RU2451521C2 - Sparc-производные антигенные пептиды отторжения опухоли и лекарственные средства, содержащие их - Google Patents
Sparc-производные антигенные пептиды отторжения опухоли и лекарственные средства, содержащие их Download PDFInfo
- Publication number
- RU2451521C2 RU2451521C2 RU2009101191/10A RU2009101191A RU2451521C2 RU 2451521 C2 RU2451521 C2 RU 2451521C2 RU 2009101191/10 A RU2009101191/10 A RU 2009101191/10A RU 2009101191 A RU2009101191 A RU 2009101191A RU 2451521 C2 RU2451521 C2 RU 2451521C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- peptide
- cancer
- sparc
- cell
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 148
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 75
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims abstract description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims description 32
- 238000002483 medication Methods 0.000 title abstract 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 title description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 56
- 210000001239 CD8-positive, alpha-beta cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 32
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 29
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 16
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 15
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims abstract description 14
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims abstract description 12
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims abstract description 8
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 230000036039 immunity Effects 0.000 claims abstract description 6
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims abstract description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 5
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 23
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 14
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 14
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 abstract description 5
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 abstract description 4
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 abstract description 4
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 abstract description 3
- 208000016691 refractory malignant neoplasm Diseases 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 82
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 34
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 31
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 28
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 28
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 26
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 25
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 description 25
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 25
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 23
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 23
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 23
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 23
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 23
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 20
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 20
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 20
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 17
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 13
- 108010013476 HLA-A24 Antigen Proteins 0.000 description 11
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 11
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 11
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 10
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 10
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 10
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 10
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 8
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 8
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 230000034994 death Effects 0.000 description 7
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 7
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 7
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 7
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 6
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 6
- 101000881168 Homo sapiens SPARC Proteins 0.000 description 5
- 241001467552 Mycobacterium bovis BCG Species 0.000 description 5
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 5
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 5
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 5
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 5
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 4
- 229960000190 bacillus calmette–guérin vaccine Drugs 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 4
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 4
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 3
- 102100037599 SPARC Human genes 0.000 description 3
- 101150036757 SPARC gene Proteins 0.000 description 3
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 3
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 2
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000008808 Fibrosarcoma Diseases 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 2
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 2
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000881173 Mus musculus SPARC Proteins 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 101000621511 Potato virus M (strain German) RNA silencing suppressor Proteins 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229940029030 dendritic cell vaccine Drugs 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 2
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 description 2
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 2
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDQLRUYAYXDIFW-RWKIJVEZSA-N (2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-4-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxymethyl]oxan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 WDQLRUYAYXDIFW-RWKIJVEZSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000668 Chronic Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000022072 Gallbladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229920001491 Lentinan Polymers 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 206010051676 Metastases to peritoneum Diseases 0.000 description 1
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010033649 Pancreatitis chronic Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 101710100111 SPARC Proteins 0.000 description 1
- 229920002305 Schizophyllan Polymers 0.000 description 1
- 108091058545 Secretory proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000040739 Secretory proteins Human genes 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011224 anti-cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000002788 anti-peptide Effects 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 238000003163 cell fusion method Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 208000006990 cholangiocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 235000016213 coffee Nutrition 0.000 description 1
- 235000013353 coffee beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000002059 diagnostic imaging Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 201000010175 gallbladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 102000045436 human SPARC Human genes 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229940025708 injectable product Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940115286 lentinan Drugs 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000001531 micro-dissection Methods 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- DDOVBCWVTOHGCU-QMXMISKISA-N n-[(e,2s,3r)-3-hydroxy-1-[(2r,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxynonadec-4-en-2-yl]octadecanamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@H]([C@H](O)\C=C\CCCCCCCCCCCCCC)CO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DDOVBCWVTOHGCU-QMXMISKISA-N 0.000 description 1
- 210000000581 natural killer T-cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 208000028591 pheochromocytoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- -1 t-butyloxycarbonyl Chemical group 0.000 description 1
- 101150095542 tap gene Proteins 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 239000000439 tumor marker Substances 0.000 description 1
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K40/00—Cellular immunotherapy
- A61K40/10—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K40/19—Dendritic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K40/00—Cellular immunotherapy
- A61K40/20—Cellular immunotherapy characterised by the effect or the function of the cells
- A61K40/24—Antigen-presenting cells [APC]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K40/00—Cellular immunotherapy
- A61K40/40—Cellular immunotherapy characterised by antigens that are targeted or presented by cells of the immune system
- A61K40/41—Vertebrate antigens
- A61K40/42—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00
- A61K2239/31—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00 characterized by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Oncology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Описан пептид, который обладает способностью индуцировать цитотоксические (киллерные) Т-клетки. Представлены средства, содержащие описанный пептид, для индукции иммунитета, направленного против злокачественных опухолей, для лечения и/или профилактики опухолей, индукции антиген-презентирующих клеток, обладающих высокой способностью индуцировать Т-клетки, реакционноспособные в отношении опухоли, для индукции Т-клеток, реакционноспособных в отношении опухолей. Представлено антитело, которое специфически связывается с описанным пептидом. Описаны выделенные Т-клетка киллер, реакционноспособная в отношении опухолей, которая индуцируется in vitro стимуляцией описанным пептидом, хелперная Т-клетка, реакцонноспособная в отношении опухолей, которая индуцируется in vitro стимуляцией описанным пептидом, антиген-презентирующая клетка, которая представляет комплекс молекулы HLA и описанного пептида. Изобретение позволяет усилить иммунитет пациента, страдающего метастазирующим раком или резистентным раком, у которого хирургическое лечение, химеотерапия и лучевая терапия практически не применимы. 10 н.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 3 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к новым пептидам, которые являются эффективными в качестве вакцины для злокачественных новообразований, высоко экспрессирующих SPARC, таких как рак желудка, рак поджелудочной железы или злокачественная меланома (меланома), и к лекарственным средствам, содержащим вышеуказанные пептиды, используемым для лечения и/или профилактики опухолей.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
По сравнению с западными странами заболеваемость раком желудка выше в азиатских странах, таких как Япония и Китай. В результате распространения медицинских осмотров, широкого применения эндоскопов для исследования пищеварительного тракта и разработки методик проверки, стало возможным выявлять рак желудка на ранней стадии, и, таким образом, число пациентов, страдающих от этого вида рака, снизилось. Тем не менее, рак желудка остается второй причиной смерти в результате злокачественных новообразований в Японии. Таким образом, рак желудка остается основной причиной смертности. Среди нескольких типов рака желудка, диффузный (скиррозный) рак желудка чаще встречается у молодых людей по сравнению с другим типом рака желудка (аденокарциномой). Такой диффузный (скиррозный) рак желудка имеет тенденцию к быстрому прогрессированию, и часто возникают отдаленные метастазы или перитонеальные метастазы, что дает плохой прогноз. Во многих случаях скиррозного рака желудка уже стало невозможным проводить хирургическое удаление опухоли на момент постановки диагноза. Даже если сохраняется возможность удалить опухоль, то после лечения рак зачастую рецидивирует. В связи этим крайне необходимо создать новый способ лечения.
Количество смертей от рака поджелудочной железы в Японии имеет тенденцию к увеличению. В 2003 году из-за рака поджелудочной железы умерло 21148 человек. В настоящее время рак поджелудочной железы составляет 6,8% злокачественных опухолей, которые являются причиной смерти в Японии. То есть, рак поджелудочной железы занимает пятое место среди причин смерти после рака легких, рака желудка, рака толстой кишки и рака печени. Были проанализированы демографические данные по всему миру, и был подсчитан возрастной уровень смертности, используемый для сравнения уровней смертности в разнородных возрастных популяциях. В результате, в 2000 году на 100000 мужчин, 8,6 человек умерло из-за рака поджелудочной железы в Японии, тогда как 7,3 человека умерло в Соединенных Штатах и 6,3-7,0 человек умерло в Соединенном Королевстве из-за рака того же типа. На 100000 женщин 4,9 человека умерло из-за рака поджелудочной железы в Японии, тогда как 5,3 человека умерло в Соединенных Штатах и 4,8-5,1 человек умерло в Соединенном Королевстве из-за рака того же типа. Таким образом, уровень смертности из-за рака поджелудочной железы в Японии стал таким же, как и уровень в западных странах.
