[go: up one dir, main page]

ES2810003T3 - Micropartícula que contiene proteína terapéutica recubierta con polímero biodegradable para uso médico - Google Patents

Micropartícula que contiene proteína terapéutica recubierta con polímero biodegradable para uso médico Download PDF

Info

Publication number
ES2810003T3
ES2810003T3 ES18173299T ES18173299T ES2810003T3 ES 2810003 T3 ES2810003 T3 ES 2810003T3 ES 18173299 T ES18173299 T ES 18173299T ES 18173299 T ES18173299 T ES 18173299T ES 2810003 T3 ES2810003 T3 ES 2810003T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
protein
polymer
poly
pharmaceutical formulation
microns
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES18173299T
Other languages
English (en)
Inventor
Hunter Chen
Scott Walsh
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Regeneron Pharmaceuticals Inc
Original Assignee
Regeneron Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=47295198&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2810003(T3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Regeneron Pharmaceuticals Inc filed Critical Regeneron Pharmaceuticals Inc
Application granted granted Critical
Publication of ES2810003T3 publication Critical patent/ES2810003T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5031—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5089—Processes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A61K38/179—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for growth factors; for growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1611—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A61K9/1623—Sugars or sugar alcohols, e.g. lactose; Derivatives thereof; Homeopathic globules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1652—Polysaccharides, e.g. alginate, cellulose derivatives; Cyclodextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5036—Polysaccharides, e.g. gums, alginate; Cyclodextrin
    • A61K9/5042—Cellulose; Cellulose derivatives, e.g. phthalate or acetate succinate esters of hydroxypropyl methylcellulose
    • A61K9/5047—Cellulose ethers containing no ester groups, e.g. hydroxypropyl methylcellulose
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)

Abstract

Una formulación farmacéutica de liberación prolongada para su uso en el vítreo para el tratamiento de trastornos oculares vasculares, comprendiendo la formulación farmacéutica micropartículas que tienen un diámetro de 2 micrómetros a 70 micrómetros, teniendo las micropartículas un núcleo de partícula proteica dentro de una corteza polimérica, conteniendo la partícula proteica menos de 3 % de agua en peso, en donde las micropartículas liberan la proteína en un ambiente acuoso fisiológico a aproximadamente 37 ºC a una velocidad de aproximadamente 0,01 mg/semana a aproximadamente 0,30 mg/semana durante al menos 60 días.

