RU2463040C2 - Композиция и микросфера с контролируемым высвобождением экзендина и способ получения микросферы - Google Patents
Композиция и микросфера с контролируемым высвобождением экзендина и способ получения микросферы Download PDFInfo
- Publication number
- RU2463040C2 RU2463040C2 RU2009136655/15A RU2009136655A RU2463040C2 RU 2463040 C2 RU2463040 C2 RU 2463040C2 RU 2009136655/15 A RU2009136655/15 A RU 2009136655/15A RU 2009136655 A RU2009136655 A RU 2009136655A RU 2463040 C2 RU2463040 C2 RU 2463040C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- exendin
- polymer
- group
- microspheres
- copolymer
- Prior art date
Links
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 title claims abstract description 155
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 96
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 43
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 81
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 55
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 claims abstract description 54
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 claims abstract description 54
- JUFFVKRROAPVBI-PVOYSMBESA-N chembl1210015 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO[C@]3(O[C@@H](C[C@H](O)[C@H](O)CO)[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C3)C(O)=O)O2)O)[C@@H](CO)O1)NC(C)=O)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 JUFFVKRROAPVBI-PVOYSMBESA-N 0.000 claims abstract description 43
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 claims abstract description 41
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 40
- 108010011459 Exenatide Proteins 0.000 claims abstract description 37
- 229960001519 exenatide Drugs 0.000 claims abstract description 37
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims abstract description 34
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims abstract description 29
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims abstract description 26
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 19
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 16
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 16
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 15
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 claims abstract description 14
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims abstract description 12
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical compound NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims abstract description 12
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims abstract description 9
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims abstract description 9
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 claims abstract description 8
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N lactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims abstract description 7
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 239000006046 creatine Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 239000002745 poly(ortho ester) Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000004632 polycaprolactone Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 229940045136 urea Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 83
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims description 83
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 30
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 29
- 239000011247 coating layer Substances 0.000 claims description 25
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 18
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 claims description 13
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 claims description 13
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 13
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims description 11
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 claims description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 9
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 9
- 150000002897 organic nitrogen compounds Chemical class 0.000 claims description 8
- RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane-2,5-dione Chemical compound O=C1COC(=O)CO1 RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 7
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 claims description 6
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 claims description 5
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 4
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 39
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 37
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 28
- -1 nitrogenous compound Chemical class 0.000 abstract description 21
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 abstract description 4
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 abstract description 4
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 abstract description 4
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 abstract description 4
- 230000008693 nausea Effects 0.000 abstract description 4
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 abstract description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 abstract 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 abstract 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 56
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- 235000019422 polyvinyl alcohol Nutrition 0.000 description 53
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 52
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 37
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 30
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 20
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 18
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 18
- IYKLZBIWFXPUCS-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(naphthalen-1-ylamino)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(N[C@@H](C)C(O)=O)=CC=CC2=C1 IYKLZBIWFXPUCS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 17
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N Ser-Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 13
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 13
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 12
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 11
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 11
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 11
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 9
- 102400000322 Glucagon-like peptide 1 Human genes 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 9
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 9
- 101800000224 Glucagon-like peptide 1 Proteins 0.000 description 8
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 8
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 8
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 8
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- DZLNHFMRPBPULJ-VKHMYHEASA-N L-thioproline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CSCN1 DZLNHFMRPBPULJ-VKHMYHEASA-N 0.000 description 7
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 7
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 7
- HXEACLLIILLPRG-UHFFFAOYSA-N pipecolic acid Chemical compound OC(=O)C1CCCCN1 HXEACLLIILLPRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 6
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 6
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 5
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- VZSRBBMJRBPUNF-UHFFFAOYSA-N 2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)-N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C(=O)NCCC(N1CC2=C(CC1)NN=N2)=O VZSRBBMJRBPUNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010067722 Dipeptidyl Peptidase 4 Proteins 0.000 description 4
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 4
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 238000001723 curing Methods 0.000 description 4
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 4
- 108010015174 exendin 3 Proteins 0.000 description 4
- LMHMJYMCGJNXRS-IOPUOMRJSA-N exendin-3 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@H](C)O)[C@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 LMHMJYMCGJNXRS-IOPUOMRJSA-N 0.000 description 4
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 4
- 239000002569 water oil cream Substances 0.000 description 4
- TXHAHOVNFDVCCC-UHFFFAOYSA-N 2-(tert-butylazaniumyl)acetate Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)=O TXHAHOVNFDVCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100025012 Dipeptidyl peptidase 4 Human genes 0.000 description 3
- IMROMDMJAWUWLK-UHFFFAOYSA-N Ethenol Chemical compound OC=C IMROMDMJAWUWLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- XNSAINXGIQZQOO-UHFFFAOYSA-N L-pyroglutamyl-L-histidyl-L-proline amide Natural products NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CN=CN1 XNSAINXGIQZQOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000627 Thyrotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 3
- 102400000336 Thyrotropin-releasing hormone Human genes 0.000 description 3
- 101800004623 Thyrotropin-releasing hormone Proteins 0.000 description 3
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 3
- 239000011368 organic material Substances 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- XNSAINXGIQZQOO-SRVKXCTJSA-N protirelin Chemical compound NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CN=CN1 XNSAINXGIQZQOO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 3
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 229940034199 thyrotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 3
- HOSGXJWQVBHGLT-UHFFFAOYSA-N 6-hydroxy-3,4-dihydro-1h-quinolin-2-one Chemical group N1C(=O)CCC2=CC(O)=CC=C21 HOSGXJWQVBHGLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002237 B-cell of pancreatic islet Anatomy 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 2
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 2
- 241000270453 Heloderma horridum Species 0.000 description 2
- 241000270431 Heloderma suspectum Species 0.000 description 2
- 101000904173 Homo sapiens Progonadoliberin-1 Proteins 0.000 description 2
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JPNRPAJITHRXRH-BQBZGAKWSA-N Lys-Asn Chemical group NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O JPNRPAJITHRXRH-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- GDFAOVXKHJXLEI-VKHMYHEASA-N N-methyl-L-alanine Chemical compound C[NH2+][C@@H](C)C([O-])=O GDFAOVXKHJXLEI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 2
- 102100024028 Progonadoliberin-1 Human genes 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 101000996723 Sus scrofa Gonadotropin-releasing hormone receptor Proteins 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZFKJVJIDPQDDFY-UHFFFAOYSA-N fluorescamine Chemical compound C12=CC=CC=C2C(=O)OC1(C1=O)OC=C1C1=CC=CC=C1 ZFKJVJIDPQDDFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 2
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 2
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N gonadorelin Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BJBUEDPLEOHJGE-UHFFFAOYSA-N (2R,3S)-3-Hydroxy-2-pyrolidinecarboxylic acid Natural products OC1CCNC1C(O)=O BJBUEDPLEOHJGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DEQANNDTNATYII-OULOTJBUSA-N (4r,7s,10s,13r,16s,19r)-10-(4-aminobutyl)-19-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-16-benzyl-n-[(2r,3r)-1,3-dihydroxybutan-2-yl]-7-[(1r)-1-hydroxyethyl]-13-(1h-indol-3-ylmethyl)-6,9,12,15,18-pentaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentazacycloicosane-4-carboxa Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H](NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC1=O)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 DEQANNDTNATYII-OULOTJBUSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole;hydrate Chemical compound O.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IHPYMWDTONKSCO-UHFFFAOYSA-N 2,2'-piperazine-1,4-diylbisethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCN1CCN(CCS(O)(=O)=O)CC1 IHPYMWDTONKSCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000954 2-hydroxyethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- TVEXGJYMHHTVKP-UHFFFAOYSA-N 6-oxabicyclo[3.2.1]oct-3-en-7-one Chemical compound C1C2C(=O)OC1C=CC2 TVEXGJYMHHTVKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000599 Acromegaly Diseases 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- PQBHGSGQZSOLIR-RYUDHWBXSA-N Arg-Phe Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PQBHGSGQZSOLIR-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- QJMCHPGWFZZRID-BQBZGAKWSA-N Asn-Lys Chemical group NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O QJMCHPGWFZZRID-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102100030916 Gamma-soluble NSF attachment protein Human genes 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229940127552 Glucagon-like Peptide-1 (GLP-1) Agonists Drugs 0.000 description 1
- YIWFXZNIBQBFHR-LURJTMIESA-N Gly-His Chemical compound [NH3+]CC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CN=CN1 YIWFXZNIBQBFHR-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- MVORZMQFXBLMHM-QWRGUYRKSA-N Gly-His-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CN=CN1 MVORZMQFXBLMHM-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- VLDVBZICYBVQHB-IUCAKERBSA-N His-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CN=CN1 VLDVBZICYBVQHB-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- 101000702693 Homo sapiens Gamma-soluble NSF attachment protein Proteins 0.000 description 1
- 101000886868 Homo sapiens Gastric inhibitory polypeptide Proteins 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 125000000393 L-methionino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])[*])C([H])([H])C(SC([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 241000270322 Lepidosauria Species 0.000 description 1
- NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- UEQUQVLFIPOEMF-UHFFFAOYSA-N Mianserin Chemical compound C1C2=CC=CC=C2N2CCN(C)CC2C2=CC=CC=C21 UEQUQVLFIPOEMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(CCNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000010410 Nogo Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010077641 Nogo Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010016076 Octreotide Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Chemical compound OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVWLUVNSQYXYBE-UHFFFAOYSA-N Ribitol Natural products OCC(C)C(O)C(O)CO JVWLUVNSQYXYBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 108010028340 arginylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 1
- 239000006177 biological buffer Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 210000003158 enteroendocrine cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002795 fluorescence method Methods 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 description 1
- 229940035638 gonadotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 1
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229960002700 octreotide Drugs 0.000 description 1
- 238000010525 oxidative degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002571 pancreatic alpha cell Anatomy 0.000 description 1
- WXZMFSXDPGVJKK-UHFFFAOYSA-N pentaerythritol Chemical compound OCC(CO)(CO)CO WXZMFSXDPGVJKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-ZXFHETKHSA-N ribitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-ZXFHETKHSA-N 0.000 description 1
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- BJBUEDPLEOHJGE-IMJSIDKUSA-N trans-3-hydroxy-L-proline Chemical compound O[C@H]1CC[NH2+][C@@H]1C([O-])=O BJBUEDPLEOHJGE-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N trisodium borate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]B([O-])[O-] BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000002435 venom Substances 0.000 description 1
- 210000001048 venom Anatomy 0.000 description 1
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
- A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/2278—Vasoactive intestinal peptide [VIP]; Related peptides (e.g. Exendin)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
- A61K9/0024—Solid, semi-solid or solidifying implants, which are implanted or injected in body tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/5005—Wall or coating material
- A61K9/5015—Organic compounds, e.g. fats, sugars
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/5005—Wall or coating material
- A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
- A61K9/5026—Organic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
- A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
- A61K47/38—Cellulose; Derivatives thereof
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области фармации и представляет собой микросферу с контролируемым высвобождением, имеющую покровный слой и содержащую ядро, содержащее экзендин в качестве активного ингредиента и биоразлагающийся полимер, и покровный слой, который покрывает ядро покрывающим материалом, при этом экзендин является экзендином-4 (SEQ ID NO:2), биоразлагающийся полимер представляет собой полимер, выбранный из группы, состоящей из полилактида (PLA), полигликолида (PGA), сополимера лактида и гликолида (PLGA), сложного полиортоэфира, полиангидрида, полигидроксимасляной кислоты, поликапролактона и полиалкилкарбоната; сополимера или простой смеси двух или более полимеров, выбранных из указанной группы полимеров; сополимер указанного полимера и полиэтиленгликоля (PEG); или полимерно-сахарный комплекс, в котором сахар связан с указанным полимером или указанным сополимером, покрывающий материал выбран из группы, состоящей из основных аминокислот, полипептидов и органических азотистых соединений, причем основная аминокислота является одной или более, выбранной из группы, состоящей из аргинина, лизина и гистидина; полипептид представляет собой L-Lys-L-Thr-L-Thr-L-Lys-L-Ser; a органическое азотистое соединение выбрано из группы, состоящей из креатина, креатинина и мочевины, причем содержание покровного слоя составляет от 0,01 до 5 мас. частей в расчете на 100 мас. частей микросферы. Изобретение обеспечивает повышение биодоступности и снижение начального пика экзендина для предупреждения таких побочных эффектов, как рвота, тошнота, головные боли. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 7 пр., 5 табл., 7 ил.
Description
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННУЮ ЗАЯВКУ
Данная заявка заявляет льготное право приоритета корейской патентной заявки №10-2007-0029586, поданной 27 марта 2007, которая настоящим включена посредством ссылки для всех целей, как будто она полностью изложена в настоящем описании.
ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
(a) Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к композиции с контролируемым высвобождением и микросфере с контролируемым высвобождением, содержащим экзендин в качестве активного ингредиента, а также к способу их получения.
(b) Описание аналогов
Экзендины представляют собой агонисты глюкагоноподобного пептида-1 (GLP-1), действующие как GLP-1 в организме, а экзендин-4 обладает 53%-ной гомологией последовательностей с аминокислотной последовательностью GLP-1(7-36)NH2 (Goke, et al., J. Biol. Chem., 268: 19650-19655, 1993).
GLP-1, типичный инкретиновый гормон, является пептидом, выделенным из L-клеток кишечника, выделяется при попадании пищи в пищеварительный тракт и снижает уровень сахара в крови путем стимулирования секреции инсулина из бета-клеток поджелудочной железы (Orskov, et al., Diabetes, 42:658-661, 1993). Кроме того, GLP-1 ингибирует высвобождение глюкагона из альфа-клеток поджелудочной железы (D'Alessio, et al., J. Clin. Invest., 97:133-138, 1996) и увеличивает время освобождения желудочно-кишечного тракта, что приводит к ингибированию всасывания пищи (Schira, et al., J. Clin. Invest., 97:92-103, 1996). Функции GLP-1 заключаются не только в стимулировании секреции инсулина из бета-клеток поджелудочной железы, но также в повышении скорости пролиферации и уровня выживаемости бета-клеток (Buteau, et al., Diabetologia, 42:856-864, 1999). Однако GLP-1 теряет способность выполнения своей функции с расщеплением его N-терминального участка посредством дипептидилпептидазы-4 (DPP-4) и имеет очень короткое время полужизни, составляющее приблизительно 2 минуты (Pridal, et al., Eur. J. Drug. Metab. Pharmacokinet., 21:51-59, 1996; Deacon, et al., Diabetes, 47:764-769, 1998).
