[go: up one dir, main page]

RU2328272C2 - Interferon inductor suppositories - Google Patents

Interferon inductor suppositories Download PDF

Info

Publication number
RU2328272C2
RU2328272C2 RU2005108089/15A RU2005108089A RU2328272C2 RU 2328272 C2 RU2328272 C2 RU 2328272C2 RU 2005108089/15 A RU2005108089/15 A RU 2005108089/15A RU 2005108089 A RU2005108089 A RU 2005108089A RU 2328272 C2 RU2328272 C2 RU 2328272C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
suppository
per
mixture
interferon
base
Prior art date
Application number
RU2005108089/15A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2005108089A (en
Inventor
Галина Михайловна Левагина (RU)
Галина Михайловна Левагина
Валентина Ивановна Масычева (RU)
Валентина Ивановна Масычева
Елена Дмитриевна Даниленко (RU)
Елена Дмитриевна Даниленко
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью (ООО) "Диафарм"
Галина Михайловна Левагина
Валентина Ивановна Масычева
Елена Дмитриевна Даниленко
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью (ООО) "Диафарм", Галина Михайловна Левагина, Валентина Ивановна Масычева, Елена Дмитриевна Даниленко filed Critical Общество с ограниченной ответственностью (ООО) "Диафарм"
Priority to RU2005108089/15A priority Critical patent/RU2328272C2/en
Publication of RU2005108089A publication Critical patent/RU2005108089A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2328272C2 publication Critical patent/RU2328272C2/en

Links

Landscapes

  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

FIELD: medicine; pharmacology.
SUBSTANCE: proposed suppository along with consistent base (lipophilic, hydrophilic or diphilic) and stabiliser selected from chlorhexidine bigluconate, nypagine and sodium carboxymethyl cellulose as natural endogenous interferon inductor, is supplied with sodium salt complex of alpha-helical and double-helical RNA from killer yeast Saccharomyces cerevisiae. Quantitative amount of specified ingredients per suppository of mass 1.0 g is: sodium salt complex of alpha-helical and double-helical RNA from killer yeast Saccharomyces cerevisiae - 50-150 mcg; stabiliser - 10-30 mcg; additives - others.
EFFECT: extended range of therapeutic antiviral agents and reduced toxicity with maintained efficiency.
6 cl, 4 ex, 3 tbl

Description

Изобретение относится к медицине и фармакологии, конкретно к области разработки противовирусных препаратов в виде суппозиториев.The invention relates to medicine and pharmacology, specifically to the field of development of antiviral drugs in the form of suppositories.

Эффективными средствами профилактики и терапии вирусных инфекций являются индукторы интерферона, стимулирующие выработку в организме человека и животных эндогенного интерферона. При этом необходим поиск средств, которые не только обладают интерферониндуцирующей активностью, но и могут быть просты в изготовлении и применении. Перспективными в этом отношении являются препараты, которые не требуют парентерального или инъекционного введения, в частности - суппозитории. Кроме того, обращение к такого рода лекарственной форме позволило бы расширить возможности терапевтического использования индукторов интерферона за счет белее четкого дозированного высвобождения активного начала при исключении нежелательных побочных эффектов - раздражение, воспаление и т.д. Следует также отметить, что отказ от инъекционного способа введения противовирусных препаратов исключает опасность инфицирования гепатитами В и С, а также ВИЧ-инфекцией; кроме того, введение противовирусной композиции в форме свечи обеспечивает быстрое поступление препарата в кровь и органы, богатые макрофагоцитарными и лимфоидными элементами.Interferon inducers that stimulate the production of endogenous interferon in the human and animal body are effective means of preventing and treating viral infections. At the same time, it is necessary to search for agents that not only possess interferon-inducing activity, but can also be simple to manufacture and use. Promising in this regard are drugs that do not require parenteral or injectable administration, in particular suppositories. In addition, the use of such a dosage form would expand the possibilities of therapeutic use of interferon inducers due to a whiter clear dosage release of the active principle while eliminating undesirable side effects - irritation, inflammation, etc. It should also be noted that the refusal of the injection method of administering antiviral drugs eliminates the risk of infection with hepatitis B and C, as well as HIV infection; in addition, the introduction of an antiviral composition in the form of a candle ensures the rapid entry of the drug into the blood and organs rich in macrophagocytic and lymphoid elements.

К наиболее активным индукторам интерферона относятся синтетические полирибонуклеотиды и двуспиральные РНК (дсРНК) природного происхождения [1].The most active interferon inducers include synthetic polyribonucleotides and double-stranded RNA (dsRNA) of natural origin [1].

Известно использование в качестве индуктора интерферона двутяжевого комплекса полирибоуридиловой (поли-rU) и полирибоадениловой (поли-rA) кислот, который под названием "Полудан" используется при вирусных заболеваниях глаз [2]. Однако препараты индукторов интерферона на основе синтетических полирибонуклеотидов наряду с высокой эффективностью обладают токсичностью [3] и проявляют мутагенную активность [4].It is known to use as an interferon inducer a double-stranded complex of polyribouridyl (poly-rU) and polyriboadenyl (poly-rA) acids, which is called “Poludan” for viral diseases of the eyes [2]. However, preparations of interferon inducers based on synthetic polyribonucleotides, along with high efficiency, are toxic [3] and exhibit mutagenic activity [4].

На российском фармацевтическом рынке присутствует мазь "Ларифан" (производство Латвии) - высокополимерный индуктор интерферона природного происхождения, представляющий собой двуспиральную РНК фага f2 [5]. Недостатком препарата является то, что его активную основу составляет фаговая нуклеиновая кислота, представляющая потенциальную опасность для человека в связи с обнаружением массовой контаминации фагами вирусных вакцин.On the Russian pharmaceutical market there is Larifan ointment (manufactured in Latvia), a high-polymer inducer of interferon of natural origin, which is a double-stranded RNA of phage f2 [5]. The disadvantage of the drug is that its active basis is phage nucleic acid, which is a potential danger to humans in connection with the detection of mass contamination of viral vaccines by phages.

