RU2447445C1 - Method for evaluating clinical effectiveness and dynamics of destructive changes in pulmonary tissue accompanying pulmonary tuberculosis - Google Patents
Method for evaluating clinical effectiveness and dynamics of destructive changes in pulmonary tissue accompanying pulmonary tuberculosis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2447445C1 RU2447445C1 RU2010150484/15A RU2010150484A RU2447445C1 RU 2447445 C1 RU2447445 C1 RU 2447445C1 RU 2010150484/15 A RU2010150484/15 A RU 2010150484/15A RU 2010150484 A RU2010150484 A RU 2010150484A RU 2447445 C1 RU2447445 C1 RU 2447445C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lymphocytes
- treatment
- tuberculosis
- cd62l
- dynamics
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 70
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 title claims abstract description 7
- 208000008128 pulmonary tuberculosis Diseases 0.000 title claims description 8
- 210000004879 pulmonary tissue Anatomy 0.000 title abstract 4
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 56
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 claims abstract description 50
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 claims abstract description 38
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 claims abstract description 38
- 101001018097 Homo sapiens L-selectin Proteins 0.000 claims abstract description 34
- 102100033467 L-selectin Human genes 0.000 claims abstract description 34
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 33
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 13
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 claims abstract description 6
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 claims abstract description 6
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 34
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 6
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 3
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 abstract description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 10
- 230000004044 response Effects 0.000 abstract description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 5
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 abstract description 5
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 abstract description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 abstract description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 abstract description 3
- 210000004976 peripheral blood cell Anatomy 0.000 abstract description 3
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 abstract description 2
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 abstract description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 13
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 13
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 11
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 10
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 10
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 10
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 8
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 8
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 208000036981 active tuberculosis Diseases 0.000 description 6
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 6
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 5
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 5
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 101710166488 6 kDa early secretory antigenic target Proteins 0.000 description 3
- 208000032420 Latent Infection Diseases 0.000 description 3
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 3
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 208000037771 disease arising from reactivation of latent virus Diseases 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 3
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 3
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 3
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 3
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 3
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 3
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 206010062207 Mycobacterial infection Diseases 0.000 description 2
- 101001057048 Mycobacterium tuberculosis (strain ATCC 25618 / H37Rv) ESAT-6-like protein EsxB Proteins 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 2
- 238000005056 compaction Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 208000027531 mycobacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 206010065048 Latent tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 108010037255 Member 7 Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily Proteins 0.000 description 1
- 206010048723 Multiple-drug resistance Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960000190 bacillus calmette–guérin vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000004940 costimulation Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000011990 functional testing Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000009027 insemination Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 238000010212 intracellular staining Methods 0.000 description 1
- 208000033353 latent tuberculosis infection Diseases 0.000 description 1
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005210 lymphoid organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 229960001005 tuberculin Drugs 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к клинической медицине, а именно фтизиатрии и иммунологии, и может быть использовано для оценки эффективности лечения туберкулеза легких.The invention relates to clinical medicine, namely phthisiology and immunology, and can be used to evaluate the effectiveness of the treatment of pulmonary tuberculosis.
В настоящее время резко возросла заболеваемость туберкулезом и смертность от этой инфекции. При этом отмечается множественная лекарственная устойчивость возбудителей заболевания. В связи с этим, а также в связи с многообразием форм туберкулеза легких, различным течением заболевания и различным ответом больных на химиотерапию большое значение имеет постоянный мониторинг за эффективностью проводимой терапии и оценка динамики патологических изменений в легочной ткани больного. Имеет значение также особенность иммунореактивности организма больного, определяющая характер патологических процессов в легочной ткани и скорость развития репаративных процессов при лечении туберкулеза. Такой мониторинг важен как для своевременного выявления больных с низкой отвечаемостью на проводимую терапию, так и для своевременного заключения об излечении туберкулеза. Последнее имеет большое значение в связи с длительностью и высокой стоимостью лечения туберкулеза, а также большим риском развития побочных эффектов.Currently, the incidence of tuberculosis and mortality from this infection has risen sharply. In this case, multiple drug resistance of pathogens is noted. In this regard, as well as in connection with the variety of forms of pulmonary tuberculosis, the different course of the disease, and the different responses of patients to chemotherapy, constant monitoring of the effectiveness of the therapy and assessment of the dynamics of pathological changes in the lung tissue of the patient are of great importance. The peculiarity of the patient’s immunoreactivity, which determines the nature of the pathological processes in the lung tissue and the rate of development of reparative processes in the treatment of tuberculosis, is also important. Such monitoring is important both for the timely detection of patients with low response rates to ongoing therapy, and for the timely conclusion of a cure for tuberculosis. The latter is of great importance due to the duration and high cost of treating tuberculosis, as well as the greater risk of side effects.
В настоящее время основными методами оценки эффективности лечения туберкулеза являются клинические показатели, методы лучевой диагностики и микробиологические методы, а основными критериями эффективности лечения - исчезновение (уменьшение) клинических признаков заболевания, положительная рентгенологическая динамика и прекращение бактериовыделения.Currently, the main methods for assessing the effectiveness of treatment for tuberculosis are clinical indicators, methods of radiation diagnostics and microbiological methods, and the main criteria for the effectiveness of treatment are the disappearance (reduction) of clinical signs of the disease, positive radiological dynamics and the cessation of bacterial excretion.
