RU2494760C1 - Способ получения гипериммунной сыворотки против цирковирусной инфекции, репродуктивно-респираторного синдрома и гемофилеза свиней - Google Patents
Способ получения гипериммунной сыворотки против цирковирусной инфекции, репродуктивно-респираторного синдрома и гемофилеза свиней Download PDFInfo
- Publication number
- RU2494760C1 RU2494760C1 RU2012117465/15A RU2012117465A RU2494760C1 RU 2494760 C1 RU2494760 C1 RU 2494760C1 RU 2012117465/15 A RU2012117465/15 A RU 2012117465/15A RU 2012117465 A RU2012117465 A RU 2012117465A RU 2494760 C1 RU2494760 C1 RU 2494760C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- reproductive
- serum
- respiratory syndrome
- pigs
- hemophilosis
- Prior art date
Links
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 53
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 title claims abstract description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 title claims description 14
- 241000202347 Porcine circovirus Species 0.000 title abstract 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims abstract description 25
- 208000005753 Circoviridae Infections Diseases 0.000 claims abstract description 19
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 claims description 13
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 claims description 13
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 6
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 claims description 5
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 claims description 3
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 claims description 3
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 claims description 3
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 18
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 abstract description 4
- 208000005342 Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 abstract 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 15
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 13
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 241001533384 Circovirus Species 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 206010034107 Pasteurella infections Diseases 0.000 description 4
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 4
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 4
- 201000005115 pasteurellosis Diseases 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 241000571391 Gull circovirus Species 0.000 description 3
- 241001673669 Porcine circovirus 2 Species 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- OQUFOZNPBIIJTN-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;sodium Chemical compound [Na].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O OQUFOZNPBIIJTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100508406 Caenorhabditis elegans ifa-1 gene Proteins 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 2
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 2
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 2
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 2
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 2
- 206010039438 Salmonella Infections Diseases 0.000 description 2
- 230000000181 anti-adherent effect Effects 0.000 description 2
- 230000001147 anti-toxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 2
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 206010039447 salmonellosis Diseases 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 241000283725 Bos Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 201000000297 Erysipelas Diseases 0.000 description 1
- 241000233756 Fabriciana elisa Species 0.000 description 1
- 208000005577 Gastroenteritis Diseases 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010036141 Polyserositis Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 206010062106 Respiratory tract infection viral Diseases 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 108010074506 Transfer Factor Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 208000010399 Wasting Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 238000011138 biotechnological process Methods 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 208000016253 exhaustion Diseases 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 231100000001 growth retardation Toxicity 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229940031348 multivalent vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000011328 necessary treatment Methods 0.000 description 1
- 230000000474 nursing effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011012 sanitization Methods 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000009589 serological test Methods 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 239000000273 veterinary drug Substances 0.000 description 1
- 244000052613 viral pathogen Species 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к ветеринарии, а именно к ветеринарной эпизоотологии и иммунологии. Способ заключается в следующем. Свиней-продуцентов гипериммунизируют внутримышечно в разные точки моновалентными инактивированными вакцинами цирковирусной инфекции (ЦВИС), репродуктивно-респираторного синдрома (РРСС) и гемофилеза свиней в возрастающих дозах с интервалом 7 дней, параллельно вводят препарат гамавит для дополнительной стимуляции иммуногенеза. Технический результат изобретения заключается в повышении профилактического эффекта и сокращении сроков лечения ассоциированных вирусно-бактериальных заболеваний у поросят-отъемышей за счет содержания в сыворотке высоких титров защитных антител к цирковирусной инфекции не менее 1:25600 и к репродуктивно-респираторному синдрому не менее 1:12800 (в ИФА), к гемофилезу не менее 1:512 (в РА). 3 табл., 4 пр.
Description
Изобретение относится к ветеринарии, а именно к ветеринарной эпизоотологии и иммунологии, и касается средств для специфической пассивной профилактики и лечения ассоциированных болезней вирусно-бактериальных этиологии.