Интерферон индуцирующих препаратов на основе двуспиральных РНК, выполненных в виде суппозитория, известно очень не много. Так американская фирма "Merck" Co. Inc. запатентовала мазь, которая предназначена для лечения герпетических поражений глаза и содержит синтетический индуктор интерферона - поли-rI - поли-rC, а также носитель: простые или сложные эфиры целлюлозы, поливиниловый спирт, поливинилпирролидон, карбоксивиниловые эфиры и полиэтиленгликоль [6]. В этом же изобретении описаны вагинальные и ректальные суппозитории на основе указанной полирибонуклеотидной композиции, которые имеют обычный размер и форму и содержат примерно от 2,5 до 250 мг индуктора интерферона на 1 г композиции.Interferon-inducing drugs based on double-stranded RNA, made in the form of a suppository, very little is known. So the American company "Merck" Co. Inc. patented ointment, which is intended for the treatment of herpetic lesions of the eye and contains a synthetic interferon inducer - poly-rI - poly-rC, as well as a carrier: cellulose ethers or esters, polyvinyl alcohol, polyvinylpyrrolidone, carboxyvinyl esters and polyethylene glycol [6]. The same invention describes vaginal and rectal suppositories based on the specified polyribonucleotide composition, which are of normal size and shape and contain from about 2.5 to 250 mg of an interferon inducer per 1 g of composition.

Наиболее близким препаратом индуктора интерферона является лекарственная форма двутяжевого комплекса поли-rU* поли-rA* (200-250 мкг), выполненная в виде ректальной свечи, которая помимо индуктора интерферона содержит еще гиалуроновую кислоту (10-20 мг) в качестве иммуномодулятора и витамины С и Е (30-40 мг) в массовом соотношении 1:1 в качестве антиоксидантов в основе [7, прототип]. Недостатком препарата является то, что в качестве индуктора интерферона используется двутяжевый комплекс поли-rU* - поли-rA*, который имеет синтетическое происхождение и, как указывалось выше, проявляет токсичность и обладает мутагенной активностью.The closest preparation of the interferon inducer is the dosage form of the poly-rU * poly-rA * double-strand complex (200-250 μg), made in the form of a rectal suppository, which, in addition to the interferon inducer, also contains hyaluronic acid (10-20 mg) as an immunomodulator and vitamins C and E (30-40 mg) in a mass ratio of 1: 1 as antioxidants in the base [7, prototype]. The disadvantage of the drug is that a double-strand poly-rU * - poly-rA * complex is used as an interferon inducer, which has a synthetic origin and, as mentioned above, is toxic and has mutagenic activity.

Технической задачей изобретения является расширение номенклатуры противовирусных препаратов - индукторов неспецифической резистентности организма, путем создания лекарственной формы индуктора интерферона - суппозитория на основе дсРНК природного происхождения, обладающего сниженной токсичностью.An object of the invention is to expand the range of antiviral drugs - inducers of nonspecific resistance of the body, by creating a dosage form of an interferon inducer - suppository based on dsRNA of natural origin, which has reduced toxicity.

Поставленная задача решается путем введения в состав суппозитория наряду с консистентно-образующей основой (липофильной, гидрофильной или дифильной) и стабилизатором в качестве индуктора интерферона природного происхождения комплекса натриевых солей одно- и двуспиральных РНК из дрожжей Saccharomyces cerevisiae.The problem is solved by introducing into the composition of the suppository along with a consistent-forming base (lipophilic, hydrophilic or diphilic) and a stabilizer as a naturally-occurring interferon complex of sodium salts of single and double-stranded RNA from Saccharomyces cerevisiae yeast.

В настоящее время известен препарат индуктора интерферона для наружного применения (мазь), обладающий выраженной противовирусной активностью, биологически активной частью которого является комплекс натриевых солей одно- и двуспиральных РНК киллерных дрожжей Saccharomyces cerevisiae [8]. Этот препарат обладает высокой эффективностью, сниженной токсичностью и хорошей переносимостью.Currently known is the preparation of an interferon inducer for external use (ointment), which has a pronounced antiviral activity, the biologically active part of which is a complex of sodium salts of single- and double-stranded RNA of killer yeast Saccharomyces cerevisiae [8]. This drug has high efficacy, reduced toxicity and good tolerance.

Предлагаемый в данной разработке суппозиторий включают в качестве индуктора интерферона природного происхождения комплекс натриевых солей одно- и двуспиральных РНК киллерных дрожжей Saccharomyces cerevisiae, стабилизатор и вспомогательные вещества. Количественное содержание указанных ингредиентов на суппозиторий массой 1,0 г составляет:The suppository proposed in this development includes, as an inducer of naturally occurring interferon, a complex of sodium salts of single- and double-stranded RNA of killer yeast Saccharomyces cerevisiae, a stabilizer and excipients. The quantitative content of these ingredients on a suppository weighing 1.0 g is:

Комплекс натриевых солей одно- и двуспиральных РНКThe complex of sodium salts of single and double-stranded RNA киллерных дрожжей Saccharomyces cerevisiaekiller yeast Saccharomyces cerevisiae 50-150 мкг50-150 mcg СтабилизаторStabilizer 10-30 мкг10-30 mcg Вспомогательные веществаExcipients остальное.rest.

В качестве стабилизатора - бактериостатика (стабилизатора микробиологической чистоты) предлагаемый суппозиторий на основе комплекса натриевых солей одно- и двуспиральных РНК из дрожжей Saccharomyces cerevisiae может содержать нипагин или хлоргексидина биглюконат и/или производное метилцеллюлозы (NaКМЦ).As a stabilizer - bacteriostatic (stabilizer of microbiological purity), the proposed suppository based on a complex of sodium salts of single and double-stranded RNA from Saccharomyces cerevisiae yeast may contain nipagin or chlorhexidine bigluconate and / or methyl cellulose derivative (NaKMTS).

