[go: up one dir, main page]

RU2429017C1 - Antiaggregant activation in experiment in vitro - Google Patents

Antiaggregant activation in experiment in vitro Download PDF

Info

Publication number
RU2429017C1
RU2429017C1 RU2010113226/15A RU2010113226A RU2429017C1 RU 2429017 C1 RU2429017 C1 RU 2429017C1 RU 2010113226/15 A RU2010113226/15 A RU 2010113226/15A RU 2010113226 A RU2010113226 A RU 2010113226A RU 2429017 C1 RU2429017 C1 RU 2429017C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
antiaggregant
vitro
activation
experiment
cyclodextrin
Prior art date
Application number
RU2010113226/15A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Татьяна Анатольевна Баталова (RU)
Татьяна Анатольевна Баталова
Михаил Константинович Грачев (RU)
Михаил Константинович Грачев
Галина Ивановна Курочкина (RU)
Галина Ивановна Курочкина
Original Assignee
Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования Амурская Государственная Медицинская Академия Росздрава
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования Амурская Государственная Медицинская Академия Росздрава filed Critical Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования Амурская Государственная Медицинская Академия Росздрава
Priority to RU2010113226/15A priority Critical patent/RU2429017C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2429017C1 publication Critical patent/RU2429017C1/en

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FIELD: medicine. ^ SUBSTANCE: invention refers to a method of antiaggregant activation in vitro with using a conjugate of beta-cyclodextrin with 1-(4-isobutylphenyl)-propionic acid. ^ EFFECT: extended range of products for increasing antiaggregant activity. ^ 1 tbl

Description

Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к экспериментальной фармакологии.The invention relates to biology and medicine, namely to experimental pharmacology.

На сегодняшний день известен способ антиагрегантной активации с помощью препарата ибупрофена, обладающего антиагрегантными и противовоспалительными свойствами [1], но на сегодняшний день этот препарат является устаревшим и обладает рядом побочных эффектов.To date, a known method of antiplatelet activation using the drug ibuprofen, which has antiplatelet and anti-inflammatory properties [1], but today this drug is obsolete and has a number of side effects.

Цель изобретения - расширение арсенала средств для увеличения антиагрегантной активности.The purpose of the invention is the expansion of the arsenal of funds to increase antiplatelet activity.

Поставленная цель достигается применением нового синтезированного химического соединения, являющегося конъюгатом бета-циклодекстрина с 1-(4-изобутилфенил)-пропионовой кислотой (ибупрофеном).This goal is achieved by the use of a new synthesized chemical compound, which is a conjugate of beta-cyclodextrin with 1- (4-isobutylphenyl) -propionic acid (ibuprofen).

Синтез применяемого соединенияSynthesis of the compound used

Конъюгат бета-циклодекстрина с 1-(4-изобутилфенил)-пропионовой кислотой синтезирован в научной лаборатории кафедры органической химии Московского государственного педагогического университета.A beta-cyclodextrin conjugate with 1- (4-isobutylphenyl) -propionic acid was synthesized in a scientific laboratory of the Department of Organic Chemistry of Moscow State Pedagogical University.

К раствору 0.50 г (0.441 ммоль) β-циклодекстрина в 8 мл пиридина при перемешивании прикапывали 0.69 г (3.09 ммоль) хлорангидрида 1-(4-изобутилфенил)-пропионовой кислоты в 2 мл бензола, выдерживали при 20°С 24 ч. Выпавший гидрохлорид пиридина отфильтровывали, фильтрат упаривали, остаток затирали в эфире (5 мл), образовавшийся осадок отфильтровывали, промывали водой (2×5 мл), остатки воды удаляли азеотропной отгонкой с бензолом и сушили в вакууме (1 мм рт.ст.) 3 ч при 60°C.To a solution of 0.50 g (0.441 mmol) of β-cyclodextrin in 8 ml of pyridine, 0.69 g (3.09 mmol) of 1- (4-isobutylphenyl) propionic acid chloride in 2 ml of benzene was added dropwise with stirring at 20 ° C for 24 hours. The precipitated hydrochloride pyridine was filtered off, the filtrate was evaporated, the residue was triturated with ether (5 ml), the precipitate formed was filtered off, washed with water (2 × 5 ml), the remaining water was removed by azeotropic distillation with benzene and dried in vacuum (1 mm Hg) for 3 h at 60 ° C.