В структуре инфекционных респираторных болезней поросят - отъемышей цирковирусная инфекция занимает высокий удельный вес.Получены положительные результаты при серологическом исследовании в ИФА среди разных половозрастных групп: доращивание - 50%, ремонтный молодняк - 81,0%, свиноматки - 62,7%, хряки - 30%, что в среднем составляет - 55,9% (Шкаева М.А., Верховский О.А. с сотр., 2005). Заболевание характеризуется тем, что на фоне развития иммунодефицитного состояния наслаиваются сопутствующие инфекции вирусной и бактериальной этиологии, в частности вирус репродуктивно-респираторного синдрома, возбудитель гемофилеза и др. (Шахов А.Г. и др., 2003, 2008, 2009; Федоров Ю.Н., 2006).
Ассоциированные формы цирковирусной инфекции наносят свиноводческим комплексам значительный экономический ущерб, складывающийся из высокой смертности заболевших, снижения привесов, больших затрат на лечение больных и проведение общих ветеринарно-санитарных и специфических профилактических мероприятий.
Особенностью инфекционного процесса является размножение цирковируса в активно делящихся клетках, в частности в макрофагах. Экспериментальная или естественная иммуноактивация может привести к повышенному содержанию макрофагов и, следовательно, увеличивает репликацию цирковируса (Krakowka S.A. et al., 2001; Segales J., 2002; Allan J.M. et al., 2000).
В естественных условиях клинические признаки цирковирусной инфекции свиней отмечаются у 5-12 недельных поросят в виде синдрома послеотъемного мультисистемного истощения с дальнейшим развитием респираторной патологии в результате наслоения сопутствующих вирусных и бактериальных возбудителей. В разных хозяйствах заболеваемость молодняка обычно составляет 5…20% (иногда 50…70%), летальность достигает 80…100%. Частота заболевания и тяжесть его течения находятся в прямой зависимости от концентрации поголовья животных в хозяйстве.
На современном этапе развития ветеринарной науки в области промышленного свиноводства эффективных средств и специфической профилактики и лечения свиней при ассоциированной форме течения цирковирусной инфекции не существует. Профилактические мероприятия сводятся к тщательной дезинфекции помещений, недопущению заноса инфицированных животных из неблагополучных хозяйств и другим карантинным действиям. Внедрение такой стратегии снижения заболеваемости поросят и санитарно-гигиенических мероприятий как ранний отъем поросят от свиноматок, откорм в группах, подобранных по возрасту, оказались малоуспешными в профилактике вирусных заболеваний послеотъемного периода поросят (Орлянкин Б.Г., Алипер Т., Непоклонов Е.А., 2002, 2003, 2007, 2009; Дрю Т., 2005).
С синдромом мультисистемного послеотъемного истощения поросят связывают несколько респираторных патогенов как вирусной, так и бактериальной природы. Наиболее часто в этой связи находят цирковирус второго типа, вирус репродуктивного и респираторного синдромов, возбудитель гемофилеза.
В настоящее время для специфической профилактики цирковирусной инфекции свиней в нашей стране применяется инактивированная тканевая вакцина и проходит широкое производственное испытание вакцина «Веррес - Цирко» производства ООО «Ветбиохим» г.Москва. Однако не разработаны поливалентные вакцины и гипериммунные сыворотки против ЦВИС и вторичных инфекций (Гречухин А.Н., 2008).
Предложен биопрепарат, содержащий поливалентную гипериммунную сыворотку свиней с антителами к возбудителям сальмонеллеза, колибактериоза, пастереллеза, рожи и трансмиссивного гастроэнтерита, а также трансфер-фактор, полученный из лейкоцитарной массы крови гипериммунизированных свиней после отделения сыворотки (Щербаков П.Н., Юров К.П., Караваев Ю.Д., Щербакова Т.Б., 2002).
Его недостатком является отсутствие специфических антител к наиболее часто встречающимся возбудителям респираторных инфекций и требует дополнительного введения соответствующих сывороток.
Известна гипериммунная антиадгезивная и антитоксическая сыворотка против эшерихиоза сельскохозяйственных животных, содержащая комплекс антител против соматических 09, 078, 0141, белковых адгезивных К88, К99, 987Р, 741 и полисахоридных капсульных К30, К80, К87 антигенов (Малахов Ю.А., Тугаринов О.А., Пирожков М.К., Солодков B.C., 1993).