Суппозитории в качестве вспомогательных веществ содержат жировую основу, включающую твердый кондитерский жир или кулинарный жир и эмульгатор Т-2, поверхностно-активное вещество (ПАВ) Твин - 80, являющееся также солюбилизатором высокополимерной дс РНК; при этом основа может дополнительно содержать масло какао до 0,15 г в 1 г смеси и парафин до 0,10 г, а содержание ПАВ Твин - 80 составляет 0,03 г в 1 г смеси.Suppositories as adjuvants contain a fatty base, including solid confectionery fat or cooking oil and T-2 emulsifier, Tween-80 surfactant, which is also a solubilizer of high-polymer ds RNA; the base may additionally contain cocoa butter up to 0.15 g per 1 g of the mixture and paraffin up to 0.10 g, and the content of Tween 80 surfactant is 0.03 g per 1 g of the mixture.

В качестве консистентно-образующей основы может быть использована дифильная основа, содержащая полиэтиленоксиды, твердый пищевой жир и ПАВ Твин - 80, или гидрофильная основа, содержащая полиэтиленоксиды и глицерин (в количестве 0,05 г на 1 г смеси).As a consistent-forming base, a diphilic base containing polyethylene oxides, solid food fat and Tween-80 surfactant, or a hydrophilic base containing polyethylene oxides and glycerin (in the amount of 0.05 g per 1 g of the mixture) can be used.

В качестве антиоксиданта средство может дополнительно содержать витамин Е в количестве 0,0001-0,0005 г в 1 г смеси.As an antioxidant, the agent may additionally contain vitamin E in an amount of 0.0001-0.0005 g per 1 g of the mixture.

Консистентно-образующие композиции готовят с использованием вспомогательных веществ, разрешенных к медицинскому применению.Consistent-forming compositions are prepared using auxiliary substances that are approved for medical use.

Кроме того, средство дополнительно может содержать диметилсульфоксид для увеличения проницаемости слизистых оболочек в количестве 0,0005-0,0025 г в 1 г смеси.In addition, the tool may additionally contain dimethyl sulfoxide to increase the permeability of the mucous membranes in an amount of 0.0005-0.0025 g per 1 g of the mixture.

Сочетание индуктора интерферона в виде комплекса натриевых солей одно- и двуспиральных РНК природного происхождения (из киллерных дрожжей Saccharomyces cerevisiae) со стабилизаторами - бактериостатиками (стабилизаторами микробиологической чистоты) и антиоксидантами в суппозиторной консистентно-образующей основе позволяет расширить номенклатуру лечебных противовирусных препаратов - индукторов неспецифической резистентности организма, обладающих сниженной токсичностью, при сохранении эффективности.The combination of an interferon inducer in the form of a complex of sodium salts of single- and double-stranded RNAs of natural origin (from killer yeast Saccharomyces cerevisiae) with stabilizers - bacteriostats (stabilizers of microbiological purity) and antioxidants in a suppository consistent-forming basis allows expanding the nomenclature of therapeutic antiviral resistance inducers - with reduced toxicity, while maintaining effectiveness.

Изучена стабильность физических свойств и активность предложенных суппозиториев индукторов интерферона. Проведены доклинические испытания на лабораторных животных. Исследованы токсичность, пирогенность, местнораздражающее действие, фармакокинетика, фагоцитозстимулирующая активность суппозиториев на модели генитального герпеса морских свинок, а также интерфе-рониндуцирующая активность препарата.The stability of physical properties and the activity of the proposed suppositories of interferon inducers were studied. Preclinical tests were performed on laboratory animals. The toxicity, pyrogenicity, local irritating effect, pharmacokinetics, phagocytosis-stimulating activity of suppositories on the model of genital herpes of guinea pigs, as well as interferon-inducing activity of the drug were studied.

Результаты исследований на модели лабораторных животных показывают, что препарат суппозитория эффективен, безвреден, малотоксичен, не обладает пирогенностью и местно-раздражающим действием.The results of studies on a model of laboratory animals show that the suppository preparation is effective, harmless, low toxicity, does not have pyrogenicity and local irritating effect.

Новая лекарственная форма - суппозиторий индуктора интерферона использован в клинической практике при лечении хламидиоза. Показана его выраженная интерферониндуцирующая активность при эффективных лечебных свойствах.A new dosage form - the suppository of an interferon inducer is used in clinical practice in the treatment of chlamydia. Its pronounced interferon-inducing activity is shown with effective healing properties.

Для лучшего понимания сущности изобретения ниже следуют примеры его конкретного выполнения.For a better understanding of the invention, the following are examples of its specific implementation.

Пример 1. Получение суппозиториев с липофильной консистентно-образующей основой.Example 1. Obtaining suppositories with lipophilic consistent base.

Для получения суппозиториев массой 1 г в расплавленную основу - кулинарный жир, парафин, масло какао и эмульгатор Т-2 вводят ПАВ твин-80 в качестве солюбилизатора высокополимерной дс РНК, диметилсульфоксид для усиления проницаемости слизистых оболочек и хлоргексидина биглюконат в качестве стабилизатора микробиологической чистоты. Затем в полученную смесь добавляют раствор комплекса натриевых солей одно- и двуспиральных РНК Saccharomyces cerevisiae. Смесь выливают в формы для суппозиториев, охлаждают и упаковывают.To obtain suppositories weighing 1 g, cooking oil, paraffin, cocoa butter and T-2 emulsifier are injected with a Tween-80 surfactant as a solubilizer of high-polymer DS RNA, dimethyl sulfoxide to enhance the permeability of mucous membranes and chlorhexidine bigluconate as a microbiological purity stabilizer. Then, a solution of the complex of sodium salts of single and double-stranded RNA Saccharomyces cerevisiae is added to the resulting mixture. The mixture is poured into suppository molds, cooled and packaged.