Description

DESCRIPCIÓN
Micropartícula que contiene proteína terapéutica recubierta con polímero biodegradable para uso médico Campo
La invención se refiere a la fabricación, composición y uso de una proteína terapéutica de liberación prolongada. Específicamente, la invención se refiere a la fabricación, composición y uso de una pluralidad de microesferas de proteínas recubiertas con polímeros para la liberación prolongada y uniforme de proteínas en un entorno acuoso o fisiológico a lo largo del tiempo. En particular, la presente invención se refiere a una formulación de liberación prolongada.
Antecedentes
La liberación prolongada de una proteína terapéutica administrada hacia una diana biológica, como por ejemplo, la retina o un tumor, o administrada por vía parenteral es deseable para el tratamiento de muchas afecciones diferentes, incluidos cánceres, enfermedades cardiovasculares, afecciones vasculares, trastornos ortopédicos, trastornos dentales, heridas, enfermedades autoinmunes, trastornos gastrointestinales y enfermedades oculares. Los polímeros biocompatibles y biodegradables para el suministro controlado y prolongado de medicamentos han estado en uso durante décadas. A medida que el polímero se degrada con el tiempo, el fármaco terapéutico se libera lentamente.
En el caso de los terapéuticos intraoculares, existe una importante necesidad médica no satisfecha de formulaciones de liberación prolongada para administrar las proteínas terapéuticas de manera efectiva con el tiempo con la menor cantidad posible de inyecciones intraoculares. En el caso de otras enfermedades, tales como cáncer, enfermedades inflamatorias y otras enfermedades, existe la necesidad de formulaciones de liberación prolongada implantables mejoradas que contengan proteínas terapéuticas.
Los solicitantes han descubierto y desvelan y reivindican métodos de fabricación y uso de micropartículas que contienen un polímero biodegradable y una proteína terapéutica, que es capaz de liberar una cantidad terapéuticamente efectiva de la proteína terapéutica de manera uniforme durante un período prolongado de tiempo. También se hace referencia a los siguientes documentos:
• La patente US 2011/0104151 que se refiere a composiciones de micropartículas y métodos para tratar la degeneración macular relacionada con la edad.
• La patente US 2008/0305115 que se refiere a formas de dosificación de acción duradera y masa reducida. • El documento WO 03/092665 que se refiere a sistemas de administración ocular y sus usos; y
• Kim et al., Biomaterials, 30 (5): 902-909 que se refiere a microcápsulas de PLGA cargadas con BSA_FITC para la administración in vivo.
Sumario
La presente invención proporciona una formulación farmacéutica de liberación prolongada para su uso en el vítreo para el tratamiento de trastornos oculares vasculares, comprendiendo la formulación farmacéutica micropartículas que tienen un diámetro de 2 micrómetros a 70 micrómetros, teniendo las micropartículas un núcleo de partícula proteica dentro de una corteza polimérica, conteniendo la partícula proteica menos de 3 % de agua en peso, en donde las micropartículas liberan la proteína en un ambiente acuoso fisiológico a aproximadamente 37 °C a una velocidad de aproximadamente 0,01 mg/semana a aproximadamente 0,30 mg/semana durante al menos 60 días. También se desvela una micropartícula que comprende una proteína recubierta con un polímero. En un caso, la micropartícula tiene un diámetro de aproximadamente 2 micrómetros a aproximadamente 70 micrómetros. En un caso, la micropartícula tiene un diámetro de aproximadamente 15 micrómetros.
En un caso, la proteína es una proteína de unión a antígeno. En un caso, la proteína comprende un dominio Fc. En un caso, la proteína comprende un dominio receptor. En un caso, la proteína es un anticuerpo. En otro caso, la proteína es una proteína de fusión del receptor Fc. En otro caso, la proteína es una proteína de tipo Trap, que comprende un fragmento de receptor cognado y un dominio Fc. En un caso particular, la proteína es una proteína VEGF-Trap. En un caso, la proteína VEGF-Trap comprende una secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 1.
En un caso, el polímero es un polímero biodegradable. En algunos casos, el polímero se selecciona del grupo que consiste en ácido poliláctico (PLA), ácido poliglicólico (PGA), copolímero poliláctico-poliglicólico (PLGA), poli-D,L-láctido-co-glicólido (PLGA), PLGA-fumarato de óxido de etileno, succinato de PLGA-alfa-tocoferil esterificado a polietilenglicol 1000 (PLGA-TGPS), polianhídrido poli [1,6-bis (p-carboxifenoxi) hexano] (pCPH), poli (ácido hidroxibutírico-ácido cohidroxivalérico) (PHB-PVA), copolímero de polietilenglicol-poli (ácido láctico) (PEG-PLA), poli£-caprolactona (PCL), poli-alquil-ciano-acrilato (PAC), poli(etil)cianoacrilato (PEC), poliisobutil-cianoacrilato, poli-N-(2-hidroxipropil) metacrilamida (poli (HPMA)), poli-p-R-hidroxibutirato (PHB), poli-p-R-hidroxialcanoato (PHA), poli-p-R-ácido málico, polímeros de fosfolípidos y colesterol, 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina/polietilenglicoldistearoilfosfatidiletanolamina (DOPC/PEG-DSPE)/colesterol, polisacáridos, celulosa, etilcelulosa, metilcelulosa, alginatos, dextrano, y polímeros de hidrogel de dextrano, amilosa, inulina, pectina y goma guar, quitosano, quitina, heparina, ácido hialurónico, polirrotaxanos y poliseudorrotaxanos basados en ciclodextrina (CD), poliaspartatos, poliglutamatos, polileucina, copolímeros de leucina-glutamato, succinato de polibutileno (PBS), gelatina, colágenos, fibrinas, fibroína, poliortoésteres, copolímero de poliortoésteres-poliamidina, copolímeros de poliortoésteres-diamina, poliortoésteres que incorporan ácidos latentes, copolímero de poli (etilenglicol)/poli (tereftalato de butileno) y sus combinaciones y copolímeros. En una realización, el polímero es poli-£-caprolactona (PCL) o un derivado o copolímero de la misma. En una realización, el polímero es PLGA o un derivado o copolímero del mismo. En una realización, el polímero es etilcelulosa o un derivado o copolímero de la misma. En una realización, el polímero es poliortoéster o un derivado o copolímero del mismo.
En un caso, la micropartícula comprende un núcleo de proteína micronizada de menos de diez micrómetros y una corteza de polímero. En un caso, el núcleo de proteína micronizada está recubierto al menos al 50 % con polímero, lo que significa que no está expuesto más del 50 % de la superficie del núcleo de proteína micronizada. En una realización, al menos el 60 %, al menos el 70 %, al menos el 80 %, al menos el 90 %, al menos el 95 %, al menos el 99 % o el 100 % de la superficie del núcleo de proteína micronizada está recubierta con polímero.
En un caso, la micropartícula de más de 10 micrómetros de tamaño comprende (a) un núcleo de proteína micronizada de menos de 10 micrómetros, en el que la proteína es uno o más de un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, un receptor o fragmento soluble del mismo, un fragmento de receptor de células T soluble, un fragmento de MHC soluble, una proteína de fusión del receptor Fc, una proteína de tipo Trap y una proteína VEGF-Trap; y (b) una cubierta polimérica, en la que el polímero es uno o más de un polímero biocompatible, un polímero biodegradable, un polímero bioerosionable, ácido poliláctico (PLA), ácido poliglicólico (PGA), copolímero polilácticopoliglicólico (PLGA), poli-D,L-láctido-co-glicólido (PLGA), PLGA-fumarato de óxido de etileno, succinato de PLGA-alfa-tocoferil esterificado a polietilenglicol 1000 (PLGA-TGPS), polianhídrido poli [1,6-bis (p-carboxifenoxi) hexano] (pCPH), poli (ácido hidroxibutírico-ácido cohidroxivalérico) (PHB-PVA), copolímero de polietilenglicol-poli (ácido láctico) (PEG-PLA), poli-£-caprolactona (PCL), poli-alquil-ciano-acrilato (PAC), poli(etil)cianoacrilato (PEC), poliisobutil-cianoacrilato, poli-N-(2-hidroxipropil) metacrilamida (poli (HPMA)), poli-p-R-hidroxibutirato (PHB), poli-p-R-hidroxialcanoato (PHA), poli-p-R-ácido málico, polímeros de fosfolípidos y colesterol, 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina/polietilenglicol-distearoilfosfatidiletanolamina (DOPC/PEG-DSPE)/colesterol, polisacáridos, celulosa, etilcelulosa, metilcelulosa, alginatos, dextrano, y polímeros de hidrogel de dextrano, amilosa, inulina, pectina y goma guar, quitosano, quitina, heparina, ácido hialurónico, polirrotaxanos y poliseudorrotaxanos basados en ciclodextrina (CD), poliaspartatos, poliglutamatos, polileucina, copolímeros de leucina-glutamato, succinato de polibutileno (PBS), gelatina, colágenos, fibrinas, fibroína, poliortoésteres, copolímero de poliortoésteres-poliamidina, copolímeros de poliortoésteres-diamina, poliortoésteres que incorporan ácidos latentes, copolímero de poli (etilenglicol)/poli (tereftalato de butileno) y sus combinaciones y copolímeros.
En un caso, la micropartícula de un diámetro promedio de aproximadamente 15 micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros comprende (a) un núcleo de proteína micronizada de aproximadamente 10 a aproximadamente 12 micrómetros, en el que la proteína es una proteína VEGF-Trap; y (b) una cubierta polimérica, en la que el polímero es uno cualquiera o más de PCL, PLGA, etilcelulosa y poliortoéster, y sus copolímeros o derivados.
También se desvela una pluralidad de micropartículas, que varían en tamaño de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 70 micrómetros, y que comprenden un núcleo de proteína micronizada de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros, y una corteza de polímero.
En un caso, la proteína es una proteína de unión a antígeno. En algunos casos, la proteína de unión a antígeno es uno o más de un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, un receptor o fragmento soluble del mismo, un fragmento de receptor soluble de células T, un fragmento de MHC soluble, una proteína de fusión del receptor Fc, un proteína de tipo Trap y una proteína VEGF-Trap. En un caso, la proteína comprende un dominio Fc. En un caso, la proteína es un anticuerpo. En otro caso, la proteína es una proteína de fusión del receptor Fc. En otro caso, la proteína es una proteína de tipo Trap, que comprende un fragmento de receptor cognado y un dominio Fc. En un caso particular, la proteína es una proteína VEGF-Trap. En un caso específico, la proteína VEGF-Trap comprende la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 1.
En un caso, el polímero es un polímero biocompatible. En un caso, el polímero es un polímero bioerosionable. En un caso, el polímero es un polímero biodegradable. En algunos casos, el polímero se selecciona del grupo que consiste en ácido poliláctico (PLA), ácido poliglicólico (PGA), copolímero poliláctico-poliglicólico (PLGA), poli-D,L-láctido-coglicólido (PLGA), PLGA-fumarato de óxido de etileno, succinato de PLGA-alfa-tocoferil esterificado a polietilenglicol 1000 (PLGA-TGPS), polianhídrido poli [1,6-bis (p-carboxifenoxi) hexano] (pCPH), poli (ácido hidroxibutírico-ácido cohidroxivalérico) (PHB-PVA), copolímero de polietilenglicol-poli (ácido láctico) (PEG-PLA), poli-£-caprolactona (PCL), poli-alquil-ciano-acrilato (PAC), poli(etil)cianoacrilato (PEC), poliisobutil-cianoacrilato, poli-N-(2-hidroxipropil) metacrilamida (poli (HPMA)), poli-p-R-hidroxibutirato (PHB), poli-p-R-hidroxialcanoato (PHA), poli-p-R-ácido málico, polímeros de fosfolípidos y colesterol, 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina/polietilenglicoldistearoilfosfatidiletanolamina (DOPC/PEG-DSPE)/colesterol, polisacáridos, celulosa, etilcelulosa, metilcelulosa, alginatos, dextrano, y polímeros de hidrogel de dextrano, amilosa, inulina, pectina y goma guar, quitosano, quitina, heparina, ácido hialurónico, polirrotaxanos y poliseudorrotaxanos basados en ciclodextrina (CD), poliaspartatos, poliglutamatos, polileucina, copolímeros de leucina-glutamato, succinato de polibutileno (PBS), gelatina, colágenos, fibrinas, fibroína, poliortoésteres, copolímero de poliortoésteres-poliamidina, copolímeros de poliortoésteres-diamina, poliortoésteres que incorporan ácidos latentes, copolímero de poli (etilenglicol)/poli (tereftalato de butileno) y sus combinaciones y copolímeros. En un caso, el polímero es poli-£-caprolactona (PCL) o un derivado o copolímero de la misma. En un caso, el polímero es PLGA o un derivado o copolímero del mismo. En un caso, el polímero es etilcelulosa o un derivado o copolímero de la misma. En un caso, el polímero es un poliortoéster que incorpora un ácido latente.
En un caso, el núcleo de proteína micronizada de la mayoría de las micropartículas de la pluralidad de micropartículas está recubierto al menos al 50 % con polímero, lo que significa que no está expuesto más del 50 % de la superficie del núcleo de proteína micronizada. En un caso, al menos el 60 %, al menos el 70 %, al menos el 80 %, al menos el 90 %, al menos el 95 %, al menos el 99 % o el 100 % de la superficie del núcleo de proteína micronizada está recubierta con polímero.
En un caso, la pluralidad de micropartículas, que varían en tamaño de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 70 micrómetros, comprenden (a) un núcleo de proteína micronizada de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros, en el que la proteína es uno o más de un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, un receptor o fragmento soluble del mismo, un fragmento de receptor soluble de células T, un fragmento de MHC soluble, una proteína de fusión del receptor Fc, una proteína de tipo Trap y una proteína VEGF-Trap; y (b) una corteza polimérica, en la que el polímero es uno o más de un polímero biocompatible, un polímero biodegradable, un polímero bioerosionable, ácido poliláctico (PLA), ácido poliglicólico (PGA), copolímero polilácticopoliglicólico (PLGA), poli-D,L-láctido-co-glicólido (PLGA), PLGA-fumarato de óxido de etileno, succinato de PLGA-alfa-tocoferil esterificado a polietilenglicol 1000 (PLGA-TGPS), polianhídrido poli [1,6-bis (p-carboxifenoxi) hexano] (pCPH), poli (ácido hidroxibutírico-ácido cohidroxivalérico) (PHB-PVA), copolímero de polietilenglicol-poli (ácido láctico) (PEG-PLA), poli(etil)cianoacrilato (PEC), poliisobutil-cianoacrilato, poli-N-(2-hidroxipropil) metacrilamida (poli (HPMA)), poli-p-R-hidroxibutirato (PHB), poli-p-R-hidroxialcanoato (PHA), poli-p-R-ácido málico, polímeros de fosfolípidos y colesterol, 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina/polietilenglicol-distearoilfosfatidiletanolamina (DOPC/PEG-DSPE)/colesterol, polisacáridos, celulosa, etilcelulosa, metilcelulosa, alginatos, dextrano, y polímeros de hidrogel de dextrano, amilosa, inulina, pectina y goma guar, quitosano, quitina, heparina, ácido hialurónico, polirrotaxanos y poliseudorrotaxanos basados en ciclodextrina (CD), poliaspartatos, poliglutamatos, polileucina, copolímeros de leucina-glutamato, succinato de polibutileno (PBS), gelatina, colágenos, fibrinas, fibroína, poliortoésteres, copolímero de poliortoésteres-poliamidina, copolímeros de poliortoésteres-diamina, poliortoésteres que incorporan ácidos latentes, copolímero de poli (etilenglicol)/poli (tereftalato de butileno) y sus combinaciones y copolímeros.
En un caso, la pluralidad de micropartículas, que varían en tamaño de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 70 micrómetros, con una mediana de tamaños de aproximadamente 15 micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros, comprenden (a) un núcleo de proteína micronizada de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros, con una mediana de tamaños de aproximadamente 10 micrómetros a aproximadamente 12 micrómetros, en el que la proteína es una proteína VEGF-Trap; y (b) una corteza polimérica, en la que el polímero es uno o más de PLA, PCL, PLGA, etilcelulosa y poliortoéster, y sus copolímeros o derivados.
También se desvela un método de fabricación de una micropartícula, que comprende un núcleo proteico y una corteza polimérica. En un caso, la micropartícula fabricada tiene un diámetro de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 70 micrómetros, o un diámetro de mediana de aproximadamente 15 micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros. En un caso, el método de fabricación de la micropartícula comprende (1) obtener una partícula proteica; (2) suspender la partícula proteica en una solución que comprende el polímero y un disolvente; y (3) eliminar el disolvente, en donde se forma una micropartícula que comprende el núcleo proteico recubierto con la corteza polimérica.
En un caso, la partícula proteica de la etapa (1) es una partícula proteica micronizada, que se obtiene secando por pulverización una solución que comprende la proteína. En algunos casos, la solución proteica se seca por pulverización mediante sonicación de boquilla doble, sonicación de boquilla sencilla o electropulverización. En algunos casos, la partícula proteica micronizada resultante, que forma el núcleo de la micropartícula fabricada, tiene un diámetro de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros, con una mediana del diámetro de aproximadamente 10 micrómetros a aproximadamente 12 micrómetros.
En algunos casos, la proteína que forma el núcleo es una proteína de unión a antígeno. En algunos casos, la proteína de unión a antígeno es uno cualquiera o más de un anticuerpo (p. ej., IgG) o fragmento de anticuerpo, un receptor o fragmento soluble del mismo, un fragmento de receptor soluble de células T, un fragmento de MHC soluble, una proteína de fusión del receptor Fc, una proteína de tipo Trap y una proteína VEGF-Trap. En un caso específico, la proteína es un VEGF-Trap que comprende la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 1.
En un caso, el disolvente se retira en la etapa (3) creando una dispersión de la mezcla de proteína-polímerodisolvente de la etapa (2) y permitiendo que el disolvente se evapore de las gotas creadas por la dispersión. En un caso, la dispersión se crea mediante secado por pulverización, que puede realizarse mediante sonicación de boquilla doble, sonicación de boquilla sencilla o electropulverización. En un caso, el disolvente se elimina de las gotas aplicando calor o aire o mediante extracción química.
En un caso, el polímero es biodegradable, bioerosionable y/o biocompatible. En algunos casos, el polímero es uno cualquiera o más de ácido poliláctico (PLA), ácido poliglicólico (PGA), copolímero poliláctico-poliglicólico (PLGA), poli-D,L-láctido-co-glicólido (PLGA), PLGA-fumarato de óxido de etileno, succinato de PLGA-alfa-tocoferil esterificado a polietilenglicol 1000 (PLGA-TGPS), polianhídrido poli [1,6-bis (p-carboxifenoxi) hexano] (pCPH), poli (ácido hidroxibutírico-ácido cohidroxivalérico) (PHB-PVA), copolímero de polietilenglicol-poli (ácido láctico) (PEG-PLA), poli-£-caprolactona (PCL), poli-alquil-ciano-acrilato (PAC), poli(etil)cianoacrilato (PEC), poliisobutil cianoacrilato, poli-W-(2-hidroxipropil) metacrilamida (poli (HPMA)), poli-p-R-hidrox ibutirato (PHB), poli-p-R-hidroxialcanoato (PHA), poli-p-R-ácido málico, polímeros de fosfolípidos y colesterol, 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina/polietilenglicol-distearoilfosfatidiletanolamina (DOPC/PEG-DSPE)/colesterol, polisacáridos, celulosa, etilcelulosa, metilcelulosa, alginatos, dextrano, y polímeros de hidrogel de dextrano, amilosa, inulina, pectina y goma guar, quitosano, quitina, heparina, ácido hialurónico, polirrotaxanos y poliseudorrotaxanos basados en ciclodextrina (CD), poliaspartatos, poliglutamatos, polileucina, copolímeros de leucina-glutamato, succinato de polibutileno (PBS), gelatina, colágenos, fibrinas, fibroína, poliortoésteres, copolímero de poliortoésteres-poliamidina, copolímeros de poliortoésteres-diamina, poliortoésteres que incorporan ácidos latentes, copolímero de poli (etilenglicol)/poli (tereftalato de butileno) y sus combinaciones y copolímeros. En un caso, el polímero es poli-£-caprolactona (PCL) o un derivado o copolímero de la misma. En un caso, el polímero es etil celulosa o un derivado o copolímero de la misma. En un caso, el polímero es poliortoéster, o un derivado del mismo, que contiene elementos lábiles por ácidos. En otro caso, el polímero es p La .