Недостатком известного препарата является то, что он не обладает иммуноспецифической активностью при ассоциированных формах течения инфекционного процесса.
Наиболее близким аналогом (прототипом) является гипериммунная сыворотка против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней получаемая от продуцентов волов (Школьников Е.Э., Коломнина Г.Ф., Скородумов Д.И. 2004; Гринь С.А., 2008). Известную гипериммунную сыворотку получают 7…10 кратными внутримышечными инъекциями антигенов волов-продуцентов с интервалом 2…3 дня. Предложенный способ получения гипериммунной сыворотки является трудоемким и высокозатратным, так как основан на предварительном получении необходимого количества антигенов путем высева на питательные среды с последующим этапом их инактивации. Не предусмотрено использование иммуностимулирующего препарата для повышения уровня вырабатываемых антител после инъекции антигенов животным-продуцентам.
Эффективность известной сыворотки недостаточна, т.к. она содержит только антитела нейтрализующие возбудителей бактериальной природы, но не действует на возбудителей вирусных респираторных инфекций свиней. У поросят в группе доращивания, как правило, основным пусковым механизмом в развитии респираторной болезни являются агенты вирусной природы или сочетание нескольких вирусов таких как цирковирус и возбудитель репродуктивно-респираторного синдрома, которые сильно подавляют иммунную систему и на этом фоне размножаются вторичные бактериальные инфекции. Увеличение количества антигенов и числа инъекций нецелесообразно, так как оказывает дополнительную нагрузку на иммунную систему продуцентов и не выгодна с экономической точки зрения.
Цель работы - разработать оптимальную технологию получения поливалентной сыворотки против цирковирусной инфекции, репродуктивно-респираторного синдрома и гемофилеза свиней, обеспечивающую эффективный пассивный иммунитет в предельно короткие сроки и сокращение лечения при возникновении болезни.
Задача изобретения - получить иммуноспецифическую поливалентную сыворотку для профилактики и лечения ассоциированных вирусно-бактериальных инфекций свиней.
Технический результат заявляемого изобретения заключается в повышении профилактического эффекта и сокращении сроков лечения ассоциированных вирусно-бактериальных заболеваний у поросят -отъемышей за счет содержания в сыворотке высоких титров защитных антител к цирковирусной инфекции не менее 1:25600 и к репродуктивно-респираторному синдрому не менее 1:12800 (в ИФА), к гемофилезу не менее 1:512 (в РА).
Сущность изобретения. Поливалентная гипериммунная сыворотка для профилактики и лечения ассоциированных респираторных болезней поросят содержит антитела к возбудителям цирковирусной инфекции в титре не менее 1:25600 (в ИФА), репродуктивно-респираторному синдрому в титре не менее 1:12800 (в ИФА), к возбудителю гемофилеза в титре не менее 1:512 (в РА).
Препарат представляет собой прозрачную, слегка опалесцирующую, соломенно-желтого цвета с красноватым оттенком жидкость. Выпускают расфасованным в стеклянные флаконы емкостью 100 см3. Хранят препарат в сухом, темном месте при +4…+10°C. Срок годности - 12 месяцев со дня изготовления.
Сыворотку вводят подкожно поросятам с профилактической целью в дозах по 7…10 см3 на голову двукратно с интервалом 10 дней. С лечебной целью препарат вводят в двойной дозе по 15…20 мл см3 на голову в сочетании с антибиотиками.
В рекомендуемых дозах препарат не вызывает осложнений и не оказывает побочного действия.
Способ изготовления поливалентной гипериммунной сыворотки осуществляется следующим образом.