С учетом возрастного показателя в 2000 (100000 человек мировой популяции), в отношении мужчин, 8,6 человек умерло из-за рака поджелудочной железы в Японии, тогда как 7,3 человека умерло в Соединенных Штатах и 6,3-7,0 человек умерло в Соединенном Королевстве из-за рака того же типа. Кроме того, в отношении женщин, 4,9 человек умерло из-за рака поджелудочной железы в Японии, тогда как 5,3 человека умерло в Соединенных Штатах и 4,8-5,1 человек умерло в Соединенном Королевстве из-за рака того же типа. Таким образом, уровень смертности из-за рака поджелудочной железы в Японии стал таким же, что и уровень в западных странах. Несмотря на развитие диагностической визуализации, в настоящее время, приблизительно 40% всех японцев, больных раком поджелудочной железы, страдает от прогрессирующего рака поджелудочной железы, приводящего к отдаленным метастазам, и, в дальнейшем, имеется много случаев, при которых рак обнаруживается после достижения местно распространенной стадии рака, при которой опухоль не может быть удалена. Относительная 5-летняя выживаемость всех пациентов с раком поджелудочной железы составляет 43% в диагностированных случаях в 1996 году. Хотя этот уровень обычно бывает выше, чем обычный уровень выживаемости (2-3%), он все еще остается низким. В отношении факторов развития рака поджелудочной железы было высказано предположение, что различные факторы, в том числе образ жизни, например, курение, ожирение, питание, алкогольные напитки и кофе, а также хронический панкреатит, диабет, генетический фактор и т.д. приводят к возникновению рака поджелудочной железы.
Рак поджелудочной железы не имеет особых симптомов, и, следовательно, во многих случаях, когда появляются определенные симптомы, рак уже прогрессировал. В результате, 5-летняя выживаемость всех пациентов составляет 5% или менее, и прогноз после постановки диагноза является крайне негативным. Из-за трудности диагностики рака поджелудочной железы, процент этого типа рака как причины смерти от рака постепенно увеличивается в развитых странах. В настоящее время проводится многопрофильное лечение, в том числе хирургическое удаление, в качестве основного лечения, лучевая терапия и химиотерапия. Однако, не было получено существенного улучшения терапевтических эффектов, и, следовательно, крайне необходимо разработать новую терапевтическую стратегию.
Меланома представляет собой тип рака кожи, который зачастую называют злокачественной меланомой. Среди нескольких типов рака кожи, у меланомы высока вероятность инфильтрации и метастазирования и у нее наиболее высокая степень злокачественности, и, следовательно, меланома вызывает серьезные опасения. Среди клеток, которые составляют кожу, некоторые клетки продуцируют пигмент меланин. Такие клетки называются меланоцитами. Когда такие меланоциты становятся злокачественными, возникает меланома. Кроме того, частота встречаемости меланомы увеличилась, в частности среди лиц белой расы, как результат увеличения воздействия ультрафиолетовых лучей вследствие уменьшения озонового слоя в атмосфере, вызванного резким ухудшением состояния окружающей среды.
В Японии, случаи меланомы варьируют от 1,5 до 2 человек на 100000 в общей популяции. Следовательно, по оценкам, приблизительно у 1500-2000 человек в год развивается меланома. С другой стороны, в западных странах, более чем у двенадцати человек развивается меланома на 100000 в общей популяции. В частности, в Австралии, у двадцати или более человек развивается такая меланома на 100000 в общей популяции, и, следовательно, известно, что заболеваемость меланомой в Австралии наиболее высокая в мире. В этих условиях, люди, проживающие в Европе, Соединенных Штатах и в Австралии обращают особое внимание на симптомы меланомы. Более того, неожиданно было отмечено что, возникновение меланомы имеет тенденцию к увеличению год от года в Японии, также как и в зарубежных странах. В соответствии с данными последних исследований, ежегодное число смертельных исходов от меланомы приблизительно составляет 450 в Японии. Меланома развивается независимо от возраста. Однако частота случаев этого заболевания увеличивается у людей старше 40, и является наиболее высокой у людей 60 и 70 лет. Появление этого заболевания в детстве является чрезвычайно редким, но это не означает, что это заболевание никогда не развивается в детстве. В последнее время, возникновение меланомы имеет тенденцию к увеличению у молодых пациентов в возрасте 20 и 30 лет. Меланома развивается независимо от пола, и этим заболеванием страдают как мужчины, так и женщины. В случае пациентов-японцев местом, в котором наиболее вероятно развивается меланома, является подошва ступни, и насчитывает 30% всех случаев меланомы. Как характеристика пациентов-японцев, меланома также развивается на ступне и ногтевых фалангах пальцев. Кроме того, в случае пациентов западных стран, меланома развивается в любых участках кожи, таких как туловище, рука, ступня, лицо и голова.
В настоящее время, способы, которые могут использоваться для лечения меланомы, включают хирургическое лечение, химиотерапию и лучевую терапию. Однако в качестве терапии для облегчения симптомов метастазирующего рака или резистентного рака, при котором вышеупомянутые способы лечения применяться не могут, центром внимания стала иммунотерапия для повышения иммунитета пациентов, страдающих раком, к злокачественной опухоли, с тем, чтобы подавить рост злокачественной опухоли. Такая иммунотерапия является фактически эффективной для некоторых пациентов.
С другой стороны, с развитием молекулярной биологии и иммунологии опухолей в последние годы, было показано, что цитотоксические (киллерные) Т-клетки и хелперные Т-клетки распознают пептиды, образованные при разрушении белков, высоко и специфически экспрессируемых на злокачественных клетках, которые представлены на поверхностях злокачественных клеток или антиген-презентирующих клеток через молекулы HLA, и что они проявляют иммунологическую реактивность для разрушения таких злокачественных клеток. Более того, было идентифицировано огромное количество опухолевых антигенных белков и пептидов, происходящих от них, которые стимулируют иммунную реакцию для разрушения злокачественных опухолей, и было предложено клиническое применение антиген-специфичной иммунотерапии опухолей.
Молекулы HLA I класса экспрессируются на поверхностях всех ядросодержащих клеток организма. Белки, образованные в цитоплазме и ядре, предоставляют пептиды, образованные в результате разрушения в клетках, и они экспрессируются на поверхностях таких клеток. На поверхностях здоровых клеток пептиды, происходящие от нормальных аутологичных белков, связываются с молекулами HLA I класса, а Т-клетки иммунной системы не распознают и не разрушают такие пептиды, связанные с молекулами HLA I класса. С другой стороны, в процессе, при котором злокачественные клетки превращаются в злокачественную опухоль, такие злокачественные клетки могут экспрессировать огромное количество белков, которые практически не экспрессируются или экспрессируются только в небольших количествах на здоровых клетках. Если пептид, образованный при разрушении в цитоплазме такого белка, который высоко специфически экспрессируется в злокачественной клетке, связывается с молекулой HLA I класса и экспрессируется на поверхности такой злокачественной клетки, Т-клетка киллер распознает этот пептид и разрушает только злокачественную клетку. Кроме того, путем иммунизации организма пациента таким антигеном, специфичным для злокачественной опухоли, или пептидом можно разрушить злокачественные клетки и подавить рост злокачественной опухоли без причинения вреда здоровым клеткам. Это называется иммунотерапией злокачественных опухолей с использованием антигена, специфичного для злокачественной опухоли. Более того, молекулы HLA II класса преимущественно экспрессируются на поверхности антиген-презентирующих клеток. Такие молекулы HLA II класса связываются с пептидами, происходящими из антигена, специфичного для злокачественной опухоли, образованными включением антигена, специфичного к злокачественной опухоли, с наружной стороны клетки и разрушения его в клетке, и он экспрессируется на поверхности клетки. Т-клетка хелпер, которая распознала пептиды, связанные с молекулой HLA II класса, активируется для продукции различных цитокинов, которые активируют другие иммунокомпетентные клетки, с тем, чтобы индуцировать или усилить иммунную реакцию против опухоли.
Таким образом, если может быть разработана иммунотерапия, направленная на антиген, специфически экспрессирующийся на высоком уровне в такой злокачественной опухоли, она может обеспечить терапевтический способ эффективного устранения только злокачественной опухоли, не нанося вреда здоровым аутологичным органам. Более того, ожидается, что такая иммунотерапия может обеспечить терапевтический способ, который может использоваться у пациентов, страдающих терминальной стадией рака, у которых другие способы лечения проводиться не могут. Кроме того, если антиген, специфичный для злокачественной опухоли, и пептид вводить в форме вакцины людям с высоким риском развития такого типа рака, то будет получена возможность предотвращения возникновения злокачественной опухоли.