Данные подходы имеют определенные ограничения. Клинические симптомы не являются специфичными. Рентгенологическое обследование обладает рядом побочных эффектов и является дорогостоящим, а рентгенологическая оценка динамики туберкулезного процесса является достаточно субъективной. Основными ограничениями микробиологических и молекулярно-биологических методов являются слабая чувствительность (микроскопия мазков мокроты), длительность получения результатов (посев мокроты на микобактерии, время ожидания результата - 1-3 месяца), недоступность ускоренных методов для обычных клинических лабораторий (ВАСТЕС, ПЦР), а также необходимость использования мокроты, получение которой не всегда возможно, особенно у пациентов с ограниченными деструктивными процессами в легочной ткани. Кроме того, результаты микробиологических методов не позволяют судить о характере патологических изменений в легочной ткани, прогнозировать и мониторировать течение патологического процесса в легочной ткани.These approaches have certain limitations. Clinical symptoms are not specific. An X-ray examination has a number of side effects and is expensive, and an X-ray assessment of the dynamics of the tuberculosis process is quite subjective. The main limitations of microbiological and molecular biological methods are weak sensitivity (microscopy of sputum smears), the duration of obtaining results (sputum culture on mycobacteria, the waiting time for the result is 1-3 months), the inaccessibility of accelerated methods to conventional clinical laboratories (WASTES, PCR), and also the need to use sputum, the receipt of which is not always possible, especially in patients with limited destructive processes in the lung tissue. In addition, the results of microbiological methods do not allow one to judge the nature of pathological changes in the lung tissue, to predict and monitor the course of the pathological process in the lung tissue.
Поскольку состояние иммунной системы больного зависит от интенсивности инфекционного процесса и характера поражения ткани в очаге инфекции, иммунологические тесты потенциально могут быть использованы для мониторинга течения туберкулеза и эффективности проводимой терапии.Since the condition of the patient’s immune system depends on the intensity of the infectious process and the nature of the tissue lesion in the infection site, immunological tests can potentially be used to monitor the course of tuberculosis and the effectiveness of the therapy.
Существуют различные иммунологические методы, используемые во фтизиатрической практике, однако большинство из используемых методов имеют те или иные недостатки и не решают вопрос о мониторинге эффективности лечения туберкулеза легких.There are various immunological methods used in phthisiatric practice, however, most of the methods used have certain disadvantages and do not solve the issue of monitoring the effectiveness of treatment of pulmonary tuberculosis.
Определение содержания различных популяций и субпопуляций лимфоцитов (B-лимфоциты, T-лимфоциты CD4+, T-лимфоциты CD8, NK клетки) методом проточной цитометрии является современным методом, точным и быстрым, однако не позволяет получить информацию о функциональном состоянии иммунитета; в большинстве случаев результаты исследования не отражают активности туберкулезного процесса и не могут быть использованы для оценки эффективности проводимой терапии.Determination of the contents of various populations and subpopulations of lymphocytes (B-lymphocytes, CD4 + T-lymphocytes, CD8 T-lymphocytes, NK cells) by flow cytometry is a modern method, accurate and fast, but does not allow to obtain information about the functional state of the immune system; in most cases, the results of the study do not reflect the activity of the tuberculosis process and cannot be used to assess the effectiveness of the therapy.
Определение антиген-индуцированной продукции интерферона-гамма и других цитокинов клетками крови позволяет оценить функциональное состояние иммунной системы больного и выявить наличие антиген-специфического иммунного ответа, но не позволяют дать однозначную оценку активности туберкулезного процесса и эффективности проводимой терапии. Например, низкий уровень продукции интерферона-гамма может наблюдаться как при низкой активности туберкулезного процесса (вследствие низкой антигенной нагрузки и, соответственно, низкой активации клеток в организме), так и при тяжелом течении туберкулеза (вследствие постоянной активации клеток в условиях высокой антигенной нагрузки и «истощении» иммунной системы больного). К другим недостаткам данного и других функциональных тестов относятся необходимость культивирования клеток in vitro, обусловливающая трудоемкость и длительность получения результатов.Determination of antigen-induced production of interferon-gamma and other cytokines by blood cells allows us to evaluate the functional state of the patient’s immune system and to detect the presence of an antigen-specific immune response, but they do not allow an unambiguous assessment of the activity of the tuberculosis process and the effectiveness of the therapy. For example, a low level of production of interferon-gamma can be observed both with low activity of the tuberculosis process (due to low antigenic load and, accordingly, low activation of cells in the body), and in severe tuberculosis (due to the constant activation of cells under high antigenic load and exhaustion of the patient’s immune system). Other disadvantages of this and other functional tests include the need for in vitro cell cultivation, which determines the complexity and duration of the results.
Определение индуцированной люминолзависимой хемилюминесценции нейтрофилов в ответ на их стимуляцию инактивированной вакциной БЦЖ и опсонизированным [RU 2389020, G01N 33/49, 10.05.2010] предлагается для диагностики ТБ, но не используется для оценки течения ТБ процесса и эффективности проводимой терапии.Determination of induced luminol-dependent chemiluminescence of neutrophils in response to their stimulation with inactivated BCG vaccine and opsonized [RU 2389020, G01N 33/49, 05/10/2010] is proposed for the diagnosis of TB, but is not used to assess the course of the TB process and the effectiveness of the therapy.