Пример 1. Сыворотку получают путем 6 кратной гипериммунизации свиней моновалентными инактивированными вакцинами против цирковирусной инфекции, репродуктивно-респираторного синдрома и гемофилеза внутримышечными инъекциями в возрастающих дозах с интервалом по 7 дней, с параллельным введением иммуностимулятора гамавита. Свиней-продуцентов, живой массой 150…160 кг, предварительно карантинируют, подвергают исследованию и необходимой обработке, против инфекционных болезней согласно действующей «Инструкции о порядке заготовки и санитарной обработки животных, используемых для производства биопрепаратов». Гипериммунизация свиней проводится по схеме, приведенной в таблице 1.
| Таблица 1 | |||||
| Схема гипериммунизации свиней-продуцентов | |||||
| Количество инъекций | III | IV | V | VI | |
| Общая доза препарата (см3) | Веррес-Цирко (Ветбиохим) | 40 | 50 | 80 | 115 |
| Концентр. инакт. против РРСС (Ветбиохим) | 40 | 50 | 75 | 105 | |
| Инакт. сорбиров. против гемофилеза (ВНИИЗЖ) | 45 | 60 | 90 | 125 | |
| Гамавит (иммуностимулятор) |
30 | 40 | 50 | 60 | |
| Активность сыворотки | ЦВИС в ИФА | 1:6400 | 1:12800 | 1:25600 | 1:25600 |
| РРСС в ИФА | 1:3200 | 1:6400 | 1:12800 | 1:12800 | |
| Гемофилез в РА | 1:128 | 1:256 | 1:512 | 1:512 | |
Из данных таблицы 1 следует, что максимальная активность сыворотки получена после пяти кратной инъекции вакцин к цирковирусной инфекции на уровне 1:25600 и к репродуктивно-респираторному синдрому - 1:12800 (в ИФА), к возбудителю гемофилеза 1:512 (в РА). Дальнейшее увеличение числа инъекций вакцин не приводит к повышению уровня титров антител
Взятие крови необходимо проводить при наличии уровня антител к цирковирусной инфекции 1:25600, репродуктивно-респираторному синдрому в титрах не менее 1:12800 (в ИФА) и к гемофилезному полисерозиту в титре не менее 1:512 (в РА).
Забор крови осуществляется путем тотального обескровливания при убое животных через 3…4 недели после завершающей гипериммунизации в стерильные 20…30 литровые бутыли. Сыворотку из крови получают цитратным методом. Для предохранения крови от свертывания применяют антикоагулянт 10%-ный раствор лимонно-кислого натрия, который готовят физиологическом растворе, стерилизуют в автоклаве при температуре 120°C в течение 30 мин. В стерильные бутыли наливают раствор лимонно-кислого натрия из расчета 34 мл на 1 литр крови. В процессе и после окончания взятия крови раствор антикоагулянта и кровь смешивают, покачиванием бутыли плавными круговыми движениями.
Для отделения форменных элементов полученную цитратную кровь сепарируют на сепараторе марки Ж5-АС-2Ж с последующим дефибринированием плазмы в стерильном дефибринаторе с мешалкой. К плазме, при работе мешалки, через штуцер добавляют 30%-ный раствор хлористого кальция из расчета 1,3 мл на литр плазмы и свежеприготовленную сыворотку, содержащую фермент тромбин, из расчета 10 мл на 1 л. Процесс дефибринирования плазмы обычно длится 25…30 мин. По истечении этого времени берут пробу для проверки на полноту перевода фибриногена в фибрин, для чего в пробирку наливают 7…8 мл испытуемой сыворотки и 5…6 мл насыщенного раствора хлористого кальция, смесь тщательно встряхивают и оставляют в покое на 10…15 мин. Прозрачность смеси указывает на полноту перехода фибриногена в фибрин. Полученную сыворотку проверяют манганометрическим методом на содержание кальция, присутствие которого в сыворотке не должно превышать 35 мг%. Далее сыворотку крови консервируют 5%-ным раствором фенола до концентрации его в общем объеме сыворотки 0,5%. После этого сыворотку перекачивают в отстойник и выдерживают 2…2,5 месяца при 2…15°C. Отстаивание сыворотки можно заменить сепарированием. Затем сыворотку подвергают последовательно предварительной и стерилизующей фильтрации через пластины марок «Ф2» и «СФ», после чего снова проверяют на стерильность как указано в примере 2.
Пример 2. Приготовленные серии сыворотки проверяют на внешний вид, стерильность, безвредность и активность.