Сначала авторы настоящего изобретения провели анализ экспрессии генов всего генома. Авторы изобретения проанализировали 23040 типов генов в тканях рака желудка и здоровых тканях, используя микроматрицу кДНК. В результате в 11 из 20 случаев у пациентов с диффузным инфильтрирующим раком желудка авторы изобретения идентифицировали секретируемый кислый и богатый цистеином белок (SPARC), который представляет собой продукт гена, высокоэкспрессирующегося в тканях рака желудка, и уровень экспрессии которого в 5 или более раз выше уровня экспрессии в здоровых тканях (в среднем в 130000 раз выше в среднем) (Фигура 1). Ген SPARC экспрессируется на низких уровнях в нормальных жировых тканях, молочной железе, яичниках, спинном мозге, тестикулах, матке, плаценте и т.д. Однако уровень экспрессии гена SPARC в любом из вышеупомянутых органов ниже уровня экспрессии в здоровой слизистой оболочке желудка в 5 раз или менее (Фигура 2).
Другие исследователи сообщили, что SPARC не только экспрессируется при диффузном инфильтрирующем раке желудка, но также экспрессируется при раке поджелудочной железы и при меланоме. Более того, авторы настоящего изобретения обнаружили, что SPARC секретируется в сыворотке пациентов, страдающих меланомой, и что SPARC может быть подходящим опухолевым маркером, особенно для раннего обнаружения меланомы (японская патентная заявка № 2004-303688; и Clinical Cancer Research 11: 8079-8088, 2005).
SPARC представляет собой кислый секреторный белок размером 43-кДа, состоящий из 286 аминокислот. Этот белок богат цистеином и двигается к ядру во время фазы деления клетки. Кроме того, SPARC контролирует взаимодействие между белками внеклеточного матрикса и клеткой, поэтому он также может быть связан с контролем за клеточным ростом. Поскольку SPARC экспрессируется в остеобластах, тромбоцитах и раневых областях, считается, что этот белок связан с репарацией и восстановлением тканей. Более того, также сообщалось, что SPARC высоко экспрессируется в злокачественных опухолях, таких как меланома или остеосаркома, и в интерситциальных клетках опухолей, и что экспрессия SPARC коррелирует с прогнозом, инфильтрацией или метастазированием опухолей.
[Непатентный документ 1] Icuta Y et al, Clinical Cancer Research 11: 8079-8088, 2005.
[Патентный документ 1] японская патентная заявка № 2004-303688
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Проблемы, решаемые настоящим изобретением
Целью настоящего изобретения является разработка способа усиления иммунитета пациента, страдающего метастазирующим раком или резистентным раком, у которого хирургическое лечение, химиотерапия и лучевая терапия, используемые в качестве способа лечения опухолей, высокоэкспрессирующих SPARC, таких как диффузный инфильтрирующий рак желудка, рак поджелудочной железы или меланома, практически не применимы, для облегчения симптомов таких злокачественных опухолей и для проведения иммунотерапии, подавляющей рост таких злокачественных опухолей. Другими словами, целью настоящего изобретения является идентификация пептида, происходящего из белка SPARC, гиперэкспрессирующая в злокачественной ткани, который способен индуцировать сильный иммунный ответ на вышеупомянутые злокачественные опухоли, не вызывая вредных эффектов у больных злокачественным заболеванием, и применение идентифицированного пептида для иммунотерапии опухолей. То есть, целью настоящего изобретения является идентификация пептида, производного белка SPARC, способного индуцировать Т-клетки киллеры и Т-клетки хелперы человека, реакционноспособные в отношении опухолей, и получение средства для проведения иммунотерапии опухолей у пациентов с различными типами рака, выскоэкспрессирующими SPARC.
Способы решения этих задач
Авторы настоящего изобретения идентифицировали ген, SPARC, который высоко экспрессируется при диффузном инфильтрирующем раке желудка, путем проведения анализа с использованием кДНК микроматрицы с указанным выше раком желудка и различными здоровыми тканями. Экспрессия SPARC также наблюдается в некоторых типах здоровых тканей. Однако уровень экспрессии SPARC в нормальных тканях существенно ниже уровня экспрессии в злокачественных тканях. Для того, чтобы проверить наличие или отсутствие индукции противоопухолевого иммунитета SPARC- специфичными Т-клетками киллерами, были использованы мыши BALB/c, которые экспрессируют мышиные молекулы Kd, характеристики аминокислотной последовательности связанного пептида которых идентичны таковым HLA-A24, который является наиболее частым аллелем HLA I класса у населения Японии. Гомология аминокислотной последовательности SPARC человека и мыши составляет 95%. Таким образом, были синтезированы пептиды, состоящие из аминокислотных последовательностей, общих для людей и мышей, имеющие связывающий мотив, общий для HLA-A24 человека и Kd мыши. После чего, мышей BALB/c (Kd-экспрессирующих) иммунизировали дендритными клетками, полученными из костного мозга, на которые была нагружена эта смесь пептидов, и авторы изобретения исследовали, индуцируются ли или нет Т-клетки киллеры, реакционноспособные в отношении злокачественных клеток, экспрессирующих SPARC. Более того, в отношении мышей, которых предварительно подвергали тому же способу иммунизации, как описано выше, авторы настоящего изобретения исследовали, подавляется ли рост трансплантированных злокачественных клеток, экспрессирующих мышиный SPARC, и удлиняется или нет время выживания мышей. Кроме того, также проверили, появляются ли или нет негативные эффекты вместе с возникновением аутоиммунного феномена у мышей, иммунизированных пептидом. В результате было обнаружено, что пептид с любой аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 1-3 способен индуцировать Т-клетки киллеры, которые разрушают злокачественные клетки, экспрессирующие SPARC. Более того, рост трансплантированных мышиных злокачественных клеток, экспрессирующих SPARC, подавляется у мышей, иммунизированных вышеупомянутым пептидом, и, следовательно, время выживания мышей удлиняется. Настоящее изобретение было выполнено на основании полученных результатов.
Настоящее изобретение относится к следующему:
(1) Пептиду, выбранному из:
(А) пептида, который состоит из любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1-3; или
(В) пептида, который состоит из аминокислотной последовательности, содержащей замену или добавление одной или нескольких аминокислот в отношении пептида, состоящего из любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1-3, и который обладает способностью индуцировать цитотоксические (киллерные) Т-клетки.
(2) Средству, индуцирующему иммунитет в отношении злокачественных опухолей, который содержит по меньшей мере один тип пептида по пункту (1).
(3) Лекарственному средству для лечения и/или профилактики опухолей, которое содержит по меньшей мере один тип пептида по пункту (1).
(4) Средству для индукции антиген-презентирующих клеток, обладающих высокой способностью индуцировать Т-клетки, реакционноспособные в отношении опухоли, которое содержит по меньшей мере один тип пептида по пункту (1).
(5) Средству для индукции Т-клеток, реакционноспособных в отношении опухолей, которое содержит по меньшей мере один тип пептида по пункту (1).
(6) Средству для индукции антиген-презентирующих клеток, обладающему высокой способностью индуцировать Т-клетки, реакционноспособные в отношении опухоли, которое содержит ген, кодирующий пептид, выбранный из:
(А) пептида, состоящего из любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1-3; или
(В) пептида, состоящего из аминокислотной последовательности, содержащей замену или добавление одной или нескольких аминокислот в отношении пептида, состоящего из любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1-3, и который обладает способностью индуцировать Т-клетки киллеры.
(7) Антителу против пептида по пункту (1).
(8) Т-клетке киллеру, хелперной Т-клетке, или популяции иммуноцитов, содержащих такие клетки, которые индуцируется пептидом по пункту (1).
(9) Антиген-презентирующей клетке, которая представляет комплекс молекулы HLA и пептида по пункту (1).
(10) Антиген-презентирующей клетке по пункту (9), которая индуцируется средством по пункту (4) или (6).
НАИЛУЧШИЙ ВАРИАНТ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
(1) Пептид по настоящему изобретению и содержащее его средство, индуцирующее противоопухолевый иммунитет
Пептид по настоящему изобретению описывается следующим:
(А) пептид, который состоит из любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1-3; или
(В) пептид, который состоит из аминокислотной последовательности, содержащей замену или добавление одной или нескольких аминокислот в отношении пептида, состоящего из любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1-3, и который обладает способностью индуцировать Т-клетки киллеры.