También se desvela un método para fabricar una micropartícula que comprende las etapas de (1) formar una partícula proteica micronizada que tiene un diámetro de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros, con una mediana del diámetro de aproximadamente 10 micrómetros a 12 micrómetros, secando por pulverización una solución que contiene una proteína, en donde la proteína es una proteína de unión a antígeno. En algunos casos, la proteína de unión a antígeno es uno cualquiera o más de un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, un receptor o fragmento soluble del mismo, un fragmento del receptor de linfocitos T soluble, un fragmento del MHC soluble, una proteína de fusión de receptor-Fc, una proteína de tipo trap y una proteína VEGF-Trap (p. ej., una que tiene la secuencia de la SEQ ID NO: 1); (2) suspender la partícula proteica micronizada en una solución que comprende el polímero y un disolvente, en donde el polímero es uno cualquiera o más de un polímero biodegradable, un polímero bioerosionable, un polímero biocompatible, ácido poliláctico (PLA), ácido poliglicólico (PGA), copolímero poliláctico-poliglicólico (PLGA), poli-D,L-láctido-co-glicólido (PLGA), PLGA-fumarato de óxido de etileno, succinato de PLGA-alfa-tocoferil esterificado a polietilenglicol 1000 (PLGA-TGPS), polianhídrido poli [1,6-bis (p-carboxifenoxi) hexano] (pCPH), poli (ácido hidroxibutírico-ácido cohidroxivalérico) (PHB-PVA), copolímero de polietilenglicol-poli (ácido láctico) (PEG-PLA), poli-£-caprolactona (PCL), poli-alquil-ciano-acrilato (PAC), poli(etil)cianoacrilato (PEC), poliisobutil cianoacrilato, poli-W-(2-hidroxipropil) metacrilamida (poli (HPMA)), poli-p-R-hidroxibutirato (PHB), poli-p-R-hidroxialcanoato (PHA), poli-p-R-ácido málico, polímeros de fosfolípidos y colesterol, 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina/polietilenglicol-distearoilfosfatidiletanolamina (DOPC/PEG-DSPE)/colesterol, polisacáridos, celulosa, etilcelulosa, metilcelulosa, alginatos, dextrano, y polímeros de hidrogel de dextrano, amilosa, inulina, pectina y goma guar, quitosano, quitina, heparina, ácido hialurónico, polirrotaxanos y poliseudorrotaxanos basados en ciclodextrina (CD), poliaspartatos, poliglutamatos, polileucina, copolímeros de leucina-glutamato, succinato de polibutileno (PBS), gelatina, colágenos, fibrinas, fibroína, poliortoésteres, copolímero de poliortoésterespoliamidina, copolímeros de poliortoésteres-diamina, poliortoésteres que incorporan ácidos latentes, copolímero de poli (etilenglicol)/poli (tereftalato de butileno) y sus combinaciones y copolímeros; y (3) eliminar el disolvente mediante secado por pulverización de suspensión de partícula proteica micronizada-polímero-disolvente y retirar el disolvente aplicando calor o aire, o extrayendo el disolvente, en donde se forma una micropartícula que tiene un diámetro de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 70 micrómetros, con una mediana de diámetro de aproximadamente 15 micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros, y que comprende un núcleo proteico y una corteza polimérica.
En algunos casos, el secado por pulverización de la etapa (1) o la etapa (3) se realiza mediante sonicación de boquilla doble, sonicación de boquilla sencilla o electropulverización.
En un caso, el método de fabricación de la micropartícula comprende las etapas de (1) formar una partícula de VRGF-Trap micronizada que tiene un diámetro de aproximadamente 10 micrómetros a 12 micrómetros secando por pulverización una solución que contiene una proteína VEGF-Trap; (2) suspender la partícula de VEGF-Trap micronizada en una solución que comprende poliortoéster que incorpora un ácido latente y un disolvente compatible, o etilcelulosa y un disolvente compatible y (3) eliminar el disolvente mediante (a) secado por pulverización de la suspensión de partícula de VEGF-Trap micronizada-poliortoéster-ácido latente-disolvente o la suspensión de partícula de VEGF-Trap micronizada-etilcelulosa- disolvente y (b) retirar el disolvente aplicando calor o aire, o extrayendo el disolvente, en donde se forma una micropartícula que tiene un diámetro de aproximadamente 15 micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros, y que comprende un núcleo de VEGF-Trap y una corteza polimérica de poliortoéster y sus copolímeros o derivados.
En un aspecto, la invención proporciona una formulación de liberación prolongada de una proteína terapéutica para la liberación o administración de un nivel constante de la proteína terapéutica a lo largo del tiempo. En particular, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica de liberación prolongada para su uso en el vítreo para el tratamiento de trastornos oculares vasculares, comprendiendo la formulación farmacéutica micropartículas que tienen un diámetro de 2 micrómetros a 70 micrómetros, teniendo las micropartículas un núcleo de partícula proteica en una corteza polimérica, conteniendo la partícula proteica menos del 3 % de agua en peso, en donde las micropartículas liberan la proteína en un ambiente acuoso fisiológico a aproximadamente 37 °C a una velocidad de aproximadamente 0,01 mg/semana a aproximadamente 0,30 mg/semana durante al menos 60 días. La formulación de liberación prolongada comprende una pluralidad de micropartículas, que varían en tamaño de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 70 micrómetros, cada una de las cuales puede comprender un núcleo de proteína micronizada de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros, y una corteza de polímero.
En una realización, la proteína terapéutica es una proteína de unión a antígeno. En algunas realizaciones, la proteína de unión a antígeno es uno o más de un anticuerpo (por ejemplo, IgG) o fragmento de anticuerpo, un receptor o fragmento soluble del mismo, un fragmento de receptor soluble de células T, un fragmento de MHC soluble, una proteína de fusión del receptor Fc, una proteína de tipo Trap y una proteína VEGF-Trap (por ejemplo, una de los cuales tiene una estructura primaria de la SEQ ID NO: 1). En una realización, la proteína terapéutica comprende un dominio Fc. En una realización, la proteína es un anticuerpo. En otra realización, la proteína es una IgG. En otra realización, la proteína terapéutica es una proteína de fusión del receptor Fc. En otra realización, la proteína terapéutica es una proteína de tipo Trap, que comprende un fragmento de receptor cognado y un dominio Fc. En una realización particular, la proteína terapéutica es una proteína VEGF-Trap. En otra realización más, la de VEGF-Trap comprende la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID NO: 1.
En una realización, la corteza polimérica comprende un polímero biocompatible. En una realización, la corteza polimérica comprende un polímero bioerosionable. En una realización, la corteza polimérica comprende un polímero biodegradable. En algunas realizaciones, la corteza polimérica comprende un polímero seleccionado del grupo que consiste en ácido poliláctico (PLA), ácido poliglicólico (PGA), copolímero poliláctico-poliglicólico (PLGA), poli-D,L-láctido-co-glicólido (PLGA), PLGA-fumarato de óxido de etileno, succinato de PLGA-alfa-tocoferil esterificado a polietilenglicol 1000 (PLGA-TGPS), polianhídrido poli [1,6-bis (p-carboxifenoxi) hexano] (pCPH), poli (ácido hidroxibutírico-ácido cohidroxivalérico) (PHB-PVA), copolímero de polietilenglicol-poli (ácido láctico) (PEG-PLA), poli-£-caprolactona (PCL), poli-alquil-ciano-acrilato (PAC), poli(etil)cianoacrilato (PEC), poliisobutil-cianoacrilato, poli-N-(2-hidroxipropil) metacrilamida (poli (HPMA)), poli-p-R-hidroxibutirato (PHB), poli-p-R-hidroxialcanoato (PHA), poli-p-R-ácido málico, polímeros de fosfolípidos y colesterol, 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina/polietilenglicoldistearoilfosfatidiletanolamina (DOPC/PEG-DSPE)/colesterol, polisacáridos, celulosa, etilcelulosa, metilcelulosa, alginatos, dextrano, y polímeros de hidrogel de dextrano, amilosa, inulina, pectina y goma guar, quitosano, quitina, heparina, ácido hialurónico, polirrotaxanos y poliseudorrotaxanos basados en ciclodextrina (CD), poliaspartatos, poliglutamatos, polileucina, copolímeros de leucina-glutamato, succinato de polibutileno (PBS), gelatina, colágenos, fibrinas, fibroína, poliortoésteres, copolímero de poliortoésteres-poliamidina, copolímeros de poliortoésteres-diamina, poliortoésteres que incorporan ácidos latentes, copolímero de poli (etilenglicol)/poli (tereftalato de butileno) y sus combinaciones y copolímeros. En una realización, el polímero es poli-£-caprolactona (PCL) o un derivado o copolímero de la misma. En una realización, la corteza polimérica comprende un PLGA. En una realización, la corteza polimérica comprende una etilcelulosa. En una realización, la corteza polimérica comprende uno o más de PLA, PLGA, etilcelulosa y poliortoéster, y sus copolímeros o derivados.
En una realización, la pluralidad de micropartículas comprende una colección de micropartículas que tienen un intervalo de espesores de la corteza polimérica, de modo que las micropartículas individuales de la colección de micropartículas se degradan a una velocidad diferente, lo que permite una velocidad uniforme de liberación de la proteína terapéutica.
En una realización, la pluralidad de micropartículas comprende una mezcla de partículas de proteína micronizada no recubiertas y micropartículas que tienen un intervalo de espesores de la corteza polimérica, lo que permite la liberación de proteínas terapéuticas a intervalos periódicos basados en el espesor de la corteza.
En una realización, la pluralidad de micropartículas comprende una mezcla de micropartículas que tienen cortezas poliméricas de niveles variables de hidrofobicidad para controlar el momento o la duración de la degradación y la posterior liberación. En una realización, las micropartículas cada una comprenden una capa interna de polímero y una capa externa de polímero, en la que la capa externa de polímero limita la hidratación de la capa interna de polímero para controlar la liberación de la proteína terapéutica.
La proteína terapéutica se libera de la pluralidad de micropartículas a una velocidad de aproximadamente 0,01 mg/semana a aproximadamente 0,30 mg/semana durante un periodo de al menos 60 días, cuando las micropartículas están en un entorno acuoso. En una realización, el entorno acuoso es tampón in vitro. En una realización, el entorno acuoso es in vivo. En una realización, el entorno acuoso es ex vivo. En una realización, el ambiente acuoso es un humor vitreo.
En una realización, la formulación de liberación prolongada comprende una pluralidad de micropartículas, que varían en tamaño de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 70 micrómetros y que comprenden (a) un núcleo de proteína terapéutica micronizada de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros, en el que la proteína terapéutica es una proteína de unión a antígeno, que en algunos casos puede ser uno o más de un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, un receptor o fragmento soluble del mismo, un fragmento de receptor soluble de células T, un fragmento de MHC soluble, una proteína de fusión del receptor Fc, una proteína de tipo Trap y una proteína VEGF-Trap; y (b) una corteza polimérica de un intervalo de espesores, en el que el polímero es uno o más de un polímero biocompatible, un polímero biodegradable, un polímero bioerosionable, ácido poliláctico (PLA), ácido poliglicólico (PGA), copolímero poliláctico-poliglicólico (PLGa ), poli-D,L-láctido-co-glicólido (PLGA), PLGA-fumarato de óxido de etileno, succinato de PLGA-alfa-tocoferil esterificado a polietilenglicol 1000 (PLGA-TGPS), polianhídrido poli [1,6-bis (p-carboxifenoxi) hexano] (pCPH), poli (ácido hidroxibutírico-ácido cohidroxivalérico) (PHB-PVA), copolímero de polietilenglicol-poli (ácido láctico) (PEG-PLA), poli-£-caprolactona (PCL), poli-alquil-ciano-acrilato (PAC), poli(etil)cianoacrilato (PEC), poliisobutil-cianoacrilato, poli-N-(2-hidroxipropil) metacrilamida (poli (HPMA)), poli-p-R-hidroxibutirato (PHB), poli-p-R-hidroxialcanoato (PHA), poli-p-R-ácido málico, polímeros de fosfolípidos y colesterol, 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina/polietilenglicoldistearoilfosfatidiletanolamina (DOPC/PEG-DSPE)/colesterol, polisacáridos, celulosa, etilcelulosa, metilcelulosa, alginatos, dextrano, y polímeros de hidrogel de dextrano, amilosa, inulina, pectina y goma guar, quitosano, quitina, heparina, ácido hialurónico, polirrotaxanos y poliseudorrotaxanos basados en ciclodextrina (CD), poliaspartatos, poliglutamatos, polileucina, copolímeros de leucina-glutamato, succinato de polibutileno (PBS), gelatina, colágenos, fibrinas, fibroína, poliortoésteres, copolímero de poliortoésteres-poliamidina, copolímeros de poliortoésteres-diamina, poliortoésteres que incorporan ácidos latentes, copolímero de poli (etilenglicol)/poli (tereftalato de butileno) y sus combinaciones y copolímeros, en el que las micropartículas liberan o proporcionan un nivel estable de la proteína terapéutica a una velocidad de aproximadamente 0,01 mg/semana a aproximadamente 0,30 mg/semana durante al menos 60 días.
En una realización, la formulación de liberación prolongada comprende una pluralidad de micropartículas, que varían en tamaño de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 70 micrómetros, con una mediana de tamaños de aproximadamente 15 micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros, y que comprenden (a) un núcleo de proteína micronizada de aproximadamente dos micrómetros a aproximadamente 30 micrómetros, con una mediana de tamaños de aproximadamente 10 micrómetros a aproximadamente 12 micrómetros, en el que la proteína es una proteína VEGF-Trap; y (b) una corteza polimérica de un intervalo de espesores, en el que el polímero es uno cualquiera o más de PLGA, etilcelulosa y poliortoéster, y sus copolímeros o derivados, de modo que en un ambiente acuoso las micropartículas liberan o proporcionan un nivel estable de VEGF-Trap a una velocidad de aproximadamente 0,06 ± 0,02 mg/semana durante al menos 60 días.
También se desvela un método para modular la liberación de una proteína. En un caso, el método comprende la etapa de preparar una pluralidad de micropartículas como se describe en el aspecto anterior, seguido de la etapa de poner las micropartículas en un disolvente. El disolvente en algunas realizaciones es acuoso. El disolvente puede ser in vitro, como en una solución tamponada con fosfato. El disolvente puede ser in vivo, como por ejemplo, humor vítreo.
Dibujos
La Figura 1 representa la cantidad relativa (% de volumen) de partículas de proteínas sin una corteza polimérica de un diámetro determinado (DCE (pm)) en una población de partículas de proteínas fabricadas a partir de 50 mg/ml de proteína VEGF-Trap, 25 mg/ml de proteína VEGF-Trap y 25 mg/ml de proteína VEGF-Trap más el 0,1 % de polisorbato 80.
La Figura 2 representa la cantidad relativa (% de volumen determinado por MFI) de micropartículas de un diámetro determinado (DCE (pm)) en una población de micropartículas fabricadas a partir de 50 mg/ml de proteína VEGF-Trap más 50 mg/ml de POE, 250 mg/ml de POE y 50 mg/ml de EC.
La Figura 3 representa la cantidad de proteína VEGF-Trap en miligramos liberados de micropartículas fabricadas a partir de 50 mg/ml de POE, 250 mg/ml de POE o 50 mg/ml de EC durante aproximadamente 60 días.
Descripción detallada
La micropartícula y la partícula de núcleo de proteína de la presente invención tienen una forma más o menos esférica. Algunas micropartículas y núcleos de proteínas se acercarán a la esfericidad, mientras que otras tendrán una forma más irregular. Por lo tanto, como se usa en este documento, el término "diámetro" significa cada uno de los siguientes: (a) el diámetro de una esfera que circunscribe la micropartícula o el núcleo de la proteína, (b) el diámetro de la esfera más grande que se ajusta dentro de los límites de la micropartícula o el núcleo de la proteína, (c) cualquier medida entre la esfera circunscrita de (a) y la esfera confinada de (b), incluida la media entre las dos, (d) la longitud del eje más largo de la micropartícula o el núcleo de la proteína, (e) la longitud del eje más corto de la micropartícula o el núcleo de la proteína, (f) cualquier medida entre la longitud del eje largo (d) y la longitud del eje corto (e), incluyendo la media entre los dos, y/o (g) el diámetro circular equivalente ("DCE"), según lo determinado por imágenes de micro flujo (MFI), análisis de seguimiento de nanopartículas (NTA) o métodos de oscurecimiento de la luz como la dispersión dinámica de la luz (DLS). Ver, en general, Sharma et al., Micro-flow imaging: flow microscopy applied to subvisible particulate analysis in protein formulations, AAPS J. 2010 Sep; 12 (3): 455-64. El diámetro generalmente se expresa en micrómetros (pm o micras). El diámetro puede determinarse por medición óptica.
"Partícula de proteína micronizada" o "partícula de proteína" significa una partícula que contiene múltiples moléculas de proteína con cantidades bajas, muy bajas o cercanas a cero de agua (por ejemplo, <3 % de agua en peso). Como se usa en el presente documento, la partícula de proteína micronizada generalmente es de forma esférica y tiene un DCE que varía de 2 micrómetros a aproximadamente 35 micrómetros. La partícula de proteína micronizada no está limitada a ninguna entidad proteica particular, y es adecuada para la preparación y administración de una proteína terapéutica. Las proteínas terapéuticas comunes incluyen, entre otras, proteínas de unión a antígeno, como por ejemplo, fragmentos de receptor solubles, anticuerpos (incluidas IgG) y derivados o fragmentos de anticuerpos, otras proteínas que contienen Fc, incluidas proteínas de fusión de Fc, y proteínas de fusión del receptor Fc, incluidas las proteínas de tipo Trap (Huang, C., Curr. Opin. Biotechnol 20: 692-99 (2009)) como por ejemplo VEGF-Trap.
Se puede hacer la partícula de proteína micronizada de la invención por cualquier método conocido en la técnica para hacer partículas de proteína de un tamaño de micrómetros. Por ejemplo, la partícula de proteína puede prepararse, entre otros, mediante secado por pulverización (más abajo), liofilización, molienda por chorro, cristalización por gota colgante (Ruth et al., Acta Crystallographica D56: 524-28 (2000)), precipitación gradual (Patente US 7.998.477 (2011)), liofilización de una mezcla acuosa de proteína-PEG (polietilenglicol) (Morita et al., Pharma. Res. 17: 1367-73 (2000)), precipitación de fluido supercrítico (Patente US 6.063.910 (2000)), o la formación de partículas inducidas por dióxido de carbono a alta presión (Bustami et al., Pharma. Res. 17: 1360-66 (2000)).
Como se usa en el presente documento, el término "proteína" se refiere a una molécula que comprende dos o más restos de aminoácidos unidos entre sí por enlaces peptídicos. Los péptidos, polipéptidos y proteínas también incluyen modificaciones que incluyen, pero no se limitan a, glicosilación, unión de lípidos, sulfatación, gammacarboxilación de restos de ácido glutámico, hidroxilación y ADP-ribosilación. Los polipéptidos pueden ser de interés científico o comercial, incluidos los medicamentos basados en proteínas. Los polipéptidos incluyen, entre otros, anticuerpos y proteínas quiméricas o de fusión. Los polipéptidos se producen mediante líneas celulares animales recombinantes usando métodos de cultivo celular.
Está previsto que un "anticuerpo" se refiera a moléculas de inmunoglobulina que consisten en cuatro cadenas de polipéptidos, dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas ligeras (L) interconectadas por enlaces disulfuro. Cada cadena pesada tiene una región variable de cadena pesada (HCVR o VH) y una región constante de cadena pesada. La región constante de la cadena pesada contiene tres dominios, CH1, CH2 y CH3. Cada cadena ligera tiene una región variable de cadena ligera y una región constante de cadena ligera. La región constante de la cadena ligera consta de un dominio (CL). Las regiones VH y VL pueden subdividirse en regiones de hipervariabilidad, denominadas regiones determinantes de complementariedad (CDR), intercaladas con regiones que están más conservadas, denominadas regiones marco (FR). Cada VH y VL se compone de tres CDR y cuatro FR, dispuestas desde el extremo amino al extremo carboxilo en el orden siguiente: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. El término "anticuerpo" incluye la referencia a inmunoglobulinas glicosiladas y no glicosiladas de cualquier isotipo o subclase. El término "anticuerpo" incluye, pero no se limita a, aquellos que se preparan, expresan, crean o aíslan por medios recombinantes, tales como anticuerpos aislados de una célula huésped transfectada para expresar el anticuerpo. Una IgG comprende un subconjunto de anticuerpos.