Экзендины известны способностью повышать секрецию инсулина в зависимости от уровня сахара в крови в организме, ингибировать высвобождение глюкагона после еды, а также снижать скорость освобождения желудочно-кишечного тракта, что приводит к ингибированию всасывания пищи. Кроме того, экзендины обладают преимуществом более длительного времени полужизни по сравнению с GLP-1, поскольку экзендин, в отличие от GLP-1, не расщепляется на N-терминальном участке посредством DPP-4, и поэтому экзендины могут проявлять свое действие в организме в течение более длительного времени, чем GLP-1 (Thum, et al., Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes., 110:113-118, 2002). Экзендины обнаруживаются в выделениях слюнных желез ящерицы Хила (Gila monster) и мексиканского ядозуба (Mexican Beaded Lizard), причем экзендин-3 обнаружен у мексикансого ядозуба, Heloderma horridum, a экзендин-4 обнаружен у ящерицы Хила, Heloderma suspectum (Eng, J., et al., J. Biol. Chem., 265:20259-62, 1990; Eng., J., et al., J. Biol. Chem., 267:7402-05, 1992).
Посредством внутрибрюшинных инъекций экзендина-4 мышам с диабетом, обусловленным ожирением (ob/ob-мышам) один раз в день было подтверждено, что экзендин-4 обладает пролонгированным эффектом снижения уровня сахара в крови (Greig et al., Diabetologia 42:45-50, 1999). Недавно был разработан состав для экзендина-4 в качестве агента инъекции, который вводится подкожно два раза в день в дозе, составляющей 5 мкг или 10 мкг. Несмотря на то что экзендин проявляет стабильность в отношении энзима DPP-4, он также известен способностью вызывать такие побочные эффекты, как рвота, тошнота, головные боли и тому подобное, при подкожном введении человеку в дозе 0,2 мкг/кг или более (Drug Development Research, 53:260-267, 2001). При введении экзендинов ограничение дозы из-за побочных эффектов, связанных с начальным пиком и начальной высокой концентрацией в крови, представляет собой самое большое препятствие для разработки агента с контролируемым высвобождением экзендина.
В общем случае агент с контролируемым высвобождением водного лекарственного препарата демонстрирует очень высокий уровень высвобождения на начальной стадии после введения, и были проведены различные исследования с целью снижения чрезмерного начального пика. В частности, при разработке агента с контролируемым высвобождением экзендинов важно снижение начального пика для предупреждения таких побочных эффектов, как рвота, тошнота, головные боли и тому подобное, вызванных чрезмерным начальным пиком.
С целью снижения начального пика микросфер с контролируемым высвобождением, содержащих октреотид (octreotide), обладающий терапевтическим эффектом против акромегалии и подобных заболеваний, было проведено исследование по получению микросфер посредством получения первичной эмульсии лекарственного препарата вместе с глюкозой, и последующего осуществления способа двойного эмульгирования. В процессе данного исследования было обнаружено, что начальный пик может быть снижен посредством введения лекарственного препарата одновременно с глюкозой. Однако в условиях получения, в которых начальный пик от микросфер составляет приблизительно 5%, добавление глюкозы не может привести к увеличению вводимого количества, и скорее увеличивает начальный пик (J. Wang et al., Biomaterials, 25:1919-1927, 2004).
Поэтому технология, раскрытая в вышеупомянутом документе, весьма сложна для применения с целью получения состава с контролируемым высвобождением экзендина, у которого начальный пик должен составлять 5% или ниже для снижения побочных эффектов, вызванных начальным пиком.
Патент США №7164005 и US2005/0271702 раскрывают способ получения экзендинсодержащих микросфер методом разделения фаз с использованием сополимера лактида и гликолида (PLGA)), у которого соотношение лактида и гликолида составляет 50:50. В вышеуказанных документах в качестве полимера используются полимер 3А (IV=0,38 дл/г (IV - сокращ. от Inherent Viscosity - характеристическая вязкость - примеч. перевод)), полимер 4А (IV=0,42 дл/г) и им подобные, в особенности, полимер 4А, предоставляемый компанией Alkermes Inc. В вышеуказанных документах микросферы получают путем смешивания пептидного лекарственного препарата с высаливающими компонентами, например, сульфатом аммония, и сахаров, например, сахарозой и маннитолом, для получения первичной эмульсии с целью улучшения биодоступности микросфер, состоящих из экзендина и полимера 3А или 4А, а также стабильности пептидного лекарственного препарата. То есть указанные документы предназначены для улучшения биодоступности посредством добавления добавок, например, сахаров, сульфата аммония, и им подобных, что обеспечивает достаточное высвобождение экзендина из полимерной матрицы. В результате биодоступность может быть улучшена до некоторой степени, однако значение максимальной концентрации (Cmax) остается высоким, что обуславливает проблему побочных эффектов, вызванных высоким начальным пиком. То есть при повышении биодоступности начальный пик становится чрезмерным, в то время как при снижении начального пика биодоступность снижается.
Как описано выше, существующая технология получения микросферы с контролируемым высвобождением ограничивается тем, что полученная микросфера имеет чрезмерно высокий начальный пик и неудовлетворительную биодоступность для применения в получении экзендинсодержащих микросфер с контролируемым высвобождением, которые требуют минимизации побочных эффектов, вызванных высоким начальным пиком, наряду с улучшением биодоступности.
Поэтому для разрешения вышеизложенных проблем необходимо разработать биоразлагающийся экзендинсодержащий состав, проявляющий низкий начальный пик и улучшенную биодоступность.
КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Чтобы удовлетворить вышеописанные нужды, целью настоящего изобретения является обеспечение агента с контролируемым высвобождением с высокой биодоступностью, содержащего экзендин в качестве активного ингредиента и биоразлагающийся полимер в качестве носителя, в котором снижен чрезмерный начальный пик, представляющий собой одну из проблем существующих агентов с контролируемым высвобождением, и способ его получения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Фиг.1 представляет собой график, показывающий изменение концентрации лекарственного препарата в крови у крыс в зависимости от наличия покровного слоя в экзендинсодержащем составе RG502H.
Фиг.2 представляет собой график, показывающий изменение концентрации лекарственного препарата в крови у крыс в зависимости от наличия покровного слоя в экзендинсодержащем составе RG503H.
Фиг.3 представляет собой график, показывающий изменение концентрации лекарственного препарата в крови у крыс в зависимости от наличия покровного слоя и типа покрывающих материалов в экзендинсодержащей смеси составов RG502H:RG503H=1:1.
Фиг.4а представляет собой изображение микросфер под электронным микроскопом, полученных обычным методом двойного эмульгирования.
Фиг.4b представляет собой изображение микросфер под электронным микроскопом, покрытых специальными покрывающими материалами методом двойного эмульгирования в соответствии с настоящим изобретением.
Фиг.4с представляет собой изображение микросфер под электронным микроскопом, полученных методом двойного эмульгирования с покрывающими материалами в первичной водной фазе.
Фиг.4d представляет собой изображение микросфер под электронным микроскопом, полученных методом двойного эмульгирования с покрывающими материалами, растворенными с полимерами масляной фазы.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ПРИМЕРОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
Более полная оценка изобретения и множества присущих ему преимуществ будет сразу очевидна, как только это будет лучше понято посредством ссылки на нижеследующее подробное описание.
Настоящее изобретение относится к композиции с экзендинсодержащими микросферами с контролируемым высвобождением с высокой биодоступностью и минимизированным начальным пиком лекарственного препарата при введении в организм.
Корейский патент №140209 раскрывает способ получения микросферы путем растворения водного лекарственного препарата со специфическими основными органическими материалами для получения первичной эмульсии и последующего осуществления метода двойного эмульгирования для ингибирования начального пика водного лекарственного препарата. Вышеуказаный документ раскрывает повышение эффективности насыщения лекарственным препаратом и ингибирование излишне высокого уровня начального пика посредством формирования прочного слоя путем взаимодействия между кислотными остатками биоразлагающихся полимеров и основными остатками лекарственного препарата. Как раскрыто в вышеуказанном документе, вышеуказанный способ может быть использован для получения композиции с контролируемым высвобождением, содержащей основный или нейтральный полипептид, например гонадотропин-высвобождающий гормон (LHRH), тиротропин-высвобождающий гормон (TRH) и их производные. Однако данный способ не может быть использован вследствие характеристик вводимых лекарственных препаратов, в частности, при получении композиции с контролируемым высвобождением, содержащей кислотный лекарственный препарат с относительно высокой молекулярной массой по сравнению с LHRH и TRH, например экзендин и ему подобные. Кроме того, в вышеуказанном способе добавление основных материалов вызывает увеличенную пористость поверхности полученных микросфер, и следовательно, данный способ не подходит для получения состава с контролируемым высвобождением, содержащего экзендин, который проявляет различные побочные эффекты, вызываемые начальным пиком.
Авторы настоящего изобретения подтвердили, что микросферы, имеющие высокую биодоступность и не имеющие побочных эффектов вследствие чрезмерного начального пика, могут быть выполнены посредством их покрытия специфическими покрывающими материалами во время или после получения экзендинсодержащих микросфер с использованием биоразлагающихся полимеров в качестве носителей, чтобы сделать настоящее изобретение.
Во-первых, настоящее изобретение обеспечивает композицию с контролируемым высвобождением, содержащую экзендин в качестве активного ингредиента, биоразлагающийся полимер со специфической вязкостью и покрывающие материалы с высокой биодоступностью и длительным высвобождением активного ингредиента в эффективной концентрации в течение определенного периода времени без чрезмерного начального пика активного ингредиента.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает микросферу с контролируемым высвобождением, содержащую ядро, включающее экзендин в качестве активного ингредиента и биоразлагающийся полимер; и покровный слой, покрывающий ядро.
Далее настоящее изобретение описывается более конкретно.
В настоящем изобретении экзендин может быть одним или более, выбранным из группы, состоящей из экзендина-3 (SEQ ID NO:1), экзендина-4 (SEQ ID NO:2), их фрагментов и производных и их фармацевтически приемлемых солей.
Производные экзендина могут быть соединением, представленным следующей химической формулой I, или его фармацевтически приемлемой солью.
(Химическая формула I)
Xaa1 Хаа2 Хаа3 Хаа4 Хаа5 Хаа6 Хаа7 Хаа8 Хаа9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Хаа13 Хаа14 Хаа15 Хаа16 Хаа17 Ala Xaa19 Хаа20 Хаа21 Хаа22 Хаа23 Хаа24 Хаа25 Xaa26 Xaa27 Xaa28-Z1,
где:
Xaa1 представляет собой His, Arg, Tyr, Ala, Norval, Val, Norleu или 4-имидазопропионил;
Хаа2 представляет собой Ser, Gly, Ala или Thr;
Хаа3 представляет собой Ala, Asp или Glu;
Хаа4 представляет собой Ala, Norval, Val, Norleu или Gly;
Хаа5 представляет собой Ala или Thr;
Хаа6 представляет собой Ala, Phe, Tyr или нафтилаланин;
Хаа7 представляет собой Thr или Ser;
Хаа8 представляет собой Ala, Ser или Thr;
Хаа9 представляет собой Ala, Norval, Val, Norleu, Asp или Glu;
Xaa10 представляет собой Ala, Leu, Ile, Val, пентилглицин или Met;
Xaa11 представляет собой Ala или Ser;
Xaal2 представляет собой Ala или Lys;
Хаа13 представляет собой Ala или Gln;
Хаа14 представляет собой Ala, Leu, Ile, пентилглицин, Val или Met;
Хаа15 представляет собой Ala или Glu;
Хаа16 представляет собой Ala или Glu;
Хаа17 представляет собой Ala или Glu;
Xaa19 представляет собой Ala или Val;
Хаа20 представляет собой Ala или Arg;
Хаа21 представляет собой Ala, Leu, или Lys-NHε-R (где R представляет собой Lys, Arg либо линейный или разветвленный алканоил с 1-10 атомами углерода);
Хаа22 представляет собой Ala, Phe, Tyr или нафтилаланин;
Хаа23 представляет собой Ile, Val, Leu, пептилглицин, трет-бутилглицин или Met;
Хаа24 представляет собой Ala, Glu или Asp;
Хаа25 представляет собой Ala, Trp, Phe, Tyr или нафтилаланин;
Хаа26 представляет собой Ala или Leu;
Хаа27 представляет собой Ala или Lys;
Хаа28 представляет собой Ala или Asn; и
Z1 представляет собой -ОН,
-NH2,
Gly-Z2,
Gly Gly-Z2,
Gly Gly Xaa31-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser GlyAla-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Хаа36 Xaa37-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Хаа36 Xaa37 Xaa38-Z2 или
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Хаа36 Xaa37 Xaa38 Xaa39-Z2,
(где Xaa31, Хаа36, Xaa37 и Xaa38 являются независимо Pro, гомопролином, 3Нур, 4Нур, тиопролином, N-алкилглицином, N-алкилпентилглицином или N-алкилаланином, Хаа39 представляет собой Ser или Tyr, а более предпочтительно - Ser, и Z2 представляет собой -ОН или -NH2),
при условии, что не более трех из Xaa3, Хаа4, Хаа5, Хаа6, Хаа8, Хаа9, Xaa10, Xaa11, Xaa12, Хаа13, Хаа14, Хаа15, Хаа16, Хаа17, Хаа19, Хаа20, Хаа21, Хаа24, Хаа25, Хаа26, Хаа27 и Хаа28 представляют собой Ala, и если Xaa1 представляет собой His, Arg или Tyr, по меньшей мере, одна из Xaa3, Хаа4, и Хаа9 представляет собой Ala.
