Все перечисленные изменения с животными, получавшими экстракт аврана, положительные, что указывает на низкую токсичность экстракта и свидетельствует об иммуностимуляции.Changes in the internal organs of laboratory animals under the action of an extract of avrana were mild. In addition, the state of the animals changed in terms of indicators such as the state of the coat (increased by two points to four in the experimental group compared to the control), motor activity (increased by one point to four in the experimental group compared to the control), pain (decreased by one point to one in the experimental group compared to the control), muscle tone (increased by one point to four in the experimental group compared to the control), scratching in 1 minute (uve increased by one point to two in the experimental group compared with the control group), body temperature (decreased on average from 36.9 to 35.8 ° C). All these changes with animals treated with Avrana extract are positive, which indicates a low toxicity of the extract and indicates immunostimulation.

Таким образом, полученный экстракт аврана лекарственного обладает одновременно комплексом свойств, необходимых для профилактики и лечения онкологических заболеваний: противоопухолевыми (преимущественно цитостатическими) и иммуномодулируюшими свойствами (возможной активации NK-киллеров, активирующих апоптоз в атипичных клетках), что, наряду с низкой токсичностью, позволяет использовать его как средство в комплексной терапии злокачественных новообразований.Thus, the obtained extract of Avrana drug simultaneously possesses a set of properties necessary for the prevention and treatment of cancer: antitumor (mainly cytostatic) and immunomodulating properties (possible activation of NK-killers that activate apoptosis in atypical cells), which, along with low toxicity, allows use it as a tool in the treatment of malignant neoplasms.

Пример. Траву аврана измельчали и просеивали через сито с размером ячеек не более 3 мм. Взвесили 10 г измельченного сырья, поместили его в колбу объемом 500 мл, добавили 100 мл этилового спирта 96%, на водяной бане довели до кипения и кипятили в течение 14-15 мин. Экстракт из колбы процедили в стеклянную емкость через 4 слоя широкого бинта, остаток растительного материала тщательно отжали, залили еще 100 мл этилового спирта 96%. Довели до кипения и снова профильтровали в ту же стеклянную емкость. Полученный экстракт выпарили досуха в термостате при температуре не выше 55-60°C. В стеклянную емкость с выпаренным экстрактом добавили 8 мл дистиллированной воды, затем с помощью шприца перенесли полученный раствор в пластиковую центрифужную пробирку объемом 11 мл, добавили 2 мл хлороформа, встряхнули несколько раз до однородности, остудили до комнатной температуры и центрифугировали в течение 15 мин (для удаления неполярных примесей (хлорофилла) и др.) при скорости 1500 оборотов в минуту. Водную фракцию собирали с помощью шприца, поместили в заранее взвешенную чашку Петри, высушили и в таком виде хранили до начала эксперимента. Вес сухого экстракта подсчитали как разницу между весом взвешенной чашкой Петри с сухим экстрактом и весом пустой чашки Петри. Получили 225 мг сухого экстракта аврана.Example. Avrana grass was crushed and sieved through a sieve with a mesh size of not more than 3 mm. 10 g of the crushed raw material was weighed, placed in a 500 ml flask, 100 ml of ethanol 96% was added, the mixture was brought to a boil in a water bath and boiled for 14-15 minutes. The extract from the flask was filtered into a glass container through 4 layers of a wide bandage, the remainder of the plant material was carefully squeezed out, another 100 ml of ethanol 96% was poured. It was brought to a boil and filtered again in the same glass container. The resulting extract was evaporated to dryness in a thermostat at a temperature not exceeding 55-60 ° C. 8 ml of distilled water was added to the glass container with the evaporated extract, then the resulting solution was transferred into a 11 ml plastic centrifuge tube using a syringe, 2 ml of chloroform was added, it was shaken several times until uniform, cooled to room temperature and centrifuged for 15 min (for removal of non-polar impurities (chlorophyll), etc.) at a speed of 1500 rpm. The aqueous fraction was collected using a syringe, placed in a pre-weighed Petri dish, dried and stored as such until the start of the experiment. The weight of the dry extract was calculated as the difference between the weight of the weighed Petri dish with the dry extract and the weight of the empty Petri dish. Received 225 mg of dry extract of Avran.