Указанные компоненты берут в следующем соотношении в 1 г смеси:These components are taken in the following ratio in 1 g of the mixture:

Комплекс натриевых солей одно- и двуспиральных РНКThe complex of sodium salts of single and double-stranded RNA 50-150 мкг 50-150 mcg Масло какаоCacao butter 0-15 мг0-15 mg ПарафинParaffin 10 мг10 mg Твин-80Twin 80 3 мг3 mg Вода очищеннаяPurified water 5 мг5 mg Эмульгатор Т-2Emulsifier T-2 3 мг3 mg ДиметилсульфоксидDimethyl sulfoxide 100 мкг100 mcg Хлоргексидина биглюконатChlorhexidine bigluconate 250 мкг250 mcg Кулинарный жирCooking oil остальноеrest

Пример 2. Получение суппозиториев с гидрофильной консистентно-образующей основой.Example 2. Obtaining suppositories with a hydrophilic consistent base.

Для получения суппозиториев массой 1 г в консистентно-образующую основу - расплав полиэтиленоксидов 1500 и 400 вводят глицерин, диметилсульфоксид для усиления проницаемости слизистых оболочек и хлоргексидина биглюконат в качестве стабилизатора микробиологической чистоты. В подготовленную основу вводят раствор комплекса натриевых солей, одно- и двуспиральных РНК Saccharomyces cerevisiae. Смесь выливают в формы для суппозиториев, охлаждают и упаковывают.To obtain suppositories weighing 1 g, glycerin, dimethyl sulfoxide are introduced into the consistently forming base - a melt of polyethylene oxides 1500 and 400 to increase the permeability of the mucous membranes and chlorhexidine bigluconate as a stabilizer of microbiological purity. A solution of the complex of sodium salts, single- and double-stranded RNA Saccharomyces cerevisiae is introduced into the prepared base. The mixture is poured into suppository molds, cooled and packaged.

Указанные компоненты берут в следующем соотношении в 1 г смеси:These components are taken in the following ratio in 1 g of the mixture:

Комплекс натриевых солей одно- и двуспиральных РНКThe complex of sodium salts of single and double-stranded RNA 50-150 мкг 50-150 mcg ГлицеринGlycerol 5 мг5 mg Вода очищеннаяPurified water 5 мг5 mg Полиэтиленоксид 1500Polyethylene Oxide 1500 20 мг20 mg Хлоргексидина биглюконатChlorhexidine bigluconate 250 мкг250 mcg Полиэтиленоксид 400Polyethylene Oxide 400 остальноеrest

Пример 3. Получение суппозиториев с дифильной консистентно-образующей основой.Example 3. Obtaining suppositories with a diphilic consistent base.

Для получения суппозиториев массой 1 г в расплавленную гидрофильную основу - расплав полиэтиленоксидов 1500 и 400, добавляют раствор комплекса натриевых солей одно- и двуспиральных РНК Saccharomyces cerevisiae. Затем вводят расплавленную гидрофобную основу (ТКЖ), ПАВ твин-80, эмульгатор Т-2, диметилсульфоксид, антиоксидант Е-2 и нипагин в качестве стабилизатора микробиологической чистоты (бактериостатика). Смесь выливают в формы для суппозиториев, охлаждают и упаковывают.To obtain suppositories weighing 1 g, a solution of the complex of sodium salts of Saccharomyces cerevisiae single and double-stranded RNA is added to a molten hydrophilic base — a melt of polyethylene oxides 1500 and 400. Then, a molten hydrophobic base (TLC), Tween-80 surfactant, T-2 emulsifier, dimethyl sulfoxide, antioxidant E-2, and nipagin are introduced as a stabilizer of microbiological purity (bacteriostatic). The mixture is poured into suppository molds, cooled and packaged.

Указанные компоненты берут в следующем соотношении в 1 г смеси:These components are taken in the following ratio in 1 g of the mixture:

Комплекс натриевых солей одно- и двуспиральных РНКThe complex of sodium salts of single and double-stranded RNA 50-150 мкг 50-150 mcg ТКЖTKZH 240 мг240 mg ПЭГ 400PEG 400 350 мг350 mg ПЭГ 1500PEG 1500 25 мг25 mg Твин-80Twin 80 4 мг4 mg Эмульгатор Т-2Emulsifier T-2 2 мг2 mg ДиметилсульфоксидDimethyl sulfoxide 100 мкг100 mcg НипагинNipagin 10 мкг10 mcg Антиоксидант Е-2Antioxidant E-2 10-20 мкг10-20 mcg Вода очищеннаяPurified water ОстальноеRest

Состав суппозиториев с дифильной консистентно-образующей основой может быть и несколько иным.The composition of suppositories with a diphilic consistently forming base may be somewhat different.

Для получения суппозиториев массой 1 г в гидрофильную основу - раствор NaКМЦ добавляют раствор комплекса натриевых солей одно- и двуспиральных РНК Saccharomyces cerevisiae. Затем вводят глицерин и расплавленную гидрофобную основу (ТКЖ), эмульгатор Т-2, нипагин в качестве стабилизатора микробиологической чистоты (бактериостатика). Смесь вымешивают до получения однородной консистенции при температуре 37°, выливают в формы для суппозиториев, охлаждают и упаковывают.To obtain suppositories weighing 1 g, a solution of the complex of sodium salts of single- and double-stranded RNA Saccharomyces cerevisiae is added to a hydrophilic base - NaKMC solution. Then glycerol and a molten hydrophobic base (TLC), T-2 emulsifier, nipagin are introduced as a stabilizer of microbiological purity (bacteriostatic). The mixture is kneaded until a homogeneous consistency is obtained at a temperature of 37 °, poured into suppository molds, cooled and packaged.

Указанные компоненты берут в следующем соотношении в 1 г смеси:These components are taken in the following ratio in 1 g of the mixture:

Комплекс натриевых солей одно- и двуспиральных РНКThe complex of sodium salts of single and double-stranded RNA 50-150 мкг 50-150 mcg NaКМЦNaKMTS 300 мкг300 mcg ГлицеринGlycerol 150 мкг150 mcg Эмульгатор Т-2Emulsifier T-2 3 мг3 mg НипагинNipagin 10 мкг10 mcg ТКЖTKZH 240 мг240 mg Вода очищеннаяPurified water ОстальноеRest

Пример 4. Определение биологической активности суппозиториев на основе комплекса натриевых солей одно- и двуспиральных РНК.Example 4. Determination of the biological activity of suppositories based on a complex of sodium salts of single- and double-stranded RNA.

