RU2495565C1 - Method to stimulate growth and to improve resistance of farm animals - Google Patents
Method to stimulate growth and to improve resistance of farm animals Download PDFInfo
- Publication number
- RU2495565C1 RU2495565C1 RU2012142131/15A RU2012142131A RU2495565C1 RU 2495565 C1 RU2495565 C1 RU 2495565C1 RU 2012142131/15 A RU2012142131/15 A RU 2012142131/15A RU 2012142131 A RU2012142131 A RU 2012142131A RU 2495565 C1 RU2495565 C1 RU 2495565C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- animals
- cells
- peripheral blood
- animal
- agent
- Prior art date
Links
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 69
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 28
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 23
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims abstract description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000006166 lysate Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 16
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 6
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 claims description 2
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 claims description 2
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 abstract description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 abstract description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 abstract description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 abstract description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 abstract description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 24
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 20
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 12
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 9
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 244000309466 calf Species 0.000 description 7
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 6
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 5
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 4
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 4
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000498833 Kluyvera ascorbata Species 0.000 description 4
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 4
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 4
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 4
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 4
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 4
- 229950001715 glucosaminylmuramyl dipeptide Drugs 0.000 description 4
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical group N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 3
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 3
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- MXMOFDISXOBSJM-BHACDBBJSA-N C[C@H](NC(=O)[C@@H](C)O[C@@H]1[C@@H](NC(C)=O)[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1N)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(O)=O Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@@H](C)O[C@@H]1[C@@H](NC(C)=O)[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1N)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(O)=O MXMOFDISXOBSJM-BHACDBBJSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 2
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 2
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 2
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 2
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 2
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- JPBBNLWRCVBGJS-KCAUTNRHSA-N glucosaminylmuramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]([C@@H](NC(C)=O)C=O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1NC(C)=O JPBBNLWRCVBGJS-KCAUTNRHSA-N 0.000 description 2
- 108700026361 glucosaminylmuramyl-2-alanine-D-isoglutamine Proteins 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 2
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 2
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 2
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 2
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 2
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- GSDSWSVVBLHKDQ-UHFFFAOYSA-N 9-fluoro-3-methyl-10-(4-methylpiperazin-1-yl)-7-oxo-2,3-dihydro-7H-[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinoline-6-carboxylic acid Chemical compound FC1=CC(C(C(C(O)=O)=C2)=O)=C3N2C(C)COC3=C1N1CCN(C)CC1 GSDSWSVVBLHKDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 208000031295 Animal disease Diseases 0.000 description 1
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- 208000037663 Best vitelliform macular dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 1
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 description 1
- 201000006306 Cor pulmonale Diseases 0.000 description 1
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- JPXZQMKKFWMMGK-KQYNXXCUSA-K IDP(3-) Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)O[C@H]1N1C(N=CNC2=O)=C2N=C1 JPXZQMKKFWMMGK-KQYNXXCUSA-K 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 1
- 239000004104 Oleandomycin Substances 0.000 description 1
- RZPAKFUAFGMUPI-UHFFFAOYSA-N Oleandomycin Natural products O1C(C)C(O)C(OC)CC1OC1C(C)C(=O)OC(C)C(C)C(O)C(C)C(=O)C2(OC2)CC(C)C(OC2C(C(CC(C)O2)N(C)C)O)C1C RZPAKFUAFGMUPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004100 Oxytetracycline Substances 0.000 description 1
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000606860 Pasteurella Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 206010051497 Rhinotracheitis Diseases 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 206010054979 Secondary immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010051511 Viral diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- RNBGYGVWRKECFJ-ZXXMMSQZSA-N alpha-D-fructofuranose 1,6-bisphosphate Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@](O)(COP(O)(O)=O)O[C@@H]1COP(O)(O)=O RNBGYGVWRKECFJ-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 1
- 229960004821 amikacin Drugs 0.000 description 1
- LKCWBDHBTVXHDL-RMDFUYIESA-N amikacin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](N)C[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)NC(=O)[C@@H](O)CCN)[C@H]1O[C@H](CN)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LKCWBDHBTVXHDL-RMDFUYIESA-N 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007503 antigenic stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 239000003782 beta lactam antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 229960004755 ceftriaxone Drugs 0.000 description 1
- VAAUVRVFOQPIGI-SPQHTLEESA-N ceftriaxone Chemical compound S([C@@H]1[C@@H](C(N1C=1C(O)=O)=O)NC(=O)\C(=N/OC)C=2N=C(N)SC=2)CC=1CSC1=NC(=O)C(=O)NN1C VAAUVRVFOQPIGI-SPQHTLEESA-N 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 1
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003405 ciprofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 1
- 238000009313 farming Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 229940124307 fluoroquinolone Drugs 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229940025237 fructose 1,6-diphosphate Drugs 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 208000018685 gastrointestinal system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 229940124622 immune-modulator drug Drugs 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 206010024378 leukocytosis Diseases 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 229960002422 lomefloxacin Drugs 0.000 description 1
- ZEKZLJVOYLTDKK-UHFFFAOYSA-N lomefloxacin Chemical compound FC1=C2N(CC)C=C(C(O)=O)C(=O)C2=CC(F)=C1N1CCNC(C)C1 ZEKZLJVOYLTDKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003120 macrolide antibiotic agent Chemical group 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229960002260 meropenem Drugs 0.000 description 1
- DMJNNHOOLUXYBV-PQTSNVLCSA-N meropenem Chemical compound C=1([C@H](C)[C@@H]2[C@H](C(N2C=1C(O)=O)=O)[C@H](O)C)S[C@@H]1CN[C@H](C(=O)N(C)C)C1 DMJNNHOOLUXYBV-PQTSNVLCSA-N 0.000 description 1
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- XBCXJKGHPABGSD-UHFFFAOYSA-N methyluracil Natural products CN1C=CC(=O)NC1=O XBCXJKGHPABGSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940029985 mineral supplement Drugs 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 229960001699 ofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 235000019367 oleandomycin Nutrition 0.000 description 1
- RZPAKFUAFGMUPI-KGIGTXTPSA-N oleandomycin Chemical compound O1[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@H](C)[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@]2(OC2)C[C@H](C)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C RZPAKFUAFGMUPI-KGIGTXTPSA-N 0.000 description 1
- 229960002351 oleandomycin Drugs 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229960001019 oxacillin Drugs 0.000 description 1
- UWYHMGVUTGAWSP-JKIFEVAISA-N oxacillin Chemical compound N([C@@H]1C(N2[C@H](C(C)(C)S[C@@H]21)C(O)=O)=O)C(=O)C1=C(C)ON=C1C1=CC=CC=C1 UWYHMGVUTGAWSP-JKIFEVAISA-N 0.000 description 1
- 229960000625 oxytetracycline Drugs 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N oxytetracycline Chemical compound C1=CC=C2[C@](O)(C)[C@H]3[C@H](O)[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N 0.000 description 1
- 235000019366 oxytetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 229960004236 pefloxacin Drugs 0.000 description 1
- FHFYDNQZQSQIAI-UHFFFAOYSA-N pefloxacin Chemical compound C1=C2N(CC)C=C(C(O)=O)C(=O)C2=CC(F)=C1N1CCN(C)CC1 FHFYDNQZQSQIAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 235000019371 penicillin G benzathine Nutrition 0.000 description 1
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 238000000528 statistical test Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N terramycin dehydrate Natural products C1=CC=C2C(O)(C)C3C(O)C4C(N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)C4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000707 tobramycin Drugs 0.000 description 1
- NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-S tobramycin(5+) Chemical compound [NH3+][C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](C[NH3+])O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H]([NH3+])[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H]([NH3+])C[C@@H]1[NH3+] NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-S 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 208000020938 vitelliform macular dystrophy 2 Diseases 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/15—Cells of the myeloid line, e.g. granulocytes, basophils, eosinophils, neutrophils, leucocytes, monocytes, macrophages or mast cells; Myeloid precursor cells; Antigen-presenting cells, e.g. dendritic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано в фармакологических целях для повышения неспецифической резистентности организма у молодняка сельскохозяйственных животных.The invention relates to veterinary medicine and can be used for pharmacological purposes to increase the nonspecific resistance of an organism in young farm animals.
