RU2582959C1 - Тест-система иммуноферментная для определения коклюшных антител в сыворотках крови человека и животных - Google Patents
Тест-система иммуноферментная для определения коклюшных антител в сыворотках крови человека и животных Download PDFInfo
- Publication number
- RU2582959C1 RU2582959C1 RU2015101148/15A RU2015101148A RU2582959C1 RU 2582959 C1 RU2582959 C1 RU 2582959C1 RU 2015101148/15 A RU2015101148/15 A RU 2015101148/15A RU 2015101148 A RU2015101148 A RU 2015101148A RU 2582959 C1 RU2582959 C1 RU 2582959C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pertussis
- antibodies
- human
- solution
- blood serum
- Prior art date
Links
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 title claims abstract description 41
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 25
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 15
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 20
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 18
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 241000588832 Bordetella pertussis Species 0.000 claims abstract description 14
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 claims abstract description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 6
- 108010021711 pertactin Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 4
- 108010081690 Pertussis Toxin Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 20
- 239000013641 positive control Substances 0.000 claims description 13
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 9
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 6
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 5
- 101710154643 Filamentous hemagglutinin Proteins 0.000 claims description 4
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 claims description 3
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 claims description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims description 2
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 claims description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 2
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 claims description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 abstract description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 3
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 abstract 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 2
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 abstract 1
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 abstract 1
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 abstract 1
- 239000012487 rinsing solution Substances 0.000 abstract 1
- 229940080237 sodium caseinate Drugs 0.000 abstract 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 abstract 1
- BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N trisodium borate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]B([O-])[O-] BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 13
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 6
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 5
- 238000010079 rubber tapping Methods 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000011545 carbonate/bicarbonate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- 241000713340 Human immunodeficiency virus 2 Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 230000000954 anitussive effect Effects 0.000 description 1
- 229940124584 antitussives Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- PCHPORCSPXIHLZ-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine hydrochloride Chemical compound [Cl-].C=1C=CC=CC=1C(OCC[NH+](C)C)C1=CC=CC=C1 PCHPORCSPXIHLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 description 1
- 229920006255 plastic film Polymers 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 230000009799 post infectious immunity Effects 0.000 description 1
- 230000009800 post vaccination immunity Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000009993 protective function Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и иммунологии и может быть использовано для определения в сыворотках крови человека и животных коклюшных антител. Сущность изобретения состоит в том, что для определения коклюшных антител используют иммуноферментную тест-систему, содержащую цельный или стрипированный 96-луночный планшет, сенсибилизированный смесью природного комплекса антигенов Bordetella pertussis, полученного без разделения компонентов и содержащего фимбриальные агглютиногены типа 2 и 3, пертактин, коклюшный токсин, филаментозный гемагглютинин, и коклюшной суспензией, промывающий раствор, конъюгат, субстратный буферный раствор с перекисью водорода и хромогеном, стоп-реагент, отрицательный контрольный образец, положительный контрольный образец в виде лиофильно высушенного пула сывороток крови человека или животных с титром коклюшных антител не ниже 1:160, откалиброванного в реакции агглютинации, блокатор в виде 5% раствора казеината натрия в натрий-боратном буферном растворе с рН 8,3. Система обеспечивает повышение специфичности проводимых анализов, более полное выявление коклюшных антител в сыворотках крови людей или животных. 1 ил., 4 табл.
Description
Изобретение относится к биотехнологии и иммунологии и касается разработки и использования иммуноферментной тест-системы для определения коклюшных антител в сыворотках крови людей и животных.
Известен способ определения коклюшных антител, применяемый в практике уже более 50 лет, заключающийся в связывании антител корпускулярными антигенами с выпадением в осадок образовавшегося комплекса (реакция агглютинации). Эта реакция, используемая для оценки постинфекционного и поствакцинального иммунитета, обладает рядом существенных недостатков: невозможность получения точного количественного результата, т.к. учет проводится визуально и поэтому достаточно субъективен; тест очень длителен по времени - учет результатов проводится только через сутки после постановки реакции. К тому же реакция агглютинации не применима в случае оценки иммунного статуса людей, иммунизированных вакцинами, содержащими бесклеточный коклюшный компонент.