Для определения внешнего вида, цвета, наличия посторонних примесей, плесени, неразбивающихся хлопьев, герметичности укупорки все флаконы с сывороткой встряхивают, просматривают в проходящем свете и переворачивают вниз пробками. Стерильность сыворотки проверяют путем высева на мясо-пептонный агар, мясо-пептонный бульон, Сабуро, регенерированную среду Китт-Тарацци. Посевы культивируют при температуре 37…38°C. Через двое суток из жидких сред делают пересевы на мясо-пептонный агар, мясо-пептонный бульон, мясо-пептонно-печеночный агар под вазелиновым маслом. Первичные посевы выдерживают в течение 10, а вторичные - 8 суток. Стерильность подтверждается отсутствием роста на обычных и селективных питательных средах. Безвредность сыворотки определяют на 10 белых мышах массой 14…18 г и 10 морских свинках массой 350…400 г при подкожном введении соответственно 0,5 и 2,0 см3 препарата. Сыворотку считают безвредной, если все животные остаются клинически здоровыми в течение 10 суток.
Пример 3. Полученную по примеру 1 гипериммунную сыворотку применяют для профилактики респираторных болезней поросят. Опыт проведен на 80 поросятах в возрасте 28 суток перед переводом в группу доращивания, со средней живой массой тела по 7,1-7,5 кг. Поросята разделены на 4 группы по принципу аналогов. Животным 1,2 и 3 групп (опытные) по 20 голов подкожно вводили полученную по примеру 1 сыворотку соответственно 5, 7 и 10 см3 на голову. Поросята 4-ой группы 20 голов вводили сыворотку (прототип) в дозе 10 см. Сыворотку вводили трехкратно, с интервалом в 10 дней. Срок наблюдения 60 суток.
| Таблица 2 | ||||
| Уровень заболеваемости респираторных болезней поросят - отъемышей | ||||
| Показатели | Опытные группы | Прототип (контроль) | ||
| I | II | III | ||
| Количество животных, (гол.) | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Доза сыворотки (см3) | 5 | 7 | 10 | 10 |
| Кратность введения | 3 инъекции с интервалом 7 дней | |||
| Заболело респираторными болезнями (%) | 25 | 10 | 10 | 20 |
Из табл.2 следует, что наиболее оптимальной дозой сыворотки является 7 см3 на голову, при которой получен высокий профилактический эффект, с повышением дозы препарата до 10 см3 эффективность осталась на прежнем уровне.
Пример 4. Полученную по примеру 1 сыворотку применяют для лечения ассоциированных респираторных заболеваний у поросят на доращивании 60…65 суточного возраста с живой массой тела 20…22 кг. У больных поросят наблюдается отставание в росте, истощение, кашель, одышка, повышение температуры до 41°C. В опыте использованы 60 поросят, которых разделили на четыре группы по принципу пар-аналогов. Поросятам первой, второй и третьей групп вводил полученную по примеру 1 сыворотку в дозах 10, 15, 20 см3 на голову. Поросятам четвертой группы вводили сыворотку (прототип) в дозе 20 см3 на голову. Поросятам всех групп вводили внутримышечно гентамицин в рекомендуемых дозах. Срок наблюдения 60 суток. Результаты опытов представлены в табл.3.
| Таблица 3 | ||||
| Эффективность сыворотки при респираторных болезнях поросят | ||||
| Показатели | Опытные группы | Прототип (контроль) | ||
| I | II | III | ||
| Доза сыворотки (см3) | 10 | 15 | 20 | 20 |
| Количество животных (гол.) | 15 | 15 | 15 | 15 |
| Выздоровело, гол. | 12 | 14 | 14 | 12 |
| Пало, гол. | 3 | 1 | 1 | 3 |
| Сохранность, % | 80 | 93,3 | 93,3 | 80 |
Из приведенных данных табл.3 видно, что предлагаемая гипериммунная сыворотка в дозе 15 см3 на голову с повторным введением сыворотки через 48 ч., до 3-5 инъекций, обладает более выраженным терапевтическим эффектом по сравнению с гипериммунной сывороткой - прототипом. В особо тяжелых случаях клинического течения болезни суточную дозу сыворотки следует вводить дробно 2-3 раза через промежутки в 3-4 часа, что обеспечивает надежный терапевтический эффект.