При современном уровне физического, химического и биологического загрязнения окружающей природной среды сельскохозяйственные животные страдают от вторично индуцированного иммунодефицита - разбалансировки нормального функционирования иммунной системы. Это приводит к существенному снижению общей сопротивляемости организма животного к различным заболеваниям вирусной и бактериальной природы. При вторичном иммунодефиците животные с большим трудом переносят любые стрессы, начиная от транспортировки, смены кормовых рационов, стрижек, прививок и кончая применением сильных антибиотиков в качестве лекарственных препаратов.At the current level of physical, chemical and biological pollution of the environment, farm animals suffer from secondarily induced immunodeficiency - an imbalance in the normal functioning of the immune system. This leads to a significant decrease in the overall resistance of the animal to various diseases of a viral and bacterial nature. With secondary immunodeficiency, animals can withstand any stress with great difficulty, starting from transportation, changing feed rations, haircuts, vaccinations and ending with the use of strong antibiotics as medications.
Новорожденный молодняк в отличие от взрослых животных имеет недоразвитую иммунологическую и физиологическую систему защиты от воздействия окружающей микрофлоры. Способность иммунной системы отвечать на антигенную стимуляцию полностью развивается у животных лишь спустя определенное время после рождения. Для защиты молодого организма в период созревания иммунной системы ему передаются материнские антитела (иммуноглобулины), которые создают пассивный иммунитет. При недостатке иммуноглобулинов у животных в ранний постнатальный период создается предрасположенность к желудочно-кишечным и респираторным болезням, вызываемым, условно-патогенной микрофлорой.Newborn young animals, unlike adult animals, have an underdeveloped immunological and physiological protection system from the effects of the surrounding microflora. The ability of the immune system to respond to antigenic stimulation fully develops in animals only after a certain time after birth. To protect the young organism during the maturation of the immune system, maternal antibodies (immunoglobulins), which create passive immunity, are transmitted to it. With a lack of immunoglobulins in animals in the early postnatal period, a predisposition to gastrointestinal and respiratory diseases caused by conditionally pathogenic microflora is created.
Инфекционные заболевания, вызываемые вирусами, бактериями и их ассоциациями, поражают более 60% молодняка. Особенно остро это отражается на животных, рожденных с малой массой тела, поскольку такой молодняк плохо набирает вес и более подвержен инфекционным заболеваниям. Среди патогенных возбудителей в возникновении диареи преимущественную роль играют коронавирусы, ротавирусы, эшерихия коли, сальмонеллы, протеи. Наиболее часто респираторную патологию молодняка вызывают вирусы инфекционного ринотрахеита, парагриппа 3, вирусной диареи-болезни слизистых, из бактериальных - пастереллы, хламидии и микоплазмы. Любая патология животного является причиной или следствием иммунологических нарушений, которые способствуют переходу основного заболевания в хроническое и его осложнениям. Для профилактики, терапии и борьбы с этими болезнями проводят общие ветеринарно-санитарные и противоэпизоотические мероприятия. Вместе с этим применяют препараты специфической профилактики (гипериммунные сыворотки крови, вакцины и т.п.), средства химио- и антибиотикотерапии и профилактики.Infectious diseases caused by viruses, bacteria and their associations affect more than 60% of young animals. This is especially acute for animals born with low body weight, since such young animals gain weight poorly and are more susceptible to infectious diseases. Among the pathogenic pathogens in the occurrence of diarrhea, the predominant role is played by coronaviruses, rotaviruses, Escherichia coli, Salmonella, Proteus. The most common respiratory pathology of young animals is caused by the viruses of infectious rhinotracheitis, parainfluenza 3, viral diarrhea-mucosal diseases, and bacterial ones - pasteurella, chlamydia and mycoplasma. Any pathology of the animal is the cause or consequence of immunological disorders that contribute to the transition of the underlying disease into a chronic one and its complications. For the prevention, treatment and control of these diseases, general veterinary-sanitary and anti-epizootic measures are carried out. Along with this, specific prophylaxis drugs (hyperimmune blood serum, vaccines, etc.), chemo- and antibiotic therapy and prophylaxis are used.
В последнее время значительно возрос интерес к биоактивным препаратам как средствам повышения неспецифической и специфической резистентности животных к инфекционным агентам и их токсинам. Быстрота действия некоторых иммуностимуляторов, их высокая эффективность позволяют надеяться на перспективность этого направления исследований в ветеринарии с целью профилактики инфекционных заболеваний.Recently, there has been a significant increase in interest in bioactive drugs as a means of increasing the non-specific and specific resistance of animals to infectious agents and their toxins. The speed of action of some immunostimulants, their high efficiency allows us to hope for the prospects of this area of research in veterinary medicine with the aim of preventing infectious diseases.
В этом плане особый интерес для ветеринарных врачей представляет отечественный иммуномодулятор Гликопин. Это высокоэффективный и безопасный иммуномодулирующий препарат, действующим началом которого является синтезированный из природных компонентов глюкозаминилмурамилдипептид (ГМДП) - универсальный структурный фрагмент оболочки бактериальных клеток, взаимодействующий с иммунной системой животного организма (Применение иммуномодулятора гликопина для профилактики и лечения заболеваний животных // Методические рекомендации, http://www.peptek.ru/productions/glicopin/recomendations.php).In this regard, of particular interest to veterinarians is the domestic immunomodulator Glycopin. This is a highly effective and safe immunomodulating drug, the active principle of which is glucosaminyl muramyl dipeptide (GMDP) synthesized from natural components, which is a universal structural fragment of the membrane of bacterial cells that interacts with the immune system of the animal organism (Use of the glycopin immunomodulator for the prevention and treatment of animal diseases // Methodical recommendations, http: //www.peptek.ru/productions/glicopin/recomendations.php).
Известно средство для стимуляции обменных процессов животных и повышения общей работоспособности организма, содержащее экстракт плаценты для инъекций, нуклеинат натрия и в качестве источника витаминов и аминокислот - питательную среду для культивирования клеток 199 (патент РФ №2203073, 20.10.2002). Данное средство эффективно в отношении повышения работоспособности животных, однако при его применении существует опасность аллергических реакций на вводимые в составе препарата чужеродные для организма животного компоненты плаценты.Known means to stimulate the metabolic processes of animals and increase the overall health of the body, containing placenta extract for injection, sodium nucleinate and as a source of vitamins and amino acids - a nutrient medium for culturing cells 199 (RF patent No. 2203073, 10.20.2002). This tool is effective in improving the performance of animals, however, when it is used, there is a danger of allergic reactions to the placenta components that are alien to the animal organism and are introduced into the preparation.
Известен комплексный препарат «Пуриветин» для стимуляции роста и повышения резистентности сельскохозяйственных, домашних животных (патент РФ №2195838, 10.01.2003), содержащий азотистые основания, активатор гликолиза (фруктозо-1,6-дифосфат кальция) и витамины В12 и С. Где в качестве азотистых оснований используется - рибоксин и метилурацил, которые широко применяются в медицине в качестве активаторов энергообмена. Его использование нормализует обменные процессы в организме, влияет на изменение живой массы поросят, т.е. является перспективным биостимулятором в кормлении сельскохозяйственных животных, однако не позволяет добиться образования адекватного и стойкого ответа на бактериальные и вирусные агенты, необходимого для профилактики инфекционных заболеваний и снижения падежа.The well-known complex drug Purivetin is used to stimulate the growth and increase the resistance of farm animals and domestic animals (RF patent No. 2195838, January 10, 2003) containing nitrogen bases, a glycolysis activator (fructose-1,6-diphosphate of calcium) and vitamins B 12 and C. Where it is used as nitrogenous bases, riboxin and methyluracil, which are widely used in medicine as activators of energy exchange. Its use normalizes metabolic processes in the body, affects the change in live weight of piglets, i.e. It is a promising biostimulator in the feeding of farm animals, but it does not allow the formation of an adequate and stable response to bacterial and viral agents, which is necessary for the prevention of infectious diseases and reduction of mortality.