Термин «пептид, обладающий способностью индуцировать цитотоксические Т-клетки» используется в настоящем описании для обозначения пептида, обладающего активностью стимулировать Т-клетки киллеры, реакционноспособные в отношении опухолей.
Способ получения/продукции пептида по настоящему изобретению не ограничен особым образом. Может быть использован либо химически синтезированный пептид, либо рекомбинантный пептид, полученный с помощью генной рекомбинации.
При получении химически синтезированного пептида пептид по настоящему изобретению может быть синтезирован способом химического синтеза, таким как метод Fmoc (фторэнилметилоксикарбонильный метод) или метод tBoc (t-бутилоксикарбонильный метод), например.
Кроме того, пептид по настоящему изобретению также может быть синтезирован различными видами коммерчески доступных пептидных синтезаторов.
В тех случаях, когда пептид по настоящему изобретению продуцируется в форме рекомбинантного белка, получают ДНК, имеющую нуклеотидную последовательность, кодирующую упомянутый выше белок, ее мутированную форму или ее гомолог, а затем ее вводят в предпочтительную систему экспрессии, для получения пептида по настоящему изобретению.
В качестве вектора экспрессии, предпочтительно, может быть использован вектор, способный к автономной репликации в клетке-хозяине, или способный встраиваться в хромосому клетки-хозяина. Используют вектор экспрессии, содержащий промотор в положении, способном экспрессировать ген, кодирующий пептид. Кроме того, трансформант, имеющий ген, кодирующий пептид по настоящему изобретению, может быть получен путем встраивания вышеупомянутого экспрессионного вектора в хозяина. В качестве хозяина может быть использована любая из бактериальных, дрожжевых клеток, клеток животного и насекомого. Вектор экспрессии может быть введен в хозяина в соответствии с известным способом, в зависимости от типа такого хозяина.
В настоящем изобретении, трансформант, полученный выше, культивируют, а пептид по настоящему изобретению затем продуцируется и накапливается в культуре. После этого, пептид по настоящему изобретению собирают из культуры для выделения рекомбинантного пептида.
В тех случаях, когда такой трансформант является прокариотической клеткой, таким как Escherichia coli, или эукариотом, таким как дрожжи, средой, используемой для культивирования таких микроорганизмов может быть любая природная или синтетическая среда, при условии, что она содержит источник углерода, источник азота, неорганические соли и подобное, что может ассимилироваться вышеупомянутыми микроорганизмами, способная эффективно осуществлять культивирование трансформанта. Более того, такое культивирование можно проводить в условиях, которые обычно применяются для культивирования вышеупомянутых микроорганизмов. После завершения культивирования, пептид по настоящему изобретению может быть выделен и очищен из культуры трансформанта в соответствии с общепринятым способом выделения и очистки пептидов.
Термин «одна или несколько аминокислот», используется в настоящем описании для обозначения в основном от 1 до 10 аминокислот, предпочтительно от 1 до 8 аминокислот, более предпочтительно от 1 до 5 аминокислот, и особенно предпочтительно от 1 до 3 аминокислот (например, 1, 2, или 3 аминокислот).
Пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, содержащей замену или добавление одной или нескольких аминокислот в отношении пептида, состоящего из любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1-3, может быть соответствующим образом получен или приобретен специалистами в данной области на основании информации, касающейся любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1-3. Другими словами, пептид, который состоит из аминокислотной последовательности, содержащей замену или добавление одной или нескольких аминокислот в отношении любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1-3, и который обладает способностью индуцировать цитотоксические Т-клетки, может быть получен любым заданным способом, известным специалистам в данной области, например, упомянутым выше химическим синтезом, способами генной инженерии или мутагенезом. Например, подходит сайт-направленный мутагенез, который представляет собой генно-инженерный способ, поскольку представляет собой способ введения специфической мутации в конкретное положение. Такой сайт-направленный мутагенез можно выполнить с помощью способа, описанного в Molecular Cloning: A laboratory Manual, 2nd Ed, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY, 1989 (здесь и далее сокращенно Molecular Cloning 2nd Ed), Current Protocols in Molecular Biology, Supplement 1-38, John Wiley & Sons (1987-1997) (здесь и далее сокращенно Current Protocols in Molecular Biology), и т.д.
Как описано далее в примерах, упомянутый выше пептид по настоящему изобретению способен индуцировать иммунный ответ против злокачественных опухолей. Таким образом, настоящее изобретение относится к средству, индуцирующему иммунный ответ против злокачественных опухолей, которое содержит пептид по настоящему изобретению.
Средство, индуцирующее иммунный ответ по настоящему изобретению, используемое против злокачественных опухолей, применяется in vitro, ex vivo или in vivo, и, предпочтительно, ex vivo, так, чтобы оно могло индуцировать Т-клетки киллеры, хелперные Т-клетки или популяцию иммуноцитов, содержащую такие клетки, тем самым обеспечивая противоопухолевый иммунитет.
(2) Антитело по настоящему изобретению
Настоящее изобретение также относится к антителу, которое распознает часть упомянутого выше пептида по настоящему изобретению, или пептид целиком как эпитоп (антиген), и Т-клеткам киллерам, индуцированным посредством ex vivo или in vitro стимуляции с использованием упомянутого выше пептида. В основном, известно, что такие Т-клетки киллеры проявляют противоопухолевую активность, которая сильнее активности антитела.
Антитело по настоящему изобретению может быть либо поликлональным антителом, либо моноклональным антителом. Такое антитело может быть получено общепринятым способом.
Например, поликлональное антитело может быть получено путем иммунизации млекопитающего или птиц пептидом по настоящему изобретению, используемому в качестве антигена, затем получения крови этого млекопитающего или птицы, а затем отделением и очисткой антитела из полученной крови. Например, могут быть иммунизированы млекопитающие или птицы, например, мыши, хомяки, морские свинки, цыплята, крысы, кролики, псовые, козы, овцы, были или лошади. Такой способ иммунизации известен специалистам в данной области. Например, антиген можно вводить 2 или 3 раза с интервалами от 7 до 30 дней. В дозе приблизительно от 0,05 до 2 мг антигена, например, можно вводить однократно. Путь введения особым образом не ограничен и в зависимости от ситуации может быть выбрано подкожное введение, внутрикожное введение, внутрибрюшинное введение, внутривенное введение, внутримышечное введение и т.д. Кроме того, антиген можно растворить в подходящем буфере, содержащем адъювант, например, в подходящем буфере, содержащем обычно используемый адъювант, такой как полный адъювант Фрейнда или гидроксид алюминия, и может быть использован такой антиген.
Иммунизированных таким образом млекопитающих или птиц выращивают в течение определенного периода времени. После этого, если титр антител повышается, можно провести повторную иммунизацию с использованием от 100 до 1000 мкг антигена, например. Через один или два месяца после последней иммунизации у иммунизированного млекопитающего или птицы берут кровь. Полученную таким образом кровь (поликлональную антисыворотку) затем отделяют и очищают обычным способом, включающим в себя центрифугирование, преципитацию с использованием сульфата аммония или полиэтиленгликоля, хроматографию, такую как гель-фильтрационная хроматография, ионообменная хроматография или аффинная хроматография и т.д., для получения поликлонального антитела, которое распознает пептид по настоящему изобретению.
С другой стороны, моноклональное антитело может быть получено с помощью гибридомы. Например, такая гибридома может быть получена путем клеточного слияния клетки, продуцирующей антитела, и миеломной клетки. Гибридома, которая генерирует моноклональное антитело по настоящему изобретению, может быть получена следующим способом слияния клеток.
В качестве антителопродуцирующей клетки использую Т-клетку селезенки, клетку лимфатического узла, В лимфоцит или подобные, полученные от иммунизированного животного. В качестве антигена, используют пептид по настоящему изобретению. В качестве иммунизированного животного можно использовать мышь, крысу или подобное. Антиген вводят этому животному в соответствии с обычным способом. Например, суспензию или эмульгированную жидкость, содержащую адъювант, такой как полный адъювант Фрейнда или неполный адъювант Фрейнда, и пептид по настоящему изобретению, используемый в качестве антигена, вводят животному посредством внутривенного введения, подкожного введения, внутрикожного введения, внутрибрюшинного введения и т.д., несколько раз для иммунизации животного. После этого антителопродуцирующую клетку, такую как клетка селезенки, получают от иммунизированного животного, и полученную таким образом клетку селезенки затем сливают с миеломной клеткой в соответствии с известным способом (G Kohler et al., Nature, 256 495 (1975)), получая, таким образом, гибридому.
