RU2595839C2 - Антитело к cd38 и леналидомид или бортезомиб для лечения множественной миеломы и nhl - Google Patents
Антитело к cd38 и леналидомид или бортезомиб для лечения множественной миеломы и nhl Download PDFInfo
- Publication number
- RU2595839C2 RU2595839C2 RU2013113933/15A RU2013113933A RU2595839C2 RU 2595839 C2 RU2595839 C2 RU 2595839C2 RU 2013113933/15 A RU2013113933/15 A RU 2013113933/15A RU 2013113933 A RU2013113933 A RU 2013113933A RU 2595839 C2 RU2595839 C2 RU 2595839C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- seq
- combination
- sequence
- region
- lenalidomide
- Prior art date
Links
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 title claims abstract description 71
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 title claims abstract description 66
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 title claims abstract description 64
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 title claims abstract description 56
- GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N lenalidomide Chemical compound C1C=2C(N)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 119
- 229960004942 lenalidomide Drugs 0.000 claims abstract description 116
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 claims abstract description 96
- 101000777636 Homo sapiens ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 claims abstract description 94
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 45
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 claims abstract description 34
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims abstract description 19
- UVSMNLNDYGZFPF-UHFFFAOYSA-N pomalidomide Chemical compound O=C1C=2C(N)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UVSMNLNDYGZFPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229960000688 pomalidomide Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 163
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 83
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims description 74
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 claims description 36
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 36
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 claims description 28
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 claims description 18
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 claims description 18
- 239000011885 synergistic combination Substances 0.000 claims description 17
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 7
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 abstract description 29
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 22
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 22
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 64
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 61
- 238000000034 method Methods 0.000 description 41
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 23
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 20
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 20
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 18
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 17
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 17
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 17
- 229940079156 Proteasome inhibitor Drugs 0.000 description 15
- 238000010603 microCT Methods 0.000 description 15
- 239000003207 proteasome inhibitor Substances 0.000 description 15
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 14
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 13
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 13
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 11
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 11
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 11
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 10
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 10
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 10
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 9
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 9
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 8
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 208000004698 branchiootic syndrome Diseases 0.000 description 7
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 7
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 7
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 7
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 7
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 7
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 6
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 6
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 6
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 6
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 6
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 6
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 208000007452 Plasmacytoma Diseases 0.000 description 5
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 5
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 5
- -1 for example Chemical class 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 5
- 229940099039 velcade Drugs 0.000 description 5
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 4
- BQOHYSXSASDCEA-KEOHHSTQSA-N Cyclic ADP-Ribose Chemical compound C([C@@H]1[C@H]([C@H]([C@@H](O1)N1C=2N=CN3C(C=2N=C1)=N)O)O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]3O1 BQOHYSXSASDCEA-KEOHHSTQSA-N 0.000 description 4
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 4
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 4
- 101100191385 Mus musculus Prkdc gene Proteins 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 230000034994 death Effects 0.000 description 4
- AUZONCFQVSMFAP-UHFFFAOYSA-N disulfiram Chemical compound CCN(CC)C(=S)SSC(=S)N(CC)CC AUZONCFQVSMFAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 229950002736 marizomib Drugs 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- NGWSFRIPKNWYAO-SHTIJGAHSA-N salinosporamide A Chemical compound C([C@@H]1[C@H](O)[C@]23C(=O)O[C@]2([C@H](C(=O)N3)CCCl)C)CCC=C1 NGWSFRIPKNWYAO-SHTIJGAHSA-N 0.000 description 4
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 4
- 239000008354 sodium chloride injection Substances 0.000 description 4
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 4
- 101100075830 Caenorhabditis elegans mab-5 gene Proteins 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 3
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 3
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 3
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 3
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 3
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 3
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 3
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 3
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 3
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 3
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 3
- NGWSFRIPKNWYAO-UHFFFAOYSA-N salinosporamide A Natural products N1C(=O)C(CCCl)C2(C)OC(=O)C21C(O)C1CCCC=C1 NGWSFRIPKNWYAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 3
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 3
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N (-)-Epigallocatechin-3-o-gallate Chemical compound O([C@@H]1CC2=C(O)C=C(C=C2O[C@@H]1C=1C=C(O)C(O)=C(O)C=1)O)C(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N 0.000 description 2
- 229930014124 (-)-epigallocatechin gallate Natural products 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108050008264 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 description 2
- 241000208199 Buxus sempervirens Species 0.000 description 2
- 238000004956 CI calculation Methods 0.000 description 2
- 101150015280 Cel gene Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- WMBWREPUVVBILR-UHFFFAOYSA-N GCG Natural products C=1C(O)=C(O)C(O)=CC=1C1OC2=CC(O)=CC(O)=C2CC1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 2
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 101710085938 Matrix protein Proteins 0.000 description 2
- 101710127721 Membrane protein Proteins 0.000 description 2
- 102100032965 Myomesin-2 Human genes 0.000 description 2
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N calcein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(O)=O)CC(=O)O)C(O)=C1 DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000002737 cell proliferation kit Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 2
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 2
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 2
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000004141 dimensional analysis Methods 0.000 description 2
- 229960002563 disulfiram Drugs 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 239000002532 enzyme inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 201000003444 follicular lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 2
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 2
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 2
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 229960002378 oftasceine Drugs 0.000 description 2
- WRUUGTRCQOWXEG-UHFFFAOYSA-N pamidronate Chemical compound NCCC(O)(P(O)(O)=O)P(O)(O)=O WRUUGTRCQOWXEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 229940120975 revlimid Drugs 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 2
- 229940034915 thalomid Drugs 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- XRASPMIURGNCCH-UHFFFAOYSA-N zoledronic acid Chemical compound OP(=O)(O)C(P(O)(O)=O)(O)CN1C=CN=C1 XRASPMIURGNCCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LSHVYAFMTMFKBA-PZJWPPBQSA-N (+)-catechin-3-O-gallate Chemical compound O([C@H]1CC2=C(O)C=C(C=C2O[C@@H]1C=1C=C(O)C(O)=CC=1)O)C(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LSHVYAFMTMFKBA-PZJWPPBQSA-N 0.000 description 1
- UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 4-isocyanato-4'-methyldiphenylmethane Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CC1=CC=C(N=C=O)C=C1 UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010027122 ADP-ribosyl Cyclase 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 101100447914 Caenorhabditis elegans gab-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- DAQAKHDKYAWHCG-UHFFFAOYSA-N Lactacystin Natural products CC(=O)NC(C(O)=O)CSC(=O)C1(C(O)C(C)C)NC(=O)C(C)C1O DAQAKHDKYAWHCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 101100000208 Mus musculus Orm2 gene Proteins 0.000 description 1
- DNFNPIVNSWRWNX-UHFFFAOYSA-N OP(O)(O)=O.OC(=O)C1=CC=CN=C1.NC1=NC=NC2=C1NC=N2 Chemical compound OP(O)(O)=O.OC(=O)C1=CC=CN=C1.NC1=NC=NC2=C1NC=N2 DNFNPIVNSWRWNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003076 Osteolysis Diseases 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- PWJFNRJRHXWEPT-AOOZFPJJSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2r,3r,4r)-2,3,4-trihydroxy-5-oxopentyl] hydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O)[C@@H](O)[C@H]1O PWJFNRJRHXWEPT-AOOZFPJJSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 102000035181 adaptor proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005764 adaptor proteins Proteins 0.000 description 1
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 125000003180 beta-lactone group Chemical group 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N calcein am Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=C(OC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(=O)C)C(OC(C)=O)=C1 BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003560 cancer drug Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229960002438 carfilzomib Drugs 0.000 description 1
- 108010021331 carfilzomib Proteins 0.000 description 1
- BLMPQMFVWMYDKT-NZTKNTHTSA-N carfilzomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)[C@]1(C)OC1)NC(=O)CN1CCOCC1)CC1=CC=CC=C1 BLMPQMFVWMYDKT-NZTKNTHTSA-N 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 206010012818 diffuse large B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 150000004659 dithiocarbamates Chemical class 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N epoxyketone group Chemical group O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000006569 extramedullary plasmacytoma Diseases 0.000 description 1
- 238000000556 factor analysis Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000052645 human CD38 Human genes 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- DAQAKHDKYAWHCG-RWTHQLGUSA-N lactacystin Chemical compound CC(=O)N[C@H](C(O)=O)CSC(=O)[C@]1([C@@H](O)C(C)C)NC(=O)[C@H](C)[C@@H]1O DAQAKHDKYAWHCG-RWTHQLGUSA-N 0.000 description 1
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 1
- 208000029791 lytic metastatic bone lesion Diseases 0.000 description 1
- 238000009115 maintenance therapy Methods 0.000 description 1
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Chemical class 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 description 1
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 1
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 1
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 1
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 1
- 229940046231 pamidronate Drugs 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 229940076788 pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 201000006845 reticulosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000029922 reticulum cell sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000011476 stem cell transplantation Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 229960004276 zoledronic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940002005 zometa Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
- A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/69—Boron compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/05—Dipeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/07—Tetrapeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
- C07K16/3061—Blood cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
- C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Pyrrole Compounds (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к области медицины, конкретнее к области лечения опухолевых заболеваний. Изобретение представляет собой синергическую комбинацию (1) антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14) или GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и (2) леналидомида, помалидомида или бортезомиба, для применения при лечении множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы. Заявленное изобретение эффективно в лечении вышеуказанных опухолевых заболеваний. 16 з.п. ф-лы, 20 ил., 21 табл., 12 пр.
Description
Перекрестная ссылка на родственные заявки
Настоящая заявка заявляет преимущество предварительной заявки на патент США с серийным номером 61/486814, поданной 17 мая 2011 года, предварительной заявки на патент США с серийным номером 61/468607, поданной 29 марта 2011 года, предварительной заявки на патент США с серийным номером 61/437696, поданной 31 января 2011 года, и предварительной заявки на патент США с серийным номером 61/386619, поданной 27 сентября 2010 года, которые включены ссылкой в своей полноте.
Предпосылки изобретения
Множественная миелома представляет собой В-клеточную неоплазию, характеризующуюся скрытым накоплением в костном мозге секреторных плазмацитов с низким пролиферативным индексом и увеличенной продолжительностью жизни. Заболевание в конечном итоге поражает кости и костный мозг, приводя в результате к множественным опухолям и повреждениям по всей костной системе.
Приблизительно 1% всех форм рака и чуть более чем 10% всех гемобластозов мот быть связаны с множественной миеломой (ММ). Заболеваемость ММ возрастает у стареющего населения, причем медианный возраст на момент диагностирования составляет приблизительно 61 год. Доступные в настоящее время терапевтические средства для множественной миеломы включают химиотерапию, трансплантацию стволовых клеток, Thalomid® (талидомид), Velcade® (бортезомиб), Aredia® (памидронат) и Zometa® (золедроновая кислота). Современные протоколы лечения, которые включают сочетание химиотерапевтических средств, таких как винкристин, BCNU, мелфалан, циклофосфамид, адриамицин и преднизон или дексаметазон, дают показатель полной ремиссии только приблизительно 5%, и медиана выживаемости составляет приблизительно 36-48 месяцев от времени диагностирования. Недавние достижения с применением высокодозовой химиотерапии с последующей трансплантацией аутогенного костного мозга или мононуклеарных клеток периферической крови повысили показатель полной ремиссии и длительность ремиссии. Тем не менее, обтай выживаемость продлилась лишь незначительно, и не было получено доказательства излечения. В конечном счете, у пациентов с ММ часто возникают рецидивы даже при поддерживающей терапии интерфероном-альфа (IFN-α) самим по себе или в сочетании со стероидами.
Неходжкинская лимфома представляет собой широкую классификационную группу лимфом, которые представляют собой формы рака, происходящие из лимфатической системы, когда лимфоциты (В-клетки или Т-клетки) становятся злокачественными и бесконтрольно пролиферируют с образованием опухолевой массы. В совокупности NHL включает около 30 различных подтипов лимфомы, включая диффузную В-крупноклеточную лимфому (DLBCL) и фолликулярную лимфому (FL). Заболеваемость NHL достигнет более 140000 на основных рынках к 2019. Доступные методы лечения включают Rituxan/MabThera, их комбинации, такие как, R-CHOP (ритуксимаб, циклофосфамид, доксорубицин, винкристин и преднизон), R-CVP (Rituxan, циклофосфамид, винкристин и преднизон) и химиотерапию. К тому же можно предусматривать трансплантацию гемопоэтических клеток после ремиссии или после рецидива. Несмотря на современные методы лечения, однако, показатели выживаемости в пределах групп повышенного риска агрессивной NHL могут составлять только 30% за 5 лет. Следовательно, остается сильная неудовлетворенная потребность в эффективных средствах лечения и средствах комплексного лечения.
CD38 представляет собой пример антигена, экспрессированного на таких злокачественных плазмацитах и других лимфоцитах. Функции, приписываемые CD38, включают как роль рецепторного опосредования в адгезии и передаче сигнала, так и (экто)ферментативную активность. Как экзофермент CD38 использует NAD+ в качестве субстрата для образования циклической ADP-рибозы (cADPR) и ADPR, а также никотинамида и никотиновой кислоты-аденин динуклеотид фосфата (NAADP). Было показано, что cADPR и NAADP действуют как вторичные мессенджеры для мобилизации Са2+. Превращая NAD+ в cADPR, CD38 контролирует концентрацию внеклеточного NAD+ и, следовательно, выживание клеток путем модуляции индуцируемой NAD клеточной смерти (NCID). В дополнение к передаче сигнала через Са2+ передача сигнала CD38 происходит посредством взаимодействия (cross-talk) с комплексами антиген-рецептор на Т- и В-клетках или другими типами рецепторных комплексов, например, молекулы МНС, и является таким образом вовлеченной в несколько клеточных ответов, а также в переключение и секрецию IgG.
Антитела, специфичные к CD38, описаны в WO 1999/62526 (Mayo Foundation); WO 200206347 (Crucell Holland); US 2002164788 (Jonathan Ellis), которые включены по ссылке в своей полноте; WO 2005/103083 (MorphoSys AG), заявке на патент США с серийным номером 10/588568, которая включена по ссылке в своей полноте, WO 2006/125640 (MorphoSys AG). заявке на патент США с серийным номером 11/920830, которая включена по ссылке в своей полноте, и WO 2007/042309 (MorphoSys AG), заявке на патент США с серийным номером 12/089806, которая включена по ссылке в своей полноте; WO 2006099875 (Genmab), заявке на патент США с серийным номером 11/886932, которая включена по ссылке в своей полноте: и WO 08/047242 (Sanofi-Aventis), заявке на патент США с серийным номером 12/441466, которая включена по ссылке в своей полноте.
Комбинации антител, специфичных к CD38, и других средств описаны в WO 200040265 (Research Development Foundation); WO 2006099875 и WO 2008037257 (Genmab); и WO 2010061360, WO 2010061359, WO 2010061358 и WO 2010061357 (Sanofi Aventis), все из которых включены по ссылке в своей полноте. Ясно, что, несмотря на недавний прогресс в исследовании и разработке противораковых средств, многие формы рака, включающие экспрессирующие CD38 опухоли, все еще имеют неблагоприятный прогноз. Таким образом, существует потребность в улучшенных способах лечения таких форм рака.
Краткое описание
В одном аспекте настоящее раскрытие относится к синергической комбинации антитела, специфичного к CD38, и талидомида или его аналога, например, леналидомида. В другом аспекте настоящее раскрытие относится к синергической комбинации, содержащей антитело, специфичное к CD38, и бортезомиб или другой ингибитор протеасом. Такие комбинации являются применимыми при лечении форм рака, таких как множественная миелома и/или неходжкинская лимфома.
In vitro и in vivo модели рассматривают как прогностические для того, чтобы определить как определенное соединение или комбинация соединений будет вести себя у людей. В рамках настоящего документа комбинации антитела, специфичного к CD38, и леналидомида исследовали на клеточных линиях множественной миеломы и выявляли синергизм. Кроме того, комбинацию антитела, специфичного к CD38, и леналидомида, и комбинацию антитела, специфичного к CD38, и бортезомиба исследовали в мышиных моделях против как клеток множественной миелома, так и клеток лимфомы Беркитта (формы NHL) и выявляли синергизм. Следовательно, комбинации будут эффективны при лечении людей с множественной миеломой и/или неходжкинской лимфомой. К тому же антитело, специфичное к CD38, иллюстрируемой в настоящем описании, вступает в клинические испытания, где такие комбинации можно подтвердить у людей.
Если соединения объединяют либо in vitro, либо in vivo, специалист предположит, что комбинация проявляет лишь аддитивные эффекты. Авторы изобретения обнаружили, что комбинация конкретного антитела к CD38 и леналидомида опосредовала синергический уровень антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности (ADCC) как в АМО-1, так и NCI-Н929 клеточных линиях множественной миеломы. К тому же конкретное антитело к CD38 при объединении с леналидомидом или при объединении с бортезомибом опосредовано синергический уровень снижения разрушения кости NCI-H929 в модели на SCID мышах и синергично увеличивало количество дней медианы выживаемости с RAMOS в модели на SCID мышах.
Следовательно, как комбинация иллюстрируемого антитела, специфичного к CD38, и леналидомида и иллюстрируемого антитела, специфичного к CD38, и бортезомиба вела себя синергично в моделях in vitro и/или in vivo, соответствующих множественной миеломе и/или неходжкинской лимфоме.
В аспекте настоящее раскрытие включает комбинацию, где антитело, специфичное к CD38, содержит HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6) и талидомид, или его аналог, представляющий собой леналидомид. В предпочтительных аспектах комбинацию применяют для лечения множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы.
Аспект настоящего изобретения включает комбинацию, где антитело, специфичное к CD38, содержит HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и ингибитор протеасом представляет собой бортезомиб. В предпочтительных аспектах комбинацию применяют для лечения множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы.
Описание графических материалов
На фигуре 1 показаны воздействия леналидомида самого по себе на экспрессию CD38 в клетках АМО-1.
На фигуре 2 показаны воздействия леналидомида самого по себе на пролиферацию клеток различных клеточных линий множественной миеломы. Эти измерения представляют относительную цитотоксичность леналидомида в отношении каждой клеточной линии.