Известно также биологическое средство на основе зародышевой ткани, обладающее иммуномодулирующим свойством, восстанавливающее физиологическое состояние организма (FR 2413912 (А1), 1979-08 - 03.08.1979).Also known is a biological agent based on germinal tissue, having an immunomodulating property, restoring the physiological state of the body (FR 2413912 (A1), 1979-08 - 08/03/1979).
Указанное средство выполнено на основе измельченной и гомогенизированной животной ткани, выделенной из зародыша в смеси с физиологической сывороткой. Его использование обеспечивает в том числе и повышение продуктивности животных на 5-15% по сравнению с контрольной группой. Однако эффективность известного указанного вещества недостаточна вследствие того, что наряду с иммуномодулирующими факторами оно содержит в своем составе иммунодепрессанты, которые по сути препятствуют полному проявлению иммуномодулирующего эффекта.The specified tool is made on the basis of crushed and homogenized animal tissue isolated from the embryo in a mixture with physiological serum. Its use provides, among other things, an increase in animal productivity by 5-15% compared with the control group. However, the effectiveness of the known substance is insufficient due to the fact that along with immunomodulating factors it contains immunosuppressants, which essentially impede the full manifestation of the immunomodulating effect.
Наиболее близким аналогом является биологически активное средство для нормализации физиологического состояния организма человека и животных, предусматривающее введение в организм этого средства (RU 2041717 С1, 20.08.1995). Это биологически активное средство, обладающее иммуномодулирующим свойством, выполнено на основе органических соединений компонентов клеточных мембран гомогенизированной животной ткани, содержит в своем составе термостабильные, низкомолекулярные модифицированные компоненты клеточных мембран с антигенной структурой, модифицированной при процессах эмбриогенеза, или пролиферации, или дифференцировки клеток, или репарации ткани. Однако недостатком данного средства является то, что в его основе лежит использование только компонентов клеточных мембран, что сужает спектр биологической активности препарата.The closest analogue is a biologically active agent for normalizing the physiological state of the human and animal body, which provides for the introduction of this agent into the body (RU 2041717 C1, 08.20.1995). This biologically active agent with an immunomodulating property is made on the basis of organic compounds of the components of the cell membranes of homogenized animal tissue, contains thermostable, low molecular weight modified components of cell membranes with an antigenic structure modified during embryogenesis, or proliferation, or differentiation of cells, or repair tissue. However, the disadvantage of this tool is that it is based on the use of only components of cell membranes, which narrows the spectrum of biological activity of the drug.
В состав заявленного изобретения входит комплекс из клеточного лизата, а также культуральной средой, обогащенной клеточными метаболитами, цитокинами, факторами роста и другими, секретируемыми веществами культивируемыми клетками.The composition of the claimed invention includes a complex of cell lysate, as well as a culture medium enriched with cellular metabolites, cytokines, growth factors and other cultured cells secreted by substances.
Основной задачей изобретения является создание средства для ветеринарии, повышающего продуктивность сельскохозяйственных животных на основе белково-пептидного комплекса из лизата лейкоцитов периферической крови и стволовых и/или прогениторных клеток животных и кондиционированной среды их культивирования.The main objective of the invention is to provide a means for veterinary medicine, which increases the productivity of farm animals based on a protein-peptide complex from a peripheral blood leukocyte lysate and animal stem and / or progenitor cells and an air-conditioned environment for their cultivation.
Технический результат заявленного изобретения заключается в получении средства, обладающего эффективной индукцией неспецифической резистентности организма, улучшении клинического состояния и снижении заболеваемости сельскохозяйственных животных, содержащего: белково-пептидный комплекс, полученный из лизата культивированных стволовых и/или прогениторных клеток и лейкоцитов периферической крови животных; кондиционированную среду, полученную при совместном культивировании стволовых и/или прогениторных клеток и лейкоцитов периферической крови животных, где указанный комплекс имеет молекулярную массу от 1 до 200 кДа, причем не менее 80% от общей массы белка имеет молекулярную массу от 5 до 120 кДа, характеризующийся наличием пиков при длине волны 270-290 нм и 200-225 нм в УФ-области спектра, при следующем соотношении компонентов, мас.%:The technical result of the claimed invention consists in obtaining a means having effective induction of nonspecific resistance of the organism, improving the clinical condition and reducing the incidence of farm animals, comprising: a protein-peptide complex obtained from a lysate of cultured stem and / or progenitor cells and peripheral blood leukocytes of animals; conditioned medium obtained by co-cultivation of stem and / or progenitor cells and leukocytes of peripheral blood of animals, where this complex has a molecular weight of 1 to 200 kDa, and at least 80% of the total protein has a molecular weight of 5 to 120 kDa, characterized the presence of peaks at a wavelength of 270-290 nm and 200-225 nm in the UV region of the spectrum, with the following ratio of components, wt.%:
лизат лейкоцитов периферической крови и стволовых и/или прогениторных клеток - 0,01-10;peripheral blood leukocyte lysate and stem and / or progenitor cells - 0.01-10;
кондиционированная среда - 90,0-99,9.air-conditioned environment - 90.0-99.9.
Технический результат состоит также в индукции иммунного ответа за счет регулирования пролиферации иммунных клеток, их дифференцировки, и определения спектра синтезируемых цитокинов. Использование данного средства позволяет не только обеспечить иммунный эффект и стимуляцию роста сельскохозяйственных животных, но и избежать многокомпонентности состава и снизить количество вспомогательных веществ.The technical result also consists in the induction of an immune response by regulating the proliferation of immune cells, their differentiation, and determining the spectrum of synthesized cytokines. The use of this tool allows not only to provide an immune effect and stimulate the growth of farm animals, but also to avoid multi-component composition and reduce the amount of excipients.
I. Получение средства на основе белково-пептидного комплекса осуществляли следующим образом.I. Obtaining funds based on a protein-peptide complex was carried out as follows.
1) Получение стволовых и прогениторных клеток для культивирования1) Obtaining stem and progenitor cells for cultivation
Стволовые клетки и прогениторные клетки получали от интактного животного. Костный мозг забирали у животного, находящегося под общим эфирным наркозом, из бедренной кости, пунктируя кость и промывая ее раствором Хенкса. Из аспирата костномозговой взвеси удаляют эритроциты. Для удаления эритроцитов можно использовать градиентное центрифугирование, лизис эритроцитов лизирующим раствором или комбинацию этих методов с другими, в результате чего наступает разделение эритроцитов и ядросодержащих клеток. Данные ядросодержащие клетки содержат как стволовые клетки, так и прогениторные.Stem cells and progenitor cells were obtained from an intact animal. Bone marrow was taken from an animal under general ether anesthesia from the femur, puncturing the bone and washing it with Hanks solution. Red blood cells are removed from the bone marrow suspension aspirate. To remove red blood cells, you can use gradient centrifugation, lysis of red blood cells with a lysis solution, or a combination of these methods with others, resulting in the separation of red blood cells and nucleated cells. These nucleated cells contain both stem cells and progenitor cells.