Предпочтительные N-алкильные группы для N-алкилглицина, N-алкилпентилглицина и N-алкилаланина могут включать низшие алкильные группы, предпочтительно из 1 до приблизительно 6 атомов углерода, более предпочтительно, из 1 до 4 атомов углерода. Соединение, представленное химической формулой I, может включать соединения, идентифицированные в примерах 1-89 (Соединения 1-89, соответственно), и соответствующие соединения, идентифицированные в примерах 104 и 105 заявки РСТ с серийным номером PCT/US98/24273, поданной 13 ноября 1998 г. с названием «Новые соединения агониста экзендина» ("Novel Exendin Agonist Compounds"), которая приведена здесь в качестве ссылки.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы I могут включать те, в которых Xaa1 представляет собой His, Ala, Norval или 4-имидазопропионил, более предпочтительно, Xaa1 представляет собой His, Ala или 4-имидазопропионил, и еще более предпочтительно, Xaa1 представляет собой His или 4-имидазопропионил).
Предпочтительные производные экзендина химической формулы I могут быть теми, в которых Хаа2 представляет собой Gly.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы I могут быть теми, в которых Хаа3 представляет собой Ala.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы I могут быть теми, в которых Хаа4 представляет собой Ala.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы I могут быть теми, в которых Хаа9 представляет собой Ala.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы I могут быть теми, в которых Xaa14 представляет собой Leu, пентилглицин или Met.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы I могут быть теми, в которых Хаа21 представляет собой Lys-NHε-R (где R представляет собой Lys, Arg либо линейный или разветвленный алканоил с 1-10 атомами углерода).
Предпочтительные производные экзендина химической формулы I могут быть теми, в которых Хаа25 представляет собой Trp или Phe.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы I могут быть теми, в которых Хаа6 представляет собой Ala, Phe или нафтилаланин, Хаа22 представляет собой Phe или нафтилаланин, и Хаа23 представляет собой Ile или Val. Кроме того, предпочтительные производные экзендина химической формулы I могут быть теми, в которых Хаа31, Хаа36, Хаа37 и Хаа38 независимо выбраны из группы, состоящей из Pro, гомопролина, тиопролина и N-алкилаланина, и более предпочтительно Z1 представляет собой -NH2, a Z2 представляет собой -NH2.
В другом аспекте предпочтительные производные экзендина химической формулы I могут быть теми, в которых Xaa1 представляет собой Ala, His или Tyr, и более предпочтительно - Ala или His; Xaa2 представляет собой Ala или Gly; Хаа6 представляет собой Phe или нафтилаланин; Xaa14 представляет собой Ala, Leu, пентилглицин или Met; Xaa22 представляет собой Phe или нафтилаланин; Хаа23 представляет собой Ile или Val; Хаа31, Хаа36, Хаа37 и Хаа38 независимо выбраны из группы, состоящей из Pro, гомопролина, тиопролина и N-алкилаланина; Хаа39 представляет собой Ser или Tyr и более предпочтительно - Ser; и предпочтительно Z1 представляет собой -NH2.
В соответствии с особенно предпочтительным аспектом особенно предпочтительные производные экзендина химической формулы I могут быть теми, в которых Xaa1 представляет собой His или Ala; Xaa2 представляет собой Gly или Ala; Хаа3 представляет собой Ala, Asp или Glu; Xaa4 представляет собой Ala или Gly; Хаа5 представляет собой Ala или Thr; Хаа6 представляет собой Phe или нафтилаланин; Хаа7 представляет собой Thr или Ser; Хаа8 представляет собой Ala, Ser или Thr; Хаа9 представляет собой Ala, Asp или Glu; Хаа10 представляет собой Ala, Leu или пентилглицин; Xaa11 представляет собой Ala или Ser; Хаа12 представляет собой Ala или Lys; Xaal3 представляет собой Ala или Gln; Xaa14 представляет собой Ala, Leu, Met или пентилглицин; Xaa15 представляет собой Ala или Glu; Xaa16 представляет собой Ala или Glu; Xaa17 представляет собой Ala или Glu; Xaa19 представляет собой Ala или Val; Хаа20 представляет собой Ala или Arg; Xaa21 представляет собой Ala или Leu; Xaa22 представляет собой Phe или нафтилаланин; Хаа23 представляет собой Ile, Val или трет-бутилглицин; Хаа24 представляет собой Ala, Glu или Asp; Xaa25 представляет собой Ala, Trp или Phe; Хаа26 представляет собой Ala или Leu; Хаа27 представляет собой Ala или Lys; Хаа28 представляет собой Ala или Asn; Z1 представляет собой -ОН, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa31-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Хаа36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Хаа36 Xaa37 Xaa38-Z2 или Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Хаа36 Xaa37 Xaa38 Xaa39-Z2; Xaa31, Хаа36, Xaa37 и Xaa38 независимо представляют собой Pro, гомопролин, тиопролин или N-метилаланин; Хаа39 представляет собой Ser или Tyr, а более предпочтительно Ser; и Z2 представляет собой -ОН или -NH2, при условии не более, чем три из Хаа3, Хаа5, Хаа6, Хаа8, Xaa10, Xaa11, Xaa12, Хаа13, Хаа14, Хаа15, Хаа16, Хаа17, Хаа19, Хаа20, Хаа21, Хаа24, Хаа25, Хаа26, Хаа27 и Хаа28 представляют собой Ala, и если Xaa1 представляет собой His, Arg или Tyr, по меньшей мере, одна из Хаа3, Хаа4 и Хаа9 может быть Ala.
Особенно предпочтительные соединения химической Формулы I могут включать те, которые имеют аминокислотные последовательности от SEQ ID NO:5 до SEQ ID NO:93, изложенные в заявке РСТ с серийным номером PCT/US98/25728, или те, которые изложены в предварительной заявке США 60/066029, включенные в данное описание в качестве ссылки.
В соответствии с особенно предпочтительным аспектом обеспечиваются соединения, в которых Xaa14 представляет собой Leu, Ile, Val или пентилглицин, а более предпочтительно Leu или пентилглицин; и Хаа25 представляет собой Ala, Phe, Tyr или нафтилаланин, а более предпочтительно Phe или нафтилаланин. Эти соединения будут менее чувствительны по отношению к окислительной деградации, как в условиях in vitro, так и in vivo, равно как и во время синтеза соединения.
В другом аспекте производные экзендина также могут включать соединения, представленные химической Формулой II, или их фармацевтически приемлемыми солями.
(Химическая формула II)
Xaa1 Хаа2 Хаа3 Хаа4 Хаа5 Хаа6 Хаа7 Хаа8 Хаа9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Хаа13 Хаа14 Хаа15 Хаа16 Хаа17 Ala Хаа19 Хаа20 Хаа21 Хаа22 Хаа23 Хаа24 Хаа25 Хаа26 X1-Z1,
где
Xaa1 представляет собой His, Arg, Tyr, Ala, Norval, Val, Norleu или 4-имидазопропионил;
Xaa2 представляет собой Ser, Gly, Ala или Thr;
Хаа3 представляет собой Ala, Asp или Glu;
Xaa4 представляет собой Ala, Norval, Val, Norleu или Gly;
Xaa5 представляет собой Ala или Thr;
Хаа6 представляет собой Ala, Phe, Tyr или нафтилаланин;
Хаа7 представляет собой Thr или Ser;
Хаа8 представляет собой Ala, Ser или Thr;
Хаа9 представляет собой Ala, Norval, Val, Norleu, Asp или Glu;
Xaa10 представляет собой Ala, Leu, Ile, Val, пентилглицином (pentylglycine) или Met;
Xaa11 представляет собой Ala или Ser;
Xaa12 представляет собой Ala или Lys;
Xaa13 представляет собой Ala или Gln;
Xaa14 представляет собой Ala, Leu, Ile, пентилглицин, Val или Met;
Xaa15 представляет собой Ala или Glu;
Xaa16 представляет собой Ala или Glu;
Xaa17 представляет собой Ala или Glu;
Хаа19 представляет собой Ala или Val;
Хаа20 представляет собой Ala или Arg;
Хаа21 представляет собой Ala, Leu или Lys-NHε-R (где R представляет собой Lys, Arg, линейный или разветвленный алканоил с 1-10 атомами углерода или циклический аллил-алканоил);
Хаа22 представляет собой Phe, Tyr или нафтилаланин;
Хаа23 представляет собой Ile, Val, Leu, пентилглицин, трет-бутилглицин или Met;
Хаа24 представляет собой Ala, Glu или Asp;
Хаа25 представляет собой Ala, Trp, Phe, Tyr или нафтилаланин;
Хаа26 представляет собой Ala или Leu;
X1 представляет собой Lys Asn, Asn Lys, Lys-NHε-R Asn, Asn Lys-NHε-R, Lys-NHε-R Ala, Ala Lys-NHε-R (где R представляет собой Lys, Arg, линейный или разветвленный алканоил с 1-10 атомами углерода или циклоалкилалканоил);
Z1 представляет собой -ОН,
-NH2,
Gly-Z2,
Gly Gly-Z2,
Gly Gly Xaa31-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Хаа36 Xaa37-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Хаа36 Xaa37 Xaa38-Z2 или
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Хаа36 Xaa37 Xaa38 Xaa39-Z2,
(где Xaa31, Хаа36, Xaa37 и Xaa38 независимо выбраны из группы, состоящей из Pro, гомопролина, 3Нур, 4Нур, тиопролина, N-алкилглицина, N-алкилпентилглицина и N-алкилаланина, Xaa39 представляет собой Ser или Tyr, и Z2 представляет собой -ОН или -NH2),
при условии, что не более трех из Xaa3, Хаа4, Хаа5, Хаа6, Хаа8, Хаа9, Xaa10, Xaa11, Xaa12, Хаа13, Хаа14, Хаа15, Хаа16, Хаа17, Хаа19, Хаа20, Хаа21, Хаа24, Хаа25 и Хаа26 представляют собой Ala, а если Xaa1 представляет собой His, Arg, Tyr или 4-имидазопропионил, по меньшей мере, один из Xaa3, Хаа4 и Хаа9 представляет собой Ala.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут быть теми, в которых Xaa1 представляет собой His, Ala, Norval или 4-имидазопропионил, предпочтительно His, 4-имидазопропионил или Ala, а более предпочтительно His или 4-имидазопропионил.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут включать в себя те элементы, в которых Хаа2 представляет собой Gly.
Предпочтительные производные экзендина по Химической Формуле II могут быть теми, в которых Хаа4 представляет собой Ala.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут быть теми, в которых Хаа9 представляет собой Ala.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут быть теми, в которых Хаа14 представляет собой Leu, пентилглицин или Met.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут быть теми, в которых Хаа25 представляет собой Trp или Phe.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут быть теми, в которых Хаа6 представляет собой Ala, Phe или нафтилаланин, Хаа22 представляет собой Phe или нафтилаланин, и Хаа23 представляет собой Ile или Val.
Предпочтительные производные экзендина по Химической Формуле II могут включать в себя те элементы, в которых Z1 представляет собой -NH2.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут быть теми, в которых Хаа31, Хаа36, Хаа37 и Хаа38 независимо выбраны из группы, состоящей из Pro, гомопролина, тиопролина и N-алкилаланина.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут быть теми, в которых Хаа39 представляет собой Ser или Tyr и предпочтительно Ser.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут быть теми, в которых Z2 представляет собой -NH2.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут быть теми, в которых Z1 представляет собой -NH2.
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут быть теми, в которых Хаа21 представляет собой Lys-NHε-R (где R представляет собой Lys, Arg либо линейный или разветвленный алканоил с 1-10 атомами углерода).
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут быть теми, в которых X1 представляет собой Lys Asn, Lys-NHε-R Asn или Lys-NHε-R Ala (где R представляет собой Lys, Arg либо линейный или разветвленный алканоил с 1-10 атомами углерода).
Предпочтительные производные экзендина химической формулы II могут включать соединения, имеющие аминокислотные последовательности, идентифицированные как SEQ ID NO:95- SEQ ID NO:110, представленные в WO99/025728. Производные экзендина химической формулы II могут включать соединения, имеющие аминокислотные последовательности, идентифицированные как SEQ ID NO:5- SEQ ID NO:93, как описано в РСТ заявке PCT/US98/24210, поданной 13 ноября 1998 г. с названием «Новые соединения агониста экзендина» ("Novel Exendin Agonist Compounds"). В другом аспекте производные экзендина химической формулы II могут включать соединения, имеющие аминокислотные последовательности, идентифицированные как SEQ ID NO:37- SEQ ID NO:40, приведенные в WO99/007404. Вышеуказанные документы включены в настоящее описание в качестве ссылок.
Аббревиатуры, использованные в химических формулах I и II, имеют следующие значения.
"ACN" и "CH3CN" означают ацетонитрил.
"Вое", "tBoc" и "Tboc" означают трет-бутоксикарбонил.
"DCC" означает N,N'-дициклогексилкарбодиимид.
"Fmoc" означает фторэнилметоксикарбонил.
"HBTU" означает 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3,-тетраметилурониума гексафторфосфат.
"HOBt" означает 1-гидроксибензотриазола моногидрат.
"homoP" и "hPro" означают гомопролин.
"MeAla" и "Nme" означает N-метилаланин.
"naph" означает нафтилаланин.
"pG" и "pGly" означают пентилглицин.
"tBuG" означает третичный бутилглицин.
"ThioP" и "tPro" означает тиопролин.
"3Нур" означает 3-гидроксипролин.
"4Нур" означает 4-гидроксипролин.
"NAG" означает N-алкилглицин.
"NAPG" означает N-алкилпентилглицин.
"Norval" означает норвалин.
В предпочтительном примере осуществления фрагменты или производные экзендина могут иметь С-конец, замещенный или не замещенный амидной группой, и могут быть выбраны из группы, состоящей из экзендина-4 (1-28) (SEQ ID NO:3), экзендина-4(1-28) амида, экзендина-4(1-30) (SEQ ID NO:4), экзендина-4(1-30) амида, экзендина-4 (1-31) (SEQ ID NO:5), экзендина-4(1-31) амида, 14Leu25Phe экзендина-4(SЕО ID NO:6), 14Leu25Phe экзендина-4 амида и их фармацевтически приемлемых солей.