Выход соединения (II) 0.70 г (65%), т.пл. 157-160°C, Rf 0.59 (на алюминиевых пластинках с закрепленным слоем силикагеля, в системе этилацетат-уксусная кислота-вода 3:1:3). Спектр ЯМР 1Н (d6-ДМСО), δ, м. д.: 0.78-0.85 м [42H, (CH3)2], 1.24-1.30 м (21H, CH3), 1.72-1.81 м [7H, CH(CH3)2], 2.37 уш. с (14H, CH2), 3.13-3.77 м (42H; C1H-C5H, C6H2], 3.47-3.51 м (5H, CH), 4.82 д (7H, C1H), 5.66-5.82 м (14H; C2OH, C3OH), 6.96-7.22 м (28H, CHаром). ЯМР 13C (d6-ДМСО), δ, м. д.: 18.2 (CH3), 22.2 [(CH3)2], 29.7 [CH(CH3)2], 40.3 (CHCH3), 44.3 (CH2), 63.2 [C 6OC(O)], 69.3 [C 5C6OC(O)], 72.0-73.0 (C2, C3, C5), 81.8 (C4), 102.1 (C1), 127.1-139.6 (CHаром.), 174.2 [C(O)]. Найдено, %: C 64.64; H 7.55. C133H182O42. Вычислено, %: C 65.13; H 7.48.The yield of compound (II) 0.70 g (65%), so pl. 157-160 ° C, R f 0.59 (on aluminum plates with a fixed layer of silica gel, in the system ethyl acetate-acetic acid-water 3: 1: 3). 1 H NMR spectrum (d 6 -DMSO), δ, ppm: 0.78-0.85 m [42H, (CH 3 ) 2 ], 1.24-1.30 m (21H, CH 3 ), 1.72-1.81 m [7H, C H (CH 3 ) 2 ], 2.37 br. s (14H, CH 2 ), 3.13-3.77 m (42H; C 1 HC 5 H, C 6 H 2 ], 3.47-3.51 m (5H, CH), 4.82 d (7H, C 1 H), 5.66-5.82 m (14H; C 2 OH, C 3 OH), 6.96-7.22 m (28H, CH arom ). 13 C NMR (d 6 -DMSO), δ, ppm: 18.2 (CH 3 ), 22.2 [( CH 3 ) 2 ], 29.7 [ C H (CH 3 ) 2 ], 40.3 ( C HCH 3 ), 44.3 (CH 2 ), 63.2 [ C 6 OC (O)], 69.3 [ C 5 C 6 OC (O) ], 72.0-73.0 (C 2 , C 3 , C 5 ), 81.8 (C 4 ), 102.1 (C 1 ), 127.1-139.6 (CH arom. ), 174.2 [C (O)]. Found,%: C 64.64; H 7.55. C 133 H 182 O 42. Calculated,%: C 65.13; H 7.48.

Формула полученного соединения:The formula of the obtained compound:

Figure 00000001
Figure 00000001

В эксперименте in vitro проводились испытания на антиагрегантную активность в отношении тромбоцитов плазмы крови богатой. Препаратом сравнения служила ацетилсалициловая кислота (аспирин).In an in vitro experiment, tests were carried out for antiplatelet activity against platelets rich in blood plasma. The reference drug was acetylsalicylic acid (aspirin).

Для исследования функционального состояния тромбоцитов фотометрическим методом использовали богатую тромбоцитами плазму (PRP) и суспензию отмытых тромбоцитов. Утром, до кормления лабораторных животных (белые беспородные крысы), брали кровь из яремной вены в пластиковые шприцы, содержащие антикоагулянт (3.8% (0.11 М) раствор цитрата натрия) в соотношении 9:1. Все манипуляции с кровью, плазмой, обогащенной тромбоцитами и суспензией отмытых тромбоцитов, проводились в полиэтиленовой посуде. Для получения богатой тромбоцитами плазмы кровь центрифугировали в пластиковых пробирках при комнатной температуре в течение 10 минут для осаждения эритроцитов и лейкоцитов. Количество тромбоцитов PRP подсчитывалось в камере Горяева на микроскопе МБИ-15 с фазово-контрастной приставкой и доводилось до 2×1011-2.5×1011 тромбоцитов/л при помощи плазмы, бедной тромбоцитами (РРР). PRP получали повторным центрифугированием крови в течение 10 минут. PRP хранилась при температуре 4°C.To study the functional state of platelets by the photometric method, platelet-rich plasma (PRP) and a suspension of washed platelets were used. In the morning, before feeding laboratory animals (white outbred rats), blood was taken from the jugular vein into plastic syringes containing an anticoagulant (3.8% (0.11 M) sodium citrate solution) in a 9: 1 ratio. All manipulations with blood, plasma, enriched in platelets and a suspension of washed platelets, were carried out in plastic dishes. To obtain platelet-rich plasma, blood was centrifuged in plastic tubes at room temperature for 10 minutes to precipitate red blood cells and white blood cells. The platelet count of PRP was counted in a Goryaev’s chamber with an MBI-15 microscope with a phase-contrast attachment and brought up to 2 × 10 11 -2.5 × 10 11 platelets / l using platelet-poor plasma (PPP). PRP was obtained by repeated centrifugation of blood for 10 minutes. PRP was stored at 4 ° C.