Список литературы
1. Гречухин, А.Н. Особенности проявления цирковирусной инфекции свиней и ее специфическая профилактика/ А.Н. Гречухин // Свиноводство. - 2010. - №2. - С.48-50.
2. Гринь, С.А. Современные биотехнологические процессы и иммунологические методы при промышленном производстве ветеринарных препаратов: дис…докт. биол. наук / С.А. Гринь. - Щелково, 2008. - С.305.
3. Дрю, Т. Синдром послеотъемного мультисистемного истощения: роль цирковируса свиней в его этиологии / Промышленное и племенное свиноводство, 2005. - №4. - С.51-52.
4. Малахов, Ю.А. Специфическая профилактика эшерихиоза животных / Ю.А.Малахов, О.А.Тугаринов., М.К.Пирожков // Ветеринария. - 1993. - №3. - С.5-7.
5. Орлянкин, Б.Г. Цирковирусная инфекция / Б.Г. Орлянкин, Т. Алипер, Е.А. Непоклонов // Ветеринария. - 2002. - №8. - С.24-25.
6. Орлянкин, Б.Г. Цирковирусная инфекция / Б.Г. Орлянкин, Т. Алипер, Е.А. Непоклонов // Животноводство России, - 2003. - №11. - С.48-51.
7. Орлянкин, Б.Г. Цирковирусная инфекция / Б.Г. Орлянкин // Проблемы инфекционной патологии свиней: материалы XVI междунар. Москов. Конгресса, 2007. - Москва. - 2007. - С.19-24.
8. Орлянкин, Б.Г. Инфекционные респираторные болезни свиней / Б.Г. Орлянкин // Животноводство России. - 2009. - №5. - С.35-36.
9. Справочник Vidal ветеринарный, «Лекарственные средства ветеринарного назначения», Москва, Астра Фарм Сервис, 2003-2004. - С.480.
10. Федоров, Ю.Н. Иммунный статус поросят в хозяйствах промышленного типа / Ю.Н. Федоров [и др.] // Ветеринария. - 2006.-№6. - С.18-21.
11. Щербаков, П.Н. Профилактика желудочно-кишечных и респираторных болезней поросят / Щербаков П.Н. [и др.] // Свиноводство. - 2002. - №5. - С.25-26.
12. Патент 2180239 Российская Федерация, А61К 39/395. Биологический препарат для профилактики и лечения желудочно-кишечных и респираторных болезней поросят / Щербаков П.Н., Юров К.П., Караваев Ю.Д., Щербакова Т.Б.; заявитель и патентообладатель Урал. Государств. Академия ветеринарной медицины.- №2000122079/13; заявл. 22.08.2000; опубл. 10.03.2002.
13. Патент 2357756 С2 Российская Федерация, А61К 39/40. Способ получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней / Школьников Е.Э.; заявитель и патентообладатель Госуд. науч.-исследов. И технолог, институт биолог, пром.-ти, - №200713692/13; заявл. 26.06.2007; опубл. 10.06.2009.
14. Патент 2043772 С1 Российская Федерация, А61К 39/108, А61К 39/40. Способ получения сыворотки антиадгезивной и антитоксической против эшерихиоза сельскохозяйственных животных / Малахов Ю.А., Тугаринов О.А., Пирожков М.К., Солодков B.C.; заявитель и патентообладатель Малахов Ю.А., Тугаринов О.А., Пирожков М.К., Солодков B.C. - №93009805/13; заявл. 25.02.1993; опубл. 20.09.1995.
15. Шахов, А.Г. Применение иммуномодуляторов при вакцинации животных против сальмонеллеза / А.Г. Шахов [и др.] // Ветеринария.- 2006. - №6. - С.21-26.
16. Шахов, А.Г. Этиология респираторных болезней поросят в промышленных свиноводческих хозяйствах и меры их профилактики / А.Г. Шахов [и др.] // Свиноводство. - 2008. - №5. - С.26-28.