Согласно предпочтительному примеру осуществления композиция или микросферы с контролируемым высвобождением могут содержать экзендин в качестве активного ингредиента в количестве от 0,1 до 10 масс. частей, а более предпочтительно от 0,8 до 6 масс. частей, в расчете на 100 мас. частей композиции или микросферы, содержащих экзендин, биоразлагающиеся полимеры и покрывающие материалы. Если количество экзендина, содержащегося в композиции или микросферах в соответствии с настоящим изобретением, ниже вышеуказанного диапазона, действенный эффект экзендина не может быть получен, а если количество экзендина выше вышеуказанного диапазона, начальный пик экзендина повышается, тем самым вызывая побочные эффекты вследствие чрезмерного начального пика, и таким образом, предпочтительно, чтобы количество экзендина было в пределах вышеуказанного диапазона.
Биоразлагающийся полимер относится ко всем полимерам, не наносящим вред человеческому организму, так как при его введении в организм он может медленно разлагаться и выводится. Биоразлагающийся полимер может включать один полимер или более, выбранный из группы, состоящей из полилактида (PLA), полигликолида (PGA), сополимера лактида и гликолида (PLGA), сложного полиортоэфира, полиангидрида, полигидроксимасляной кислоты, поликапролактона и полиалкилкарбоната, а также сополимеров одного полимера или более и полиэтиленгликоля (PEG), при этом один полимер или более могут быть в форме сополимера или простой смеси.
Например, биоразлагающийся полимер может быть одним полимером или более, выбранным из группы, состоящей из сополимеров лактида и гликолида (PLGA), состоящих из RG502H (IV=0,16…0,24 дл/г), RG503H (IV=0,32…0,44 дл/г) и RG504H (IV=0,45…0,60 дл/г), имеющих соотношение лактида и гликолида, равное 1:1, и RG752H (IV=0,14…0,22 дл/г), имеющим соотношение лактида и гликолида, равное 75:25, полилактидов (PLA), R202H (IV=0,16…0,24 дл/г) и R203H (IV=0,25…0,35 дл/г), которые предоставляются Boehringer-Ingelheim company, Германия; сополимеров лактида и гликолида), 5050DL 2А (IV=0,15…0,25 дл/г), 5050DL 3А (IV=0,25…0,43 дл/г), и 5050DL 4А (IV=0,38…0,48 дл/г), которые являются сополимерами, предоставляемыми Lakeshore Biomaterials Company (ранее Alkermes Company), США, имеющими соотношение лактид и гликолида, равное 1:1; и тому подобное.
В другом аспекте биоразлагающийся полимер может быть полимерно-сахарным комплексом, в котором сахар связывается с полимером, выбранным из группы, состоящей из полилактидов (PLA), полигликолидов (PGA), сополимеров лактида и гликолида (PLGA), сложных полиортоэфиров, полиангидридов, полигидроксимасляных кислот, поликапролактонов и полиалкилкарбонатов,
сополимером, по меньшей мере, двух полимеров из указанной группы полимеров или
сополимером полиэтиленгликоля (PEG) и одного полимера из указанной группы полимеров.
В примере осуществления настоящего изобретения, полимерно-сахарный комплекс может относиться к комплексу, в котором полимер замещен гидкроксильной группой сахара. Сахар может включать моносахариды и полисахариды, которые включают от 1 до 8 сахаридных единиц, при этом каждая сахаридная единица включает от 3 до 6 гидроксильных групп, и линейные сахарные спирты, включающие от 3 до 6 гидроксильных групп и имеющие молекулярную массу 20,000 или меньше. Сахарные спирты могут включать маннитол, пентаэритритол, сорбитол, рибитол и ксилитол. Полимер связывается с сахаром по трем или более гидроксильным группам, присутствующим в сахаре.
В соответствии с вышеизложенным примером осуществления полимерно-сахарный комплекс в условиях in vivo обладает свойствами, схожими со свойствами полимера, связанного с сахаром, имеет различные скорости разложения в зависимости от типа используемого полимера и в организме разлагается до безвредного полимера и сахара, а следовательно, он может быть подходящим как биоразлагающийся полимер. В предпочтительном примере осуществления полимерно-сахарный комплекс может быть PLA-глюкозным комплексом, PGA-глюкозным комплексом или PLGA-глюкозным комплексом, при этом PLGA-глюкозный комплекс может быть комплексом, имеющим следующую структуру:
В микросфере с контролируемым высвобождением согласно настоящему изобретению покровный слой, выполненный на ее поверхности, позволяет обеспечить эффективный контроль начального пика экзендина, тем самым предотвращая побочные эффекты, вызванные чрезмерным начальным пиком. Биоразлагающийся полимер может использоваться без какого-либо ограничения вязкости.
В композиции с контролируемым высвобождением согласно настоящему изобретению биоразлагающийся полимер выполняет роль матрицы для сохранения активного ингредиента, экзендина, у которой неудовлетворительно низкая вязкость полимера не позволяет эффективно сохранять активный ингредиент, что, как следствие, повышает начальный пик, а чрезмерно высокая вязкость полимера вызывает снижение общего высвобождаемого количества активного ингредиента, что, как следствие, снижает его биодоступность. В настоящем изобретении не только биоразлагающийся полимер, но также и покрывающие материалы, содержащиеся в композиции, выполняют роль контролирования высвобождения лекарственного препарата, и таким образом, может быть использован биоразлагающийся полимер, имеющий относительно низкую вязкость. Следовательно, чтобы эффективно контролировать начальный пик лекарственного препарата и повысить биодоступность, характеристическая вязкость (IV) биоразлагающегося полимера, измеряемая для биоразлагающегося полимера, растворенного в хлороформе при концентрации 1% (масса/объем) при 25±0,1°C с использованием вискозиметра Уббелоде, предпочтительно может быть от 0,1 до 0,6 дл/г, более предпочтительно от 0,15 до 0,31 дл/г и еще более предпочтительно от 0,16 до 0,24 дл/г.
В композиции или в микросферах по настоящему изобретению биоразлагающийся полимер выполняет роль матрицы для сохранения активного ингредиента в процессе высвобождения и для контролирования скорости высвобождения, при этом его содержание в композиции или в микросферах предпочтительно может быть от 85 до 99.89 мас. частей, а более предпочтительно - от 91 до 99 мас. частей в расчете на 100 мас. частей композиции или микросфер, содержащих экзендин, биоразлагающийся полимер(ы) и покрывающий материал(ы).
Покрывающий материал используется для предупреждения чрезмерного высвобождения и повышения биодоступности активного ингредиента, и в микросферах по настоящему изобретению он может быть в виде покровного слоя на их поверхности. Покрывающий материал может быть одним материалом или более, выбранным из основных аминокислот, полипептидов и органических азотистых соединений. Основная аминокислота может включать аргинин, лизин, гистидин и их производные. Полипептид может включать от 2 до 10 аминокислот, а более предпочтительно от 2 до 5 аминокислот, в том числе одну аминокислоту или более, выбранную из аргинина, лизина и гистидина. Полипептид может включать в себя больше основных аминокислот, чем кислых аминокислот, тем самым проявляя свойства основания. Например, полипептид может быть L-Ala-L-His-L-Lys, L-Arg-L-Phe, Gly-L-His, Gly-L-His-Gly, Gly-L-His-L-Lys, L-His-Gly, L-His-Leu, L-Lys-L-Tyr-L-Lys, L-His-L-Val, L-Lys-L-Lys, L-Lys-L-Lys-L-Lys, L-Lys-L-Thr-L-Thr-L-Lys-L-Ser, и т.п. Кроме того, органическое азотистое соединение может быть креатином, креатинином, мочевиной и т.п.
Количество покрывающего материала, содержащегося в композиции по настоящему изобретению или нанесенного на микросферы, предпочтительно может составлять от 0,01 до 5 мас. частей, а более предпочтительно - от 0,015 до 3 мас. частей в расчете на 100 мас. частей композиции или микросфер, содержащих экзендин, биоразлагающийся полимер(ы) и покрывающий материал(ы). Эффективный контроль высвобождения лекарственного препарата не может быть достигнут, если содержание покрывающего материала ниже указанного диапазона, в то же время эффект контролирования начального пика дополнительно не возрастает, даже если содержание покрывающего материала повышается сверх вышеуказанного диапазона. Таким образом, вышеуказанный диапазон содержания покрывающего материала может быть предпочтительным.
В соответствии с настоящим изобретением каждая микросфера с контролируемым высвобождением имеет гладкую поверхность, покрытую покрывающим материалом, и средний размер от 1 до 50 мкм, и предпочтительно от 5 до 30 мкм (см. Фиг.4-b). Такая гладкая поверхность микросферы позволяет достичь эффективный контроль начального пика и наилучшую биодоступность.
В отличие от обычной формы микросфера с контролируемым высвобождением или микросфера, полученная из композиции в соответствии с настоящим изобретением, покрыта покрывающим материалом, обеспечивающим предупреждение чрезмерного начального пика и повышение биодоступности, которые не могут быть достигнуты в обычной экзендинсодержащей микросфере. В частности, чрезмерный начальный пик экзендина вызывает различные побочные эффекты, такие как рвота, тошнота, головная боль и тому подобные, а следовательно, снижение величины начального пика до 5% или ниже является очень важным. Микросфера с контролируемым высвобождением или микросфера, полученная из композиции в соответствии с настоящим изобретением, позволяет снизить высвобождаемое количество в первые 24 часа до 5% или ниже. С целью снижения побочных эффектов, связанных с введением экзендинсодержащих микросфер с контролируемым высвобождением, величина начального пика в первый час может быть предпочтительно 5% или ниже, а более предпочтительно - 1% или ниже, как измерено посредством теста на высвобождение in vitro, описанного здесь.
Было предпринято несколько попыток снизить побочные эффекты, обусловленные чрезмерным начальным пиком экзендинсодержащих микросфер, полученных обычными способами. Однако большинство таких попыток, в результате которых было достигнуто успешное предупреждение чрезмерного начального пика, имеют некоторые проблемы в том, что общее высвобождение снижается как и начальный пик, вследствие чего значительно снижается биодоступность лекарственного препарата. Однако микросферы по настоящему изобретению содержат покровный слой из покрывающего материала на их поверхности, что позволяет обеспечить эффективный контроль начального пика для исключения побочных эффектов, обусловленных чрезмерным начальным пиком, и получить продолжительное и достаточное высвобождение лекарственного препарата для достижения наилучшей биодоступности.
В примере осуществления настоящего изобретения композиция или микросферы могут дополнительно содержать наполнители, например защитные коллоиды и/или стабилизаторы.
Композиция или микросферы могут дополнительно содержать один защитный коллоид или более, выбранный из поливиниловых спиртов, альбуминов, поливинилпирролидонов, желатинов и т.п. Насмотря на то что защитный коллоид не обладает специальным свойством предупреждения чрезмерного начального пика экзендина, содержащегося в микросферах, он выполняет роль предупреждения аггрегации между микросферами и улучшать диспергируемость. С учетом данной роли содержание защитного коллоида предпочтительно может составлять по массовой доле от 0,02% до 1,0% в расчете на общую массу композиции или микросфер, содержащих экзендин, биоразлагающийся полимер(ы) и покрывающий материал(ы).
Кроме того, для повышения стабильности микросфер в процессе лиофилизации композиция или микросферы по настоящему изобретению дополнительно могут содержать наполнители, выбранные из маннитола, трегалозы, сахарозы, натрия карбоксиметилцеллюлозы и т.п., в массовой доле от 5% до 30%, а более предпочтительно - в массовой доле от 10% до 20% в расчете на общую массу композиции или микросфер, содержащих экзендин, биоразлагающийся полимер(ы) и покрывающий материал(ы).
Также композиция или микросферы по настоящему изобретению дополнительно могут содержать любые добавки и наполнители, обычно используемые в составе лекарственных средств, тип и содержание которых могут быть без труда определены специалистом в соответствующей области.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает способ получения экзендинсодержащих микросфер с контролируемым высвобождением, описанных выше. В соответствии с настоящим изобретением, экзендинсодержащие микросферы с контролируемым высвобождением могут быть получены различными способами, например путем покрытия поверхности микросфер посредством суспензирования микросфер в растворе покрывающего материала в процессе или после получения микросфер для получения микросфер с контролируемым высвобождением. Способ получения микросфер в соответствии с настоящим изобретением может быть осуществлен методом двойной эмульсии (метод «вода-масло-вода»), методом одинарной эмульсии (метод «масло-вода»), методом фазового разделения, методом распылительной сушки и т.п.
Конкретно способ получения экзендинсодержащих микросфер с контролируемым высвобождением может включать следующие операции:
смешивание экзендина и биоразлагающегося полимера(ов) для получения эмульсии типа «вода в масле» или гомогенной смеси; и
эмульгирование путем добавления эмульсии или гомогенной смеси в водный раствор покрывающего материала для образования покровного слоя.
Еще конкретнее, в случае использования метода двойной эмульсии, способ по настоящему изобретению может включать операции эмульгирования путем смешивания водного раствора экзендина и биоразлагающегося полимера, растворенного в органическом растворителе, для образования первичной эмульсии (типа «вода в масле»); суспензирования эмульсии в водном растворе покрывающего материала для образования эмульсии типа «вода-масло-вода»; нагрева эмульсии типа «вода-масло-вода» для удаления растворителя и затвердевания полученных микросфер; сбора и промывки затвердевших микросфер; и лиофилизации микросфер. Органический растворитель может быть любым органическим растворителем, который способен образовывать эмульсию путем растворения биоразлагающегося полимера и затем смешиваться с водным раствором, и, например, он может быть одним или более раствором, выбранным из группы, состоящей из хлороформа, этилацетата, метиленхлорида и метилэтилкетона, а более предпочтительно метиленхлорида. В данном случае покрывающий материал содержится во вторичной водной фазе (внешняя водная фаза эмульсии «вода-масло-вода»), для образования покровного слоя на внешней стороне микросфер, содержащих экзендин и биоразлагающийся полимер, когда удаляется органический растворитель.