Известен способ иммуноферментного определения коклюшных антител, включающий сенсибилизацию твердой фазы одним или несколькими индивидуально очищенными антигенами Bordetella pertussis. Существуют импортные иммуноферментные тест-системы (ИФТС):
1. Human Anti-Pertussis IgG ELISA Assay (XpressBio, USA);
2. Enzyme Immunoassay for the detection of human IgG antibodies against Bordetella Pertussis in serum and plasma (MyBioSourse, Inc., USA);
3. Bordetella Pertussis/toxin IgG ELISA (DRG Instruments GmbH, Germany).
Основным недостатком известных способов является выявление антител только к некоторым антигенам Bordetella pertussis (ИФТС фирмы MyBioSourse выявляет антитела только к токсину (ТН), филаментозному гемагглютинину (ФГА) и липополисахариду (ЛПС), ИФТС фирмы DRG - в основном к ТН). До настоящего времени остается не ясна роль отдельных антигенов Bordetella pertussis в развитии заболевания, а также в отношении их вклада в обеспечение протективной функции иммунопрофилактических препаратов. Так, за последние десятилетия в нескольких многоцентровых исследованиях было установлено, что поверхностно расположенные антигены коклюшных бактерий (фимбрии) и пертактин принимают активное участие в патогенезе коклюшной инфекции и формировании противококлюшного иммунитета. Поэтому использование как можно большего количества коклюшных антигенов для фиксации их на твердой фазе позволяет более полно выявлять спектр специфических антител в сыворотках крови людей. Еще одним недостатком известных способов является то, что антитела выявляются только качественно или полуколичественно (ИФТС фирмы DRG). К тому же в инструкциях к некоторым ИФТС (ИФТС фирмы XpressBio) нет раздела интерпретация результатов, что не позволяет оценить полученные результаты анализа, поскольку нет единого международного стандарта количественного содержания антител к Bordetella pertussis. Таким образом, перечисленные тест-системы не обеспечивают полного выявления всего спектра специфических коклюшных антител в сыворотках крови людей. Кроме того, ни одна из данных ИФТС не может быть использована для определения титров коклюшных антител в сыворотках крови животных.
Отечественных иммуноферментных тест-систем для оценки противококлюшного иммунитета нет.
В качестве ближайшего аналога рассматривается известная тест-система для определения коклюшных антител Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) for the semi-quantitative determination of specific IgG antibodies to Bordetella Pertussis in human serum (Savyon Diagnostics Ltd., Israel).
Данная ИФТС определяет антитела только полуколичественно, и только к токсину (ТН) и филаментозному гемагглютинину (ФГА), что не позволяет выявлять весь спектр специфических антител в сыворотках крови людей. Затрудняет постановку реакции наличие в тест-системе трех буферных растворов (отдельно для промывания планшетов, разведения проб и разведения конъюгата), а также наличие нескольких положительных контролей и калибраторов (откалиброванных в неизвестных единицах).
Задача, решаемая изобретением, состоит в повышении эффективности тест-системы для определения коклюшных антител в сыворотках крови человека и животных.
Технический результат, обеспечивающий решение указанной задачи, заключается в расширении спектра выявляемых антител, в повышении точности результатов анализа, в уменьшении количества реагентов и упрощении процедуры анализа.
Технический результат достигается тем, что в известной тест-системе для определения коклюшных антител в сыворотке крови человека путем сенсибилизации 96-луночного планшета смесью антигенов, добавления к нему контрольных и исследуемых образцов, добавления специфического конъюгата, добавления субстрат-индикаторного раствора, добавления стоп-реагента и учета результатов реакции, с инкубацией на каждом этапе постановки реакции и применения промывающего буферного раствора и разводящих растворов для образов и конъюгата согласно изобретению в качестве специфического антигена для сенсибилизации планшета используют смесь природного комплекса антигенов Bordetella pertussis, полученного без разделения компонентов и содержащего фимбриалльные агглютиногены типа 2 и 3, пертактин, коклюшный токсин, филаментозный гемагглютинин, и коклюшной суспензии, в качестве положительного контрольного образца - пул сывороток крови человека или животных, откалиброванный по реакции агглютинации, а в качестве промывающего и разводящего раствора для образцов и конъюгата применяют фосфатно-солевой буферный раствор с твином и блокатором.