Las "proteínas de fusión Fc" comprenden parte o la totalidad de dos o más proteínas, una de las cuales es una porción Fc de una molécula de inmunoglobulina, que no están fusionadas en su estado natural. La preparación de proteínas de fusión que comprenden ciertos polipéptidos heterólogos fusionados a diversas porciones de polipéptidos derivados de anticuerpos (incluido el dominio Fc) ha sido descrita, por ejemplo, por Ashkenazi et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA 88: 10535, 1991; Byrn et al., Nature 344: 677, 1990; y Hollenbaugh y col., "Construction of Immunoglobulin Fusion Proteins", en Current Protocols in Immunology, Supl. 4, páginas 10.19.1-10.19.11, 1992. Las "proteínas de fusión del receptor Fc" comprenden uno o más de uno o más dominios extracelulares de un receptor acoplado a un resto Fc, que en algunas realizaciones comprende una región bisagra seguida de un dominio CH2 y CH3 de una inmunoglobulina. En algunas realizaciones, la proteína de fusión Fc contiene dos o más cadenas receptoras distintas que se unen a uno o más ligandos. Por ejemplo, una proteína de fusión Fc es una trampa, como por ejemplo una trampa IL-1 (por ejemplo, Rilonacept, que contiene la región de unión al ligando IL-1RAcP fusionada a la región extracelular IL-1R1 fusionada a Fc de hlgG1; véase Patente de EE.UU. n.° 6,927,004) o una VEGF-Trap (por ejemplo, Aflibercept, que contiene el dominio 2 de Ig del receptor de VEGF Flt1 fusionado al dominio 3 de Ig del receptor de VEGF Flk1 fusionado a Fc de hlgG1; por ejemplo, SEQ ID NO: 1; véanse Patentes de EE.UU. 7.087.411 y 7.279.159).
Como se usa en el presente documento, el término "polímero" se refiere a una macromolécula que comprende monómeros repetidos conectados por enlaces químicos covalentes. Los polímeros utilizados en la práctica de esta invención son biocompatibles y biodegradables. Un polímero biocompatible y biodegradable puede ser natural o sintético. Los polímeros naturales incluyen polinucleótidos, polipéptidos, tales como proteínas naturales, proteínas recombinantes, gelatina, colágenos, fibrinas, fibroína, poliaspartatos, poliglutamatos, polileucina, copolímeros de leucina-glutamato; y polisacáridos, tales como alginatos de celulosa, dextrano y polímeros de hidrogel de dextrano, amilosa, inulina, pectina y goma guar, quitosano, quitina, heparina y ácido hialurónico. Los polímeros sintéticos biocompatibles o biodegradables incluyen ácido poliláctico (p La ), ácido poliglicólico (PGA), copolímero polilácticopoliglicólico (PLGA), poli-D,L-láctido-co-glicólido (PLGA), PLGA-fumarato de óxido de etileno, PLGA-alfa-tocoferil succinato esterificado a polietilenglicol 1000 (PLGA-TGPS), polianhídrido poli [1,6-bis (p-carboxifenoxi) hexano] (pCPH), poli (ácido hidroxibutírico-ácido cohidroxivalérico) (PHB-PVA), copolímero de polietilenglicol-poli (ácido láctico) (PEG-PLA), poli-£-caprolactona (PCL), poli-alquil-ciano-acrilato (PAC), poli(etil)cianoacrilato (PEC), poliisobutil-cianoacrilato, poli-N-(2-hidroxipropil) metacrilamida (poli (HPMA)), poli-p-R-hidroxibutirato (PHB), poli-p-R-hidroxialcanoato (PHA), poli-p-R-ácido málico, polímeros de fosfolípidos y colesterol, 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina/polietilenglicol-distearoilfosfatidiletanolamina (DOPC/PEG-DsPE)/colesterol, etilcelulosa, polirrotaxanos y poliseudorrotaxanos basados en ciclodextrina (CD), succinato de polibutileno (PBS), copolímero de poliortoésteres-poliamidina, copolímeros de poliortoésteres-diamina, poliortoésteres que incorporan ácidos latentes para controlar las tasas de degradación, y, entre otros, copolímeros de poli (etilenglicol)/poli (tereftalato de butileno).
La etilcelulosa (EC) es un biomaterial bien conocido y fácilmente disponible utilizado en las ciencias farmacéuticas y alimentarias. Es un derivado de celulosa en el que algunos de los grupos hidroxilo de glucosa se reemplazan con éter etílico. Véase Martinac et al., J. Microencapsulation, 22 (5): 549-561 (2005) y las referencias allí citadas, que describen métodos para usar etilcelulosa como polímeros biocompatibles en la fabricación de microesferas. Véase también la patente de EE.UU. 4.210.529 (1980) y sus referencias para una descripción detallada de la etilcelulosa y los métodos para elaborar derivados de etilcelulosa.
El poli-D,L-láctido-co-glicólido (PLGA) también es un polímero biocompatible y biodegradable aprobado por la Administración de Fármacos y Alimentos (FDA, por sus siglas en inglés) conocido en la ingeniería de tejidos y sistemas de administración farmacéutica. El PLGA es un poliéster que comprende ácido glicólico y monómeros de ácido láctico. Para una descripción de la síntesis de PLGA y la fabricación de nanopartículas de PLGa , véase Astete y Sabliov, Biomater. Sci. Polym. Ed., 17 (3): 247-89 (2006) y las referencias allí citadas.
La poli-£-caprolactona (PCL) es otro polímero biocompatible y biodegradable aprobado por la FDA para su uso en seres humanos como dispositivo de administración de medicamentos. La PCL es un poliéster de £-caprolactona, que se hidroliza rápidamente en el cuerpo para formar un ácido hidroxicarboxílico no tóxico o de baja toxicidad. Para obtener una descripción de la fabricación de PCL, consulte Labet y Thielemans, Chemical Society Reviews 38: 3484-3504 (2009) y las referencias allí citadas. Para obtener una descripción de la fabricación y el uso de microesferas y nanoesferas basadas en PCL como sistemas de administración, consulte Sinha et al., Int. J. Pharm., 278 (1): 1-23 (2004) y las referencias allí citadas.
El poliortoéster (POE) es un polímero bioerosionable diseñado para la administración de fármacos. Generalmente es un polímero de un acetal de ceteno, preferiblemente un acetal de diceteno cíclico, tal como, por ejemplo, 3,9-dimetilen-2,4,8,10-tetraoxa espiro[5,5]-undecano, que se polimeriza mediante condensación de glicol para formar los enlaces ortoéster. Se puede encontrar una descripción de la síntesis de poliortoésteres y varios tipos, por ejemplo, en la patente US 4.304.767. Los poliortoésteres se pueden modificar para controlar su perfil de liberación del fármaco y las tasas de degradación sustituyendo varios dioles y polioles hidrófobos, como por ejemplo, reemplazando un hexanotriol con un decanotriol; además de añadir ácidos latentes, tales como, por ejemplo, ácido octanodioico o similares, a la cadena principal para aumentar la sensibilidad al pH. Otras modificaciones al poliortoéster incluyen la integración de una amina para aumentar la funcionalidad. La formación, descripción y uso de poliortoésteres se describen en las patentes US 5.968.543; US 4.764.364; Heller y Barr, Biomacromolecules, 5 (5): 1625-32 (2004); y Heller, Adv. Drug. Deliv. Rev., 57: 2053-62 (2005).
Como se usa en el presente documento, la frase "secado por pulverización" significa un método para producir un polvo seco que comprende partículas de un tamaño de micrómetros a partir de una suspensión usando un secador por pulverización. Los secadores por pulverización emplean un atomizador o una boquilla de pulverización para dispersar la suspensión en una pulverización de tamaño de gota controlado. Se pueden generar tamaños de gota de 10 a 500 |jm mediante secado por pulverización. A medida que se seca el disolvente (agua o disolvente orgánico), la sustancia proteica se seca en una partícula de un tamaño de micrómetros, formando una sustancia en forma de polvo; o en el caso de una suspensión de proteína-polímero, durante el secado, la cubierta endurecida con polímero en torno a la carga de proteína.
Las micropartículas de la invención comprenden un núcleo de proteína rodeado por una corteza o recubrimiento de polímero. Brevemente, se forma una partícula de proteína micronizada, que a continuación se dispersa en una solución de polímero (polímero disuelto en disolvente) para formar una suspensión de proteína-polímero. La suspensión de proteína-polímero se dispersa a continuación en gotas micronizadas (atomizadas), y el disolvente se elimina para formar la micropartícula.
En una realización, la partícula de proteína micronizada se forma preparando una solución de la proteína y a continuación sometiendo esa solución de proteína a dispersión y calor para formar un polvo seco que comprende la proteína. Un método para formar las partículas de proteína micronizadas es mediante secado por pulverización. En una realización, la proteína es una proteína terapéutica que está formulada para incluir tampones, estabilizadores y otros excipientes farmacéuticamente aceptables para preparar una formulación farmacéutica de la proteína terapéutica. Formulaciones farmacéuticas ejemplares se describen en las patentes US 7.365.165, US 7.572.893, US 7.608.261, US 7.655.758, US 7.807.164, US 2010-0279933, US 2011-0171241 y PCT/US11/54856.
La cantidad de proteína terapéutica contenida dentro de las formulaciones farmacéuticas de la presente invención puede variar dependiendo de las propiedades específicas deseadas de las formulaciones, así como de las circunstancias particulares y los fines para los cuales se pretende usar las formulaciones. En ciertas realizaciones, las formulaciones farmacéuticas pueden contener de aproximadamente 1 mg/ml a aproximadamente 500 mg/ml de proteína; de aproximadamente 5 mg/ml a aproximadamente 400 mg/ml de proteína; de aproximadamente 5 mg/ml a aproximadamente 200 mg/ml de proteína; de aproximadamente 25 mg/ml a aproximadamente 180 mg/ml de proteína; de aproximadamente 25 mg/ml a aproximadamente 150 mg/ml de proteína; o de aproximadamente 50 mg/ml a aproximadamente 180 mg/ml de proteína. Por ejemplo, las formulaciones de la presente invención pueden comprender aproximadamente 1 mg/ml; aproximadamente 2 mg/ml; aproximadamente 5 mg/ml; aproximadamente 10 mg/ml; aproximadamente 15 mg/ml; aproximadamente 20 mg/ml; aproximadamente 25 mg/ml; aproximadamente 30 mg/ml; aproximadamente 35 mg/ml; aproximadamente 40 mg/ml; aproximadamente 45 mg/ml; aproximadamente 50 mg/ml; aproximadamente 55 mg/ml; aproximadamente 60 mg/ml; aproximadamente 65 mg/ml; aproximadamente 70 mg/ml; aproximadamente 75 mg/ml; aproximadamente 80 mg/ml; aproximadamente 85 mg/ml; aproximadamente 86 mg/ml; aproximadamente 87 mg/ml; aproximadamente 88 mg/ml; aproximadamente 89 mg/ml; aproximadamente 90 mg/ml; aproximadamente 95 mg/ml; aproximadamente 100 mg/ml; aproximadamente 105 mg/ml; aproximadamente 110 mg/ml; aproximadamente 115 mg/ml; aproximadamente 120 mg/ml; aproximadamente 125 mg/ml; aproximadamente 130 mg/ml; aproximadamente 131 mg/ml; aproximadamente 132 mg/ml; aproximadamente 133 mg/ml; aproximadamente 134 mg/ml; aproximadamente 135 mg/ml; aproximadamente 140 mg/ml; aproximadamente 145 mg/ml; aproximadamente 150 mg/ml; aproximadamente 155 mg/ml; aproximadamente 160 mg/ml; aproximadamente 165 mg/ml; aproximadamente 170 mg/ml; aproximadamente 175 mg/ml; aproximadamente 180 mg/ml; aproximadamente 185 mg/ml; aproximadamente 190 mg/ml; aproximadamente 195 mg/ml; aproximadamente 200 mg/ml; aproximadamente 205 mg/ml; aproximadamente 210 mg/ml; aproximadamente 215 mg/ml; aproximadamente 220 mg/ml; aproximadamente 225 mg/ml; aproximadamente 230 mg/ml; aproximadamente 235 mg/ml; aproximadamente 240 mg/ml; aproximadamente 245 mg/ml; aproximadamente 250 mg/ml; aproximadamente 255 mg/ml; aproximadamente 260 mg/ml; aproximadamente 265 mg/ml; aproximadamente 270 mg/ml; aproximadamente 275 mg/ml; aproximadamente 280 mg/ml; aproximadamente 285 mg/ml; aproximadamente 200 mg/ml; aproximadamente 200 mg/ml; o aproximadamente 300 mg/ml de proteína terapéutica.
Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención comprenden uno o más excipientes. El término "excipiente", como se usa en el presente documento, significa cualquier agente no terapéutico añadido a la formulación para proporcionar una consistencia, viscosidad o efecto estabilizador deseados.
Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención también pueden comprender uno o más carbohidratos, por ejemplo, uno o más azúcares. El azúcar puede ser un azúcar reductor o un azúcar no reductor. Los "azúcares reductores" incluyen, por ejemplo, azúcares con un grupo cetona o aldehído y contienen un grupo hemiacetal reactivo, que permite que el azúcar actúe como agente reductor. Los ejemplos específicos de azúcares reductores incluyen fructosa, glucosa, gliceraldehído, lactosa, arabinosa, manosa, xilosa, ribosa, ramnosa, galactosa y maltosa. Los azúcares no reductores pueden comprender un carbono anomérico que es un acetal y no es sustancialmente reactivo con aminoácidos o polipéptidos para iniciar una reacción de Maillard. Ejemplos específicos de azúcares no reductores incluyen sacarosa, trehalosa, sorbosa, sucralosa, melezitosa y rafinosa. Los ácidos de azúcar incluyen, por ejemplo, ácidos sacáricos, gluconato y otros azúcares polihidroxilados y sus sales.
La cantidad de azúcar contenida dentro de las formulaciones farmacéuticas de la presente invención variará dependiendo de las circunstancias específicas y los fines previstos para los que se usan las formulaciones. En ciertas realizaciones, las formulaciones pueden contener de aproximadamente el 0,1 % a aproximadamente el 20 % de azúcar; de aproximadamente el 0,5 % a aproximadamente el 20 % de azúcar; de aproximadamente el 1 % a aproximadamente el 20 % de azúcar; de aproximadamente el 2 % a aproximadamente el 15 % de azúcar; de aproximadamente el 3 % a aproximadamente el 10 % de azúcar; de aproximadamente el 4 % a aproximadamente el 10 % de azúcar; o de aproximadamente el 5 % a aproximadamente el 10 % de azúcar. Por ejemplo, las formulaciones farmacéuticas de la presente invención pueden comprender aproximadamente el 0,5 %; aproximadamente el 1,0 %; aproximadamente el 1,5 %; aproximadamente el 2,0 %; aproximadamente el 2,5 %; aproximadamente el 3,0 %; aproximadamente el 3,5 %; aproximadamente el 4,0 %; aproximadamente el 4,5 %; aproximadamente el 5,0 %; aproximadamente el 5,5 %; aproximadamente el 6,0 %; aproximadamente el 6,5 %; aproximadamente el 7,0 %; aproximadamente el 7,5 %; aproximadamente el 8,0 %; aproximadamente el 8,5 %; aproximadamente el 9,0 %; aproximadamente el 9,5 %; aproximadamente el 10,0 %; aproximadamente el 10,5 %; aproximadamente el 11,0 %; aproximadamente el 11,5 %; aproximadamente el 12,0 %; aproximadamente el 12,5 %; aproximadamente el 13,0 %; aproximadamente el 13,5 %; aproximadamente el 14,0 %; aproximadamente el 14,5 %; aproximadamente el 15,0 %; aproximadamente el 15,5 %; aproximadamente el 16,0 %; 16,5 %; aproximadamente el 17,0 %; aproximadamente el 17,5 %; aproximadamente el 18,0 %; aproximadamente el 18,5 %; aproximadamente el 19,0 %; aproximadamente el 19,5 %; o aproximadamente el 20,0 % de azúcar (por ejemplo, sacarosa).
Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención también pueden comprender uno o más tensioactivos. Como se usa en el presente documento, el término "tensioactivo" significa una sustancia que reduce la tensión superficial de un fluido en el que se disuelve y/o reduce la tensión interfacial entre el aceite y el agua. Los tensioactivos pueden ser iónicos o no iónicos. Los ejemplos de tensioactivos no iónicos que pueden incluirse en las formulaciones de la presente invención incluyen, por ejemplo, alquil poli (óxido de etileno), alquil poliglucósidos (por ejemplo, octil glucósido y decil maltósido), alcoholes grasos tales como alcohol cetílico y alcohol oleílico, cocamida MEA, cocamida DEA y cocamida TEA. Los tensioactivos no iónicos específicos que pueden incluirse en las formulaciones de la presente invención incluyen, por ejemplo, polisorbatos tales como polisorbato 20, polisorbato 28, polisorbato 40, polisorbato 60, polisorbato 65, polisorbato 80, polisorbato 81 y polisorbato 85; poloxámeros tales como poloxámero 188, poloxámero 407; polietilen-polipropilenglicol; o polietilenglicol (PEG). El polisorbato 20 también se conoce como TWEEN 20, monolaurato de sorbitán y monolaurato de polioxietilensorbitán.
La cantidad de tensioactivo contenido dentro de las formulaciones farmacéuticas de la presente invención puede variar dependiendo de las propiedades específicas deseadas de las formulaciones, así como de las circunstancias y fines particulares para los que se pretende usar las formulaciones. En ciertas realizaciones, las formulaciones pueden contener de aproximadamente el 0,05 % a aproximadamente el 5 % de tensioactivo; o de aproximadamente el 0,1 % a aproximadamente el 0,2 % de tensioactivo. Por ejemplo, las formulaciones de la presente invención pueden comprender aproximadamente el 0,05 %; aproximadamente el 0,06 %; aproximadamente el 0,07 %; aproximadamente el 0,08 %; aproximadamente el 0,09 %; aproximadamente el 0,10 %; aproximadamente el 0,11 %; aproximadamente el 0,12 %; aproximadamente el 0,13 %; aproximadamente el 0,14 %; aproximadamente el 0,15 %; aproximadamente el 0,16 %; aproximadamente el 0,17 %; aproximadamente el 0,18 %; aproximadamente el 0,19 %; aproximadamente el 0,20 %; aproximadamente el 0,21 %; aproximadamente el 0,22 %; aproximadamente el 0,23 %; aproximadamente el 0,24 %; aproximadamente el 0,25 %; aproximadamente el 0,26 %; aproximadamente el 0,27 %; aproximadamente el 0,28 %; aproximadamente el 0,29 %; o aproximadamente el 0,30 % de tensioactivo (por ejemplo, polisorbato 20).
Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención también pueden comprender uno o más tampones. En algunas realizaciones, el tampón tiene un rango de tamponamiento que se superpone completamente o en parte al intervalo de pH 5,5-7,4. En una realización, el tampón tiene un pKa de aproximadamente 6,0 ± 0,5. En ciertas realizaciones, el tampón comprende un tampón fosfato. En ciertas realizaciones, el fosfato está presente a una concentración de 5 mM ± 0,75 mM a 15 mM ± 2,25 mM; 6 mM ± 0,9 mM a 14 mM ± 2,1 mM; 7 mM ± 1,05 mM a 13 mM ± 1,95 mM; 8 mM ± 1,2 mM a 12 mM ± 1,8 mM; 9 mM ± 1,35 mM a 11 mM ± 1,65 mM; 10 mM ± 1,5 mM; o aproximadamente 10 mM. En ciertas realizaciones, el sistema tampón comprende histidina a 10 mM ± 1,5 mM, a un pH de 6,0 ± 0,5.
Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención pueden tener un pH de aproximadamente 5,0 a aproximadamente 8,0. Por ejemplo, las formulaciones de la presente invención pueden tener un pH de aproximadamente 5,0; aproximadamente 5,2; aproximadamente 5,4; aproximadamente 5,6; aproximadamente 5,8; aproximadamente 6,0; aproximadamente 6,2; aproximadamente 6,4; aproximadamente 6,6; aproximadamente 6,8; aproximadamente 7,0; aproximadamente 7,2; aproximadamente 7,4; aproximadamente 7,6; aproximadamente 7,8; o aproximadamente 8,0.
En una realización particular, la proteína terapéutica es una proteína VEGF-Trap. Las formulaciones farmacéuticas para la formación de partículas micronizadas de proteína VEGF-Trap pueden contener de aproximadamente 10 mg/ml a aproximadamente 100 mg/ml de proteína VEGF-Trap, aproximadamente 10 mg/ml, aproximadamente 15 mg/ml, aproximadamente 20 mg/ml, aproximadamente 25 mg/ml, aproximadamente 30 mg/ml, aproximadamente 35 mg/ml, aproximadamente 40 mg/ml, aproximadamente 45 mg/ml, aproximadamente 50 mg/ml, aproximadamente 55 mg/ml, aproximadamente 60 mg/ml, aproximadamente 65 mg/ml, aproximadamente 70 mg/ml, aproximadamente 75 mg/ml, aproximadamente 80 mg/ml, aproximadamente 85 mg/ml, aproximadamente 90 mg/ml, aproximadamente 95 mg/ml o aproximadamente 100 mg/ml de proteína VEGF-Trap. Las soluciones pueden contener uno o más tampones de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 50 mM. En una realización, el tampón es fosfato aproximadamente 10 mM a un pH de aproximadamente 6 ± 0,5. Las soluciones también pueden contener sacarosa a una concentración de aproximadamente el 1 % a aproximadamente el 10 %. En una realización, la solución contiene sacarosa a aproximadamente el 2 % en p/p.
En algunas realizaciones, la solución de proteína terapéutica contiene proteína VEGF-Trap a aproximadamente 25 mg/ml o aproximadamente 50 mg/ml en fosfato 10 mM, pH 6,2, sacarosa al 2 % y opcionalmente polisorbato al 0,1 %.
La formulación terapéutica de proteínas a continuación se somete a dispersión y secado para formar partículas de proteínas micronizadas. Un método para realizar las partículas de proteína micronizadas es someter la solución de proteína a secado por pulverización. El secado por pulverización se conoce generalmente en la técnica y se puede realizar en equipos tales como, por ejemplo, un secador por pulverización BÜCHI Mini Spray Dryer B-290 (Buchi Labortechnik a G, Flawil, CH). En una realización particular, la solución de proteína (por ejemplo, pero sin limitarse a cualquiera de las formulaciones de VEGF-Trap descritas anteriormente) se bombea al secador por pulverización a una velocidad de aproximadamente 2 ml/min a aproximadamente 15 ml/min, o aproximadamente 7 ml/min. La temperatura de entrada del secador por pulverización se ajusta a una temperatura superior al punto de ebullición del agua, como por ejemplo, a aproximadamente 130 °C. La temperatura de salida a una temperatura por debajo del punto de ebullición del agua y por encima de la temperatura ambiente, como por ejemplo, 55 °C. En una realización específica, se bombea una solución de proteína (por ejemplo, solución de VEGF-Trap o solución de IgG) en un secador por pulverización BÜCHI Mini Spray Dryer B-290 a aproximadamente 7 ml/min, con una temperatura de entrada de aproximadamente 130 °C y una temperatura de salida de aproximadamente 55 °C, con el aspirador ajustado a 33 m3/h y el gas de pulverización a 530 l/h.