В другом случае, если используется метод одинарной эмульсии, способ по настоящему изобретению может включать операции растворения экзендина и биоразлагающегося полимера в органическом растворителе для образования гомогенной смеси; добавления водного раствора, содержащего покрывающий материал, к полученной смеси для образования эмульсии; нагрева эмульсии для удаления растворителя и затвердения полученных микросфер; сбора и промывки затвердевших микросфер; и лиофилизации микросфер. Органическим растворителем может быть любой органический растворитель, способный как полностью смешивать экзендин и биоразлагающийся полимер для образования гомогенной смеси, так и смешиваться с водным раствором для образования эмульсии. Например, органическим растворителем может быть смешанный растворитель, в котором смешаны один растворитель или более, выбранный из группы, состоящей из спиртов, имеющих от 1 до 5 атомов углерода, ледяной уксусной кислоты, муравьиной кислоты, диметилсульфоксида и N-метилпирролидона, и один растворитель или более, выбранный из группы, состоящей из хлороформа, этилацетата, метилэтилкетона и метиленхлорида, и предпочтительно, в котором смешаны метанол и метиленхлорид. В этом случае поверхность окончательно полученных микросфер имеет покровный слой на ней за счет эмульгирования гомогенной смеси биоразлагающегося полимера и экзендина и добавления покрывающего материала к водному раствору для удаления органического растворителя.
В другом аспекте способ получения экзендинсодержащих микросфер с контролируемым высвобождением по настоящему изобретению может включать операции:
смешивания экзендина и биоразлагающегося полимера для образования эмульсии или гомогенной смеси;
отверждения полученной эмульсии или гомогенной смеси для получения первичных микросфер; и
суспензирования полученных первичных микросфер в водном растворе покрывающего материала для образования покровного слоя на каждой микросфере.
Способ отверждения не имеет ограничения и может быть любым способом отверждения, обычно используемым в соответствующей области, например, способом разделения фаз или способом распылительной сушки.
Более конкретно, в случае применения способа разделения фаз на операции отверждения способ по настоящему изобретению может включать операции:
смешивания водного раствора экзендина и биоразлагающегося полимера, растворенного в органическом растворителе, для образования эмульсии или смешивания экзендина и биоразлагающегося полимера в смешанном растворителе для образования раствора гомогенной смеси;
добавления масла, например силиконового масла, к полученной эмульсии или раствору для получения первичных микросфер;
добавления осадителя для биоразлагающегося полимера, например смешанного растворителя из спирта, имеющего от 1 до 5 атомов углерода, и алкана, имеющего от 1 до 12 атомов углерода, предпочтительно смешанного растворителя из этанола и гептана, для удаления органического растворителя из микросфер и затвердения микросфер;
суспензирования полученных микросфер в водном растворе покрывающего материала для образования покровного слоя на каждой микросфере; и
сбора, промывки и лиофилизации микросфер с образованным покровным слоем.
Органический растворитель может быть одним растворителем или более, выбранным из группы, состоящей из хлороформа, этилацетата, метиленхлорида и метилэтилкетона, а предпочтительно он может быть метиленхлоридом. Смешанный растворитель может быть таким, в котором смешаны один растворитель или более, выбранный из группы, состоящей из спирта, имеющего от 1 до 5 атомов углерода, ледяной уксусной кислоты, муравьиной кислоты, диметилсульфоксида и N-метилпирролидона, и один растворитель или более, выбранный из группы, состоящей из хлороформа, этилацетата, метилэтилкетона и метиленхлорида, и предпочтительно он может быть смешанным растворителем из метанола и метиленхлорида.
В другом случае, если используется способ распылительной сушки, способ по настоящему изобретению может включать операции:
смешивание водного раствора экзендина и биоразлагающегося полимера, растворенного в органическом растворителе, для образования эмульсии или смешивания экзендина и биоразлагающегося полимера в одинарном растворителе или смешанном растворителе для образования раствора гомогенной смеси;
распылительной сушки полученной эмульсии или раствора для получения первичных микросфер;
суспензирования полученных первичных микросфер в водном растворе покрывающего материала для образования покровного слоя на каждой микросфере; и
промывки и лиофилизации микросфер с образованным слоем покрытия.
Органический растворитель может быть одним растворителем или более, выбранным из группы, состоящей из хлороформа, этилацетата, метиленхлорида и метилэтилкетона, и предпочтительно он может быть метиленхлоридом. Одинарный растворитель может быть одним растворителем или более, выбранным из группы, состоящей из ледяной уксусной кислоты и муравьиной кислоты, а смешанный растворитель может быть таким, в котором смешаны один растворитель или более, выбранный из группы, состоящей из спирта, имеющего от 1 до 5 атомов углерода, ледяной уксусной кислоты, муравьиной кислоты, диметилсульфоксида и N-метилпирролидона, и один растворитель или более, выбранный из группы, состоящей из хлороформа, этилацетата, метилэтилкетона и метиленхлорида, смешаны, и предпочтительно он является смешанным растворителем из метанола и метиленхлорида.
В соответствии с настоящим изобретением, способ может дополнительно включать операцию добавления защитного коллоидного материала любым обычным способом, а предпочтительно защитный коллоидный материал может быть добавлен на операции покрытия микросфер покрывающим материалом.
Предпочтительная концентрация покрывающего материала, растворенного в водной фазе или в водном растворе, может быть от 0,01 М до 1 М, и предпочтительно, от 0,1 М до 0,5 М. Более низкая концентрация покрывающего материала, чем вышеуказанный диапазон, не позволяет полностью покрыть поверхность микросфер покрывающим материалом, в то время как более высокая концентрация покрывающего материала, чем вышеуказанный диапазон, приводит к перенасыщению раствора покрывающего материала, что не может привести к повышенному эффекту по контролированию начального пика, и таким образом, концентрация покрывающего материала предпочтительно может быть в вышеуказанном диапазоне.
В способе по настоящему изобретению, типы и содержание экзендина, биоразлагающихся полимеров и покрывающих материалов являются такими, что описаны выше.
Экзендинсодержащая композиция по настоящему изобретению может вводиться оральным или парентеральным путями, и предпочтительно парентеральным путем, например внутривенно, подкожно, внутримышечно, внутрибрюшинно и т.п. Следовательно, в предпочтительном примере осуществления настоящего изобретения экзендинсодержащая композиция может применяться в качестве раствора для инъекций в виде диспергированного раствора. Эффективное количество композиции может быть соответствующим способом подобрано в зависимости от возраста субъекта, типа и тяжести заболевания и состояния субъекта, а дозировка активного ингредиента в композиции может составлять от 0,01 до 100 мкг/кг/день, и более предпочтительно, от 0,1 до 10 мкг/кг/день, данная доза может быть введена одноразово или с разделением на несколько раз.
Далее настоящее изобретение объясняется более подробно со ссылкой на нижеследующие примеры. Эти примеры, однако, не должны толковаться как ограничивающие объем настоящего изобретения любым образом.
ПРИМЕР 1
<Пример 1> Получение микросфер, содержащих экзендин-4, способом распылительной сушки
4,850 г биоразлагающегося полимера, RG502H (лот №1009848, IV=0,19 дл/г), и 0,150 г экзендина-4 (Polypeptide Laboratories, США) были растворены до однородного состояния в 97 мл ледяной уксусной кислоты. Чтобы получить микросферы, подготовленный раствор был помещен в распылительную сушилку (SODEVA, Франция), оснащенную ультразвуковым соплом (Sono-tek, 120 кГц) со скоростью потока 1,5 мл/мин с использованием поршневого насоса при подаче осушенного воздуха при температуре 180°С. Полученные микросферы суспензировались в 0,5 М водном растворе лизина (состав 1-1), в 0,01 М водном растворе лизина (состав 1-2), в 0,1 М водном растворе гистидина (состав 1-3) и в 0,5 М водном растворе аргинина (состав 1-4), соответственно, в которых растворы содержат 1% (масса/объем) поливинилового спирта (торговая марка поливинилового спирта Gohsenol, EG-50) в качестве защитного коллоида; перемешивались в течение трех часов, были собраны, промыты дистиллированной водой и затем подвергнуты сублимационной сушке. Для сравнения были осуществлены те же операции суспензирования, перемешивания, промывки и сублимационной сушки за исключением использования 1% водного раствора поливинилового спирта (масса/объем) без покрывающих материалов (состав 1).
<Пример 2> Эффекты композиции в зависимости от полимера
Микросферы, содержащие экзендин-4, были получены тем же способом, что и в примере 1, за исключением использования RG503H (лот №1006370, IV=0,38 дл/г, составы 2, 2-1 и 2-2), смеси в том же количестве RG502H и RG503H (лот №1009848: лот №1006370=1:1, IV=0,29 дл/г, составы 3 и 3-1), RG504H (лот №1016605, IV=0,51 дл/г, составы 4 и 4-1), 5050DL 2А (лот №LP-207, IV=0,18 дл/г, составы 5 и 5-1), и 5050DL 4А (лот №LP-206, IV=0,46 дл/г, составы 6 и 6-1), в качестве биоразлагающегося полимера.
<Экспериментальный пример 1-1> Испытание эффектов покрытия микросфер
Содержание экзендина в микросферах, полученных в примерах 1 и 2, было количественно определено следующим способом. Экзендин-4 (Polypeptide Laboratories, США) растворили в ДМСО (диметилсульфоксид), развели с помощью ДМСО до концентраций растворов 2, 5, и 10 мкг/мл, соответственно, которые были использованы в качестве стандартных растворов, и подвергли измерению флюоресцентным методом при возбуждении Ех 280 нм и излучении Em 350 нм с использованием флюоресцентного спектрометра (Cary Eclipse, Varian, США) для получения шкалы измерения. Полученные микросферы растворили в ДМСО до концентрации 150 мкг/мл, и затем флюоресценцию, измеренную по ним, экстраполировали в шкалу измерения, тем самым определив содержание экзендина в микросферах.
Для определения содержания покрывающих материалов, используемых в композиции по настоящему изобретению, и в частности, лизина, аргинина, гистидина и т.п., содержащихся в поверхности микросфер, был использован метод количественного анализа с флюорескамином. Раствор, в котором полученные микросферы растворили в ДМСО до концентрации в 150 мкг/мл, был смешан с 0,01% ацетоновым раствором флюорескамина (масса/объем) и 0,5М раствора натрия бората (рН 9,5), выдержан при комнатной температуре в течение 20 минут и подвергнут измерению флюоресцентным методом при возбуждении Ех 392 нм и излучении Em 480 нм с использованием флюоресцентного спектрометра (Сагу Eclipse, Varian, США). Применяя тот же самый метод, используемые покрывающие материалы растворили в ДМСО и развели посредством ДМСО до концентраций 2, 5, и 10 мкг/мл, соответственно, для получения стандартных растворов. После этого провели измерение флюоресцентным методом, чтобы получить шкалу измерений, осуществив таким образом количественный анализ покрывающих материалов в поверхности микросфер.
Для подтверждения ингибирующего эффекта начального пика за счет микросфер были произведены измерения in vitro высвобождаемых количеств из микросфер, покрытых покрывающим материалом, и из существующих микросфер без покрытия. 10 мг каждого вида микросфер были суспензированы в 1 мл контрольного раствора на высвобождение (10 мМ HEPES (биологический буфер, представляющий собой натриевую соль N-(2-гидроксиэтил)пиперазин-N'-2-этансульфоновой кислоты - примеч. перевод.), рН 7,5, 100 мМ NaCl), и выдержаны при 37°C с постоянным вращением 5 оборотов в минуту. После 1 и 24 часов каждый образец был собран и подвергнут центрифугированию. Высвобожденное количество экзендина в надосадочной жидкости определяли посредством измерения методом флюоресценции при возбуждении Ех 280 нм и излучении Em 350 нм.
Содержание и начальный пик in vitro микросфер, полученных в данном примере, были изучены в соответствии с вышеизложенным описанием, а полученные результаты были суммированы в нижеследующей Таблице 1. Таблица 1 показывает снижение начального пика in vitro в зависимости от типов покрывающих материалов и биоразлагающихся полимеров.
| Таблица 1 | |||||||
| Состав № | Полимер | Суспензия | Наме чен ная нагрузка (%) |
Действительное содержание лекарственного препарата (%) | Содержание основных органических материалов в поверхности(%) | Высвобождение после 1 часа (%) | Высвобожде ние после 24 часов (%) |
| 1 | 502Н | 1% поливиниловый спирт | 3 | 2,76 | - | 4,50 | 9,90 |
| 1-1 | 502Н | 1% поливиниловый спирт + 0,5М лизин | 3 | 2,73 | 0,249 | 0,79 | 3,84 |
| 1-2 | 502Н | 1% поливиниловый спирт + 0,01М лизин | 3 | 2,72 | 0,099 | 3,76 | 5,66 |
| 1-3 | 502Н | 1% поливиниловый спирт + 0,1М гистидин | 3 | 2,71 | 0,015 | 1,53 | 3,51 |
| 1-4 | 502Н | 1% поливиниловый спирт + 0,5М аргинин | 3 | 2,56 | 0,156 | 1,46 | 4,60 |
| 2 | 503Н | 1% поливиниловый спирт | 3 | 2,88 | - | 1,40 | 1,50 |
| 2-1 | 503Н | 1% поливиниловый спирт + 0,5М лизин | 3 | 2,96 | 0,057 | 0,00 | 0,29 |
| 2-2 | 503Н | 1% поливиниловый спирт + 0,1М гистидин | 3 | 2,85 | 0,132 | 0,00 | 0,58 |
| 3 | 502Н:503Н | 1% поливиниловый спирт | 3 | 2,75 | - | 2,80 | 4,0 |
| 3-1 | 502Н:503Н | 1% поливиниловый спирт + 0,5М лизин | 3 | 2,91 | 0,056 | 0,00 | 0,75 |
| 4 | 504Н | 1% поливиниловый спирт | 3 | 2,46 | - | 1,23 | 2,25 |
| 4-1 | 504Н | 1% поливиниловый спирт + 0,5М лизин | 3 | 2,47 | 0,018 | 0,81 | 0,84 |
| 5 | 5050DL 2А | 1% поливиниловый спирт | 3 | 2,53 | - | 1,31 | 1,95 |
| 5-1 | 5050DL 2А | 1% поливиниловый спирт + 0,5М лизин | 3 | 2,54 | 0,034 | 1,02 | 1,66 |
| 6 | 5050DL 4А | 1% поливиниловый спирт | 3 | 2,40 | - | 1,21 | 2,03 |
| 6-1 | 5050DL 4А | 1% поливиниловый спирт + 0,5М лизин | 3 | 2,51 | 0,018 | 0,79 | 0,82 |
Как показано в Таблице 1, выявляется, что высвобожденные количества составов, покрытых покрывающими материалами в соответствии с настоящим изобретением, в течение первого часа и через 24 часа снижаются по сравнению с составами 1, 2, 3, 4, 5 и 6, которые только суспензируются в защитном коллоиде, растворе поливинилового спирта с последующей распылительной сушкой. Такие эффекты получаются независимо от диапазона вязкости полимера и являются важными в предотвращении побочных эффектов, вызванных резким повышением начальной концентрации в крови непосредственно после введения экзендинсодержащих микросфер с контролируемым высвобождением.