При этом использование в качестве антигена для сенсибилизации планшета смеси природного комплекса антигенов Bordetella pertussis и коклюшной суспензии позволяет нанести на планшет максимальное количество антигенов, соответствующих полному антигенному составу Bordetella pertussis, что в итоге расширяет спектр выявляемых антител. Использование в качестве положительного контрольного образца пула сывороток крови человека или животных, откалиброванного по реакции агглютинации, позволяет стандартизовать результаты анализа, что обеспечивает повышение их точности. Применение одного буферного раствора на всех этапах постановки реакции уменьшает количество реагентов и упрощает процедуру анализа.
Состав набора следующий:
Тест-система комплектуется реагентами в различных вариантах, что позволяет потребителю в зависимости от поставленной задачи использовать один из 4-х предлагаемых наборов:
1. Тест-система иммуноферментная для определения коклюшных антител в сыворотках крови людей;
2. Тест-система иммуноферментная для определения коклюшных антител в сыворотках крови кроликов;
3. Тест-система иммуноферментная для определения коклюшных антител в сыворотках крови морских свинок;
4. Тест-система иммуноферментная для определения коклюшных антител в сыворотках крови мышей.
Способ получения ИФТС осуществляется следующим образом:
1. Приготовление иммуносорбента.
Для приготовления иммуносорбента обезвреженную формальдегидом и теплом антигенную фракцию Bordetella pertussis (содержащую комплекс антигенов (фимбриальные агглютиногены типа 2 и 3, пертактин, ТН, ФГА)), очищенную без разделения компонентов (патент РФ №2504399), разводят стерильным карбонат-бикарбонатным буферным раствором концентрацией 0,06 моль/л и pH (9,5±0,1) до содержания белка 10 мкг/мл.
Коклюшную суспензию инактивированную, представляющую собой суспензию убитых формалином коклюшных микробов первой фазы трех штаммов Bordetella pertussis (серовара 1.2.3 - 1 штамм, серовара 1.0.3 - 1 штамм, серовара 1.2.0 - 1 штамм), взятых в равных соотношениях (ЛСР-002909/10-070410), разводят стерильным карбонат-бикарбонатным буферным раствором концентрацией 0,06 моль/л и pH (9,5±0,1) до содержания 5 млрд коклюшных клеток в 1 мл.
Полученные растворы смешивают в соотношении 1:1, вносят в каждую лунку 96-луночного цельного или разборного полистиролового планшета для иммунологических реакций. Планшет герметично закрывают и выдерживают 18-20 часов при температуре 2-8°C. Затем содержимое лунок удаляют сильным встряхиванием, планшет подсушивают постукиванием по сложенной в несколько слоев фильтровальной бумаге.
Для стабилизации антигена на твердой фазе в каждую лунку планшета вносят стерильный 4% раствор сахарозы, содержащий 1 мг/мл БСА. Планшет герметично закрывают и выдерживают 30 минут при температуре 20-22°C. Затем содержимое лунок удаляют сильным встряхиванием, планшет подсушивают постукиванием по сложенной в несколько слоев фильтровальной бумаге.
Планшет помещают в пакет из полиэтиленовой пленки, закладывают осушитель и герметично запаивают. Иммуносорбент хранят при температуре 2-8°C.
2. Приготовление положительного и отрицательного контрольного образца.
Для приготовления положительного контрольного образца используют инактивированные сыворотки крови людей или животных, имеющих титр коклюшных антител по реакции агглютинации не ниже 1:160. Положительный контрольный образец калибруют в условных иммуноферментных единицах (ИЕ/мл) по реакции агглютинации, поскольку в настоящее время нет международного стандарта коклюшных антител, а реакция агглютинации является единственным методом определения коклюшных антител, утвержденным ВОЗ.
Для приготовления отрицательного контрольного образца используют инактивированные сыворотки крови людей или животных, не имеющих коклюшных антител по реакции агглютинации и имеющих оптическую плотность не выше 0,15 в реакции иммуноферментного анализа.
Все человеческие сыворотки, используемые для приготовления стандартных образцов, контролируют на отсутствие антител к вирусам иммунодефицита человека ВИЧ-1, ВИЧ-2, вирусу гепатита C и отсутствие поверхностного антигена вируса гепатита B (HBsAg).
Контрольные образцы лиофильно высушивают с добавлением 2% сахарозы.