Известно, что вирусы герпеса способны угнетать функциональную активность макрофагов и синтез интерферона, что сказывается на неспособности элиминировать вирус из организма. Очевидно, что при отборе перспективных антигерпетических средств следует оценивать их влияние на фагоциты.It is known that herpes viruses are able to inhibit the functional activity of macrophages and the synthesis of interferon, which affects the inability to eliminate the virus from the body. Obviously, when selecting promising antiherpetic drugs, their effect on phagocytes should be evaluated.

Биологическую активность заявляемых суппозиториев оценивают по фагоцитарной активности на монослойной культуре перитонеальных макрофагов мышей ICR, самцов. Образцы суппозиториев, приготовленных согласно примерам 1-3, т.е. с различными консистентно-образующими основами и вспомогательными веществами, вводят мышам ректально в дозе 70 мг/мышь. В контрольных группах используют основу суппозиториев, которую вводят аналогичным образом.The biological activity of the claimed suppositories is evaluated by phagocytic activity on a monolayer culture of peritoneal macrophages of ICR mice, males. Samples of suppositories prepared according to examples 1-3, i.e. with various consistent-forming bases and excipients, administered to mice rectally at a dose of 70 mg / mouse. In the control groups, a suppository base is used, which is administered in a similar manner.

Исследование фагоцитоза макрофагов проводят через 24 ч после введения суппозиториев.The study of macrophage phagocytosis is carried out 24 hours after the introduction of suppositories.

Макрофаги выделяют из перитониальной полости мышей путем вымывания средой Хенкса с гепарином (5 ед. акт. на мл среды). Культивирование и все последующие операции проводят в среде Хенкса с 3% сыворотки крупного рогатого скота (КРС). Суспензию макрофагов (1×106 в мл) высевают на покровное стекло, помещенное в бюкс диаметром 35 мм.Macrophages are isolated from the peritoneal cavity of mice by washing with Hanks's medium with heparin (5 units of act. Per ml of medium). Cultivation and all subsequent operations are carried out in Hanks medium with 3% serum of cattle (cattle). A suspension of macrophages (1 × 10 6 in ml) is plated on a coverslip placed in a 35 mm diameter bottle.

Инкубацию проводят 1 ч при температуре 37°С. Для исследования фагоцитоза монослой отмывают от непрекрепившихся клеток и в качестве объекта фагоцитоза наносят 20 мкл суспензии опсонизированных эритроцитов барана (ЭБ) из расчета 20 эритроцитов на макрофаг. Монослой макрофагов продолжают инкубировать в течение 45 мин, отмывают, высушивают, готовят для микроскопического анализа.Incubation is carried out for 1 h at a temperature of 37 ° C. To study phagocytosis, the monolayer is washed from non-adhering cells and 20 μl of a suspension of opsonized ram erythrocytes (EB) is applied as a phagocytosis object at the rate of 20 red blood cells per macrophage. A macrophage monolayer is continued to incubate for 45 minutes, washed, dried, and prepared for microscopic analysis.

Оценку фагоцитоза проводят путем пересчета перитонеальных макрофагов, поглотивших эритроциты барана.Assessment of phagocytosis is carried out by recounting peritoneal macrophages that have absorbed sheep erythrocytes.

Фагоцитарную активность (ФА) оценивают от общего числа макрофагов. Достоверность различий (Р) данных, полученных в опыте и контроле, оценивают с помощью критерия Стьюдента при обсчете 250 клеток на монослой. Процент стимуляции определяют по отношению показателей опытных групп животных к контролю по формуле:Phagocytic activity (FA) is evaluated from the total number of macrophages. The reliability of the differences (P) of the data obtained in the experiment and control is assessed using Student's criterion when calculating 250 cells per monolayer. The percentage of stimulation is determined by the ratio of the parameters of the experimental groups of animals to the control according to the formula:

Figure 00000001
Figure 00000001

Результаты этих экспериментов представлены в Таблице 1.The results of these experiments are presented in Table 1.

Данные представлены для суппозиториев, приготовленных по примеру 1.The data are presented for suppositories prepared according to example 1.

Таблица 1.Table 1. Фагоцитоз стимулирующая активность суппозиториевPhagocytosis stimulating activity of suppositories Условия опыта Experience Conditions Показатели фагоцитоза Phagocytosis Препарат,
Серия
A drug,
Series
Время исследованияStudy time ФА, (%)FA, (%) Фагоцитозстимулирующая активностьPhagocytosis-stimulating activity Достоверность различий (Р)Significance of differences (P)
Суппозитории с 020900
Основа суппозиториев
Suppositories with 020900
Suppository base
24 ч24 h 22,3±3,2 15,8±1,822.3 ± 3.2 15.8 ± 1.8 141,1%141.1% 0,050.05
Суппозитории с 010301
Основа суппозиториев
Suppositories from 010301
Suppository base
24 ч24 h 27,8±1,8 12,75±2,627.8 ± 1.8 12.75 ± 2.6 218,0%218.0% 0,050.05
Суппозитории с 091100
Основа суппозиториев
Suppositories from 091100
Suppository base
24 ч24 h 27,1±2,2 11.3±0,927.1 ± 2.2 11.3 ± 0.9 239,8%239.8% 0,050.05

Проведенное исследование показывает, что патентуемые суппозитории обладают выраженной способностью активировать фагоцитоз. Это указывает на лечебное антигерпетическое действие препарата.The study shows that patented suppositories have a pronounced ability to activate phagocytosis. This indicates a therapeutic antiherpetic effect of the drug.

