RU2394816C1 - Neurotropic agent with antioxidant, antihypoxic, neuroprotector, antiamnesic and anti-motion sickness activity and capable of enhancing cognitive functions - Google Patents
Neurotropic agent with antioxidant, antihypoxic, neuroprotector, antiamnesic and anti-motion sickness activity and capable of enhancing cognitive functions Download PDFInfo
- Publication number
- RU2394816C1 RU2394816C1 RU2008146322/04A RU2008146322A RU2394816C1 RU 2394816 C1 RU2394816 C1 RU 2394816C1 RU 2008146322/04 A RU2008146322/04 A RU 2008146322/04A RU 2008146322 A RU2008146322 A RU 2008146322A RU 2394816 C1 RU2394816 C1 RU 2394816C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- emop
- mexidol
- rats
- animals
- dose
- Prior art date
Links
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 53
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 title claims abstract description 19
- 230000003496 anti-amnesic effect Effects 0.000 title claims abstract description 15
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 title claims abstract description 9
- 239000003076 neurotropic agent Substances 0.000 title claims abstract description 6
- 230000000141 anti-hypoxic effect Effects 0.000 title claims description 17
- 201000003152 motion sickness Diseases 0.000 title abstract description 4
- 230000001067 neuroprotector Effects 0.000 title abstract description 3
- 239000002475 cognitive enhancer Substances 0.000 title abstract 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 title abstract 2
- JPGDYIGSCHWQCC-UHFFFAOYSA-N emoxypine Chemical compound CCC1=NC(C)=CC=C1O JPGDYIGSCHWQCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 claims description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 29
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 abstract description 28
- 208000016988 Hemorrhagic Stroke Diseases 0.000 abstract description 23
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 abstract description 8
- 208000032382 Ischaemic stroke Diseases 0.000 abstract description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 abstract description 2
- IKMNOGHPKNFPTK-UHFFFAOYSA-N 2-ethyl-6-methylpyridin-1-ium-3-ol;4-hydroxy-4-oxobutanoate Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O.CCC1=NC(C)=CC=C1O IKMNOGHPKNFPTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 122
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 96
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 77
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 59
- SLGAYYOOVPWBEU-UHFFFAOYSA-N 1,2,4-thiadiazole-3,5-diamine Chemical compound NC1=NSC(N)=N1 SLGAYYOOVPWBEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 45
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 42
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 40
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 38
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 38
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 35
- STECJAGHUSJQJN-FWXGHANASA-N scopolamine Chemical compound C1([C@@H](CO)C(=O)O[C@H]2C[C@@H]3N([C@H](C2)[C@@H]2[C@H]3O2)C)=CC=CC=C1 STECJAGHUSJQJN-FWXGHANASA-N 0.000 description 35
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 30
- 229930000680 A04AD01 - Scopolamine Natural products 0.000 description 28
- STECJAGHUSJQJN-GAUPFVANSA-N Hyoscine Natural products C1([C@H](CO)C(=O)OC2C[C@@H]3N([C@H](C2)[C@@H]2[C@H]3O2)C)=CC=CC=C1 STECJAGHUSJQJN-GAUPFVANSA-N 0.000 description 28
- STECJAGHUSJQJN-UHFFFAOYSA-N N-Methyl-scopolamin Natural products C1C(C2C3O2)N(C)C3CC1OC(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 STECJAGHUSJQJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 229960002646 scopolamine Drugs 0.000 description 28
- 238000012549 training Methods 0.000 description 28
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 27
- 208000031091 Amnestic disease Diseases 0.000 description 27
- 230000006986 amnesia Effects 0.000 description 27
- 208000020658 intracerebral hemorrhage Diseases 0.000 description 22
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 description 18
- 230000007971 neurological deficit Effects 0.000 description 17
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 17
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 15
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 14
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 11
- GMZVRMREEHBGGF-UHFFFAOYSA-N Piracetam Chemical compound NC(=O)CN1CCCC1=O GMZVRMREEHBGGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229960004526 piracetam Drugs 0.000 description 9
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 9
- 241000772415 Neovison vison Species 0.000 description 8
- 230000009471 action Effects 0.000 description 8
- 238000011161 development Methods 0.000 description 7
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 6
- 108700019404 Pro-Gly-Pro- ACTH (4-7) Proteins 0.000 description 6
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 6
- AFEHBIGDWIGTEH-AQRCPPRCSA-N semax Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CNC=N1 AFEHBIGDWIGTEH-AQRCPPRCSA-N 0.000 description 6
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010020591 Hypercapnia Diseases 0.000 description 5
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 5
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 5
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 5
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 5
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 4
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 4
- 208000019430 Motor disease Diseases 0.000 description 4
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 4
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 4
- 208000007542 Paresis Diseases 0.000 description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 4