Las partículas de proteína micronizadas resultantes varían en tamaño desde aproximadamente 1 |jm hasta aproximadamente 100 jm de diámetro, dependiendo de la formulación particular y la concentración de proteínas y excipientes. En algunas realizaciones, las partículas de proteína micronizadas tienen un diámetro de aproximadamente 1 jm a aproximadamente 100 jm, de aproximadamente 1 jm a aproximadamente 40 jm, de aproximadamente 2 jm a aproximadamente 15 jm, de aproximadamente 2,5 jm a aproximadamente 13 jm, de aproximadamente 3 jm a aproximadamente 10 jm, de aproximadamente 5 jm, de aproximadamente 6 jm, de aproximadamente 7 jm, de aproximadamente 8 jm, de aproximadamente 9 jm, de aproximadamente 10 jm, de aproximadamente 11 jm o de aproximadamente 12 jm.
Las partículas de proteína micronizadas se recubren a continuación con un polímero biocompatible y biodegradable. Esto se puede lograr suspendiendo las partículas de proteína micronizadas en una solución de polímero. Una solución de polímero es esencialmente un polímero disuelto en un disolvente. Por ejemplo, el polímero biocompatible y biodegradable se puede disolver, entre otros, en cloruro de metileno, tetrahidrofurano, acetato de etilo o algún otro disolvente útil. El acetato de etilo es ampliamente conocido como disolvente seguro y a menudo se usa en la preparación de medicamentos, implantes y alimentos.
En algunas realizaciones, el polímero puede ser etilcelulosa ("EC"), poli (ácido láctico) ("PLA"), poliortoéster ("POE"), poli-D,L-láctido-co-glicólido ("PLGA") o poli-£-caprolactona ("PCL"). El polímero se puede disolver en el disolvente (por ejemplo, acetato de etilo) a una concentración de aproximadamente 10 mg/ml a aproximadamente 300 mg/ml, de aproximadamente 15 mg/ml a aproximadamente 295 mg/ml, de aproximadamente 20 mg/ml a aproximadamente 290 mg/ml, de aproximadamente 25 mg/ml a aproximadamente 280 mg/ml, de aproximadamente 30 mg/ml a aproximadamente 270 mg/ml, de aproximadamente 35 mg/ml a aproximadamente 265 mg/ml, de aproximadamente 40 mg/ml a aproximadamente 260 mg/ml, de aproximadamente 45 mg/ml a aproximadamente 260 mg/ml, de aproximadamente 50 mg/ml a aproximadamente 255 mg/ml, de aproximadamente 55 mg/ml a aproximadamente 250 mg/ml, de aproximadamente 20 mg/ml, de aproximadamente 25 mg/ml, de aproximadamente 30 mg/ml, de aproximadamente 35 mg/ml, de aproximadamente 40 mg/ml, de aproximadamente 45 mg/ml, de aproximadamente 50 mg/ml, de aproximadamente 75 mg/ml, de aproximadamente 100 mg/ml, de aproximadamente 125 mg/ml, de aproximadamente 150 mg/ml, de aproximadamente 175 mg/ml, de aproximadamente 200 mg/ml, de aproximadamente 225 mg/ml o de aproximadamente 250 mg/ml.
Las partículas de proteína micronizadas se añaden a la solución de polímero de aproximadamente 10 mg/ml a aproximadamente 100 mg/ml, de aproximadamente 15 mg/ml a aproximadamente 95 mg/ml, de aproximadamente 20 mg/ml a aproximadamente 90 mg/ml, de aproximadamente 25 mg/ml a aproximadamente 85 mg/ml, de aproximadamente 30 mg/ml a aproximadamente 80 mg/ml, de aproximadamente 35 mg/ml a aproximadamente 75 mg/ml, de aproximadamente 40 mg/ml a aproximadamente 70 mg/ml, de aproximadamente 45 mg/ml a aproximadamente 65 mg/ml, de aproximadamente 50 mg/ml a aproximadamente 60 mg/ml, aproximadamente a 25 mg/ml, aproximadamente a 30 mg/ml, aproximadamente a 35 mg/ml, aproximadamente a 40 mg/ml, aproximadamente a 45 mg/ml, o aproximadamente a 50 mg/ml. Las partículas se mezclan para formar una suspensión, que a continuación se somete a dispersión y secado para formar la partícula de proteína recubierta de polímero (es decir, micropartícula).
En una realización, la suspensión de la solución de partículas de proteína y polímero se somete al secado por pulverización, que se realiza de manera similar al método para fabricar las partículas de proteína micronizadas, pero con una temperatura de admisión reducida para proteger contra la ignición del disolvente orgánico o polímero. Brevemente, la suspensión de solución de partículas de proteína y polímero se bombea al secador por pulverización a una velocidad de aproximadamente 5 ml/min a aproximadamente 20 ml/min, o aproximadamente 12,5 ml/min. La suspensión se bombeó a 12,5 ml/min en el secador por pulverización con un caudal de aire de aspiración y gas de pulverización de aproximadamente 530 l/h y 35 m3/h (mm), respectivamente. La temperatura de entrada se ajustó a 90 °C y la temperatura de salida se ajustó a aproximadamente 54 °C. La temperatura de entrada del secador por pulverización se ajusta a una temperatura superior al punto de inflamación del disolvente, como por ejemplo, a aproximadamente 90 °C. La temperatura de salida a una temperatura inferior a la temperatura de admisión y superior a la temperatura ambiente, como por ejemplo, a aproximadamente 54 °C. En una realización particular, una suspensión que contiene aproximadamente 50 mg/ml de partículas de proteína (por ejemplo, VEGF-Trap) en aproximadamente 50 mg/ml a aproximadamente 250 mg/ml de solución de polímero/acetato de etilo se bombea a un BÜCHI Mini Spray Dryer B-290 a aproximadamente 12,5 ml/min, con una temperatura de entrada de aproximadamente 90 °C y una temperatura de salida de aproximadamente 54 °C, con el aspirador ajustado a aproximadamente 35 m3/h y el gas de pulverización a aproximadamente 530 l/h.
Las micropartículas resultantes, que contienen un núcleo de partículas de proteína dentro de una corteza polimérica, tienen un rango de diámetros de aproximadamente 2 jm a aproximadamente 70 |jm, de aproximadamente 5 jm a aproximadamente 65 jm, de aproximadamente 10 jm a aproximadamente 60 jm, de aproximadamente 15 jm a aproximadamente 55 jm, de aproximadamente 20 jm a aproximadamente 50 jm, de aproximadamente 15 jm, de aproximadamente 20 jm, de aproximadamente 25 jm o de aproximadamente 30 jm. La variación de tamaño en gran parte refleja el espesor de la corteza del polímero, aunque el diámetro del núcleo de la proteína podría contribuir en cierta medida a la variación de tamaño. La manipulación de la concentración inicial de la solución de polímero y/o el propio polímero puede controlar el diámetro de la micropartícula. Por ejemplo, las micropartículas que se fabricaron con polímero de 50 mg/ml tienen una mediana de tamaños de aproximadamente 15 jm a 20 jm, mientras que las micropartículas que se fabricaron con polímero de 250 mg/ml tenían una mediana de tamaños de aproximadamente 30 jm.
Las micropartículas en la formulación de la invención son útiles en la liberación prolongada o en el tiempo de proteínas terapéuticas. Por ejemplo, se prevé que las micropartículas de VEGF-Trap sean útiles en la liberación prolongada de la proteína terapéutica de VEGF-Trap en, por ejemplo, el vítreo para el tratamiento de trastornos vasculares oculares, o la implantación subcutánea para la liberación prolongada de VEGF-Trap para tratar el cáncer u otros trastornos.
Las micropartículas en la formulación de la presente invención liberan proteínas en un entorno acuoso fisiológico a aproximadamente 37 °C a una velocidad relativamente constante durante un período prolongado de tiempo, hasta al menos 60 días. En general, las micropartículas fabricadas con una mayor concentración de polímero (por ejemplo, 250 mg/ml) tendían a mostrar un perfil de liberación de proteínas relativamente lineal; mientras que las micropartículas fabricadas con una concentración más baja de polímero (por ejemplo, 50 mg/ml) tendían a mostrar una liberación súbita inicial seguida de un inicio de liberación retardada de la liberación súbita. Además, las micropartículas formadas a partir de una concentración más alta de polímero mostraron una velocidad de liberación de proteína más lenta que las formadas a partir de una concentración más baja de partículas. La calidad de la proteína liberada de las micropartículas a lo largo del tiempo fue consistente con la calidad del material de proteína de partida. Se produjo poca o ninguna degradación de proteínas.
Ejemplos
Los siguientes ejemplos se presentan para proporcionar a los expertos en la materia una divulgación y una descripción completas de cómo hacer y usar los métodos y composiciones de la invención. Se han realizado esfuerzos para garantizar la precisión con respecto a los números utilizados (por ejemplo, cantidades, tamaños, etc.) pero se deben tener en cuenta algunos errores y desviaciones experimentales.
En los siguientes ejemplos, la proteína VEGF-Trap ("VGT"), que es un dímero del polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos SEQ ID NO: 1, sirve como proteína de fusión del receptor Fc ejemplar.
Ejemplo 1: Proteínas micronizadas
Soluciones que contenían 25 mg/ml de proteína VEGF-Trap ("VGT"), 25 mg/ml de VGT más el 0,1 % de polisorbato 80 y 50 mg/ml de VGT en fosfato 10 mM, 2 % de sacarosa, a pH 6,2 se atomizaron cada una independientemente en una micronizador de pulverización seco (BÜCHI Mini Spray Dryer B-290, Buchi Labortechnik AG, Flawil, CH) para formar gotas que contienen VEGF-Trap. Se aplicó calor para evaporar el agua de las gotas, dando como resultado un polvo que contiene VEGF-Trap. La temperatura de entrada se ajustó a 130 °C y la temperatura de salida a aproximadamente 55 °C. El aspirador se ajustó a 33 m3/h y el gas de pulverización a 530 l/h. La solución de VGT se bombeó a aproximadamente 7 ml/min.
El tamaño de las partículas VGT resultantes se midió mediante imágenes de micro flujo (MFI) e imágenes de dispersión dinámica de luz (DLS). La Figura 1 representa la distribución del tamaño de partícula determinada por MFI para las partículas de VGT derivadas de cada una de las concentraciones de 25 mg/ml de VGT, 25 mg/ml de VGT más el 0,1 % de polisorbato 80 y 50 mg/ml de VGT. Para todas las concentraciones, el diámetro circular equivalente (DCE) de las partículas VGT varió de aproximadamente 1 jm a aproximadamente 39 jm, con un tamaño para la mayoría de las partículas de aproximadamente 2 jm a aproximadamente 14 jm. Para la solución de 25 mg/ml de VGT, las partículas se agruparon en el rango de aproximadamente 2,5 jm a aproximadamente 8,8 jm, con una moda de aproximadamente 6 jm. Para la solución de 25 mg/ml de VGT más el 0,1 % de polisorbato 80, las partículas se agruparon en el rango de aproximadamente 2,5 jm a aproximadamente 9,7 jm, con una moda de aproximadamente 6 jm. Para la solución de VGT de 50 mg/ml, las partículas se agruparon en el rango de aproximadamente 2,7 jm a aproximadamente 12,8 jm, con una moda de aproximadamente 7 jm. Las medianas de los diámetros para cada formulación, según lo determinado por los métodos MFI y DLS, se describen en la Tabla 1. Las partículas de VGT se reconstituyeron en agua para inyección y se examinaron mediante exclusión por tamaños, es decir, exclusión por tamaños-cromatografía líquida de ultra rendimiento (SE-UPLC) para determinar la pureza de la proteína. No se observó ningún cambio en la pureza después de la micronización en relación con el material de partida (ver Tabla 3).
T l 1: M i n l m ñ rí l r ín m n l rmin r MFI DL
Figure imgf000014_0001
Ejemplo 2: Suspensiones de proteína micronizadas en soluciones de polímero orgánico
Se usaron varios polímeros o se contemplan para su uso en la fabricación de la corteza polimérica de las micropartículas. Esos polímeros incluyen, entre otros, etilcelulosa ("EC"), poliortoéster ("POE"), poli-D,L-láctido-coglicólido ("PLGA") y poli-£-caprolactona ("PCL").
Recubrimiento de etilcelulosa
Las partículas de VEGF-Trap micronizadas se suspendieron en una solución de 50 mg/ml de etilcelulosa en acetato de etilo a una concentración de aproximadamente 50 mg/ml de VGT; en el presente documento se denomina "suspensión VGT-50-EC".
Las partículas de VEGF-Trap micronizadas se suspendieron en una solución de 100 mg/ml de etilcelulosa en acetato de etilo a una concentración de aproximadamente 50 mg/ml de VGT; en el presente documento se denomina "suspensión VGT-100-EC".
Las partículas de VEGF-Trap micronizadas se suspenden en una solución de 250 mg/ml de etilcelulosa en acetato de etilo a una concentración de aproximadamente 50 mg/ml de VGT; en el presente documento se denomina "suspensión VGT-250-EC".
Recubrimiento de poliortoéster
Las partículas de VEGF-Trap micronizadas se suspendieron en una solución de poliortoéster de 50 mg/ml que contenía aproximadamente el 5 % de ácido latente en acetato de etilo a una concentración de aproximadamente 50 mg/ml de VGT; en el presente documento se denomina "suspensión VGT-50-POE".
Las partículas de VEGF-Trap micronizadas se suspendieron en una solución de poliortoéster de 250 mg/ml que contenía aproximadamente el 5 % de ácido latente en acetato de etilo a una concentración de aproximadamente 50 mg/ml de VGT; en el presente documento se denomina "suspensión VGT-250-POE".
Recubrimiento de poli-D.L-láctido-co-glicólido
Las partículas de VEGF-Trap micronizadas se suspendieron en una solución de 50 mg/ml de PLGA en acetato de etilo a una concentración de aproximadamente 50 mg/ml de VGT; en el presente documento se denomina "suspensión VGT-50-PLGA".
Las partículas de VEGF-Trap micronizadas se suspendieron en una solución de 200 mg/ml de PLGA en acetato de etilo a una concentración de aproximadamente 50 mg/ml de VGT; en el presente documento se denomina "suspensión VGT-200-PLGA".
Las partículas de VEGF-Trap micronizadas se suspendieron en una solución de 250 mg/ml de PLGA en acetato de etilo a una concentración de aproximadamente 50 mg/ml de VGT; en el presente documento se denomina "suspensión VGT-250-PLGA".
Recubrimiento de pol¡-£-caprolactona
Las partículas de VEGF-Trap micronizadas se suspenden en una solución de 50 mg/ml de PCL en acetato de etilo a una concentración de aproximadamente 50 mg/ml de VGT; en el presente documento se denomina "suspensión VGT-50-PCL".
Las partículas de VEGF-Trap micronizadas se suspenden en una solución de 250 mg/ml de PCL en acetato de etilo a una concentración de aproximadamente 50 mg/ml de VGT; en el presente documento se denomina "suspensión VGT-250-PCL".
La PCL tiene una Tg baja y puede no ser adecuada para el secado por calor como se describe a continuación, pero puede usarse para la extracción con disolvente en un baño acuoso con alcohol polivinílico (PVA), por ejemplo.
Ejemplo 3: Dispersión de gotas finas de proteína-polímero y eliminación de disolventes
Cada suspensión de polímero VGT, que se preparó de acuerdo con el Ejemplo 2 (más arriba), se sometió a secado por pulverización usando un secador por pulverización BÜCHI Mini Spray Dryer B-290 (Buchi Labortechnik AG, Flawil, CH). Brevemente, cada suspensión se atomizó para formar microgotas, que posteriormente se secaron con calor para eliminar el disolvente y formar las micropartículas de proteínas recubiertas con polímero. La suspensión se bombeó a 12,5 ml/min en el secador por pulverización con un caudal de aire de aspiración y gas de pulverización de aproximadamente 530 l/h y 35 m3/h, respectivamente. La temperatura de entrada se ajustó a 90 °C y la temperatura de salida se ajustó a aproximadamente 54 °C.
Ejemplo 4: Caracterización de micropartículas de proteína-polímero
Las partículas de proteína recubiertas de polímero secadas por pulverización fabricadas de acuerdo con el proceso ejemplificado generan una pluralidad de micropartículas que tienen un intervalo de diámetros circulares equivalentes de aproximadamente 2,5 pm a aproximadamente 65 pm (Figura 2). La variación de tamaño en gran parte refleja el espesor de la corteza del polímero, aunque el diámetro del núcleo de la proteína podría contribuir en cierta medida a la variación de tamaño.
El diámetro de la micropartícula se correlaciona con la concentración inicial de la solución de polímero (Tabla 2, Figura 2). Las micropartículas que se fabricaron usando 50 mg/ml de polímero tenían una mediana de tamaños de aproximadamente 17 pm ± 2,8 pm. Las micropartículas que se fabricaron usando 250 mg/ml de polímero tenían una mediana de tamaños de aproximadamente 29 pm.
Ejemplo 5: Estabilidad de la proteína después del secado por pulverización
La estabilidad de la proteína VEGF-Trap se evaluó mediante cromatografía de exclusión por tamaños cuantitativa (SE-UPLC), que permite la cuantificación de productos de degradación más pequeños y productos de agregación más grandes en relación con el monómero intacto. Los resultados se describen en la Tabla 3. Esencialmente, la proteína se mantuvo estable durante los procesos de secado por pulverización y recubrimiento por pulverización. La proporción promedio en peso de proteína a polímero también se determinó para las micropartículas fabricadas. Se extrajo una colección de micropartículas fabricadas con polímeros y concentración de polímeros variados y se sometió a cromatografía cuantitativa en fase inversa (RP-HpLC). Los resultados se presentan en la Tabla 3. Los datos pueden interpretarse para respaldar la teoría de que una concentración inicial más alta de polímero produce una corteza polimérica más gruesa en la micropartícula.
Tabla 2: Valores de diámetro circular e uivalente
Figure imgf000015_0002
T l : E ili r r ín
Figure imgf000015_0001
Ejemplo 6: Liberación de proteína de las micropartículas
La liberación de proteína de las micropartículas se determinó suspendiendo varios lotes de micropartículas en tampón (fosfato 10 mM, polisorbato 20 al 0,03 %, pH 7,0) y midiendo la cantidad y la calidad de la proteína liberada en la solución a lo largo del tiempo mientras se incubaban a 37 °C. A intervalos de 1-2 semanas, las micropartículas se sedimentaron mediante centrifugación suave y se recogió el 80 % del sobrenadante que contenía la proteína liberada para su posterior análisis. Se reemplazó una cantidad equivalente de tampón fresco y las micropartículas se resuspendieron mediante agitación con vórtex suave y se devolvieron a la cámara de incubación a 37 °C. La cantidad y calidad de la proteína en el sobrenadante se evaluó mediante cromatografía de exclusión por tamaños. En general, las micropartículas fabricadas con una mayor concentración de polímero (por ejemplo, 250 mg/ml) tendían a mostrar un perfil de liberación de proteínas relativamente lineal; mientras que las micropartículas fabricadas con una concentración más baja de polímero (por ejemplo, 50 mg/ml) tendían a mostrar una liberación súbita inicial seguida de un inicio de liberación retardada de la liberación súbita. Los datos que muestran la liberación prolongada de proteína, que se mantuvo estable, durante aproximadamente 60 días se muestran en la Figura 3 (datos de liberación). La Tabla 4 resume los datos de la tasa de liberación lineal.
_____________________ Tabla 4: Dinámica de liberación de proteínas_____________________ Material VEGF-Trap de liberación de proteínas (mg VGT/semana) VGT (50 mg/ml) POE (50 mg/ml) 0,14 ± 0,16
VGT (50 mg/ml) POE (250 mg/ml) 0,06 ± 0,02
VGT (50 mg/ml) EC (50 mg/ml) 0,031 ± 0,02
Figure imgf000016_0001
Ejemplo 7: El tamaño de las partículas se puede manipular por la concentración de polímeros y el flujo de gases de pulverización
Las distribuciones del tamaño de partícula se controlaron mediante la concentración de polímero y el flujo de atomización del gas de pulverización. El aumento de la concentración de polímero desplazó la distribución hacia partículas más grandes (200 mg/ml de PLGA a 45 pm de flujo de gas de pulverización frente a 100 mg/ml de PLGA a 45 pm de flujo de gas de pulverización; ver Tabla 5). De manera similar, un flujo de gas de pulverización de atomización más bajo dio como resultado gotas más grandes y, por lo tanto, partículas más grandes (PLGA de 100 mg/ml a un flujo de gas de pulverización de 25 pm frente a PLGa de 100 mg/ml a un flujo de gas de pulverización de 45 pm; ver Tabla 5).
T l : T m ñ r í l l m ri n^ r xim
Figure imgf000016_0003
Ejemplo 8: Tamaño de las partículas y liberación de proteína a través de varios polímeros
La VEGF-Trap o la IgG se recubrieron por pulverización con poli (ácido láctico) de bajo peso molecular (202S) (PLA-LMW), poli (ácido láctico) de alto peso molecular (203S) (PLA-HMW), polianhídrido poli [1,6-bis(p-carboxifenoxi) hexano] (pCPH), poli (ácido hidroxibutírico-ácido cohidroxivalérico) (PHB-PVA), copolímero en bloque de PEG-poli (ácido láctico) (PEG-PLA) y poli-D,L-láctido-co-glicólido (PLGA). Se combinaron 25 mg/ml de proteína secada por pulverización con 50-100 mg/ml de polímero. Los ensayos de liberación in vitro se realizaron en tampón fosfato 10 mM, a pH 7,2 y 37 °C. Los resultados se muestran en la Tabla 6.
Tabla 6: Tamaño de partícula dependiente de polímero y liberación de proteína (todas las métricas son a roximadas
Figure imgf000016_0002
Ejemplo 9: Estabilidad de la proteína en varios polímeros
Se extrajeron la VEGF-Trap y la IgG de sus respectivas capas de polímero y se midió la pureza por SE-UPLC. Los resultados se resumen en la Tabla 7. Las proteínas generalmente eran compatibles con el proceso de recubrimiento por pulverización para los polímeros probados. La proteína permaneció estable durante al menos 14 días para aquellos polímeros que continuaron liberando proteína.