Пример 4. Исследование интерферониндуцирующей активности суппозиториев на животной модели.Example 4. The study of interferon-inducing activity of suppositories in an animal model.

Уровень интерферониндуцирующей активности суппозиториев, содержащих комплекс натриевых солей одно- и двуспиральных РНК в липофильной основе, оценивают в сыворотке крови мышей, полученной через сутки после интравагинального введения суппозиториев животным (опытные) или их основы (контрольные), а также у интактной группы животных. Образцы крови объемом 0,8-1,0 мл забирают в стерильные пробирки; сыворотку получают центрифугированием при 2,5 тыс.об/мин, переносят по 0,3-0,5 мл в стерильные пробирки и замораживают при - 20°С до анализа.The level of interferon-inducing activity of suppositories containing a complex of sodium salts of single and double-stranded RNA in a lipophilic basis is evaluated in the blood serum of mice obtained one day after intravaginal administration of suppositories to animals (experimental) or their bases (control), as well as in the intact group of animals. Blood samples with a volume of 0.8-1.0 ml are collected in sterile tubes; serum is obtained by centrifugation at 2.5 thousand rpm, transferred 0.3-0.5 ml in sterile tubes and frozen at -20 ° C until analysis.

Титр интерферона определяют микрометодом в 96-луночных полистироловых планшетах с плоским дном. О наличии интерферона судят по подавлению цитопатического действия тест-вируса в культуре клеток мышиных фибробластов линии L-929. В качестве тест-вируса был использован вирус энцефаломиокардита (ЕМС) штамм "Колумбия" в дозе 100 ЦПД50 0,1 мл. За титр сывороточного интерферона принимают величину его наибольшего разведения, при котором наблюдается защита 50% клеток культуры от 100 ЦПД50 тест-вируса. Полученные данные, представленные в Таблице 2, показывают, что предложенные препараты суппозиториев обладают ярко выраженной интерферониндуцирующей активностью.The interferon titer is determined by micromethod in 96-well flat bottom polystyrene plates. The presence of interferon is judged by the suppression of the cytopathic effect of the test virus in the cell culture of murine fibroblasts of the L-929 line. Encephalomyocarditis virus (EMC) strain Columbia at a dose of 100 CPD 50 0.1 ml was used as a test virus. For the titer of serum interferon, the value of its largest dilution is taken, at which protection of 50% of the culture cells from 100 CPD of the 50 test virus is observed. The obtained data presented in Table 2 show that the proposed suppository preparations have a pronounced interferon-inducing activity.

Таблица 2table 2 Интерферониндуцирующая активность суппозиториев на животной моделиInterferon-inducing activity of suppositories in an animal model Группа животных
Препарат суппозитория
Group of animals
Suppository drug
№ сыворотокSerum No. Титр интерферонаInterferon titer
Индивидуальное значениеIndividual value M±mM ± m 1. Контрольные живо тные.1. Control animals. 1
2
one
2
<1:10
1:10
<1:10
1:10
Липофильная основа.Lipophilic base. 33 1:101:10 4four <1:10<1:10 <1:10<1:10 55 <1:10<1:10 66 <1:10<1:10 2. Опытные животные2. Experienced animals 77 1:101:10 Лечебные свечиHealing candles 88 1:101:10 99 1:801:80 1010 1:201:20 23,3±11,523.3 ± 11.5 11eleven 1:101:10 1212 1:101:10 3. Интактные животные3. Intact animals 1313 <1:10<1:10 14fourteen <1:10<1:10 15fifteen <1:10<1:10 <1:10<1:10 1616 <1:10<1:10 1717 <1:10<1:10 18eighteen <1:10<1:10

Пример 5. Исследование индукции интерферона при использовании суппозиториев в клинической практике.Example 5. The study of the induction of interferon when using suppositories in clinical practice.

Свечами, полученными согласно Примеру 1, в условиях стационара лечили больных (мужчины) по поводу хламидиоза. Курс лечения составил 10 свечей по 1 суппозиторию ежедневно утром или вечером. Контроль титра интерферона проводили в сыворотке крови пациентов до лечения, во время приема суппозиториев на 2, 3, 5 день и через 10 дней после окончания курса терапии. Интерферониндуцирующую активность определяли титрованием сывороток крови, полученных от больных, в 96-луночных планшетах в перевиваемой линии клеток легкого эмбриона человека Л-68 по стандартной методике в среде Игла-МЕМ с добавлением 7% сыворотки КРС. Полученные данные представлены в Таблице 3.Candles obtained according to Example 1 in a hospital treated patients (men) for chlamydia. The course of treatment was 10 suppositories, 1 suppository daily in the morning or in the evening. The control of interferon titer was carried out in the blood serum of patients before treatment, while taking suppositories on days 2, 3, 5 and 10 days after the end of the course of therapy. Interferon-inducing activity was determined by titration of blood sera obtained from patients in 96-well plates in a transplantable cell line of human lung embryo L-68 according to the standard method in Igla-MEM medium supplemented with 7% cattle serum. The data obtained are presented in Table 3.

Таблица 3.Table 3. Интерферониндуцирующая активность суппозиториевSuppository interferon-inducing activity ПациентA patient Титр интерферона в сыворотке крови до леченияSerum interferon titer before treatment Титр интерферона в сыворотке крови во время леченияSerum interferon titer during treatment Титр интерферона в сыворотке крови после леченияSerum interferon titer after treatment Больной К., 31 годPatient K., 31 years old 1:81: 8 1:321:32 1:21: 2 Больной Ч., 57 летPatient C., 57 years old 1:21: 2 1: 161: 16 1:21: 2 Больной Б., 26 летPatient B., 26 years old 1:21: 2 1:161:16 1:41: 4

Данные лабораторных исследований свидетельствуют о том, что ректальные свечи активно индуцируют эндогенный интерферон in vivo, оказывая системное действие. Показано, что в ответ на проводимое лечение (курс из 10 свечей) уровень сывороточного интерферона возрастает через 48 часов в среднем в 2-4 раза.Laboratory data suggest that rectal suppositories actively induce endogenous interferon in vivo, exerting a systemic effect. It was shown that in response to the treatment (a course of 10 suppositories), the level of serum interferon increases after 48 hours on average 2-4 times.