2) Получение лейкоцитов периферической крови2) Obtaining peripheral blood leukocytes
Проводят забор периферической крови любым известным способом, после чего осуществляют получение лейкоцитарной суспензии: для этого 2 мл гепаринизированной крови смешивают с 1 мл подогретого до 37°С 3% раствора желатина и инкубируют в термостате при 37°С в течение 30 мин. После оседания эритроцитов слой плазмы, обогащенный лейкоцитами, отбирают в пластиковые пробирки и отмывали 10-кратным объемом фосфатно-солевого буфера (рН 7,4). Затем лейкоциты после центрифугирования в течение 10 мин при 1000 об/мин ресуспендируют в растворе Хенкса без Са2+ и Mg2+. После подсчета числа лейкоцитов концентрацию клеток доводят до 106 клеток.Peripheral blood sampling is carried out by any known method, after which a leukocyte suspension is obtained: for this, 2 ml of heparinized blood is mixed with 1 ml of a 3% gelatin solution heated to 37 ° C and incubated in an incubator at 37 ° C for 30 minutes. After erythrocyte sedimentation, the plasma layer enriched in leukocytes was taken into plastic tubes and washed with a 10-fold volume of phosphate-saline buffer (pH 7.4). Then, the leukocytes after centrifugation for 10 min at 1000 rpm are resuspended in a Hanks solution without Ca 2+ and Mg 2+ . After counting the number of leukocytes, the cell concentration was adjusted to 10 6 cells.
3) Культивирование клеток3) Cell cultivation
Полученные клетки, а именно лейкоциты периферической крови и стволовые и/или прогениторные клетки животных, ресуспендируют в культуральной ростовой среде. Клетки культивируют совместно при 37°С в атмосфере, содержащей 5% CO2 и при 95% влажности, в течение 1-60 суток.The resulting cells, namely peripheral blood leukocytes and animal stem and / or progenitor cells, are resuspended in culture growth medium. Cells are cultured together at 37 ° C in an atmosphere containing 5% CO 2 and at 95% humidity for 1-60 days.
Эти клетки могут быть культивированы любым известным способом, например в монослое, на гранулах или в трехмерном слое и любым другим способом (т.е. в чашках для культивирования, в роллер-флаконах, в системах с непрерывным потоком и т.п.). Методы культивирования клеток и тканей хорошо известны специалистам и описаны (Freshney. Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Techniques, 1987).These cells can be cultured by any known method, for example, in a monolayer, on granules or in a three-dimensional layer and in any other way (i.e., in culture dishes, in roller bottles, in continuous flow systems, etc.). Methods of culturing cells and tissues are well known in the art and are described (Freshney. Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Techniques, 1987).
В другом варианте клетки культивируются в культуральной среде в CO2-инкубаторе при содержании CO2 от 4 до 6%, кислорода от 2% до 22% при 37°С (CO2-инкубатор «Thermo Scientific серии WJ» с контролем содержания O2). При изменении содержания кислорода происходит изменение спектра синтезируемых белков (в частности HIF (гипоксия индуцированный фактор)), что вызывает повышение-активности препарата (Antonina Lavrentieva, Ingrida Majore, Cornelia Kasper, Ralf Hass // Effects of hypoxic culture conditions on umbilical cord-derived human mesenchymal stem cells// Cell Commun Signal., 2010; 8: 18).In another embodiment, cells are cultured in a culture medium in a CO 2 incubator with a CO 2 content of 4 to 6%, oxygen 2% to 22% at 37 ° C (Thermo Scientific WJ Series CO 2 incubator with O 2 content control ) When the oxygen content changes, the spectrum of the synthesized proteins changes (in particular, HIF (hypoxia-induced factor)), which causes an increase in the activity of the drug (Antonina Lavrentieva, Ingrida Majore, Cornelia Kasper, Ralf Hass // Effects of hypoxic culture conditions on umbilical cord-derived human mesenchymal stem cells // Cell Commun Signal., 2010; 8: 18).
Кроме того, культуральная среда может быть подвергнута 10-20-кратному концентрированию с использованием концентрирующего устройства, работающего при избыточном давлении и имеющего фильтр с отсечкой 100000 мол. масс. («Amicon», «Beverly»).In addition, the culture medium can be subjected to 10-20-fold concentration using a concentrating device operating at overpressure and having a filter with a cut-off of 100,000 mol. mass ("Amicon", "Beverly").
4) Получение средства4) Receiving funds
После культивирования клетки вместе с культуральной средой переносят в пробирки, в которых клетки подвергаются разрушению с использованием физических (ультразвук, замораживание-оттаивание, электрический импульс и др.), и/или химических (ферменты, химические реагенты и др.), и/или механических (растирание и др.) методов или их комбинации, приводящих к нарушению клеточных структур.After cultivation, the cells together with the culture medium are transferred to test tubes in which the cells are destroyed using physical (ultrasound, freeze-thaw, electric pulse, etc.), and / or chemical (enzymes, chemical reagents, etc.), and / or mechanical (grinding, etc.) methods or their combination, leading to disruption of cellular structures.
Полученный раствор пропускают через систему ультрафильтрации Pellicon 2 (фирмы «Millipor» с фильтрами «Biomax») для удаления белков выше 120 кДа.The resulting solution was passed through a Pellicon 2 ultrafiltration system (Millipor company with Biomax filters) to remove proteins above 120 kDa.
После ультрафильтрации полученный раствор замораживали до - 80С и помещали в лиофильную сушку «Thermo Scientific P16000» для лиофилизации.After ultrafiltration, the resulting solution was frozen to -80 ° C and placed in a Thermo Scientific P16000 freeze dryer for lyophilization.
Для индентификации белково-пептидного комплекса в заявленном средстве использовали методы ультрафиолетовой спектрофотометрии. Наличие пиков отмечается при длине волны 270-290 нм и 200-225 нм в УФ-области спектра. Молекулярную массу белков, входящих в композицию, определяют методом электофореза в полиакриламидном геле («SDS-Page»). В состав средства входят белки с молекулярной массой от 1 до 200 кДа, причем не менее 80% от общей массы белка имеет молекулярную массу от 5 до 120 кДа.For the identification of the protein-peptide complex in the claimed tool used methods of ultraviolet spectrophotometry. The presence of peaks is observed at a wavelength of 270-290 nm and 200-225 nm in the UV region of the spectrum. The molecular weight of the proteins in the composition is determined by polyacrylamide gel electrophoresis ("SDS-Page"). The composition of the product includes proteins with a molecular weight of 1 to 200 kDa, with at least 80% of the total protein mass having a molecular weight of 5 to 120 kDa.
Полученное средство подвергают стерилизующей фильтрации через мембранный фильтр с диаметром пор не более 0,22 мкм, разливают в стерильные стеклянные флаконы и закупоривают.The resulting product is subjected to sterilizing filtration through a membrane filter with a pore diameter of not more than 0.22 μm, poured into sterile glass bottles and sealed.
В одном варианте осуществления изобретения средство содержало белково-пептидный комплекс, полученный из лизата культивированных стволовых клеток и лейкоцитов периферической крови животных; кондиционированную среду, полученную при совместном культивировании стволовых клеток и лейкоцитов периферической крови животных, где указанный комплекс имеет молекулярную массу от 1 до 200 кДа, причем не менее 80% от общей массы белка имеет молекулярную массу от 5 до 120 кДа, характеризующийся наличием пиков при длине волны 270-290 нм и 200-225 нм в УФ-области спектра, при следующем соотношении компонентов, мас.%: лизат культивированных стволовых клеток и лейкоцитов периферической крови - 2,5; кондиционированная среда - 97,5.In one embodiment, the agent comprises a protein-peptide complex derived from a lysate of cultured stem cells and animal peripheral blood leukocytes; conditioned medium obtained by joint cultivation of stem cells and leukocytes of peripheral blood of animals, where this complex has a molecular weight of 1 to 200 kDa, with at least 80% of the total protein mass having a molecular weight of 5 to 120 kDa, characterized by the presence of peaks with a length waves 270-290 nm and 200-225 nm in the UV region of the spectrum, with the following ratio of components, wt.%: lysate of cultured stem cells and peripheral blood leukocytes - 2.5; air-conditioned environment - 97.5.