Оценку агрегации тромбоцитов производили на агрегометре PICA (модель 330, США), а также на двухканальном агрегометре LaborAPACT (США) с графической регистрацией и автоматической калькуляцией амплитуды и максимальной скорости агрегации. Агрегатограммы анализировали по амплитуде (максимальная величина падения оптической плотности, выраженная в %); максимальной скорости агрегации (выраженной в %/мин). Все эксперименты проводились в шести параллельных испытаниях, где опытная проба сравнивалась с контрольным образцом. В качестве индукторов агрегации тромбоцитов использовали тромбин в конечной концентрации 0.5 ед/мл. Кровь инкубировали 5 мин с образцами при 37°C.Platelet aggregation was evaluated on a PICA aggregometer (model 330, USA), as well as on a two-channel laborAPACT aggregometer (USA) with graphic recording and automatic calculation of the amplitude and maximum aggregation rate. Aggregates were analyzed by amplitude (maximum value of the optical density drop, expressed in%); maximum aggregation rate (expressed in% / min). All experiments were carried out in six parallel tests, where the experimental sample was compared with a control sample. Thrombin at a final concentration of 0.5 u / ml was used as inducers of platelet aggregation. Blood was incubated for 5 min with samples at 37 ° C.

В качестве примера в таблице №1 приведены данные антиагрегационной активности конъюгата бета-циклодекстрина с ацетилсалициловой кислотой, полученные в эксперименте in vitro.As an example, table No. 1 shows the anti-aggregation activity of the beta-cyclodextrin conjugate with acetylsalicylic acid obtained in an in vitro experiment.

Табл.1Table 1 Антиагрегантная активность конъюгата бета-циклодестрина с ацетилсалициловой кислотойAntiplatelet activity of the conjugate of beta-cyclodextrin with acetylsalicylic acid ОбразецSample КонцентрацияConcentration Скорость (% в мин)Speed (% per min) противовоспалительногоanti-inflammatory Амплитуда (%)Amplitude (%) средства в навеске (мМ)funds in the sample (mm) КонтрольThe control -- 38±8.738 ± 8.7 48±6.548 ± 6.5 Ацетилсалициловая кислотаAcetylsalicylic acid 0,050.05 24.7±4.924.7 ± 4.9 27.9±6.527.9 ± 6.5 Конъюгат бета-циклодекстрина с ацетилсалициловой кислотойBeta-cyclodextrin conjugate with acetylsalicylic acid 0,020.02 13.0±3.5*13.0 ± 3.5 * 13.0±6.1*13.0 ± 6.1 * * p<0,05 по сравнению с контролем* p <0.05 compared with control

Источники информацииInformation sources

Машковский М.Д. Лекарственные средства. Москва. Изд. «Новая волна» 2005 г. 1206 с.Mashkovsky M.D. Medicines Moscow. Ed. “New Wave” 2005, 1206 p.

1. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических средств. Под общей ред. Р.У.Хабриева. Москва. 2005.829 с.1. Guidance on the experimental (preclinical) study of new pharmacological agents. Under the general ed. R.U. Khabrieva. Moscow. 2005.829 p.

2. К.Uekama, F.Hirayama, Т.Irie, Chem. Rev, 98 (5), 2045-2076 (1998).2. K. Uekama, F. Hirayama, T. Irie, Chem. Rev. 98 (5), 2045-2076 (1998).

3. M.E.Davis, M.E.Brewster, Nature Rev. Drug Discovery, 3, 1023-1035 (2004).3. M.E. Davis, M.E. Brewster, Nature Rev. Drug Discovery, 3, 1023-1035 (2004).

4. Cyclodextrins and their complexes. Chemistry, analytical methods, applications // Ed. H.Dodziuk, Wiley-VCH, Weinheim. 2006. 489 p.4. Cyclodextrins and their complexes. Chemistry, analytical methods, applications // Ed. H. Dodziuk, Wiley-VCH, Weinheim. 2006.498 p.

5. K.Uekama, K.Minami, F.Hirayama, J. Med. Chem, 40 (17), 2755-2761 (1997).5. K. Uekama, K. Minami, F. Hirayama, J. Med. Chem. 40 (17), 2755-2761 (1997).

Claims (1)

Способ антиагрегантной активации in vitro, отличающийся тем, что в качестве антиагрегантного средства используют новое синтезированное химическое соединение, представляющее собой конъюгат бета-циклодекстрина с 1-(4-изобутилфенил)-пропионовой кислотой. A method of antiplatelet activation in vitro, characterized in that a new synthesized chemical compound is used as an antiplatelet agent, which is a conjugate of beta-cyclodextrin with 1- (4-isobutylphenyl) -propionic acid.
RU2010113226/15A 2010-04-05 2010-04-05 Antiaggregant activation in experiment in vitro RU2429017C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2010113226/15A RU2429017C1 (en) 2010-04-05 2010-04-05 Antiaggregant activation in experiment in vitro

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2010113226/15A RU2429017C1 (en) 2010-04-05 2010-04-05 Antiaggregant activation in experiment in vitro

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2429017C1 true RU2429017C1 (en) 2011-09-20

Family

ID=44758627

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2010113226/15A RU2429017C1 (en) 2010-04-05 2010-04-05 Antiaggregant activation in experiment in vitro

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2429017C1 (en)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2072361C1 (en) * 1993-08-30 1997-01-27 МГУ (химический факультет) CONJUGATES OF α OR b-CYCLODEXTRINS WITH POLYETHYLENE OXIDE AS COMPLEXING AGENT AND EMULSIFIER AND METHOD FOR THEIR PRODUCTION
RU2094059C1 (en) * 1993-08-30 1997-10-27 Московский государственный университет, химический факультет Method of transport of neurotropic preparation to brain
WO2006005794A1 (en) * 2004-07-13 2006-01-19 Schering Oy A delivery system
RU2288921C2 (en) * 2000-12-19 2006-12-10 Калифорниа Инститьют оф Текнолоджи Inclusion complexes-containing compositions

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2072361C1 (en) * 1993-08-30 1997-01-27 МГУ (химический факультет) CONJUGATES OF α OR b-CYCLODEXTRINS WITH POLYETHYLENE OXIDE AS COMPLEXING AGENT AND EMULSIFIER AND METHOD FOR THEIR PRODUCTION
RU2094059C1 (en) * 1993-08-30 1997-10-27 Московский государственный университет, химический факультет Method of transport of neurotropic preparation to brain
RU2288921C2 (en) * 2000-12-19 2006-12-10 Калифорниа Инститьют оф Текнолоджи Inclusion complexes-containing compositions
WO2006005794A1 (en) * 2004-07-13 2006-01-19 Schering Oy A delivery system

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Новая волна, 2005, ч.1, с.205. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Lamola Molecular mechanisms in nucleic acid photochemistry. I. Sensitized photochemical splitting of thymine dimer
CN113004258B (en) Preparation method and application of hydrogen sulfide ratio type fluorescent molecular probe based on ESIPT effect
CN108003866A (en) A kind of dithiothreitol (DTT) fluorescence probe and its preparation method and application
JPH02261833A (en) Attaching of giant molecule through covalent bonding to base material surface
RU2429017C1 (en) Antiaggregant activation in experiment in vitro
JP2021523244A (en) Fluorescently labeled polysaccharides, and their preparation methods and uses
Wessig et al. Molecular rods based on oligo-spiro-thioketals
RU2440370C2 (en) Method of intensifying antiaggregant activity
CN108079954A (en) A kind of functional graphene oxide composite nano materials and preparation and application
CN109553643B (en) Monosaccharide analogs, molecular probes containing the same, and applications of the molecular probes
CN118652244B (en) A probe for extracellular vesicles and its preparation method and application
US11306158B1 (en) Method for preparing high-purity sugammadex sodium
CN103467552B (en) 8-cyclohexyl-2-fluoro-vidarabine as well as preparation method and application thereof
JP2007538112A (en) β-cyclodextrin derivatives and their use against anthrax lethal toxin
WO2019232895A1 (en) Quinolinium type compound and use thereof
CN106083760B (en) Fluorescent chemical sensor capable of selectively detecting hydrogen sulfide, preparation method and application
CN113387852A (en) Preparation method of sulfoxide compound
Veremeeva et al. Novel amphiphilic compounds for the design of stimulus-sensitive liposomal containers
CN110878129B (en) Glucosamine heparin salt and application thereof
CN107915705B (en) Dithiothreitol fluorescent probe
RU2459826C1 (en) Cyclohexylammonium salt of [3-methyl-1-n-propyl-7-(1-oxothietanyl-3)xanthinyl-8-thio]acetic acid exhibiting antithrombotic activity
Harris et al. Purification of biomaterials by phase-partitioning with poly (ethylene glycol)-alkyl ether
RU2703513C1 (en) L-alaninium acetyl salicylate exhibiting anticoagulation activity
RU2782930C2 (en) Method for extracting lymphotropin from industrial dye &#34;disulphine blue&#34;
CN113004886B (en) Preparation method and application of benzoquinolines ratio type near-infrared fluorescent molecular probe for fluorine ion detection

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20120406