У всех больных отмечалось значительное уменьшение или полное исчезновение воспалительных процессов.All patients showed a significant decrease or complete disappearance of inflammatory processes.

Таким образом, полученные данные показали высокую эффективность применения индуктора интерферона на основе комплекса натриевых солей одно- и двуспиральных РНК природного происхождения в виде свечи.Thus, the data obtained showed the high efficiency of using an interferon inducer based on a complex of sodium salts of single- and double-stranded RNAs of natural origin in the form of a candle.

ЛИТЕРАТУРАLITERATURE

1. Ф.И.Ершов, В.М.Жданов, в кн. "Индукторы интерферона", М., 1982 г., стр.7-18.1. F.I. Ershov, V.M.Zhdanov, in the book. "Inductors of interferon", M., 1982, pp. 7-18.

2. М.Д.Машковский, в кн. "Лекарственные средства", М.: Медицина, 1988 г., т.2, стр.386-387.2. M.D. Mashkovsky, in the book. "Medicines", M .: Medicine, 1988, vol. 2, pp. 386-387.

3. В.И.Масычева, И.Г.Надолинная // Острая токсичность и кумулятивные свойства полирибонуклеотидных комплексов поли И: поли Ц и поли Г: поли Ц // Фармакол. токсикол. // 1981 г., №3, стр.353-358.3. V.I.Masycheva, I.G. Nadolinnaya // Acute toxicity and cumulative properties of poly I: poly I: poly C and poly G: poly C // Farmakol. toxicol. // 1981, No. 3, pp. 353-358.

4. В.Г.Матвеева // Исследование мутагенной активности синтетических индукторов интерферона на лабораторных мышах // Вопр. вирусологии // 1982 г., №5, стр.540-543.4. V.G. Matveeva // Study of the mutagenic activity of synthetic interferon inducers in laboratory mice // Vopr. Virology // 1982, No. 5, pp. 540-543.

5. Ф.И.Ершов, Н.П.Чижов, З.Б.Тазулахова // Противовирусные средства (справочник) // С-Петербург, 1993 г., УДК 616.988-085.281.8, стр.68-70.5. F.I. Ershov, N.P. Chizhov, Z.B. Tazulakhova // Antiviral agents (reference) // St. Petersburg, 1993, UDC 616.988-085.281.8, pp. 68-70.

6. Патент США №4283393, кл. А61К 31/70, опубл. 11.08.1981 г.6. US patent No. 4283393, cl. A61K 31/70, publ. 08/11/1981

7. Патент РФ №2162687, кл. А61К 9/02, опубл. БИ №4 за 2001 г.7. RF patent No. 2162687, cl. A61K 9/02, publ. BI No. 4 for 2001

8. Патент РФ №2123339, кл. А61К 31/70, опубл. БИ №35 за 1998 г.8. RF patent №2123339, cl. A61K 31/70, publ. BI No. 35 for 1998

Claims (6)

1. Суппозиторий на основе индуктора интерферона, характеризующийся тем, что содержит в качестве индуктора интерферона комплекс натриевых солей одно-двуспиральных РНК природного происхождения из киллерных дрожжей Saccharomyces cerevisiae, стабилизатор, выбранный из группы хлоргексидина биглюконат, нипагин, натрий карбоксиметилцеллюлоза, а в качестве вспомогательных веществ гидрофильную, или липофильную, или дифильную основы при следующем соотношении ингредиентов на 1 свечу массой 1,0 г:1. A suppository based on an interferon inducer, characterized in that it contains, as an interferon inducer, a complex of sodium salts of single-stranded RNA of natural origin from killer yeast Saccharomyces cerevisiae, a stabilizer selected from the group of chlorhexidine bigluconate, nipagin, sodium carboxymethyl cellulose, and as hydrophilic, or lipophilic, or diphilic bases in the following ratio of ingredients per 1 candle weighing 1.0 g: Комплекс натриевых солей одно- и двуспиральных РНК киллерных дрожжей Saccharomyces cerevisiaeThe complex of sodium salts of single- and double-stranded RNA of killer yeast Saccharomyces cerevisiae 50-150 мкг50-150 mcg Стабилизатор, выбранный из группы хлоргексидина биглюконат, нипагин, натрий карбоксиметилцеллюлозаA stabilizer selected from the group of chlorhexidine bigluconate, nipagin, sodium carboxymethyl cellulose 10-3 0 мкг10-3 0 mcg Вспомогательные веществаExcipients ОстальноеRest
2. Суппозиторий по п.1, отличающийся тем, что в качестве вспомогательных веществ он содержит жировую основу, включающую твердый кондитерский жир или кулинарный жир и эмульгатор Т-2, и поверхностно-активное вещество (ПАВ) Твин - 80; при этом основа может дополнительно содержать масло какао до 0,15 г в 1 г смеси и парафин до 0,10 г, а содержание эмульгатора Т-2 и ПАВ Твин-80 составляет по 0,03 г в 1 г смеси.2. The suppository according to claim 1, characterized in that it contains a fat base as auxiliary substances, including solid confectionery fat or cooking oil and T-2 emulsifier, and Tween - 80 surfactant; the base may additionally contain cocoa butter up to 0.15 g per 1 g of the mixture and paraffin up to 0.10 g, and the content of the emulsifier T-2 and Tween-80 surfactant is 0.03 g per 1 g of the mixture. 3. Суппозиторий по п.1, отличающийся тем, что он содержит гидрофильную основу, включающую полиэтиленоксиды (1500 и 400) и глицерин в количестве 0,05 г на 1 г смеси.3. The suppository according to claim 1, characterized in that it contains a hydrophilic base, including polyethylene oxides (1500 and 400) and glycerin in an amount of 0.05 g per 1 g of the mixture. 4. Суппозиторий по п.1, отличающийся тем, что он содержит дифильную основу, включающую полиэтиленоксиды (1500 и 400), твердый пищевой жир и эмульгатор Т-2 и ПАВ Твин-80.4. The suppository according to claim 1, characterized in that it contains a diphilic base, including polyethylene oxides (1500 and 400), solid edible fat and T-2 emulsifier and Tween-80 surfactant. 5. Суппозиторий по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что он дополнительно содержит в качестве антиоксиданта витамин Е в количестве 0,0001-0,0005 г в 1 г смеси.5. A suppository according to any one of claims 1 to 4, characterized in that it additionally contains vitamin E as an antioxidant in an amount of 0.0001-0.0005 g per 1 g of the mixture. 6. Суппозиторий по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что он дополнительно содержит диметилсульфоксид для увеличения проницаемости слизистых оболочек в количестве 0,0005-0,0025 г в 1 г смеси.6. A suppository according to any one of claims 1 to 4, characterized in that it further comprises dimethyl sulfoxide to increase the permeability of the mucous membranes in an amount of 0.0005-0.0025 g per 1 g of the mixture.
RU2005108089/15A 2005-03-22 2005-03-22 Interferon inductor suppositories RU2328272C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2005108089/15A RU2328272C2 (en) 2005-03-22 2005-03-22 Interferon inductor suppositories