3. В качестве конъюгата используют коммерческие препараты (антитела против IgG человека или животных, меченные пероксидазой).
4. В качестве субстратного буферного раствора (ТМБ) используется коммерческий субстрат ТМБ (Subs ТМВ).
5. В ИФТС используют также 0,01 моль/л фосфатно-солевой буферный раствор (pH 7,2-7,4), содержащий 0,5% Твина-20 и блокатор (белково-солевой раствор (патент РФ №2206095)) - ФСБ-Т-Б, а также стоп-реагент - 5% раствор серной кислоты.
Постановка ИФА
1. Перед постановкой реакции все реагенты набора выдерживают при комнатной температуре не менее 30 минут.
2. Иммуносорбент трехкратно промывают раствором ФСБ-Т-Б, внося в каждую лунку планшета по 0,3 мл раствора и отсасывая содержимое лунок в сосуд для слива, в который налит 6% раствор перекиси водорода. По окончании промывки из лунок планшета тщательно удаляют остатки жидкости, постукивая по сложенной в несколько слоев фильтровальной бумаге, помещенной на поддон.
3. В лунки иммуносорбента вносят:
- двукратные разведения положительного контрольного образца (лунки: A1; B1; C1; D1; E1; F1);
- разведения контрольного отрицательного образца (лунки G1 и H1);
- исследуемые образцы (лунки А2…Н12).
Планшет герметично закрывают и инкубируют при температуре (37±1)°C в течение (60±5) мин.
4. После удаления образцов и пятикратного промывания планшета раствором ФСБ-Т-Б, в лунки вносят конъюгат в рабочем разведении. Планшет герметично закрывают и инкубируют при температуре (37±1)°C в течение (60±5) мин.
5. После удаления несвязавшегося конъюгата и пятикратного промывания планшета раствором ФСБ-Т-Б, в лунки вносят субстратный буферный раствор (ТМБ). Планшеты закрывают и инкубируют при комнатной температуре в течение 20 минут в защищенном от света месте. Реакцию останавливают добавлением в лунки планшета стоп-реагента.
6. Учет результатов.
Учет результатов производят спектрофотометрически в двухволновом режиме: основной фильтр - 450 нм, референс-фильтр 620 нм.
Определение уровня коклюшных антител в положительных образцах сывороток проводят по градуировочному графику, построенному в координатах: y - lg ОП К+, x - log2 кратности его разведения (см. рисунок). График строят по результатам измерения ОП для пяти разведений К+, начиная с того разведения, ОП которого ближе к 1.000.
Зная ОП исследуемого образца (например, 0,647 - в разведении 1:100), находят lg этого числа (lg 0,647=-0,19) и через точку на оси ординат, соответствующую его значению (-0,19), проводят прямую, параллельную оси абсцисс. Через точку пересечения прямой и линейного участка графика опускают перпендикуляр на ось абсцисс и определяют log2 кратности разведения положительного контрольного образца (Х=1,7), соответствующий значению ОП данного разведения исследуемого образца.
Затем по таблице 3 находят кратность разведения контрольного положительного образца, соответствующую этому логарифму (А=3,25).
После этого проводят расчет титра антител в исследуемом образце по формуле
Пример расчета: Если титр положительного контрольного образца равен 400 ИЕ/мл коклюшных антител, то титр исследуемой сыворотки в нашем примере (табл. 4)
Образцы 200 сывороток крови были проанализированы параллельно в ИФА с использованием разработанной тест-системы и реакции агглютинации. Согласованность значений характеризовали коэффициентом корреляции (Кк).
Установлена высокая степень корреляции (Кк=0,80) результатов измерения концентрации коклюшных антител с помощью разработанной тест-системы и реакции агглютинации.
Область применения набора - оценка иммунного статуса населения; оценка эффективности иммунизации вакцинными препаратами, содержащими коклюшный компонент (цельноклеточный и бесклеточный); диагностика коклюшной инфекции по нарастанию титров антител в парных сыворотках крови; оценка иммуногенности вакцин на животных; научные исследования.