II. Способ стимуляции роста и повышения резистентности организма сельскохозяйственных животных проводили следующим образом: на базе двух животноводческих хозяйств Московской области - ОАО «Куйбышево» (телята, n=20) и АОЗТ «Кострово» (поросята, n=20). Стимулирующее влияние заявленного средства определяли на клинически здоровых телятах и поросятах. Подобранных по принципу аналогов животных распределяли на две группы - опытную и контрольную. Препарат вводят внутримышечно в дозе по 1 мг/кг веса животного на одну инъекцию. Курс лечения - 10 инъекций, по одной инъекции один раз в три дня, внутримышечно. Общая продолжительность курса - 30 дней. Животным контрольных групп препаратов не назначали.II. A method of stimulating growth and increasing the resistance of farm animals was carried out as follows: on the basis of two livestock farms in the Moscow Region - Kuybyshevo OJSC (calves, n = 20) and AOZT Kostrovo (piglets, n = 20). The stimulating effect of the claimed funds was determined on clinically healthy calves and pigs. Animals selected according to the principle of analogues were divided into two groups - experimental and control. The drug is administered intramuscularly at a dose of 1 mg / kg of animal weight per injection. The course of treatment is 10 injections, one injection every three days, intramuscularly. The total duration of the course is 30 days. Animals in the control groups of drugs were not prescribed.
Средство по изобретению может также вводиться с использованием любого подходящего пути введения: пероральный, парентеральный, подкожный, интраназальный.The agent of the invention may also be administered using any suitable route of administration: oral, parenteral, subcutaneous, intranasal.
Дополнительно с заявленным средством можно вводить антибиотик, противовоспалительный агент, противовирусеый агент, противогрибковый агент, гормон, анальгетик, анестезирующее средство или любую их комбинацию.Additionally, an antibiotic, anti-inflammatory agent, antiviral agent, antifungal agent, hormone, analgesic, anesthetic, or any combination thereof can be administered with the claimed agent.
Бактериологическое исследование носовой слизи проводили общепринятыми методами. Идентификацию выделенных культур проводили в соответствии с классификационной системой «Bergy's manual., 1984-1989». Биохимические свойства микроорганизмов изучали с использованием сред Гиса, СИБ (Н. Новгородский НИИ экспериментальной микробиологии) и множественной тест-системы «Enterotube II» («Becton Dickinson GmbH BD Diagnostics»). Гемолитическую активность качественно оценивали путем посева штрихом суточной агаровой культуры на МПА с содержанием 5%-ной стерильной крови барана. Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам изучали методом диффузии в агар.Bacteriological examination of nasal mucus was carried out by conventional methods. Identification of the selected cultures was carried out in accordance with the classification system "Bergy's manual., 1984-1989." The biochemical properties of microorganisms were studied using the His, SIB (N. Novgorod Research Institute of Experimental Microbiology) media and the Enterotube II multiple test system (Becton Dickinson GmbH BD Diagnostics). Hemolytic activity was qualitatively assessed by streaking the daily agar culture on MPA containing 5% sterile ram blood. The sensitivity of microorganisms to antibiotics was studied by agar diffusion.
Комплексное гематологическое исследование включало определение: концентрации гемоглобина, общего числа лейкоцитов, формулы крови, биохимический анализ крови (общий белок, альбумин, активность аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы, лактатдегидрогеназы, креатининкиназы, глюкозы, мочевины, калия, фосфора, кальция, железа, кетона). Данные исследования проводили по общепринятым методикам.A comprehensive hematological study included determination of: hemoglobin concentration, total leukocyte count, blood count, blood chemistry (total protein, albumin, activity of aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase, alkaline phosphatase, lactate dehydrogenase, creatinine kinase, glucose, urea, potassium, phosphorus, calcium, iron, calcium, iron ) These studies were carried out according to generally accepted methods.
Для определения влияния заявленной композиции на факторы общей неспецифической резистентности проводили оценку фагоцитарной звена, а также поглотительной и оксидазной активности нейтрофилов.To determine the effect of the claimed composition on factors of general nonspecific resistance, the phagocytic link, as well as the absorption and oxidase activity of neutrophils were evaluated.
Фагоцитарную активность нейтрофилов крови определяли по фагоцитозу убитой взвеси Staph.aureus, подсчитывая фагоцитарный индекс и фагоцитарное число. В окрашенных мазках подсчитывали число фагоцитирующих клеток на 100 нейтрофилов (фагоцитарный индекс, ФИ, %), количество микробных тел, поглощенных в среднем одним нейтрофилом (фагоцитарное число, ФЧ, микробных тел).The phagocytic activity of blood neutrophils was determined by the phagocytosis of the killed suspension of Staph.aureus, counting the phagocytic index and phagocytic number. In stained smears, the number of phagocytic cells per 100 neutrophils (phagocytic index, PI,%), the number of microbial bodies absorbed on average by one neutrophil (phagocytic number, PS, microbial bodies) were counted.
Оксидазную и бактерицидную функцию нейтрофилов оценивали в НСТ-тесте спектрофотометрически при длине волны 650 нм.The oxidase and bactericidal function of neutrophils was evaluated spectrophotometrically in the HCT test at a wavelength of 650 nm.
Статистическая обработка результатов проводилась методом вариационной статистики. При нормальном распределении количественных признаков подсчитывали средние значения (М), ошибки средней (ш) и среднеквадратические отклонения (5). В качестве статистических тестов при нормальном распределении количественных признаков с равными выборочными дисперсиями использовали t-критерий Стьюдента.Statistical processing of the results was carried out by the method of variation statistics. In the normal distribution of quantitative traits, mean values (M), mean errors (w), and standard deviations (5) were calculated. Student's t-test was used as statistical tests with a normal distribution of quantitative traits with equal sample variances.
Пример 1. Опыт применения белково-пептидного препарата на телятах 2-х месячного возраста в хозяйстве «Куйбышево» Московской областиExample 1. The experience of using a protein-peptide preparation in calves of 2 months of age in the farm "Kuibyshevo" Moscow region
Показатели привеса молодняка в опытной группе на 45 сутки с начала проведения эксперимента по сравнению с контролем составили 50% (600 г в сутки в опытной и 400 г в сутки в контрольной группе).The weight gain of young animals in the experimental group on the 45th day from the beginning of the experiment compared with the control was 50% (600 g per day in the experimental group and 400 g per day in the control group).
В опытной группе наблюдалось снижение заболеваемости (одно заболевшее животное в опытной группе и 5 в контрольной) и сроков лечения и заживления ран по сравнению с контролем (2 дня в опытной и 7-15 дней в контрольной соответственно). В отличие от контрольной группы, применение антибиотиков у животных, получавших биоактивный препарат, не потребовалось, что определило разницу в количестве расходов на лечение (100 руб. - опытная группа и 1000 руб. - контрольная) (табл.1).In the experimental group, there was a decrease in the incidence (one sick animal in the experimental group and 5 in the control) and the duration of treatment and wound healing compared with the control (2 days in the experimental and 7-15 days in the control, respectively). Unlike the control group, the use of antibiotics in animals treated with the bioactive drug was not required, which determined the difference in the amount of treatment costs (100 rubles - experimental group and 1000 rubles - control) (Table 1).
При проведении бактериологического исследования в опытной группе наблюдалось резкое снижение содержания гемолитических микроорганизмов (показатели гемолитической активности до применения препарата выявлены у 15% штаммов, после - не наблюдалось), синегнойной палочки (Pseudomonas aeruginosa), золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus), грамотрицательной условно-патогенной палочки Kluyvera ascorbata и грибов рода Aspergillus. Так, в опытной группе до введения препарата наблюдалось 7 штаммов с гемолитической активностью, тогда как после их отмечено не было; 1 штамм Staphylococcus aureus - до введения препарата, 0 - после; 6 штаммов гемолитически активной Kluyvera ascorbata - до введения препарата, 1 - после; Pseudomonas aeruginosa - 1 штамм до введения препарата, после - не наблюдалось. В контрольной группе соответственно до введения препарата 2 штамма с гемолитической активностью, 3 штамма - Kluyvera ascorbata, Staphylococcus aureus - 0; после введения препарата - 3 штамма с гемолитической активностью, Kluyvera ascorbata - 1 штамм, Staphylococcus aureus - 1 (табл.2).When conducting a bacteriological study in the experimental group, a sharp decrease in the content of hemolytic microorganisms was observed (indicators of hemolytic activity were detected in 15% of strains before use of the drug, after it was not observed), Pseudomonas aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa), Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus), and gram-negative opportunistic sticks of Kluyvera ascorbata and fungi of the genus Aspergillus. So, in the experimental group, before the drug was administered, 7 strains with hemolytic activity were observed, whereas after they were not observed; 1 strain of Staphylococcus aureus - before drug administration, 0 - after; 6 strains of hemolytically active Kluyvera ascorbata - before drug administration, 1 - after; Pseudomonas aeruginosa - 1 strain before drug administration, after - not observed. Before the administration of the drug, in the control group, 2 strains with hemolytic activity, 3 strains — Kluyvera ascorbata, Staphylococcus aureus — 0; after drug administration, 3 strains with hemolytic activity, Kluyvera ascorbata - 1 strain, Staphylococcus aureus - 1 (Table 2).