17. Шахов, А.Г. Влияние состояния иммунного статуса на врзникновение и развитие респираторных болезней свиней / А.Г. Шахов, М.И. Рецкий, Ю.Н. Масьянов и др. // Доклады РАСХН. - 2009. - №4. - С.55-58.
18. Шкаева, М.А. ИФА для выявления антител к цирковирусу свиней второго типа / Шкаева М.А. [и др.] // Ветеринария. - 2005. - №9. - С.20-23.
19. Школьников, Е.Э. Испытание сыворотки против гемофилеза и пастереллеза свиней / Е.Э.Школьников, Г.Ф.Коломнина, Д.И.Скородумов // Ветеринарная биотехнология: настоящее и будущее: материалы междунар. науч.-практич. конференции, 2004. - Щелково. - 2004. - С.56-57.
20. Allan, G.M. Immunostimulation, PCV-2 and PMWS / G.M. Alan [et al.] // Vet. Rec, 2000. - V. 147. №6. - P.170-171.
21. Krakowka, S. Activation of the immune system is the pivotal event in the production of wasting disease in pigs infected with porcine circovirus-2 (PCV-2) / S. Krakowka, J.A. Ellis, F. McNeilly [et al.] // Vet. Pathol, 2001. - V. 38. - P. 31-42.
22. Segales, J. Postweaning multisystemic wasting sysndrome (PMWS) in pigs. A review / J. Segales, M. Domingo // Vet. Quaterty, 2002. - V. 24. - P.109-124.
Claims (1)
- Способ получения гипериммунной сыворотки против цирковирусной инфекции, репродуктивно-респираторного синдрома и гемофилеза свиней, включающий гипериммунизацию свиней-продуцентов с последующим крововзятием и выделением целевого продукта, отличающийся тем, что гипериммунизацию проводят моновалентными вакцинами против цирковирусной инфекции, репродуктивно-респираторного синдрома и гемофилеза свиней возрастающими дозами, 6-кратными внутримышечными инъекциями с интервалом 7 дней, в общей дозе каждой вакцины 105-125 см3, с дополнительным введением иммуностимулятора гамавита.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012117465/15A RU2494760C1 (ru) | 2012-04-26 | 2012-04-26 | Способ получения гипериммунной сыворотки против цирковирусной инфекции, репродуктивно-респираторного синдрома и гемофилеза свиней |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012117465/15A RU2494760C1 (ru) | 2012-04-26 | 2012-04-26 | Способ получения гипериммунной сыворотки против цирковирусной инфекции, репродуктивно-респираторного синдрома и гемофилеза свиней |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2494760C1 true RU2494760C1 (ru) | 2013-10-10 |
Family
ID=49302838
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012117465/15A RU2494760C1 (ru) | 2012-04-26 | 2012-04-26 | Способ получения гипериммунной сыворотки против цирковирусной инфекции, репродуктивно-респираторного синдрома и гемофилеза свиней |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2494760C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US10688129B2 (en) | 2013-11-26 | 2020-06-23 | Central Biomedia, Inc. | Method of producing a designer blood product, method of using a designer blood product, and diet for selectively enhancing blood profile |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1993006211A1 (en) * | 1991-09-16 | 1993-04-01 | Collins James E | Vaccine for mystery swine disease and method for diagnosis thereof |
| RU2118169C1 (ru) * | 1996-09-02 | 1998-08-27 | Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности | Способ получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней |
| EP0595436B1 (en) * | 1992-10-30 | 2007-05-23 | Solvay Animal Health, Inc. | Porcine respiratory and reproductive disease virus, vaccines and viral DNA |
| RU2333771C2 (ru) * | 2006-09-01 | 2008-09-20 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности | Способ получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза и пастереллеза свиней |
| RU2357756C2 (ru) * | 2007-06-26 | 2009-06-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности | Способ получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней |
-
2012