Полученные 225 мг сухого экстракта из травы аврана лекарственного исследовали методом хромато-масс-спектрометром модели Trace (GC-Trace DSQ (фирма “ThermoFinnigan”, США). В рамках выполненной работы были выделены органические вещества: -4-винил-2-метоксифенол; 2,3-дигидро-3,5-дигидрокси-6-метил-4H-пиран-4-он; 2,3-дигидробензофуран; 3-фуранкарбоновая кислота; 5-гидроксиметил-2-фуральдегид; этил-α-d-рибозид; 4-пропилфенол; пирокатехин; L-луксоза (пентоза); 6-деоксигексоза L-галактоза; бензоилуксусной кислоты этиловый эфир; гексадекановая кислота (пальмитиновая кислота); гомованилиновая кислота; глюкоза; 1,4-ангидро-d-маннитол; бензойная кислота; кверцетин.The obtained 225 mg of dry extract from the herb of Avrana officinalis was studied using the Trace model chromatography-mass spectrometer (GC-Trace DSQ (ThermoFinnigan, USA). Organic substances were isolated as part of this work: -4-vinyl-2-methoxyphenol; 2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-4H-pyran-4-one; 2,3-dihydrobenzofuran; 3-furancarboxylic acid; 5-hydroxymethyl-2-furaldehyde; ethyl-α-d-riboside ; 4-propylphenol; pyrocatechol; L-lucose (pentose); 6-deoxyhexose L-galactose; benzoyl acetic acid ethyl ester; hexadecanoic acid (palmitic acid); omovanilinovaya acid; glucose, 1,4-anhydro-d-mannitol, benzoic acid, quercetin.

В эксперименте использовался самец крысы, массой 160 г, которому подкожно в области лопатки имплантировали опухолевую взвесь штамма альвеолярного рака печени PC-1 по 0,5 мл 25% в растворе Хэнкса. Водный раствор сухого экстракта аврана вводили перорально с помощью шприца в объеме 1 мл один раз в двое суток в течение трех недель с момента трансплантации опухоли. Была использована дозировка 65 мг/кг. Динамику роста опухоли оценивали по увеличению ее объема через 6, 8, 10, 12, 14, 20, 22 и 24 суток. Измерения проводились штангенциркулем. На 26 сутки крысу вывели из эксперимента и произвели забор образцов ткани органов, опухоли, крови для морфологического и биохимического исследования.In the experiment, a male rat, weighing 160 g, was used, to which a tumor suspension of the PCA-1 alveolar liver cancer strain 0.5 ml of 25% in Hanks's solution was implanted subcutaneously in the scapular region. An aqueous solution of the dry extract of Avran was administered orally with a syringe in a volume of 1 ml once every two days for three weeks from the moment of tumor transplantation. A dosage of 65 mg / kg was used. The dynamics of tumor growth was evaluated by increasing its volume after 6, 8, 10, 12, 14, 20, 22, and 24 days. The measurements were carried out with a caliper. On day 26, the rat was taken out of the experiment and samples of organ tissue, tumor, blood were sampled for morphological and biochemical studies.

В структуре исследуемой опухоли отмечалось заметное уменьшение слизистого компонента; появление клеток по типу <<клеточных теней>> и четких зон некроза, что свидетельствовало об атрофических и дистрофических изменениях опухолевых клеток. Митозы в клетках опухоли не выявлялись. Диаметр ядер опухолевых клеток составил в среднем 3,2±0,10 у.е., диаметр самой клетки - 5,00±0,12 у.е. Отсутствие митозов и уменьшение диаметра клетки и диаметра ядра (по сравнению со средними значениями в контрольной группе крыс) указывают на низкую митотическую активность клеток опухоли.In the structure of the studied tumor, a noticeable decrease in the mucous component was noted; the appearance of cells of the type << cell shadows >> and clear zones of necrosis, which indicated atrophic and degenerative changes in tumor cells. Mitoses in the tumor cells were not detected. The diameter of the nuclei of tumor cells averaged 3.2 ± 0.10 cu, the diameter of the cell itself - 5.00 ± 0.12 cu The absence of mitoses and a decrease in cell diameter and nucleus diameter (compared with the average values in the control group of rats) indicate a low mitotic activity of tumor cells.