Примеры штаммов миеломных клеток, используемых в слиянии клеток, включают штамм P3X63Ag8, штамм P3U1 и штамм Sp2/0, в случае мышей. При проведении такого слияния клеток, используют активатор слияния, такой как полиэтиленгликоль или вирус Сендай. Для селекции гибридомы после завершения клеточного слияния, используют среду с гипоксантин-аминоптерин-тимидином (HAT) в соответствии с обычным способом. Гибридому, полученную как результат слияния клеток, клонируют с помощью метода предельных разведений. Далее, при необходимости, проводят скрининг иммуноферментным анализом с использованием пептида по настоящему изобретению, с получением штамма клеток, продуцирующих моноклональное антитело, специфически распознающего пептид по настоящему изобретению.
Для получения моноклонального антитела, представляющего интерес, из полученной таким образом гибридомы, эту гибридому можно культивировать, обычным способом культивирования клеток или способом получения асцитической жидкости, и моноклональное антитело, представляющее интерес, может быть очищено из культурального супернатанта или асцитической жидкости в соответствии с обычным способом. Например, фракционирование с использованием сульфата аммония, гель-фильтрация, ионообменная хроматография, аффинная хроматография и другие способы могут быть объединены, в зависимости от ситуации, и использованы.
Более того, фрагменты вышеупомянутого антитела также включены в объем настоящего изобретения. Примеры таких фрагментов антител включают фрагмент F(ab')2 и фрагмент Fab'.
(3) Т-клетки киллеры, хелперные Т-клетки или популяция иммуноцитов, содержащая такие клетки
Настоящее изобретение также относится к Т-клетке киллеру, хелперной Т-клетке или популяции иммуноцитов, содержащей такие клетки, которые индуцируются путем стимуляции in vitro с использованием пептида по настоящему изобретению. Например, когда лимфоциты периферической крови или лимфоциты, инфильтрирующие опухоль стимулируют in vitro пептидом по настоящему изобретению, индуцируются активированные Т-клетки, демонстрирующие реакционную способность в отношении опухоли. Таким образом, активированные Т-клетки могут эффективно использоваться для адоптивной иммунотерапии рака. Более того, пептид по настоящему изобретению имеет возможность экспрессироваться в дентдритных клетках, которые являются мощными антиген-презентирующими клетками in vivo или in vitro, и дендритные клетки, экспрессирующие антигенный пептид затем вводят для индукции иммунного ответа на опухоли.
Предпочтительно, Т-клетки киллеры, хелперные Т-клетки или популяция иммуноцитов, содержащая такие клетки, могут быть индуцированы путем стимуляции ex vivo или in vitro с использованием пептида по настоящему изобретению и иммуностимулятора. Примеры такого иммуностимулятора, используемого в настоящем изобретении, включают Т-клеточный фактор роста и цитокин.
Полученные таким образом Т-клетки киллеры, хелперные Т-клетки или популяцию иммуноцитов, содержащую такие клетки, переносят в организм таким образом, чтобы опухоль могла быть суппрессирована и чтобы можно было предупредить и/или лечить злокачественную опухоль.
Далее, используя пептид по настоящему изобретению, можно получить Т-клетки киллеры, хелперные Т-клетки или популяцию иммуноцитов, содержащую такие клетки, которые способы подавлять рост опухоли, как описано выше. В связи с этим, настоящее изобретение относится к клеточному культуральному раствору, содержащему Т-клетки, реационноспособные в отношении опухоли, и пептид по настоящему изобретению. Используя такой клеточный культуральный раствор, могут быть получены Т-клетки киллеры, хелперные Т-клетки или популяция иммуноцитов, содержащая такие клетки, которые способны подавлять рост опухоли. Более того, настоящее изобретение также относится к клеточному культуральному набору для получения Т-клеток киллеров, хелперных Т-клеток или популяции иммуноцитов, содержащей такие клетки, который содержит вышеупомянутый клеточный культуральный раствор и флакон для клеточной культуры.
(4) Лекарственное средство по настоящему изобретению для лечения и/или профилактики опухоли (противораковая вакцина)
Поскольку пептид по настоящему изобретению способен индуцировать Т-клетки киллеры, специфичные к злокачественным клеткам, его можно предложить в качестве средства для лечения и/или профилактики злокачественных опухолей. Например, бактерии, такие как BCG (Bacillus Calmette-GuErin), которые были трансформированы рекомбинантной ДНК, полученной путем внесения гена, кодирующего пептид по настоящему изобретению, в подходящий вектор, или вирусы, такие как вирус коровьей оспы, в геном которого ДНК, кодирующая пептид по настоящему изобретению, была включена, могут эффективно использоваться в качестве живой вакцины для лечения и/или профилактики злокачественных опухолей человека. Следует отметить, что доза и способ введения противораковой вакцины такие же, что и дозы и способы введения в случае обычной противооспенной вакцинации или вакцинации BCG.
Другими словами, ДНК, кодирующая пептид по настоящему изобретению (которая используется как есть, или в форме плазмидной ДНК, встроенной в вектор экспрессии), или рекомбинантный вирус или рекомбинантная бактерия, содержащая вышеупомянутую ДНК, можно вводить в качестве противораковой вакцины млекопитающим, в том числе людям, непосредственно или в диспергированном в адъюванте виде. Подобным образом, пептид по настоящему изобретению также можно вводить в качестве противораковой вакцины в диспергированном в адъюванте виде.
Примеры адъюванта, используемого в настоящем изобретении, включают в себя неполный адъювант Фрейнда, BCG, димиколат трегалозы (TDM), липополисахарид (LPS), алюминиевый адъювант и кремниевый адъювант. С точки зрения способности индуцировать антитела, предпочтительно используется неполный адъювант Фрейнда (IFA).
Тип рака не является индивидуальным в настоящем описании. Конкретные примеры злокачественной опухоли включают рак желудка, рак толстой кишки, рак пищевода, рак поджелудочной железы, рак печени, рак желчного пузыря, холангиокарциному, рак легких, рак груди, рак щитовидной железы, меланому (злокачественную меланому), рак кожи, остеосаркому, феохромоцитому, рак тканей головы и шеи, опухоль головного мозга, хронический миелолейкоз, острый миелолейкоз, злокачественную лимфому, рак почек, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, рак яичек, рак матки, рак яичников и карциному мягких тканей. Из них злокачественные опухоли, которые высоко экспрессируют SPARC, такие как рак желудка (в частности диффузный инфильтрирующий рак желудка), рак поджелудочной железы и меланома (злокачественная меланома), являются характерными примерами.
Пептид по настоящему изобретению действует как Т-клеточный эпитоп для индукции Т-клеток киллеров, специфичных к злокачественным клеткам, или хелперных Т-клеток. Таким образом, пептид по настоящему изобретению используется в качестве средства для профилактики и/или лечения злокачественных опухолей человека. Кроме того, если антитело по настоящему изобретению способно ингибировать активность SPARC, антигена злокачественных опухолей, это антитело также применимо в качестве средства для профилактики и/или лечения злокачественных опухолей человека. В качестве фактического использования пептид или антитело по настоящему изобретению можно вводить в виде инъекционного продукта непосредственно или вместе с фармацевтически приемлемым носителем и/или разбавителем, и, при необходимости, также вместе с упомянутыми ниже вспомогательными веществами. Более того, пептид или антитело по настоящему изобретению также можно вводить таким способом, как распыление, посредством чрескожной абсорбции через слизистую. Термин «носитель», используемый в настоящем описании, означает, например, сывороточный альбумин человека. Кроме того, в качестве разбавителя можно использовать PBS, дистиллированную воду или подобное.
В качестве дозы пептид или антитело по настоящему изобретению можно вводить в диапазоне от 0,01 до 100 мг для взрослого на одно введение. Однако доза не ограничивается вышеупомянутым диапазоном. Также особым образом не ограничивается лекарственная форма. Также могут быть доступны лиофилизированный продукт или гранулы, полученные добавлением эксципиента, такого как сахар.