Claims (14)

REIVINDICACIONES
1. Una formulación farmacéutica de liberación prolongada para su uso en el vitreo para el tratamiento de trastornos oculares vasculares, comprendiendo la formulación farmacéutica micropartículas que tienen un diámetro de 2 micrómetros a 70 micrómetros, teniendo las micropartículas un núcleo de partícula proteica dentro de una corteza polimérica, conteniendo la partícula proteica menos de 3 % de agua en peso, en donde las micropartículas liberan la proteína en un ambiente acuoso fisiológico a aproximadamente 37 °C a una velocidad de aproximadamente 0,01 mg/semana a aproximadamente 0,30 mg/semana durante al menos 60 días.
2. La formulación farmacéutica de liberación prolongada para el uso de la reivindicación 1, en donde la corteza polimérica comprende poliortoéster (POE) y la velocidad de liberación estable es de 0,01 mg/semana a 0,30 mg/semana.
3. La formulación farmacéutica de liberación prolongada para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la proteína:
(a) es una proteína de unión a antígeno;
(b) comprende un dominio Fc;
(c) es un anticuerpo o una proteína de fusión de receptor-Fc; y/o
(d) es un fragmento de anticuerpo.
4. La formulación farmacéutica de liberación prolongada para el uso de la reivindicación 3, en donde:
(a) la proteína es una fusión de receptor-Fc, que es una VEGF-Trap; o
(b) un anticuerpo que es un anticuerpo monoclonal humano.
5. La formulación farmacéutica de liberación prolongada para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde el polímero es un polímero biodegradable.
6. La formulación farmacéutica de liberación prolongada para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde el polímero se selecciona del grupo que consiste en ácido poliláctico (PLA), polianhídrido poli [1,6-bis (p-carboxifenoxi) hexano] (pCPH), poli (ácido hidroxibutírico-ácido cohidroxivalérico) (PHB-PVA), copolímero de polietilenglicol-poli (ácido láctico) (PEG-PLA), poli-D,L-láctido-co-glicólido (PLGA), poliortoéster (POE), etilcelulosa (EC) y poli-e-caprolactona (PCL).
7. La formulación farmacéutica de liberación prolongada para el uso de la reivindicación 2, en donde el polímero es POE a 50 mg/ml, la proteína es VEGF-Trap a 50 mg/ml, la relación promedio de proteína con respecto a polímero es de 14,6 en peso, el tamaño modal de la partícula es de 9,4 micrómetros, al menos 96,3 % de la proteína conserva su conformación nativa según lo determinado por cromatografía de exclusión por tamaño y la proteína se libera de la corteza polimérica a una velocidad de 0,14 x 0,16 mg/semana.
8. La formulación farmacéutica de liberación prolongada para el uso de la reivindicación 2, en donde el polímero es POE a 250 mg/ml, la proteína es VEGF-Trap a 50 mg/ml, la relación promedio de proteína con respecto a polímero es de 1,8 en peso, el tamaño modal de la partícula es de 28,5 micrómetros, al menos 97,7 % de la proteína conserva su conformación nativa según lo determinado por cromatografía de exclusión por tamaño y la proteína se libera de la corteza polimérica a una velocidad de 0,06 x 0,02 mg/semana.
9. La formulación farmacéutica de liberación prolongada para el uso de la reivindicación 2, en donde el polímero es EC a 50 mg/ml, la proteína es VEGF-Trap a 50 mg/ml, la relación promedio de proteína con respecto a polímero es de 6,1 en peso, el tamaño modal de la partícula es de 16,5 micrómetros, al menos 97,1 % de la proteína conserva su conformación nativa según lo determinado por cromatografía de exclusión por tamaño y la proteína se libera de la corteza polimérica a una velocidad de 0,031 x 0,02 mg/semana.
10. La formulación farmacéutica de liberación prolongada para el uso de la reivindicación 2, en donde el polímero es PLGA, la proteína es IgG y al menos 92 % de la proteína conserva su conformación nativa después de 14 días según lo determinado por cromatografía de exclusión por tamaño.
11. La formulación farmacéutica de liberación prolongada para el uso de la reivindicación 2, en donde el polímero es POE (AP141), la proteína es VEGF-Trap y al menos 96,7 % de la proteína conserva su conformación nativa después de 14 días según lo determinado por cromatografía de exclusión por tamaño.
12. Una formulación farmacéutica de liberación prolongada para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad ocular.
13. Un método para fabricar una formulación farmacéutica de liberación prolongada para el uso de la reivindicación 1 que comprende (a) obtener un núcleo proteico mediante secado por pulverización de una solución que contiene la proteína; (b) suspender la partícula proteica en una solución que comprende un polímero y un disolvente; y (c) eliminar el disolvente mediante evaporación.
14. El método de la reivindicación 13, en donde la proteína es un anticuerpo o una proteína de fusión de receptor-Fc.
ES18173299T 2011-11-18 2012-11-18 Micropartícula que contiene proteína terapéutica recubierta con polímero biodegradable para uso médico Active ES2810003T3 (es)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161561525P 2011-11-18 2011-11-18

