RU2449381C1 - Способ коррекции эндотелиальной дисфункции l-норвалином при adma-подобной модели гестоза - Google Patents
Способ коррекции эндотелиальной дисфункции l-норвалином при adma-подобной модели гестоза Download PDFInfo
- Publication number
- RU2449381C1 RU2449381C1 RU2010144195/14A RU2010144195A RU2449381C1 RU 2449381 C1 RU2449381 C1 RU 2449381C1 RU 2010144195/14 A RU2010144195/14 A RU 2010144195/14A RU 2010144195 A RU2010144195 A RU 2010144195A RU 2449381 C1 RU2449381 C1 RU 2449381C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- adma
- gestosis
- model
- dose
- endothelial dysfunction
- Prior art date
Links
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 title claims abstract description 10
- 206010048554 Endothelial dysfunction Diseases 0.000 title claims abstract description 9
- 230000008694 endothelial dysfunction Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 201000011461 pre-eclampsia Diseases 0.000 title claims abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 7
- KCWZGJVSDFYRIX-YFKPBYRVSA-N N(gamma)-nitro-L-arginine methyl ester Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N[N+]([O-])=O KCWZGJVSDFYRIX-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 claims abstract description 3
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 claims description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 abstract description 7
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 abstract description 4
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 abstract description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 abstract description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 abstract description 2
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 abstract 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 7
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 7
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 7
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 102000004452 Arginase Human genes 0.000 description 3
- 108700024123 Arginases Proteins 0.000 description 3
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- YDGMGEXADBMOMJ-LURJTMIESA-N N(g)-dimethylarginine Chemical compound CN(C)C(\N)=N\CCC[C@H](N)C(O)=O YDGMGEXADBMOMJ-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- YDGMGEXADBMOMJ-UHFFFAOYSA-N asymmetrical dimethylarginine Natural products CN(C)C(N)=NCCCC(N)C(O)=O YDGMGEXADBMOMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YEESUBCSWGVPCE-UHFFFAOYSA-N azanylidyneoxidanium iron(2+) pentacyanide Chemical compound [Fe++].[C-]#N.[C-]#N.[C-]#N.[C-]#N.[C-]#N.N#[O+] YEESUBCSWGVPCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N chloral hydrate Chemical compound OC(O)C(Cl)(Cl)Cl RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002327 chloral hydrate Drugs 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- XEYBHCRIKKKOSS-UHFFFAOYSA-N disodium;azanylidyneoxidanium;iron(2+);pentacyanide Chemical compound [Na+].[Na+].[Fe+2].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].[O+]#N XEYBHCRIKKKOSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 210000003191 femoral vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 229960002460 nitroprusside Drugs 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229940083618 sodium nitroprusside Drugs 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000006442 vascular tone Effects 0.000 description 1
- 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 1
- 230000000304 vasodilatating effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных. Моделирование ADMA-подобной модели гестоза у лабораторных беременных крыс линии Wistar проводят ежедневным введением с 14 по 20 день беременности ингибитора NO-синтазы L-NAME в дозе 25 мг/кг. Коррекцию эндотелиальной дисфункции обеспечивают L-норвалином, который на фоне моделирования вводят внутрижелудочно ежедневно в течение 7 суток в дозе 10 мг/кг однократно в сутки. Способ приводит к выраженной коррекции дисфункции в условиях специфических механизмов протекания патологического процесса у беременных. 1 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии.
Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных животных с помощью L-аргинина - субстрата для синтеза оксида азота, согласно описанию экспериментальных исследований в статье «Фармакологическая коррекция L-аргинином «ADMA-eNOS-ассоциированных мишеней» при экспериментальной преэклампсии», Кубанский научный медицинский вестник, №1, 2010 г., стр.85-92.
Основным недостатком способа является то, что L-аргинин является прямым конкурентом ADMA и повышение его концентрации приводит только к увеличению субстрата для образования NO и активации NO-синтазы, что увеличивает синтез NO. Однако другим способом увеличения синтеза оксида азота является повышение биодостуности L-аргинина. Этого можно достичь использованием ингибиторов аргиназ. Поэтому результаты коррекции нарушения эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели патологии у беременных животных с использованием L-аргинина неудовлетворительны.
Техническим результатом изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели гестоза, включающий использование L-норвалина, относящегося к группе ингибиторов аргиназ.
Технический результат достигается тем, что на фоне моделирования гестоза в эксперименте внутрибрюшинным введением беременным самкам крыс линии Wistar в течение 7 суток ADMA-подобного блокатора эндотелиальной NO-синтазы - N-нитро-L-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг проводится коррекция эндотелиальной дисфункции внутрижелудочным введением L-норвалина в дозе 10 мг/кг однократно в сутки. Это приводит к выраженной коррекции нарушений, так как введение L-норвалина приводит к блокированию фермента аргиназы, а следовательно, к уменьшению превращения L-аргинина в орнитин и мочевину. Таким образом, введение L-норвалина увеличивает биодоступность L-аргинина для синтеза N0, повышает концентрацию оксида азота и уменьшает эндотелиальную дисфункцию.