Примеры вспомогательных веществ, которые могут быть добавлены к средству по настоящему изобретению, для усиления индуцирующей активности Т-клеток, реакционноспособных в отношении опухоли, включают: мурамил-дипептид (MDP); бактериальные компоненты, такие как бактерии BCG; ISCOM, описанный в Nature, vol. 344, p. 873 (1990); сапонин QS-21, описанный в J Immunol vol. 148, p. 1438 (1992); липосомы; и оксид алюминия. Дополнительно, иммуностимуляторы, такие как лентинан, шизофиллан или пицибанил также могут быть использованы в качестве вспомогательных веществ. Другие примеры продуктов, используемых в настоящем изобретении в качестве вспомогательных веществ, включают: цитокины для усиления роста или дифференцировки Т-клеток, такие как IL-2, IL-4, IL-12, IL-1, IL-6 или TNF; галактозилцерамид для активации NKT клеток; CpG, который связывается с Toll-подобным рецептором для активации природной иммунной системы; и липополисахарид (LPS).
Более того, вышеупомянутый антигенный пептид добавляют in vitro к клеткам, взятым от HLA-A24-позитивных пациентов или аллогенным клеткам, выделенным у кого-то еще, кто является HLA-A24-позитивным, с последующей антигенной презентацией этих клеток. После этого клетки вводят в кровеносный сосуд пациента, таким образом, чтобы T клетки могли эффективно индуцироваться в организме пациента. Далее, пептид по настоящему изобретению добавляют к лимфоцитам периферической крови пациента, и полученную смесь затем культивируют in vitro. Посредством этого Т-клетки киллеры могут индуцироваться in vitro, а затем их можно вводить в кровеносный сосуд пациента. Такое лечение, включающее в себя перенос клеток, уже проводилось как способ лечения злокачественных опухолей, и, следовательно, этот способ хорошо известен специалистам в данной области.
Путем введения пептида по настоящему изобретению в организм, индуцируются Т-клетки, реакционноспособные в отношении опухоли, и в результате, можно ожидать противоопухолевое действие. Более того, при стимуляции лимфоцитов пептидом по настоящему изобретению ex vivo или in vitro, индуцируются активированные Т-клетки. Активированные Т-клетки вводят в пораженную область. Таким образом, эта методика может быть эффективно использована для адоптивной иммунотерапии.
Настоящее изобретение далее будет описано в следующих примерах. Однако эти примеры не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.
ПРИМЕРЫ [Пример 1]
(1) Анализ с микроматрицей кДНК
Что касается иссеченной злокачественной ткани пациента с диффузным инфильтрирующим раком желудка, разделение злокачественной ткани и незлокачественных тканей проводили с помощью лазерной захватывающей микродиссекции, и иссекали как злокачественный, так и незлокачественный сегменты. После этого из каждой ткани экстрагировали РНК. Когда кДНК была синтезирована из этой РНК с помощью реакции обратной транскрипции, кДНК, полученную из злокачественной ткани, флуоресцентно метили Cy5, а кДНК, полученную из незлокачественной ткани, флуоресцентно метили Cy3. После этого, два препарата кДНК перемешивали для получения целевой ДНК. Гибридизацию проводили на предметном стекле, на котором были упорядочены зонды кДНК, а неспецифическое связывание затем удаляли промыванием. После этого флуоресцентные изображения, полученные после гибридизации, фиксировали с помощью CCD камеры или флуоресцентного сканера, а затем их проявляли с помощью псевдоцветов (Cy5: красный; Cy3: зеленый). В это же время, рассчитывали соотношение двух типов интенсивности флуоресценции (К/З), и указывали как профиль генной экспрессии. Более того, экспрессия 23040 типов генов в злокачественных и незлокачественных сегментах 20 пациентов с диффузным инфильтрирующим раком желудка подвергали сравнительному исследованию, и было выбрано 15 типов генов, отношение экспрессии которых в злокачественной ткани/незлокачественной ткани было 5 или выше (фигура 1).
После этого был проанализирован профиль экспрессии 23040 типов генов в здоровых тканях 29 органов (в том числе в 4 эмбриональных органах), и были выбраны гены, уровень экспрессии которых был ниже в этих здоровых органах. В случае SPARC, который был выбран в качестве опухолевого антигена в этом эксперименте, соотношение экспрессии в злокачественных/незлокачественных сегментах равнялось 5 или выше (133359 раз в среднем) у 11 из 20 пациентов с диффузным инфильтрирующим раком желудка. SPARC экспрессировался в некоторых здоровых тканях, но уровни экспрессии в таких незлокачественных тканях были существенно ниже уровней экспрессии в злокачественных тканях (Фигура 2).
[Пример 2]
(2) Выбор пептидных репертуаров SPARC HLA-A24 человека и мышиных Kd-рестириктированных пептидных репертуаров SPARC
В SPARC человека и мыши, имеющем гомологию 95%, следующие пептиды были выбраны из фрагмента SPARC, аминокислотные последовательности которого были общими для людей и мышей. Все аминокислотные последовательности молекул SPARC исследовали на основании известной информации в отношении аминокислотных последовательностей, обычно наблюдаемых в пептидах, имеющих сильную аффинность связывания как с молекулами HLA-A24 человека, так и с мышиными Kd. Репертуары пептидов, которые предположительно имели высокую аффинность связывания в отношении молекул двух типов, были выбраны с помощью компьютерной программы. В результате в качестве кандидатных пептидов было выбрано 4 типа пептидов (таблица 1).
| Таблица 1 | ||||
| SPARC-производные пептиды, возможно имеющие аффинность связывания как с молекулами HLA-A24, так и с мышиными молекулами K d | ||||
| Пептид | Последовательность | Стартовое положение | Показатель связывания | |
| А24 | Kd | |||
| SPARC- Kd-1 | DYIGPCKYI | 143 | 75 | 400 |
| SPARC- Kd-2 | HFFATKCTL | 123 | 20 | 1382 |
| SPARC- Kd-3 | EFPLRMRDWL | 161 | 30 | 960 |
| SPARC- Kd-4 | MYIFPVHWQF | 225 | 210 | 120 |
| Определено с помощью http://bimas.dcrt.nih.qov/cqi-bin/molbio/ken parker combpform | ||||
SPARC Kd-1:SEQ ID NO: 1
SPARC Kd-3: SEQ ID NO: 2
SPARC Kd-4: SEQ ID NO: 3
(3) Вакцина с дендритными клетками (DC)
Дендритные клетки костного мозга (BM-DC) были получены из клеток костного мозга, происходящих из костного мозга мышей BALBc, с использованием GM-CSF, как описано ранее авторами изобретения (Nakatsura, T. et al, Clin Cancer Res 10, 8630-8640, 2004). Полученные таким образом BM-DC культивировали со смесью 4 типов пептидов, выбранных, как описано выше, в концентрации 10 мкM в течение 2 часов, и сенсибилизированные пептидом BM-DC (5×105 клеток) затем вводили внутрибрюшинно каждой мыши. После перерыва 1 неделю те же сенсибилизированные пептидом BM-DC дважды вводили мышам таким образом, чтобы мышь была сильно иммунизирована. После этого, получали клетки селезенки мыши и оценивали индукцию Т-клеток киллеров. Чтобы точно проанализировать индукцию Т-клеток киллеров, происходящих из Т-клеток CD8+, после получения селезенки Т-клетки CD4+ T удалили из полученных клеток селезенки, используя бусины MACS, а оставшиеся клетки затем использовали для анализа.
Для получения и характеристики SPARC-специфичных Т-клеток киллеров использовали следующие протоколы (День получения клеток селезенки от иммунизированной мыши был обозначен как День 0).
День -21 (1) GM-CSF добавляли к клеткам костного мозга мышей BALB/c, чтобы начать индукцию дендритных клеток костного мозга (здесь и далее называемых BM-DC).
День -14 (2) Смесь 4 типов пептидов SPARC добавляли к индуцированным BM-DC, и 2 часа спустя, 5×105 клеток вводили внутрибрюшинно каждой мыши.
Стадии (1) и (2) повторяли дважды раз в две недели.
День 0. Были получены клетки селезенки иммунизированных мышей BALB/c. Эти клетки совместно культивировали с BM-DC, предварительно сенсибилизированными каждым пептидом SPARC в течение 2 часов. После этого полученные в результате клетки совместно культивировали в течение 6 дней.
День 6. Для выявления Т-клеток киллеров, специфически распознающих пептиды SPARC, проводили анализ с высвобождением Cr. Клетки T2Kd, RL самца 1 клеточная линия, клеточная линия Meth A и клеточная линия BALB/3T3 были выбраны в качестве опухолевых клеток-мишеней для Т-клеток киллеров.