При определении спектра чувствительности бактерий к антибиотикам установлено, что штаммы были чувствительными к антибиотикам группы фторхинолонов (пефлоксацин, офлоксацин, ломефлоксацин, ципрофлоксацин); группы аминогликозидов (тобрамицин, гентамицин, амикацин); группы цефалоспоринов (цефатоксим, цефтриаксон); карбопенемам (меропенем). Устойчивость наблюдалась к (3-лактамным антибиотикам группы пенициллинов (бензилпенициллин, ампициллин, оксациллин); тетрациклинов (тетрациклин, окситетрациклин); группы макролидов (эритромицин, олеандомицин).When determining the sensitivity spectrum of bacteria to antibiotics, it was found that the strains were sensitive to antibiotics of the fluoroquinolone group (pefloxacin, ofloxacin, lomefloxacin, ciprofloxacin); aminoglycoside groups (tobramycin, gentamicin, amikacin); groups of cephalosporins (cefatoxime, ceftriaxone); carbopenem (meropenem). Resistance was observed to (3-lactam antibiotics of the penicillin group (benzylpenicillin, ampicillin, oxacillin); tetracycline (tetracycline, oxytetracycline); macrolide group (erythromycin, oleandomycin).
При морфологическом исследовании крови у животных опытной группы после применения препарата отмечена нормализация изначально повышенных показателей воспалительного процесса - содержание лейкоцитов и моноцитов в периферической крови (содержание лейкоцитов до применения препарата - 14,75±4,46; после применения - 9,44±1,27). На последнее также указывает снижение в крови животных опытной группы содержания незрелых палочкоядерных форм нейтрофилов (сдвиг формулы вправо) по сравнению с уровнем этого показателя до применения препарата (до применения - 4,5±1,0; после - 1,9±0,94). В контрольной группе высокие уровни содержания этих клеток в крови характеризуют непрекращающийся воспалительный процесс (табл.3).Morphological blood tests in animals of the experimental group after the use of the drug showed normalization of initially elevated inflammatory parameters - the content of leukocytes and monocytes in the peripheral blood (leukocyte count before use of the drug - 14.75 ± 4.46; after use - 9.44 ± 1 27). The latter is also indicated by a decrease in the blood of animals of the experimental group of the content of immature stab forms of neutrophils (shift of the formula to the right) compared to the level of this indicator before use of the drug (before use - 4.5 ± 1.0; after - 1.9 ± 0.94 ) In the control group, high levels of these cells in the blood characterize the ongoing inflammatory process (Table 3).
В биохимическом анализе крови в опытной группе наблюдалось снижение показателей щелочной фосфатазы (ЩФ) в 2,5 раза, лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в 1,43 раза, креатининкиназы (КК) в 1,3 раза. В контрольной группе показатели лактатдегидрогеназы и креатининкиназы снизились в 1,03 и 1,2 раза соответственно, а показатели щелочной фосфатазы увеличились в 1,7 раз (табл.4).In the biochemical analysis of blood in the experimental group, there was a decrease in alkaline phosphatase (ALP) by 2.5 times, lactate dehydrogenase (LDH) by 1.43 times, creatinine kinase (CC) by 1.3 times. In the control group, lactate dehydrogenase and creatinine kinase indices decreased 1.03 and 1.2 times, respectively, and alkaline phosphatase indices increased 1.7 times (Table 4).
Снижение белка, наблюдаемое как в контрольной (в 1,3 раза), так и в опытной группах (в 1,2 раза), связано с нарушением кормовой базы. Хотя в последнее время некоторые хозяйства приобретают широко рекламируемые различные белково-витаминно-минеральные добавки (БВМД), но основной недостаток этих добавок в том, что они разработаны и выпускаются для всех регионов страны без учета кормов местного производства, их использование в отдельных случаях, еще более усугубляет избыток или дефицит элементов питания.The decrease in protein observed both in the control (1.3 times) and in the experimental groups (1.2 times) is associated with a violation of the food supply. Although recently some farms have been purchasing widely advertised various protein-vitamin-mineral supplements (BVMD), but the main drawback of these additives is that they are developed and produced for all regions of the country without taking into account local feed, their use in some cases is still more aggravates excess or deficiency of nutrients.
При исследовании иммунологических показателей в опытной группе по сравнению с контрольной наблюдаются положительные изменения в фагоцитарном звене, ответственном за общую неспецифическую резистентность.In the study of immunological parameters in the experimental group compared with the control, there are positive changes in the phagocytic link, responsible for the general non-specific resistance.
В частности, показатели фагоцитарного индекса в опытной группе увеличились на 7,7%, тогда как в контрольной на 3,1%. Фагоцитарное число в опытной группе увеличилось в 1,63 раза, тогда как в опытной группе наблюдалось снижение этого показателя. Оксидазная функция нейтрофилов в НСТ-тесте характеризовалась снижением индекса стимуляции как в опытной группе, так и в контрольной (табл.5).In particular, the phagocytic index in the experimental group increased by 7.7%, while in the control group by 3.1%. The phagocytic number in the experimental group increased 1.63 times, while in the experimental group there was a decrease in this indicator. The oxidase function of neutrophils in the NBT test was characterized by a decrease in the stimulation index both in the experimental group and in the control group (Table 5).
Пример 2. Опыт применения белково-пептидного препарата на поросятах 1,5-х месячного возраста в хозяйстве «Кострово» московской областиExample 2. The experience of using a protein-peptide preparation on piglets of 1.5 months of age in the farm "Kostrovo" in the Moscow region
Показатели привеса молодняка в опытной группе на 45 сутки с начала проведения эксперимента по сравнению с контролем превысили 30% (400 г в сутки в опытной группе и 300 г в сутки в контрольной).The gain of young animals in the experimental group on the 45th day from the start of the experiment compared to the control exceeded 30% (400 g per day in the experimental group and 300 g per day in the control).
В опытной группе наблюдалось снижение заболеваемости по сравнению с контролем (1 заболевшее животное - заболевание ЖКТ, в опытной группе и 3 заболевших животных в контрольной группе) (табл.6).In the experimental group, there was a decrease in the incidence compared with the control (1 diseased animal - gastrointestinal disease in the experimental group and 3 diseased animals in the control group) (Table 6).
При морфологическом исследовании крови у поросят, так же как и у молодняка КРС, отмечается нормализация повышенных показателей содержания лейкоцитов в периферической крови (в два раза) у животных опытной группы. В контрольной группе лейкоцитоз обнаруживается не у всех животных, однако динамика среднего показателя (увеличение до верхней границы нормы и существенное превышение нормальных показателей у отдельных животных) указывает на развитие воспаления. Содержание лейкоцитов в опытной группе составило 14,78±4,46×109л до применения препарата и 7,88±1,22×109л, в контрольной - 9,29±2,23×109л и 10,44±3,31×109л соответственно. Показатели гемоглобина характеризовались повышением (в опытной группе с 112,8±5,7 до 117,2±3,5 г/л, в контрольной с 110,6±5,1 до 112,2±4,6112,2±4,6 г/л) (табл.7).A morphological study of blood in piglets, as well as in young cattle, normalizes the elevated levels of leukocytes in peripheral blood (twice) in animals of the experimental group. In the control group, leukocytosis is not found in all animals, however, the dynamics of the average indicator (an increase to the upper limit of the norm and a significant excess of normal values in individual animals) indicates the development of inflammation. The leukocyte count in the experimental group was 14.78 ± 4.46 × 10 9 L before use of the drug and 7.88 ± 1.22 × 10 9 L, in the control group - 9.29 ± 2.23 × 10 9 L and 10, 44 ± 3.31 × 10 9 L, respectively. Hemoglobin indices were characterized by an increase (in the experimental group from 112.8 ± 5.7 to 117.2 ± 3.5 g / l, in the control group from 110.6 ± 5.1 to 112.2 ± 4.6112.2 ± 4 6 g / l) (Table 7).