На фигуре 3 показано опосредование ADCC на клетках АМО-1 комбинацией MOR03087 и леналидомида. Клетки РВМС и АМО-1 обрабатывали леналидомидом перед обработкой MOR03087. MOR03207 связывает лизоцим и применяется в качестве изотипического контроля, так как оно представляет собой IgG1. LEN представляет леналидомид. "Теоретическое" представляет сумму значения для MOR03087 самого по себе и значение для LEN самого по себе. Показанные данные представляют собой средние величины из Таблицы 3b.
На фигуре 4 показано опосредованно ADCC на клетках АМО-1 комбинацией MOR03087 и леналидомида. Только РВМС обрабатывали леналидомидом перед обработкой MOR03087. MOR03207 связывает лизоцим и применяется в качестве изотипического контроля, так как оно представляет собой IgG1. LEN представляет леналидомид. "Теоретическое" представляет сумму значения для MOR03087 самого по себе и значения для LEN самого по себе. Показанные данные представляют собой средние величины из Таблицы 4b.
На фигуре 5 показаны воздействия леналидомида самого по себе на экспрессию CD38 в клетках NCI-H929.
На фигуре 6 показано опосредование ADCC на клетках NCI-H929 комбинацией MOR03087 и леналидомида. Клетки РВМС и NCI-H929 обрабатывали леналидомидом перед обработкой MOR03087. Теоретическое представляет комбинацию, рассчитанную с применением метода дольного продукта по Chou и соавт. Показанные данные представляют собой средние величины из Таблицы 7b.
На фигуре 7 показано опосредование ADCC на клетках NCI-H929 комбинацией MOR03087 и леналидомида. Только РВМС обрабатывали леналидомидом перед обработкой MOR03087. Теоретическое представляет комбинацию, рассчитанную с применением метода дольного продукта по Chou и соавт. Показанные данные представляют собой средние величины из Таблицы 8b.
На фигуре 8 показано ингибирование роста различных клеточных линий множественной миеломы, вызванное бортезомибом самим по себе. IC50 на клетках АМО-1 составляла 3,9 нМ. IC50 на клетках LP-1 составляла 6,1 нМ. IC50 на клетках NCI-H929 составляла 3,3 нМ. IC50 на клетках RPMI-8226 составляла 9,0 нМ.
На фигуре 9 показано опосредование ADCC на клетках NCI-H929 комбинацией MOR03087 при 15 мкг/мл и Velcade® (бортезомиб). Две диаграммы представляют двух разных доноров.
На фигуре 10 показано опосредование ADCC на клетках LP-1 комбинацией MOR202 при 15 мкг/мл и Velcade® (бортезомиб). Две диаграммы представляют двух разных доноров.
На фигуре 11 показана аминокислотная последовательность MOR202.
На фигуре 12 показана кривая наилучшего приближения, как описано в Chou и соавт., для комбинации MOR202 и леналидомида при опосредовании ADCC на клетках АМО-1, и она также является типичной для кривой наилучшего соответствия, генерируемой для анализа опосредования ADCC на клетках NCI-H929.
На фигурах 13-18 показан факторный анализ синергизма по Chou для шести отдельных экспериментов с применением комбинации MOR202 и леналидомида при опосредовании ADCC на клетках АМО-1. На фигуре 13 показан эксперимент 1. На фигуре 14 показан эксперимент 2. На фигуре 15 показан эксперимент 3. На фигуре 16 показан эксперимент 4. На фигуре 17 показан эксперимент 5. На фигуре 18 показан эксперимент 6. Фигуры 13-15 получали из трех экспериментов, показанных в Таблицах 3а-с и на фигуре 3. Фигуры 16-18 получали из трех экспериментов, показанных в Таблицах 4а-с и на фигуре 4.
На фигуре 19 показано полученное с помощью компьютерной микротомографии изображение среднего общего объема кости каждой из исследуемых групп, описанных в Примере 7, где результаты показаны в Таблице 11.
На фигуре показано полученное с помощью компьютерной микротомографии изображение среднего общего объема кости каждой из исследуемых групп, описанных в Примере 11, где результаты показаны в Таблице 17.
Подробное описание изобретения
"Синергия", "синергизм" или "синергический" означает больше, чем ожидаемый аддитивный эффект комбинации. "Синергия", "синергизм" или "синергический" эффект комбинации определяют в данном документе способами по Chou и соавт. и/или Clarke и соавт. Смотри, Ting-Chao Chou, Theoretical Basis, Experimental Design, and Computerized Simulation of Synergism and Antagonism in Drug Combination Studies, Pharmacol Rev 58: 621-681 (2006), которая включена по ссылке в своей полноте. В Chou и соавт. раскрыты многие способы определения синергизма и по меньшей мере один из этих способов применяют в данном документе. Смотри также, Clarke et al., Issues in experimental design and endpoint analysis in the study of experimental cytotoxic agents in vivo in breast cancer and other models. Breast Cancer Research and Treatment 46: 255-278 (1997), которая включена по ссылке в своей полноте.
Выражение "антитело" означает моноклональные антитела, включая любой изотип, такой как IgG, IgM, IgA, IgD и IgE. IgG-антитело состоит из двух идентичных тяжелых цепей и двух идентичных легких цепей, которые соединены дисульфидными связями. Каждая тяжелая и легкая цепь содержит константный участок и вариабельный участок. Каждый вариабельный участок содержит три сегмента, называемые "участками, определяющими комплементарность" ("CDR") или "гипервариабельные участки", которые преимущественно отвечают за связывание эпитопа антигена. Их называют CDR1, CDR2 и CDR3, пронумерованные последовательно от N-конца. Более высококонсервативные части вариабельных участков вне CDR называют "каркасными участками". "Фрагмент антитела" означает Fv-, scFv-, dsFv-, Fab-, Fab', F(ab')2-фрагмент или другой фрагмент, который содержит по меньшей мере один вариабельный участок тяжелой или вариабельный участок легкой цепи, каждая из которых содержит CDR и каркасные участки.
THALOMID® (талидомид) в комбинации с дексаметазоном показан для лечения пациентов с впервые выявленной множественной миеломой и поставляемый на рынок Celgene.
"Аналог талидомида" включает без ограничения сам талидомид, леналидомид (СС-5013, Revlimid™), помалидомид (СС4047, Actimid™) и соединения, раскрытые в WO 2002068414 и WO 2005016326, которые включены по ссылке в своей полноте. Выражение относится к синтетическому химическому соединению, использующему структуру талидомида в качестве скелета (например, были присоединены боковые группы или такие группы были удалены из исходной структуры). Аналог отличается по структуре от талидомида и его соединений-метаболитов, как, например, различием по длине длина алкильной цепи, фрагменту молекулы, по одной или нескольким функциональным группам или изменению при ионизации. Выражение "аналог талидомида" также включает метаболиты талидомида. Аналоги талидомида включают рацемическую смесь S- и R-энантиомера соответствующего соединения и S-энантиомер или R-энантиомер отдельно. Рацемическая смесь является предпочтительной. Аналоги талидомида включают соединения следующей структуры:
(А) Леналидомид
(В) Талидомид
(С) Помалидомид
(D)
где каждый из R21, R22, R23 и R24 независимо представляет собой Н, алкокси, амино или алкиламин, и
(Е)
где каждый из R21, R22, R23, и R24 независимо представляет собой Н, алкокси, амино или алкиламин.
Леналидомид в настоящее время поставляется на рынок как Revlimid® or Celgene для лечения множественной миеломы. Леналидомид описан, как обладающий в отношении лечения опухолей по меньшей мере следующими свойствами: а) цитотоксичный к опухолевым клеткам, Gandhi et al., Lenalidomide inhibits proliferation of Namalwa CSN.70 cells and interferes with Gab1 phosphorylation and adaptor protein complex assembly, Leuk Res., 30(7): 849-58 (2006), которая включена по ссылке в своей полноте; b) активирует естественные клетки-киллеры (Nk), Gandhi et al., Dexamethasone synergizes with lenalidomide to inhibit multiple myeloma tumor growth, but reduces lenalidomide-induced immunomodulation of Т and NK cell function, Curr Cancer Drug Targets, 1; 10(2): 155-67 (March 2010), которая включена по ссылке в своей полноте; и с) повышающе регулирует экспрессию CD38 на опухолевых клетках, смотри, Lapalombella et al., Lenalidomide down-regulates the CD20 antigen and antagonizes direct and antibody-dependent cellular cytotoxicity of rituximab on primary chronic lymphocytic leukemia cells. Blood, 112:13, 5180-5189 (15 December 2008), которая включена по ссылке в своей полноте. "LEN" применяют для описания леналидомида.
Как описано, аналоги талидомида повышающе регулируют экспрессию CD38 на опухолевых клетках. Другие средства, которые повышающе регулируют экспрессию CD38 на поверхности опухолевых клеток, описаны в международной заявке WO 00/40265, заявке на патент США с серийным номером 09/226895, которая включена по ссылке в своей полноте (Research Development Foundation).
"Ингибитор протеасом" относится к соединению, которое блокирует действие протеасом, т.е. клеточных комплексов, которые разрушают белки, такие как, например, белок р53. Известно несколько классов ингибиторов протеасом. Класс пептид-боронатов включает бортезомиб (INN, PS-341; Velcade®), соединения, которые одобрены в США для лечения рецидивирующей множественной миеломы. Другим пептид-боронатом является СЕР-18770. Другие классы ингибиторов протеасом включают пептид-альдегиды (например, MG132), пептид-винилсульфоны, пептид-эпоксикетоны (например, эпоксомицин, карфилзомиб), ингибиторы на основе β-лактона (например, лактацистин, MLN 519, NPI-0052, салиноспорамид А), соединения, которые образуют дитиокарбаматные комплексы с металлами (например, дисульфирам, лекарственное средство, которое также применяют для лечения хронического алкоголизма), и некоторые антиоксиданты (например, эпигаллокатехин-3-галлат), катехин-3-галлат и салиноспорамид А.
"VH" относится к вариабельному участку тажелой цепи иммуноглобулина из анттела или фрагмента антитела. "VL" относится к вариабельному участку легкой цепи иммуноглобулина из антитела или фрагмента антитела.
Выражение "CD38" относится к белку, известному как CD38, имеющему следующие синонимы: ADP-рибозилциклаза 1, cADPr-гидролаза 1, гидролаза 1 циклической ADP-рибозы, Т10. CD38 человека имеет аминокислотную последовательность:
"MOR202" является антителом к CD38, чья аминокислотная последовательность представлена на фигуре 11. "MOR202" и "MOR03087" используют как синонимы для описания антитела, показанного на фигуре 11.
Последовательность ДНК, кодирующая вариабельный домен тяжелой цепи MOR202, представляет собой:
Последовательность ДНК, кодирующая вариабельный домен легкой цепи MOR202, представляет собой:
Антитело "Ref mAB5" представляет собой антитело к CD38, чья аминокислотная последовательность представлена ниже (CDR выделены полужирным шрифтом и подчеркнуты):
CDR Ref mAB5 определены Kabat и соавт. и антитело, имеющее такие же CDR, как Ref mAB5, описано в WO 2008/047242, заявке на патент США 12/441466, которая включена по ссылке в своей полноте.
"Fc-участок" означает константный участок антитела, которое у людей может быть из подкласса IgG1, 2, 3, 4 или других. Последовательности человеческих Fc-участков доступны в IMGT, Human IGH C-REGION, http://www.imgt.org/IMGTrepertoire/Proteins/protein/human/IGH/IGHC/Hu_IGHCallgenes.html (загруженная 16 мая 2011 г.).
"Усиливает активность ADCC" означает повышение при опосредовании антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности. Аминокислотные модификации в пределах Fc-участка, которые приводят в результате к усилению активности ADCC, раскрыты в WO 200042072, Genentech, WO 2004029207A2, Xencor, и WO 2004063351A2, Macrogenics, которые все включены по ссылке в своей полноте.
"MOR03207" представляет собой антитело, чья аминокислотная последовательность представляет собой:
MOR03207 связывает лизоцим и применяется в качестве изотипического контроля, гак как оно представляет собой IgG1.
"Комбинация" означает более чем один элемент, например, соединение, такое как антитело и леналидомид.
Настоящее раскрытие также относится к комбинациям, фармацевтическим препаратам и фармацевтическим композициям, содержащим описанные комбинации. Два компонента синергической комбинации настоящего изобретения, например, антитело, специфичное к CD38, и леналидомид, можно вводить вместе или раздельно. При введении вместе два компонента можно составить вместе в одну фармацевтическую композицию, которая может включать фармацевтический приемлемый носитель или вспомогательное вещество Альтернативно, два компонента можно также составить в разных фармацевтических композициях. В данном случае два компонента можно вводить одновременно или последовательно. В варианте осуществления талидомид или его аналог, например, леналидомид, вводят перед и/или раздельно с введением антитела, специфичного к CD38, например, MOR202. В еще одном варианте осуществления леналидомид вводят по меньшей мере за 72 часа до введения антитела, специфичного к CD38, например, MOR202. Этот период времени позволяет опосредованную леналидомидом повышающую регуляцию CD38 в целевых клетках.
Фармацевтическая композиция включает активное средство, например, антитело для терапевтического применения у людей. Фармацевтическая композиция может включать приемлемые носители или вспомогательные вещества.
"Введенный" или "введение" включает без ограничения доставку с помощью инъекционной формы, такую как, например, внутривенный, внутримышечный, внутрикожный или подкожный путь, или мукозальный путь, например, в виде назального спрея или аэрозоля для ингаляции, или в виде инъекционного раствора, капсулы или таблетки.
"Терапевтически эффективное количество" соединения или комбинации относится к количеству, достаточному для излечения, ослабления или частичной подавления клинических проявлений данного заболевания или расстройства и его осложнений. Количество, которое является эффективным для конкретного терапевтического результата, будет зависеть от тяжести заболевания или повреждения, а также от веса и общего состояния субъекта и т.д. Будет понятно, что определение соответствующей дозировки можно достичь с помощью обычного экспериментирования путем построения матрицы значений и определения различных точек в матрице, все из этого находится в рамках обычных навыков обученного врача или ученого-клинициста.
Было обнаружено, что комбинация конкретного антитела к CD38 и леналидомида опосредовала синергический уровень антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности (ADCC) как у АМО-1, так и у NCI-H929 клеток множественной миеломы. К тому же конкретное антитело к CD38 при объединении с леналидомидом опосредовало синергический уровень снижения разрушения кости NCI-H929 в модели на SCID мышах и синергично увеличивало количество дней медианы выживаемости с RAMOS в модели на SCID мышах. Следовательно, комбинация проиллюстрированного антитела, специфичного к CD38, и леналидомида вела себя синергично как в in vitro, так и in vivo моделях, соответствующих множественной миеломе и/или неходжкинской лимфоме. Следовательно, эта комбинация дает синергические результаты при лечении множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы у людей.
Леналидомид представляет собой аналог талидомида, следовательно, ожидается, что другие аналоги талидомида, такие как помалидомид или талидомид сам по себе, также ведут к синергическим эффектам при применении в комбинации с антителом к CD38. К тому же, поскольку талидомид или его аналог повышающе регулируют экспрессию CD38 в клеточных линиях множественной миеломы, следовательно, ожидается, что синергизм должен получаться в результате, когда в комбинации применяют другие средства, которые повышающе регулирую г экспрессию CD38 на поверхности опухолевых клеток, например, транс-ретиноевая кислота, и антитела к CD38.
Было обнаружено, что комбинация конкретного антитела к CD38 и бортезомиба опосредовала высокий уровень антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности (ADCC) в клеточных линиях множественной миеломы NCI-H929 и LP-1. К тому же, было обнаружено, что комбинация конкретного антитела к CD38 и бортезомиба опосредовала синергический уровень снижения разрушения кости NCI-H929 в модели на SCID мышах и синергично повышала количество дней медианы выживаемости с RAMOS в модели на SCID мышах. Следовательно, комбинация проиллюстрированного антитела, специфичного к CD38, и бортезомиба вела себя синергично в in vivo моделях, соответствующей множественной миеломе и/или неходжкинской лимфоме. Следовательно, эта комбинация дает синергические результаты при лечении множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы у людей.
Ожидается, что другие ингибиторы протеасом, такие как, дисульфирам, эпигаллокатехин-3-галлат и салиноспорамид А будут приводить к подобным эффектам при применении в комбинации с антителом к CD38.
"CDR" в данном документе определены либо по Chothia и соавт., Kabat и соавт., либо по правилам внутренней нумерации. Смотри, Chothia С, Lesk AM. (1987) Canonical structures for the hypervariable regions of immunoglobulins. J Mol Biol., 196(4): 901-17, которая включена по ссылке в своей полноте. Смотри, Kabat Е.А, Wu T.T., Perry H.M., Gottesman K.S. and FoellerC. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest. 5th edit., NIH Publication no. 91-3242, US Dept. of Health and Human Services, Washington, DC, которая включена по ссылке в своей полноте.
Варианты осуществления
Аспект настоящего описания включает синергическую комбинацию антитела, специфичного к CD38, и (а) талидомида или его аналога или (b) ингибитора протеасом, для применения при лечении множественной миеломы и неходжкинской лимфомы.
Аспект настоящего изобретения включает комбинацию антитела, специфичного к CD38, и талидомида или его аналога. В вариантах осуществления комбинация является синергической.
В вариантах осуществления антитело, специфичное к CD38, содержит HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6).
В вариантах осуществления антитело, специфичное к CD38, содержит HCDR1 участок с последовательностью DYWMQ (SEQ ID NO: 15), HCDR2 участок с последовательностью TIYPGDGDTGYAQKFQG (SEQ ID NO: 16), HCDR3 участок с последовательностью GDYYGSNSLDY (SEQ ID NO: 17), LCDR1 участок с последовательностью KASQDVSTVVA (SEQ ID NO: 18), LCDR2 участок с последовательностью SASYRYI (SEQ ID NO: 19) и LCDR3 участок с последовательностью QQHYSPPYT (SEQ ID NO: 20).
В аспекте комбинацию применяют для лечения множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы. Варианты осуществления включают комбинацию, где аналог талидомида представляет собой леналидомид.