(4) Анализ цитотоксических эффектов SPARC-специфичных Т-клеток киллеров с помощью анализа высвобождения Cr
Цитотоксическую активность индуцированных SPARC-специфичных Т-клеток киллеров в отношении опухолевых клеток анализировали следующим образом. Клетки T2Kd представляют собой клеточную линию, полученную путем введения гена Kd в мышиную клеточную линию T2, которая не экспрессирует ген TAP. Только в том случае, когда пептид, добавленный извне, связывается с молекулой MHC I класса, вследствие дефицита TAP, происходит стабильная экспрессия комплекса молекулы MHC I класса и этого пептида на поверхности клетки. Клеточная линия RL самца 1 представляет собой лейкозные Т-клетки мышей BALB-c и не экспрессирует SPARC. Упомянутые выше два типа клеток не экспрессируют SPARC. С другой стороны, клеточная линия Meth A и клеточная линия BALB/3T3 представляют собой клеточную линию фибросаркомы и клеточную линию фибробластов, полученные от мышей BALB/c, соответственно. Обе эти клеточные линии экспрессируют SPARC. Вышеупомянутые клеточные линии метили радиоактивным хромом (Cr), а затем их культивировали с упомянутыми выше Т-клетками киллерами в течение 4 часов. После этого, культуральный супернатант извлекали и оценивали количество радиоактивного Cr, высвобожденного из погибших клеток, для определения цитотоксической активности.
В результате, не неблюдалось цитотоксичности в отношении клеток T2Kd и клеток RL самцов 1, которые не экспрессировали SPARC. Однако цитотоксичность наблюдалась специфично в отношении клеток T2Kd, которые экспрессировали пептиды SPARC в случае молекулы Kd на поверхности путем нагрузки SPARC Kd пептидов 1, 3 и 4, а также в отношении Meth A и BALB/3T3, которые самопроизвольно экспрессировали SPARC (фигура 3).
[Пример 3]
(5) Индукция противоопухолевого иммунитета у мышей BALB/c путем иммунизации пептидом SPARC
(Способ)
BM-DC культивировали со смесью пептидов SPARC Kd-1, 3 и 4 (10 мкМ для каждого) в течение 2 часов. После этого, 5×105 клеток вводили внутрибрюшинно каждой мыши. После перерыва в 1 неделю, нагруженные пептидом BM-DC вводили мышам таким же образом, чтобы мышь была иммунизирована в сумме два раза. Спустя семь дней, клеточную линию мышиной фибросаркомы, Meth A (1×106 клеток), которая высоко экспрессирует мышиные SPARC, подкожно трансплантировали мышам. Таким образом, изучали рост опухоли и время выживания мышей.
(Результаты)
Результаты показаны на фигуре 4. Профилактическое введение BM-DC, сенсибилизированных пептидом SPARC, могло индуцировать ингибирование роста подкожно трансплантированных Meth A, и индуцировать удлинение времени выживания мышей.
ПРОМЫШЛЕННАЯ ПРИМЕНИМОСТЬ
HLA-A24 (A*2402) является наиболее частым аллелем HLA I класса, которым обладает приблизительно 60% японцев. Структурные мотивы пептидов, связанных с молекулами Kd мышей BALB/c, в значительной степени схожи со структурными мотивами пептидов, связанных с молекулами HLA-A24 человека. В связи с этим, показано, что при иммунизации мышей BALB/c определенным пептидом, если этот пептид связывается с молекулой Kd и, тем самым, индуцирует Т-клетки киллеры, и если эти Т-клетки киллеры разрушают злокачественные клетки, которые экспрессируют комплекс этого пептида и молекулы Kd, высока вероятность того, что этот пептид также связывается с HLA-A24 и индуцирует Т-клетки киллеры человека, которые могут разрушать злокачественные клетки. Следовательно, пептид по настоящему изобретению может применяться для иммунотерапии пациентов с диффузным инфильтрирующим раком желудка, раком поджелудочной железы и меланомой, обладающих HLA-A24. Ожидается, что качество жизни пациентов может быть улучшено за счет подавления роста или прогрессирования таких злокачественных опухолей под действием противораковой иммунотерапии, основанной на SPARC-пептидах.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На фигуре 1 показана степень экспрессии самых главных 15 генов, которые экспрессировались в тканях рака желудка на более высоком уровне, чем в нормальной слизистой оболочке желудка, которые были идентифицированы путем проведения анализа с микроматрицами кДНК у 20 пациентов с диффузным инфильтрирующим раком желудка. Принимая во внимание полученные результаты, а также результаты анализа с микроматрицами кДНК здоровых тканей, как описано ниже, из упомянутых выше 15 генов, секретируемый кислый и богатый цистеином белок (SPARC), специфически экспрессируемый в злокачественной ткани, был выбран в качестве наиболее идеального специфичного для опухоли антигена при диффузном инфильтрирующем раке желудка.
На фигуре 2 показаны результаты, полученные путем анализа экспрессии SPARC в 25 типах основных органов человека и в 4 типах эмбриональных органов, с использованием микроматрицы кДНК. Экспрессия гена SPARC наблюдалась даже в некоторых здоровых тканях, но уровень экспрессии в таких здоровых тканях был значительно ниже уровня в злокачественной ткани.
На фигуре 3 показана цитотоксичность SPARC-позитивных опухолевых клеток под действием CTL, которые были индуцированы с использованием мышиных Kd-рестриктированного SPARC Kd-1, Kd-3 или Kd-4 эпитопного пептида у мышей BALB/c.
На фигуре 4 показано подавление роста подкожно трансплантированных злокачественных клеток Meth A и удлинение времени выживания мышей BALB/c путем предварительного введения дендритных клеток, полученных из костного мозга (BM-DC), нагруженных смесью пептидов SPARC Kd-1, Kd-3 и Kd-4.
Claims (10)
1. Пептид, который обладает способностью индуцировать цитотоксические (киллерные) Т-клетки, выбранный из (А) и (В):
(A) пептида, который состоит из любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1-3; или
(B) пептида, который состоит из аминокислотной последовательности, содержащей замену, или добавление одной или нескольких аминокислот относительно пептида, состоящего из любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1-3.
(A) пептида, который состоит из любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1-3; или
(B) пептида, который состоит из аминокислотной последовательности, содержащей замену, или добавление одной или нескольких аминокислот относительно пептида, состоящего из любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1-3.
2. Средство, индуцирующее иммунитет, направленный против злокачественных опухолей, которое содержит по меньшей мере один тип пептида по п.1.
3. Лекарственное средство для лечения и/или профилактики опухолей, которое содержит по меньшей мере один тип пептида по п.1.
4. Средство для индукции антигенпрезентирующих клеток, обладающих высокой способностью индуцировать Т-клетки, реакционноспособные в отношении опухоли, которое содержит по меньшей мере один тип пептида по п.1.
5. Средство для индукции Т-клеток, реакционноспособных в отношении опухолей, которое содержит по меньшей мере один тип пептида по п.1.
6. Антитело, которое специфически связывается с пептидом по п.1, полученное с помощью пептида по п.1.
7. Выделенная Т-клетка киллер, реакционно-способная в отношении опухолей, которая индуцируется in vitro стимуляцией пептидом по п.1.
8. Выделенная хелперная Т-клетка, реакционно-способная в отношении опухолей, которая индуцируется in vitro стимуляцией пептидов по п.1.
9. Популяция иммуноцитов, которая содержит выделенные Т-клетки киллеры по п.7.
