[go: up one dir, main page]

RU2541454C1 - Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней erysipelothrix rhuisipathie - Google Patents

Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней erysipelothrix rhuisipathie Download PDF

Info

Publication number
RU2541454C1
RU2541454C1 RU2014149885/93A RU2014149885A RU2541454C1 RU 2541454 C1 RU2541454 C1 RU 2541454C1 RU 2014149885/93 A RU2014149885/93 A RU 2014149885/93A RU 2014149885 A RU2014149885 A RU 2014149885A RU 2541454 C1 RU2541454 C1 RU 2541454C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
strain
rhuisipathie
erysipelothrix
erysipelas
nutrient
Prior art date
Application number
RU2014149885/93A
Other languages
English (en)
Inventor
Виталий Иванович Рябушко
Наталия Адольфовна Пархоменко
Владислав Евстафьевич Ерохин
Николай Алексеевич Голубь
Екатерина Юрьевна Колесникова
Original Assignee
Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского filed Critical Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского
Priority to RU2014149885/93A priority Critical patent/RU2541454C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2541454C1 publication Critical patent/RU2541454C1/ru

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней Erysipelothrix rhuisipathie, относится к общей биотехнологии и ветеринарной микробиологии и может быть использована для приготовления микробиологических питательных сред для наращивания биомассы штамма возбудителя рожи свиней.
В питательной среде в качестве источника азотного питания используют смесь рыбного автолизата и щелочного мидийного гидролизата при следующем соотношении компонентов:
щелочной мидийный гидролизат 20-50% пептон ферментативний 1% калий фосфорнокислый 0,3% натрий фосфорнокислый 1,8% рыбный автолизат остальное.