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2810003T3 true ES2810003T3 (es) 2021-03-08

Family

ID=47295198

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES18173299T Active ES2810003T3 (es) 2011-11-18 2012-11-18 Micropartícula que contiene proteína terapéutica recubierta con polímero biodegradable para uso médico
ES22150172T Active ES2985784T3 (es) 2011-11-18 2012-11-18 Micropartículas de proteínas recubiertas con polímeros para formulaciones de liberación prolongada para su uso en el humor vítreo del ojo para tratar trastornos oculares vasculares
ES12795967T Active ES2775104T5 (es) 2011-11-18 2012-11-18 Método de fabricación de una formulación farmacéutica de liberación prolongada que comprende micropartículas de proteínas recubiertas de polímero utilizando secado por pulverización
ES19180351T Active ES2909777T3 (es) 2011-11-18 2012-11-18 Formulación de liberación prolongada que comprende micropartículas para su uso en el humor vítreo del ojo para tratar trastornos oculares vasculares

Family Applications After (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES22150172T Active ES2985784T3 (es) 2011-11-18 2012-11-18 Micropartículas de proteínas recubiertas con polímeros para formulaciones de liberación prolongada para su uso en el humor vítreo del ojo para tratar trastornos oculares vasculares
ES12795967T Active ES2775104T5 (es) 2011-11-18 2012-11-18 Método de fabricación de una formulación farmacéutica de liberación prolongada que comprende micropartículas de proteínas recubiertas de polímero utilizando secado por pulverización
ES19180351T Active ES2909777T3 (es) 2011-11-18 2012-11-18 Formulación de liberación prolongada que comprende micropartículas para su uso en el humor vítreo del ojo para tratar trastornos oculares vasculares

Country Status (20)

Country Link
US (4) US20130129830A1 (es)
EP (4) EP2790681B9 (es)
JP (5) JP6267649B2 (es)
KR (4) KR102218223B1 (es)
CN (2) CN103957898B (es)
AU (1) AU2012340107B2 (es)
BR (1) BR112014011915B1 (es)
CA (2) CA3076725A1 (es)
DK (3) DK2790681T4 (es)
ES (4) ES2810003T3 (es)
FI (1) FI2790681T4 (es)
HU (2) HUE051644T2 (es)
IL (4) IL303832A (es)
MX (2) MX362286B (es)
PL (3) PL3574897T3 (es)
PT (2) PT3574897T (es)
RU (2) RU2642664C2 (es)
SG (2) SG11201402152YA (es)
WO (1) WO2013075068A1 (es)
ZA (4) ZA201403379B (es)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2807552A1 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
EP3431485B2 (en) 2010-10-01 2024-09-04 ModernaTX, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
WO2012135805A2 (en) 2011-03-31 2012-10-04 modeRNA Therapeutics Delivery and formulation of engineered nucleic acids
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
EP2763701B1 (en) 2011-10-03 2018-12-19 Moderna Therapeutics, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
ES2810003T3 (es) 2011-11-18 2021-03-08 Regeneron Pharma Micropartícula que contiene proteína terapéutica recubierta con polímero biodegradable para uso médico
KR20140102759A (ko) 2011-12-16 2014-08-22 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 변형된 뉴클레오사이드, 뉴클레오타이드 및 핵산 조성물
DE18200782T1 (de) 2012-04-02 2021-10-21 Modernatx, Inc. Modifizierte polynukleotide zur herstellung von proteinen im zusammenhang mit erkrankungen beim menschen
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9878056B2 (en) 2012-04-02 2018-01-30 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
CA2892529C (en) 2012-11-26 2023-04-25 Moderna Therapeutics, Inc. Terminally modified rna
WO2014152211A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Moderna Therapeutics, Inc. Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
EP3041934A1 (en) 2013-09-03 2016-07-13 Moderna Therapeutics, Inc. Chimeric polynucleotides
US20160194368A1 (en) 2013-09-03 2016-07-07 Moderna Therapeutics, Inc. Circular polynucleotides
US10023626B2 (en) 2013-09-30 2018-07-17 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
EA201690675A1 (ru) 2013-10-03 2016-08-31 Модерна Терапьютикс, Инк. Полинуклеотиды, кодирующие рецептор липопротеинов низкой плотности
US9840553B2 (en) 2014-06-28 2017-12-12 Kodiak Sciences Inc. Dual PDGF/VEGF antagonists
WO2016011226A1 (en) 2014-07-16 2016-01-21 Moderna Therapeutics, Inc. Chimeric polynucleotides
PL3389636T3 (pl) * 2015-12-16 2022-11-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Kompozycje i metody wytwarzania mikrocząstek białkowych
EP4039699A1 (en) 2015-12-23 2022-08-10 ModernaTX, Inc. Methods of using ox40 ligand encoding polynucleotides
WO2017117464A1 (en) 2015-12-30 2017-07-06 Kodiak Sciences Inc. Antibodies and conjugates thereof
US20190241658A1 (en) 2016-01-10 2019-08-08 Modernatx, Inc. Therapeutic mRNAs encoding anti CTLA-4 antibodies
WO2018213731A1 (en) 2017-05-18 2018-11-22 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding tethered interleukin-12 (il12) polypeptides and uses thereof
EP3459529A1 (en) 2017-09-20 2019-03-27 Tillotts Pharma Ag Preparation of sustained release solid dosage forms comprising antibodies by spray drying
MX2020005170A (es) 2017-11-17 2020-10-16 Amgen Inc Formulaciones de proteinas de fusion vegfr-fc.
BR112020017872A2 (pt) 2018-03-02 2020-12-22 Kodiak Sciences Inc. Anticorpos de il-6 e construtos de fusão e conjugados dos mesmos
US20220098279A1 (en) * 2019-01-30 2022-03-31 Amgen Inc. Aflibercept attributes and methods of characterizing and modifying thereof
WO2021072265A1 (en) 2019-10-10 2021-04-15 Kodiak Sciences Inc. Methods of treating an eye disorder
CN119318636A (zh) * 2019-11-25 2025-01-17 里珍纳龙药品有限公司 使用非水性乳液的持续释放调配物
CN115887760A (zh) * 2022-11-21 2023-04-04 娜罗曼苏(杭州)医疗生物科技有限公司 一种注射用左旋聚乳酸制备工艺