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2005108089/15A RU2328272C2 (en) 2005-03-22 2005-03-22 Interferon inductor suppositories

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2005108089A RU2005108089A (en) 2006-09-10
RU2328272C2 true RU2328272C2 (en) 2008-07-10

Family

ID=37112264

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2005108089/15A RU2328272C2 (en) 2005-03-22 2005-03-22 Interferon inductor suppositories

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2328272C2 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2427373C1 (en) * 2010-11-08 2011-08-27 Виктор Вениаминович Тец Method for endogenous interferon induction
RU2496783C1 (en) * 2012-05-24 2013-10-27 Общество с ограниченной ответственностью "ВИТАЛАНГ" Soapy amphiphilic interferon gamma inducer penetrating readily through biological membranes

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2123339C1 (en) * 1996-06-18 1998-12-20 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Antiviral agent
RU2162687C2 (en) * 1998-02-03 2001-02-10 Баринский Игорь Феликсович Improved medicinal form of interferon inductor
RU2172631C2 (en) * 1999-10-08 2001-08-27 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Prolonged-effect interferon inductor

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2123339C1 (en) * 1996-06-18 1998-12-20 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Antiviral agent
RU2162687C2 (en) * 1998-02-03 2001-02-10 Баринский Игорь Феликсович Improved medicinal form of interferon inductor
RU2172631C2 (en) * 1999-10-08 2001-08-27 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Prolonged-effect interferon inductor

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2427373C1 (en) * 2010-11-08 2011-08-27 Виктор Вениаминович Тец Method for endogenous interferon induction
WO2012064222A1 (en) * 2010-11-08 2012-05-18 Tets Viktor Veniaminovich Agent for inducing endogenous interferon
US10029990B2 (en) 2010-11-08 2018-07-24 Viktor Veniaminovich Tets Agent for inducing endogenous interferon
RU2496783C1 (en) * 2012-05-24 2013-10-27 Общество с ограниченной ответственностью "ВИТАЛАНГ" Soapy amphiphilic interferon gamma inducer penetrating readily through biological membranes

Also Published As

Publication number Publication date
RU2005108089A (en) 2006-09-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2266512T3 (en) COMPOSITIONS TO INHIBIT ANGIOGENESIS.
JPH0759498B2 (en) Long-term adhesive antifungal suppository
JPH11504000A (en) Thiols promote proliferation of hematopoietic progenitor cells
JPH08501317A (en) Antibacterial interferon-inducing drug
RU2673807C2 (en) Agent possessing biocidal action
CN111346081B (en) Novel use of a pharmaceutical composition comprising n-valeric acid, indole propionic acid and sodium n-butyrate
TW201902474A (en) Compounds for treating stroke and reducing nerve damage and uses thereof
JP2004526763A (en) Topical macrolide pharmaceutical composition in ophthalmology
RU2328272C2 (en) Interferon inductor suppositories
US9314446B2 (en) Sustained releasing pharmaceutical composition
CN111084765A (en) Application of cannabidiol hydrate in preparation of medicine for preventing and/or treating brain injury and medicine composition of cannabidiol hydrate
RU2197248C2 (en) Medicinal preparation eliciting immunomodulating, immunocorrecting, antiparasitic, antisclerotic, antiviral, antibacterial, antifungal, anti-inflammatory and antitumor effect and method of its preparing
JP2021130688A (en) Composition for the treatment of infertility in female subjects
CN118319920B (en) Application of taraxasterol or its salt in preparing medicine for preventing or treating septic brain injury
CN107126418B (en) Diclofenac sodium pharmaceutical composition for injection and preparation method thereof
RU2404796C1 (en) Antivirus agent with human leukocytic human interferon based on chitosan succinate
US3852454A (en) Treatment of rheumatoid arthritis
RU2744919C1 (en) Remedy for the treatment of endometritis in cows
RU2814279C2 (en) Composition for preventing or treating proctological diseases
RU2751034C1 (en) Method of production of a preparation for treatment of bovine endometritis
RU2411032C2 (en) Drug preparation tilorone in suppositories
RU2552851C1 (en) ENCAPSULATED LYPOSOMAL ANTIVIRAL AGENT BASED ON HUMAN INTERFERON ALPHA-2b FOR VAGINAL APPLICATION
RU2255086C1 (en) 1-methyl-2-phenylthiomethyl-3-carbethoxy-4-dimethylaminomethyl-5- hydroxy-6 -bromoindole mesylate eliciting antiviral activity and pharmaceutical composition with its usage
RU2414223C1 (en) Medication possessing immunostimulating and hemostimulating action
US20250152606A1 (en) Induction of irreversible infertility in female mammalian animals using a single progesterone implant

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20090323