В условиях промышленного свиноводства у животных, как правило, регистрируют низкий иммунный статус и, соответственно, восприимчивость к заболеваниям, в том числе бактериальной природы. Одной из актуальных проблем промышленного свиноводства является разработка средств, методов и технологий, обеспечивающих высокую резистентность свиней и, соответственно, устойчивость к болезням, в том числе инфекционной природы. Одним из ведущих механизмов элиминации внеклеточных патогенов является активность фагоцитирующих клеток, активность которых снижают токсины бактерий. В результате проведенных исследований иммунологических показателей установлено, что у поросят в опытной группе по сравнению с контрольной также наблюдаются положительные изменения в фагоцитарном звене. В частности, показатели фагоцитарного индекса в опытной группе увеличились на 6,8%, тогда как в контрольной на 2,8%. Показатели фагоцитарного числа в опытной группе увеличились в 1,5 раз, тогда как в опытной группе наблюдалось снижение. Оксидазная функция нейтрофилов в НСТ-тесте характеризовалась снижением индекса стимуляции в опытной группе, и повышением в контрольной (табл.8).In conditions of industrial pig breeding in animals, as a rule, low immune status and, accordingly, susceptibility to diseases, including bacterial nature, are recorded. One of the urgent problems of industrial pig farming is the development of tools, methods and technologies that provide high resistance to pigs and, accordingly, resistance to diseases, including infectious nature. One of the leading mechanisms for the elimination of extracellular pathogens is the activity of phagocytic cells, the activity of which is reduced by bacterial toxins. As a result of studies of immunological parameters, it was found that piglets in the experimental group compared with the control also observed positive changes in the phagocytic link. In particular, the phagocytic index in the experimental group increased by 6.8%, while in the control by 2.8%. The phagocytic number in the experimental group increased 1.5 times, while in the experimental group there was a decrease. The oxidase function of neutrophils in the NBT test was characterized by a decrease in the stimulation index in the experimental group and an increase in the control (Table 8).
Таким образом, проведенные исследования подтверждают положительное действие заявленного средства на организм телят и поросят. При этом препарат показал положительное влияние на прирост поросят и телят, животные из опытных групп по приросту живой массы превосходили контрольных. Гематологические показатели крови у получавших препарат телят и поросят (в 60- и 45-суточном возрасте соответственно), представленные в описании, демонстрируют тенденцию улучшения этих показателей. Полученные данные свидетельствуют о хорошей биодоступности заявленного средства. Применение этого препарата приводит к снижению заболеваемости и падежа животных. Также целесообразно применение заявленного средства как дополнительного препарата в сочетании с антибактериальной и прочей терапией в целях уменьшения сроков течения болезни и расходов на лечение животных. Введение препарата позволило обеспечить и несколько большую сохранность животных, что можно объяснить улучшением общего физиологического и клинического состояния животных.Thus, the studies confirm the positive effect of the claimed funds on the body of calves and piglets. At the same time, the preparation showed a positive effect on the growth of piglets and calves; animals from the experimental groups exceeded the control ones in terms of increase in live weight. Hematological blood counts for calves and piglets treated at the age of 60 and 45 days, respectively, presented in the description show a tendency for these parameters to improve. The data obtained indicate good bioavailability of the claimed funds. The use of this drug leads to a decrease in the incidence and mortality of animals. It is also advisable to use the claimed funds as an additional drug in combination with antibacterial and other therapy in order to reduce the duration of the disease and the cost of treating animals. The introduction of the drug made it possible to ensure somewhat greater safety of animals, which can be explained by an improvement in the general physiological and clinical condition of animals.
Таким образом, на основании клинических, гематологических, биохимических, бактериологических и иммунологических исследований установлено, что применение заявленного средства способствует повышению параметров неспецифической резистентности иммунитета организма животных и обладает профилактической эффективностью.Thus, on the basis of clinical, hematological, biochemical, bacteriological and immunological studies, it has been established that the use of the claimed agent helps to increase the parameters of non-specific resistance of the animal body immunity and has prophylactic effectiveness.
Claims (5)
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012142131/15A RU2495565C1 (en) | 2012-10-03 | 2012-10-03 | Method to stimulate growth and to improve resistance of farm animals |
| PCT/RU2013/000870 WO2014054981A2 (en) | 2012-10-03 | 2013-10-02 | Method for stimulating the growth and enhancing the resistance of livestock |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012142131/15A RU2495565C1 (en) | 2012-10-03 | 2012-10-03 | Method to stimulate growth and to improve resistance of farm animals |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2495565C1 true RU2495565C1 (en) | 2013-10-20 |
Family
ID=49357033
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012142131/15A RU2495565C1 (en) | 2012-10-03 | 2012-10-03 | Method to stimulate growth and to improve resistance of farm animals |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2495565C1 (en) |
| WO (1) | WO2014054981A2 (en) |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2557527C1 (en) * | 2014-07-10 | 2015-07-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечернозёмной зоны Российской Федерации" (ФГБНУ "НИВИ НЗ России") | Method of correction of immunobiochemical status in cows in prenatal and postpartum periods |
| RU2569669C1 (en) * | 2014-07-17 | 2015-11-27 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны Российской Федерации" | Method of prevention of gastrointestinal diseases in newborn calves |
| RU2646793C1 (en) * | 2016-12-13 | 2018-03-07 | Акаев Ислам Умарович | Dog remedy regenerative activity |
| RU2646792C1 (en) * | 2016-12-13 | 2018-03-07 | Акаев Ислам Умарович | Horse remedy with regenerative activity |
| RU2646791C1 (en) * | 2016-12-13 | 2018-03-07 | Акаев Ислам Умарович | Remedy for cats with regenerative activity |
| RU2651835C1 (en) * | 2017-03-09 | 2018-04-24 | Гурьянова Светлана Владимировна | Method for increasing productivity and resistance to bacterial and viral infections in agricultural animals, birds, fish, receiving a biologically active additive to food |
| RU2662172C2 (en) * | 2016-12-13 | 2018-07-24 | Акаев Ислам Умарович | Method for producing regenerative veterinary preparation based on extract of mesenchimal stem cells and conditioned medium |
| RU2676130C1 (en) * | 2017-12-14 | 2018-12-26 | Никита Владимирович Малков | Means for prevention and elimination of energy deficiency in farm animals and poultry |
| RU2720812C1 (en) * | 2018-11-28 | 2020-05-13 | Общество с ограниченной ответственностью "НОВИСТЕМ" | Method of producing agent possessing anti-inflammatory, regenerative, immunomodulating, detoxification, adaptogenic activity and capable of regulating metabolism |
| RU2720800C1 (en) * | 2018-11-28 | 2020-05-13 | Общество с ограниченной ответственностью "НОВИСТЕМ" | Agent for cattle, having anti-inflammatory, regenerative, immunomodulating, detoxification, adaptogenic activity and able to regulate metabolism |