Изменение объема опухоли крысы, получавшей экстракт аврана, через 6 суток - 0 см3, 8-0 см3, 10-2,89 см3, 12-4,8 см3, 14-8,91 см3, 20-11,88 см3, 22-18,24 см3 и 24-18,36 см3, свидетельствует о заметом замедлении роста опухоли (по сравнению со средними значениями объема в контрольной группе крыс).The change in the tumor volume of a rat treated with Avran extract after 6 days - 0 cm 3 , 8-0 cm 3 , 10-2.89 cm 3 , 12-4.8 cm 3 , 14-8.91 cm 3 , 20-11 , 88 cm 3 , 22-18,24 cm 3 and 24-18,36 cm 3 , indicates a marked slowdown in tumor growth (compared with the average volume in the control group of rats).

В лейкоцитарной формуле крысы под действием экстракта аврана: палочек - 3, сегментов - 42, базофилов - 2, моноцитов - 10, лимфоцитов - 38. Отмечается уменьшение количества сегментоядерных нейтрофилов на 22% и увеличение количества лимфоцитов на 54% (по сравнению со средними значениями в контрольной группе крыс), что свидетельствует об иммуномодулирующем действии аврана у крысы с перевитым раком печени РС-1.In the rat's leukocyte formula, under the influence of an extract of avran: rods - 3, segments - 42, basophils - 2, monocytes - 10, lymphocytes - 38. There is a decrease in the number of segmented neutrophils by 22% and an increase in the number of lymphocytes by 54% (compared with average values in the control group of rats), which indicates the immunomodulating effect of Avran in rats with transplanted liver cancer RS-1.

Отмечена также умеренная степень интоксикации, рассчитанная по лейкоцитарному интоксикационному индексу (ЛИИ) Каль-Калифа и равная 1,0.A moderate degree of intoxication was also calculated, calculated by the leukocyte intoxication index (LII) of Cal-Calif and equal to 1.0.

Изменения во внутренних органах крысы под действием экстракта аврана носили слабовыраженный характер. Через сутки состояние крысы изменилось по значению таких показателей, как состояние шерсти (увеличилось на два балла до четырех по сравнению с исходным), двигательная активность (увеличилось на один балл до четырех по сравнению с исходным), болевая реакция (снизилась на один балл до одного по сравнению с исходным), мышечный тонус (увеличился на один балл до четырех по сравнению с исходным), почесывания за 1 минуту (увеличилось на один балл до двух по сравнению с исходным), температура тела (снизилась с 36,9 до 35,7°C). Такие изменения в состоянии крысы косвенно свидетельствуют о повышении иммунитета на фоне раковой опухоли под действием экстракта аврана.Changes in the internal organs of the rat under the action of the extract of avrana were mild. A day later, the state of the rat changed in terms of indicators such as the state of the coat (increased by two points to four compared to the original), motor activity (increased by one point to four compared to the original), pain response (decreased by one point to one compared with the original), muscle tone (increased by one point to four compared to the original), scratching in 1 minute (increased by one point to two compared to the original), body temperature (decreased from 36.9 to 35.7 ° C). Such changes in the condition of the rat indirectly indicate an increase in immunity against the background of a cancerous tumor under the action of avran extract.

Применение водного раствора сухого экстракта аврана лекарственного у крысы с перевитым раком печени РС-1 показало, что данное средство обладает противоопухолевым и иммуномодулирующем действием.The use of an aqueous solution of dry extract of avrana officinalis in a rat with transplanted liver cancer RS-1 showed that this agent has an antitumor and immunomodulating effect.