<Экспериментальный пример 1-2> Снижение концентрации препарата в крови на начальной стадии после введения в соответствии с вязкостью полимеров и покрывающих материалов
Поскольку побочные эффекты экзендинов вызваны резким повышением концентрации лекарственного препарата в крови на начальной стадии после введения, очень важно предупредить повышение концентрации лекарственного препарата в крови вследствие начального высвобождения лекарственного препарата непосредственно после его введения. Было обнаружено, что при использовании составов в соответствии с настоящим изобретением концентрации лекарственного препарата в крови достигают пикового значения в течение часа после введения и затем снижаются. Для определения биодоступности и пика начальной концентрации в крови (конц. через 1 час) после введения составов, полученных по примерам 1 и 2, эти составы были введены самцам крыс S. D. (генетической линии Sprague-Dawley - примеч. перевод.) (350±20 g). Экзендинсодержащие микросферы, полученные, как указано выше, были суспензированы в питательной среде (0,5% (массовая доля) натрия карбоксилметилцеллюлозы, 5% (массовая доля) маннитола и 0,1% (массовая доля) Твин 80 (полисорбат 80 - примеч. перевод.) и затем введены посредством подкожных инъекций с дозировкой 0,6 мг (экзендина)/кг после анестезии эфиром. Кровь взяли из хвостовой вены в момент времени 0 и в конце первого часа, а также в 1-й, 2-й, 4-й, 7-й, 14-й, 21-й и 28-й день после введения, и осуществили центрифугирование при 12000 оборотов в минуту при 4°С в течение 10 минут. Затем собрали полученную из нее сыворотку и поместили ее на хранение при -20°С. Экзендин в сыворотке был количественно определен с использованием набора для ферментного иммунологического анализа (ЕК-070-94, Phoenix Pharmaceuticals, Inc., США), а относительную биодоступность сравнили с площадью под кривой для полученного графика «концентрация в крови - время».
Полученные графики концентрации в крови показаны на Фиг.1-3, а полученные результаты суммированы в Таблице 2. Таблица 2 показывает результаты снижения концентрации лекарственного препарата в крови на начальной стадии после введения и сравнение площади под кривой в соответствии с вязкостью покрывающих материалов и полимеров.
| Таблица 2 | |||||
| Сос тав № |
Полимер | Суспензия | Действительное содержание лекарственного препарата (мас.%) | Концентрация через 1 час | Площадь под кривой (пг·день/мл) |
| 1 | 502Н | 1% поливиниловый спирт | 2,76 | 10969 (1 час) | 24169 |
| 1-1 | 502Н | 1% поливиниловый спирт + 0,5М лизин | 2,73 | 900 (1 час) | 26681 |
| 2 | 503Н | 1% поливиниловый спирт | 2,88 | 3561 (1 час) | 5401 |
| 2-1 | 503Н | 1% поливиниловый спирт + 0,5М лизин | 2,96 | 159 (1 час) | 5569 |
| 3 | 502Н:503Н | 1% поливиниловый спирт | 2,75 | 6363 (1 час) | 8030 |
| 3-1 | 502Н:503Н | 1% поливиниловый спирт + 0,5М лизин | 2,91 | 320 (1 час) | 10909 |
Как показано на Фиг.1-3 и в Таблице 2, выявляется, что непокрытые составы проявляют более высокий пик концентрации в крови на начальной стадии после введения, чем покрытые составы. Кроме того, также выявляется, что полимер RG502H, обладающий самой низкой вязкостью, показал самую высокую величину площади под кривой, т.е. самую высокую биодоступность, и что покрытие покрывающими материалами дает улучшение биодоступности как составов с полимерами, имеющими высокую молекулярную массу, так и составов с полимерами, имеющими низкую молекулярную массу. В заключение, несмотря на то, что биодоступность зависит от вязкости используемого полимера, эффективное ингибирование начального пика, которое не может быть достигнуто при использовании существующих составов, полученных обычными способами, достигается за счет покрытия покрывающими материалами в соответствии с настоящим изобретением.
<Пример 3> Получение микросфер с различной лекарственной нагрузкой
Биоразлагающийся полимер RG502H и экзендин-4 были смешаны так, чтобы обеспечить содержание экзендина-4 с массовой долей 1% (составы 7 и 7-1) и массовой долей 7% (составы 8 и 8-1), соответственно, и смеси были растворены в ледяной уксусной кислоте. Полученные растворы подвергли распылительной сушке тем же способом, что и в примере 1 для получения микросфер. Полученные микросферы суспензировали в 1% водном растворе поливинилового спирта (составы 7 и 8), и водном растворе 1% поливинилового спирта и 0,5 М лизина (составы 7-1 и 8-1), соответственно, в течение трех часов, а затем собрали, промыли дистиллированной водой и подвергли лиофилизации.
<Экспериментальный пример 2> Снижение начального пика в зависимости от различной лекарственной нагрузки
Количественный анализ начального пика микросфер, полученных в Примере 3, был произведен тем же методом, что и в экспериментальном примере 1-1, а полученные результаты суммируются в Таблице 3. Таблица 3 показывает эффект покрытия покрывающими материалами в зависимости от содержания лекарственного препарата.
| Таблица 3 | |||||
| Состав № | Намеченная нагрузка (%) | Действительное содержание лекарственного препарата (%) | Содержание основных органических материалов в поверхности(%) | Высвобождение через 1 час (%) | Высвобождение через 24 часа(%) |
| 7 | 1 | 0,85 | - | 3,06 | 3,87 |
| 7-1 | 1 | 0,81 | 0,295 | 2,63 | 3,68 |
| 1 | 3 | 2,76 | - | 4,50 | 9,90 |
| 1-1 | 3 | 2,73 | 0,249 | 0,79 | 3,84 |
| 8 | 7 | 5,79 | - | 8,00 | 11,34 |
| 8-1 | 7 | 5,85 | 1,636 | 2,04 | 5,47 |
Как показано в Таблице 3, составы 1, 7 и 8, которые не покрыты покрывающими материалами, демонстрируют повышенный начальный пик в соответствии с увеличением количества экзендина, введенного в биоразлагающийся полимер, в то время как составы 1-1, 7-1 и 8-1, которые покрыты покрывающими материалами, демонстрируют значительно сниженный начальный пик, несмотря на количество экзендина, введенного в биоразлагающийся полимер.
<Пример 4> Получение микросфер, содержащих экзендин-4, методом двойной эмульсии
970 мг RG502H растворили в 3,23 мл дихлорметана (Junsei Chem.). 30 mg экзендина-4, растворенного в 0,3 мл дистиллированной воды, добавили к полученному раствору RG502H и диспергировали ультразвуком для получения первичной эмульсии типа «вода в масле». Полученную эмульсию инжектировали в 270 мл 0,5% (масса/объем) водного раствора поливинилового спирта при перемешивании со скоростью 5000 оборотов в минуту для получения эмульсии типа «вода-масло-вода». Эмульсию суспензировали при 4000 оборотов в минуту при 40°С в течение одного часа, таким образом обеспечив удаление дихлорметана и затвердение полимера, а затем полученные микросферы собрали. Собранные микросферы были дважды промыты дистиллированной водой и подвергнуты лиофилизации для получения микросфер. В процессе получения составов тем же способом, что и описан выше, суспензию для инжектирования первичной эмульсии суспензировали в 1% поливиниловом спирте (состав 9), 0,5 М водном растворе лизина + 1% поливиниловый спирт (состав 9-1), 0,5 М водном растворе Tris (tris(hydroxymethyl)aminomethane - примеч. перевод.) + 1% поливиниловый спирт (состав 9-2), 0,5 М водном растворе мочевины + 1% поливиниловый спирт (состав 9-3), 0,05 М водном растворе креатинина + 1% поливиниловый спирт (состав 9-4), 0,5 М водном растворе креатинина + 1% поливиниловый спирт (состав 9-5), соответственно, в течение одного часа и собрали, промыли дистиллированной водой и подвергли лиофилизации.
Изображения полученных микросфер под электронным микроскопом, как описано выше, показаны на Фиг.4а и 4b. Фиг.4а показывает состав 9, который не покрыт покрывающим материалом, а Фиг.4b показывает состав 9-1, который покрыт покрывающим материалом. Как показано на Фиг.4b, выявляется, что состав по настоящему изобретению имеет гладкую поверхность.
<Экспериментальный пример 3> Снижение начального пика в зависимости от типа покрывающего материала
Количественный анализ высвобождения лекарственного препарата из микросфер, полученных в примере 4, в течение первых 24 часов после введения был осуществлен тем же методом, что и в экспериментальном примере 1-1, а полученные результаты суммируются в Таблице 4. Таблица 4 демонстрирует сниженный начальный пик в зависимости от покрывающего материала.
| Таблица 4 | |||
| Состав № | Суспензия | Высвобождение через 1 час (%) | Высвобождение через 24 часа (%) |
| 9 | 1% поливиниловый спирт | 7,45 | 13,88 |
| 9-1 | 1% поливиниловый спирт + 0,5М лизин | 0,87 | 1,87 |
| 9-2 | 1% поливиниловый спирт + 0,5М tris | 5,79 | 9,91 |
| 9-3 | 1% поливиниловый спирт + 0,5М мочевина | 2,23 | 5,04 |
| 9-4 | 1% поливиниловый спирт + 0,05М креатинин | 2,20 | 3,06 |
| 9-5 | 1% поливиниловый спирт + 0,5М креатин | 0,89 | 1,23 |
Как показано в Таблице 4, несмотря на то, что сниженная величина начального пика незначительно варьируется в зависимости от типа используемого покрывающего материала, микросферы составов 9-1…9-5, покрытые покрывающими материалами, демонстрируют значительно сниженный начальный пик по сравнению с микросферами состава 9, не покрытыми покрывающими материалами.
<Сравнительный пример> Получение микросфер, нагруженных экзендином-4 и покрывающими материалами, и измерение начального пика
970 мг RG502H растворили в 3,23 мл дихлорметана (Junsei Chem.). 30 мг экзендина-4 и 6,68 мг лизина растворили в 0,3 мл дистиллированной воды и добавили к полученному раствору RG502H для получения первичной эмульсии типа «вода в масле». Полученную эмульсию суспензировали в водном растворе 1% поливинилового спирта, а микросферы состава 10 получили тем же способом, что и в примере 4. Кроме того, 970 мг RG502H и 6,68 мг лизина растворили в 3,23 мл дихлорметана (Junsei Chem.). К полученному раствору добавили 30 мг экзендина-4, растворенного в 0,3 мл дистиллированной воды для получения первичной эмульсии типа «вода в масле». Эмульсию суспензировали в водном растворе 1% поливинилового спирта для получения микросфер состава 11.
Изображения полученных выше составов 10 и 11 под электронным микроскопом, как описано выше, показаны на Фиг.4с и 4d. Как показано на Фиг.4с, полученные в сравнительном примере микросферы имеют множество пор на своих поверхностях.
Высвобождаемые количества из микросфер, полученных в сравнительном примере, в первые 1 час и 24 часа были соответствующим образом измерены тем же способом, что и в экспериментальном примере 1-1, а полученные результаты суммируются в Таблице 5. Таблица 5 демонстрирует изменение величины начального пика в зависимости от способов, посредством которых добавляются покрывающие материалы при изготовлении микросфер.
| Таблица 5 | ||||
| Сос тав № |
Первичная эмульсия | Суспензия | Высвобождение через 1 час (%) | Высвобождение через 24 часа (%) |
| 9 | 502Н, экзендин-4 | 1% поливиниловый спирт | 7,45 | 13,88 |
| 9-1 | 502Н, экзендин-4 | 1% поливиниловый спирт + 0,5М лизин | 0,87 | 1,87 |
| 10 | 502Н, экзендин-4 + лизин (водная фаза) | 1% поливиниловый спирт | 65,63 | 71,64 |
| 11 | 502Н + лизин (масляная фаза), экзендин-4 | 1% поливиниловый спирт | 80,31 | 87,00 |
Как показано в Таблице 5, когда покрывающие материалы просто введены вместе с экзендином без образования покровного слоя или используются просто смешанными с полимерами, возникает чрезмерный начальный пик, который представляет собой критический дефект, не позволяющий экзендину иметь форму с контролируемым высвобождением.
Как показано на Фиг.4с и 4d, добавление покрывающих материалов в масляной фазе или в водной фазе первичной эмульсии приводит к повышению пористости поверхности микросфер. В заключение, добавление покрывающих материалов внутрь микросфер повышает пористость поверхности, что, в конечном счете, приводит к чрезмерному начальному пику лекарственного препарата, содержащегося внутри них. И наоборот, микросферы, покрытые покрывающими материалами в соответствии с настоящим изобретением, не имеют никакого повышения пористости поверхности и демонстрируют более низкий начальный пик, чем состав 9, имеющий гладкую поверхность, но не покрытую покрывающими материалами.