Аспект относится к фармацевтическим композициям, содержащим комбинации. В вариантах осуществления композиция содержит приемлемый носитель. В вариантах осуществления композицию вводят в эффективном количестве.
Аспект настоящего раскрытия включает синергическую комбинацию антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и леналидомида для лечения множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы.
Дополнительный вариант осуществления включает комбинацию, где антитело содержит вариабельный участок тяжелой цепи с последовательностью QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYYMNWVRQAPGKGLEWVSGISGDPSNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLPLVYTGFAYWGQGTLVTV SS (SEQ ID NO: 10) и вариабельный участок легкой цепи с последовательностью DIELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDNLRHYYVYWYQQKPGQAPVLVIYGDSKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAEDEADYYCQTYTGGASLVFGGGTKLTVLGQ (SEQ ID NO: 11).
Аспект настоящего описания включает синергическую комбинацию антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью DYWMQ (SEQ ID NO: 15), HCDR2 участок с последовательностью TIYPGDGDTGYAQKFQG (SEQ ID NO: 16), HCDR3 участок с последовательностью GDYYGSNSLDY (SEQ ID NO: 17), LCDR1 участок с последовательностью KASQDVSTVVA (SEQ ID NO: 18), LCDR2 участок с последовательностью SASYRYI (SEQ ID NO: 19) и LCDR3 участок с последовательностью QQHYSPPYT (SEQ ID NO: 20), и леналидомида для лечения множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы.
Дополнительный вариант осуществления включает комбинацию, где антитело содержит вариабельный участок тяжелой цепи с последовательностью QVQLVQSGAEVAKPGTSVKLSCKASGYTFTDYWMQWVKQRPGQGLEWIGTIYPGDGDTGYAQKFQGKATLTADKSSKTVYMHLSSLASEDSAVYYCARGDYYGSNSLDYWGQGTSVTV SS (SEQ ID NO: 21) и вариабельный участок легкой цепи с последовательностью DIVMTQSHLSMSTSLGDPVSITCKASQDVSTVVAWYQQKPGQSPRRLIYSASYRYIGVPDRFTGSGAGTDFTFTISSVQAEDLAVYYCQQHYSPPYTFGGGTKLEIKRT (SEQ ID NO: 22).
В вариантах осуществления антитело имеет Fc-участок IgG1. В вариантах осуществления антитело содержит модифицированный Fc-участок, где указанная модификация усиливает активность ADCC.
В другом аспекте компоненты комбинации, антитело, специфичное к CD38, и леналидомид, вводят раздельно. В варианте осуществления леналидомид вводят до введения антитела, специфичного к CD38. В еще одном варианте осуществления леналидомид вводят по меньшей мере за 72 часа до введения антитела, специфичного к CD38.
В другом аспекте синергическая комбинация антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и леналидомида способна опосредовать цитолиз экспрессирующих CD38 клеток АМО-1 и/или клеток NCI-H929 посредством ADCC в присутствии выделенных РВМС человека с эффективностью по меньшей мере в два раза, три раза, четыре раза, пять раз лучшей, чем леналидомид сам по себе.
В другом аспекте синергическая комбинация антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и леналидомида способна снижать разрушение кости с эффективностью по меньшей мере в два раза, три раза, четыре раза, пять раз лучшей, чем леналидомид сам по себе.
Другой аспект включает способ лечения множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы у лица, нуждающегося в этом, при этом способ включает введение антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и леналидомида лицу с множественной миеломой или неходжкинской лимфомой. В вариантах осуществления комбинацию вводят в эффективном количестве.
Другой аспект включает комбинацию, содержащую антитело, специфичное к CD38, содержащей HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и леналидомид. В варианте осуществления комбинацию применяют для лечения рака. В еще одном варианте осуществления рак выбран из множественной миеломы и неходжкинской лимфомы.
Другой аспект включает комбинацию антитела, специфичного к CD38, и ингибитора протеасом. В вариантах осуществления комбинация является синергической. В вариантах осуществления антитело, специфичное к CD38, содержит HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6).
В аспекте комбинацию применяют для лечения множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы. В вариантах осуществления комбинация содержит ингибитор протеасом, который представляет собой бортезомиб. Аспект относится к фармацевтическим композициям, содержащим комбинации. В вариантах осуществления композиция содержит приемлемый носитель. В вариантах осуществления композицию вводят в эффективном количестве.
Аспект настоящего раскрытия включает синергическую комбинацию антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и бортезомиб для лечения множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы.
Дополнительный вариант осуществления содержит комбинацию, где ан гит ело содержит вариабельный участок тяжелой цепи с последовательностью QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYYMNWVRQAPGKGLEWVSGISGDPSNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLPLVYTGFAYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 10) и вариабельный участок легкой цепи с последовательностью DIELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDNLRHYYVYWYQQKPGQAPVLVIYGDSKRPSGIPERFS GSNSGNTATLTISGTQAEDEADYYCQTYTGGASLVFGGGTKLTVLGQ (SEQ ID NO. 11).
В вариантах осуществления антитело имеет Fc-участок IgG1. В вариантах осуществления антитело содержит модифицированный Fc-участок, где указанная модификация усиливает активность ADCC.
В варианте осуществления комбинацию применяют для лечения рака. В еще одном варианте осуществления рак выбран из множественной миеломы и неходжкинской лимфомы.
В другом аспекте компоненты комбинации, антитело и ингибитор протеасом, вводят раздельно.
В другом аспекте синергическая комбинация антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и бортезомиба способна опосредовать цитолиз экспрессирующих CD38 клеток LP-1 и/или клеток NCI-H929 посредством ADCC в присутствии выделенных РВМС человека с эффективностью по меньшей мере в два раза, три раза, четыре раза, пять раз лучшей, чем бортезомиб сам по себе.
В другом аспекте синергическая комбинация антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5), и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и бортезомиба способна снижать разрушение кости с эффективностью по меньшей мере в два раза, три раза, четыре раза, пять раз лучшей, чем бортезомиб сам по себе.
В другом аспекте настоящее раскрытие включает способ лечения множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы у лица, нуждающегося в этом, причем способ включает введение антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и бортезомиба лицу с множественной миеломой или неходжкинской лимфомой.
В вариантах осуществления комбинацию вводят в эффективном количестве.
Другой аспект включает комбинацию, содержащую антитело, специфичное к CD38, содержащее HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и бортезомиб.
Аспект включает синергическую комбинацию антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и
(a) талидомида или его аналога или
(b) ингибитора протеасом для применения при лечении множественной миеломы и неходжкинской лимфомы.
Варианты осуществления включают комбинацию, где антитело содержит вариабельный участок тяжелой цепи с последовательностью
QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYYMNWVRQAPGKGLEWVSGISGDPSNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLPLVYTGFAYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 10) и вариабельный участок легкой цепи с последовательностью
DIELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDNLRHYYVYWYQQKPGQAPVLVIYGDSKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAEDEADYYCQTYTGGASLVFGGGTKLTVLGQ (SEQ ID NO: 11).
Варианты осуществления включают комбинацию, где антитело содержит Fc-участок IgG1. Варианты осуществления включают комбинацию, где антитело содержит модифицированный Fc-участок, где указанная модификация усиливает активность ADCC.
Варианты осуществления включают комбинацию, где указанное антитело, специфичное к CD38, и указанный талидомид или его аналог или ингибитор протеасом вводят раздельно.
Варианты осуществления включают комбинацию, которая способна снижать разрушение кости с эффективностью по меньшей мере в два раза лучшей, чем леналидомид и/или бортезомиб сам по себе.
Варианты осуществления включают комбинацию, где указанное антитело, специфичное к CD38, объединено с талидомидом или его аналогом. Варианты осуществления включают комбинацию, где аналог талидомида включает леналидомид. Варианты осуществления включают комбинацию, где леналидомид вводят до введения антитела, специфичного к CD38. Варианты осуществления включают комбинацию, где леналидомид вводят по меньшей мере за 72 часа до введения антитела, специфичного к CD38.
Варианты осуществления включают комбинацию антитела, специфичного к CD38, и леналидомида, которая способна опосредовать цитолиз экспрессирующих CD38 клеток АМО-1 и/или NCI-H929 посредством ADCC в присутствии выделенных РВМС человека с эффективностью по меньшей мере в два раза лучшей, чем леналидомид сам по себе.
Варианты осуществления включают комбинацию, содержащую указанное антитело, специфичное к CD38, и ингибитор протеасом. В некоторых вариантах осуществления ингибитор протеасом представляет собой бортезомиб. Варианты осуществления включаю г комбинацию антитела, специфичного к CD38, и бортезомиба, которая способна опосредовать цитолиз экспрессирующих CD38 клеток LP-1 и/или NCI-H929 посредством ADCC в присутствии выделенных РВМС человека с эффективностью по меньшей мере в два раза лучшей, чем бортезомиб сам по себе.
Аспект включает синергическую комбинацию антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и леналидомида или другого аналога талидомида для применения при лечении множественной миеломы и неходжкинской лимфомы.
Аспект включает синергическую комбинацию антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1) или с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и бортезомиба или другого ингибитора протеасом для применения при лечении множественной миеломы и неходжкинской лимфомы.
Примеры
Пример 1: Экспрессия CD38 на поверхности различных клеточных линий
Клеточные линии из Таблицы 1 исследовали в отношении уровней экспрессии CD38.
| Таблица 1 | ||
| Клеточная линия | Поставляется: | Культивируется в: |
| АМО-1: Клеточная линия множественной миеломы | DSMZ # АСС 538 | RPMI 1640, с L-глутамином, (PAN Biotech GmbH, кат. №: P04-16500 medium) |
| LP1: Клеточная линия множественной миеломы | DSMZ # ACC 41 | Среда Дульбекко в модификации Искова (IMDM) с GlutaMAX™ (Invitrogen, кат. №: 31980-048) |
| NCI-H929: Клеточная линия множественной миеломы | DSMZ # ACC 163 | RPMI 1640 (та же, что и для АМО-1), дополненная 1 мМ Na-пируватом, 50 мкМ В-меркаптоэтанолом |
| RPMI8226: Клеточная линия множественной миеломы | DSMZ # ACC 402 | RPMI 1640 (та же, что и для АМО-1) |
| ОРМ-2: Клеточная линия множественной миеломы | DSMZ # ACC 50 | RPMI 1640 (та же, что и для АМО-1) |
| Плазмацитома, злокачественные плазмациты | Klinikum rechts der Isar | RPMI 1640 (та же, что и для АМО-1) |
Образцы костного мозга (4-10 мл пунктата) от пациентов с множественной миеломой и образцы экстрамедуллярной опухоли плазмацитомы получали после информированного согласия из Klinikum rechts der Isar ("Krdl") (Мюнхен, Германия). Образцы подвергали центрифугированию и дальнейшего обогащения плазмацитами достигали посредством магнито-активированного клеточного сортинга.
Клетки окрашивали антителами QuantiBRITETM к CD38, непосредственно меченными РЕ, (Becton Dickinson GmbH, клон НВ7, кат. №342371), которое является специфичным к CD38. "Количество связанных антител на клетку" (АВС) определяли с применением системы QuantiBRITETM на основе проточной цитометрии, которая измеряет среднее геометрическое (GeoMean) на клетку. Преобразование измеренного GeoMean в соответствующее количество АВС на клетку выполняли с помощью программного обеспечения GraphPad PRISMTM. Предполагают, что значения АВС соответствуют количеству молекул CD38 на клетку, поскольку QuantiBRITE™ CD38-PE несет одну молекулу РЕ на антитело. Результаты показаны в Таблице 2.
Пример 2: Оценка воздействия леналидомида на повышающую регуляцию CD38 у различных клеточных линий
Чтобы определить: вызывал ли леналидомид повышающую регуляцию CD38 в клетках множественной миеломы и плазмацитомы из Таблицы 1, клеточные линии инкубировали с 100 мкМ леналидомидом и, затем, экспрессию CD38 на поверхности анализировали с помощью FACS.
Материалы и способы
Около 2×105 клеток каждой из клеточных линий из Таблицы 1 высевали на 48-луночные чашки в стандартную среду RPMI. Леналидомид, приобретенный у Selleck Chemicals (LLC S1029, CAS №191732-6; партия: S 10290), вносили в соответствующие лунки до конечной концентрации 100 мкМ в объеме 750 мкл, содержащем 20% FCS и 0,1% DMSO. В качестве отрицательного контроля применяли 0,1% DMSO в дополненной FCS среде и планшеты инкубировали в течение 24 часов, 48 часов и 72 часов при 37°С и 5% СО2 в увлажняемом инкубаторе.
Клетки ресуспендировали аккуратным пипетированием и 250 мкл суспензии клеток на период инкубирования переносили в лунку 96-луночного круглодонного планшета. Клетки отмывали центрифугированием в течение 1 мин. при 700×g и ресуспендировали в 150 мкл холодного буфера для FACS (1×PBS, дополненный 3% FCS). Клетки вновь осаждали центрифугированием и ресуспендировали в 150 мкл буфера для FACS, содержащей 15 мг/мл антитела к CD38 (MOR202, IgG1) или контрольного антитела MOR03207, и инкубировали в течение 1 часа на льду. Клетки затем отмывали 3 раза центрифугированием и ресуспендировали в буфере для FACS, дополненного меченным РЕ вторичным антителом (РЕ-Fab2-фрагмент, антитело козы к IgG человека, специфичное к Fc-фрагменту; Jackson Immuno Research; кат.: 109-116-098; лот: 80938). Клетки инкубировали в течение 45 минут на льду, затем отмывали 3 раза центрифугированием и ресуспендировали в буфере для FACS. Суспензии клеток затем подвергали FACS анализу с применением устройства FACS array.
Базальная экспрессия CD38 каждой клеточной линией и влияние леналидомида на экспрессию CD38 показаны в Таблице 2. Дополнительно, влияние леналидомида на экспрессию CD38 клетками АМО-1, показано на фигуре 1 и влияние леналидомида на экспрессию CD38 клетками NCI-H929 показано на фигуре 5.
| Таблица 2 | |||||
| Абсолютное количество АВС (экспрессия CD38) | ПОВЫШЕНИЕ | Кратность повышения | Воздействие | ||
| Клеточная линия | Базальный | LEN (экстраполированный) | |||
| АМО-1 | 25000 | 115000 | 90000 | 4,6 | Значительное |
| LP-1 | 125000 | 162500 | 37500 | 1,3 | Нет |
| NG-H929 | 195000 | 390000 | 195000 | 2,0 | Слабое |
| RPMI-8226 | 670000 | 871000 | 199000 | 1,3 | Слабое |
| OPM-2 | 38000 | 98800 | 60800 | 2,6 | Значительное |
| Плазмацитома | 30000 | 69000 | 39000 | 2,3 | Значительное |
Пример 3: Ингибирование пролиферации клеток АМО-1 с применением леналидомида самого по себе
Цитотоксичность леналидомида исследовали на клетках АМО-1. Клетки собирали и распределяли в 96-луночных планшетах при 5000 клеток на лунку. Возрастающие количества леналидомида добавляли в лунки и планшеты инкубировали в течение 24 часов, 48 часов и 72 часов при 37°С в увлажняемом инкубаторе (5% СО2).
После инкубирования планшеты анализировали в отношении клеточной пролиферации в количественном колориметрическом анализе на основе ХТТ с применением набора для изучения клеточной пролиферации II (ROCHE, Cell Proliferation Kit II, кат. №:11465015001). Для дальнейшего измерения планшеты считывали на планшет-ридере Tecan Genios и определяли поглощение при 492 нм. Результаты показаны на фигуре 2.
Пример 4: Синергическая комбинация MOR0202 и леналидомида в клетках АМО-1
Клетки АМО-1 выбирали для исследования с комбинацией MOR202 и леналидомида. клетки АМО-1 являются сходными с клетками плазмацитомы у людей в том, что как те, так и другие имеют низкую базальную экспрессию CD38, и CD38 существенно повышаюше регулируется как у одних, так и у других при обработке леналидомидом, как показано в Таблице 2.
РВМС выделяли центрифугированием в градиенте плотности из свежевыделенной крови человека. Выделенную кровь от разных доноров наслаивали на определенный объем Biocoll (Biochrome AG; кат №: L6115; лот No.: 1050Т) в пробирке Falcon и центрифугировали при 380 g. РВМС выделяли и дополняли средой RPMI.
Через 72 часа клетки подсчитывали и РВМС доводили до концентрации 6,6×106/мл, тогда как клетки АМО-1 доводили до конечной концентрации 2,5×105/мл. Для последующей идентификации проточной цитометрией клетки АМО-1 окрашивали в течение 3 мин. 0,1 мкг/мл кальцеином AM (кальцеин: 1 мг/мл маточный раствор, Invitrogen, кат. №: С3099) и отмывали три раза аккуратным центрифугированием. 100 мкл суспензии целевых клеток смешивали со 100 мкл РВМС с достижением соотношения 1:30. Антитело MOR202 или антитело MOR03207 (отрицательный контроль) добавляли до конечной концентрации 15 мкл/мл. Клеточные суспензии дополнительно инкубировали в течение 4 часов при 37°С. Для выявления мертвых клеток АМО-1 на клеточные суспензии воздействовали пропидий-йодидом (PI) и затем анализировали проточной цитометрией. Целевые клетки отделяли посредством гейтирования положительных по кальцеину AM клеточных популяций и количественно определяли клетки, погибшие вследствие ADCC.
В сумме осуществляли шесть экспериментов с тем, чтобы определить опосредование ADCC на клетках АМО-1 комбинацией MOR202 и леналидомида. В трех экспериментах клетки РВМС и АМО-1 обрабатывали леналидомидом перед обработкой MOR202, результаты показаны в Таблицах 3а-с и на фигуре 3. В трех дополнительных экспериментах только РВМС обрабатывали леналидомидом перед обработкой MOR202, результаты показаны в Таблицах 4а-с и на фигуре 4.
Таблица 3: Как эффекторные, так и клетки АМО-1 обрабатывали леналидомидом перед обработкой MOR202. Применяли отдельные и комбинированные дозы 10 мкМ LEN и 15 мкг/мл MOR03207 и MOR202.