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 4
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 4
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 3
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 3
- 231100000642 Histotoxic hypoxia Toxicity 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 230000003109 amnesic effect Effects 0.000 description 3
- 210000001168 carotid artery common Anatomy 0.000 description 3
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 3
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 3
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 230000002276 neurotropic effect Effects 0.000 description 3
- 229960001227 oxiracetam Drugs 0.000 description 3
- IHLAQQPQKRMGSS-UHFFFAOYSA-N oxiracetam Chemical compound NC(=O)CN1CC(O)CC1=O IHLAQQPQKRMGSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 230000005062 synaptic transmission Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GRFNBEZIAWKNCO-UHFFFAOYSA-N 3-pyridinol Chemical class OC1=CC=CN=C1 GRFNBEZIAWKNCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 2
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 description 2
- 206010024264 Lethargy Diseases 0.000 description 2
- 206010044522 Traumatic haematoma Diseases 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 230000003459 anti-dromic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 2
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 2
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 2
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 210000000991 chicken egg Anatomy 0.000 description 2
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-M glutaminate Chemical compound [O-]C(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000002425 internal capsule Anatomy 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 206010027175 memory impairment Diseases 0.000 description 2
- 230000006993 memory improvement Effects 0.000 description 2
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 2
- 230000001191 orthodromic effect Effects 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001176 projection neuron Anatomy 0.000 description 2
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 2
- WUBBRNOQWQTFEX-UHFFFAOYSA-N 4-aminosalicylic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C(O)=C1 WUBBRNOQWQTFEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- 206010058842 Cerebrovascular insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000032274 Encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 206010040880 Skin irritation Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- LVKZSFMYNWRPJX-UHFFFAOYSA-N benzenearsonic acid Natural products O[As](O)(=O)C1=CC=CC=C1 LVKZSFMYNWRPJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 238000009811 bilateral tubal ligation Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 125000006367 bivalent amino carbonyl group Chemical group [H]N([*:1])C([*:2])=O 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- OXOPZJSRBKSRBY-UHFFFAOYSA-N butanedioic acid;4-ethyl-3-methyl-1h-pyridin-2-one Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O.CCC1=CC=NC(O)=C1C OXOPZJSRBKSRBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N chloral hydrate Chemical compound OC(O)C(Cl)(Cl)Cl RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002327 chloral hydrate Drugs 0.000 description 1
- 230000001713 cholinergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009194 climbing Effects 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- XEYBHCRIKKKOSS-UHFFFAOYSA-N disodium;azanylidyneoxidanium;iron(2+);pentacyanide Chemical compound [Na+].[Na+].[Fe+2].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].[O+]#N XEYBHCRIKKKOSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001879 hippocampal ca1 region Anatomy 0.000 description 1
- 208000018879 impaired coordination Diseases 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 210000003715 limbic system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000004973 motor coordination Effects 0.000 description 1
- 210000000478 neocortex Anatomy 0.000 description 1
- 230000004776 neurological deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000001962 neuropharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001777 nootropic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000004796 pathophysiological change Effects 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229920006012 semi-aromatic polyamide Polymers 0.000 description 1
- 230000036556 skin irritation Effects 0.000 description 1
- 231100000475 skin irritation Toxicity 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229940083618 sodium nitroprusside Drugs 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000033912 thigmotaxis Effects 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к созданию нейротропного средства, обладающего антиоксидантной, противогипоксической, нейропротекторной, антиамнестической и противоукачивающей активностью и способностью улучшать когнитивные функции, предназначенного, в частности, для лечения острых и хронических нарушений мозгового кровообращения, в том числе ишемического и геморрагического инсульта и других состояний и заболеваний, сопровождающихся снижением когнитивных функций и нейродегенерацией, в том числе при старении.The invention relates to medicine, namely to the creation of a neurotropic agent with antioxidant, antihypoxic, neuroprotective, antiamnestic and anti-pumping activity and the ability to improve cognitive function, intended, in particular, for the treatment of acute and chronic cerebrovascular disorders, including ischemic and hemorrhagic stroke and other conditions and diseases accompanied by a decrease in cognitive functions and neurodegeneration, including aging.