В пролиферативных тестах (реакция бласттрансформации) определяют уровень пролиферации лимфоцитов в ответ на антигены микобактерий и дают заключение о наличии инфицирования микобактериями. Способы используются, в основном, для диагностики туберкулеза, но не для оценки его активности или мониторинга за эффективностью его лечения. Примером является способ диагностики туберкулезной инфекции у детей, основанный на реакции пролиферации лимфоцитов в микрокультурах [RU 2315315, C2, G01N 33/53, G01N 33/60, 20.01.2008]. У пациентов определяют уровень пролиферации лимфоцитов в микрокультурах цельной крови по реакции бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) с аллергеном туберкулином (ППД-Л). Оценивают индекс стимуляции специфического клеточного ответа и при показателях индекса менее 3,2 диагностируют отсутствие инфицирования микобактериями туберкулеза, при индексе более 3,2 диагностируют инфицирование микобактериями туберкулеза, а при показателе более 12,1 - активный туберкулезный процесс. Данный способ может быть использован для диагностики туберкулезной инфекции, но малоинформативен для мониторинга течения ТБ процесса или оценки эффективности его лечения. Кроме того, способ предложен для применения у детей, но не у взрослых, а достоверность диагностики ТБ данным способом относительно невысока.In proliferative tests (blast transformation reaction), the level of lymphocyte proliferation in response to mycobacterial antigens is determined and a conclusion is made about the presence of mycobacterial infection. The methods are used mainly for the diagnosis of tuberculosis, but not for assessing its activity or monitoring the effectiveness of its treatment. An example is a method for the diagnosis of tuberculosis infection in children, based on the reaction of proliferation of lymphocytes in microcultures [RU 2315315, C2, G01N 33/53, G01N 33/60, 01/20/2008]. In patients, the level of lymphocyte proliferation in whole blood microcultures is determined by the reaction of blast transformation of lymphocytes (RBTL) with tuberculin allergen (PPD-L). The specific cell response stimulation index is estimated, and if the index is less than 3.2, the absence of mycobacterium tuberculosis infection is diagnosed, when the index is more than 3.2, mycobacterium tuberculosis infection is diagnosed, and if the index is more than 12.1, the active tuberculosis process is diagnosed. This method can be used to diagnose tuberculosis infection, but is not very informative for monitoring the course of the TB process or evaluating the effectiveness of its treatment. In addition, the method is proposed for use in children, but not in adults, and the reliability of TB diagnosis by this method is relatively low.
Интерфероновые тесты основаны на определении количества клеток, продуцирующих интерферон-гамма (метод T-SPOT), или уровня продукции интерферона-гамма (метод QuantiFERON-TB) клетками периферической крови при стимуляции образцов крови антигенами микобактерий. Метод иммунологической диагностики и мониторинга туберкулезной инфекции T-SPOT (USPTO Applicaton №20070196878) основан на определении количества клеток, продуцирующих интерферон-гамма в ответ на стимуляцию образцов крови антигенами микобактерий ESAT-6 и CFP-10. Данный метод был предложен для диагностики туберкулеза, дифференциальной диагностики активного туберкулеза и латентной инфекции и мониторинга течения ТБ. Однако, по данным большинства исследователей, основной областью применения данного метода является диагностика туберкулеза, а не мониторинг его активности или эффективности лечения (Streitz М, Tesfa L, Yildirim V, Yahyazadeh A, Ulrichs T, et al: 2007 Loss of Receptor on Tuberculin-Reactive T-Cells Marks Active Pulmonary Tuberculosis. PLoS ONE 2(8): e735. doi:10.1371/journal.pone.0000735). Помимо этого, метод является сложным и трудоемким, требует культивирования клеток в стерильных условиях и дорогостоящих реагентов.Interferon tests are based on determining the number of cells producing interferon-gamma (T-SPOT method), or the level of production of interferon-gamma (QuantiFERON-TB method) by peripheral blood cells upon stimulation of blood samples with mycobacterial antigens. The method of immunological diagnosis and monitoring of tuberculosis infection T-SPOT (USPTO Applicaton No. 20070196878) is based on determining the number of cells that produce interferon-gamma in response to stimulation of blood samples with ESAT-6 and CFP-10 mycobacteria antigens. This method was proposed for the diagnosis of tuberculosis, differential diagnosis of active tuberculosis and latent infection, and monitoring the course of TB. However, according to most researchers, the main area of application of this method is the diagnosis of tuberculosis, rather than monitoring its activity or treatment effectiveness (Streitz M, Tesfa L, Yildirim V, Yahyazadeh A, Ulrichs T, et al: 2007 Loss of Receptor on Tuberculin- Reactive T-Cells Marks Active Pulmonary Tuberculosis. PLoS ONE 2 (8): e735. Doi: 10.1371 / journal.pone.0000735). In addition, the method is complex and time-consuming, requires culturing cells under sterile conditions and expensive reagents.
Метод QuantiFERON-TB Gold in-tube основан на определении уровня продукции интерферона-гамма клетками периферической крови в ответ на стимуляцию клеток антигенами микобактерий ESAT-6 и CFP-10. Метод используется для диагностики туберкулезной инфекции, однако не позволяет проводить дифференциальную диагностику активной и латентной туберкулезной инфекции, оценивать активность туберкулезного процесса или эффективность лечения.The QuantiFERON-TB Gold in-tube method is based on determining the level of production of interferon-gamma by peripheral blood cells in response to stimulation of cells with ESAT-6 and CFP-10 mycobacterial antigens. The method is used to diagnose tuberculosis infection, however, it does not allow differential diagnosis of active and latent tuberculosis infection, to evaluate the activity of the tuberculosis process or the effectiveness of treatment.