Способ осуществляется следующим образом.
Опыты проводят на белых беременных самках крыс линии Wistar массой 250-300 г сроком беременности 14 дней. N-нитро-L-аргинин-метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут в течение 7 дней (с 14 по 20 день беременности). L-норвалин вводится внутрижелудочно в дозе 10 мг/кг/сут в течение 7 дней.
На 8 день от начала эксперимента под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг) вводят катетер в правую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Проводят сосудистые пробы на эндотелийзависимую вазодилатацию (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, и эндотелийнезависимую вазодилатацию (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг с расчетом коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД) - патент №2301015 от 20.06.2007 г. (бюл. №17).
При статистической обработке данных рассчитывается среднее значение, величина стандартного отклонения. Различия считаются достоверными при p<0,05.
Пример конкретного выполнения
Блокада NO-синтазы, вызванная 7-дневным введением L-NAME беременным крысам, приводила к нарушению взаимоотношений вазодилатирующих и вазоконстрикторных механизмов регуляции сосудистого тонуса, о чем свидетельствуют результаты сосудистых проб на эндотелийзависимое расслабление (ацетилхолин) и эндотелийнезависимое (нитропруссид натрия) и увеличение КЭД с 1,28±0,23 у интактных беременных животных до 3,06±0,32* (p<0,05). Длительное, в течение 7 суток, ежедневное внутрижелудочное введение L-норвалина (10 мг/кг) на фоне ADMA-подобной модели гестоза у беременных крыс приводило к достоверному снижению КЭД до 1,50±0,1, что в два раза меньше, чем в группе животных с введением L-NAME (p<0,05).
Таким образом, полученные результаты убедительно свидетельствуют о выраженной коррекции эндотелиальной дисфункции в условиях воспроизводимой нами ADMA-подобной модели гестоза у беременных крыс L-норвалином.
Claims (1)
- Способ коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели гестоза, включающий воспроизведение модели гестоза у крыс линии Wistar ежедневным с 14 по 20 день беременности внутрибрюшинным введением L-нитро-аргинин-метилового эфира в дозе 25 мг/кг, отличающийся тем, что на фоне этого ежедневно в течение 7 суток вводят внутрижелудочно L-норвалин в дозе 10 мг/кг однократно в сутки.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010144195/14A RU2449381C1 (ru) | 2010-10-28 | 2010-10-28 | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции l-норвалином при adma-подобной модели гестоза |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010144195/14A RU2449381C1 (ru) | 2010-10-28 | 2010-10-28 | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции l-норвалином при adma-подобной модели гестоза |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2449381C1 true RU2449381C1 (ru) | 2012-04-27 |
Family
ID=46297645
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010144195/14A RU2449381C1 (ru) | 2010-10-28 | 2010-10-28 | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции l-норвалином при adma-подобной модели гестоза |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2449381C1 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2490632C1 (ru) * | 2012-05-17 | 2013-08-20 | Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Красноярский Государственный Медицинский Университет Имени Профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства Здравоохранения И Социального Развития Российской Федерации" | Способ моделирования дисфункции эндотелия in vitro |
| RU2639415C1 (ru) * | 2016-10-06 | 2017-12-21 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ" | Способ эндотелиопротекции при adma-подобной модели гестоза ингибитором аргиназы ii |
| RU2721290C1 (ru) * | 2019-11-21 | 2020-05-18 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели преэклампсии с использованием ацетилсалициловой кислоты |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070213399A1 (en) * | 2004-11-10 | 2007-09-13 | Jallal Messadek | Modulation of nitric oxide synthases by betaines |
| RU2306930C1 (ru) * | 2005-12-28 | 2007-09-27 | Михаил Владимирович Покровский | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции комбинацией лозартана и l-аргинина при l-name-индуцированном дефиците оксида азота |
| RU2353369C1 (ru) * | 2007-11-22 | 2009-04-27 | Елена Станиславовна Черноморцева | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции джозамицином при l-name-индуцированном дефиците оксида азота |
-
2010
- 2010-10-28 RU RU2010144195/14A patent/RU2449381C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070213399A1 (en) * | 2004-11-10 | 2007-09-13 | Jallal Messadek | Modulation of nitric oxide synthases by betaines |
| RU2306930C1 (ru) * | 2005-12-28 | 2007-09-27 | Михаил Владимирович Покровский | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции комбинацией лозартана и l-аргинина при l-name-индуцированном дефиците оксида азота |