Данные представлены следующими тремя способами: как а) необработанные данные (% мертвых клеток), b) нормализованные данные специфичного цитолиза, где группа обработки MOR202 принята за 1 (100%), и с) нормализованные данные специфичного цитолиза, где теоретическая комбинация принята за 1 (100%). Таблица 3а представляет необработанные данные.
| Таблица 3а | |||||||||
| AMO-1 | LEN 10 мкМ сам по себе | MOR202 сам по себе (15 мкм/мл) | Комбинация LEN (10 мкМ) и MOR202 (15 мкг/мл) | DMSO | MOR03207 (15 мкМ/мл) | MOR03207 (15 мкг/мл) + DMSO | LEN (0 мкМ) | LEN (10 мкМ) сам по себе без РВМС | DMSO контроль без РВМС |
| Эксперимент 1 | 12,89 | 23,69 | 35,98 | 13,10 | 14,15 | 15,12 | 15,45 | 15,41 | 11,07 |
| Эксперимент 2 | 10,13 | 22,53 | 29,09 | 7,94 | 10,52 | 6,99 | 13,22 | 8,44 | 8,45 |
| Эксперимент 3 | 22,80 | 49,56 | 80,39 | 19,93 | 24,04 | 22,24 | 22,63 | 22,38 | 26,43 |
Единицы перечисленных значений представляют % мертвых клеток Группы с DMSO, MOR03207, MOR03207 + DMSO, LENO, LEN10 без РВМС и DMSO без РВМС являются контролями.
В Таблице 3b представлены данные из Таблицы 3а, но нормализованные, где группа обработки MOR202 принята за 1 (100%).
| Таблица 3b | |||||
| АМО-1 | MOR03207 (15 мкг/мл) | MOR202 (15 мкг/мл) | LEN сам по себе (10 мкМ) | Теоретическое комбинации | MOR202 (15 мкг/мл) и LEN (10 мкМ) |
| Эксперимент 1 | -0,1 | 1,0 | 0,0 | 1,0 | 2,2 |
| Эксперимент 2 | -0,2 | 1,0 | 0,2 | 1,2 | 1,8 |
| Эксперимент 3 | 0,1 | 1,0 | 0,1 | 1,1 | 2,3 |
Для Таблиц 3b-с "теоретическое комбинации" представляет сумму значений для MOR202 самого по себе и значений для LEN самого по себе. Нормализованные данные из Таблицы 3b рассчитывают следующим образом. Таблица 3а представляет количество мертвых клеток. Следовательно, значения специфичного цитолиза из Таблицы 3b рассчитывают путем вычитания значений контролей. Затем значения специфичного цитолиза сравнивают с MOR202 группой, которую принимают за 1. Средние результатов в Таблице 3b показаны на фигуре 3.
1. Определение синергизма
1.1 Chou и соавт.
Способы по Chou-Talalay применяли для определения синергизма. Смотри. Chou TC, Talalay P, Quantitative analysis of dose-effect relationships: the combined effects of multiple drugs or enzyme inhibitors. Adv Enzyme Regul 22: 27-55 (1984), которая включена по ссылке в своей полноте. Анализ синергизма проводят с помощью CI-изоболограммного способа.
Уравнение медианного эффекта
Уравнение медианного эффекта моделирует воздействие ингибитора (такого как лекарственное средство) как Fa/Fu=(D/D50)^m, где D представляет собой дозу, Fa и Fu представляет собой часть системы, на которую влияет или не влияет доза D (Fa+Fu=1); D50 представляет собой дозу, дающую медианный эффект (например, IC50, ED50, LD50). Постоянная m определяет форму кривой доза-эффект. Было применено программное обеспечение Excel Fit для выполнения расчета линейной регрессии для оценки параметров m и D50.
Воздействия комбинации на клетки АМО-1 измеряют как % мертвых клеток, как описано выше. Часть Fu определяют, как соотношение % мертвых клеток обработанной клеточной линии к % мертвых клеток клеточной линии, на которую воздействуют контролем. То есть:
Fu = % мертвых клеток (обработанная клеточная линия)/% мертвых клеток (необработанная клеточная линия)
Тогда % мертвых клеток клеточной линии выражают постоянной D50 в уравнении медианного эффекта, который можно приблизительно рассчитать с помощью линейной регрессии, описанной выше.
CI-изоболограммный способ
CI-изоболограммный способ обеспечивает количественную оценку синергизма между лекарственными средствами. Комбинаторный индекс (CI) оценивают из данных доза-эффект от обработок отдельным лекарственным средством или комбинированных обработок лекарственными средствами. Значение CI менее 1 указывает на синергизм; CI=1 указывает на аддитивный эффект; и CI>1 указывает на антагонизм. Диапазоны синергизма дополнительно определены Chou и Talahay для значений CI<0,1 как очень сильный синергизм, значений CI от 0,1 до 0,3 как сильный синергизм, значений CI 0,3-0,7 как синергизм, значений CI 0,7-0,9 как умеренный-слабый синергизм. Взаимодействие лекарственных средств (синергизм или антагонизм) тем более выражено, чем более значение CI отдалено от 1.
Формально комбинаторный индекс (CI) комбинированной обработки лекарственными средствами определяется как
CI=D1/Dx1+D2/DX2
В настоящем уравнении D1 и D2 представляют дозы лекарственного средства 1 и лекарственного средства 2, соответственно, в комбинации; каждое из Dx1 и Dx2 представляем собой дозу обработки только лекарственным средством 1 и лекарственным средством 2, которая будет давать такой же эффект, как у комбинации, соответственно. Дозы Dx1 и Dx2 нужно приблизительно рассчитать из данных доза-эффект обработок отдельным лекарственным средством. По существу, в уравнение медианного эффекта подставляют данные каждого лекарственного средства. Из уравнения медианного эффекта для лекарственного средства можно приблизительно рассчитать дозу (т.е. D), необходимую для получения эффекта (т.е. Fa, Fu). Чем дальше точка лежит от линии аддитивной активности, тем больше разница между 1 и ее CI, таким образом, и тем более сильным является (синергический или антагонистический) эффект.
Приведенный выше способ описан в Chou TC, Talalay P, Quantitative analysis of dose-effect relationships: the combined effects of multiple drugs or enzyme inhibitors. Adv Enzyme Regul 22: 27-55 (1984), которая включена по ссылке в своей полноте. Дополнительный обзор приведенного выше способа по Chou также представлен в Ting-Chao Chou, Theoretical Basis, Experimental Design, and Computerized Simulation of Synergism and Antagonism in Drug Combination Studies, Pharmacol Rev 58: 621-681 (2006), которая включена по ссылке в своей полноте.
Кривые, построенные для расчетов синергии на основе способа Chou, показаны на фигурах 12-18. На фигуре 12 кривую наилучшего соответствия определяли путем удаления экспериментальных точек на графике, а) где концентрация MOR202 была слишком низкой для какого-либо эффекта, и b) где концентрация была близкой к насыщению. В соответствующих экспериментальных точках на графике приблизительно 80% цитолиз значение CI составляет менее 1, подтверждая явную синергию. Фиг.13-18 представляют шесть экспериментов из Таблиц 3 и 4, и в каждом Dx1 (доза MOR202), необходимая для достижения 100% эффекта комбинации MOR 202 и леналидомида, стремится к бесконечности; таким образом, D1/Dx1 составляет менее 1, и поскольку леналидомид не оказывает на клетки АМО-1 воздействия, относящегося к цитолизу, значение Dx2 также стремится к бесконечности, так что D2/Dx2 приближается к 0, таким образом, значения CI для каждого из шести экспериментов составляют менее 1, подтверждая явную синергию.
Таблица 3с представляет нормализацию данных, где теоретическое комбинации принято за 1 (100%), и включает расчеты CI по Chou.
| Таблица 3с | |||||||
| Клеточная линия | Эксперимент | MOR202 (0,42 мкг/мл) | LEN (5 мкМ) | Теоретическое комбинации | MOR202 (0,42 мкг/мл) и LEN (5 мкМ) | Комбинаторный индекс (CI) | Вывод |
| АМО-1 | Эксперимент 1 | 0,6 | 0,4 | 1,0 | 1,0 | <<0,1* | синергия |
| Эксперимент 2 | 0,9 | 0,1 | 1,0 | 2,4 | <<0,1* | синергия | |
| Эксперимент 3 | 0,9 | 0,1 | 1,0 | 1,8 | <<0,1* | синергия | |
| Среднее | 0,8 | 0,2 | 1,0 | 1,7 | - | - | |
Данные, показанные в Таблице 3с, отличаются от Таблиц 3а и 3b. Таблица 3с основывается на разных необработанных точках данных, которые показаны в Таблице 3а, поскольку концентрации, выбранные в Таблице 3с, более близки к ЕС50 антитела (необработанные данные не показаны). "Теоретическое комбинации" представляет сумму значений для MOR202 самого по себе и значений для LEN самого по себе.
Таблица 4: Эффекторные клетки обработанные только леналидомидом перед обработкой MOR202. Применяли отдельные и комбинированные дозы 10 мкМ LEN и 15 мкг/мл MOR03207 и MOR202.
Данные представлены следующими тремя способами: как а) необработанные данные (% мертвых клеток), b) нормализованные данные специфического цитолиза, где группа обработки MOR202 принята за 1 (100%), и с) нормализованные данные специфического цитолиза, где теоретическое комбинации принято за 1 (100%). Таблица 4а представляет необработанные данные.
| Таблица 4а | |||||||
| АМО-1 | LEN (10 мкМ) сам по себе | MOR202 сам по себе (15 мкг/мл) | Комбинация LEN (10 мкМ) и MOR202 (15 мкг/мл) | DMSO | MOR03207 15 мкг/мл | MOR03207 15 мкг/мл + DMSO | LEN (0 мкМ) |
| Эксперимент. 1 | 15,33 | 23,09 | 23,46 | 14,62 | 16,17 | 15,97 | 12,87 |
| Эксперимент. 2 | 12,98 | 21,08 | 25,75 | 10,24 | 12,17 | 11,45 | 9,78 |
| Эксперимент. 3 | 17,93 | 48,28 | 56,49 | 16,75 | 17,42 | 15,77 | 18,16 |
Единицы перечисленных значений выражают % мертвых клеток. DMSO, MOR03207, MOR03207 + DMSO, LENO, LEN10 без РВМС и DMSO без РВМС являются контролями.
| Таблица 4b | |||||
| АМО-1 | MOR03207 (15 мкг/мл) | MOR202 (15 мкг/мл) | LEN сам по себе (10 мкМ) | Теоретическое комбинации | MOR202 (15 мкг/мл) и LEN (10 мкМ) |
| Эксперимент. 1 | 0,5 | 1,0 | 0,1 | 1,1 | 1,1 |
| Эксперимент. 2 | 0,3 | 1,0 | 0,3 | 1,3 | 1,6 |
| Эксперимент. 3 | 0,0 | 1,0 | 0,0 | 1,0 | 1,3 |
В Таблице 4b представлены данные из Таблицы 4а, но нормализованные, где группа обработки MOR202 принята за 1 (100%). Для Таблиц 4b-с "Теоретическое комбинации" представляет значения для MOR202 самого по себе плюс значения для LEN самого по себе.
Нормализацию данных, которые показаны в Таблице 4b, рассчитывают, как описано в Таблице 3b, путем вычитания контролей. Средние результатов из Таблицы 4b показаны на фигуре 4.
| Таблица 4с | |||||||
| Клеточная линия | Эксперимент | MOR202 (0,42 мкг/мл) | LEN (5 мкМ) | Теоретическое комбинации | MOR202 (0,42 мкг/мл) и LEN (5 мкМ) | Комбинаторный индекс (CI) | Вывод |
| АМО-1 | Эксперимент 1 | 1,2 | -0,2 | 1,0 | 1,7 | <<0,1* | синергия |
| Эксперимент 2 | 0,7 | 0,3 | 1,0 | 1,4 | <<0,1* | синергия | |
| Эксперимент 3 | 0,8 | 0,2 | 1,0 | 1,3 | <<0,1* | синергия | |
| СРЕДНЕЕ | 0,9 | 0,1 | 1,0 | 1,5 | - | - |
В Таблице 4с представлена нормализация данных, где теоретическое комбинации принято за 1 (100%), и она включает расчеты CI по Chou и соавт. с применением методики, описанной выше в Примере 4.
Таблица 4с отличается от Таблиц 4а и 4b. Таблица 4с основывается на разных необработанных точках данных, которые показаны в Таблице 4а, поскольку концентрации, выбранные в Таблице 4с более близки к ЕС50 для антитела (необработанные данные не показаны).
1. Определение синергизма
1.2 Синергизм по Clarke и соавт.
Там где одно лекарственное средство имеет низкую активность, как в данном случае, где лепалидомид сам по себе обладает низкой цитотоксичностью в отношении клеток АМО-1, синергию можно определить по статистическим данным, что комбинация существенно отличается от лекарственного средства-ингибитора самого по себе. Смотри, Clarke et al., Issues in experimental design and endpoint analysis in the study of experimental cytotoxic agents in vivo in breast cancer and other models. Breast Cancer Research and Treatment 46: 255-278 (1997), которая включена по ссылке в своей полноте. В данном случае при определении синергизма применяли как способ по Chou и соавт., который показан выше, так и способ по Clarke и соавт.
Данные анализировали следующим образом:
Антагонистический (АВ)/С<(А/С)×(В/С)
Аддитивный (АВ)/С=(А/С)×(В/С)
Синергический (АВ)/С>(А/С)×(В/С),
где А представляет собой обработку LEN самим по себе; В представляет собой обработку MOR202 самим по себе; С представляет реакцию на обработку носителем; АВ представляет собой комбинацию обработок А и В.
Таблица 5: Значения необработанных данных, показанные в этой таблице, являются такими же, как показанные в Таблице 3а, поскольку они получены из тех же трех экспериментов, где как эффекторные клетки, так и клетки АМО-1 обрабатывали леналидомидом перед обработкой MOR202 и применяли отдельные и комбинированные дозы 10 мкМ LEN и 15 мкг/мл MOR03207 и MOR202. Различие состояло лишь в том, что данные анализировали с применением способа по Clarke и соавт., а не Chou и соавт.
| Эксперимент 1 | Эксперимент 2 | Эксперимент 3 | |
| A: LEN сам по себе | 15,41 | 8,44 | 22,38 |
| В: MOR202 само по себе | 23,69 | 22,53 | 49,56 |
| С: контроль | 11,07 | 8,45 | 26,43 |
| АВ: комбинация LEN и MOR202 | 35,98 | 29,09 | 80,39 |
| (АВ)/С | 3,25 | 3,44 | 3,04 |
| (А/С)×(В/С) | 2,98 | 2,66 | 1,59 |
| А = реакция на обработку LEN самим по себе В = реакция на обработку MOR202 самим по себе С = реакция на обработку контролем АВ = комбинация обработок А и В\ Значения А, В, С и АВ представляют % цитолиза. |
|||
В каждом эксперименте (АВ)/С было большим, чем (А/С)×(В/С), показывая явную синергию.
Таблица 6: Значения необработанных данных, показанные в этой таблице, являются такими же, как показанные в Таблице 4а, поскольку они получены из тех же трех экспериментов, где только эффекторные клетки обрабатывали леналидомидом перед обработкой MOR202 и применяли отдельные и комбинированные дозы 10 мкМ LEN и 15 мкг/мл MOR03207 и MOR202. Различие состояло лишь в том, что данные анализировали с применением способа но Clarke и соавт., а не Chou и соавт.
| Эксперимент 1 | Эксперимент 2 | Эксперимент 3 | |
| А: LEN сам по себе | 15,33 | 12,98 | 17,93 |
| В: MOR202 само по себе | 23,09 | 21,08 | 48,28 |
| С: контроль | 15,97 | 11,45 | 15,77 |
| АВ: комбинация LEN и MOR202 | 23,46 | 25,75 | 56,49 |
| (АВ)/С | 1,47 | 2,25 | 3,58 |
| (А/С)×(В/С) | 1,39 | 2,09 | 3,48 |
| А = реакция на обработку LEN самим по себе В = реакция на обработку MOR202 самим по себе С = реакция на обработку контролем АВ = комбинация обработок А и В |
|||
В каждом эксперименте (АВ)/С было большим, чем (А/С)×(В/С), показывая явную синергию.
Результаты
С применением анализа по Clarke и соавт. установлено, что LEN синергически усиливал активность ADCC MOR202 в клетках АМО-1 во всех 6 экспериментах. С применением анализа по Chou и соавт. установлено, что LEN синергически усиливал активность ADCC MOR202 в клетках АМО-1 в 6 из 6 экспериментов. Это усиление активности, как было определено, происходит посредством нескольких механизмов, включая непосредственную цитотоксичность, активацию эффекторных клеток и повышающую регуляцию уровней экспрессии CD38 на клетках ММ.
Эксперименты согласно примеру 4 также проводят с другими антителами, специфичными к CD38, например, антитело "RefmAB5".
Пример 5: Ингибирование пролиферации клеток NCI-H929 с применением леналидомида самого по себе
Цитотоксичность леналидомида исследовали на NCI-H929 с применением способов, описанных в Примере 3. Результаты показаны на фигуре 2. Вкратце, воздействие леналидомидом самим по себе существенно ингибировало клеточную пролиферацию у клечок NCI-H929.
Пример 6: Синергическая комбинация MOR202 и леналидомида в клетках NCI-H929
Клетки NCI-H929 выбирали для исследования с комбинацией MOR202 и леналидомида. Клетки NCI-H929 экспрессируют более высокие уровни CD38, чем клетки АМО-1, следовательно, являются иллюстративными для определенных типов клеток, обнаруживаемых у пациентов-людей с множественной миеломой или неходжкинской лимфомой.
В сумме проводили шесть экспериментов с применением способов, описанных в Примере 4, чтобы определить опосредование ADCC на клетках NCI-H929 комбинацией MOR202 и леналидомида. В трех экспериментах клетки РВМС и NCI-H929 обрабатывали леналидомидом перед обработкой MOR202, результаты показаны в Таблицах 7а-b и на фигуре 6. В трех дополнительных экспериментах только РВМС обрабатывали леналидомидом перед обработкой MOR202, результаты показаны в Таблицах 8а-b и на фигуре 7.