10. Выделенная антигенпрезентирующая клетка, которая представляет комплекс молекулы HLA и пептида по п.1, которая индуцируется средством по п.4.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2006-167724 | 2006-06-16 | ||
| JP2006167724 | 2006-06-16 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2009101191A RU2009101191A (ru) | 2010-08-10 |
| RU2451521C2 true RU2451521C2 (ru) | 2012-05-27 |
Family
ID=38831831
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009101191/10A RU2451521C2 (ru) | 2006-06-16 | 2007-06-15 | Sparc-производные антигенные пептиды отторжения опухоли и лекарственные средства, содержащие их |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US8053557B2 (ru) |
| EP (1) | EP2030984B1 (ru) |
| JP (1) | JP5150849B2 (ru) |
| KR (1) | KR101408173B1 (ru) |
| CN (3) | CN105418751B (ru) |
| AT (1) | ATE509096T1 (ru) |
| AU (1) | AU2007259667B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0713731B8 (ru) |
| CA (1) | CA2655361C (ru) |
| ES (1) | ES2365077T3 (ru) |
| IL (1) | IL195831A (ru) |
| MX (1) | MX2008015939A (ru) |
| RU (1) | RU2451521C2 (ru) |
| WO (1) | WO2007145318A1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2529373C2 (ru) * | 2008-08-19 | 2014-09-27 | Онкотерапи Сайенс, Инк. | Фармацевтическое средство, содержащее эпитопные пептиды hig2 и urlc10, для лечения рака, способы и средства для индукции антигенпрезентирующей клетки и цитотоксического т-лимфоцита (цтл), антигенпрезентирующая клетка и цтл, полученные таким способом, способ и средство индукции иммунного противоопухолевого ответа |
| RU2809113C2 (ru) * | 2018-02-21 | 2023-12-06 | Борд Оф Риджентс, Дзе Юниверсити Оф Техас Систем | Универсальные антигенпрезентирующие клетки и их применения |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007018199A1 (ja) | 2005-08-09 | 2007-02-15 | Kumamoto University | HLA-A2陽性者用glypican-3(GPC3)由来癌拒絶抗原ペプチド及びこれを含む医薬 |
| US8053557B2 (en) | 2006-06-16 | 2011-11-08 | Onco Therapy Science, Inc. | SPARC-derived tumor rejection antigenic peptides and medicaments comprising the same |
| TWI596109B (zh) * | 2007-02-21 | 2017-08-21 | 腫瘤療法 科學股份有限公司 | 表現腫瘤相關抗原之癌症的胜肽疫苗 |
| MX2011005967A (es) * | 2008-12-05 | 2011-06-30 | Abraxis Bioscience Llc | Peptidos enlazados a sparc y usos de los mismos. |
| TWI507204B (zh) | 2009-05-26 | 2015-11-11 | Oncotherapy Science Inc | Ｃｄｃ４５ｌ胜肽與含此胜肽之疫苗 |
| MX2012003287A (es) * | 2009-09-18 | 2012-08-03 | Abraxis Bioscience Llc | Uso de la identificacion microambiental de sparc en el tratamiento del cancer. |
| EP2544704A4 (en) * | 2010-03-11 | 2013-08-28 | Abraxis Bioscience Llc | SPARC ANGIOGENIC DOMAIN AND METHODS OF USE |
| CA2801190A1 (en) | 2010-06-03 | 2011-12-08 | Abraxis Bioscience, Llc | Use of the sparc microenvironment signature in the treatment of cancer |
| KR101988895B1 (ko) | 2011-05-19 | 2019-06-13 | 도레이 카부시키가이샤 | 면역 유도제 |
| AU2018402356B2 (en) * | 2018-01-09 | 2021-05-20 | Fujita Academy | Cytocidal agent |
| WO2019160099A1 (ja) * | 2018-02-15 | 2019-08-22 | 大塚製薬株式会社 | がん抗原ペプチド |
| CN111918661A (zh) | 2018-02-21 | 2020-11-10 | 得克萨斯大学体系董事会 | 用于活化和扩增自然杀伤细胞的方法及其用途 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2129018C1 (ru) * | 1993-12-24 | 1999-04-20 | Мерк Патент Гмбх | Иммуноконьюгат, способ получения иммуноконьюгата и фармацевтическая композиция |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000023673A (ja) * | 1998-07-13 | 2000-01-25 | Ajinomoto Co Inc | ヒト胃癌抗原遺伝子および胃癌抗原蛋白質 |
| AU2001266787A1 (en) * | 2000-06-07 | 2002-01-08 | Human Genome Sciences, Inc. | Nucleic acids, proteins, and antibodies |
| US7074901B2 (en) * | 2001-05-25 | 2006-07-11 | Serono Genetics Institute S.A. | Isolated human vCOL16A1 polypeptide and fragments thereof |
| ATE521702T1 (de) | 2002-08-30 | 2011-09-15 | Medinet Co Ltd | Krebsantigene und deren nutzung |
| JP2006503575A (ja) | 2002-10-25 | 2006-02-02 | オンコセラピー・サイエンス株式会社 | びまん型胃癌を診断する方法 |
| JP2004303688A (ja) | 2003-04-01 | 2004-10-28 | Matsushita Electric Works Ltd | 放電灯点灯装置 |
| EP1684076B1 (en) | 2003-10-29 | 2008-12-31 | Kumamoto Technology & Industry Foundation | Diagnostic method for malignant melanoma |
| AU2005297303B2 (en) | 2004-10-19 | 2011-11-10 | Lsip, Llc | Novel diagnostic kit for malignant melanoma |
| WO2007018199A1 (ja) | 2005-08-09 | 2007-02-15 | Kumamoto University | HLA-A2陽性者用glypican-3(GPC3)由来癌拒絶抗原ペプチド及びこれを含む医薬 |
| US8053557B2 (en) | 2006-06-16 | 2011-11-08 | Onco Therapy Science, Inc. | SPARC-derived tumor rejection antigenic peptides and medicaments comprising the same |
-
2007
- 2007-06-15 US US12/304,350 patent/US8053557B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-06-15 WO PCT/JP2007/062117 patent/WO2007145318A1/ja not_active Ceased
- 2007-06-15 AU AU2007259667A patent/AU2007259667B2/en not_active Ceased
- 2007-06-15 CN CN201610034435.7A patent/CN105418751B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-06-15 CN CN201310236439.XA patent/CN103435683B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-06-15 EP EP20070745372 patent/EP2030984B1/en active Active
- 2007-06-15 ES ES07745372T patent/ES2365077T3/es active Active
- 2007-06-15 KR KR1020097000778A patent/KR101408173B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2007-06-15 AT AT07745372T patent/ATE509096T1/de active
- 2007-06-15 MX MX2008015939A patent/MX2008015939A/es active IP Right Grant
- 2007-06-15 JP JP2008521269A patent/JP5150849B2/ja active Active
- 2007-06-15 BR BRPI0713731A patent/BRPI0713731B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2007-06-15 CA CA 2655361 patent/CA2655361C/en active Active
- 2007-06-15 CN CN200780022547XA patent/CN101472943B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-06-15 RU RU2009101191/10A patent/RU2451521C2/ru active
-
2008
- 2008-12-10 IL IL195831A patent/IL195831A/en active IP Right Grant
-
2011
- 2011-09-23 US US13/243,259 patent/US8470968B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2013
- 2013-05-23 US US13/901,194 patent/US9120842B2/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2129018C1 (ru) * | 1993-12-24 | 1999-04-20 | Мерк Патент Гмбх | Иммуноконьюгат, способ получения иммуноконьюгата и фармацевтическая композиция |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2529373C2 (ru) * | 2008-08-19 | 2014-09-27 | Онкотерапи Сайенс, Инк. | Фармацевтическое средство, содержащее эпитопные пептиды hig2 и urlc10, для лечения рака, способы и средства для индукции антигенпрезентирующей клетки и цитотоксического т-лимфоцита (цтл), антигенпрезентирующая клетка и цтл, полученные таким способом, способ и средство индукции иммунного противоопухолевого ответа |
| US9119800B2 (en) | 2008-08-19 | 2015-09-01 | Oncotherapy Science, Inc. | HIG2 and URLC10 epitope peptide and vaccines containing the same |
| RU2809113C2 (ru) * | 2018-02-21 | 2023-12-06 | Борд Оф Риджентс, Дзе Юниверсити Оф Техас Систем | Универсальные антигенпрезентирующие клетки и их применения |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2451521C2 (ru) | Sparc-производные антигенные пептиды отторжения опухоли и лекарственные средства, содержащие их | |
| JP5291641B2 (ja) | 癌抗原及びその利用 | |
| JP5299942B2 (ja) | ＨＬＡ−Ａ２陽性者用ｇｌｙｐｉｃａｎ−３（ＧＰＣ３）由来癌拒絶抗原ペプチド及びこれを含む医薬 | |
| JP2004147649A (ja) | 頭頚部癌の抗原 | |
| JP2013047230A (ja) | Ｈｌａ−ａ２陽性者用ｈｓｐ１０５由来癌拒絶抗原ペプチド及びこれを含む医薬 | |
| HK1128924B (en) | Sparc-derived cancer rejection antigen peptide and pharmaceutical comprising the same | |
| JP2008106052A (ja) | 免疫誘導剤及びその用途 | |
| HK1118079B (en) | Cancer-rejection antigen peptide derived from glypican-3 (gpc3) for use in hla-a2-positive patient and pharmaceutical comprising the antigen |