Одной из актуальных проблем современной медицины является изыскание и разработка новых нейротропных средств, способных эффективно защищать мозг. Актуальность этого определяется, в частности, высокой летальностью при инсульте, а также тем, что применяемые при нем препараты разных фармакологических групп, как правило, не являются средствами патогенетической терапии, малоэффективны и имеют серьезные побочные эффекты [5, 6].One of the urgent problems of modern medicine is the search and development of new neurotropic drugs that can effectively protect the brain. The relevance of this is determined, in particular, by the high mortality in stroke, as well as the fact that the drugs used in it of different pharmacological groups, as a rule, are not a means of pathogenetic therapy, are ineffective and have serious side effects [5, 6].
Ближайший аналог заявляемого средства (как по химическому строению, так и по фармакологическим свойствам) - отечественный лекарственный препарат мексидол (этилметилгидроксипиридина сукцинат: 2-этил-6-метил-3-оксипиридина сукцинат), который является производным 3-оксипиридина и обладает нейротропной, нейропротекторной и антиоксидантной активностью, из-за чего его широко используют в неврологии при острой и хронической недостаточности мозгового кровообращения и связанных с ней заболеваниях, в том числе при инсульте и его последствиях [3, 4, 11, 13]. Однако установлено, что в клинике и эксперименте мексидол не всегда эффективен при этой патологии. Например, мексидол давал положительный клинический эффект лишь у 63% больных, который преобладал у пациентов с дисциркуляторной энцефалопатией атеросклеротического генеза [12]. Более того, мексидол обладает недостаточной противогипоксической и ноотропной активностью.The closest analogue of the claimed drug (both in chemical structure and in pharmacological properties) is the domestic drug mexidol (ethylmethylhydroxypyridine succinate: 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine succinate), which is a derivative of 3-hydroxypyridine and has a neurotropic, neuroprotector and antioxidant activity, which is why it is widely used in neurology in acute and chronic cerebrovascular insufficiency and related diseases, including stroke and its consequences [3, 4, 11, 13]. However, it was found that in the clinic and experiment, Mexidol is not always effective in this pathology. For example, mexidol gave a positive clinical effect in only 63% of patients, which prevailed in patients with atherosclerotic discirculatory encephalopathy [12]. Moreover, Mexidol has insufficient antihypoxic and nootropic activity.
Поэтому необходимо изыскание в ряду производных 3-оксипиридина новых веществ, имеющих широкий спектр фармакологического действия и способных более активно и эффективно, чем мексидол, действовать, в частности, на моделях инсульта в эксперименте.Therefore, it is necessary to find new substances in the series of derivatives of 3-hydroxypyridine that have a wide spectrum of pharmacological action and are able to act more actively and efficiently than mexidol, in particular, on stroke models in the experiment.
В связи с изложенным задачей настоящего изобретения является создание нового нейротропного средства, обладающего антиоксидантной, противогипоксической, нейропротекторной, антиамнестической и противоукачивающей активностью и способностью улучшать когнитивные функции.In connection with the stated objective of the present invention is the creation of a new neurotropic agent with antioxidant, antihypoxic, neuroprotective, antiamnestic and anti-protracting activity and the ability to improve cognitive function.
Поставленная цель достигается применением в качестве нового нейротропного средства 2-этил-6-метил-3-оксипиридиния N-ацетил-L-глутамината (ЭМОП-АГ) в эффективных количествах, имеющего выраженное нейропротекторное действие в сочетании с антиоксидантной, противогипоксической, антиамнестической, противоукачивающей активностью и способностью улучшать когнитивные функции.This goal is achieved by using, as a new neurotropic agent, 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridinium N-acetyl-L-glutaminate (EMOP-AG) in effective amounts, which has a pronounced neuroprotective effect in combination with antioxidant, antihypoxic, antiamnestic, anti-pumping activity and ability to improve cognitive functions.