В заключение, существующие экзендинсодержащие составы, получаемые обычными способами, например, раскрытыми в патенте Кореи №140209, не позволяют достичь желаемого снижения начального пика, а следовательно, они не обладают преимуществом в использовании в качестве эффективных экзендинсодержащих составов из-за побочных эффектов, обусловленных чрезмерным начальным пиком. И наоборот, композиция по настоящему изобретению очень полезна при разработке экзендинсодержащих микросфер с контролируемым высвобождением, к которым предъявляются требования высококонтролируемого начального высвобождения. Кроме того, настоящее изобретение может достичь высокой биодоступности экзендинсодержащего состава, которая не может быть достигнута обычной технологией для контролирования начального пика экзендинсодержащего состава.
<Пример 5> Получение микросфер, содержащих экзендин-3, способом распылительной сушки
4,850 г биоразлагающегося полимера, RG502H (лот №1009848, IV=0,19 дл/г), и 0,150 г экзендина-3 (Peptron Inc., Южная Корея), растворили до гомогенного состояния в 97 мл ледяной уксусной кислоты. Для получения микросфер полученный раствор был подан в распылительную сушилку (SODEVA, Франция), оснащенную ультразвуковым соплом (Sono-tek, 120 kHz), с использованием поршневого насоса при скорости потока 1,5 мл/мин и при подаче осушенного воздуха с температурой 180°С. Полученные микросферы суспензировали в 0,5 водного раствора лизина с добавленным 1% (масса/объем) поливиниловым спиртом (поливиниловый спирт, Gohsenol, EG-50) в качестве защитного коллоида, перемешивали в течение трех часов, собрали, промыли дистиллированной водой и затем подвергли лиофилизации.
<Пример 6> Получение микросфер, содержащих экзендин-4(1-28)амид, способом распылительной сушки
4,850 г биоразлагающегося полимера, RG502H (лот №1009848, IV=0,19 дл/г), и 0,150 г экзендина-4(1-28)амида (Peptron Inc., Южная Корея), растворили до гомогенного состояния в 97 мл ледяной уксусной кислоты. Для получения микросфер подготовленный раствор был подан в распылительную сушилку (SODEVA, Франция), оснащенную ультразвуковым соплом (Sono-tek, 120 kHz), с использованием поршневого насоса при скорости потока 1,5 мл/мин и при подаче осушенного воздуха с температурой 180°С. Полученные микросферы суспензировали в 0,5 М водном растворе L-Lys-L-Thr-L-Thr-L-Lys-L-Ser с добавленным 1% (масса/объем) поливиниловым спиртом (поливиниловый спирт, Gohsenol, EG-50) в качестве защитного коллоида, перемешивали в течение трех часов, собрали, промыли дистиллированной водой, суспензировали в 10 мл 10% водного раствора D-маннитола (по массовой доле) и затем подвергли лиофилизации.
<Пример 7> Получение микросфер, содержащих экзендин-4, способом разделения фаз.
Для получения первичной эмульсии 0,1 г экзендина-4 (Polypeptide Laboratories, США) растворили в 1,86 мл дистиллированной воды, медленно инжектировали в раствор, в котором растворили 1,86 г RG502H (лот №1009848, IV=0,19 дл/г) в 23,32 мл дихлорметана, и диспергировали ультразвуком. Полученную эмульсию гомогенизировали путем добавления к ней 58,8 г силиконового масла для образования зародышевых микросфер. Смесь 400 г гептана и 50 г этанола медленно добавили к сформированным зародышевым микросферам при перемешивании со скоростью 500 оборотов в минуту и поддержании температуры 3°С для затвердевания зародышевых микросфер. После перемешивания в течение приблизительно одного часа растворитель удалили путем декантации. Затем к полученному дополнительно добавили 200 г гептана и перемешивали в течение одного часа для удаления силиконового масла и дихлорметана из зародышевых микросфер. Полученные микросферы отфильтровали, собрали, промыли гептаном при 4°С и высушили в вакууме для подготовки микросфер. Подготовленные микросферы суспензировали в 0,5% (масса/объем) поливиниловом спирте и 0,5 М водном растворе лизина в течение одного часа, собрали, промывали дистиллированной водой и осуществили лиофилизацию для изготовления состава.
Как показано в вышеприведенных примерах, настоящее изобретение обеспечивает новый состав с экзендинсодержащими микросферами с контролируемым высвобождением, имеющий сниженные побочные эффекты и улучшенную биодоступность путем покрытия поверхности микросфер покрывающими материалами, что снижает чрезмерное высвобождение лекарственного препарата на начальной стадии после введения.
Claims (10)
1. Микросфера с контролируемым высвобождением, имеющая покровный слой и содержащая
ядро, содержащее экзендин в качестве активного ингредиента и биоразлагающийся полимер, и
покровный слой, который покрывает ядро покрывающим материалом, при этом экзендин является экзендином-4 (SEQ ID NO:2), биоразлагающийся полимер представляет собой полимер, выбранный из группы, состоящей из полилактида (PLA), полигликолида (PGA), сополимера лактида и гликолида (PLGA), сложного полиортоэфира, полиангидрида, полигидроксимасляной кислоты, поликапролактона и полиалкилкарбоната; сополимера или простой смеси двух или более полимеров, выбранных из указанной группы полимеров; сополимер указанного полимера и полиэтиленгликоля (PEG); или полимерно-сахарный комплекс, в котором сахар связан с указанным полимером или указанным сополимером,
покрывающий материал выбран из группы, состоящей из основных аминокислот, полипептидов и органических азотистых соединений, причем основная аминокислота является одной или более, выбранной из группы, состоящей из аргинина, лизина и гистидина; полипептид представляет собой L-Lys-L-Thr-L-Thr-L-Lys-L-Ser; а органическое азотистое соединение выбрано из группы, состоящей из креатина, креатинина и мочевины, причем содержание покровного слоя составляет от 0,01 до 5 мас.ч. в расчете на 100 мас.ч. микросферы.
ядро, содержащее экзендин в качестве активного ингредиента и биоразлагающийся полимер, и
покровный слой, который покрывает ядро покрывающим материалом, при этом экзендин является экзендином-4 (SEQ ID NO:2), биоразлагающийся полимер представляет собой полимер, выбранный из группы, состоящей из полилактида (PLA), полигликолида (PGA), сополимера лактида и гликолида (PLGA), сложного полиортоэфира, полиангидрида, полигидроксимасляной кислоты, поликапролактона и полиалкилкарбоната; сополимера или простой смеси двух или более полимеров, выбранных из указанной группы полимеров; сополимер указанного полимера и полиэтиленгликоля (PEG); или полимерно-сахарный комплекс, в котором сахар связан с указанным полимером или указанным сополимером,
покрывающий материал выбран из группы, состоящей из основных аминокислот, полипептидов и органических азотистых соединений, причем основная аминокислота является одной или более, выбранной из группы, состоящей из аргинина, лизина и гистидина; полипептид представляет собой L-Lys-L-Thr-L-Thr-L-Lys-L-Ser; а органическое азотистое соединение выбрано из группы, состоящей из креатина, креатинина и мочевины, причем содержание покровного слоя составляет от 0,01 до 5 мас.ч. в расчете на 100 мас.ч. микросферы.
2. Микросфера с контролируемым высвобождением по п.1, в которой биоразлагающийся полимер имеет характеристическую вязкость от 0,1 до 0,6 дл/г.
3. Микросфера с контролируемым высвобождением по п.1, в которой биоразлагающийся полимер имеет характеристическую вязкость от 0,15 до 0,31 дл/г.
4. Микросфера с контролируемым высвобождением по п.1, в которой содержание экзендина составляет от 0,1 до 10 мас.ч. в расчете на 100 мас.ч. микросферы.
5. Микросфера с контролируемым высвобождением по любому из пп.1-4, дополнительно содержащая один ингредиент или более, выбранный из группы, состоящей из фармацевтически приемлемых защитных коллоидов и наполнителей.
6. Способ получения экзендинсодержащей микросферы с контролируемым высвобождением, имеющей покровный слой, по п.1, содержащий следующие операции:
смешивание экзендина и биоразлагающегося полимера для получения эмульсии типа «вода в масле» или гомогенной смеси; и
эмульгирование путем добавления эмульсии или гомогенной смеси в водный раствор покрывающего материала для образования покровного слоя,
при этом экзендин является экзендином-4 (SEQ ID NO:2), биоразлагающийся полимер представляет собой полимер, выбранный из группы, состоящей из полилактида (PLA), полигликолида (PGA), сополимера лактида и гликолида (PLGA), сложного полиортоэфира, полиангидрида, полигидроксимасляной кислоты, поликапролактона и полиалкилкарбоната; сополимера или простой смеси двух или более полимеров, выбранных из указанной группы полимеров; сополимер указанного полимера и полиэтиленгликоля (PEG); или полимерно-сахарный комплекс, в котором сахар связан с указанным полимером или указанным сополимером, а
покрывающий материал выбран из группы, состоящей из основных аминокислот, полипептидов и органических азотистых соединений, причем основная аминокислота является одной или более, выбранной из группы, состоящей из аргинина, лизина и гистидина; полипептид представляет собой L-Lys-L-Thr-L-Thr-L-Lys-L-Ser; а органическое азотистое соединение выбрано из группы, состоящей из креатина, креатинина и мочевины, причем содержание покровного слоя составляет от 0,01 до 5 мас.ч. в расчете на 100 мас.ч. микросферы.
смешивание экзендина и биоразлагающегося полимера для получения эмульсии типа «вода в масле» или гомогенной смеси; и
эмульгирование путем добавления эмульсии или гомогенной смеси в водный раствор покрывающего материала для образования покровного слоя,
при этом экзендин является экзендином-4 (SEQ ID NO:2), биоразлагающийся полимер представляет собой полимер, выбранный из группы, состоящей из полилактида (PLA), полигликолида (PGA), сополимера лактида и гликолида (PLGA), сложного полиортоэфира, полиангидрида, полигидроксимасляной кислоты, поликапролактона и полиалкилкарбоната; сополимера или простой смеси двух или более полимеров, выбранных из указанной группы полимеров; сополимер указанного полимера и полиэтиленгликоля (PEG); или полимерно-сахарный комплекс, в котором сахар связан с указанным полимером или указанным сополимером, а
покрывающий материал выбран из группы, состоящей из основных аминокислот, полипептидов и органических азотистых соединений, причем основная аминокислота является одной или более, выбранной из группы, состоящей из аргинина, лизина и гистидина; полипептид представляет собой L-Lys-L-Thr-L-Thr-L-Lys-L-Ser; а органическое азотистое соединение выбрано из группы, состоящей из креатина, креатинина и мочевины, причем содержание покровного слоя составляет от 0,01 до 5 мас.ч. в расчете на 100 мас.ч. микросферы.
7. Способ по п.6, в котором концентрация водного раствора покрывающего материала составляет от 0,01 М до 1 М.
8. Способ получения экзендинсодержащих микросфер с контролируемым высвобождением, имеющих покровный слой, по п.1, содержащий следующие операции:
смешивание экзендина и биоразлагающегося полимера для образования эмульсии или гомогенной смеси;
отверждение полученной эмульсии или гомогенной смеси для изготовления первичных микросфер; и
суспензирование полученных первичных микросфер в водном растворе покрывающего материала для образования покровного слоя на каждой микросфере,
при этом экзендин является экзендином-4 (SEQ ID NO:2) биоразлагающийся полимер представляет собой полимер, выбранный из группы, состоящей из полилактида (PLA), полигликолида (PGA), сополимера лактида и гликолида (PLGA), сложного полиортоэфира, полиангидрида, полигидроксимасляной кислоты, поликапролактона и полиалкилкарбоната; сополимера или простой смеси двух или более полимеров, выбранных из указанной группы полимеров; сополимер указанного полимера и полиэтиленгликоля (PEG); или полимерно-сахарный комплекс, в котором сахар связан с указанным полимером или указанным сополимером, а
покрывающий материал выбран из группы, состоящей из основных аминокислот, полипептидов и органических азотистых соединений, причем основная аминокислота является одной или более, выбранной из группы, состоящей из аргинина, лизина и гистидина; полипептид представляет собой L-Lys-L-Thr-L-Thr-L-Lys-L-Ser; а органическое азотистое соединение выбрано из группы, состоящей из креатина, креатинина и мочевины, причем содержание покровного слоя составляет от 0,01 до 5 мас.ч. в расчете на 100 мас.ч. микросферы.
смешивание экзендина и биоразлагающегося полимера для образования эмульсии или гомогенной смеси;
отверждение полученной эмульсии или гомогенной смеси для изготовления первичных микросфер; и
суспензирование полученных первичных микросфер в водном растворе покрывающего материала для образования покровного слоя на каждой микросфере,
при этом экзендин является экзендином-4 (SEQ ID NO:2) биоразлагающийся полимер представляет собой полимер, выбранный из группы, состоящей из полилактида (PLA), полигликолида (PGA), сополимера лактида и гликолида (PLGA), сложного полиортоэфира, полиангидрида, полигидроксимасляной кислоты, поликапролактона и полиалкилкарбоната; сополимера или простой смеси двух или более полимеров, выбранных из указанной группы полимеров; сополимер указанного полимера и полиэтиленгликоля (PEG); или полимерно-сахарный комплекс, в котором сахар связан с указанным полимером или указанным сополимером, а
покрывающий материал выбран из группы, состоящей из основных аминокислот, полипептидов и органических азотистых соединений, причем основная аминокислота является одной или более, выбранной из группы, состоящей из аргинина, лизина и гистидина; полипептид представляет собой L-Lys-L-Thr-L-Thr-L-Lys-L-Ser; а органическое азотистое соединение выбрано из группы, состоящей из креатина, креатинина и мочевины, причем содержание покровного слоя составляет от 0,01 до 5 мас.ч. в расчете на 100 мас.ч. микросферы.
9. Способ по п.8, в котором операцию отверждения осуществляют способом разделения фаз или способом распылительной сушки.