Как видно из описания и примера, средство представляет собой сухой экстракт травы аврана лекарственного и не содержит токсичные соединения алкалоиды и гликозиды, находящиеся в растении. Средство уникально тем, что не является токсичным и в то же время способствует задержке роста опухоли, вызывает в ней дистрофические изменения и некрозы, а также благоприятно воздействует на организм лабораторного животного с опухолью, значительно снижая эндогенную интоксикацию и повышая иммунитет.As can be seen from the description and example, the tool is a dry extract of the herb Avrana officinalis and does not contain the toxic compounds alkaloids and glycosides present in the plant. The tool is unique in that it is not toxic and at the same time helps to delay the growth of the tumor, causes dystrophic changes and necrosis in it, and also favorably affects the body of the laboratory animal with the tumor, significantly reducing endogenous intoxication and increasing immunity.

Claims (1)

Средство, обладающее противоопухолевым и иммуномодулирующим действием, представляющее собой сухой экстракт листьев и цветков аврана лекарственного, полученный путем измельчения их, экстракции спиртом 96% на водяной бане до кипения и кипячения в течение 14-15 минут, выпаривания при температуре 55-60°С, разведения выпаренного остатка сначала дистиллированной водой при температуре 40-50°С, затем добавления хлороформа в пропорции 4/5 части воды и 1/5 часть хлороформа, охлаждения до комнатной температуры и центрифугирования со скоростью 1500 оборотов в минуту в течение 15 минут с последующим отделением водной фракции и высушиванием ее. An agent with antitumor and immunomodulatory effects, which is a dry extract of leaves and flowers of medicinal Avran, obtained by grinding them, extraction with 96% alcohol in a water bath until boiling and boiling for 14-15 minutes, evaporation at a temperature of 55-60 ° C, diluting the evaporated residue first with distilled water at a temperature of 40-50 ° C, then adding chloroform in a proportion of 4/5 parts of water and 1/5 part of chloroform, cooling to room temperature and centrifuging at a speed of 1500 rpm per minute for 15 minutes, followed by separation of the aqueous fraction and drying it.
RU2013112710/15A 2013-03-21 2013-03-21 Agent possessing antineoplastic and immunomodulatory action RU2519769C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2013112710/15A RU2519769C1 (en) 2013-03-21 2013-03-21 Agent possessing antineoplastic and immunomodulatory action

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2013112710/15A RU2519769C1 (en) 2013-03-21 2013-03-21 Agent possessing antineoplastic and immunomodulatory action

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2519769C1 true RU2519769C1 (en) 2014-06-20

Family

ID=51216822

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2013112710/15A RU2519769C1 (en) 2013-03-21 2013-03-21 Agent possessing antineoplastic and immunomodulatory action

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2519769C1 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2578440C1 (en) * 2015-04-13 2016-03-27 Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Саратовский Государственный Медицинский Университет Имени В.И. Разумовского" Министерства Здравоохранения Российской Федерации Product for treatment of tumor cachexia
RU2731105C2 (en) * 2018-04-25 2020-08-28 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского" Министерства здравоохранения Российской Федерации Agent causing in vivo experiments in substitution of tumor connective tissue and transferring tumor cells from g1 phase of cell cycle into rest state g0
RU2734143C1 (en) * 2020-03-04 2020-10-13 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Саратовский государственный медицинский университет имени В.И. Разумовского" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Минздрава России) Method of combined liver cancer pc-1 therapy in experiment

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1063118A (en) * 1964-12-01 1967-03-30 Roger Bellon Plant extract
US5399349A (en) * 1992-02-06 1995-03-21 Paunescu; Calin Treatment of acne
RU2155062C1 (en) * 1999-11-10 2000-08-27 Общество с ограниченной ответственностью "ФИТОГАЛЕНИКА" Method of preparing drug with enhanced activity and drug