Таблица 7: Как эффекторные клетки, так и клетки NCI-H929 обрабатывали леналидомидом перед обработкой MOR202. Применяли отдельные и комбинированные дозы 5 мкМ LEN и 15 мкг/мл MOR03207 и 0,2 или 0,07 мкг/мл MOR202.
Данные представлены следующими способами: как а) необработанные данные (% мертвых клеток), и b) нормализованные данные специфического цитолиза, где комбинация дольных продуктов принята за 1 (100%). Таблица 7а представляет необработанные данные.
| Таблица 7а | |||||||
| NCI-H929 | LEN 5 мкМ сам по себе | MOR202 само по себе (0,2* или 0,07 мкг/мл) | Комбинация LEN (5 мкМ) и MOR202 (0,2* или 0,07 мкг/мл) | DMSO | LEN (0 мкМ) | MOR03207 (15 мкг/мл) + DMSO | MOR03207 (15 мкг/мл) |
| Эксперимент. 1 | 38,65 | 30,64* | 60,20* | 18,01 | 18,42 | 18,27 | 17,81 |
| Эксперимент. 2 | 41,92 | 43,08 | 66,62 | 18,77 | 19,92 | 20,26 | 19,20 |
| Эксперимент. 3 | 39,92 | 32,54 | 64,58 | 12,32 | 12,44 | 13,74 | 14,09 |
Единицы перечисленных значений представляют собой % мертвых клеток. DMSO, MOR03207, MOR03207 + DMSO, LENO, LEN10 без РВМС и DMSO без РВМС представляют собой контроли.
Таблица 7b представляет нормализованные данные, где комбинация дольных продуктов принята за 1 (100%).
| Таблица 7b | ||||||
| NCI-H929 | MOR202 само по себе (0,2* или 0,07 мкг/мл) | LEN 5 мкМ сам по себе | Комбинация на основе метода дольного продукта | Комбинация LEN (5 мкМ) и MOR202 (0,2* или 0,07 мкг/мл) | Комбинаторный индекс (CI) | Вывод |
| Эксперимент. 1 | 0,42* | 0,67 | 1,00 | 1,36* | <<0,1 | синергизм |
| Эксперимент. 2 | 0,58 | 0,56 | 1,00 | 1,12 | <<0,1 | синергизм |
| Эксперимент. 3 | 0,45 | 0,67 | 1,00 | 1,24 | <<0,1 | синергизм |
| СРЕДНЕЕ | 0,48 | 0,63 | 1,00 | 1,24 | ||
Комбинацию дольных продуктов рассчитывают с помощью следующей формулы 1-[(1-А)*(1-В)]=fpc(%), как описано в Ting-Chao Chou, Theoretical Basis, Experimental Design, and Computerized Simulation of Synergism and Antagonism in Drug Combination Studies, Pharmacol Rev 58: 621-681 (2006), которая включена по ссылке в своей полноте. Таблица 7b основывается на необработанных данных, показанных в Таблице 7а. Нормализацию данных, которые показаны в Таблице 7b, рассчитывают, как описано для Таблицы 3b, путем вычитания контролей. В Таблице 7b, там, где комбинация LEN и MOR202 является большей, чем комбинация, основанная на методе дольного продукта, существует явная синергия. К тому же, значения комбинаторного индекса рассчитывали с применением способов по Chou и соавт., как описано в Примере 4. Средние результатов из Таблицы 7b показаны на фигуре 6.
Таблица 8: Эффекторные клетки, обработанные только леналидомидом перед обработкой MOR202. Применяли отдельные и комбинированные дозы 5 мкМ LEN и 15 мкг/мл MOR03207 и 0,2* или 0,07 мкг/мл MOR202.
Данные представлены следующими способами: как а) необработанные данные (% мертвых клеток) и b) нормализованные данные специфического цитолиза, где комбинация дольных продуктов принята за 1 (100%). Таблица 8а представляет необработанные данные.
| Таблица 8а | |||||||
| NQ-H929 | LEN 5 мкМ сам по себе | MOR202 само по себе (0,2* или 0,07 мкг/мл) | Комбинация LEN (5 мкМ) и MOR202 (0,2* или 0,07 мкг/мл) | DMSO | LEN (0 мкМ) | MOR03207 (15 мкг/мл) + DMSO | MOR032 07 (15 мкг/мл) |
| Эксперимент. 1 | 17,50 | 26,60* | 29,11* | 18,36 | 17,56 | 19,52 | 17,07 |
| Эксперимент. 2 | 25,72 | 47,00 | 51,23 | 22,55 | 24,90 | 24,16 | 23,19 |
| Эксперимент. 3 | 26,27 | 53,74 | 67,99 | 25,29 | 25,16 | 24,43 | 27,10 |
Единицы перечисленных значений представляют собой % мертвых клеток. DMSO, MOR03207, MOR03207 + DMSO, LENO, LEN10 без РВМС и DMSO без РВМС представляют собой контроли. Таблица 8b представляет нормализованные данные, где комбинация дольных продуктов принята за 1 (100%).
| Таблица 8b | ||||||
| NCI-H929 | MOR202 само по себе (0,2* или 0,07 мкг/мл) | LEN 5 мкМ сам по себе | Комбинация на основе метода дельного продукта | Комбинация LEN (5 мкМ) и MOR202 (0,2* или 0,07 мкг/мл) | Комбинаторный индекс (CI) | Вывод |
| Эксперимент. 1 | 1,09* | -0,10 | 1,00 | 1,10* | 0,07 | синергизм |
| Эксперимент. 2 | 0,91 | 0,12 | 1,00 | 1,03 | 0,81 | синергизм |
| Эксперимент. 3 | 0,97 | 0,04 | 1,00 | 1,59 | <<0,1 | синергизм |
| СРЕДНЕЕ | 0,99 | 0,02 | 1,00 | 1,24 | ||
Таблица 8b основывается на необработанных данных, показанных в Таблице 8а. Нормализацию данных, которые показаны в Таблице 8а, рассчитывали, как описано в Таблице 3b, путем вычитания контролей. В Таблице 8b, там, где комбинация LEN и MOR202 является большей, чем комбинация, основанная на методе дельного продукта, существует явная синергия. К тому же, значения комбинаторного индекса рассчитывали с применением способов по Chou и соавт., как описано в Примере 4. Средние результатов из Таблицы 8b показаны на фигуре 7.
Определение синергизма
1.3 Метод дольного продукта
Оценка данных в этом примере отличается от применяемой при анализе воздействия комбинации MOR202 и LEN на клетки АМО-1 в Примере 4. В данном случае, исследуют клетки NCI-H929, и LEN сам по себе оказывает существенное воздействие на пролиферацию клеток NCI-H929, как показано в Примере 5, таким образом, используют метод дольного продукта. Метод дольного продукта был описан в Ting-Chao Chou, Theoretical Basis, Experimental Design, and Computerized Simulation of Synergism and Antagonism in Drug Combination Studies, Pharmacol Rev 58: 621-681 (2006), который включена по ссылке в своей полноте. В том документе Chou и соавт. утверждают: если каждый из А и В ингибирует на 60%, то при упрощении аддитивный эффект представляет собой 84% ингибирование. На основании рассуждений Webb (1963) проблему такого рода можно разрешить (1-0,6)(1-0,6)=0,16, 1-0,16-=0,84. Chou и Talalay (1984) назвали это метод дольного продукта. Этот метод не будет приводить к эффекту комбинации, превышающему 100% ингибирование. Chou и Talalay (1984), однако, также доказали, что этот способ имеет ограниченную достоверность, поскольку он принимает во внимание силу (например, частичное ингибирование), но не обращает внимания на форму кривой доза-эффект (например, гиперболическую или сигмовидную). Важность "формы" в анализе доза-эффект показана на фиг.1. Chou и Talalay (1984) показывали, что способ по Webb является достоверным только тогда, когда оба лекарственных средства имеют гиперболические кривые (т.е. при простой кинетике Михаэлиса-Ментен, когда кривые доза-эффект являются гиперболическими, т.е. m=1 на графике медианного эффекта) и не является достоверным, когда m не равно 1, как, например, для сигмовидной (m>1) или плоской сигмовидной (m<1) кривых Кроме того, способ по Webb является достоверным, когда эффекты двух лекарственных средств являются взаимно неисключающими (например, полностью независимые), и не является достоверным для взаимоисключающих (например, сходные механизмы или способы действия, как предполагается для классической изоболограммы, смотри ниже).
Clarke и соавт. не использовали, поскольку Clarke является наиболее подходящим когда одна монотерапия оказывает слабое воздействие.
Смотри Фигуру 12, кривую наилучшего соответствия определяли посредством удаления экспериментальных точек на графике, а) где концентрация MOR202 была слишком низкой чтобы оказывать какое-либо воздействие, и b) где концентрация была близкой к насыщению. В соответствующих экспериментальных точках на графике, приблизительно 80% цитолиз, значение CI составляет менее 1, подтверждая явную синергию.
Результаты
С применением анализа согласно методу дольного продукта было установлено, что LEN синергично усиливал активность MOR202 в клетках NCI-H929 в 6 из 6 экспериментов. С применением анализа по Chou и соавт. было установлено, что LEN синергически усиливал активность MOR202 в клетках NCI-H929 в 6 из 6 экспериментов. Смотри Таблицы 7а-b и 8а-b.
Пример 7: MOR202 и LEN сам по себе и в комбинации при разрушении кости NCI-H929 в модели ММ на SCID мышах
Материалы
Леналидомид (SYNthesis med chem; Шанхай, Китай; лот №: ZHM-066-051).
MOR202 (MorphoSys AG, лот 100706-5KLE18). Среда-контроль: Ora-Plus:Ora-Sweet SF (Paddock Laboratories, Миннеаполис, Миннесота, США, лот №9499528). SCID мыши (Университет Аделаиды, Уэйт кампус, Еррбро, Южная Австралия, Австралия, линия C.B.-17-lgh-lb-Prkdcscid).
Клетки NCI-H929 множественной миеломы человека (смотри Таблицу 1). Среда культивирования клеток RPMI 1640, фетальная бычья сыворотка (FBS), меркаптоэтанол, сбалансированный солевой раствор Хенкса (HBSS) и пенициллин-стрептомицин от Invitrogen Australia (Маунт Уэверли, Виктория, Австралия); и трипановый синий и глюкоза от Sigma-Aldrich (Касл Хилл, Новый Южный Уэллс, Австралия).
Способы
63 SCID мыши инокулировали в День (-7) ортотопически в правую большеберцовую кость 2,5×106 NCI-H929 клеток ММ (в 5 мкл) с целью вызвать разрушение кости. Через трое суток после инокуляции (День -4) 60 из SCID мышей рандомизировали по массе тела на группы, показанные в Таблице 13, 10 мышей на группу. Схема дозирования представлена в Таблице 9. Обработки леналидомидом (группы А и D) и средой-контролем (Группа С) начались в День (-1). Обработки MOR202 (группы В и D) начинались в День 0. Обработки продолжались в течение 6 недель.
| Таблица 9 | |||
| Схема дозирования и группы | |||
| Группа | Соединение | Обработка | Схема |
| А | леналидомид | 50 мг/кг, перорально при 10 мл/кг | раз в сутки в течение 6 недель |
| В | MOR202 | 3 мг/кг, внутрибрюшинно при 10 мл/кг | 3 раза в неделю в течение 6 недель |
| С | среда-контроль | 10 мл/кг, перорально | раз в сутки в течение 6 недель |
| (Ora-Plus:Ora-Sweet SF (1:1, вес/вес)) | |||
| D | Комбинация леналидомид/MOR202 | 50 мг/кг, перорально при 10 мл/кг | раз в сутки в течение 6 недель |
| 3 мг/кг, внутрибрюшинно при 10 мл/кг | 3 раза в неделю в течение 6 недель | ||
Изображения, полученные с помощью компьютерной микротомографии, применяли для оценки разрушения кости, и они включали трехмерный анализ, включающий общий объем кости (TBV), объем трабекулярной структуры кости (Tb.BV), трабекулярный коэффициент (Tb.Pf) и индекс модельной структуры (SMI). Таблица 10 определяет каждый из этих параметров. Результаты для каждого из параметров изображения, полученного с помощью компьютерной микротомографии, показаны в Таблице 11. Результаты общего объема кости (TBV) показаны на фигуре 19.
| Таблица 10 | |
| Параметры изображения, полученного с помощью компьютерной микротомографии | |
| Параметры: | Определения: |
| Общий объем кости (мм3) | Общий объем кортикального слоя и трабекулярной структуры кости в объеме интереса (поперечное сечение). |
| Объем трабекулярной структуры кости | Объем трабекулярной структуры кости в объеме интереса (поперечное сечение). |
| ^Трабекулярный коэффициент (Tb.Pf) | Индекс фрагментации; обратный индексу связанности при конкретном применении к губчатой кости. Более низкий Tb.Pf выражает лучше связанные трабекулярные решетки, тогда как более высокий Tb.Pf означает более разобщенную трабекулярную структуру (т.е. большее разрушение кости). |
| ** Индекс модельной структуры (SMI) | Показатель относительной распространенности стержней и пластин в 3D структуре, такой как трабекулярная структура кости. Этот параметр является важным при остеолизе кости, который характеризуется переходом от пластинчатой (нормальная) к стержневидной (деградация) структурам. Идеальная плоскость, цилиндр и сфера имеют значения SMI 0, 3 и 4, соответственно. Чем выше значение, тем большее повреждение присутствует. |
| Таблица 11 | ||||||
| Результаты, полученные с помощью компьютерной микротомографии: общий объем кости (TBV), объем трабекулярной структуры кости (Tb.BV), трабекулярный коэффициент (Tb.Pf) и индекс модельной структуры (SMI). | ||||||
| Группа | Обработка | Идентификационный номер (ID) мыши | Общий объем кости (TBV) | Объем трабекулярной структыры кости (Tb.BV) | Трабекулярный коэффициент (Tb.Pf) | Индекс модельной структуры (SMI) |
| мм-3 | мм-2 | мм-1 | ||||
| Контроль | Неинокулированная большеберцовая кость сравнения* | 38045 | 2,748 | 0,244 | 15,354 | 1,756 |
| 38596 | 2,839 | 0,295 | 12,373 | 1,542 | ||
| 39565 | 2,930 | 0,314 | 14,703 | 1,847 | ||
| 38325 | 2,964 | 0,309 | 13,538 | 1,653 | ||
| 33746 | 2,751 | 0,293 | 13,270 | 1,624 | ||
| 38770 | 2,567 | 0,307 | 13,025 | 1,645 | ||
| 37966 | 2,967 | 0,410 | 12,125 | 1,557 | ||
| 38604 | 3,087 | 0,327 | 11,902 | 1,658 | ||
| 38023 | 2,775 | 0,270 | 18,005 | 1,889 | ||
| 38594 | 2,830 | 0,311 | 13,293 | 1,589 | ||
| среднее значение | 2,846 | 0,308 | 13,759 | 1,676 | ||
| стандартная ошибка среднего | 0,047 | 0,014 | 0,583 | 0,037 | ||
| А | Леналидомид, 50 мг/кг | 33150 | 1,604 | 0,107 | 24,329 | 2,679 |
| 38027 | 1,742 | 0,100 | 23,561 | 2,667 | ||
| 38314 | 2,506 | 0,256 | 22,893 | 2,335 | ||
| 38446 | 2,466 | 0,213 | 28,280 | 2,560 | ||
| 38562 | 2,688 | 0,385 | 22,213 | 2,086 | ||
| 38626 | 2,869 | 0,293 | 30,739 | 2,619 | ||
| 38748 | 1,786 | 0,114 | 24,016 | 2,562 | ||
| 39192 | 1,988 | 0,081 | 29,454 | 2,592 | ||
| 39364 | 1,741 | 0,155 | 24,205 | 2,547 | ||
| 39512 | 2,007 | 0,219 | 38,360 | 3,125 | ||
| среднее значение | 2,140 | 0,192 | 26,805 | 2,577 | ||
| стандартная ошибка среднего | 0,143 | 0,031 | 1,584 | 0,083 | ||
| В | MOR03087, 3 мг/кг | 32094 | 2,233 | 0,190 | 27,049 | 2,386 |
| 32548 | 2,893 | 0,310 | 15,631 | 1,818 | ||
| 33564 | 2,760 | 0,356 | 27,631 | 2,423 | ||
| 38016 | 1,635 | 0,118 | 27,523 | 2,450 | ||
| 38023 | 2,681 | 0,248 | 17,887 | 1,860 | ||
| Группа | Обработка | Идентификационный номер (ID) мыши | Общий объем кости (TBV) | Объем трабекулярной структыры кости (Tb.BV) | Трабекулярный коэффициент (Tb.Pf) | Индекс модельной структуры (SMI) |
| мм-3 | мм-2 | мм--1 | ||||
| 38510 | 1,838 | 0,260 | 21,405 | 2,461 | ||
| 38599 | 2,884 | 0,482 | 26,345 | 2,558 | ||
| 39086 | 3,068 | 0,566 | 20,327 | 2,247 | ||
| 39666 | 2,547 | 0,416 | 25,843 | 2,318 | ||
| 39715 | 2,135 | 0,284 | 22,402 | 2,275 | ||
| среднее значение | 2,467 | 0,323 | 23,204 | 2,280 | ||
| стандартная ошибка среднего | 0,153 | 0,043 | 1,365 | 0,079 | ||
| С | Среда-контроль (Ora Plus:Ora Sweet SF(1:1, вес/вес)) | 33090 | 1,821 | 0,159 | 26,537 | 2,714 |
| 33131 | 1,863 | 0,132 | 28,429 | 2,681 | ||
| 33746 | 1,577 | 0,130 | 29,171 | 2,652 | ||
| 37966 | 1,865 | 0,234 | 18,276 | 2,327 | ||
| 38325 | 2,030 | 0,096 | 30,839 | 2,591 | ||
| 38596 | 1,870 | 0,154 | 33,079 | 2,783 | ||
| 38604 | 1,904 | 0,232 | 23,234 | 2,607 | ||
| 38770 | 2,461 | 0,210 | 19,149 | 2,137 | ||
| 39426 | 1,556 | 0,184 | 21,846 | 2,348 | ||
| 39565 | 2,235 | 0,256 | 24,545 | 2,365 | ||
| среднее значение | 1,918 | 0,179 | 25,510 | 2,521 | ||
| стандартная ошибка среднего | 0,087 | 0,017 | 1,567 | 0,067 | ||
| АВ | Леналидомид, | 32695 | 2,471 | 0,168 | 21,323 | 2,028 |
| 37854 | 2,527 | 0,265 | 15,938 | 1,758 | ||
| 38276 | 3,212 | 0,220 | 20,046 | 2,197 | ||
| 38550 | 2,833 | 0,186 | 17,907 | 1,892 | ||
| 50 мг/кг/ | 38594 | 3,044 | 0,268 | 16,530 | 1,787 | |
| MOR03087, | 38994 | 2,896 | 0,408 | 14,633 | 1,683 | |
| 3 мг/кг | 39256 | 2,308 | 0,304 | 24,513 | 2,280 | |
| 39555 | 3,227 | 0,215 | 19,753 | 2,497 | ||
| 39677 | 3,205 | 0,548 | 12,313 | 1,799 | ||
| 39750 | 2,961 | 0,281 | 14,981 | 1,752 | ||
| среднее значение | 2,868 | 0,286 | 17,794 | 1,967 | ||
| стандартная ошибка среднего | 0,105 | 0,036 | 1,152 | 0,086 |
Анализ каждого параметра в отношении синергической активности осуществляли согласно теореме по Clarke и соавт. В Таблице 12 показаны расчеты, выполненные для определения синергии комбинации MOR202 и леналидомида.