Claims (1)
- Тест-система иммуноферментная для определения коклюшных антител в сыворотке крови человека или животных путем сенсибилизации 96-луночного планшета смесью антигенов, добавления к нему контрольных и исследуемых образцов, добавления специфического конъюгата, добавления субстрат-индикаторного раствора, добавления стоп-реагента и учета результатов реакции, с инкубацией на каждом этапе постановки реакции и применения промывающего буферного раствора и разводящих растворов для образцов и конъюгата, отличающаяся тем, что в качестве антигена для сенсибилизации планшета используют смесь природного комплекса антигенов Bordetella pertussis, полученного без разделения компонентов и содержащего фимбриальные агглютиногены типа 2 и 3, пертактин, коклюшный токсин, филаментозный гемагглютинин, и коклюшной суспензии, в качестве положительного контрольного образца - пул сывороток крови человека или животных, откалиброванный по реакции агглютинации, а в качестве промывающего и разводящего раствора для образцов и конъюгата применяют фосфатно-солевой буферный раствор с твином и блокатором.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015101148/15A RU2582959C1 (ru) | 2015-01-16 | 2015-01-16 | Тест-система иммуноферментная для определения коклюшных антител в сыворотках крови человека и животных |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015101148/15A RU2582959C1 (ru) | 2015-01-16 | 2015-01-16 | Тест-система иммуноферментная для определения коклюшных антител в сыворотках крови человека и животных |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2582959C1 true RU2582959C1 (ru) | 2016-04-27 |
Family
ID=55794773
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015101148/15A RU2582959C1 (ru) | 2015-01-16 | 2015-01-16 | Тест-система иммуноферментная для определения коклюшных антител в сыворотках крови человека и животных |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2582959C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2843305C1 (ru) * | 2024-10-29 | 2025-07-11 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" ФГБУ "ВНИИЗЖ" | Иммуноферментная тест-система для оценки антигенной и иммуногенной активности противоящурной вакцины на основе штамма "SAT-2/XIV/2023" вируса ящура |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5126276A (en) * | 1984-11-27 | 1992-06-30 | Falk Fish | Method for the determination and measurements of more than one unknown material in a single surface of a multianalytic assay |
| RU2186395C1 (ru) * | 2001-04-27 | 2002-07-27 | Предприятие по производству бактерийных препаратов Научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи РАМН | Способ получения диагностических коклюшных сывороток к агглютиногенам 1,2,3 для реакции агглютинации (варианты) |
| RU2506316C2 (ru) * | 2011-05-24 | 2014-02-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи Министерства здравоохранения и социального развития РФ" | Способ диагностики коклюша и определения авирулентных мутантов возбудителя и диагностический набор |
-
2015
- 2015-01-16 RU RU2015101148/15A patent/RU2582959C1/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5126276A (en) * | 1984-11-27 | 1992-06-30 | Falk Fish | Method for the determination and measurements of more than one unknown material in a single surface of a multianalytic assay |
| RU2186395C1 (ru) * | 2001-04-27 | 2002-07-27 | Предприятие по производству бактерийных препаратов Научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи РАМН | Способ получения диагностических коклюшных сывороток к агглютиногенам 1,2,3 для реакции агглютинации (варианты) |
| RU2506316C2 (ru) * | 2011-05-24 | 2014-02-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи Министерства здравоохранения и социального развития РФ" | Способ диагностики коклюша и определения авирулентных мутантов возбудителя и диагностический набор |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Коклюш /Bordetella pertussis/, IgA (R-Biopharm AG, Германия), Тест RIDASCREEN&αχιρχ; Bordetella - диагностическая in vitro иммуноферментная (ИФА) тест-система для выявления антител классов IgA, IgG, IgM к возбудителю коклюша Bordetella pertussis в сыворотке крови человека. 31.12.2009, найдено в Интеренет 18.11.2015 г. на http://www.analytica.ru/product.php?id=795&pgroup=598;. ГОРЕЛИКОВА Е.В. Оптимизация клинико-лабораторной диагностики и эпидемиологического надзора за коклюшем. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. Пермь 2006. С.1-24. S C REDD et al. Immunoblot analysis of humoral immune responses following infection with Bordetella pertussis or immunization with diphtheria-tetanus-pertussis vaccine. J. Clin. Microbiol. Jul. 1988 vol. 26 no. 7 PP. 1373-1377. D. J. FARRELL et al. Rapid-Cycle PCR Method To Detect Bordetella pertussis That Fulfills All Consensus Recommendations for Use of PCR in Diagnosis of Pertussis. J. Clin. Microbiol. Dec. 200 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2843305C1 (ru) * | 2024-10-29 | 2025-07-11 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" ФГБУ "ВНИИЗЖ" | Иммуноферментная тест-система для оценки антигенной и иммуногенной активности противоящурной вакцины на основе штамма "SAT-2/XIV/2023" вируса ящура |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Grauballe et al. | Optimized enzyme‐linked immunosorbent assay for detection of human and bovine rotavirus in stools: Comparison with electron‐microscopy, immunoelectro‐osmophoresis, and fluorescent antibody techniques | |
| van Gageldonk et al. | Development and validation of a multiplex immunoassay for the simultaneous determination of serum antibodies to Bordetella pertussis, diphtheria and tetanus | |
| Sack et al. | Microtiter ganglioside enzyme-linked immunosorbent assay for vibrio and Escherichia coli heat-labile enterotoxins and antitoxin | |
| Feyssaguet et al. | Multicenter comparative study of a new ELISA, PLATELIA™ RABIES II, for the detection and titration of anti-rabies glycoprotein antibodies and comparison with the rapid fluorescent focus inhibition test (RFFIT) on human samples from vaccinated and non-vaccinated people | |
| Yousefi et al. | Long-term persistence of anti-SARS-COV-2 IgG antibodies | |
| Lin et al. | Evaluation of a colloidal gold immunochromatography assay in the detection of Treponema pallidum specific IgM antibody in syphilis serofast reaction patients: a serologic marker for the relapse and infection of syphilis | |
| Klumpp-Thomas et al. | Standardization of enzyme-linked immunosorbent assays for serosurveys of the SARS-CoV-2 pandemic using clinical and at-home blood sampling | |
| Dey et al. | Recombinant antigen-based latex agglutination test for rapid serodiagnosis of leptospirosis | |
| US20210356464A1 (en) | Serological assays for diagnosing or confirming covid-19 virus infections | |
| Church et al. | Associations between biomarkers of environmental enteric dysfunction and oral rotavirus vaccine immunogenicity in rural Zimbabwean infants | |
| Grillner et al. | Evaluation of the hemolysis-in-gel test for the screening of rubella immunity and the demonstration of recent infection | |
| RU2582959C1 (ru) | Тест-система иммуноферментная для определения коклюшных антител в сыворотках крови человека и животных | |
| Boshuizen et al. | Reference values for the SERION classic ELISA for detecting Legionella pneumophila antibodies | |
| Gripenberg et al. | Demonstration of antibodies against Yersinia enterocolitica lipopolysaccharide in human sera by enzyme-linked immunosorbent assay | |
| Feng et al. | Serological diagnosis of infectious mononucleosis by chemiluminescent immunoassay using capsid antigen p18 of Epstein-Barr virus | |
| CN117110616A (zh) | 一种新型冠状病毒感染疫苗免疫后抗体区分检测试剂盒 | |
| Das et al. | Performance of Chemiluminiscence Assay using Reverse Algorithm for Syphilis Screening in Blood Donors. | |
| Sharma et al. | Typhoid Diagnostics: Looking Beneath the Surface | |
| CN102207500A (zh) | 补体结合酶联免疫吸附试验 | |
| Ibaraki et al. | Blockade antibody responses in human subjects challenged with a new snow mountain virus inoculum | |
| Uldum et al. | Evaluation of a commercial enzyme immunoassay for detection of Mycoplasma pneumoniae specific immunoglobulin G antibodies | |
| IDRIS et al. | HIV–FORENSICS: IDENTIFICATION OF HIV ANTIGENS AND ANTIBODIES ON BLOOD-STAINED CLOTHES | |
| Khramtsov et al. | Dot immunoassay for the simultaneous determination of postvaccination immunity against pertussis, diphtheria, and tetanus | |
| RU2726484C1 (ru) | Способ диагностики риккетсиозов группы клещевой пятнистой лихорадки, иммуноферментная диагностическая тест-система для его осуществления | |
| RU2275635C2 (ru) | ПАНЕЛЬ СЫВОРОТОК С НОРМИРОВАННЫМ СОДЕРЖАНИЕМ АНТИТЕЛ КЛАССА IgG K АНТИГЕНАМ p17 И p41 TREPONEMA PALLIDUM И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20180716 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner |