[go: up one dir, main page]

RU2441000C2 - 4-(1-(4-(4-methoxyphenylthio)-2,5-dioxo-2,5-dihydro-1h-pyrro-3-yl)-1h-indol-3-yl)butylcarbamimidothioate and method for using it - Google Patents

4-(1-(4-(4-methoxyphenylthio)-2,5-dioxo-2,5-dihydro-1h-pyrro-3-yl)-1h-indol-3-yl)butylcarbamimidothioate and method for using it Download PDF

Info

Publication number
RU2441000C2
RU2441000C2 RU2009143963/04A RU2009143963A RU2441000C2 RU 2441000 C2 RU2441000 C2 RU 2441000C2 RU 2009143963/04 A RU2009143963/04 A RU 2009143963/04A RU 2009143963 A RU2009143963 A RU 2009143963A RU 2441000 C2 RU2441000 C2 RU 2441000C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
indol
methoxyphenylthio
dioxo
dihydro
pyrro
Prior art date
Application number
RU2009143963/04A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2009143963A (en
Inventor
Гермес Григорьевич Чилов (RU)
Гермес Григорьевич Чилов
Олег Валентинович Строганов (RU)
Олег Валентинович Строганов
Виктор Сергеевич Стройлов (RU)
Виктор Сергеевич Стройлов
Федор Николаевич Новиков (RU)
Федор Николаевич Новиков
Александр Альбертович Штиль (RU)
Александр Альбертович Штиль
Валерия Александровна Глазунова (RU)
Валерия Александровна Глазунова
Элеонора Рафаиловна Переверзева (RU)
Элеонора Рафаиловна Переверзева
Дмитрий Александрович Бодягин (RU)
Дмитрий Александрович Бодягин
Иван Дмитриевич Трещалин (RU)
Иван Дмитриевич Трещалин
Мария Николаевна Преображенская (RU)
Мария Николаевна ПРЕОБРАЖЕНСКАЯ
Сергей Александрович Лакатош (RU)
Сергей Александрович Лакатош
Александр Юрьевич Симонов (RU)
Александр Юрьевич Симонов
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "Молекулярные Технологии"
Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "Молекулярные Технологии", Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "Молекулярные Технологии"
Priority to RU2009143963/04A priority Critical patent/RU2441000C2/en
Publication of RU2009143963A publication Critical patent/RU2009143963A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2441000C2 publication Critical patent/RU2441000C2/en

Links

Images

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FIELD: medicine, pharmaceutics.
SUBSTANCE: invention refers to a new compound 4-(1-(4-(4-methoxyphenylthio)-2,5-dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrro-3-yl)-1H-indol-3-yl)butyl carbamimidothioate (the compound "ЛХТА-1833") which can be used in therapy of colon cancer, breast cancer, melanoma, leucosis.
EFFECT: preparing the new compounds for treating cancer.
2 cl, 2 tbl, 3 dwg, 1 ex

Description

Область техники, к которой относится изобретениеFIELD OF THE INVENTION

Изобретение относится к новому химическому соединению, а именно 4-(1-(4-(4-метоксифенилтио)-2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пирро-3-ил)-1H-индол-3-ил)бутил карбамимидотиоату, способу его применения в терапии рака толстой кишки, рака молочной железы, меланомы, лейкоза.The invention relates to a new chemical compound, namely 4- (1- (4- (4-methoxyphenylthio) -2,5-dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrro-3-yl) -1H-indol-3- il) butyl carbamimidothioate, a method for its use in the treatment of colon cancer, breast cancer, melanoma, leukemia.

Уровень техникиState of the art

Онкологические заболевания являются одной из основных причин смертности, уступая в этом отношении лишь сердечно-сосудистым заболеваниям. К сожалению, существующие химиотерапевтические подходы во многих случаях неэффективны и обладают серьезными побочными эффектами. По этой причине поиск новых противоопухолевых препаратов является актуальной задачей.Oncological diseases are one of the main causes of death, second only to cardiovascular diseases in this regard. Unfortunately, the existing chemotherapeutic approaches are in many cases ineffective and have serious side effects. For this reason, the search for new anticancer drugs is an urgent task.

Одним из наиболее перспективных современных направлений в противоопухолевой терапии является блокирование сигнальных событий в опухолевой клетке, регулируемых серин-треониновыми протеинкиназами. Ингибирование указанных протеинкиназ нарушает пролиферацию, смену фаз клеточного цикла (включая митоз) и выживание при экзогенных токсических воздействиях, приводя к гибели клетки.One of the most promising modern directions in antitumor therapy is the blocking of signaling events in the tumor cell regulated by serine-threonine protein kinases. Inhibition of these protein kinases disrupts proliferation, phase change of the cell cycle (including mitosis) and survival under exogenous toxic effects, leading to cell death.

Среди серин-треониновых протеинкиназ, являющихся перспективными мишенями онкологических заболеваний, можно выделить следующие ферменты. Во-первых, это протеинкиназа С альфа (РКСα), которая играет важнейшую роль в механизмах ответа клетки на многие виды стресса, в том числе на противоопухолевые препараты (Sabbah M, Emami S, Redeuilh G, Julien S, Pruvost G, Zimber A, Ouelaa R, Bracke M, De Wever O, Gespach C. Molecular signature and therapeutic perspective of the epithelial-to-mesenchymal transitions in epithelial cancers. Drug Resist. Updat. 2008.11 (4-5):123-151). Во-вторых, это циклин-зависимые киназы 2 и 4 (CDK2 и CDK4), являющиеся регуляторами клеточного цикла (Johansson M, Persson JL. Cancer therapy: targeting cell cycle regulators. Anticancer Agents Med Chem. 2008. 8(7):723-731). В-третьих, это протоонкогенная серин-треониновая киназа РIМ-1, повышенная активность которой приводит к злокачественной трансформации нормальных клеток (Mumenthaler SM, Ng PY, Hodge A, Bearss D, Berk G, Kanekal S, Redkar S, Taverna P, Agus DB, Jain A. Pharmacologic inhibition of Pim kinases alters prostate cancer cell growth and resensitizes chemoresistant cells to taxanes. Mol Cancer Ther. 2009 Oct; 8(10):2882-93). Известен ряд химических соединений, принадлежащих к классу индолилмалеинимидов, более точно - производных бис(индол-3-ил)малеинимида, таких как BIS-I, BIS-II, BIS-IV, BIS-VI, BIS-VII (фиг.1), являющихся ингибиторами серин-треониновых протеинкиназ. Исследованы и способы их получения (Davis et al. J. Med.Chem. 1992, v.35, N.1, p.177-184, US 6133452, US 5545636, US 2005004201, EP 0657458 A1, WO 02/38561 A1) и противоопухолевая. Вместе с тем, противоопухолевая активность данных соединений (Prеtе SP, Rossi L, Correale РР, Turriziani M, Baier S, Tamburrelli G, De Vecchis L, Bonmassar E, Aquino A. Combined effects of protein kinase inhibitors and 5-fluorouracil on CEA expression in human colon cancer cells. Pharmacol Res. 2005 Aug; 52(2): 167-73; Robey RW, Shukla S, Steadman K, Obrzut T, Finley EM, Ambudkar SV, Bates SE. Inhibition of ABCG2-mediated transport by protein kinase inhibitors with a bisindolylmaleimide or indolocarbazole structure. Mol Cancer Ther. 2007 Jun;6(6):1877-85), а также их известных на сегодняшний день аналогов (Shchekotikhin А.Е., Dezhenkova L.G., Susova O.Yu., Glazunova V.A., Luzikov Yu.N., Sinkevich Yu.N., Buyanov V.N., Shtil AA, Preobrazhenskaya M.N. Naphthoindole-based analogues of tryptophan and tryptamine: synthesis and cytotoxic properties. Bioorganic and Medicinal Chemistry, 2007, 15, 2651-2659) недостаточно высока, для того чтобы применять их в качестве самостоятельных химиотерапевтических препаратов при лечении рака толстой кишки, рака молочной железы, меланомы, лейкоза и других онкологических заболеваний. Вместе с тем, класс индолилмалеинимидов, благодаря своему структурному разнообразию, является перспективным для поиска новых соединений с повышенной противоопухолевой активностью и, возможно, также с пониженной общей токсичностью.Among the serine-threonine protein kinases, which are promising targets for cancer, the following enzymes can be distinguished. Firstly, it is protein kinase C alpha (PKCα), which plays a crucial role in the mechanisms of cell response to many types of stress, including antitumor drugs (Sabbah M, Emami S, Redeuilh G, Julien S, Pruvost G, Zimber A, Ouelaa R, Bracke M, De Wever O, Gespach C. Molecular signature and therapeutic perspective of the epithelial-to-mesenchymal transitions in epithelial cancers. Drug Resist. Updat. 2008.11 (4-5): 123-151). Secondly, these are cyclin-dependent kinases 2 and 4 (CDK2 and CDK4), which are cell cycle regulators (Johansson M, Persson JL. Cancer therapy: targeting cell cycle regulators. Anticancer Agents Med Chem. 2008. 8 (7): 723 -731). Thirdly, it is the proto-oncogenic serine-threonine kinase PIM-1, the increased activity of which leads to malignant transformation of normal cells (Mumenthaler SM, Ng PY, Hodge A, Bearss D, Berk G, Kanekal S, Redkar S, Taverna P, Agus DB , Jain A. Pharmacologic inhibition of Pim kinases alters prostate cancer cell growth and resensitizes chemoresistant cells to taxanes. Mol Cancer Ther. 2009 Oct; 8 (10): 2882-93). A number of chemical compounds are known that belong to the class of indolyl maleiminimides, more precisely, derivatives of bis (indol-3-yl) maleimide, such as BIS-I, BIS-II, BIS-IV, BIS-VI, BIS-VII (figure 1) inhibitors of serine-threonine protein kinases. Investigated and methods for their preparation (Davis et al. J. Med. Chem. 1992, v. 35, N.1, p. 177-184, US 6133452, US 5545636, US 2005004201, EP 0657458 A1, WO 02/38561 A1 ) and antitumor. At the same time, the antitumor activity of these compounds (Prote SP, Rossi L, Correale PP, Turriziani M, Baier S, Tamburrelli G, De Vecchis L, Bonmassar E, Aquino A. Combined effects of protein kinase inhibitors and 5-fluorouracil on CEA expression in human colon cancer cells Pharmacol Res. 2005 Aug; 52 (2): 167-73; Robey RW, Shukla S, Steadman K, Obrzut T, Finley EM, Ambudkar SV, Bates SE. Inhibition of ABCG2-mediated transport by protein kinase inhibitors with a bisindolylmaleimide or indolocarbazole structure. Mol Cancer Ther. 2007 Jun; 6 (6): 1877-85), as well as their currently known analogues (Shchekotikhin A.E., Dezhenkova LG, Susova O.Yu., Glazunova VA, Luzikov Yu.N., Sinkevich Yu.N., Buyanov VN, Shtil AA, Preobrazhenskaya MN Naphthoindole-based analog of tryptophan and tryptamine: synthesis and cytotoxic properties. Bioorganic and Medicinal Chemistry, 2007, 15 , 2651-2659) is not high enough to use them as independent chemotherapeutic drugs in the treatment of colon cancer, breast cancer, melanoma, leukemia and other oncological diseases. At the same time, the class of indolyl maleiminimides, due to its structural diversity, is promising for the search for new compounds with increased antitumor activity and, possibly, also with reduced general toxicity.

Решение подобной задачи видится в обогащении традиционных методов органического синтеза и медицинской химии современными методами молекулярного моделирования, позволяющими моделировать взаимодействие новых, еще не синтезированных соединений с заданными белками (например, выбранными серин-треониновыми киназами).A solution to this problem is seen in the enrichment of traditional methods of organic synthesis and medical chemistry with modern molecular modeling methods that allow modeling the interaction of new, not yet synthesized compounds with given proteins (for example, selected serine-threonine kinases).

Раскрытие изобретенияDisclosure of invention

Настоящее изобретение представляет собой новое химическое соединение ЛХТА-1833 (4-(1-(4-(4-метоксифенилтио)-2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пирро-3-ил)-1H-индол-3-ил)бутил карбамимидотиоат), структурная формула которого представлена на фиг.2.The present invention is a new chemical compound LHTA-1833 (4- (1- (4- (4-methoxyphenylthio) -2,5-dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrro-3-yl) -1H-indole- 3-yl) butyl carbamimidothioate), the structural formula of which is shown in Fig.2.

Соединение ЛХТА-1833 было нйдено с помощью методов молекулярного моделирования, проводившихся по следующей схеме. Сначала генерировалась виртуальная библиотека различных (индол-1-ил)малеинимидов, содержащих различные заместители в 3-м положении индольного фрагмента, а также различные заместители при втором некарбонильном атоме углерода малеинимида. Далее в полученной библиотеке с помощью методов молекулярного моделирования отыскивались соединения, которые, по данным расчетов, демонстрировали ингибирование ферментов PKCα, CDK2, CDK4, PIM-1. Далее, на основе структур отобранных соединений генерировалась новая виртуальная библиотека соединений, которые, по мнению авторов изобретения, должны были обладать повышенным сродством к обозначенным ферментам. Процедура моделирования и конструирования повторялась до тех пор, пока не были отобраны удовлетворительные на взгляд авторов изобретения соединения. Далее, отобранные по результатам молекулярного моделирования соединения синтезировались и испытывались в in vitro моделях опухолевых заболеваний. В проведенных in vitro испытаниях соединение ЛХТА-1833 продемонстрировало высокую противоопухолевую активность. Таким образом, новое соединение ЛХТА-1833, раскрываемое в настоящем патенте, может применяться в терапии рака толстой кишки, рака молочной железы, меланомы, лейкоза и других онкологических заболеваний, в патогенезе которых участвуют серин-треониновые протеинкиназы, в частности PKCα, CDK2, CDK4, PIM-1.The compound LHTA-1833 was found using molecular modeling methods carried out according to the following scheme. First, a virtual library of various (indol-1-yl) maleimides was generated containing various substituents at the 3-position of the indole fragment, as well as various substituents at the second non-carbonyl carbon atom of maleimide. Further, in the obtained library, using molecular modeling methods, compounds were found that, according to the calculations, showed inhibition of PKCα, CDK2, CDK4, PIM-1 enzymes. Further, based on the structures of the selected compounds, a new virtual library of compounds was generated, which, according to the inventors, should have an increased affinity for the indicated enzymes. The modeling and construction procedure was repeated until satisfactory compounds were selected in the opinion of the inventors. Further, compounds selected according to the results of molecular modeling were synthesized and tested in in vitro models of tumor diseases. In in vitro tests, compound LHTA-1833 showed high antitumor activity. Thus, the new compound LHTA-1833 disclosed in the present patent can be used in the treatment of colon cancer, breast cancer, melanoma, leukemia and other oncological diseases, in the pathogenesis of which serine-threonine protein kinases, in particular PKCα, CDK2, CDK4, are involved , PIM-1.

Новизна раскрываемого изобретения состоит в том, что в сравнении с известными индолилмаиеинимидами соединение ЛХТА-1833 имеет ряд структурных особенностей, повышающих его сродство с целевыми ферментами (PKCα, CDK2, CDK4, PIM-1), и, следовательно, повышающих его противоопухолевую активность. А именно: изменен способ соединения индольного ядра с малеимидным фрагментом, а другой остаток индола, присутствующий в известных бис(индол-3-ил)малеинимидах, замещен на 4-метокситиофенильный остаток. В оставшемся индольном фрагменте в 3-м положении введен фрагмент бутил карбамимидотиоата. Эти модификации критичны для проявления противоопухолевой активности ЛХТА-1833.The novelty of the disclosed invention lies in the fact that, in comparison with the known indolylmaine imides, the LHTA-1833 compound has a number of structural features that increase its affinity for the target enzymes (PKCα, CDK2, CDK4, PIM-1), and therefore increase its antitumor activity. Namely: the method of connecting the indole core with a maleimide fragment has been changed, and the other indole residue present in the known bis (indol-3-yl) maleinimides has been replaced by a 4-methoxythiophenyl residue. In the remaining indole fragment at the 3rd position, a fragment of butyl carbamimidothioate was introduced. These modifications are critical for the manifestation of the antitumor activity of LHTA-1833.

Осуществление изобретенияThe implementation of the invention

1. Синтез 3-(3-(4-гидроксибутил)-1H-индол-1-ил)-4-(4-метоксифенилтио)-1H-пиррол-2,5-диона (3). 3-Бромо-4-(3-(4-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)бутил)-1H-индол-1-ил)-1H-пиррол-2,5-дион (1 г, 2.1 ммоль) растворяют в ДМФА (5 мл), добавляют триэтиламин (0,35 мл) и 4-метокситиофенол (300 мг). Реакционную смесь перемешивают 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом (50 мл), промывают 0,1н HCl (2×30 мл), водой (2×30 мл), сушат и упаривают. Полученный продукт конденсации 2 используют без очистки на следующей стадии. Продукт 2 растворяют в уксусной кислоте (10 мл), добавляют воду (5 мл) и тетрагидрофуран (3 мл), нагревают до 50°С при перемешивании в течение 2-3 ч. Реакционную смесь упаривают на роторном испарителе, остаток растворяют в этилацетате (50 мл), раствор промывают раствором бикарбоната натрия (2×30 мл), сушат и упаривают. Остаток хроматографируют на силикагеле (н-гептан-этилацетат 2:1). Фракции, содержащие целевое вещество, упаривают. Получают 3-(3-(4-гидроксибутил)-1H-индол-1-ил)-4-(4-метоксифенилтио)-1H-пиррол-2,5-дион (3) с выходом 71% в виде аморфного вещества оранжевого цвета.1. Synthesis of 3- (3- (4-hydroxybutyl) -1H-indol-1-yl) -4- (4-methoxyphenylthio) -1H-pyrrole-2,5-dione (3). 3-Bromo-4- (3- (4- (tetrahydro-2H-pyran-2-yloxy) butyl) -1H-indol-1-yl) -1H-pyrrole-2,5-dione (1 g, 2.1 mmol ) is dissolved in DMF (5 ml), triethylamine (0.35 ml) and 4-methoxythiophenol (300 mg) are added. The reaction mixture was stirred for 1 h at room temperature. The reaction mixture was diluted with ethyl acetate (50 ml), washed with 0.1 N HCl (2 × 30 ml), water (2 × 30 ml), dried and evaporated. The resulting condensation product 2 is used without purification in the next step. Product 2 was dissolved in acetic acid (10 ml), water (5 ml) and tetrahydrofuran (3 ml) were added, heated to 50 ° C with stirring for 2-3 hours. The reaction mixture was evaporated on a rotary evaporator, the residue was dissolved in ethyl acetate ( 50 ml), the solution was washed with sodium bicarbonate solution (2 × 30 ml), dried and evaporated. The residue was chromatographed on silica gel (n-heptane-ethyl acetate 2: 1). The fractions containing the target substance are evaporated. 3- (3- (4-hydroxybutyl) -1H-indol-1-yl) -4- (4-methoxyphenylthio) -1H-pyrrol-2,5-dione (3) is obtained in 71% yield as an orange amorphous substance colors.

2. Синтез 4-(1-(4-(4-метоксифенилтио)-2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-3-ил)-1H-индол-3-ил)бутил метансульфоната (4). К раствору 3 в ТГФ добавляют триэтиламин (1 эквивалент), прикапывают раствор MsCl (метансульфонилхлорида) (1 эквивалент) в ТГФ при перемешивании в течение 2-х часов. Затем разбавляют EtOAc и промывают водой, насыщенным водным раствором NaCl, сушат и упаривают. Продукт отделяют методом колоночной хроматографии в системе (н-Гептан: EtOAc, 5:1). Остаток хроматографируют на силикагеле (н-гептан-этилацетат 2:1). Фракции, содержащие целевое вещество, упаривают. Получают 4 с выходом 80% в виде аморфного вещества оранжевого цвета.2. Synthesis of 4- (1- (4- (4-methoxyphenylthio) -2,5-dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrrol-3-yl) -1H-indol-3-yl) butyl methanesulfonate (4 ) Triethylamine (1 equivalent) was added to solution 3 in THF, a solution of MsCl (methanesulfonyl chloride) (1 equivalent) in THF was added dropwise with stirring for 2 hours. It was then diluted with EtOAc and washed with water, saturated aqueous NaCl, dried and evaporated. The product was separated by column chromatography in a system (n-Heptane: EtOAc, 5: 1). The residue was chromatographed on silica gel (n-heptane-ethyl acetate 2: 1). The fractions containing the target substance are evaporated. Get 4 in 80% yield as an orange amorphous.

3. Синтез ЛХТА-1833 4-(1-(4-(4-метоксифенилтио)-2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пирро-3-ил)-1H-индол-3-ил)бутил карбамимидотиоата (5). Мезилат 4 (200 мг, 0,4 ммоль) растворяют в ТГФ (10 мл) добавляют тиомочевину (50 мг) и кипятят при перемешивании 6 ч, охлаждают до комнатной температуры и разбавляют н-бутанолом, промывают водой, насыщенным водным раствором NaCl. Сушат и упаривают. Продукт отделяют методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюент-этилацетат. Фракции, содержащие целевое вещество, упаривают. Получают 5 в виде аморфного вещества оранжевого цвета (105 мг, 0.22 ммоль, 55%).3. Synthesis of LHTA-1833 4- (1- (4- (4-methoxyphenylthio) -2,5-dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrro-3-yl) -1H-indol-3-yl) butyl carbamimidothioate (5). Mesylate 4 (200 mg, 0.4 mmol) was dissolved in THF (10 ml), thiourea (50 mg) was added and boiled for 6 hours with stirring, cooled to room temperature and diluted with n-butanol, washed with water and saturated aqueous NaCl. Dry and evaporate. The product was separated by column chromatography on silica gel, eluent-ethyl acetate. The fractions containing the target substance are evaporated. Get 5 in the form of an amorphous substance of an orange color (105 mg, 0.22 mmol, 55%).

Таблица 1.Table 1. Физико-химические характеристики промежуточных продуктов синтеза и целевего вещества ЛХТА-1833.Physico-chemical characteristics of the intermediate synthesis products and the target substance LHTA-1833. No. ТСХ, Rf TLC, R f ВЭЖХ, %, R,HPLC,%, R, 1H-ЯМР, δ, м.д. 1 H-NMR, δ, ppm 13C-ЯМР, δ, м.д. 13 C-NMR, δ, ppm 33 0.30 (н-гептан - EtOAc, 3:1)0.30 (n-heptane - EtOAc, 3: 1) -- 1.49-1.55 (2Н, м), 1.57-1.62 (2Н, м), 2.53 (2Н, т, J 7.10), 3.47 (2Н, т, J 6.10), 3.56 (3Н, с), 4.44 (1Н, с), 6.35 (2Н, д, J 8.80), 6.91 (2Н, д, J 9.00), 6.95 (1Н, с), 7.06 (1Н, т, J 7.80), 7.17 (1Н, т, J 7.10), 7,23 (1Н, д, J 8.10), 7,36 (1Н, д, J 7.70), 11.42 (1Н, с)1.49-1.55 (2Н, m), 1.57-1.62 (2Н, m), 2.53 (2Н, t, J 7.10), 3.47 (2Н, t, J 6.10), 3.56 (3Н, s), 4.44 (1Н, s ), 6.35 (2H, d, J 8.80), 6.91 (2H, d, J 9.00), 6.95 (1H, s), 7.06 (1H, t, J 7.80), 7.17 (1H, t, J 7.10), 7 23 (1H, d, J 8.10), 7.36 (1H, d, J 7.70), 11.42 (1H, s) 24.1, 25.7, 32.5, 55.0, 60.5, 112.5, 113.7 (2С), 117.3, 118.5, 119.2,
120.5, 122.1, 124.3, 126.8, 128.3, 131.9 (2С), 132.6, 135.1, 159.0, 167.6, 168.5
24.1, 25.7, 32.5, 55.0, 60.5, 112.5, 113.7 (2C), 117.3, 118.5, 119.2,
120.5, 122.1, 124.3, 126.8, 128.3, 131.9 (2C), 132.6, 135.1, 159.0, 167.6, 168.5
4four 0.50 (н-гептан - EtOAc, 3:1)0.50 (n-heptane - EtOAc, 3: 1) -- 1.59-1.67 (2Н, м), 1.71-1.78 (2Н, м), 2.57 (2Н, т, J 15.60), 3.19 (3H, с), 3.56 (3Н, с), 4.26 (2Н, т, J 12.40), 6.34 (2Н, д, J 8.80), 6.91 (2Н, д, J 8.80), 6.97 (1Н, с), 7.07 (1Н, т, J 7.00), 7.18 (1Н, т, J 7.00), 7,24 (1Н, д, J 8.20), 7,38 (1Н, д, J 7.80), 11.43 (1Н, с)1.59-1.67 (2H, m), 1.71-1.78 (2H, m), 2.57 (2H, t, J 15.60), 3.19 (3H, s), 3.56 (3H, s), 4.26 (2H, t, J 12.40 ), 6.34 (2H, d, J 8.80), 6.91 (2H, d, J 8.80), 6.97 (1H, s), 7.07 (1H, t, J 7.00), 7.18 (1H, t, J 7.00), 7 24 (1H, d, J 8.20), 7.38 (1H, d, J 7.80), 11.43 (1H, s) 20.78, 23.65, 25.22, 28.45, 55.07, 70.34, 112.53, 113.73 (2С), 117.31, 118.49, 118.61, 120.63, 122.23, 124.53, 127.14, 128.19 132.01 (2С), 132.50, 135.20, 159.04, 167.66, 168.5820.78, 23.65, 25.22, 28.45, 55.07, 70.34, 112.53, 113.73 (2C), 117.31, 118.49, 118.61, 120.63, 122.23, 124.53, 127.14, 128.19 132.01 (2C), 132.50, 135.20, 159.04, 167.66, 168.58 5 (ЛХТА-1833)5 (LHTA-1833) 0.35 (iPrOH - EtOAc-NH3(водн), 3:1:0.1)0.35 (iPrOH - EtOAc-NH 3 (aq), 3: 1: 0.1) 95,5, Rt=16.5 min (Н3РО4 0,01М - MeCN: 30-70%)95.5, R t = 16.5 min (H 3 PO 4 0.01 M - MeCN: 30-70%) 1.59-1.77 (4Н, м), 2.55 (2Н, т, J 15.55), 3.25 (2Н, т, J 12.35), 3.55 (3Н, с), 6.34 (2Н, д, J 8.80), 6.91 (2Н, д, J 8.80), 6.96 (1Н, с), 7.05 (1Н, т, J 7.00), 7.17 (1Н, т, J 7.00), 7,23 (1Н, д, J 8.20), 7,36 (1Н, д, J 7.80), 9.37 (3H, ус), 11.43 (1Н, с)1.59-1.77 (4H, m), 2.55 (2H, t, J 15.55), 3.25 (2H, t, J 12.35), 3.55 (3H, s), 6.34 (2H, d, J 8.80), 6.91 (2H, d, J 8.80), 6.96 (1H, s), 7.05 (1H, t, J 7.00), 7.17 (1H, t, J 7.00), 7.23 (1H, d, J 8.20), 7.36 (1H d, J 7.80), 9.37 (3H, s), 11.43 (1H, s) 23.64, 27.98,28.41, 29.89, 55.19, 112.54, 113.78 (2С), 117.32, 118.59 (2С), 120.66, 122.28, 124.53, 127.17 128.20, 132.04 (2С), 132.52, 135.24 159.05, 167.78, 168.70, 169.9823.64, 27.98,28.41, 29.89, 55.19, 112.54, 113.78 (2С), 117.32, 118.59 (2С), 120.66, 122.28, 124.53, 127.17 128.20, 132.04 (2С), 132.52, 135.24 159.05, 167.78, 168.70, 169.98

Пример 2. Противоопухолевая активность ЛХТА-1833 в испытаниях in vitroExample 2. Antitumor activity of LHTA-1833 in vitro tests

Исследование цитотоксичности ЛХТА-1833 на опухолевых и нормальных клетках проводили методом, основанным на способности живых клеток восстанавливать бромид 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия в формазан (МТТ-тест). Клетки рассевали на 96-луночные планшеты (Costar, США) (5-10×103 клеток в 190 мкл культуральной среды). В лунки вносили исследуемое соединение до конечных концентраций 0.1-6.4 мкМ или соответствующие количества растворителя диметилсульфоксида (контроль). Объем вносимого вещества не превышал 5% объема среды в лунках. Каждую концентрацию препарата изучали в 2-3 повторностях. Культуры инкубировали при 37°С, 5% СO2 до 72 часов. По окончании инкубации в лунки вносили 20 мкл 0,5% водного раствора МТТ (Sigma), и планшеты помещали в CO2-инкубатор на 2 часа. О жизнеспособности клеток судили по цветной реакции, развивающейся при восстановлении МТТ в формазан дегидрогеназами митохондрий. Окраску регистрировали на спектрофотометре при длине волны возбуждения 540 нм. Оптическую плотность в лунках, где клетки инкубировались только с диметилсульфоксидом (контроль), принимали за 100%.The study of LHTA-1833 cytotoxicity on tumor and normal cells was carried out by a method based on the ability of living cells to restore 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide to formazan (MTT test). Cells were scattered on 96-well plates (Costar, USA) (5-10 × 103 cells in 190 μl of culture medium). The test compound was added to the wells to final concentrations of 0.1-6.4 μM or the corresponding amount of dimethyl sulfoxide solvent (control). The volume of the introduced substance did not exceed 5% of the volume of medium in the wells. Each concentration of the drug was studied in 2-3 replicates. The cultures were incubated at 37 ° C, 5% CO 2 up to 72 hours. At the end of the incubation, 20 μl of a 0.5% MTT aqueous solution (Sigma) was added to the wells, and the plates were placed in a CO 2 incubator for 2 hours. Cell viability was judged by the color reaction that develops when MTT is reduced to formazan by mitochondrial dehydrogenases. The color was recorded on a spectrophotometer at an excitation wavelength of 540 nm. The optical density in the wells, where the cells were incubated only with dimethyl sulfoxide (control), was taken as 100%.

Показатели оптической плотности в лунках с каждой концентрацией испытуемых препаратов усредняли и вычисляли процент выживших клеток при той или иной концентрации исследуемого соединения.Indicators of optical density in the wells with each concentration of the tested drugs were averaged and the percentage of surviving cells was calculated at a particular concentration of the test compound.

Данные по цитотоксичности ЛХТА-1833 для опухолевых и нормальных клеток представлены в таблице 2. Результаты выражены как IC50 (мкМ) (концентрация соединения, вызывающая гибель 50% клеток) после 72-часовой инкубации клеток. Средние 3-х повторностей и стандартные отклонения.LHTA-1833 cytotoxicity data for tumor and normal cells are presented in Table 2. The results are expressed as IC50 (μM) (concentration of the compound that causes the death of 50% of the cells) after 72-hour cell incubation. Average 3 replicates and standard deviations.

Таблица 2.Table 2. Цитотоксичность ЛХТА-1833 для опухолевых клеток и нормальных Т-лимфоцитов.Cytotoxicity of LHTA-1833 for tumor cells and normal T-lymphocytes. Линия клетокCell line СоединениеCompound НСТ116 (рак толстой кишки)HCT116 (colon cancer) MCF-7 (рак молочной железы)MCF-7 (breast cancer) FEMX (меланома)FEMX (melanoma) К562 (лейкоз)K562 (leukemia) Т-лимфоцитыT lymphocytes ЛХТА-1833LHTA-1833 0,41±0,10*0.41 ± 0.10 * 0,41±0,10*0.41 ± 0.10 * 0,46±0,14*0.46 ± 0.14 * 0.24±0.10*0.24 ± 0.10 * 3,9±1,0*3.9 ± 1.0 * *IC50 - концентрация соединения в мкМ, вызывающая гибель 50% клеток.* IC50 is the concentration of the compound in μM, causing the death of 50% of the cells.

Claims (2)

1. Индивидуальное химическое соединение ЛХТА-1833 (4-(1-(4-(4-метоксифенилтио)-2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пирро-3-ил)-1Н-индол-3-ил) бутил карбамимидотиоат).1. Individual chemical compound LHTA-1833 (4- (1- (4- (4-methoxyphenylthio) -2,5-dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrro-3-yl) -1H-indol-3- il) butyl carbamimidothioate). 2. Применение химического соединение ЛХТА-1833 (4-(1-(4-(4-метоксифенилтио)-2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пирро-3-ил)-1Н-индол-3-ил) бутилкарбамимидотиоата) в терапии рака толстой кишки, рака молочной железы, меланомы, лейкоза. 2. The use of the chemical compound LHTA-1833 (4- (1- (4- (4-methoxyphenylthio) -2,5-dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrro-3-yl) -1H-indol-3- il) butylcarbamimidothioate) in the treatment of colon cancer, breast cancer, melanoma, leukemia.
RU2009143963/04A 2009-11-27 2009-11-27 4-(1-(4-(4-methoxyphenylthio)-2,5-dioxo-2,5-dihydro-1h-pyrro-3-yl)-1h-indol-3-yl)butylcarbamimidothioate and method for using it RU2441000C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2009143963/04A RU2441000C2 (en) 2009-11-27 2009-11-27 4-(1-(4-(4-methoxyphenylthio)-2,5-dioxo-2,5-dihydro-1h-pyrro-3-yl)-1h-indol-3-yl)butylcarbamimidothioate and method for using it

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2009143963/04A RU2441000C2 (en) 2009-11-27 2009-11-27 4-(1-(4-(4-methoxyphenylthio)-2,5-dioxo-2,5-dihydro-1h-pyrro-3-yl)-1h-indol-3-yl)butylcarbamimidothioate and method for using it

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2009143963A RU2009143963A (en) 2011-06-10
RU2441000C2 true RU2441000C2 (en) 2012-01-27

Family

ID=44736201

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2009143963/04A RU2441000C2 (en) 2009-11-27 2009-11-27 4-(1-(4-(4-methoxyphenylthio)-2,5-dioxo-2,5-dihydro-1h-pyrro-3-yl)-1h-indol-3-yl)butylcarbamimidothioate and method for using it

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2441000C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2811612C2 (en) * 2019-03-01 2024-01-15 Революшн Медисинс, Инк. Bicyclic heterocyclic compounds and their applications

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5545636A (en) * 1993-12-23 1996-08-13 Eli Lilly And Company Protein kinase C inhibitors
EP0657458B1 (en) * 1993-12-07 2001-08-22 Eli Lilly And Company Protein kinase C inhibitors
WO2002038561A1 (en) * 2000-11-07 2002-05-16 Novartis Ag Indolylmaleimide derivatives as protein kinase c inhibitors
RU2261862C2 (en) * 1999-12-22 2005-10-10 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Substituted pyrroles
US7439363B2 (en) * 2003-06-13 2008-10-21 Janssen Parmaceutica N.V. Substituted indazoly(indoly)maleimide derivatives as kinase inhibitors

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0657458B1 (en) * 1993-12-07 2001-08-22 Eli Lilly And Company Protein kinase C inhibitors
US5545636A (en) * 1993-12-23 1996-08-13 Eli Lilly And Company Protein kinase C inhibitors
RU2261862C2 (en) * 1999-12-22 2005-10-10 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Substituted pyrroles
WO2002038561A1 (en) * 2000-11-07 2002-05-16 Novartis Ag Indolylmaleimide derivatives as protein kinase c inhibitors
US7439363B2 (en) * 2003-06-13 2008-10-21 Janssen Parmaceutica N.V. Substituted indazoly(indoly)maleimide derivatives as kinase inhibitors

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2811612C2 (en) * 2019-03-01 2024-01-15 Революшн Медисинс, Инк. Bicyclic heterocyclic compounds and their applications

Also Published As

Publication number Publication date
RU2009143963A (en) 2011-06-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2726622C2 (en) New biphenyl compound or its salt
CA2660899C (en) Tricyclic compound derivatives useful in the treatment of neoplastic diseases, inflammatory disorders and immunomodulatory disorders
JP7320823B2 (en) Use of pteridinone derivatives as EGFR inhibitors
Carbone et al. 1, 2, 4‐Oxadiazole topsentin analogs with antiproliferative activity against pancreatic cancer cells, targeting GSK3β kinase
CN112119070B (en) Selective JAK2 inhibitors and uses thereof
KR20180043794A (en) Pyrazolpyimidine derivatives and uses thereof
ES2914072T3 (en) Monocyclic pyridine derivative salt and its crystal
TW200418834A (en) Indolyl pyrazinone derivatives useful for treating hyper-proliferative disorders
TW201105670A (en) Azabicyclo compound and salt thereof
CA3172987A1 (en) Small molecule inhibitors of oncogenic chd1l with preclinical activity against colorectal cancer
EP3632443B1 (en) Anti-tumor effect potentiator using a biphenyl compound
Skouta et al. Design and synthesis of Pictet–Spengler condensation products that exhibit oncogenic-RAS synthetic lethality and induce non-apoptotic cell death
CA3107548A1 (en) Smad3 inhibitors
WO2022258023A1 (en) Compound as cdk kinase inhibitor and use thereof
CN114761410A (en) Pyrrolopyrimidinone compounds and application thereof
Patil et al. Synthesis, biological evaluation and modeling studies of new pyrido [3, 4-b] indole derivatives as broad-spectrum potent anticancer agents
WO2014090398A1 (en) Use of maleimide derivatives for preventing and treating leukemia
WO2021111322A1 (en) Substituted nucleoside analogs as prmt5 inhibitors
Conchon et al. Synthesis, checkpoint kinase 1 inhibitory properties and in vitro antiproliferative activities of new pyrrolocarbazoles
RU2441000C2 (en) 4-(1-(4-(4-methoxyphenylthio)-2,5-dioxo-2,5-dihydro-1h-pyrro-3-yl)-1h-indol-3-yl)butylcarbamimidothioate and method for using it
CN105061432B (en) [2,3 b] quinoxaline derivant, pharmaceutical composition and its preparation of 6H indoles and application
Acero et al. Synthesis and biological evaluation of novel indolocarbazoles with anti-angiogenic activity
KR20220153595A (en) Pyridopyrimidine derivatives useful for modulating AhR signaling
Miambo et al. Synthesis of new biologically active isothiazolo [4, 5-b] carbazole-type tetracyclic derivatives via an indole-2, 3-quinodimethane approach
CA3233398A1 (en) Small molecule inhibitors of oncogenic chd1l with preclinical activity against colorectal cancer

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20121128

NF4A Reinstatement of patent

Effective date: 20151227