| Таблица 12 | |||||
| Если ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ имеет ВЫСОКОЕ значение | Если ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ имеет НИЗКОЕ значение | ||||
| Антагонистический = (АВ)/С<(А/С)×(В/С) | Антагонистический = (АВ)/С>(А/С)×(В/С) | ||||
| Аддитивный = (АВ)/С=(А/С)×(В/С) | Аддитивный = (АВ)/С=(А/С)×(В/С) | ||||
| Синергический = (АВ)/C>(А/С)×(В/С) | Синергический = (АВ)/С<(А/С)×(В/С) | ||||
| А = реакция на обработку LEN, 50 мг/кг | |||||
| В = реакция на обработку MOR202, 3 мг/кг | |||||
| С = реакция на обработку средой | |||||
| АВ = комбинация обработок 1 и 2 | |||||
| Общий BV | BV трабекулярной структуры кости | Трабекулярный коэффициент | Индекс модельной структуры | ||
| А | 2,14 | 0,192 | 26,805 | 2,577 | |
| В | 2,467 | 0,323 | 23,204 | 2,28 | |
| С | 1,918 | 0,179 | 25,51 | 2,521 | |
| АВ | 2,868 | 0,286 | 17,794 | 1,967 | |
| (АВ)/С | 1,495307612 | 1,597765363 | 0,69753038 | 6,786245934 | |
| больше чем | меньше чем | меньше чем | меньше чем | ||
| (А/С)×(В/С) | 1,44 | 1,94 | 0,96 | 0,92 | |
Численные значения, показанные в Таблице 12, взяты непосредственно из средних, показанных в Таблице 11 для каждого из параметров в каждой из групп. Группы, описанные как А, В, С и АВ, представляют собой те же самые группы обработки во всех Таблицах 9, 11 и 12.
По общему объему кости (АВ)/С является большим, чем (А/С)×(В/С), показывая явный синергизм. По трабекулярному коэффициенту и индексу модельной структуры, которые описаны в Таблице 10, более низкое значение представляет меньшее разрушение кости (эффективность лечения), следовательно, (АВ)/С меньше, чем (А/С)×(В/С) показывает явный синергизм по обоим параметрам.
Результаты
Инокуляция клетками множественной миеломы NCI-H929 вызывала значительное разрушение кости в большеберцовых костях самок SCID мышей в этом исследовании что показано измерением разрушения кости посредством компьютерной микротомографии. Степень разрушения кости значительно уменьшалась в большеберцовых костях мышей, обрабатываемых комбинацией MOR202 и леналидомида, как показано с помощью компьютерной микротомографии. По каждому из параметров изображения, полученного с помощью компьютерной микротомографии: общему объему кости (TBV), объему трабекулярной структуры кости (Tb.BV), трабекулярному коэффициенту (Tb.Pf) и индексу модельной структуры (SMI), комбинация MOR202 и леналидомида (группа АВ) показывала явную синергию при снижении разрушения кости, вызванного клетками множественной миеломы NCI-H929.
Если значения в Таблице 11 скорректированы с тем, чтобы контрольную группу (неинокулированная располагающаяся с противоположной стороны большеберцовая кость без опухоли) рассматривать как 0% разрушение кости и группу С (среда-контроль (инъекционный раствор 0,9% хлорида натрия)) рассматривать как 100% разрушение кости, тогда MOR202 само по себе снижало разрушение кости дозозависимо на до 55% при 12 мг/кг по сравнению с средой-контролем. LEN сам по себе при 50 мг/кг ингибировал разрушение кости на 20%. Комбинация 3 мг/кг MOR202 и 50 мг/кг LEN полностью прекращала разрушение кости. Эти результаты подтверждают синергический эффект комбинированной терапии. К тому же присутствовало снижение (>90%) уровней М-белка в сыворотке в группе с комбинацией, показывая существенное уменьшение опухолевой нагрузки.
Пример 8
MOR202 и леналидомид сами по себе и в комбинации против опухоли, вызванной неходжкинской RAMOS человека у самок SCID мышей, модель выживаемости
Материалы
Циклофосфамид (Fluka, Бухс, Швейцария, лот №07551661). Леналидомид (SYNthesis Med Chem; Шанхай, Китай; лот №2НМ-066-051). MOR202 (MorphoSys AG, лот 100706-5KLE18). Среда-контроль: Ora-Plus:Ora-Sweet SF, 1:1, объем/объем (SYNthesis Med Chem; Шанхай, Китай). SCID мыши (Университет Аделаиды, Уэйт кампус, Еррбро, Южная Австралия, Австралия, линия C.B.-17-lgh-1b-Prkdcscid).
Клетки RAMOS (Oncodesign, Dijon Cedex, Франция) культивировали в RPMI1640 + 20% инактивированной нагреванием FBS из другого источника + 1% Glutamax (среда #2). Реактивы для культуры клеток неходжкинской лимфомы RAMOS получали от следующих поставщиков: среда культивирования клеток RPMI 1640, FBS, Glutamax, HEPES, пируват натрия, HBSS и пенициллин-стрептомицин от Invitrogen Australia (Маунт Уэверли, Виктория, Австралия) и трипановый синий и глюкоза от Sigma-Aldrich (Касл Хилл, Новый Южный Уэльс, Австралия).
Способы
Шестьдесят восемь самок SCID мышей предварительно обрабатывали циклофосфамидом (75 мг/кг, внутрибрюшинно, дважды в сутки) в течение двух суток перед инокуляцией клетками RAMOS (День -5 и -4). В день инокуляции (День -3) всех мышей инокулировали 1×106 клетками RAMOS каждую внутривенно в хвостовую вену. Шестьдесят четыре из мышей рандомизировали по массе тела на восемь групп по восемь. Схема дозирования для каждой группы показана в Таблице 13.
| Таблица 13 | ||||
| Схема дозирования | ||||
| Группа | Соединение | Обработка | Предполагаемый режим | Фактический режим |
| А | Леналидомид | 50 мг/кг, перорально при 10 мл/кг | Раз в сутки (День 0-20) | День 0-20 |
| В | MOR03087 | 1 мг/кг, внутривенно при 10 мл/кг | Дважды в неделю (День 0, 4, 7, 11, 14 и 18) | Дважды в неделю (День 0, 4, 7, 11, 14 и 18) |
| С | Среда-контроль (Ora-Plus:Ora-Sweet, 1:1, объем/объем) | перорально, 10 мл/кг | Раз в сутки (День 0-20) | День 0-18 |
| АВ | Леналидомид/MOR03087 | 100/1 мг/кг, перорально/внутривенно при 10 мл/кг | Раз в сутки/дважды в неделю (как указано выше) | День 0-13 и 16-20/ |
| День 0, 4, 7, 11, 14 и 18 | ||||
Исследование продолжалось в течение 98 суток, и измеряемым конечным показателем была выживаемость. Результаты из каждой группы показаны в Таблице 14.
| Таблица 14 | ||||||
| Число выживших и период времени для каждой группы | ||||||
| День смерти (после инокуляции) | % ILS (на основе медианного дня смерти) | Число мышей, живых на момент окончания исследования (день 98) | ||||
| Медиана | Диапазон | Среднее значение | 95% CI | |||
| A: LEN 100 мг/кг | 22 | 18-23 | 21,4 | 19,8-23,0 | 10 | 0/7 |
| В: MOR202 1 мг/кг | 51 | 35-65 | 49,6 | 41,9-57,3 | 155 | 0/8 |
| С: Среда-контроль | 20 | 18-21 | 19,8 | 18,7-20,8 | X | 0/8 |
| АВ: комбинированные LEN/MOR | 65 | 32-98 | 66,5 | 41,9-91,2 | 225 | 3/8 |
Анализ в отношении синергической активности осуществляли согласно теореме по Clarke и соавт., как описано в Примере 4. В Таблице 15 показаны расчеты, выполненные при определении синергии комбинации MOR202 и леналидомида.
| Таблица 15 | |||||||
| Если ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ имеет ВЫСОКОЕ значение: | Если ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ имеет НИЗКОЕ значение: | ||||||
| Антагонистический = (АВ)/С<(А/С)×(В/С) | Антагонистический = (АВ)/С>(А/С)×(В/С) | ||||||
| Аддитивный = (АВ)/С=(А/С)×(В/С) | Аддитивный = (АВ)/С=(А/С)×(В/С) | ||||||
| Синергический = (АВ)/С>(А/С)×(В/С) | Синергический = (АВ)/С<(А/С)×(В/С) | ||||||
| А = реакция на обработку LEN, 100 мг/кг | |||||||
| В = реакция на обработку MOR202, 1 мг/кг | |||||||
| С = реакция на обработку средой | |||||||
| АВ = комбинация обработок А и В | |||||||
| Медиана выживаемости | |||||||
| А | 22 | ||||||
| В | 51 | ||||||
| С | 20 | ||||||
| АВ | 65 | ||||||
| (АВ)/С | 3,25 | ||||||
| больше чем | |||||||
| (А/С)×(В/С) | 2,805 | ||||||
Численные значения, показанные в Таблице 15, взяты из количества дней медианы выживаемости, показанного в Таблице 14 для каждой из групп. Группы, описанные как А, В, С и АВ, представляют собой те же самые группы обработки в Таблицах 13-15.
Инокуляция клетками RAMOS была летальной в пределах медианного времени 20 суток в контрольной группе. Комбинация MOR202 и леналидомида, однако, показывала явную синергию при увеличении количества дней медианы выживаемости.
Пример 9: Бортезомиб сам по себе ингибирует пролиферацию различных клеточных линий множественной миеломы.
Ингибирующее воздействие бортезомиба на пролиферацию клеток множественной миеломы анализировали на нескольких клеточных линиях. Возрастающие количества бортезомиба (Velcade®, лот №9AZSY00) применяли к клеткам АМО-1, LP-1, NCI-H929 и RPMI-8226 и инкубировали в течение 24 часов, 48 часов и 72 часов. После периода инкубирования планшеты анализировали в отношении клеточной пролиферации в количественном колориметрическом анализе на основе ХТТ с применением набора для изучения клеточной пролиферации II (ROCHE, Cell Proliferation Kit II, кат. №11465015001). Для последующего измерения планшеты считывали на планшет-ридере Tecan Genios и определяли поглощение при 492 нм.
Пролиферацию клеток всех исследуемых клеточных линий ингибировали бортезомибом с концентрацией IC50 3,9 нмоль для клеток АМО-1, 6,1 нмоль для клеток LP-1, 3,3 нмоль для клеток NCI-H929 и 9,0 нмоль для клеток RPMI-8226, соответственно, как показано на Фигуре 8.
Пример 10: ADCC с применением комбинации MOR202 и бортезомиба
С помощью способов, описанных в примере 4, анализировали ADCC эффект объединения бортезомиба и MOR202. В данном случае, целевые клетки обрабатывали бортезомибом перед обработкой MOR202. Исследовали обе линии целевых клеток, клетки NCI-H929 и LP-1. Результаты показаны на фигурах 9 и 10. Усиление активности MOR202 бортезомибом опосредовалось через прямое цитотоксическое воздействие на клетки MM.
Пример 11: MOR202 и BOR сами по себе и в комбинации модели разрушения кости NCI-H929 множественной миеломы человека на SCID мышах
Материалы
Бортезомиб (SYNthesis med chem., Шанхай, Китай, лот № ZHM-066-054).
Бортезомиб составляли в стерильном 0,9% растворе хлорида натрия для дозирования. MOR202 (MorphoSys AG, лот 100706-5KLE18). Среда-контроль: 0,9% инъекционный раствор хлорида натрия.
SCID Мыши (Университет Аделаиды, Уэйт кампус, Еррбро, Южная Австралия, Австралия, линия C.B.-17-lgh-1b-Prkdcscid).
Способы
63 SCID мышам инокулировали в День (-7) внутрь большеберцовой кости 2,5×106 NCI-Н929 клеток ММ для того, чтобы вызвать разрушение кости. Через трое суток после инокуляции (День -4) 60 из SCID мышей рандомизировали по массе тела на группы, показанные в Таблице 16, 10 мышей на группу. Схема дозирования представлена в Таблице 16. Обработки бортезомибом (группы А и АВ) и средой-контролем (группа С) начинали в День (-1). Обработки MOR202 (группы В и АВ) начинали в День 0. Обработки продолжались в течение 6 недель.
| Таблица 16 | |||
| Схема дозирования и группы | |||
| Группа | Соединение | Обработка | Режим |
| А | Бортезомиб | 0,6 мг/кг, внутрибрюшинно при 10 мл/кг | дважды в неделю |
| В | MOR202 | 3 мг/кг, внутрибрюшинно при 10 мл/кг | три раза в неделю |
| С | Среда-контроль (0,9% инъекционный раствор хлорида натрия) | внутрибрюшинно, 10 мл/кг | дважды в неделю |
| АВ | Бортезомиб/MOR202 | 0,6/3 мг/кг, внутрибрюшинно при 10 мл/кг | дважды/три раза в неделю, в чередующиеся дни |
Изображения, полученные с помощью компьютерной микротомографии, применяли для оценки разрушения кости, и она включала 3-мерный анализ, включающий общий объем кости (TBV), объем трабекулярной структуры кости (Tb.BV), трабекулярный коэффициент (Tb.Pf) и индекс модельной структуры (SMI). В Таблице 10 выше определен каждый из этих параметров. Результаты по каждому из параметров изображений, полученных с помощью компьютерной микротомографии, показаны в Таблице 17. Результаты по общему объему кости (TBV) показаны на фигуре 20.
| Таблица 17 | ||||||
| Результаты, полученные с помощью компьютерной микротомографии: общий объем кости (TBV), объем трабекулярной структуры кости (Tb.BV), трабекулярный коэффициент (Tb.Pf) и индекс модельной структуры (SMI). | ||||||
| Группа | Обработка | Идентификационный номер (ID) мыши | Общий объем кости (TBV) | Объем трабекулярной структуры кости (Tb.BV) | Трабекулярный коэффициент (Tb.Pf) | Индекс модельной структуры (SMI) |
| мм-3 | мм-2 | мм--1 | ||||
| Контрол | Неинокулированн | 115898 | 2,771 | 0,400 | 12,097 | 1,525 |
| Группа | Обработка | Идентификационный номер (ID) мыши | Общий объем кости (TBV) | Объем трабекулярной структуры кости (Tb.BV) | Трабекулярный коэффициент (Tb.Pf) | Индекс модельной структуры (SMI) |
| мм-3 | мм-2 | мм--1 | ||||
| 116259 | 3,255 | 0,598 | 7,999 | 1,264 | ||
| 109482 | 3,194 | 0,566 | 5,596 | 1,025 | ||
| 107508 | 2,945 | 0,346 | 16,910 | 1,860 | ||
| среднее | 3,041 | 0,477 | 10,650 | 1,419 | ||
| стандартная ошибка среднего | 0,112 | 0,062 | 2,481 | 0,179 | ||
| А | Бортезомиб, 0,6 мг/кг, дважды в неделю внутрибрюшинно | 101426 | 2,351 | 0,307 | 25,893 | 2,443 |
| 105949 | 2,025 | 0,191 | 26,044 | 2,374 | ||
| 107598 | 3,109 | 0,557 | 16,877 | 2,156 | ||
| 109560 | 3,146 | 0,588 | 23,179 | 2,262 | ||
| 113302 | 1,790 | 0,067 | 32,463 | 2,700 | ||
| 115836 | 1,893 | 0,076 | 33,152 | 2,981 | ||
| 116981 | 2,201 | 0,100 | 34,609 | 3,007 | ||
| 117585 | 1,617 | 0,093 | 31,813 | 2,553 | ||
| 117750 | 2,300 | 0,284 | 27,147 | 2,337 | ||
| 117793 | 2,448 | 0,329 | 23,582 | 2,273 | ||
| среднее | 2,288 | 0,259 | 27,476 | 2,509 | ||
| стандартная ошибка среднего | 0,162 | 0,061 | 1,756 | 0,094 | ||
| В | MOR03087, 3 мг/кг, три раза в неделю внутрибрюшинно | 106446 | 1,924 | 0,082 | 27,363 | 2,546 |
| 109482 | 1,987 | 0,388 | 19,479 | 2,079 | ||
| 112220 | 2,155 | 0,394 | 21,858 | 2,296 | ||
| 113668 | 1,958 | 0,276 | 23,814 | 2,429 | ||
| 115187 | 2,080 | 0,440 | 16,347 | 1,871 | ||
| 115956 | 2,207 | 0,460 | 19,748 | 2,193 | ||
| 116312 | 1,885 | 0,234 | 25,212 | 2,368 | ||
| 116798 | 1,882 | 0,254 | 21,276 | 2,436 | ||
| 116944 | 1,937 | 0,276 | 24,031 | 2,368 | ||
| 117773 | 1,862 | 0,160 | 25,056 | 2,511 | ||
| среднее | 1,988 | 0,296 | 22,418 | 2,310 | ||
| стандартная ошибка среднего | 0,038 | 0,039 | 1,044 | 0,066 |
| Группа | Обработка | Идентификационный номер (ID) мыши | Общий объем кости (TBV) | Объем трабекулярной структуры кости (Tb.BV) | Трабекулярный коэффициент (Tb.Pf) | Индекс модельной структуры (SMI) |
| мм-3 | мм-2 | мм--1 | ||||
| С | Среда-контроль (0,9% инъекционный раствор хлорида натрия), дважды в неделю внутрибрюшинно | 107097 | 1,619 | 0,248 | 22,779 | 2,246 |
| 112122 | 1,608 | 0,178 | 26,514 | 2,505 | ||
| 115971 | 1,637 | 0,241 | 24,603 | 2,485 | ||
| 116259 | 1,880 | 0,369 | 19,334 | 2,176 | ||
| 116585 | 2,060 | 0,179 | 24,120 | 2,369 | ||
| 116779 | 1,624 | 0,190 | 23,909 | 2,417 | ||
| 117054 | 1,782 | 0,131 | 23,000 | 2,541 | ||
| 117110 | 1,838 | 0,281 | 22,602 | 2,312 | ||
| 117242 | 1,919 | 0,281 | 21,162 | 2,193 | ||
| 117375 | 1,899 | 0,283 | 23,455 | 2,338 | ||
| среднее | 1,786 | 0,238 | 23,148 | 2,358 | ||
| стандартная ошибка среднего | 0,050 | 0,022 | 0,615 | 0,041 | ||
| АВ | Бортезомиб/MOR202, 0,6/3 мг/кг, два/три раза в неделю внутрибрюшинно | 107508 | 3,303 | 0,927 | 16,902 | 2,158 |
| 112625 | 4,254 | 1,661 | 3,000 | 0,772 | ||
| 113322 | 3,684 | 1,332 | 3,888 | 0,884 | ||
| 116030 | 2,422 | 0,192 | 30,272 | 2,542 | ||
| 116198 | 3,537 | 1,037 | 8,023 | 1,217 | ||
| 116376 | 1,933 | 0,255 | 22,059 | 2,321 | ||
| 116520 | 2,793 | 0,654 | 22,439 | 2,336 | ||
| 117077 | 3,402 | 0,658 | 7,207 | 1,241 | ||
| 117093 | 2,436 | 0,643 | 17,454 | 1,927 | ||
| 117135 | 3,026 | 0,627 | 13,699 | 1,775 | ||
| среднее | 3,079 | 0,799 | 14,494 | 1,717 | ||
| стандартная ошибка среднего | 0,220 | 0,144 | 2,836 | 0,204 |
Анализ каждого параметра в отношении синергической активности осуществляли согласно теореме по Clarke и соавт., как описано в Примере 4. В Таблице 18 показаны расчеты, выполненные при определении синергии комбинации MOR202 и бортезомиба.