Наиболее близким по своей сущности к методу, предложенному в данном изобретении, является подход, описанный Streitz и соавт.(Streitz M, Tesfa L, Yildirim V, Yahyazadeh A, Ulrichs T, et al. (2007) Loss of Receptor on Tuberculin-Reactive T-Cells Marks Active Pulmonary Tuberculosis. PLoS ONE 2(8):e735. doi:10.1371/journal.pone.0000735). В данном подходе образцы периферической крови стимулируют антигеном (ППД или пептидами, входящими в антиген миокбактерий ESAT-6). После окончания стимуляции клетки обрабатывают антителами, специфичными к маркерам CD4 и CD27, а также к внутриклеточному интерферону-гамма, и среди лимфоцитов, отвечающих на стимуляцию антигеном продукцией интерферона-гамма (лимфоциты IFN-γ+), определяют долю лимфоцитов CD27-. Содержание лимфоцитов CD27- выше 49% от всех лимфоцитов CD4+, продуцирующих IFN-γ, свидетельствует об активном туберкулезе, ниже 49% - о латентной инфекции. Способ позволяет диагностировать активный ТБ и латентную инфекцию. Ограничениями способа являются: а) невозможность его применения для мониторинга туберкулеза и оценки эффективности лечения вследствие того, что процент лимфоцитов CD27- среди лимфоцитов, продуцирующих IFN-γ, в процессе лечения не изменяется; б) необходимость культивирования клеток in vitro, приводящая к трудоемкости и высокой стоимости метода.Closest in nature to the method proposed in this invention is the approach described by Streitz et al. (Streitz M, Tesfa L, Yildirim V, Yahyazadeh A, Ulrichs T, et al. (2007) Loss of Receptor on Tuberculin-Reactive T-Cells Marks Active Pulmonary Tuberculosis. PLoS ONE 2 (8): e735. Doi: 10.1371 / journal.pone.0000735). In this approach, peripheral blood samples are stimulated with an antigen (PPD or peptides that are part of the ESAT-6 myocbacterium antigen). After the end of the stimulation, the cells are treated with antibodies specific for the CD4 and CD27 markers, as well as to the intracellular interferon-gamma, and among the lymphocytes responding to stimulation with the antigen by production of interferon-gamma (IFN-γ + lymphocytes), the proportion of CD27 - lymphocytes is determined. The content of CD27 lymphocytes - above 49% of all CD4 + lymphocytes producing IFN-γ, indicates active tuberculosis, below 49% - about latent infection. The method allows to diagnose active TB and latent infection. Limitations of this method are: a) the impossibility of its use for monitoring and evaluation of TB treatment efficacy due to the fact that the percentage of CD27 lymphocytes - among lymphocytes producing IFN-γ, did not change during treatment; b) the need for culturing cells in vitro, leading to the complexity and high cost of the method.
Задачей, решаемой данным изобретением, является разработка способа, который позволял бы осуществлять мониторинг течения ТБ процесса, давать объективную оценку эффективности его лечения и динамики патологических изменений в легочной ткани, основываясь на анализе поверхностного фенотипа клеток крови, без их культивирования и внутриклеточного окрашивания.The problem solved by this invention is the development of a method that would allow monitoring the course of the TB process, to give an objective assessment of the effectiveness of its treatment and the dynamics of pathological changes in the lung tissue, based on the analysis of the surface phenotype of blood cells, without cultivation and intracellular staining.
Решение задачи достигается тем, что оценивают процентное содержание в крови лимфоцитов CD4+, имеющих фенотип CD62L-CD27-, по отношению ко всем лимфоцитам CD4+, а не к лимфоцитам, продуцирующим IFN-γ (как в способе Streitz и соавт). Проведенные нами исследования показали, что процент лимфоцитов CD62L-CD27- среди всей популяции лимфоцитов CD4+ зависит от интенсивности деструктивных процессов в легочной ткани и изменяется в процессе лечения туберкулеза. Характер изменения процентного содержания лимфоцитов CD62L-CD27- (снижение, увеличение, отсутствие изменений) зависит от эффективности проводимой терапии и позволяет проводить мониторинг эффективности лечения. Вторым отличием предлагаемого способа является то, что он не требует культивирования клеток и трудоемкой процедуры окрашивания клеток на внутриклеточные цитокины, поскольку основан на определении экспрессии рецепторов CD27 и CD62L на поверхности лимфоцитов CD4+.The solution is achieved by assessing the percentage in the blood of CD4 + lymphocytes having the CD62L phenotype - CD27 - in relation to all CD4 + lymphocytes, and not to lymphocytes producing IFN-γ (as in the method of Streitz et al). Our studies have shown that the percentage of CD62L lymphocytes - CD27 - among the entire population of CD4 + lymphocytes depends on the intensity of destructive processes in the lung tissue and changes during the treatment of tuberculosis. The nature of the change in the percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - (decrease, increase, absence of changes) depends on the effectiveness of the therapy and allows monitoring the effectiveness of treatment. The second difference of the proposed method is that it does not require cell cultivation and the time-consuming procedure of staining cells for intracellular cytokines, because it is based on determining the expression of CD27 and CD62L receptors on the surface of CD4 + lymphocytes.