Изобретение иллюстрируется следующими ниже примерами. При этом примеры 2-8 иллюстрируют эффективность ЭМОП-АГ в качестве антиоксиданта, противогипоксического, антиамнестического, противоукачивающего и улучшающего когнитивные функции средства в сравнении с ближайшим аналогом мексидолом, а также другими препаратами сравнения.The invention is illustrated by the following examples. Moreover, examples 2-8 illustrate the effectiveness of EMOP-AG as an antioxidant, antihypoxic, antiamnestic, anti-protracting and improving cognitive functions of the drug in comparison with the closest analogue mexidol, as well as other comparison drugs.
Пример 1. В трехгорлую колбу, снабженную мешалкой, термометром и холодильником, загружают 30 мл ацетонитрила, затем при перемешивании постепенно добавляют 1,0 г 2-этил-6-метил-3-оксипиридина и 1,38 г кислоты N-ацетил-L-глутаминовой. Реакционную массу нагревают до температуры кипения и выдерживают при перемешивании в течение 1 часа, после чего охлаждают до комнатной температуры, ацетонитрил декантируют, к остатку прибавляют 10 мл диэтилового эфира, тщательно перемешивают и кристаллизуют при температуре 10-15°С.Example 1. In a three-necked flask equipped with a stirrer, a thermometer and a refrigerator, 30 ml of acetonitrile was charged, then 1.0 g of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine and 1.38 g of N-acetyl-L acid were gradually added with stirring. -glutamine. The reaction mass is heated to boiling point and kept under stirring for 1 hour, then cooled to room temperature, acetonitrile is decanted, 10 ml of diethyl ether are added to the residue, mix thoroughly and crystallize at a temperature of 10-15 ° С.
Получают - 2,1 г белого с кремоватым оттенком кристаллического порошка с Тпл. 95÷97°С, растворимого в воде, в спиртах.Get - 2.1 g of a white with a creamy tint crystalline powder with a melting point. 95 ÷ 97 ° C, soluble in water, in alcohols.
Найдено, %: С 55,19; Н 6,77 N 8,62. C15H22N2O6 Found,%: C 55.19; H, 6.77; N, 8.62. C 15 H 22 N 2 O 6
Вычислено, %: С 55,24; Н 6,74; N 8,59Calculated,%: C 55.24; H 6.74; N 8.59
ИК-спектр (ν, см-1): 3270 (NH), 2600 (N+), 1720 (C=O), 1600 (C=C, аром), 1560 (NHCO)IR (ν, cm -1 ): 3270 (NH), 2600 (N + ), 1720 (C = O), 1600 (C = C, arom), 1560 (NHCO)
Пример 2. Антиоксидантная активность 2-этил-6-метил-3-оксипиридиния N-ацетил-L-глутамината (ЭМОП-АГ) в модельной системе многослойных липосом из липопротеинов желтка куриных яиц (табл.1)Example 2. Antioxidant activity of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridinium N-acetyl-L-glutaminate (EMOP-AG) in the model system of multilayer liposomes from chicken egg yolk lipoproteins (Table 1)
Антиоксидантную (антиокислительную) активность ЭМОП-АГ и препаратов сравнения (отечественный препарат мексидол и эталонный антигипоксант амтизол) оценивали хемилюминесцентным методом в модельной системе многослойных липосом из липопротеинов желтка куриных яиц [2]. Регистрировали все стадии железоиндуцированной хемилюминесценции: быструю вспышку, латентный период и медленную вспышку.The antioxidant (antioxidant) activity of EMOP-AH and comparison drugs (the domestic preparation Mexidol and the reference antihypoxant Amtizol) were evaluated by the chemiluminescent method in a model system of multilayer liposomes from chicken egg yolk lipoproteins [2]. All stages of iron-induced chemiluminescence were recorded: fast flash, latent period and slow flash.
В модельной системе многослойных липосом из липопротеинов желтка куриных яиц ЭМОП-АГ тормозил перекисное окисление липидов на всех стадиях железоиндуцированной хемилюминесценции: уменьшал интенсивность быстрой вспышки и скорость медленной вспышки, увеличивал латентный период. При этом по антиоксидантной активности ЭМОП-АГ превосходил мексидол почти в 2 раза, а также эталонный антигипоксант амтизол в 3 раза (табл.1).In the model system of multilayer liposomes of egg yolk lipoproteins, EMOP-AG slowed down lipid peroxidation at all stages of iron-induced chemiluminescence: it reduced the intensity of a fast flash and the speed of a slow flash, increased the latent period. At the same time, the antioxidant activity of EMOP-AG exceeded Mexidol almost 2 times, and the reference antihypoxant Amtizol 3 times (Table 1).