| Таблица 18 | |||||||
| Если ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ имеет более ВЫСОКОЕ значение | Если ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ имеет более НИЗКОЕ значение | ||||||
| Антагонистический = (АВ)/С<(А/С)×(B/C) | Антагонистический = (АВ)/C>(А/С)×(В/С) | ||||||
| Аддитивный = (АВ)/С=(А/С)×(В/С) | Аддитивный = (АВ)/С=(А/С)×(В/С) | ||||||
| Синергический = (АВ)/C>(А/С)×(В/С) | Синергический = (АВ)/С<(А/С)×(В/С) | ||||||
| А = реакция на обработку BOR при 0,6 мг/кг | |||||||
| В = реакция на обработку MOR202 при 3 мг/кг | |||||||
| С = реакция на обработку средой, 0,9% хлоридом натрия | |||||||
| АВ = комбинация обработок А и В | |||||||
| Общий BV | BV трабекулярной структуры кости | Трабекулярный коэффициент | Индекс модельной структуры | ||||
| А | 2,288 | 0,259 | 27,476 | 2,509 | |||
| В | 1,988 | 0,296 | 22,418 | 2,31 | |||
| С | 1,786 | 0,238 | 23,148 | 2,358 | |||
| АВ | 3,079 | 0,799 | 14,494 | 1,717 | |||
| (АВ)/С | 1,723964166 | 3,357142857 | 0,626144807 | 0,728159457 | |||
| больше чем | больше чем | меньше чем | меньше чем | ||||
| (А/С)×(В/С) | 1,425967052 | 1,353435492 | 1,149538246 | 1,042377527 | |||
Численные значения, показанные в Таблице 18, взяты непосредственно из средних, показанных в Таблице 17, для каждого из параметров в каждой из групп. Группы, описанные как А, В, С и АВ, представляют собой те же самые группы обработки в Таблицах 16-18.
По общему объему кости и объему трабекулярной структуры кости (АВ)/С является большим, чем (А/С)×(В/С), показывая явный синергизм. По трабекулярному коэффициенту и индексу модельной структуры, которые описаны в Таблице 10, более низкое значение представляет меньшее разрушение кости (эффективность лечения), следовательно, (АВ)/С меньше, чем (А/С)×(В/С), подтверждает явный синергизм по обоим параметрам.
Результаты
Инокуляция клетками множественной миеломы NCI-H929 вызывала значительное разрушение кости в большеберцовых костях самок SCID мышей в этом исследовании, как показано с помощью измерения разрушения кости посредством компьютерной микротомографии. Степень разрушения кости значительно уменьшалась в большеберцовых костях мышей, обработанных комбинацией MOR202 и бортезомиба, как показано с помощью компьютерной микротомографии. По каждому из параметров изображения, полученного с помощью компьютерной микротомографии: общий объем кости (TBV), объем трабекулярной структуры кости (Tb.BV), трабекулярный коэффициент (Tb.Pf) и индекс модельной структуры (SMI), комбинация MOR202 и бортезомиба (группа АВ) показывала явную синергию при снижении разрушения кости, вызванного клетками множественной миеломы NCI-H929.
Если значения в Таблице 17 скорректированы с тем, чтобы контрольную группу (неинокулированная располагающаяся с противоположной стороны большеберцовая кость без опухоли) рассматривать как 0% разрушение кости и группу С (среда-контроль (инъекционный раствор 0,9% хлорида натрия)) рассматривать как 100% разрушение кости, тогда MOR202 само по себе снижало разрушение кости дозозависимо на до 55% при 12 мг/кг по сравнению со средой-контролем, BOR сам по себе при 0,6 мг/кг ингибировал разрушение кости на 40% и комбинация более низкой дозы 3 мг/кг MOR202 и 0,6 мг/кг BOR полностью прекращала разрушение кости. Эти результаты подтверждают синергический эффект комбинированной терапии. К тому же присутствовало снижение (>90%) уровней М-белка в сыворотке в группе с комбинацией, показывая существенное уменьшение опухолевой нагрузки.
Пример 12 MOR202 и бортезомиб сами по себе и в комбинации против опухоли, вызванной неходжкинской RAMOS человека у самок SCID мышей, модель выживаемости
Материалы
Циклофосфамид (Fluka, Бухс, Швейцария, WB 10468). Бортезомиб (SYNthesis med chem., Шанхай, Китай, лот № ZHM-066-054). Бортезомиб составляли в стерильном 0,9% растворе хлорида натрия для дозирования. MOR202 (MorphoSys AG, лот 100706-5KLE18). Среда-контроль: 0,9% инъекционный раствор хлорида натрия. SCID мыши (Университет Аделаиды, Уэйт кампус, Еррбро, Южная Австралия, Австралия, линия C.B.-17-lgh-1b-Prkdcscid).
Клетки RAMOS (Oncodesign, Dijon Cedex, Франция) культивировали в RPMI1640 + 20% инактивированной нагреванием FBS из другого источника + 1% Glutamax (среда #2). Реактивы для культуры клеток неходжкинской лимфомы RAMOS получали от следующих поставщиков: среда культивирования клеток RPMI 1640, FBS, Glutamax, HEPES, пируват натрия, HBSS и пенициллин-стрептомицин от Invitrogen Australia (Маунт Уэверли, Виктория, Австралия) и трипановый синий и глюкоза от Sigma-Aldrich (Касл Хилл, Новый Южный Уэльс, Австралия).
Способы
Пятьдесят пять самок SCID мышей предварительно обрабатывали циклофосфамидом (75 мг/кг, внутрибрюшинно, дважды в сутки) в течение двух суток до инокуляции клетками RAMOS (День -5 и -4). В день инокуляции (День -3) всех пятьдесят пять мышей инокулировали 1×106 клеток RAMOS каждую (в 100 мкл) внутривенно в хвостовую вену. Сорок восемь из мышей рандомизировали по массе тела на шесть групп по восемь. Схема дозирования для каждой группы показана в Таблице 19.
| Таблица 19 | ||||
| Схема дозирования | ||||
| Группа | Соединение | Обработка | Предполагаемый режим | Фактический режим |
| А | Бортезомиб | 0,6 мг/кг, внутрибрюшинно при 10 мл/кг | День - 1, 3, 6, 10, 13 и 17 | День - 1, 3, 6 и 13 |
| В | MOR202 | 1 мг/кг, внутривенно при 10 мл/кг | День 0, 4, 7, 11, 14 и 18 | День 0, 4, 7, 11, 14 и 18 |
| С | Среда-контроль (0,9% солевой раствор для инъекций) | внутрибрюшинно, 10 мл/кг | День - 1, 3, 6, 10, 13 и 17 | День - 1, 3, 6, 10, 13 и 17 |
| АВ | Бортезомиб/MOR202 | 0,6/1 мг/кг, внутрибрюшинно/ внутривенно при 10 мл/кг | День - 1, 3, 6, 10, 13 и 17/ День 0, 4, 7, 11, 14 и 18 | День - 1, 3, 6, 13, 17 и 20/ День 0, 4, 7, 11, 14 и 18 |
Исследование продолжалось в течение 98 суток, и измеряемым конечным показателем была выживаемость. Результаты из каждой группы показаны в Таблице 20.
| Таблица 20 | ||||||
| Число выживших и период времени для каждой группы | ||||||
| День смерти (после инокуляции) | % ILS (на основе медианного дня смерти) | Число мышей, живых на момент окончания исследования (день 98) | ||||
| Медиана | Диапазон | Среднее значение | 95% CI | |||
| A: BOR 0,6 мг/кг | 19 | 18-20 | 19,1 | 18,4-19,8 | -7 | 0/8 |
| В: MOR202 1 мг/кг | 43,5 | 38-52 | 43,6 | 39,0-48,3 | 112 | 0/8 |
| С: Среда-контроль | 20,5 | 20-22 | 20,8 | 20,0-21,5 | x | 0/8 |
| АВ: комбинированные BOR/MOR | 45 | 29-98 | 61,6 | 19,7-103,5 | 120 | 2/5 |
Анализ в отношении синергической активности осуществляли согласно теореме по Clarke и соавт. В Таблице 21 показаны расчеты, выполненные при определении синергии комбинации MOR202 и бортезомиба.
| Таблица 21 | |||
| Если ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ имеет более ВЫСОКОЕ значение | |||
| Антагонистический = (АВ)/С<(А/С)×(В/С) | |||
| Аддитивный = (АВ)/С=(А/С)×(В/С) | |||
| Синергический = (АВ)/0(А/С)×(В/С) | |||
| А = реакция на обработку BOR при 0,6 мг/кг | |||
| В = реакция на обработку MOR202 при 3 мг/кг | |||
| С = реакция на обработку средой, 0,9% хлоридом натрия | |||
| АВ = комбинация обработок А и В | |||
| Медиана выживаемости | |||
| А | 19 | ||
| В | 43,5 | ||
| С | 20,5 | ||
| АВ | 45 | ||
| (АВ)/С | 2,195121951 | ||
| больше чем | |||
| (А/С)×(В/С) | 1,966686496 | ||
Численные значения, показанные в Таблице 21, взяты непосредственно из количества дней медианы выживаемости, показанного в Таблице 20 для каждой из групп. Группы, описанные как А, В, С и АВ, представляют собой те же самые группы обработки в Таблицах 19-21.
Инокуляция клетками RAMOS была летальной в пределах медианного времени 20,5 суток в контрольной группе. Комбинация MOR202 и бортезомиба, однако, показывала явную синергию при увеличении количества дней медианы выживаемости. Важно, с комбинацией MOR202 и бортезомиба (Группа АВ), 2 из 5 мышей выживали в течение срока исследования. Это убедительно подтверждает синергический результат комбинации MOR202 и бортезомиба.
Следует понимать, что описание, конкретные примеры и данные, хотя и указывают на иллюстративные варианты осуществления, даны для иллюстрации и не предназначены для ограничения настоящего изобретения. Различные изменения и модификации в пределах настоящего изобретения станут очевидными специалисту в данной области из обсуждения, раскрытия и данных, содержащихся в данном документе, и, таким образом, рассматриваются как часть настоящего изобретения.
Claims (17)
1. Синергическая комбинация
(1) антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14) или GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и
(2) леналидомида, помалидомида или бортезомиба,
для применения при лечении множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы.
(1) антитела, специфичного к CD38, содержащего HCDR1 участок с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14) или GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1), HCDR2 участок с последовательностью GISGDPSNTYYADSVKG (SEQ ID NO: 2), HCDR3 участок с последовательностью DLPLVYTGFAY (SEQ ID NO: 3), LCDR1 участок с последовательностью SGDNLRHYYVY (SEQ ID NO: 4), LCDR2 участок с последовательностью GDSKRPS (SEQ ID NO: 5) и LCDR3 участок с последовательностью QTYTGGASL (SEQ ID NO: 6), и
(2) леналидомида, помалидомида или бортезомиба,
для применения при лечении множественной миеломы и/или неходжкинской лимфомы.
2. Комбинация по п. 1, где антитело содержит HCDR1 участок с последовательностью SYYMN (SEQ ID NO: 14).
3. Комбинация по п. 1, где антитело содержит HCDR1 участок с последовательностью GFTFSSYYMN (SEQ ID NO: 1).
4. Комбинация по п. 1, где антитело содержит вариабельный участок тяжелой цепи с последовательностью
QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYYMNWVRQAPGKGLEWVSGISGDPSNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLPLVYTGFAYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 10)
и вариабельный участок легкой цепи с последовательностью
DIELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDNLRHYYVYWYQQKPGQAPVLVIYGDSKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAEDEADYYCQTYTGGASLVFGGGTKLTVLGQ (SEQ ID NO: 11).
QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYYMNWVRQAPGKGLEWVSGISGDPSNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDLPLVYTGFAYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 10)
и вариабельный участок легкой цепи с последовательностью
DIELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDNLRHYYVYWYQQKPGQAPVLVIYGDSKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAEDEADYYCQTYTGGASLVFGGGTKLTVLGQ (SEQ ID NO: 11).
5. Комбинация по п. 1, где указанное антитело представляет собой антитело IgG.
6. Комбинация по п. 5, где указанное антитело содержит Fc-участок IgG1.
7. Комбинация по п. 1, где антитело содержит модифицированный Fc-участок, где указанная модификация усиливает активность ADCC.
8. Комбинация по п. 1, где указанное антитело, специфичное к CD38, и указанный леналидомид, помалидомид или бортезомиб вводят раздельно.
9. Комбинация по п. 8, где указанный леналидомид, помалидомид или бортезомиб вводят до введения указанного антитела, специфичного к CD38.
10. Комбинация по п. 9, где указанный леналидомид, помалидомид или бортезомиб вводят по меньшей мере за 72 часа до введения антитела, специфичного к CD38.
11. Комбинация по п. 1, где указанное антитело, специфичное к CD38, и указанный леналидомид, помалидомид или бортезомиб вводят последовательно.
12. Комбинация по п. 1, которая способна снижать разрушение кости с эффективностью по меньшей мере в два раза лучшей, чем леналидомид и/или бортезомиб сами по себе.
13. Комбинация по любому из пп. 1-12, содержащая леналидомид.
14. Комбинация по п. 13, которая способна опосредовать цитолиз экспрессирующих CD38 клеток АМО-1 и/или NCI-H929 посредством ADCC в присутствии выделенных РВМС человека с эффективностью по меньшей мере в два раза лучшей, чем леналидомид сам по себе.
15. Комбинация по любому из пп. 1-12, содержащая помалидомид.
16. Комбинация по любому из пп. 1-12, содержащая бортезомиб.
17. Комбинация по п. 16, которая способна опосредовать цитолиз экспрессирующих CD38 клеток LP-1 и/или NCI-H929 посредством ADCC в присутствии выделенных РВМС человека с эффективностью по меньшей мере в два раза лучшей, чем бортезомиб сам по себе.