Изобретение основано на открытии того факта, что процентное содержание в периферической крови лимфоцитов, CD4+, экспрессирующих фенотип CD62L-CD27-, зависит от активности туберкулезного процесса и целостности полостей распада в легочной ткани. Эффекторные лимфоциты CD4 (лимфоциты CD4+CD62L-) образуются из наивных лимфоцитов при стимуляции последних антигеном и костимуляционными сигналами. Начальные стадии дифференцировки эффекторных лимфоцитов происходят за пределами легочной ткани, в лимфоидных органах. На этих стадиях эффекторные лимфоциты CD4 экспрессируют маркер CD27 и имеют фенотип CD62L-CD27+ (Kapina MA, Shepelkova GS, Bogacheva PV, Mischenko VV, Sayles P, Winslow G, Apt ASD, Lyadova IV. CD27lo CD4+ lymphocytes that accumulate in the mouse lung tissue during mycobacterial infection differentiate from CD27hi precursors in situ, produce IFN-γ, and protect the host against TB infection. J. Immunol., 2007, 178:976-985). При попадании в очаг инфекции, находящийся в легочной ткани, эффекторные лимфоциты CD62L-CD27+ теряют экспрессию молекул CD27 и превращаются в эффекторные лимфоциты CD62L- CD27-. Образовавшиеся клетки могут выходить в кровоток, причем интенсивность этого процесса, по-видимому, зависит от степени деструкции легочной ткани в очаге инфекции.The invention is based on the discovery that the percentage of peripheral blood lymphocytes, CD4 + , expressing the CD62L phenotype - CD27 - depends on the activity of the tuberculosis process and the integrity of the decay cavities in the lung tissue. CD4 effector lymphocytes (CD4 + CD62L - lymphocytes) are formed from naive lymphocytes upon stimulation of the latter with antigen and costimulation signals. The initial stages of differentiation of effector lymphocytes occur outside of the lung tissue, in the lymphoid organs. At these stages effector lymphocytes CD4 expressed CD27 marker and have the phenotype of CD62L - CD27 + (Kapina MA, Shepelkova GS, Bogacheva PV, Mischenko VV, Sayles P, Winslow G, Apt ASD, Lyadova IV CD27lo CD4 + lymphocytes that accumulate in the mouse. lung tissue during mycobacterial infection differentiate from CD27hi precursors in situ, produce IFN-γ, and protect the host against TB infection. J. Immunol., 2007, 178: 976-985). When they enter the infection site located in the lung tissue, CD62L - CD27 + effector lymphocytes lose the expression of CD27 molecules and turn into CD62L - CD27 - effector lymphocytes. The resulting cells can enter the bloodstream, and the intensity of this process, apparently, depends on the degree of destruction of the lung tissue in the focus of infection.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом. К 200 мкл крови, стабилизированной гепарином (50 ед./мл), добавляют антитела, специфичные к антигенам CD4, CD62L, CD27, инкубируют полученную смесь при комнатной температуре 15 мин, после чего лизируют эритроциты и смесь отмывают трижды центрифугированием в забуференном физиологическом растворе с добавлением белка. Полученные клетки анализируют на проточном цитофлуориметре и определяют процентное содержание лимфоцитов CD62L-CD27- среди всех лимфоцитов CD4+. Исследование проводят в начале лечения ТБ и несколько раз в процессе лечения.The proposed method is as follows. Antibodies specific for CD4, CD62L, CD27 antigens are added to 200 μl of heparin-stabilized blood (50 units / ml), the resulting mixture is incubated at room temperature for 15 minutes, then red blood cells are lysed, and the mixture is washed three times by centrifugation in buffered saline solution with adding protein. The obtained cells are analyzed on a flow cytometer and the percentage of CD62L lymphocytes - CD27 - is determined among all CD4 + lymphocytes. The study is carried out at the beginning of TB treatment and several times during treatment.
Оценка результатов. У здоровых доноров лимфоциты CD62L-CD27- составляют 5-12% от всех лимфоцитов CD4+ периферической крови.Evaluation of the results. In healthy donors, CD62L lymphocytes - CD27 - make up 5-12% of all peripheral blood CD4 + lymphocytes.
У больных туберкулезом исследуемый показатель колеблется от 3 до 60%. Значения показателя ниже 12% могут наблюдаться как у больных с отсутствием клинических признаков заболевания, так и у больных с выраженными клиническими проявлениями туберкулезной инфекции. При значении исследуемого показателя менее 12% у больных с отсутствием выраженных клинических проявлений туберкулеза (интоксикации, изменений клинического анализа крови и др.) делают вывод о низкой активности туберкулезного процесса и прогнозируют его благоприятное течение. При значении исследуемого показателя менее 12% у больных с выраженными клиническими проявлениями заболевания делают вывод об истощении иммунной системы больного и прогнозируют тяжелое, трудно поддающееся лечению течение инфекции. При значениях процентного содержания лимфоцитов CD62L-CD27- более 12% делают вывод об активном туберкулезном процессе, при значениях выше 25% - о крайне высокой активности туберкулезного процесса.In patients with tuberculosis, the studied indicator ranges from 3 to 60%. Values below 12% can be observed both in patients with no clinical signs of the disease, and in patients with severe clinical manifestations of tuberculosis infection. If the value of the studied indicator is less than 12% in patients with no pronounced clinical manifestations of tuberculosis (intoxication, changes in the clinical analysis of blood, etc.), a conclusion is drawn about the low activity of the tuberculosis process and its favorable course is predicted. If the value of the studied indicator is less than 12% in patients with severe clinical manifestations of the disease, they conclude that the patient’s immune system is depleted and a severe, difficult to treat, course of infection is predicted. At values of the percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - more than 12%, a conclusion is drawn about active tuberculosis process, at values above 25% - about an extremely high activity of the tuberculosis process.
Определение процентного содержания лимфоцитов CD62L-CD27- в процессе лечения туберкулеза позволяет сделать вывод о динамике туберкулезного процесса в легочной ткани. У больных с исходно высоким значением процента лимфоцитов CD62L- CD27- (более 12%) снижение исследуемого показателя до нормальных (менее 12%) значений является признаком закрытия полостей распада в легочной ткани и эффективного лечении туберкулеза. Снижение исходно высокого показателя без достижения нормального значения (процент лимфоцитов CD62L-CD27- остается выше 12%) свидетельствует о положительной динамике туберкулезного процесса, уменьшении деструктивных процессов в легких, но сохранении полостей распада в легочной ткани. Отсутствие изменений в процентном содержании лимфоцитов CD62L-CD27- при его исходно высоком значении свидетельствует об отсутствии динамики патологических изменений в легких, и низкой отвечаемости больного на проводимую терапию. Увеличение процентного содержания лимфоцитов CD62L-CD27- является показателем прогрессирования ТБ и увеличения процессов распада в легочной ткани.Determination of the percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - during the treatment of tuberculosis allows us to conclude the dynamics of the tuberculosis process in the lung tissue. In patients with an initially high percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - (more than 12%), a decrease in the test parameter to normal (less than 12%) values is a sign of closure of decay cavities in the lung tissue and effective treatment of tuberculosis. A decrease in the initially high rate without reaching a normal value (the percentage of CD62L lymphocytes - CD27 - remains above 12%) indicates a positive dynamics of the tuberculosis process, a decrease in destructive processes in the lungs, but preservation of the decay cavities in the lung tissue. The absence of changes in the percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - with its initially high value indicates the absence of dynamics of pathological changes in the lungs, and low patient response to the therapy. An increase in the percentage of CD62L lymphocytes - CD27 - is an indicator of the progression of TB and an increase in the decay processes in the lung tissue.