| RU2851692C1 (en) * | 2024-10-11 | 2025-11-27 | Общество с ограниченной ответственностью "НИТА-ФАРМ" | Method and preparation for increasing productivity and resistance to bacterial and viral infections of farm animals |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2657538C1 (en) * | 2016-12-15 | 2018-06-14 | федеральное казенное образовательное учреждение высшего образования Пермский институт Федеральной службы исполнения наказаний (ФКОУ ВО Пермский институт ФСИН России) | Method of use of resveratrol and ubiquinone as stimulating agent of olfaction in dogs |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2041717C1 (en) * | 1992-07-21 | 1995-08-20 | Александр Николаевич Николаенко | Biologically active remedy, method for its producing, preparation containing the mentioned remedy and its application method |
| US8058253B2 (en) * | 2006-07-06 | 2011-11-15 | Vgx Pharmaceuticals, Inc. | Growth hormone releasing hormone treatment to decrease cholesterol levels |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5961979A (en) * | 1994-03-16 | 1999-10-05 | Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Stress protein-peptide complexes as prophylactic and therapeutic vaccines against intracellular pathogens |
| EA201001104A1 (en) * | 2010-07-29 | 2011-04-29 | Елена Михайловна Хороших | PREPARATION AND METHOD FOR PREVENTION AND CORRECTION OF PATHOLOGICAL CONDITIONS OF ANIMALS ON ITS BASIS |
-
2012
- 2012-10-03 RU RU2012142131/15A patent/RU2495565C1/en not_active IP Right Cessation
-
2013
- 2013-10-02 WO PCT/RU2013/000870 patent/WO2014054981A2/en not_active Ceased
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2041717C1 (en) * | 1992-07-21 | 1995-08-20 | Александр Николаевич Николаенко | Biologically active remedy, method for its producing, preparation containing the mentioned remedy and its application method |
| US8058253B2 (en) * | 2006-07-06 | 2011-11-15 | Vgx Pharmaceuticals, Inc. | Growth hormone releasing hormone treatment to decrease cholesterol levels |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| PATTERSON JA et al. Application of prebiotics and probiotics in poultry production// Poult Sci. 2003 Apr; 82(4):627-31. * |
| Физиология сельскохозяйственных животных// Под ред.ГОЛИКОВА А.Н. - М.: Агропромиздат, 1991, с.159,193. * |
| Физиология сельскохозяйственных животных// Под ред.ГОЛИКОВА А.Н. - М.: Агропромиздат, 1991, с.159,193. PATTERSON JA et al. Application of prebiotics and probiotics in poultry production// Poult Sci. 2003 Apr; 82(4):627-31. * |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2557527C1 (en) * | 2014-07-10 | 2015-07-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечернозёмной зоны Российской Федерации" (ФГБНУ "НИВИ НЗ России") | Method of correction of immunobiochemical status in cows in prenatal and postpartum periods |
| RU2569669C1 (en) * | 2014-07-17 | 2015-11-27 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны Российской Федерации" | Method of prevention of gastrointestinal diseases in newborn calves |
| RU2646793C1 (en) * | 2016-12-13 | 2018-03-07 | Акаев Ислам Умарович | Dog remedy regenerative activity |
| RU2646792C1 (en) * | 2016-12-13 | 2018-03-07 | Акаев Ислам Умарович | Horse remedy with regenerative activity |
| RU2646791C1 (en) * | 2016-12-13 | 2018-03-07 | Акаев Ислам Умарович | Remedy for cats with regenerative activity |
| RU2662172C2 (en) * | 2016-12-13 | 2018-07-24 | Акаев Ислам Умарович | Method for producing regenerative veterinary preparation based on extract of mesenchimal stem cells and conditioned medium |
| RU2651835C1 (en) * | 2017-03-09 | 2018-04-24 | Гурьянова Светлана Владимировна | Method for increasing productivity and resistance to bacterial and viral infections in agricultural animals, birds, fish, receiving a biologically active additive to food |
| RU2676130C1 (en) * | 2017-12-14 | 2018-12-26 | Никита Владимирович Малков | Means for prevention and elimination of energy deficiency in farm animals and poultry |
| RU2720812C1 (en) * | 2018-11-28 | 2020-05-13 | Общество с ограниченной ответственностью "НОВИСТЕМ" | Method of producing agent possessing anti-inflammatory, regenerative, immunomodulating, detoxification, adaptogenic activity and capable of regulating metabolism |
| RU2720800C1 (en) * | 2018-11-28 | 2020-05-13 | Общество с ограниченной ответственностью "НОВИСТЕМ" | Agent for cattle, having anti-inflammatory, regenerative, immunomodulating, detoxification, adaptogenic activity and able to regulate metabolism |
| RU2851692C1 (en) * | 2024-10-11 | 2025-11-27 | Общество с ограниченной ответственностью "НИТА-ФАРМ" | Method and preparation for increasing productivity and resistance to bacterial and viral infections of farm animals |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2014054981A3 (en) | 2014-07-10 |
| WO2014054981A2 (en) | 2014-04-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2495565C1 (en) | Method to stimulate growth and to improve resistance of farm animals | |
| Duque-Madrid et al. | Intramammary treatment using allogeneic pure platelet-rich plasma in cows with subclinical mastitis caused by Gram-positive bacteria | |
| Muuka et al. | Evaluation of new generation macrolides for the treatment and metaphylaxis of contagious bovine pleuropneumonia (CBPP) in cattle experimentally infected with Mycoplasma mycoides subspecies mycoides | |
| Mukhamadieva et al. | Prevalence, diagnosis and improving the effectiveness of therapy of mastitis in cows of dairy farms in East Kazakhstan | |
| Giedrys-Kalemba et al. | Autovaccines in individual therapy of staphylococcal infections | |
| Elbayoumy et al. | Advances in controlling bacterial mastitis in dairy cows | |
| Moroni et al. | Effect of intramammary infection in Bergamasca meat sheep on milk parameters and lamb growth | |
| CN103893760B (en) | Anti- garget drug-fast bacteria IgY and compound bacteriophage composition and preparation method thereof and preparation | |
| Jaguezeski et al. | Daily intake of a homeopathic agent by dogs modulates white cell defenses and reduces bacterial counts in feces | |
| RU2396080C1 (en) | Method for making complex preparation for resistance improvement, prevention and treatment of inflammatory processes in animals | |
| RU2166322C2 (en) | Biopreparation for bee productivity enhancement | |
| Han et al. | Somatic cell count in milk of bee venom treated dairy cows with mastitis | |
| Gard et al. | Preliminary evaluation of hypochlorous acid spray for treatment of experimentally induced infectious bovine keratoconjunctivitis | |
| RU2236147C2 (en) | Method for feeding in farm animals | |
| MX2008007491A (en) | Bovine osteopontin formulations for the improvement of the wound healing process. | |
| El-Azzouny et al. | Antibacterial Activities of Selenium Nanoparticles Against Multidrug Resistant Staphylococcus aureus and Escherichia coli Isolated from Mastitic Milk | |
| Qaisar et al. | Antimicrobial efficacy of combination of lincomycin and spiramycin (Lispiracin™) as systemic dry cow therapy for controlling bovine mastitis | |
| Skogoreva et al. | Improving treatment of subclinical cow mastitis using miramistin antiseptic agent | |
| RU2396083C1 (en) | Method for making complex preparation for prevention and treatment of diseases in animals | |
| De et al. | Dynamics of milk leukocytes in response to intramammary infusion of amoxicillin plus sulbactam during bovine subclinical mastitis. | |
| Alekseev et al. | Application of a plant-tissue composition in combination with the use of an aerosol of an electrochemical activated solution of neutral anolyte in the association of respiratory tract infections and wound infections of the distal extremities of cattle | |
| RU2377016C1 (en) | Method for making staphylo-streptococcal anatoxin-vaccine | |
| RU2569669C1 (en) | Method of prevention of gastrointestinal diseases in newborn calves | |
| Kashif et al. | Comparative efficacy of enrofloxacin and oxytetracycline as systemic dry period therapy for the control of bubaline mastitis | |
| Manzhurina et al. | The study of the Profort probiotic use in the specific prevention of salmonellosis in calves |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20161004 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20171211 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191004 |