- 2012-04-26 RU RU2012117465/15A patent/RU2494760C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1993006211A1 (en) * | 1991-09-16 | 1993-04-01 | Collins James E | Vaccine for mystery swine disease and method for diagnosis thereof |
| EP0595436B1 (en) * | 1992-10-30 | 2007-05-23 | Solvay Animal Health, Inc. | Porcine respiratory and reproductive disease virus, vaccines and viral DNA |
| RU2118169C1 (ru) * | 1996-09-02 | 1998-08-27 | Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности | Способ получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней |
| RU2333771C2 (ru) * | 2006-09-01 | 2008-09-20 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности | Способ получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза и пастереллеза свиней |
| RU2357756C2 (ru) * | 2007-06-26 | 2009-06-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности | Способ получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US10688129B2 (en) | 2013-11-26 | 2020-06-23 | Central Biomedia, Inc. | Method of producing a designer blood product, method of using a designer blood product, and diet for selectively enhancing blood profile |
| US11419893B2 (en) | 2013-11-26 | 2022-08-23 | Central Biomedia, Inc. | Method of producing a designer blood product, method of using a designer blood product, and diet for selectively enhancing blood profile |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK141835B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af et praeparat til anvendelse ved behandling af interferonfoelsomme infektionssygdomme | |
| CN110251671B (zh) | 鹅星状病毒卵黄抗原抗体复合物制备方法 | |
| WO2014054981A2 (ru) | Способ стимуляции роста и повышения резистентности сельскохозяйственных животных | |
| CN110812474A (zh) | 猪圆环病毒2型、猪肺炎支原体、副猪嗜血杆菌三联灭活疫苗及其制备方法 | |
| CN105688202A (zh) | 一种乙型脑炎疫苗组合物及其制备方法 | |
| CN107177001A (zh) | 一种防治猪流行性腹泻病的卵黄抗体及其制备方法 | |
| CN104258389B (zh) | 一种疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
| CN117756931A (zh) | 一种猫杯状病毒卵黄抗体及其制备方法和应用 | |
| RU2145236C1 (ru) | Ассоциированная вакцина против рота-, корона-, герпесвирусной и эшерихиозной диареи новорожденных телят | |
| RU2403063C1 (ru) | Вакцина инактивированная комбинированная против вирусной диареи, рота-, коронавирусной болезней и эшерихиоза крупного рогатого скота | |
| CN103908665A (zh) | 一种疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
| CN106563125B (zh) | 鸭甲肝病毒ⅲ型复合物活疫苗及其制备方法 | |
| RU2494760C1 (ru) | Способ получения гипериммунной сыворотки против цирковирусной инфекции, репродуктивно-респираторного синдрома и гемофилеза свиней | |
| CN114377127A (zh) | 一种三联卵黄抗体制剂及其制备方法和应用 | |
| CN106267176B (zh) | 鸡传染性鼻炎疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
| RU2438709C1 (ru) | Сыворотка против болезней крупного рогатого скота, вызываемых вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа, рота, корона и диареи - болезни слизистых, полиспецифическая гипериммунная, способ профилактики и лечения болезней крупного рогатого скота, вызываемых вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа, рота, корона и диареи - болезни слизистых | |
| CN112940987B (zh) | 一株兔金黄色葡萄球菌及其在制备灭活疫苗中的应用 | |
| CN112921006B (zh) | 一株鹅星状病毒及其应用 | |
| RU2145504C1 (ru) | ПОЛИСПЕЦИФИЧЕСКАЯ ГИПЕРИММУННАЯ СЫВОРОТКА ПРОТИВ РОТА-, КОРОНА-, ГЕРПЕСВИРУСОВ И E.coli (K 99, A 20) ДЛЯ ЛОКАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ И ИММУНОТЕРАПИИ СМЕШАННЫХ ФОРМ ДИАРЕИ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ | |
| CN104857511A (zh) | 含人参皂甙的疫苗稀释剂 | |
| CN112608382B (zh) | 鸭呼肠孤病毒病、鸭病毒性肝炎二联卵黄抗体及其制备方法 | |
| KR101411995B1 (ko) | 돼지 소모성 질병의 치료 또는 예방을 위한 젖소 초유 항체 조성물 | |
| CN103893760A (zh) | 抗牛乳房炎耐药菌IgY与复合噬菌体组合物及其制备方法及制剂 | |
| CN100518822C (zh) | 短小棒状杆菌制备猪传染性胸膜肺炎生物制剂的用途 | |
| RU2301680C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140427 |