У больных с исходно низким (менее 12%) значением процентного содержания лимфоцитов CD62L-CD27- нa фоне выраженных клинических признаков туберкулезного процесса лечение может сопровождаться повышением процента лимфоцитов CD62L-CD27-, что является признаком восстановления иммунной системы больного. У больных с исходно низким (менее 12%) значением процентного содержания лимфоцитов CD62L-CD27- и отсутствием выраженных клинических признаков инфекционного процесса значение исследуемого показателя в процессе лечения, как правило, не изменяется.In patients with an initially low (less than 12%) value of the percentage of CD62L lymphocytes - CD27 - against the background of pronounced clinical signs of the tuberculosis process, treatment may be accompanied by an increase in the percentage of CD62L lymphocytes - CD27 - which is a sign of restoration of the patient's immune system. In patients with an initially low (less than 12%) value of the percentage of CD62L lymphocytes - CD27 - and the absence of pronounced clinical signs of an infectious process, the value of the studied parameter during treatment, as a rule, does not change.
Предложенные критерии подобраны на основании клинических исследований 40 больных туберкулезом легких (17 мужчин и 23 женщины) в возрасте от 20 до 70 лет. Обследование больных проводилось в первые дни поступления в стационар. Кровь забирали из вены утром натощак и анализировали согласно описанному способу. На основе полученных результатов, больные были разделены на две основные группы: с исходно низким (нормальным, менее 12%) и высоким (более 12%) процентным содержанием лимфоцитов CD62L-CD27- в периферической крови. Повторное исследование проводили через 2-3 месяца после начала лечения. Ряд больных обследовали также через 5-6 или 12 месяцев после начала лечения. На основании динамики изменения исследуемого показателя, больные с исходно высоким содержанием лимфоцитов CD62L-CD27- были разделены на группы: а) больные с полной нормализацией показателя в процессе лечения (уменьшение процента лимфоцитов CD62L-CD27- до значений менее 12%); б) больные с частичной динамикой (снижение процента CD62L-CD27- по сравнению с исходным, но без достижения нормальных значений); в) больные без динамики (отсутствие изменений исследуемого показателя); г) больные с отрицательной динамикой (возрастание процентного содержания лимфоцитов CD62L-CD27- по сравнению с исходным). Больные с исходно низким содержанием лимфоцитов CD62L-CD27- были разделены на две группы: больные с выраженными признаками туберкулезной интоксикации и больные без признаков туберкулезной интоксикации. Для всех больных двойным слепым методом собирали данные рентгенологических исследований о динамике туберкулезного процесса в легких и анализировали зависимость между динамикой туберкулезного процесса, оцененной рентгенологическими методами, и динамикой процентного содержания лимфоцитов CD62L-CD27-.The proposed criteria are selected on the basis of clinical studies of 40 patients with pulmonary tuberculosis (17 men and 23 women) aged 20 to 70 years. The examination of patients was carried out in the first days of admission to the hospital. Blood was taken from a vein in the morning on an empty stomach and analyzed according to the described method. Based on the results, patients were divided into two main groups: with an initially low (normal, less than 12%) and high (more than 12%) percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - in the peripheral blood. A second study was carried out 2-3 months after the start of treatment. A number of patients were also examined 5-6 or 12 months after the start of treatment. Based on the dynamics of the investigated parameter, patients with high baseline lymphocyte CD62L - CD27 - were divided into groups: a) patients with complete normalization of the index in the treatment (reduction in the percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - to less than 12%); b) patients with partial dynamics (reduction in the percentage of CD62L - CD27 - compared with the original, but without reaching normal values); c) patients without dynamics (absence of changes in the studied parameter); d) patients with negative dynamics (increase in the percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - compared with the original). Patients with an initially low lymphocyte count CD62L - CD27 - were divided into two groups: patients with severe signs of tuberculosis intoxication and patients without signs of tuberculosis intoxication. For all patients with a double-blind method, X-ray data on the dynamics of the tuberculosis process in the lungs were collected and the relationship between the dynamics of the tuberculosis process evaluated by X-ray methods and the dynamics of the percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - was analyzed.
ПримерыExamples
Пример 1. Больной А. Диагноз: кавернозный туберкулез в фазе инфильтрации и обсеменения, МБТ-. Процент лимфоцитов CD62L-CD27-: в начале лечения - 43%. Через 2 месяца после начала лечения - 19% (положительная динамика). Результаты рентгенологического обследования и компьютерной томографии. При поступлении в клинику: в верхней доле правого легкого определяется крупная каверна с неравномерно утолщенными стенками и более мелкие полости распада, очаги обсеменения в окружающей легочной ткани. Через 2.5 месяца после начала лечения - положительная рентгенологическая динамика в виде уменьшения объема каверны в два раза, частичного рассасывания и уплотнения очагов.Example 1. Patient A. Diagnosis: cavernous tuberculosis in the phase of infiltration and insemination, MBT-. Percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - : at the beginning of treatment - 43%. 2 months after the start of treatment, 19% (positive dynamics). The results of x-ray examination and computed tomography. Upon admission to the clinic: in the upper lobe of the right lung, a large cavity with unevenly thickened walls and smaller decay cavities, foci of seeding in the surrounding lung tissue is determined. 2.5 months after the start of treatment, there was a positive radiological dynamics in the form of a decrease in the volume of the cavity by half, partial resorption and compaction of the foci.