Description

Изобретение относится к общей биотехнологии и ветеринарной микробиологии и может быть использовано для приготовления микробиологических питательных сред для наращивания биомассы штамма возбудителя рожи свиней.
Возбудитель рожи свиней Erysipelothrix rhuisipathie является культурой, требовательной к условиям питания. При активации штамма после длительного хранения большое значение имеет скорость наращивания биомассы. Как правило, для научных и коммерческих целей применяют традиционные питательные среды на основе мясного сырья. Мясопептонный бульон МПБ и ΜΠΑ из перевара Хоттингера обеспечивают хороший рост микроорганизмов без изменения их культуральных и биологических свойств. Гидролизаты кильки и рыбной муки также широко применяются при производстве сухих питательных сред для культивирования микроорганизмов, т.к. белки рыбы по своему строению и аминокислотному составу наиболее сходны с белками мяса и способны удовлетворить потребности микроорганизмов в органических соединениях азота. Тем не менее, поиск высококачественных и недорогих питательных сред является актуальной задачей.
Известна Питательная среда для выращивания микроорганизмов (см. патент № 2089609, С1, C12N1/20, RU), содержащая источник азотного питания, хлористый натрий, агар. В качестве азотного питания используют панкреатический гидролизат кормовой рыбной муки с содержанием аминного азота 4,4±0,2%, общего азота 12,±0,5%. Существенным недостатком является то, что гидролизат имеет высокую стоимость, из-за необходимости ввоза из-за границы. Наиболее близким по совокупности признаков к заявляемому изобретению является «Поживне середовище «Аквамеда» для культивування микроорганизмов» (див. Пат. №34711 U, C12N1/20, UA), где питательной средой является смесь щелочного гидролизата из моллюсков с кислотным гидролизатом из рыбного сырья в соотношении 3:1 - 1:3. Конечная концентрация содержания аминного азота составляла 60-120 мг %. В состав среды также входят глюкоза или мальтоза, пептон и агар. Недостатком известной среды является недостаточная для культивирования штамма возбудителя рожи свиней конечная концентращя содержания аминного азота.
Признаками, общими с существенными признаками изобретения Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней Erysipelothrix rhuisipathie, является то, что в состав среды входят пептон ферментативный, а также щелочной гидролизат из морского сырья.
В основу изобретения Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней Erysipelothrix rhuisipathie поставлена задача путем использования продуктов морского генеза сконструировать питательную среду, которая обеспечит оптимальный рост штамма возбудителя рожи свиней Erysipelothrix rhuisipathie для приготовления вакцины.
Поставленная задача достигается тем, что для культивирования вакцинного штамма возбудителя рожи свиней Erysipelothrix rhuisipathie готовят питательную среду, состоящую из рыбного автолизата, в который дополнительно вводят 20-50% щелочного мидийного гидролизата.
Мидийный гидролизат и автолизат кильки получают по с известным технологиям (см. Крутченский Г.В., Кулясова В.Е. К вопросу получения белковых гидролиза-тов из моллюска леды//Известия ТИНРО.- 1976.- 99.- С. 102-104); Лихварь Н.А. Сухие питательные среды из свежих и замороженных отходов рыбной промышленности. Ученые записки ДагНИВИ по производству питательных сред. Махачкала, 1956, 2.).
Авторы исследовали уровень формирования биомассы промышленного штамма возбудителя рожи свиней Erysipelothrix rhuisipathie №286 на различных средах (табл. 1).
Figure 00000001
Figure 00000002
Как видно из табл. 1 культура проявляла на всех средах, кроме эталонной, невысокую интенсивность роста, что свидетельствует о требовательности к условиям питания. На некоторых средах к тому же отмечали полиморфизм палочек возбудителя рожи свиней: появлялись удлиненные цепочки E.rhuisipathie, что является признаком неблагоприятных условий культивирования, в частности из-за несбалансированного питания.
Далее исследовали среды, которые кроме гидролизатов кильки содержали от О до 50% мидийного гидролизата (табл. 2). Культивировали штамм в стандартных температурных условиях в течение 48 часов. Оптическую плотность измеряли на фото-электрокалориметре при длине волны 545 нм и толщине кюветы 5 мм. Контрольным образцом было незасеянная среда такого же состава.
Figure 00000003
Как видно из табл. 2, добавление в питательную среду мидийного гидролизата в количестве 20% от объема обеспечивало удвоение биомассы как в эталонной среде (0,163 против 0,081), так и в опыте (0,130 против 0,063), а внесение 50% мидийного гидролизата в среду утраивало прирост. При этом разница между опытной и эталонной средой, несмотря на отсутствие в исследуемой среде глюкозы, с увеличением содержания мидийного гиролизата постепенно уменьшалась.
Благодаря высокому содержанию аминного азота (показатель питательности сред для выращивания микроорганизмов) гидролизаты из морепродуктов являются ценным сырьем для биотехнологических производств. В автолизате рыбы содержится в 4-10 раз больше аминного азота, чем необходимо для продуктивного роста промысловых штаммов. Мидийный гидролизат, при содержании его в среде не больше 20%, удваивает бактериальную массу. Таким образом объединение рыбного автолизата и щелочного мидийного гидролизата позволяет получить сбалансированную питательную среду для культивирования возбудителя рожи свиней.
Пример реализации способа. Готовили опытную серию вакцины против рожи свиней Erysipelothrix rhuisipathie №286 в объеме 3 дм3. Предварительно определили, что рН рыбного гидролизата составляла 6,0, a bmict амшного азоту -740 мг%. В мидийном гидролизате рН 7,7, а содержание амина азота 247мг%. Из этих компонентов готовили жидкие и твердые питательные среды по стандартным прописям для МПБ. В состав среды для культивирования промышленного штамма на предлагаемой питательной среде входила смесь рыбного автолизата и 20% по объему щелочного мидийного гидролизата, пептон ферментативный - 1% от общего объема, калий фосфорнокислый - 0,3%, натрий фосфорнокислый - 1, 8%, рН среды составляла 7,3-7,4. Штамм высевали в пробирки с жидкой средой, затем пересевали во флаконы с бульонами, а после культивирования в соответствующих условиях, пересевали во флаконы с такой же средой и культивировали в соответствующих условиях. По окончании культивирования определяли типичность и чистоту культуры микроскопией мазков из сред и устанавливали концентрацию микробных клеток.
Культура промышленного штамма возбудителя рожи свиней, полученная на средах из гидролизатов, по сравнению со средами, полученными с мясного сырья, не отличались по культурно-морфологическими свойствам и отвечала требованиям паспортных данных на штамм. Концентрация микробных клеток в 1 см должна составлять не менее 50 млн. Авторами получены следующие данные: на питательных средах из морепродуктов концентрация микробных клеток составила 50 млн., а на средах, изготовленных из отвара Хоттингера - 70 млн.
Инактивацию микробных культур проводили с использованием формальдегида в концентрации 0,4%. Проверку полноты инактивации проводили путем посевов полученной вакцины на питательные среды, микроскопией окрашенных по Грамму мазков. Контроль на безвредность вакцины проводили на 5 белых мышах массой 18-20 г, вводя им внутрибрюшинно по 0,3см3. Результаты наблюдения за животными в течение 16 суток показали, что вакцина безвредна: подопытные животные оставались живыми, нормально питались, изменений в поведении не отмечено.
Контроль иммуногенной активности проводили на тех же белых мышах после прививки вакциной. Мышей заражали контрольным штаммом возбудителя рожи в смертельной дозе. Все контрольные мыши (10 голов), которые не были привиты, погибли в течение 4-6 суток, все вакцинированные выжили в течение 10 суток. Исходя из результатов этих исследований, сделан вывод, что изготовленная вакцина является имунногенно-активной.
Таким образом, заявленная питательная середа с использованием продуктов морского генеза, обеспечивает рост штамма возбудителя рожи свиней Erysipelothrix rhuisipathie, пригодно для приготовления эффективной вакцины.