Applications Claiming Priority (11)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US38661910P | 2010-09-27 | 2010-09-27 | |
| US61/386,619 | 2010-09-27 | ||
| EP10180485 | 2010-09-27 | ||
| EP10180485.4 | 2010-09-27 | ||
| US201161437696P | 2011-01-31 | 2011-01-31 | |
| US61/437,696 | 2011-01-31 | ||
| US201161468607P | 2011-03-29 | 2011-03-29 | |
| US61/468,607 | 2011-03-29 | ||
| US201161486814P | 2011-05-17 | 2011-05-17 | |
| US61/486,814 | 2011-05-17 | ||
| PCT/EP2011/066648 WO2012041800A1 (en) | 2010-09-27 | 2011-09-26 | Anti-cd38 antibody and lenalidomide or bortezomib for the treatment of multiple myeloma and nhl |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013113933A RU2013113933A (ru) | 2014-11-10 |
| RU2595839C2 true RU2595839C2 (ru) | 2016-08-27 |
Family
ID=43640677
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013113933/15A RU2595839C2 (ru) | 2010-09-27 | 2011-09-26 | Антитело к cd38 и леналидомид или бортезомиб для лечения множественной миеломы и nhl |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US8877899B2 (ru) |
| EP (1) | EP2621531B8 (ru) |
| JP (2) | JP6087283B2 (ru) |
| KR (1) | KR101912957B1 (ru) |
| CN (1) | CN103118706B (ru) |
| AU (1) | AU2011310696B2 (ru) |
| BR (1) | BR112013006769B1 (ru) |
| CA (1) | CA2812631C (ru) |
| DK (1) | DK2621531T3 (ru) |
| ES (1) | ES2617446T3 (ru) |
| HU (1) | HUE031956T2 (ru) |
| IL (1) | IL224915A (ru) |
| LT (1) | LT2621531T (ru) |
| MX (1) | MX350540B (ru) |
| NZ (1) | NZ607473A (ru) |
| PL (1) | PL2621531T3 (ru) |
| PT (1) | PT2621531T (ru) |
| RU (1) | RU2595839C2 (ru) |
| SG (1) | SG188345A1 (ru) |
| SI (1) | SI2621531T1 (ru) |
| WO (1) | WO2012041800A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA201301232B (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2838165C1 (ru) * | 2019-12-05 | 2025-04-11 | САНОФИ-АВЕНТИС Ю.Эс. ЭлЭлСи | Составы на основе антител к cd38 для подкожного введения |
Families Citing this family (46)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5362359B2 (ja) | 2005-10-12 | 2013-12-11 | モルフォシス アーゲー | ヒトＣＤ３８に特異的な完全ヒトＨｕＣＡＬＧＯＬＤ由来の治療抗体の生成とプロファイリング |
| EP1914242A1 (en) * | 2006-10-19 | 2008-04-23 | Sanofi-Aventis | Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer |
| LT2621531T (lt) * | 2010-09-27 | 2017-04-10 | Morphosys Ag | Anti-cd38 antikūnas ir lenalidomidas arba bortezomibas, skirti išsėtinės mielomos ir nhl (nehodžino limfoma) gydymui |
| UA112170C2 (uk) * | 2010-12-10 | 2016-08-10 | Санофі | Протипухлинна комбінація, що містить антитіло, яке специфічно розпізнає cd38, і бортезоміб |
| JOP20210044A1 (ar) | 2010-12-30 | 2017-06-16 | Takeda Pharmaceuticals Co | الأجسام المضادة لـ cd38 |
| CN104203982B (zh) | 2011-10-28 | 2018-08-31 | 特瓦制药澳大利亚私人有限公司 | 多肽构建体及其用途 |
| HUE036518T2 (hu) * | 2012-09-25 | 2018-07-30 | Morphosys Ag | Kombinációk és alkalmazásaik |
| DK2914302T3 (en) | 2012-11-05 | 2017-04-10 | Morphosys Ag | RADIOACTIVALLY MARKED ANTIBODY AND USES OF IT |
| UA118255C2 (uk) | 2012-12-07 | 2018-12-26 | Санофі | Композиція, яка містить антитіло до cd38 і леналідомід |
| US10342869B2 (en) * | 2012-12-07 | 2019-07-09 | The Regents Of The University Of California | Compositions comprising anti-CD38 antibodies and lenalidomide |
| SG11201506956TA (en) | 2013-03-13 | 2015-10-29 | Sanofi Sa | Compositions comprising anti-cd38 antibodies and carfilzomib |
| ES2774976T3 (es) | 2013-04-29 | 2020-07-23 | Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd | Anticuerpos anti-CD38 y fusiones con interferón alfa-2b atenuado |
| US11117975B2 (en) | 2013-04-29 | 2021-09-14 | Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd | Anti-CD38 antibodies and fusions to attenuated interferon alpha-2B |
| JP2017506640A (ja) * | 2014-02-14 | 2017-03-09 | セントローズ， エルエルシー | 細胞外標的化薬物共役体 |
| US9603927B2 (en) | 2014-02-28 | 2017-03-28 | Janssen Biotech, Inc. | Combination therapies with anti-CD38 antibodies |
| US9732154B2 (en) | 2014-02-28 | 2017-08-15 | Janssen Biotech, Inc. | Anti-CD38 antibodies for treatment of acute lymphoblastic leukemia |
| UA119352C2 (uk) | 2014-05-01 | 2019-06-10 | Тева Фармасьютикалз Острейліа Пті Лтд | Комбінація леналідоміду або помалідоміду і конструкції анти-cd38 антитіло-атенуйований інтерферон альфа-2b та спосіб лікування суб'єкта, який має cd38-експресуючу пухлину |
| US10106620B2 (en) | 2014-06-16 | 2018-10-23 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Blocking CD38 using anti-CD38 F(ab′)2 to protect NK cells |
| MY192918A (en) * | 2014-09-09 | 2022-09-15 | Janssen Biotech Inc | Combination therapies with anti-cd38 antibodies |
| EA037749B1 (ru) | 2014-10-29 | 2021-05-18 | Тева Фармасьютикалз Острэйлиа Пти Лтд | ВАРИАНТЫ ИНТЕРФЕРОНА 2b |
| EP3227338A4 (en) | 2014-12-04 | 2018-05-16 | Janssen Biotech, Inc. | Anti-cd38 antibodies for treatment of acute myeloid leukemia |
| MA41555A (fr) * | 2015-02-17 | 2017-12-26 | Millennium Pharm Inc | Polythérapie pour le traitement du cancer |
| WO2016164656A1 (en) * | 2015-04-08 | 2016-10-13 | Sorrento Therapeutics, Inc. | Antibody therapeutics that bind cd38 |
| HRP20210552T1 (hr) * | 2015-05-13 | 2021-05-14 | Morphosys Ag | Liječenje multiplog mijeloma (mm) |
| CR20170526A (es) | 2015-05-20 | 2018-04-03 | Janssen Biotech Inc | ANTICUERPOS ANTI-CD38 PARA EL TRATAMIENTO DE AMILOIDOSIS DE CADENA LIGERA y OTRAS ENFERMEDADES MALIGNAS HEMATOLÓGICAS POSITIVAS PARA CD38 |
| MY192978A (en) | 2015-06-22 | 2022-09-20 | Janssen Biotech Inc | Combination therapies for heme malignancies with anti-cd38 antibodies and survivin inhibitors |
| US20170044265A1 (en) | 2015-06-24 | 2017-02-16 | Janssen Biotech, Inc. | Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38 |
| HUE051896T2 (hu) | 2015-07-16 | 2021-03-29 | Inhibrx Inc | Multivalens és multispecifikus DR5-kötõ fúziós fehérjék |
| CN105079776B (zh) * | 2015-09-17 | 2018-09-21 | 中南大学 | 一种石蒜碱和硼替佐米组合物的药物用途 |
| US10781261B2 (en) | 2015-11-03 | 2020-09-22 | Janssen Biotech, Inc. | Subcutaneous formulations of anti-CD38 antibodies and their uses |
| PL3827845T3 (pl) | 2015-11-03 | 2022-07-11 | Janssen Biotech, Inc. | Formulacje podskórne przeciwciał anty-cd38 i ich zastosowania |
| AU2017226960B2 (en) * | 2016-03-04 | 2024-03-21 | Morphosys Ag | Clinical assessment of M-protein response in multiple myeloma |
| BR112019000544A2 (pt) | 2016-07-15 | 2019-04-24 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | métodos e materiais para avaliar resposta a terapias de plasmoblasto- e depleção celular plasmática |
| US11124577B2 (en) | 2016-11-02 | 2021-09-21 | Engmab Sàrl | Bispecific antibody against BCMA and CD3 and an immunological drug for combined use in treating multiple myeloma |
| US20200121815A1 (en) | 2017-07-31 | 2020-04-23 | Actinium Pharmaceuticals, Inc. | Treatments for a hematological malignancy |
| WO2019035938A1 (en) | 2017-08-16 | 2019-02-21 | Elstar Therapeutics, Inc. | MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF |
| CA3079242A1 (en) | 2017-10-31 | 2019-05-09 | Janssen Biotech, Inc. | Methods of treating high risk multiple myeloma |
| AU2019208102B2 (en) | 2018-01-12 | 2025-10-09 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Subcutaneous dosing of anti-CD38 antibodies |
| JP7541974B2 (ja) * | 2018-08-26 | 2024-08-29 | カーディフ・オンコロジー・インコーポレイテッド | Ｐｌｋ１標的のリン酸化状態及びｐｌｋ１阻害剤を用いた癌の治療 |
| WO2020187718A1 (en) * | 2019-03-15 | 2020-09-24 | Morphosys Ag | Anti-cd38 antibodies and pharmaceutical compositions thereof for the treatment of autoantibody-mediated autoimmune disease |
| EP3980064A1 (en) | 2019-06-10 | 2022-04-13 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Combination therapies using cd-38 antibodies |
| WO2022112469A1 (en) | 2020-11-27 | 2022-06-02 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods for diagnosis and monitoring of toxic epidermal necrolysis |
| WO2022232557A1 (en) * | 2021-04-30 | 2022-11-03 | Adagio Therapeutics, Inc. | Compounds specific to coronavirus s protein and uses thereof |
| US20240425567A1 (en) * | 2021-10-08 | 2024-12-26 | Invivyd, Inc. | Pharmaceutical formulations comprising anti-coronavirus s protein antibodies and uses thereof |
| TW202430548A (zh) * | 2022-09-29 | 2024-08-01 | 日商武田藥品工業股份有限公司 | Ｃｄ３８結合融合蛋白組合療法 |
| WO2025042742A1 (en) | 2023-08-18 | 2025-02-27 | Bristol-Myers Squibb Company | Compositions comprising antibodies that bind bcma and cd3 and methods of treatment |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007042309A2 (en) * | 2005-10-12 | 2007-04-19 | Morphosys Ag | Generation and profiling of fully human hucal gold-derived therapeutic antibodies specific for human cd38 |
| WO2008037257A2 (en) * | 2006-09-26 | 2008-04-03 | Genmab A/S | Anti-cd38 plus corticosteroids plus a non-corticosteroid chemotherapeutic for treating tumors |
Family Cites Families (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20020164788A1 (en) | 1994-12-02 | 2002-11-07 | The Wellcome Foundation Limited | Humanized antibodies to CD38 |
| JP2003524587A (ja) | 1998-06-05 | 2003-08-19 | マヨ ファウンデーション フォー メディカル エデュケーション アンド リサーチ | 多発性骨髄腫を処置するための、ｃｄ３８に対する、遺伝子操作した抗体の使用 |
| US7223397B1 (en) | 1999-01-07 | 2007-05-29 | Research Development Foundation | Potentiation of anti-CD38-Immunotoxin cytotoxicity |
| BR0008758A (pt) | 1999-01-15 | 2001-12-04 | Genentech Inc | Variantes de polipeptìdeos parentais com funçãoefetora alterada, polipeptìdeos, composição ácidonucleico isolado, vetor, célula hospedeira,método para produzir uma variante depolipeptìdeo, método para o tratamento de umadesordem em mamìferos e método para produziruma região fc variante |
| DE19933130A1 (de) | 1999-07-19 | 2001-01-25 | Giesecke & Devrient Gmbh | Operandenstapelspeicher und Verfahren zum Betreiben eines Operandenstapelspeichers |
| EP1174440A1 (en) | 2000-07-19 | 2002-01-23 | U-BISys B.V. | A selectively-expressed epitope on the human CD38 molecule detected by a phage display library-derived human scFv antibody fragment |
| ES2338534T3 (es) | 2001-02-27 | 2010-05-10 | The Governement Of The Usa, Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services | Analogos de talidomina como inhibidores de la angiogenesis. |
| CA2499816C (en) | 2002-09-27 | 2013-07-30 | Xencor, Inc. | Optimized fc variants and methods for their generation |
| EP1587540B1 (en) | 2003-01-09 | 2021-09-15 | MacroGenics, Inc. | IDENTIFICATION AND ENGINEERING OF ANTIBODIES WITH VARIANT Fc REGIONS AND METHODS OF USING SAME |
| WO2005016326A2 (en) | 2003-07-11 | 2005-02-24 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Analogs of thalidomide as potential angiogenesis inhibitors |
| CA2555185C (en) | 2004-02-06 | 2020-03-24 | Morphosys Ag | Anti-cd38 human antibodies and uses therefor |
| JP2008504013A (ja) | 2004-02-06 | 2008-02-14 | モルフォシス・アクチェンゲゼルシャフト | 抗ｃｄ３８ヒト抗体及びその用途 |
| EA015584B1 (ru) * | 2005-03-23 | 2011-10-31 | Генмаб А/С | Антитело к cd38 человека и его применение |
| AR053489A1 (es) | 2005-05-24 | 2007-05-09 | Morphosys Ag | Generacion perfilado de anticuerpos terapeuticos totalmente derivados de hucal gold humanos especificos para cd38 humano |
| ATE462248T1 (de) | 2006-09-28 | 2010-04-15 | Nokia Siemens Networks Gmbh | Steuerung der überlastdetektion in hsdpa systemen |
| EP1914242A1 (en) | 2006-10-19 | 2008-04-23 | Sanofi-Aventis | Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer |
| NZ589880A (en) * | 2008-06-16 | 2012-10-26 | Immunogen Inc | Use of synergistic anti-cancer compositions comprising lenalidomide, at least one corticosteroid and at least one immunoconjugate |
| GB2461546B (en) | 2008-07-02 | 2010-07-07 | Argen X Bv | Antigen binding polypeptides |
| EP2191841A1 (en) | 2008-11-28 | 2010-06-02 | Sanofi-Aventis | Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and vincristine |
| EP2191842A1 (en) | 2008-11-28 | 2010-06-02 | Sanofi-Aventis | Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and cytarabine |
| EP2191840A1 (en) * | 2008-11-28 | 2010-06-02 | Sanofi-Aventis | Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and melphalan |
| EP2191843A1 (en) | 2008-11-28 | 2010-06-02 | Sanofi-Aventis | Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and cyclophosphamide |
| LT2621531T (lt) | 2010-09-27 | 2017-04-10 | Morphosys Ag | Anti-cd38 antikūnas ir lenalidomidas arba bortezomibas, skirti išsėtinės mielomos ir nhl (nehodžino limfoma) gydymui |
| UA112170C2 (uk) | 2010-12-10 | 2016-08-10 | Санофі | Протипухлинна комбінація, що містить антитіло, яке специфічно розпізнає cd38, і бортезоміб |
| JOP20210044A1 (ar) | 2010-12-30 | 2017-06-16 | Takeda Pharmaceuticals Co | الأجسام المضادة لـ cd38 |
-
2011
- 2011-09-26 LT LTEP11761360.4T patent/LT2621531T/lt unknown
- 2011-09-26 ES ES11761360.4T patent/ES2617446T3/es active Active
- 2011-09-26 PT PT117613604T patent/PT2621531T/pt unknown
- 2011-09-26 BR BR112013006769-1A patent/BR112013006769B1/pt active IP Right Grant
- 2011-09-26 EP EP11761360.4A patent/EP2621531B8/en active Active
- 2011-09-26 US US13/825,325 patent/US8877899B2/en active Active
- 2011-09-26 PL PL11761360T patent/PL2621531T3/pl unknown
- 2011-09-26 MX MX2013003304A patent/MX350540B/es active IP Right Grant
- 2011-09-26 CN CN201180043775.1A patent/CN103118706B/zh active Active
- 2011-09-26 HU HUE11761360A patent/HUE031956T2/en unknown
- 2011-09-26 CA CA2812631A patent/CA2812631C/en active Active
- 2011-09-26 AU AU2011310696A patent/AU2011310696B2/en active Active
- 2011-09-26 RU RU2013113933/15A patent/RU2595839C2/ru active
- 2011-09-26 WO PCT/EP2011/066648 patent/WO2012041800A1/en not_active Ceased
- 2011-09-26 DK DK11761360.4T patent/DK2621531T3/en active
- 2011-09-26 KR KR1020137010537A patent/KR101912957B1/ko active Active
- 2011-09-26 NZ NZ607473A patent/NZ607473A/en unknown
- 2011-09-26 JP JP2013529669A patent/JP6087283B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2011-09-26 SI SI201131109A patent/SI2621531T1/sl unknown
- 2011-09-26 SG SG2013015235A patent/SG188345A1/en unknown
-
2013
- 2013-02-18 ZA ZA2013/01232A patent/ZA201301232B/en unknown
- 2013-02-26 IL IL224915A patent/IL224915A/en active IP Right Grant
-
2014
- 2014-09-29 US US14/500,366 patent/US9289490B2/en active Active
-
2016
- 2016-02-05 US US15/016,330 patent/US9765152B2/en active Active
- 2016-10-21 JP JP2016206756A patent/JP6231642B2/ja active Active
-
2017
- 2017-08-07 US US15/670,811 patent/US10308722B2/en active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007042309A2 (en) * | 2005-10-12 | 2007-04-19 | Morphosys Ag | Generation and profiling of fully human hucal gold-derived therapeutic antibodies specific for human cd38 |
| WO2008037257A2 (en) * | 2006-09-26 | 2008-04-03 | Genmab A/S | Anti-cd38 plus corticosteroids plus a non-corticosteroid chemotherapeutic for treating tumors |
Non-Patent Citations (1)
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2838165C1 (ru) * | 2019-12-05 | 2025-04-11 | САНОФИ-АВЕНТИС Ю.Эс. ЭлЭлСи | Составы на основе антител к cd38 для подкожного введения |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2595839C2 (ru) | Антитело к cd38 и леналидомид или бортезомиб для лечения множественной миеломы и nhl | |
| RU2664462C9 (ru) | Комбинированная терапия с помощью антитела к CD19 и аналога пурина | |
| RU2625222C2 (ru) | Комбинированная терапия антителом к cd19 и азотистым ипритом | |
| JP6916741B2 (ja) | 抗ｃｄ１９抗体およびブルトン型チロシンキナーゼ阻害剤の組み合わせ、およびその使用 | |
| RU2650618C2 (ru) | Комбинации и их применение | |
| RU2670127C2 (ru) | Композиции, включающие антитела к cd38 и карфилзомиб | |
| KR102786010B1 (ko) | 조합 및 이의 용도 | |
| CA2682266A1 (en) | Treatment of hodgkins lymphoma | |
| CA3015241A1 (en) | Combination therapies comprising immuno-oncology agents and belinostat | |
| HK40081594A (en) | Combination therapy with an anti-cd19 antibody and a nitrogen mustard |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner |