RU2428173C1

RU2428173C1 - Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний нижнего отдела мочеполовой системы

Info

Publication number: RU2428173C1
Application number: RU2010123729/15A
Authority: RU
Inventors: Владимир Викторович Малинин (RU); Владимир Викторович Малинин
Original assignee: Общество с ограниченной ответственностью "ЦитоНИР" (ООО "ЦитоНИР")
Priority date: 2010-06-03
Filing date: 2010-06-03
Publication date: 2011-09-10
Also published as: EP2578206A4; WO2011152755A1; EP2578206A1; EP2578206B1

Abstract

Изобретение относится к фармакологии и медицине и представляет собой фармацевтическую композицию для лечения заболеваний нижнего отдела мочеполовой системы в форме суппозиториев, включающую биоактивное соединение и жировую основу, отличающуюся тем, что в качестве биоактивного соединения композиция содержит смесь аминокислот: глутаминовую кислоту, лизин, аланин, аргинин и глицин и дополнительно цинк в форме хлорида цинка, причем компоненты в композиции находятся в определенном соотношении на один суппозиторий массой 2,7-2,9 г. Изобретение обеспечивает расширение спектра действия лекарственного препарата. 2 з.п. ф-лы, 1 табл.

Description

Заявляемое изобретение относится к медицине, в частности к лекарственным препаратам, а именно к суппозиториям, содержащим средство для лечения заболеваний нижнего отдела мочеполовой системы. Оно может найти применение в широкой медицинской практике при лечении урологических и гинекологических заболеваний.

Известно средство для лечения хронического простатита в форме суппозиториев, включающее на один суппозиторий массой 2,0-2,2 г 4-6 мг биоактивного соединения концентрата экстракта предстательной железы крупного рогатого скота и дополнительно концентрат жидкого очищенного α-интерферона или рекомбинантный интерферон [RU №2160114, М.кл.⁶ А61К 35/48, 2000]. Суппозитории изготовлены на основе желатина, глицерина и натриевого карбонат-бикарбонатного буфера. Наличие интерферона, дающего противовирусную защиту, позволяет использовать суппозитории по RU №2160114 при лечении хронического простатита, протекающего на фоне иммунодефицита.

Однако эффективность указанных суппозиториев невысока, что связано, по-видимому, с низкой концентрацией биоактивного соединения и с нестабильностью интерферона в этой композиции.

Наиболее близкой по совокупности существенных признаков к заявляемой композиции является фармацевтическая композиция в форме суппозиториев, содержащая на суппозиторий массой 2,15-2,35 г 0,05-0,40 г биоактивного соединения и 0,7 г антимикробного средства [RU №2304979, М.кл.⁷ 61К 38/02, 2007]. В качестве биоактивного соединения композиция содержит комплекс биорегуляторных пептидов предстательной железы крупного рогатого скота. В качестве антимикробного средства композиция включает антибиотики из группы фторхинолонов, или пенициллинов, или цефалоспоринов, или тетрациклинов и др. Суппозитории по RU №2304979 могли включать также антивирусные и противопротозойные средства. Они были испытаны на модели простатита у белых крыс-самцов.

Присутствие антибиотиков в суппозиториях по RU №2304979 может вызвать у человека обычные осложнения, связанные с аллергическими реакциями на антибиотики, а также снижение уровня иммунитета, обычно вызываемое антибиотиками.

Однако фармацевтическим композициям по RU №2160114 и RU №2304979 свойственен общий недостаток - использование в качестве биоактивного соединения комплекса биорегуляторных пептидов предстательной железы крупного рогатого скота.

Как всякое средство, полученное из природного сырья, они обладают не полностью идентифицированной структурой, так как методы определения ее сложны, как и методы стандартизации, и не всегда доступны и производителю, и исследователю. Содержание активных веществ не превышает 20%; препарат, выделяемый из природного сырья, всегда содержит ряд высокомолекулярных соединений, неотделяемых от активных компонентов.

Все это сужает спектр действия лекарственного препарата.

Технический результат, на достижение которого направлено заявляемое изобретение, заключается в расширении спектра действия лекарственного препарата.

Указанный технический результат достигается тем, что фармацевтическая композиция в форме суппозиториев, включающая биоактивное соединение и жировую основу, в качестве биоактивного соединения содержит смесь аминокислот, включающую глутаминовую кислоту, лизин, аланин, аргинин и глицин, и дополнительно цинк в форме хлорида цинка при следующем соотношении компонентов в композиции в граммах на один суппозиторий массой 2,7-2,9 г:

глутаминовая кислота	0,050-0,500
лизин	0,025-0,250
аланин	0,025-0,250
аргинин	0,025-0,250
глицин	0,025-0,250
цинк	0,010-0,150
жировая основа	остальное.

Фармацевтическая композиция может дополнительно содержать 10-30 мкг селена в форме селенита натрия безводного или 0,020-0,035 г натрия фумаровокислого на один суппозиторий.

Известно, что отдельные аминокислоты регулируют различные физиологические функции живых организмов [Чиркин А.А., Данченко Е.О. Биохимия. М., «Медицинская литература», 2010, 608 с.]. Так, известно средство в форме суппозиториев для лечения женских сексуальных дисфункций [RU заявка №2000120537, М.кл.⁷ А61К 45/06, 2002], включающее 2-10 мг антагониста α-адренергических рецепторов (иохимбин, фентоламин и др.) и 1-8 г аргинина, проявляющего NО донорную активность.

Также известна фармацевтическая противогерпетическая композиция в форме, например, суппозиториев [RU №2264819, М.кл.⁷ А61К 35/74, 2005 и RU заявка №2004128635, М.кл.⁷ А61К 31/19, 2006], включающая вирионный вакцинный антигерпетический препарат, а также иммуномодулятор полиоксидоний и дополнительно валин, лизин, изолейцин и комбинацию, по крайней мере, из двух аминокислот, выбранных из группы, включающей, в частности, аланин и аргинин.

Также известна фармацевтическая композиция в форме, например, суппозиториев для лечения эректильной дисфункции [RU заявка 2000100301, М.кл.⁷А61К 31/475, 2001], включающая 2-8 мг иохимбина и 1-4 г аргинина.

Ни одна из известных фармацевтических композиций, включающих отдельные аминокислоты или даже смеси аминокислот [RU №2264819, RU заявка №2004128635], не проявляет активности в лечении заболеваний предстательной железы. Все рассматриваемые композиции содержат средства других классов, взятые как основное, а аминокислоты включены в них дополнительно, причем, как правило, в большом количестве.

Известно, что при объединении в композицию отдельных биологически активных веществ нельзя заранее предсказать, будет ли наблюдаться суммация их полезного действия, и даже будут ли составляющие совместимы [см., например, Кочетыгов Н.И. Кровезаменители при кровопотере и шоке. Л., «Медицина», 1984, с.148; под ред. Олейника С.А. Спортивная фармакология и диетология. М.: ООО «И.Д.Вильямс», 2008, 256 с.; Основы клинического питания. Материалы лекций для курсов Европейской ассоциации парентерального и энтерального питания. М., «ИнтелТек», 2003, 416 с.].

В силу этого проявленная заявляемой композицией физиологическая активность при лечении заболеваний предстательной железы (простатит, аденома предстательной железы) и, кроме того, гинекологических заболеваний, таких как вагинит, явилась неожиданной и заранее непредсказуемой.

Все компоненты заявляемой композиции выпускаются промышленностью. Были использованы глутаминовая кислота фирмы Ajinomoto, Япония, лизин фирмы Sigma-Aldrich, Германия, аланин фирмы Merk, Германия, аргинин фирмы Ajinomoto, Япония, глицин фирмы Изичжоу Сити Хуаян Кемикал, Китай и хлорид цинка (Merck, Германия), причем содержание его в формуле изобретения дано в расчете на цинк.

В случае, когда композиция включает 10-30 мкг селена, он взят в виде безводного селенита натрия.

Композиция может также включать 0,020-0,03 5 г натрия фумаровокислого. В качестве основы могут быть использованы, например, масло какао, пищевые жиры, смесь моно-, ди- и триглицеридов жирных кислот (Витепсол) и другие жировые основы, разрешенные фармакопеей.

Суппозитории готовят следующим образом.

Пример 1. Технология изготовления суппозиториев

1. Получение суппозиторной массы.

1.1. Получение премикса.

Премикс готовят в гомогенизаторе с нагреваемой рубашкой.

Для приготовления премикса в гомогенизатор помещают достаточное количество суппозиторной основы (Витепсол /Witepsol/ W35) и расплавляют.

Затем помещают предварительно отвешенные компоненты: глутаминовую кислоту, аланин, лизин, аргинин, глицин, цинк, возможно, натрий фумаровокислый и селен. Гомогензацию премикса проводят в течение 20-30 минут. По окончании процесса проверяют качество премикса - масса должна быть однородной.

1.2. Смешение премикса с основой

Суппозиторную основу (Витепсол /Witepsol/ W35) помещают в реактор и расплавляют. Затем к основе добавляют премикс и перемешивают в течение 1 часа. Суппозиторная масса должна быть однородной без видимых включений.

2. Формование суппозиториев

2.1. Наполнение контурной ячейковой упаковки суппозиторной массой (фасовка).

Фасовку препарата в контурную ячейковую упаковку осуществляют на дозирующей машине. Суппозиторную массу передают в бункер дозирующей машины. Фасовка суппозиторной массы в ячейки проводится при постоянной температуре и перемешивании.

Контурную ячейковую упаковку, заполненную суппозиторной массой, при помощи направляющих роликов сматывают в рулоны и передают на операцию «Охлаждение суппозиториев».

2.2. Охлаждение суппозиториев

Охлаждение суппозиториев осуществляют в холодильном шкафу при температуре 10-15°С в течение 1-2 часов.

Была исследована острая и хроническая токсичность заявляемых суппозиториев в соответствии с требованиями «Руководства по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ (2005)». Исследование острой токсичности проводили на 36 белых беспородных мышах-самках; исследование хронической токсичности проводили на 45 белых беспородных мышах-самках и 9 кроликах-самцах.

При изучении острой токсичности введение препарата осуществляли в возрастающих дозах 1,0, 2,0, 4,0, 8,0 и 10,0 г/кг (по готовой лекарственной форме) по Литчфилду-Уилкоксону, исходя из средней массы суппозиториев - 2,0 г.

Установлено, что однократное введение исследуемого препарата животным в дозе, превышающей терапевтическую, рекомендованную для клинического применения, более чем в 500 раз, не вызывает токсических реакций, что свидетельствует о большой терапевтической широте препарата.

Изучение хронической токсичности препарата свидетельствует об отсутствии побочных эффектов при применении суппозиториев в течение 30 дней в дозах, превышающих терапевтическую более чем в 200 раз. При исследовании не отмечено достоверного влияния исследуемого препарата на морфологические, биохимические показатели в периферической крови, а также на СОЭ и резистентность эритроцитов. Наряду с этим определяли содержание в сыворотке крови общего белка по методу Лоури, калия и натрия методом плазменной спектрофотометрии. После завершения эксперимента проводили патоморфологическое исследование головного и спинного мозга, спинномозговых ганглиев, щитовидной железы, паращитовидных желез, надпочечников, семенников, гипофиза, сердца, легких, аорты, печени, почек, мочевого пузыря, поджелудочной железы, желудка, тонкой кишки, толстой кишки, тимуса, селезенки, лимфатических узлов, костного мозга.

При оценке общего состояния животных, морфологических и биохимических показателей периферической крови, морфологического состояния внутренних органов, состояния сердечно-сосудистой и дыхательной систем, функции печени и почек патологические изменения в организме не обнаружены.

Отсутствие общетоксического действия суппозиториев позволяет рекомендовать их для проведения испытаний in vivo при экспериментальной урогенитальной патологии. Было изучено фармакологическое действие заявляемой композиции на экспериментальных моделях простатита и вагинита.

Пример 2. Эффективность применения суппозиториев у крыс на модели ирритативного простатита

Эксперименты выполнены на аутбредных крысах-самцах с массой тела 180-200 г, выращенных в питомнике РАМН «Рапполово». До экспериментов животных подвергали 14-дневному карантину и рандомизации. Метки и индивидуальные номера животных регистрировали в протоколах лабораторных испытаний. Животных содержали в условиях вивария на стандартном рационе.

Всем экспериментальным животным моделировали хронический простатит путем введения 10%-ного раствора димексида в воде, смешанного со скипидаром в объемном соотношении 4:1. Перед введением смесь встряхивали в течение 1 мин до образования мелкодисперсной эмульсии. Полученную свежеприготовленную эмульсию вводили крысам ректально на глубину 20-25 мм в объеме 1 мл с помощью устройства для ректальных вливаний (дозатора), обеспечивающего отсутствие травматичности процедуры, при этом животные фиксировались в горизонтальном положении рукой в холщовой перчатке. Смесь перед введением взбалтывали до получения мелкодисперсной эмульсии.

В указанной для ректального введения смеси скипидар используется для создания патологической гиперемии в предстательной железе, а водный раствор димексида является проводником, улучшающим внутритканевое проникновение скипидара, а также оказывает обезболивающее действие.

Изучаемые препараты вводили крысам разных групп индивидуально в следующих дозах через 28 дней от момента моделирования патологии. Животные были распределены на следующие группы по 10 крыс в каждой:

- интактные животные;

- контроль 1 (ирритативный простатит);

- контроль 2 (ирритативный простатит+препарат сравнения - Простатилен (биорегуляторные пептиды предстательной железы крупного рогатого скота), 190 мг/кг р.г.);

- ирритативный простатит+заявляемые суппозитории, 240 мг/кг р.r. Изучаемые препараты вводили каждому самцу индивидуально в расплавленном виде с помощью атравматического зонда.

Определяли снижение уродинамики (по показателям спонтанного суточного диуреза), используя индивидуальные обменные клетки фирмы «Techniplast» (Италия). Определяли фоновые значения диуреза (28 дней от момента моделирования патологии) и значения по окончании терапии (58-59 дней).

В суточной моче определяли уровень экскретируемого белка с помощью количественного метода турбодиметрии.

После сбора мочи в обменных клетках крыс подвергали мгновенной декапитации под легкой фторотановой анестезией. Забор крови осуществляли в вакуумные пробирки с активатором свертывания «Vacutest SER» фирмы «Vacutestkrma» (Италия). Пробы прогревали 30 мин при 37°С в термостате, охлаждали 1 ч в холодильной камере, центрифугировали при 2050 об/мин. Сыворотку крови отделяли в пробирки Microtubes Eppendorf фирмы «Plastibrand» (Германия).

В сыворотке крови определяли уровни тестостерона (методом иммуноферментного анализа, наборы фирмы «ХЕМА»), оксида азота (методом фотометрии Грисса при 520 нм), тиобарбитурат-реактивных продуктов - малонового диальдегида (методом фотометрии при 537 нм), С-реактивного белка (методом иммуноферментного анализа, наборы фирмы «BD»), церулоплазмина (методом фотометрии Ревина), активность простатической кислой фосфатазы (методом кинетической фотометрии, набор фирмы «Ольвекс Диагностикум»).

Для гистологического исследования вентральную часть предстательной железы фиксировали в 10% нейтральном формалине и после стандартной проводки через серию растворителей заливали в парафин. Срезы тканей толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилин-эозином.

Для сравнения выраженности простатита в различных группах была разработана следующая 5-балльная шкала:

1 балл - следы простатита (мелкие очаги фиброза, интерстициальной, лимфоцитарной и гистиоцитарной инфильтрации);

2 балла - очаги хронического простатита с воспалительной инфильтрацией (в основном интерстициальной), занимающие менее 1/4 среза железы;

3 балла - очаги простатита с крупными воспалительными инфильтратами вокруг протоков, ацинусов и кровеносных сосудов, со скоплением лейкоцитов в просветах желез, занимающие 1/4-1/2 среза железы;

4 балла - выраженный простатит, захватывающий 1/2-3/4 среза железы;

5 баллов - резко выраженный простатит с поражением более 3/4 среза железы. Статистическую обработку данных проводили с помощью стандартного пакета программ «Microsoft Excel». Существенность изменений вычисляли с применением t-критерия Стьюдента.

Моделирование экспериментального простатита сопровождается развитием значимых патологических изменений уродинамики у крыс через 28 суток от момента введения флогогена (смеси скипидара с димексидом). Введение смеси скипидара с димексидом приводило к развитию простатита, что сопровождалось за счет воспалительного увеличения массо-объемных показателей железы, снижением уродинамики. Во всех опытных группах суточный диурез через 28 дней после моделирования (фон патологии) был снижен более чем на 40%. Протеинурия существенно увеличивалась (в 5,4 раза), что объясняется выходом воспалительного экссудата в просвет уретры самцов и попадание его компонентов в мочу. На фоне патологии происходило увеличение выброса тканевого изофермента кислой фосфатазы - основного маркера простатита и аденомы. Также отмечали увеличение уровня острофазовых белков - церулоплазмина (в 24 раза) и С-реактивного белка (в 2,2 раза) и снижение уровня тестостерона.

Экспериментальная модель простатита приводит к воспалительному увеличению массо-объемных размеров вентральной простаты, что при оценке влияния лекарственных препаратов на течение простатита оценивали по величине массы железы у крыс в конце эксперимента.

Увеличение железы происходило в основном за счет отека и гиперемии ткани железы. Эти изменения играют существенную роль в ухудшении уродинамики при пассажах мочи и являются основным фактором развития гиперрастяжения стенки мочевого пузыря у больных с простатитом и аденомой предстательной железы, а также причиной дизурических расстройств, в том числе боли во время мочеиспускания.

Терапия изучаемыми препаратами в течение 1 месяца привела к значимой нормализации массы предстательной железы у крыс самцов с экспериментальным простатитом. Простатилен уменьшал массу вентральной простаты на 23,7% по сравнению с контролем без лечения. Исследуемые суппозитории в несколько большей степени способствовали нормализации данного показателя - снижение на 30,4%.

На фоне введения препарата сравнения Простатилена происходило существенное снижение протеинурии у крыс в 3,2 раза и восстановление диуреза на 54,3% по сравнению с фоном патологии.

Введение изучаемых суппозиториев способствовало восстановлению уродинамики (увеличение диуреза на 22,4%) и уменьшению суточного выделения белка с мочой (протеинурии) - в 2,2 раза по сравнению с фоном патологии в этой группе.

Терапия препаратом сравнения Простатиленом способствовала уменьшению выраженности оксидативных процессов в железе, что проявлялось значимым снижением уровня как оксида азота (в 1,5 раза), так и продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-РП) (в 2,2 раза) по сравнению с контрольными животными без лечения.

Введение крысам исследуемых суппозиториев оказывало сопоставимое с Простатиленом действие на выраженность оксидативного стресса - снижение оксида азота происходило в 1,8 раза, а ТБК-РП - в 1,9 раза по сравнению с контролем.

Под влиянием проводимой терапии препаратом Простатилен отмечали достоверное снижение выхода простатического изофермента кислой фосфатазы (в 1,7 раза) и увеличение уровня тестостерона (в 1,6 раза) по сравнению с контролем патологии.

Исследуемые суппозитории оказали более существенное влияние на активность простатической кислой фосфатазы (снижение в 2,4 раза по сравнению с контролем и в 1,4 раза по сравнению с препаратом сравнения) и уровень тестостерона (увеличение в 1,4 раза).

Простатилен уменьшал уровни острофазовых белков церулоплазмина (в 2,4 раза) и С-реактивного белка (в 1,8 раза) в крови.

Терапия исследуемыми суппозиториями также способствовала нормализации уровня церулоплазмина (в 2,5 раза) и в особенности С-реактивного белка (снижение уровня в 2,2 раза).

Как показало морфологическое исследование срезов, терапия препаратом сравнения Простатиленом способствовала редукции выраженности воспалительной инфильтрации в строме железы и ацинарно-обнаруживаемых клеток белой крови. Признаки воспаления отмечали лишь у 40% обследованных крыс самцов при просмотре гистологических препаратов. У остальных животных отмечали нормальное строение ткани железы.

Исследуемые суппозитории оказывали схожее с Простатиленом действие. Лишь у 40% животных отмечали очаги хронического простатита с воспалительной инфильтрацией (в основном интерстициальной), занимающие более 1/4 среза железы. У остальных крыс строение предстательной железы соответствовало таковому у интактных животных.

В целом заявляемая фармацевтическая композиция оказывает при лечении экспериментального простатита терапевтическое действие, подобное Простатилену или превышающее действие Простатилена.

Пример 3. Эффективность применения суппозиториев у крыс на модели ирритативного вагинита

Эксперименты проводили на 40 белых беспородных крысах-самках массой 180-200 г.

Вагинит моделировали путем однократной внутривлагалищной аппликации ирританта, в качестве которого применяли комбинацию живичного скипидара с диметилсульфоксидом в соотношении 1:1 в дозе 0,5 мл/100 г массы тела животного. Через 24 часа после введения ирританта начинали лечение животных из экспериментальной группы. Препарат вводили во влагалище в течение 7 дней в дозах, соответствующих суточной дозе для человека. В пересчете на лекарственную форму для крыс суточная доза составила - 220 мг/кг. Введение препарата осуществляли 1 раз в сутки. Для предотвращения свободной эвакуации суппозиториев вход во влагалище тампонировали небольшим ватным тампоном на 30 минут.

Животные контрольной группы оставались без лечения. У них регистрировали динамику воспалительного процесса, для чего оценивали клеточный состав влагалищных мазков и проводили микробиологическое изучение мазков-отпечатков исходно, на 1, 3 и 7 сутки после аппликации ирританта. В те же сроки оценивали гематологические маркеры воспалительного процесса - содержание в периферической крови лейкоцитов, лейкоцитарную формулу и СОЭ. Кроме того, отслеживали поведение и общее состояние животных. Учитывали также:

- степень выраженности местной гиперемии в баллах: 0 - видимая слизистая влагалища и кожа вокруг влагалища без изменений; 1 - легкая гиперемия видимой слизистой влагалища; 2 балла - выраженная гиперемия слизистой влагалища и кожи; 3 -выраженная гиперемия слизистой влагалища и признаки самоповреждения кожи -следы укусов;

- степень обильности выделений из влагалища в баллах: 0 - выделений нет; 1 -слабые выделения при надавливании тампоном; 2 - умеренные выделения, смочена кожа вокруг влагалища; 3 - обильные выделения, смочена кожа вокруг влагалища и подстилка.

Гистологический контроль осуществляли на 3, 7 и 10 сутки. Для гистологического исследования крыс из экспериментальной и контрольной групп подвергали эвтаназии с помощью декапитации под легким эфирным наркозом.

Влагалище фиксировали в 10% формалине и после спиртовой проводки заливали в парафин. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином и изучали под биологическим микроскопом МБИ-6.

У животных из всех экспериментальных групп через 24 часа после введения ирританта наблюдали выраженное беспокойство, выделения из влагалища и гиперемию видимой слизистой оболочки влагалища.

В первые сутки после моделирования вагинита животные контрольной группы проявляли беспокойство, повышенную реакцию на внешние раздражители. У них отмечены уменьшение потребления корма и воды, наличие взъерошенной шерсти. У всех животных наблюдали серозно-слизистые выделения из влагалища. Отклонения в поведении животных постепенно уменьшались к 3-му дню эксперимента. На 7-й день поведение крыс не отличалось от поведения интактных (не участвующих в эксперименте) животных.

Состояние и поведение животных, получавших исследуемые суппозитории в первые сутки эксперимента, не отличались от контрольной группы. У них отмечены взъерошенная шерсть, увеличение беспокойства, агрессивность в ответ на захват рукой. Введение препарата сопровождалось беспокойством и вокализацией. На третий день введения вагинальных суппозиториев отмечено уменьшение выделений из влагалища, снизилась выраженность гиперемии. Данные изменения носили статистически значимый характер по сравнению с контролем. На 7-й день эксперимента видимые симптомы воспаления полностью купировались.

В первые сутки после начала терапии во всех экспериментальных группах наблюдали картину острого воспаления с выраженным лейкоцитозом и сдвигом лейкоцитарной формулы влево до палочкоядерной генерации лейкоцитов, лимфопению. Отмечали высокую СОЭ.

Уже на первые сутки проведенная терапия исследуемыми суппозиториями дала положительный результат. У животных, получавших лечение, СОЭ была в 1,3 раза ниже, количество лейкоцитов также снижалось. Эта тенденция наблюдалась на протяжении всего эксперимента.

На 3 сутки, на фоне отсутствия положительной динамики в контрольной группе у животных, которым вводили исследуемые суппозитории, отмечали значимое снижение количества лейкоцитов и сегментоядерных нейтрофилов, а также уменьшение выраженности лимфопении по сравнению с первыми сутками с начала терапии.

На 7-е сутки в контрольной группе (без лечения) отмечали начало положительной динамики в отношении исследуемых показателей. В группе животных, получавших исследуемые суппозитории, наблюдали значимое снижение общего количества лейкоцитов крови, незначительный палочкоядерный сдвиг, восстанавливалось количество нейтрофилов, лимфоцитов. На 7-е сутки СОЭ не отличалась от данного показателя у интактных животных.

Введение ирританта привело к нарушениям микрофлоры влагалища у животных из всех опытных групп. В контрольной группе в течение всего эксперимента отмечали значительные изменения, свидетельствующие о воспалительном процессе - высокое содержание вегетативных и невегетативных форм дрожжей, увеличение количества диплококковой и кокковой флоры в мазках. Лишь на седьмой день эксперимента прослеживалась тенденция к нормализации микрофлоры влагалища.

Лечение изучаемым препаратом уже на 1-е сутки привело к уменьшению количества диплококков, дрожжей, грамотрицательных палочек и грамположительных кокков. Под влиянием исследуемых суппозиториев у животных на третьи сутки восстанавливался естественный состав микрофлоры (ее количественная и качественная характеристики), практически не отличающийся от показателей в норме. Необходимо также отметить нарастание количества лактобактерий, обладающих высокой антагонистической активностью в отношении широкого круга патогенных и условно-патогенных микробов, что определяет корригирующее влияние препарата при нарушениях бактериоценоза.

Лечение препаратом в течение 7 дней привело к снижению патогенной флоры в мазках, восстановлению микроценоза влагалища. К действию исследуемых суппозиториев оказались чувствительны как Граммположительные и Граммотрицательные кокки, Граммотрицательные бактерии, так и вегетативные и невегетативные дрожжи.

Таким образом, на модели ирритативного вагинита изучаемые суппозитории проявили выраженный противомикробный эффект. Лечение препаратом позволило восстановить естественный баланс влагалищных микроорганизмов.

Морфологическое изучение срезов влагалища крыс с ирритативным вагинитом проводили на 1,3 и 7-е сутки эксперимента.

У контрольных крыс в течение первых трех суток эксперимента отмечали деструктивно-воспалительные изменения всех слоев стенки влагалища. Поверхностный слой эпителия слизистой оболочки находился в состоянии некробиоза, местами отсутствовал. Наблюдался гиперхроматизм ядерной мембраны и лизис хроматина. Полиморфноядерные лейкоциты инфильтрировали подслизистый слой, проникали в эпителий. В более глубоких слоях подслизистого слоя наблюдали полнокровие и отек рыхлой соединительной ткани. На 3 сутки процессы деструкции сохраняются. Сильная воспалительная реакция проявляется массивной инфильтрацией гранулярными лейкоцитами и появлением макрофагов, лимфоцитов и плазматических клеток. К 7 дню эксперимента изменения слизистой оболочки влагалища были незначительно выражены: эпителий слизистой полностью регенерировал, ядра клеток эпителия были четкими, полнокровие и отек, лейкоцитарная инфильтрация подслизистого слоя слабо выражены.

Лечение исследуемыми суппозиториями в течение первых трех суток позволило несколько уменьшить выраженность воспаления эпителия слизистой. Некробиоз клеток наблюдали в поверхностных слоях эпителия, также в зоне воспаления происходила инфильтрация полиморфноядерными лейкоцитами, обнаруживались единичные полиморфноядерные лейкоциты, лимфоциты и плазматические клетки.

Лечение изучаемым препаратом в течение 7 суток способствовало полному восстановлению целостности эпителия, гистологическое строение слизистой оболочки влагалища не отличалось от слизистой интактных крыс.

Полученные в ходе гистологического исследования данные, полностью коррелировали с результатами оценки гематологических и микробиологических маркеров воспаления.

Таким образом, заявляемая фармацевтическая композиция эффективна при лечении экспериментального вагинита.

Клиническая эффективность суппозиториев была установлена при применении у больных мужчин и женщин с заболеваниями нижнего отдела мочеполовой системы.

Пример 4. Эффективность применения суппозиториев у больных хроническим простатитом

Исследование эффективности клинического применения суппозиториев проведено у 22 больных хроническим простатитом в возрасте 25-47 лет.

Основными проявлениями хронического простатита были ноющие боли типичной локализации, различные нарушения мочеиспускания, расстройства способности к совершению половых сношений и признаки невротического состояния.

Все больные ранее получали традиционные лекарственные средства симптоматического и патогенетического действия, при применении которых отмечался кратковременный терапевтический эффект, требующий увеличения дозы препаратов на курс лечения и продолжительного их приема. Суппозитории применяли ректально на ночь перед сном в течение 10-15 дней в зависимости от степени тяжести заболевания. Контрольная группа состояла из 10 аналогичных больных, которым назначалось традиционное лечение.

Эффективность лечения заявляемыми суппозиториями оценивали на основании динамики жалоб больных, общеклинического исследования крови и мочи, биохимического изучения крови, коагулограммы крови до и после окончания лечения. Степень брюшного давления при мочеиспускании и характер струи мочи выражали в баллах от 1 до 5 (1 -норма, 5 - наибольшие изменения показателя). Определяли максимальную и среднюю скорости и время мочеиспускания, время достижения максимальной скорости мочевыделения, оценивали флуорометрический индекс. Наряду с вышеуказанными исследованиями производили пальпаторную оценку предстательной железы, лабораторное исследование ее секрета, более углубленное изучение состояния копулятивной функции. Проводили также ультразвуковое исследование предстательной железы.

Основное внимание при оценке результатов лечения хронического простатита было уделено клиническим критериям. По окончании лечения болевые ощущения полностью исчезали у 72,4% и значительно уменьшались у 23,7% больных, предъявляющих соответствующие жалобы. Из числа больных, страдающих нарушением половой функции, 52,6% указали на полное ее восстановление и 43,7% отметили улучшение. Положительное действие суппозиториев проявлялось как относительно улучшения качества эрекции, так и усиления оргазма и ликвидации его болезненности. Отмечалось также увеличение продолжительности полового акта. К концу лечения 50,6% больных сообщили о восстановлении либидо.

Поллакиурия (учащение мочеиспускания) полностью перестала беспокоить 85,4% больных. Исчезла потребность ночного мочеиспускания. Странгурия (затрудненное мочеиспускание) перестала беспокоить 82,5%о больных, 22,9% отметили заметное усиление струи мочи и облегчение акта мочеиспускания.

Урофлуограммы, записанные после лечения у больных хроническим простатитом I и II стадии, показали восстановление основных параметров мочеиспускания до нормальных значений. При III стадии болезни этому препятствовало снижение эластичности шейки мочевого пузыря из-за склеротических изменений ткани предстательной железы, но и у них наблюдалось заметное усиление струи мочи. При пальпации предстательной железы через прямую кишку определялась тенденция к восстановлению ее размеров и консистенции после лечения заявляемыми суппозиториями. При этом исчезали участки уплотнения, а само исследование становилось безболезненным. Наблюдавшееся уменьшение размеров предстательной железы, расцениваемое как результат уменьшения отека межуточной ткани и свидетельствующее о ликвидации активности воспалительного процесса в ней, подтверждалось и результатами ультразвуковой диагностики. Выполненные в динамике общеклинические и биохимические исследования крови не выявили каких-либо существенных отклонений от нормальных показателей. Побочного действия не наблюдалось.

Благодаря восстановлению функции предстательной железы под влиянием суппозиториев, наблюдалось улучшение свойств ее секрета. Это обеспечивало увеличение содержания подвижных сперматозоидов в эякуляте на 23,7%. Снижение активности воспалительного процесса подтверждалось уменьшением количества лейкоцитов в эякуляте, секрете предстательной железы и моче. Одновременно наблюдалось уменьшение в исследуемом материале содержания клеток спущенного эпителия.

Пример 5. Эффективность применения суппозиториев у больных пожилого и старческого возраста с дизурическими расстройствами

В исследовании приняли участие 49 пациентов, страдающих нарушением мочеиспускания, в том числе 29 мужчин в возрасте от 68 до 82 лет и 20 женщин в возрасте от 58 до 84 лет. Все пациенты пожилого и старческого возраста предъявляли жалобы на учащенное мочеиспускание до 10-20 раз в сутки, особенно в ночные часы (до 5-10 раз), что существенно снижало качество жизни пожилых людей и затрудняло их социальную адаптацию.

Эффективность лечения оценивали на основании динамики жалоб больных и показателей уродинамики. Определяли максимальную, среднюю скорость и время мочеиспускания, время достижения максимальной скорости мочевыделения, оценивали урофлоуметрический индекс.

Больные методом рандомизации были разделены на 2 группы. В контрольную группу вошли 18 человек (11 мужчин, 7 женщин), которые получали общепринятое лечение, включавшее препараты спазмолитического (спазмекс, спазмол, спазмовералгин Нео) и холинолитического (детрузитол) действия.

Составившую основную группу 31 пациент (18 мужчин, 13 женщин) были разделены на 3 подгруппы в зависимости от степени выраженности нарушения мочеиспускания. Пациентам, отмечавшим наиболее выраженные дизурические расстройства в виде учащения мочеиспускания до 15-20 раз в сутки, особенно в ночные часы (до 10 раз), назначали суппозитории ректально утром и на ночь перед сном в течение 15 дней.

При средней степени выраженности дизурических расстройств (учащении мочеиспускания до 10 раз в день, в том числе до 5 раз в ночные часы) больные получали суппозитории ректально на ночь перед сном в течение 15 дней. Пациентам, отмечавшим умеренные нарушения мочеиспускания, выражавшиеся в учащении мочеиспускания в ночное время до 5 раз, применяли суппозитории ректально на ночь перед сном в течение 10-15 дней.

При сравнении показателей пациентов контрольной и основной групп выраженная положительная динамика отмечена в группе пациентов, получавших суппозитории.

При оценке динамики субъективных показателей все пациенты, получавшие суппозитории, оценили свое состояние как «улучшенное». Поллакиурия (учащение мочеиспускания) полностью перестала беспокоить 76,5% больных основной группы, кроме того, у них также исчезла потребность ночного мочеиспускания. У 13,2% больных основной группы поллакиурия значительно уменьшилась до 7-8 раз в сутки, а потребность ночного мочеиспускания сократилась до 2-3 раз.

Показатели уродинамики у пациентов пожилого и старческого возраста с дизурическими расстройствами после применения фармацевтической композиции в форме суппозиториев представлены в таблице.

Таблица
Влияние суппозиториев на состояние уродинамики больных пожилого и старческого возраста с дизурическими расстройствами
Показатель	До лечения	После лечения с применением общепринятых средств	После лечения суппозиториями
Время задержки мочеиспускания (мин)	5,4±0,7	5,1±0,6	2,9±0,7*#
Количество мочеиспусканий - в дневное время - в ночное время	9,8±0,7 5,8±0,6	8,7±0,8 5,5±0,5	6,5±0,4# 1,4±0,1#
Средняя скорость мочеиспускания (мл/с)	11,6±1,5	12,7±1,1	16,9±1,6*#
Максимальная скорость мочеиспускания (мл/с)	14,2±1,8	16,3±1,7	21,8±1,9*#
Время достижения максимальной скорости мочеиспускания (мл/с)	7,4±0,1	6,7±0,6	5,1±0,9*
* - Р<0,05 по сравнению с показателем до лечения;
# - Р<0,05 по сравнению с показателем у пациентов контрольной группы.

Следует отметить, что у пациентов контрольной труппы не наблюдалось положительной динамики функции мочевого пузыря как по субъективным, так и по объективным показателям, несмотря на применение общепринятых средств.

У пациентов контрольной группы, получавших общепринятую терапию, урофлоуметрический индекс практически не изменился после лечения.

В группе пациентов основной группы, получавших заявляемые суппозитории, урофлоуметрический индекс увеличился почти в 2 раза, что является подтверждением их положительного влияния на характер мочеиспускания.

Урофлоуграммы, записанные после лечения у больных пожилого и старческого возраста с умеренными дизурическими расстройствами, показали восстановление основных параметров мочеиспускания до нормальных значений под действием суппозиториев.

У пациентов старческого возраста с выраженными проявлениями дизурических расстройств полной нормализации показателей мочеиспускания препятствовало возрастное снижение эластичности шейки мочевого пузыря, но, тем не менее, у этих пациентов, получавших суппозитории, наблюдалось заметное усиление струи мочи и сокращение потребности в дневном мочеиспускании до 7-8 раз, а в ночном - до 2-3 раз.

Приведенные данные свидетельствуют о терапевтической эффективности суппозиториев при применении ректально в течение 10-15 дней в зависимости от степени тяжести заболевания и целесообразности их использования в лечении пациентов с дизурическими расстройствами различного генеза с целью восстановления функциональной активности детрузорно-сфинктерной системы мочевого пузыря.

Пример 6. Эффективность применения суппозиториев для лечения урогенитальных расстройств у женщин в пери- и постменопаузе

Лечение с применением суппозиториев проведено 24 женщинам в возрасте 46-55 лет с урогенитальными расстройствами в пери- и постменопаузе. Больные предъявляли жалобы на "приливы" жара к голове и верхней части туловища, гипергидроз, повышенную раздражительность, эмоциональную лабильность. Отмечались симптомы вагинальной атрофии (сухость и зуд во влагалище, диспареуния, рецидивирующие вагинальные выделения) и цистоуретральной атрофии (частые дневные (поллакиурия) и ночные (никтурия) мочеиспускания, цисталгия, императивные (неотложные) позывы к мочеиспусканию).

Заявляемые суппозитории применяли вагинально на ночь перед сном в течение 25-30 дней.

Установлено, что после применения суппозиториев у 83% больных купировались субъективные проявления вагинальной (сухость и зуд во влагалище, диспареуния, кровоточивость и т.д.) и цистоуретральной атрофии (поллакиурия, никтурия, императивные позывы и т.д.). Указанные симптомы исчезали как в перименопаузальном, так и в постменопаузальном периодах. Индекс вагинального здоровья повышался у женщин до 4-5 баллов, значение зрелости вагинального эпителия возрастало до 57-79% (появлялись промежуточные и поверхностные клетки), нормализовалась кольпоскопическая картина.

При стрессовом недержании мочи в перименопаузе на фоне монотерапии суппозиториями симптоматика полностью исчезала у 27% женщин.

При других формах дизурических расстройств с самого начала применялось комбинированное лечение суппозитории и заместительная гормональная терапия, поведенческая терапия, М-холинолитики, селективные ингибиторы обратного захвата серотонина). При подобном лечении хороший эффект достигался у 82% больных: у пациенток в 2,5 раза снижалась частота дневных и ночных мочеиспусканий, в 93% случаев купировалось императивное недержание мочи.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о нормализующем воздействии суппозиториев на структуры урогенитального тракта, заключающемся в улучшении трофики и пролиферации эпителия, а также о нормализации сократительной активности детрузора вследствие улучшения его кровоснабжения.

Заявляемые суппозитории целесообразно применять с лечебно-профилактической целью в сочетании с любыми средствами симптоматической и патогенетической терапии, используемыми для лечения урогенитальных расстройств в пери- и постменопаузе.

Как показали проведенные исследования, заявляемая фармацевтическая композиция в форме суппозиториев оказалась эффективной не только при лечении заболеваний предстательной железы (как и смесь биорегуляторных пептидов предстательной железы крупного рогатого скота), но и при других заболеваниях органов малого таза не только у мужчин, но и у женщин.

Claims

1. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний нижнего отдела мочеполовой системы в форме суппозиториев, включающая биоактивное соединение и жировую основу, отличающаяся тем, что в качестве биоактивного соединения композиция содержит смесь аминокислот: глутаминовую кислоту, лизин, аланин, аргинин и глицин и дополнительно цинк в форме хлорида цинка при следующем соотношении компонентов в композиции в граммах на один суппозиторий массой 2,7-2,9 г:
глутаминовая кислота 0,050-0,500 лизин 0,025-0,250 аланин 0,025-0,250 аргинин 0,025-0,250 глицин 0,025-0,250 цинк в форме хлорида цинка 0,010-0,150 жировая основа остальное

2. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит 10-30 мкг селена в форме безводного селенита натрия.

3. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит 0,020-0,035 г натрия фумаровокислого.