Family Cites Families (85)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4210529A (en) 1974-12-26 1980-07-01 Midwest Research Institute Blood compatible polymers and applications thereof
US4304767A (en) 1980-05-15 1981-12-08 Sri International Polymers of di- (and higher functionality) ketene acetals and polyols
US4764364A (en) 1986-02-25 1988-08-16 S R I International Method of preparing bioerodible polymers having pH sensitivity in the acid range and resulting product
US5104221A (en) 1989-03-03 1992-04-14 Coulter Electronics Of New England, Inc. Particle size analysis utilizing polarization intensity differential scattering
DE10399023I2 (de) 1989-09-12 2006-11-23 Ahp Mfg B V TFN-bindende Proteine
GB9107628D0 (en) * 1991-04-10 1991-05-29 Moonbrook Limited Preparation of diagnostic agents
US6063910A (en) 1991-11-14 2000-05-16 The Trustees Of Princeton University Preparation of protein microparticles by supercritical fluid precipitation
EP0661989B1 (en) 1992-09-21 1997-08-06 PHARMACIA &amp; UPJOHN COMPANY Sustained-release protein formulations
GB9415810D0 (en) * 1994-08-04 1994-09-28 Jerrow Mohammad A Z Composition
EP0777474B1 (en) 1994-09-23 2005-12-21 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods for the treatment of inflammatory joint disease
US6004549A (en) 1994-12-14 1999-12-21 Schering Corporation Crystalline protein controlled release compositions
US6019968A (en) 1995-04-14 2000-02-01 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use
US5968543A (en) 1996-01-05 1999-10-19 Advanced Polymer Systems, Inc. Polymers with controlled physical state and bioerodibility
US5985309A (en) 1996-05-24 1999-11-16 Massachusetts Institute Of Technology Preparation of particles for inhalation
EP0913177A1 (de) 1997-11-03 1999-05-06 Roche Diagnostics GmbH Verfahren zur Herstellung trockener, amorpher Produkte enthaltend biologisch aktive Materialien mittels Konvektionstrocknung, insbesondere Sprühtrocknung
PT1053020E (pt) * 1998-01-29 2004-06-30 Poly Med Inc Microparticulas absorviveis
US6284282B1 (en) 1998-04-29 2001-09-04 Genentech, Inc. Method of spray freeze drying proteins for pharmaceutical administration
US6956021B1 (en) 1998-08-25 2005-10-18 Advanced Inhalation Research, Inc. Stable spray-dried protein formulations
US6927044B2 (en) 1998-09-25 2005-08-09 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. IL-1 receptor based cytokine traps
US6223455B1 (en) * 1999-05-03 2001-05-01 Acusphere, Inc. Spray drying apparatus and methods of use
US7070959B1 (en) 1999-06-08 2006-07-04 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Modified chimeric polypeptides with improved pharmacokinetic properties
US7087411B2 (en) 1999-06-08 2006-08-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Fusion protein capable of binding VEGF
US7303746B2 (en) 1999-06-08 2007-12-04 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating eye disorders with modified chimeric polypeptides
US7306799B2 (en) 1999-06-08 2007-12-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Use of VEGF inhibitors for treatment of eye disorders
AU1226901A (en) 1999-10-22 2001-05-08 Amgen, Inc. Biodegradable microparticles with novel erythropoietin stimulating protein
FR2809309B1 (fr) * 2000-05-23 2004-06-11 Mainelab Microspheres a liberation prolongee pour administration injectable
CN1446077A (zh) 2000-08-07 2003-10-01 耐科塔医药公司 具有最小聚集的可吸入喷雾干燥4－螺旋束蛋白粉剂
EP1492554B1 (en) 2001-06-21 2019-08-21 Althea Technologies, Inc. Spherical protein particles
US20040142043A1 (en) * 2001-07-09 2004-07-22 Atsushi Maeda Sustained-release compositions for injection and process for producing the same
DE60309238T2 (de) 2002-03-08 2007-06-06 Asml Netherlands B.V. Lithographische Maske, lithographischer Apparat und Verfahren zur Herstellung einer Vorrichtung
AU2003217531A1 (en) * 2002-05-02 2003-11-17 Massachusetts Eye And Ear Infirmary Ocular drug delivery systems and use thereof
BR0317888A (pt) 2002-12-31 2005-12-06 Altus Pharmaceuticals Inc Cristais do hormÈnio do crescimento humano e processos para preparação dos mesmos
US20040208928A1 (en) * 2003-04-15 2004-10-21 Animal Technology Institute Taiwan Method for preparing an orally administrable formulation for controlled release
JP5628467B2 (ja) 2003-06-26 2014-11-19 シヴィダ・ユーエス・インコーポレイテッドＰｓｉｖｉｄａ Ｕｓ， Ｉｎｃ． 生体分解性徐放性ドラッグデリバリーシステム
DE10339197A1 (de) 2003-08-22 2005-03-24 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Sprühgetrocknete amorphe Pulver mit geringer Restfeuchte und guter Lagerstabilität
MXPA06003599A (es) * 2003-10-01 2006-06-20 Debio Rech Pharma Sa Dispositivo y metodo para producir particulas.
WO2005110374A1 (en) * 2004-04-30 2005-11-24 Allergan, Inc. Intraocular drug delivery systems containing a therapeutic component, a cyclodextrin, and a polymeric component
US20070059336A1 (en) 2004-04-30 2007-03-15 Allergan, Inc. Anti-angiogenic sustained release intraocular implants and related methods
US7727962B2 (en) 2004-05-10 2010-06-01 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Powder comprising new compositions of oligosaccharides and methods for their preparation
PL1778723T3 (pl) 2004-08-17 2013-03-29 Regeneron Pharma Preparaty antagonisty IL-1
US7572893B2 (en) 2004-08-17 2009-08-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. IL-1 antagonist formulations
US7655758B2 (en) 2004-08-17 2010-02-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stable liquid IL-1 antagonist formulations
BRPI0518582A2 (pt) 2004-11-24 2008-11-25 Therakine Corp implante para liberaÇço de medicamento intra-ocular
CN101094651B (zh) 2004-12-30 2011-03-09 多贝尔有限公司 含有胶原凝集素家族蛋白质或者其变体的喷雾干燥的组合物和其制备方法
ES2633574T3 (es) 2005-03-25 2017-09-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Formulaciones de antagonistas de VEGF
US8168584B2 (en) 2005-10-08 2012-05-01 Potentia Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating age-related macular degeneration by compstatin and analogs thereof
EP1959925B1 (en) 2005-12-02 2016-11-23 (OSI) Eyetech, Inc. Controlled release microparticles
KR100722607B1 (ko) 2006-05-11 2007-05-28 주식회사 펩트론 분산성 및 주사 투여능이 향상된 서방성 미립구의 제조방법
SI2944306T1 (sl) 2006-06-16 2021-04-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Formulacije antagonista VEGF, primerne za intravitrealno dajanje
DE102006030164A1 (de) 2006-06-29 2008-01-03 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Inhalative Pulver
DE102006030166A1 (de) * 2006-06-29 2008-01-10 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Tempern
EP1958622A1 (en) 2006-11-07 2008-08-20 Royal College of Surgeons in Ireland Method of producing microcapsules
US20100318193A1 (en) 2007-03-08 2010-12-16 Desai Tejal A Topographically engineered structures and methods for using the same in regenerative medicine applications
US9775932B2 (en) 2007-03-16 2017-10-03 The Regents Of The University Of California Nanostructure surface coated medical implants and methods of using the same
KR100805208B1 (ko) 2007-03-27 2008-02-21 주식회사 펩트론 엑센딘 함유 서방성 제제 조성물, 엑센딘 함유 서방성미립구 및 이의 제조 방법
CA2690858A1 (en) * 2007-06-07 2008-12-18 Surmodics Pharmaceuticals, Inc. Reduced-mass, long-acting dosage forms
BRPI0821359A2 (pt) 2007-12-21 2015-06-16 Merck Patent Ges Mit Beschränkter Haftung Microcápsulas de lipídeos sólidas contendo hormônio de crescimento no núcleo sólido interno
NZ621174A (en) 2008-01-15 2015-09-25 Abbvie Deutschland Powdered protein compositions and methods of making same
CA3045436C (en) 2009-01-29 2025-10-07 Forsight Vision4 Inc Posterior segment drug delivery
US8623395B2 (en) 2010-01-29 2014-01-07 Forsight Vision4, Inc. Implantable therapeutic device
EP2411137B1 (en) * 2009-03-27 2016-09-07 Bend Research, Inc. Spray-drying process
CN101559041B (zh) 2009-05-19 2014-01-15 中国科学院过程工程研究所 粒径均一的多肽药物缓释微球或微囊制剂及制备方法
MX368932B (es) 2009-06-26 2019-10-22 Regeneron Pharma Anticuerpos biespecificos facilmente aislados con formato de inmunoglobulina original.
US8417452B2 (en) 2009-08-19 2013-04-09 General Motors Llc System for providing information to an operator of a vehicle
EP2482804A1 (en) * 2009-10-01 2012-08-08 Evonik Degussa Corporation Microparticle compositions and methods for treating age-related macular degeneration
JO3417B1 (ar) 2010-01-08 2019-10-20 Regeneron Pharma الصيغ المستقرة التي تحتوي على الأجسام المضادة لمضاد مستقبل( interleukin-6 (il-6r
JOP20190250A1 (ar) 2010-07-14 2017-06-16 Regeneron Pharma صيغ مستقرة تحتوي على الأجسام المضادة لمضاد عامل نمو الأعصاب
HUE054113T2 (hu) 2010-08-05 2021-08-30 Forsight Vision4 Inc Injekciós készülék gyógyszerbejuttatáshoz
HUE057267T2 (hu) 2010-08-05 2022-05-28 Forsight Vision4 Inc Berendezés szem kezelésére
KR101867279B1 (ko) 2010-10-06 2018-06-15 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 항―인터류킨―４ 수용체（ｉｌ－４ｒ） 항체를 함유하는 안정화된 제형
JP6204906B2 (ja) 2011-04-14 2017-09-27 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 多層薄膜薬物送達デバイスとその作製方法および使用方法
AR087305A1 (es) 2011-07-28 2014-03-12 Regeneron Pharma Formulaciones estabilizadas que contienen anticuerpos anti-pcsk9, metodo de preparacion y kit
ES2810003T3 (es) 2011-11-18 2021-03-08 Regeneron Pharma Micropartícula que contiene proteína terapéutica recubierta con polímero biodegradable para uso médico
MY188825A (en) 2012-05-18 2022-01-06 Genentech Inc High-concentration monoclonal antibody formulations
US9878137B2 (en) 2012-05-30 2018-01-30 The Regents Of The University Of California Bioactive agent delivery devices and methods of making and using the same
WO2014039964A2 (en) 2012-09-10 2014-03-13 The Regents Of The University Of California Compounds and methods for modulating vascular injury
US20160030553A1 (en) 2013-03-19 2016-02-04 Biotech Tools S.A. Allergen preparation
US10611850B2 (en) 2014-07-14 2020-04-07 Amgen Inc. Crystalline antibody formulations
EP3362041A1 (en) 2015-10-16 2018-08-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stable protein compositions
US10555526B2 (en) 2015-11-05 2020-02-11 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
US20200289514A1 (en) 2015-11-13 2020-09-17 Novartis Ag Novel Pyrazolo Pyrimidine Derivatives
TW201731867A (zh) 2015-12-02 2017-09-16 賽諾菲公司 Ｆｇｆ２１變異體
EP3387062A2 (en) 2015-12-07 2018-10-17 Acetate International LLC Cellulose acetate film forming compositions
JP7184646B2 (ja) 2015-12-15 2022-12-06 メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー ビアリールモノバクタム化合物および細菌感染治療のためのそれの使用方法
PL3389636T3 (pl) 2015-12-16 2022-11-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Kompozycje i metody wytwarzania mikrocząstek białkowych

Also Published As

Publication number Publication date
JP7542090B2 (ja) 2024-08-29
US20240207194A1 (en) 2024-06-27
KR20200018712A (ko) 2020-02-19
DK2790681T3 (da) 2020-04-14
JP7217247B2 (ja) 2023-02-02
EP3384903A1 (en) 2018-10-10
US20170181978A1 (en) 2017-06-29
US11291636B2 (en) 2022-04-05
ZA201800078B (en) 2020-05-27
WO2013075068A1 (en) 2013-05-23
JP6727372B2 (ja) 2020-07-22
IL277958B2 (en) 2023-11-01
KR102218223B1 (ko) 2021-02-22
KR20220063293A (ko) 2022-05-17
IL232328B (en) 2018-11-29
EP3384903B1 (en) 2020-05-27
BR112014011915A2 (pt) 2017-05-16
SG11201402152YA (en) 2014-06-27
CA2855749A1 (en) 2013-05-23
IL277958B1 (en) 2023-07-01
CN103957898B (zh) 2016-02-24
PT3384903T (pt) 2020-06-25
KR20210021112A (ko) 2021-02-24
EP3574897A1 (en) 2019-12-04
MX362286B (es) 2019-01-10
BR112014011915B1 (pt) 2022-08-30
US20130129830A1 (en) 2013-05-23
JP2018008990A (ja) 2018-01-18
ES2775104T3 (es) 2020-07-23
PL3384903T3 (pl) 2020-10-19
HUE048597T2 (hu) 2020-07-28
SG10202103003RA (en) 2021-05-28
ZA201403379B (en) 2020-12-23
MX2014005997A (es) 2014-08-27
PL3574897T3 (pl) 2022-05-09
JP2019135255A (ja) 2019-08-15
AU2012340107B2 (en) 2017-06-15
FI2790681T4 (fi) 2023-05-04
CN103957898A (zh) 2014-07-30
RU2018101248A3 (es) 2021-02-18
KR102133352B1 (ko) 2020-07-14
US20220249387A1 (en) 2022-08-11
IL262651B (en) 2020-11-30
JP6267649B2 (ja) 2018-01-24
EP2790681B2 (en) 2023-02-22
PL2790681T5 (pl) 2024-02-05
PL2790681T3 (pl) 2020-07-27
US11951216B2 (en) 2024-04-09
RU2014124682A (ru) 2015-12-27
JP2023052564A (ja) 2023-04-11
RU2642664C2 (ru) 2018-01-25
EP2790681B1 (en) 2020-01-22
ZA202000742B (en) 2024-06-26
EP3574897B1 (en) 2022-01-05
CA2855749C (en) 2020-05-26
DK2790681T4 (da) 2023-05-01
MX2019000382A (es) 2023-01-05
IL277958A (en) 2020-11-30
EP4026543B1 (en) 2024-08-07
RU2768492C2 (ru) 2022-03-24
HUE051644T2 (hu) 2021-03-01
EP2790681A1 (en) 2014-10-22
AU2012340107A1 (en) 2014-06-05
ZA202400983B (en) 2025-05-28
ES2909777T3 (es) 2022-05-10
JP2014533698A (ja) 2014-12-15
DK3574897T3 (da) 2022-04-04
CN105688188A (zh) 2016-06-22
PT3574897T (pt) 2022-04-06
CA3076725A1 (en) 2013-05-23
EP4026543A1 (en) 2022-07-13
ES2775104T5 (es) 2023-06-08
IL262651A (en) 2018-12-31
EP2790681B9 (en) 2023-07-26
RU2018101248A (ru) 2019-02-21
JP6549653B2 (ja) 2019-07-24
DK3384903T3 (da) 2020-07-20
ES2985784T3 (es) 2024-11-07
KR20140096327A (ko) 2014-08-05
JP2020169195A (ja) 2020-10-15
IL232328A0 (en) 2014-06-30
IL303832A (en) 2023-08-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2810003T3 (es) Micropartícula que contiene proteína terapéutica recubierta con polímero biodegradable para uso médico
HK40068076A (en) Polymer coated protein microparticles for extended release formulations for use in the vitreous of the eye for treating vascular eye disorders
HK40009968A (en) Polymer protein microparticles
HK40011471A (en) Extended release formulation comprising polymer protein microparticles for use in the vitreous of the eye for treating vascular eye disorders
HK40011471B (en) Extended release formulation comprising polymer protein microparticles for use in the vitreous of the eye for treating vascular eye disorders
HK1197374A (en) Method of manufacturing an extended release pharmaceutical formulation comprising polymer coated protein microparticles using spray-drying
HK1197374B (en) Method of manufacturing an extended release pharmaceutical formulation comprising polymer coated protein microparticles using spray-drying