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1063118A (en) * 1964-12-01 1967-03-30 Roger Bellon Plant extract
US5399349A (en) * 1992-02-06 1995-03-21 Paunescu; Calin Treatment of acne
RU2155062C1 (en) * 1999-11-10 2000-08-27 Общество с ограниченной ответственностью "ФИТОГАЛЕНИКА" Method of preparing drug with enhanced activity and drug

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Авран лекарственный. Перечень данных [он-лайн] 19.05.2011 [Найдено 2014.01.09]- найдено из Интернет: URL: http//www.doroga-istin.ru>index.php… *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2578440C1 (en) * 2015-04-13 2016-03-27 Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Саратовский Государственный Медицинский Университет Имени В.И. Разумовского" Министерства Здравоохранения Российской Федерации Product for treatment of tumor cachexia
RU2731105C2 (en) * 2018-04-25 2020-08-28 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского" Министерства здравоохранения Российской Федерации Agent causing in vivo experiments in substitution of tumor connective tissue and transferring tumor cells from g1 phase of cell cycle into rest state g0
RU2734143C1 (en) * 2020-03-04 2020-10-13 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Саратовский государственный медицинский университет имени В.И. Разумовского" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Минздрава России) Method of combined liver cancer pc-1 therapy in experiment

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2482863C1 (en) Method for preparing dry extract of herbal raw material possessing biological activity
Lis et al. Hawthorn (Crataegus monogyna) phenolic extract modulates lymphocyte subsets and humoral immune response in mice
ES2719958T3 (en) Medicinal composition of seed extract of Emblica officinalis and method to prepare it
CN101099566B (en) Lactucin and its preparation method and application
RU2519769C1 (en) Agent possessing antineoplastic and immunomodulatory action
CN103446525B (en) Treat dermopathic Chinese medicine composition and its preparation method and application
CN102258598B (en) Medicine prepared by active part of pawpaw, its preparation method and its application
KR101805801B1 (en) Pharmaceutical composition for prevention or treatment of Parkinson&#39;s disease comprising tilianin
CN102641308A (en) Taxus chinensis var mairei Chinese herbal material as well as processing method and application thereof
KR100711028B1 (en) Obesity and type 2 diabetes prevention and treatment composition comprising juniper extract or cedrol
CN109602759A (en) The use of Lohan pine fruit polysaccharide
KR0160108B1 (en) Anticancer agent of raw ingredient extracted from the tree named gleditschia officinalis
CN103735653A (en) Traditional Chinese medicine extract with anti-tumor activity as well as preparation method and use thereof
Angeles-López et al. Neuroprotective evaluation of Tilia americana and Annona diversifolia in the neuronal damage induced by intestinal ischemia
CN113491679A (en) Application of phytol in preparation of anti-migraine drug
RU2535155C1 (en) Agent possessing anti-inflammatory, antipyretic and antimicrobial action
KR20100134463A (en) Fat-soluble Ginseng Extract Composition for Cancer Cell Growth Inhibition, Pharmaceutical Composition and Health Food
Karthikeyan et al. Scientific validation of the usefulness of Withania somnifera Dunal. in the prevention of diseases
KR100733764B1 (en) Composition for the prevention and treatment of hyperlipidemia containing Hailhwanpi extract or Kuraridinol isolated therefrom
Garmashov et al. Technological parameters of countercurrent extraction: deriving bioactive compounds from plant raw materials
RU2695328C1 (en) Method for preparing medicinal substances from moldovian dragonhead (dracocephalum moldavica l.)
CN113350390A (en) Total sesquiterpene lactone of saussurea involucrata, preparation method and pharmaceutical application thereof
KR100485936B1 (en) Anticarcinogenic constituents of ginsenoside Rh2 and Rg3
CN101816702B (en) Lung cancer preventing and treating composition extracted from selfheal and/or garden orache and application thereof in preparation of lung cancer preventing and treating medicine
KR102183670B1 (en) Process for preparing alcoholic fatty liver relaxation composition using Moringa oleifera and composition thereof