| RU2353369C1 (ru) * | 2007-11-22 | 2009-04-27 | Елена Станиславовна Черноморцева | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции джозамицином при l-name-индуцированном дефиците оксида азота |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| L-Норвалин - новый донатор азота, 13 июня 2010, 2 с. Найдено в Интернет 16.06.2011, http://sportswiki.ru. СИДОРОВА И.С. Клинико-диагностическое значение определения маркеров дисфункции эндотелия при лечении беременных с гестозом. Российский вестник акушера-гинеколога, 2010, т.10, №6, с.9-13. MING XF, et al. Inhibition of S6K1 accounts partially for the anti-inflammatory effects of the arginase inhibitor L-norvaline BMC Cardiovasc Disord. 2009 Mar 13; 9:12. ROSSELLI M. et al. Role of nitric oxide in the biology, physiology and pathophysiology of reproduction Hum Reprod Update. 1998 Jan-Feb; 4(1):3-24. * |
| ПОКРОВСКИЙ М.В. и др. Фармакологическая коррекция L-аргинином «ADMA-eNOS ассоциированных мишеней» при экспериментальной преэклампсии. Кубанский научный медицинский вестник, 2010, №1, с.85-92. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2490632C1 (ru) * | 2012-05-17 | 2013-08-20 | Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Красноярский Государственный Медицинский Университет Имени Профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства Здравоохранения И Социального Развития Российской Федерации" | Способ моделирования дисфункции эндотелия in vitro |
| RU2639415C1 (ru) * | 2016-10-06 | 2017-12-21 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ" | Способ эндотелиопротекции при adma-подобной модели гестоза ингибитором аргиназы ii |
| RU2721290C1 (ru) * | 2019-11-21 | 2020-05-18 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели преэклампсии с использованием ацетилсалициловой кислоты |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2462766C1 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции рекомбинантным эритропоэтином при adma-подобной модели гестоза | |
| CA3068728A1 (en) | Methods of synthesizing nicotinamide riboside | |
| RU2449381C1 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции l-норвалином при adma-подобной модели гестоза | |
| RU2466462C1 (ru) | Способ коррекции нарушения микроциркуляции в плаценте рекомбинантным эритропоэтином при adma-подобной модели гестоза | |
| RU2453000C1 (ru) | Способ коррекции нарушения микроциркуляции в плаценте при adma-подобной модели гестоза | |
| TWI543960B (zh) | Erythropoietin production accelerator | |
| RU2543359C1 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункуии фармакологическим прекондиционированием никорандилом при adma-подобной модели гестоза в эксперименте | |
| RU2700563C1 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции триметазидином при ADMA-подобной модели преэклампсии | |
| RU2639415C1 (ru) | Способ эндотелиопротекции при adma-подобной модели гестоза ингибитором аргиназы ii | |
| RU2460148C1 (ru) | Способ коррекции нарушения микроциркуляции в плаценте при adma-подобной модели гестоза | |
| JP2023551455A (ja) | 子癇前症を治療又は予防する薬物の調製におけるザナミビルの使用 | |
| CN113106154B (zh) | Prmt3在诊断或治疗复发性自然流产中的应用 | |
| RU2462765C1 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции дистантным прекондиционированием при adma-подобной модели гестоза | |
| Gureev et al. | Correction of adma-induced preeclampsia with the use of phosphodiesterase 5 and selective inhibitor of arginase II ZB49-0010 | |
| RU2707057C1 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции карбамилированным дарбэпоэтином при ADMA-подобной модели преэклампсии | |
| Mizutani et al. | Placental Leucine Aminopeptidase‐and Aminopeptidase A‐Deficient Mice Offer Insight concerning the Mechanisms Underlying Preterm Labor and Preeclampsia | |
| RU2421822C2 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции комбинацией триметазидина и l-аргинина при l-name-индуцированном дефиците оксида азота | |
| RU2721290C1 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели преэклампсии с использованием ацетилсалициловой кислоты | |
| RU2481103C1 (ru) | Способ коррекции нарушения микроциркуляции в плаценте при adma-подобной модели гестоза в эксперименте однократным ишемическим эпизодом | |
| RU2644271C1 (ru) | Способ коррекции нарушения микроциркуляции в плаценте ингибитором аргиназы ii | |
| RU2707060C1 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции асиалированным эритропоэтином при ADMA-подобной модели преэклампсии | |
| RU2252767C1 (ru) | Способ нормализации иммунобиохимического гомеостаза коров в предродовом и послеродовом периодах | |
| RU2526150C2 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции раствором гомеопатических разведений антител к интерлейкину-1 | |
| RU2735903C1 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции субстанцией 3-гидрокси-2-этил-6-метилпиридиния никотинат при ADMA-подобной модели преэклампсии | |
| RU2507595C2 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции азитромицином при adma-подобной модели гестоза в эксперименте |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20121029 |