Пример 2. Больная Б. Диагноз: инфильтративный туберкулез верхней доли правого легкого в фазе распада и обсеменения. Процент лимфоцитов CD62L-CD27-: в начале лечения - 17%. Через 3,5 месяца после начала лечения - 12% (нормализация). Результаты рентгенологического обследования и компьютерной томографии. На момент поступления в клинику: наличие полости распада размеров 2×1,8 см с инфильтративными стенками и множества полиморфных очагов. Через 3,5 месяца после начала лечения: положительная динамика в виде исчезновения полостей распада, частичного рассасывания инфильтративных и очаговых изменений.Example 2. Patient B. Diagnosis: infiltrative tuberculosis of the upper lobe of the right lung in the phase of decay and seeding. Percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - : at the beginning of treatment - 17%. After 3.5 months after the start of treatment - 12% (normalization). The results of x-ray examination and computed tomography. At the time of admission to the clinic: the presence of a decay cavity of size 2 × 1.8 cm with infiltrative walls and many polymorphic foci. 3.5 months after the start of treatment: positive dynamics in the form of the disappearance of decay cavities, partial resorption of infiltrative and focal changes.
Пример 3. Больной В. Диагноз ФКТ легких в фазе инфильтрации и обсеменения. Процент лимфоцитов CD62L-CD27-: в начале лечения - 18%. Через 2 месяца после начала лечения - 18%) (без динамики). Результаты рентгенологического обследования и компьютерной томографии. При поступлении в клинику: в левом легком - система разновеликих полостей, в верхней доли правого легкого - средних размеров толстостенные каверны, множество полиморфных разнокалиберных очагов с нечеткими контурами. Через 2 месяца после лечения - отсутствие рентгенологической динамики слева, некоторая положительная динамика справа в виде частичного рассасывания и уплотнения очагов и инфильтративных изменений с сохранением полостей распада.Example 3. Patient B. The diagnosis of pulmonary FCT in the phase of infiltration and contamination. Percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - : at the beginning of treatment - 18%. 2 months after the start of treatment - 18%) (without dynamics). The results of x-ray examination and computed tomography. Upon admission to the clinic: in the left lung - a system of different-sized cavities, in the upper lobe of the right lung - medium-sized thick-walled caverns, many polymorphic different-sized lesions with fuzzy contours. 2 months after treatment, there is a lack of radiological dynamics on the left, some positive dynamics on the right in the form of partial resorption and compaction of foci and infiltrative changes with preservation of decay cavities.
Пример 4. Больной М. Диагноз: инфильтративный туберкулез верхних долей легких в фазе распада и обсеменения. Процент лимфоцитов CD62L-CD27-: в начале лечения - 12,5%, через 2 месяца после начала лечения - 13%. Через 9 месяцев - 27% (резко выраженная отрицательная динамика). Результаты рентгенологического обследования и компьютерной томографии. При поступлении в клинику: инфильтрация верхних долей легкого без четких контуров с наличием полостей от 0,5 до 2 см, множество полиморфных очагов в окружающей легочной ткани. Через 2 месяца после начала лечения - уменьшение полостей распада слева, частичное рассасывания инфильтративных и очаговых изменений справа (частичная положительная динамика). Через 9 месяцев - обострение процесса, на компьютерной томографии - отрицательная динамика в виде увеличения полости деструкции слева до размеров 1,5-1,9 см, появления дополнительных очагов отсева в обоих легких.Example 4. Patient M. Diagnosis: infiltrative tuberculosis of the upper lobes of the lungs in the phase of decay and seeding. Percentage of lymphocytes CD62L - CD27 - : at the beginning of treatment - 12.5%, 2 months after the start of treatment - 13%. After 9 months - 27% (pronounced negative dynamics). The results of x-ray examination and computed tomography. Upon admission to the clinic: infiltration of the upper lobes of the lung without clear contours with the presence of cavities from 0.5 to 2 cm, many polymorphic foci in the surrounding lung tissue. 2 months after the start of treatment - a decrease in decay cavities on the left, partial resorption of infiltrative and focal changes on the right (partial positive dynamics). After 9 months - an aggravation of the process, on computed tomography - negative dynamics in the form of an increase in the destruction cavity on the left to the size of 1.5-1.9 cm, the appearance of additional foci of screening in both lungs.
Способ, предлагаемый в настоящем изобретении, отличается от других существующих методов тем, что: а) основан на анализе небольших образцов периферической крови; б) позволяет оценивать динамику патологических процессов в легочной ткани, прогрессирование заболевания, эффективность его лечения; в) не требует культивирования клеток, стерильных условий и длительного времени для получения результатов (исследование проводится в течение одного дня).The method proposed in the present invention differs from other existing methods in that: a) based on the analysis of small samples of peripheral blood; b) allows you to evaluate the dynamics of pathological processes in the lung tissue, the progression of the disease, the effectiveness of its treatment; c) does not require cell cultivation, sterile conditions and a long time to obtain results (the study is carried out within one day).