10. Способ по п.8, в котором концентрация водного раствора покрывающего материала составляет от 0,01 М до 1 М.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020070029586A KR100805208B1 (ko) | 2007-03-27 | 2007-03-27 | 엑센딘 함유 서방성 제제 조성물, 엑센딘 함유 서방성미립구 및 이의 제조 방법 |
| KR10-2007-0029586 | 2007-03-27 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2009136655A RU2009136655A (ru) | 2011-05-10 |
| RU2463040C2 true RU2463040C2 (ru) | 2012-10-10 |
Family
ID=39382592
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009136655/15A RU2463040C2 (ru) | 2007-03-27 | 2008-01-22 | Композиция и микросфера с контролируемым высвобождением экзендина и способ получения микросферы |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9155702B2 (ru) |
| EP (1) | EP2134329B1 (ru) |
| JP (1) | JP5135428B2 (ru) |
| KR (1) | KR100805208B1 (ru) |
| CN (1) | CN101646424B (ru) |
| AU (1) | AU2008230297B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0809326B8 (ru) |
| CA (1) | CA2682499C (ru) |
| ES (1) | ES2528282T3 (ru) |
| IL (1) | IL201024A (ru) |
| MX (1) | MX2009010280A (ru) |
| MY (1) | MY150087A (ru) |
| PL (1) | PL2134329T3 (ru) |
| RU (1) | RU2463040C2 (ru) |
| WO (1) | WO2008117927A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA200906381B (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2790566C2 (ru) * | 2016-10-20 | 2023-02-27 | Пептрон, Инк. | Способы доставки нейропротективного полипептида в центральную нервную систему |
Families Citing this family (28)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ580700A (en) | 2007-04-19 | 2012-01-12 | Dong A Pharm Co Ltd | A biodegradable microsphere composition suitable for the controlled release of glucose controlling peptide and formulation thereof |
| US9292307B2 (en) | 2008-07-30 | 2016-03-22 | Kyocera Corporation | User interface generation apparatus |
| US20100183876A1 (en) * | 2008-12-23 | 2010-07-22 | Hell Andre | Process for the Preparation of a Peptide Powder Form |
| WO2011106702A2 (en) | 2010-02-25 | 2011-09-01 | The Johns Hopkins University | Sustained delivery of therapeutic agents to an eye compartment |
| CN102370611B (zh) * | 2010-08-17 | 2013-09-18 | 东莞太力生物工程有限公司 | 一种包含exendin-4的温度敏感型水凝胶及其注射剂 |
| WO2012098188A1 (en) * | 2011-01-19 | 2012-07-26 | Novo Nordisk A/S | Glp-1 particles and compositions |
| WO2012109363A2 (en) | 2011-02-08 | 2012-08-16 | The Johns Hopkins University | Mucus penetrating gene carriers |
| ES2810003T3 (es) | 2011-11-18 | 2021-03-08 | Regeneron Pharma | Micropartícula que contiene proteína terapéutica recubierta con polímero biodegradable para uso médico |
| CN102688198B (zh) * | 2012-06-19 | 2015-04-15 | 广州帝奇医药技术有限公司 | 多肽药物缓释微球制剂及其制备方法 |
| US10568975B2 (en) | 2013-02-05 | 2020-02-25 | The Johns Hopkins University | Nanoparticles for magnetic resonance imaging tracking and methods of making and using thereof |
| CN104107165B (zh) * | 2013-04-17 | 2018-11-30 | 长春百益制药有限责任公司 | 一种艾塞那肽微球制剂、其制备方法及其应用 |
| CN104840415B (zh) | 2014-02-19 | 2019-03-15 | 香港浸会大学 | 含有降血糖活性成分的长效控释脂质体凝胶组合物及其制备方法 |
| US20170035856A1 (en) * | 2014-04-16 | 2017-02-09 | Shandong Luye Pharmaceutical Co., Ltd. | Exenatide-containing composition and preparation method therefor |
| WO2015175545A1 (en) | 2014-05-12 | 2015-11-19 | The Johns Hopkins University | Highly stable biodegradable gene vector platforms for overcoming biological barriers |
| US9480640B2 (en) * | 2014-09-24 | 2016-11-01 | Hongkai Zhang | Nano freeze dry process of preparation of highly bioactive agent and its method of use |
| AU2016211696B2 (en) | 2015-01-27 | 2018-05-10 | The Johns Hopkins University | Hypotonic hydrogel formulations for enhanced transport of active agents at mucosal surfaces |
| US20170079985A1 (en) | 2015-09-21 | 2017-03-23 | Teva Pharmaceuticals International Gmbh | Sustained release olanzapine formulations |
| MX391259B (es) | 2015-10-14 | 2025-03-21 | X Therma Inc | Composiciones y métodos para reducir la formación de cristales de hielo. |
| CN107405307B (zh) * | 2015-12-22 | 2020-11-10 | 四川科伦药物研究院有限公司 | 一种艾塞那肽微球制剂及其制备方法 |
| SG11201903462UA (en) * | 2016-10-20 | 2019-05-30 | Peptron Inc | Methods of delivering a neuroprotective polypeptide to the central nervous system |
| JP2020511483A (ja) | 2017-03-20 | 2020-04-16 | テバ・ファーマシューティカルズ・インターナショナル・ゲーエムベーハーＴｅｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＧｍｂＨ | 徐放性オランザピン製剤 |
| US20200353127A1 (en) * | 2018-01-10 | 2020-11-12 | G2Gbio, Inc. | Collagen peptide-containing polycaprolactone microsphere filler and preparation method therefor |
| KR102185348B1 (ko) * | 2018-12-17 | 2020-12-01 | 주식회사 지투지바이오 | 데슬로렐린을 함유하는 서방형 주사제 및 그 제조방법 |
| BR112022001595A2 (pt) | 2019-07-29 | 2022-03-22 | Peptron Inc | Composição farmacêutica para tratamento ou inibição da progressão da discinesia induzida por levodopa |
| EP4005587A4 (en) * | 2019-07-29 | 2023-08-09 | Peptron, Inc. | PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR THE TREATMENT OF LEVODOPA-INDUCED DYSKINESIA OR SUPPRESSION OF THEIR PROGRESSION |
| EP4277661A1 (en) | 2021-01-18 | 2023-11-22 | Anton Frenkel | Pharmaceutical dosage form |
| CN117098529A (zh) * | 2021-01-29 | 2023-11-21 | 天温轮特拉皮踢诗 | 初期突发释放受控的贮库组合物及其方法 |
| WO2023281406A1 (en) | 2021-07-06 | 2023-01-12 | Mark Hasleton | Treatment of serotonin reuptake inhibitor withdrawal syndrome |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2242244C2 (ru) * | 1999-01-14 | 2004-12-20 | Амилин Фармасьютикалз, Инк. | Новые композиции агонистов эксендина и способы их введения |
| WO2005102293A1 (en) * | 2004-04-15 | 2005-11-03 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Poly (lactide-co-glycolide)-based sustained release microcapsules comprising a polypeptide and a sugar |
| WO2005110425A1 (en) * | 2004-04-15 | 2005-11-24 | Alkermes, Inc. | Polymer-based sustained release device |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4389330A (en) * | 1980-10-06 | 1983-06-21 | Stolle Research And Development Corporation | Microencapsulation process |
| US5271961A (en) * | 1989-11-06 | 1993-12-21 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Method for producing protein microspheres |
| GB9210574D0 (en) | 1992-05-18 | 1992-07-01 | Ca Nat Research Council | Biotherapeutic cell-coated microspheres for wound/burn and prothesis implant applications |
| JPH09315975A (ja) * | 1995-09-28 | 1997-12-09 | Takeda Chem Ind Ltd | ２−ピペラジノン−１−酢酸誘導体の徐放剤 |
| JP4900984B2 (ja) * | 1997-07-15 | 2012-03-21 | 武田薬品工業株式会社 | 徐放性製剤の製造法 |
| DK1143989T3 (da) * | 1999-01-14 | 2007-04-16 | Amylin Pharmaceuticals Inc | Exendiner til glucagonundertrykkelse |
| DK1246638T4 (da) * | 2000-01-10 | 2014-09-22 | Amylin Pharmaceuticals Llc | Anvendelse af extendiner og agonister deraf til behandlingen af hypertriglyceridæmi |
| JP5160005B2 (ja) * | 2000-12-28 | 2013-03-13 | 武田薬品工業株式会社 | 徐放性製剤 |
| KR100566573B1 (ko) | 2002-04-13 | 2006-03-31 | 주식회사 펩트론 | Ｌｈｒｈ 동족체를 함유하는 서방성 미립구의 제조방법 |
| AU2003286472A1 (en) * | 2002-10-17 | 2004-05-04 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Ii | Microencapsulation and sustained release of biologically active polypeptides |
| SI21402A (sl) * | 2003-02-12 | 2004-08-31 | LEK farmacevtska dru�ba d.d. | Obloženi delci in farmacevtske oblike |
| AU2005271242B9 (en) * | 2004-08-12 | 2012-04-12 | Foresee Pharmaceuticals Co., Ltd. | Pharmaceutical compositions for controlled release delivery of biologically active compounds |
| US8173148B2 (en) * | 2004-11-10 | 2012-05-08 | Tolmar Therapeutics, Inc. | Stabilized polymeric delivery system comprising a water-insoluble polymer and an organic liquid |
-
2007
- 2007-03-27 KR KR1020070029586A patent/KR100805208B1/ko active Active
-
2008
- 2008-01-22 MX MX2009010280A patent/MX2009010280A/es active IP Right Grant
- 2008-01-22 EP EP08712168.7A patent/EP2134329B1/en active Active
- 2008-01-22 CN CN200880009933XA patent/CN101646424B/zh active Active
- 2008-01-22 MY MYPI20093763A patent/MY150087A/en unknown
- 2008-01-22 WO PCT/KR2008/000397 patent/WO2008117927A1/en not_active Ceased
- 2008-01-22 JP JP2010500816A patent/JP5135428B2/ja active Active
- 2008-01-22 RU RU2009136655/15A patent/RU2463040C2/ru active
- 2008-01-22 CA CA2682499A patent/CA2682499C/en active Active
- 2008-01-22 ES ES08712168.7T patent/ES2528282T3/es active Active
- 2008-01-22 BR BRPI0809326A patent/BRPI0809326B8/pt active IP Right Grant
- 2008-01-22 PL PL08712168T patent/PL2134329T3/pl unknown
- 2008-01-22 US US12/532,311 patent/US9155702B2/en active Active
- 2008-01-22 AU AU2008230297A patent/AU2008230297B2/en active Active
-
2009
- 2009-09-14 ZA ZA2009/06381A patent/ZA200906381B/en unknown
- 2009-09-17 IL IL201024A patent/IL201024A/en active IP Right Grant
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2242244C2 (ru) * | 1999-01-14 | 2004-12-20 | Амилин Фармасьютикалз, Инк. | Новые композиции агонистов эксендина и способы их введения |
| WO2005102293A1 (en) * | 2004-04-15 | 2005-11-03 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Poly (lactide-co-glycolide)-based sustained release microcapsules comprising a polypeptide and a sugar |
| WO2005110425A1 (en) * | 2004-04-15 | 2005-11-24 | Alkermes, Inc. | Polymer-based sustained release device |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2790566C2 (ru) * | 2016-10-20 | 2023-02-27 | Пептрон, Инк. | Способы доставки нейропротективного полипептида в центральную нервную систему |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MX2009010280A (es) | 2009-10-12 |
| MY150087A (en) | 2013-11-29 |
| US9155702B2 (en) | 2015-10-13 |
| CA2682499C (en) | 2013-01-08 |
| EP2134329A1 (en) | 2009-12-23 |
| WO2008117927A1 (en) | 2008-10-02 |
| CA2682499A1 (en) | 2008-10-02 |
| ES2528282T3 (es) | 2015-02-06 |
| EP2134329A4 (en) | 2013-07-10 |
| ZA200906381B (en) | 2010-11-24 |
| IL201024A0 (en) | 2010-05-17 |
| KR100805208B1 (ko) | 2008-02-21 |
| JP5135428B2 (ja) | 2013-02-06 |
| BRPI0809326B8 (pt) | 2021-05-25 |
| JP2010522743A (ja) | 2010-07-08 |
| US20100136126A1 (en) | 2010-06-03 |
| RU2009136655A (ru) | 2011-05-10 |
| AU2008230297A1 (en) | 2008-10-02 |
| CN101646424A (zh) | 2010-02-10 |
| PL2134329T3 (pl) | 2015-07-31 |
| IL201024A (en) | 2014-01-30 |
| AU2008230297B2 (en) | 2010-07-29 |
| BRPI0809326A2 (pt) | 2014-09-23 |
| CN101646424B (zh) | 2013-03-20 |
| EP2134329B1 (en) | 2015-01-07 |
| BRPI0809326B1 (pt) | 2020-10-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2463040C2 (ru) | Композиция и микросфера с контролируемым высвобождением экзендина и способ получения микросферы | |
| US10363287B2 (en) | Method of manufacturing an osmotic delivery device | |
| US20210315961A1 (en) | Stable formulations for parenteral injection of peptide drugs | |
| DK2498801T3 (en) | PHARMACEUTICAL COMPOSITION INCLUDING desPro36Exendin-4 (1-39) -Lys6-NH2 AND METHIONIN | |
| KR101034888B1 (ko) | 지속제어 방출 양상을 갖는 당조절 펩타이드 함유 생분해성고분자 미립구 및 그 제조방법 | |
| KR102161177B1 (ko) | 지속형 인슐린분비 펩타이드 결합체 액상 제제 | |
| JP4353544B2 (ja) | アミリン作動薬ペプチド用製剤 | |
| US20140220134A1 (en) | Method for treating diabetes with extended release formulation of glp-1 receptor agonists | |
| EP1551436A2 (en) | Formulations for amylin agonist peptides | |
| CA2487269A1 (en) | Novel exendin agonist formulations and methods of administration thereof | |
| KR100245534B1 (ko) | 피브릴화된 칼시토닌을 포함하는 약제학적 조성물, 이의 제조방법 및 칼시토닌 피브릴의 분산액 | |
| IE83304B1 (en) | Pharmaceutical compositions comprising calcitonin | |
| US11246913B2 (en) | Suspension formulation comprising an insulinotropic peptide |