Claims (1)

  1. Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней Erysipelothrix rhuisipathie, в состав которой входят пептон ферментативный, калий фосфорнокислый, натрий фосфорнокислый, а также гидролизат из морского сырья, отличающаяся тем, что в качестве источника азотного питания используют смесь рыбного автолизата и щелочного мидийного гидролизата при следующем соотношении компонентов:
    щелочной мидийный гидролизат 20-50% пептон ферментативний 1% калий фосфорнокислый 0,3% натрий фосфорнокислый 1,8% рыбный автолизат остальное.
RU2014149885/93A 2014-10-03 2014-10-03 Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней erysipelothrix rhuisipathie RU2541454C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014149885/93A RU2541454C1 (ru) 2014-10-03 2014-10-03 Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней erysipelothrix rhuisipathie

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014149885/93A RU2541454C1 (ru) 2014-10-03 2014-10-03 Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней erysipelothrix rhuisipathie

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2541454C1 true RU2541454C1 (ru) 2015-02-10

Family

ID=53287194

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2014149885/93A RU2541454C1 (ru) 2014-10-03 2014-10-03 Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней erysipelothrix rhuisipathie

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2541454C1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110669684A (zh) * 2018-09-20 2020-01-10 青岛高科技工业园海博生物技术有限公司 一种猪丹毒疫苗增菌培养基

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110669684A (zh) * 2018-09-20 2020-01-10 青岛高科技工业园海博生物技术有限公司 一种猪丹毒疫苗增菌培养基

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109355223A (zh) 一株具有氨氮降解功能的枯草芽孢杆菌n2及其应用
Balaji et al. Isolation and screening of proteolytic bacteria from freshwater fish Cyprinus carpio
RU2014111125A (ru) Способ получения штамма бактериофага, специфических штаммов бактериофагов и их применение
JP5923821B2 (ja) 微生物の培養方法
RU2541454C1 (ru) Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней erysipelothrix rhuisipathie
CN109439576B (zh) 一种诺维氏梭菌培养基及其制备方法
RU2398872C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus licheniformis, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ, ПРЕДНАЗНАЧЕННОЙ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ВЫСОКОКАЧЕСТВЕННЫХ КОРМОВ, ПОВЫШАЮЩИХ ПРОДУКТИВНОСТЬ И СНИЖАЮЩИХ РИСК ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЖИВОТНЫХ, ПТИЦЫ И РЫБ
CN115261287A (zh) 一种复合乳酸杆菌菌剂及其应用
RU2649754C2 (ru) Способ изготовления формолвакцины гидроокисьалюминиевой полиштаммной против стрептококковых заболеваний крупного рогатого скота
RU2388489C1 (ru) Способ изготовления вакцины ассоциированной против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий
RU2518282C1 (ru) Питательная среда для глубинного культивирования туляремийного микроба
RU2723580C1 (ru) Способ получения адсорбированной вакцины против вибриоза лососевых рыб
RU2022008C1 (ru) Способ приготовления основы для питательных сред для выращивания микроорганизмов
RU2678123C1 (ru) Питательная среда для восстановления численности анаэробных бактерий после низкотемпературного хранения
CN114015576A (zh) 去除微藻共生细菌的方法
RU2348686C2 (ru) Питательная среда для культивирования микроорганизмов
RU2444567C1 (ru) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛЕЦИТИНАЗНОЙ АКТИВНОСТИ У БАКТЕРИЙ РОДА Listeria
UA40468U (ru) Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней erysipelothrix rhuisipathie
RU2841541C1 (ru) Универсальная питательная среда для культивирования бактерий на основе гидролизата тушек норок
RU2410424C1 (ru) Питательная среда для культивирования микроорганизмов
RU2465316C1 (ru) Штамм бактерий haemophilus influenzae в №326, стабильный продуцент капсульного полисахарида
RU2722668C1 (ru) Способ получения инактивированной вакцины против легочных заболеваний молодняка продуктивных животных
JP4210674B2 (ja) マイコプラズマ・ガリセプティカム培養用培地
RU2642316C1 (ru) Способ изготовления вакцины против бруцеллеза мелкого рогатого скота
RU2303059C1 (ru) Питательная среда для культивирования и сохранения возбудителей гнильцовых болезней пчел

Legal Events

Date Code Title Description
PD4A Correction of name of patent owner
PC41 Official registration of the transfer of exclusive right

Effective date: 20160608