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010150484/15A RU2447445C1 (en) | 2010-12-09 | 2010-12-09 | Method for evaluating clinical effectiveness and dynamics of destructive changes in pulmonary tissue accompanying pulmonary tuberculosis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010150484/15A RU2447445C1 (en) | 2010-12-09 | 2010-12-09 | Method for evaluating clinical effectiveness and dynamics of destructive changes in pulmonary tissue accompanying pulmonary tuberculosis |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2447445C1 true RU2447445C1 (en) | 2012-04-10 |
Family
ID=46031786
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010150484/15A RU2447445C1 (en) | 2010-12-09 | 2010-12-09 | Method for evaluating clinical effectiveness and dynamics of destructive changes in pulmonary tissue accompanying pulmonary tuberculosis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2447445C1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2577723C2 (en) * | 2014-07-10 | 2016-03-20 | государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Омская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО ОмГМА Минздрава России) | Method of evaluating the effectiveness of anti-tuberculosis therapy in patients with genital tuberculosis |
| RU2625649C2 (en) * | 2015-08-10 | 2017-07-17 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for correction of treatment of patients with tuberculosis without bacterioexcretion by x-ray examination data |
| EP2962100B1 (en) * | 2013-02-28 | 2021-07-28 | Caprion Proteomics Inc. | Tuberculosis biomarkers and uses thereof |
| RU2831888C1 (en) * | 2024-03-30 | 2024-12-16 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза" | Method for monitoring serum concentrations of bedaquiline for assessing effectiveness of anti-tuberculosis chemotherapy |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| UA13174U (en) * | 2005-10-03 | 2006-03-15 | Kyiv Shupyk Medical Academy Of | Method for determining the efficiency of treating patients with tuberculosis |
| RU2398236C1 (en) * | 2009-04-10 | 2010-08-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Астраханская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО АГМА Росздрава) | Method of predicting reparation process in pulmonary tissue in case of pulmonary tuberculosis in children |
-
2010
- 2010-12-09 RU RU2010150484/15A patent/RU2447445C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| UA13174U (en) * | 2005-10-03 | 2006-03-15 | Kyiv Shupyk Medical Academy Of | Method for determining the efficiency of treating patients with tuberculosis |
| RU2398236C1 (en) * | 2009-04-10 | 2010-08-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Астраханская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО АГМА Росздрава) | Method of predicting reparation process in pulmonary tissue in case of pulmonary tuberculosis in children |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| STREITZ М. et al. Loss of Receptor on Tuberculin-Reactive T-Cells Marks Active Pulmonary Tuberculosis. PLoS ONE 2(8):e735. doi:10.1371/journal.pone.0000735. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2962100B1 (en) * | 2013-02-28 | 2021-07-28 | Caprion Proteomics Inc. | Tuberculosis biomarkers and uses thereof |
| RU2577723C2 (en) * | 2014-07-10 | 2016-03-20 | государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Омская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО ОмГМА Минздрава России) | Method of evaluating the effectiveness of anti-tuberculosis therapy in patients with genital tuberculosis |
| RU2625649C2 (en) * | 2015-08-10 | 2017-07-17 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for correction of treatment of patients with tuberculosis without bacterioexcretion by x-ray examination data |
| RU2831888C1 (en) * | 2024-03-30 | 2024-12-16 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза" | Method for monitoring serum concentrations of bedaquiline for assessing effectiveness of anti-tuberculosis chemotherapy |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Dias Jr et al. | Patients with endometriosis of the rectosigmoid have a higher percentage of natural killer cells in peripheral blood | |
| Washington et al. | Detection of significant bacteriuria by microscopic examination of urine | |
| CN108845129B (en) | Application of a biomarker for active tuberculosis disease | |
| RU2480765C1 (en) | Method of estimating clinical effectiveness in pulmonary tuberculosis | |
| RU2447445C1 (en) | Method for evaluating clinical effectiveness and dynamics of destructive changes in pulmonary tissue accompanying pulmonary tuberculosis | |
| Watkin et al. | The microbial diagnosis of infective endocarditis | |
| Affronti et al. | Serodiagnostic test for tuberculosis | |
| Spink et al. | Diagnostic criteria for human brucellosis: Report No. 2 of the national research council, committee on public health aspects of brucellosis | |
| WO2022194033A1 (en) | Peripheral blood tcr marker for diffuse large b-cell lymphoma, and detection kit and use therefor | |
| US5972594A (en) | Method for screening for reproductive tract inflammation and preeclampsia using neutrophil defensins | |
| Prasad et al. | Childhood bacterial meningitis and usefulness of C-reactive protein | |
| RU2430365C1 (en) | Method of estimating microbiocoenosis of uterus cavity in women with endometrium polyps in postmenopausal period | |
| Kreutzmann et al. | A Case Report of Oculoglandular Tularemia—Chasing Zebras Among Potential Diagnoses | |
| ANDERSON et al. | Haemophilus influenzae type b unsuspected bacteremia | |
| Triyani et al. | The relation of acid fast bacilli with Ziehl Neelsen staining and histopathologic examination of biopsy specimens in extrapulmonary TB suspected patients | |
| RU2488828C1 (en) | Method of assessing tuberculosis process activity and degree of pulmonary tissue destruction | |
| RU2852913C1 (en) | Method for assessing microbiological contamination of surgical wounds in children | |
| RU2807381C1 (en) | Method for differential diagnosis of bronchial asthma phenotypes | |
| Ørbæk et al. | Cerebrospinal fluid levels of the macrophage-specific biomarker sCD163 are diagnostic for Lyme neuroborreliosis: An observational cohort study | |
| RU2842283C1 (en) | Method for preparing samples of bronchoalveolar washings for analysis by mass spectrometry of microbial markers | |
| RU2740362C1 (en) | Diagnostic technique for severity of chronic pharyngitis | |
| RU2791489C1 (en) | Method for determining reference values of indicators of microorganisms in the prostate gland, investigated using chromato-mass spectrometry method | |
| CN115389766B (en) | Marker for diagnosing whether neuroblastoma is subjected to bone marrow infiltration and application thereof | |
| JP6108570B2 (en) | Rapid allergy test method | |
| RU2602697C1 (en) | Method of digestive tract microbiota condition evaluating in adolescents of 14-18 years old by oral fluid microflora |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20131210 |