При выполнении экспериментальной части работы (опыты на животных - примеры 3-8) в соответствии с Российскими национальными правилами исследований («Правила лабораторной практики в Российской Федерации»; приказ Минздрава России №267 от 19.06.2003; и др.) и международными требованиями были использованы модели и методы, рекомендованные Фармакологическим комитетом для проведения подобных исследований, утвержденные Министерством здравоохранения и социального развития РФ и соответствующие рекомендациям ВОЗ, касающихся правил надлежащей лабораторной практики (GLP - "Good Laboratory Practice") [10]. Животных получали из Центрального питомника лабораторных животных РАМН («Столбовая», Московская область). Содержание животных соответствовало правилам GLP и осуществлялось в соответствии с нормативным документом «Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию вивариев», утвержденным Главным государственным санитарным врачом 06.04.1973 г. №1045-73, и приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003.When performing the experimental part of the work (animal experiments - examples 3-8) in accordance with the Russian national research rules (“Laboratory Practice in the Russian Federation”; Order of the Ministry of Health of Russia No. 267 of 06/19/2003; and others.) And international requirements were used models and methods recommended by the Pharmacological Committee for such studies, approved by the Ministry of Health and Social Development of the Russian Federation and consistent with WHO recommendations regarding the rules of an appropriate laboratory molecular Practice (GLP - "Good Laboratory Practice") [10]. Animals were obtained from the Central Laboratory Animal Nursery of the Russian Academy of Medical Sciences (Pillar, Moscow Region). The keeping of animals was in accordance with GLP rules and was carried out in accordance with the regulatory document “Sanitary Rules for the Design, Equipment and Maintenance of Vivariums”, approved by the Chief State Sanitary Doctor on 04/06/1973 No. 1045-73, and by order of the Ministry of Health of the Russian Federation No. 267 of 06/19/2003.
Пример 3. Противогипоксическое действие 2-этил-6-метил-3-оксипиридиния N-ацетил-L-глутамината (ЭМОП-АГ) на различных моделях острой гипоксии у мышей (табл.2-6)Example 3. Antihypoxic effect of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridinium N-acetyl-L-glutaminate (EMOP-AG) in various models of acute hypoxia in mice (table 2-6)
Исследования выполнены на белых нелинейных мышах-самцах массой 20-28 г по методикам, описанным в «Методических рекомендациях по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств» [7] и «Руководстве по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» [10].The studies were performed on white nonlinear male mice weighing 20-28 g according to the methods described in the "Methodological recommendations for the experimental study of drugs proposed for clinical study as antihypoxic drugs" [7] and the Guide to the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances " [10].
Острую нормобарическую гипоксическую гипоксию с гиперкапнией воспроизводили путем помещения мышей (поодиночке) в гермокамеру. Острую гипобарическую гипоксию моделировали у мышей в проточно-вытяжной барокамере; животных поднимали со скоростью 50 м/с до "высоты" 11000 м. Острую гемическую гипоксию воспроизводили путем подкожного (п/к) введения мышам метгемоглобинообразователя натрия нитрита в дозе 300 мг/кг. Острую гистотоксическую гипоксию моделировали путем п/к введения мышам натрия нитропруссида в дозе 20 мг/кг. Регистрировали продолжительность жизни животных. Исследуемые вещества вводили однократно внутрибрюшинно (в/б) за 30 (амтизол) или 60 минут (все остальные вещества) до опыта. Животным контрольных групп вводили в/б 0,9% раствор натрия хлорида (NaCl) в том же объеме.Acute normobaric hypoxic hypoxia with hypercapnia was reproduced by placing mice (alone) in a pressure chamber. Acute hypobaric hypoxia was modeled in mice in a flow-exhaust pressure chamber; the animals were raised at a speed of 50 m / s to a "height" of 11,000 m. Acute hemic hypoxia was reproduced by subcutaneous (sc) administration of mice with sodium hemoglobin former nitrite at a dose of 300 mg / kg. Acute histotoxic hypoxia was modeled by sc administration of sodium nitroprusside at a dose of 20 mg / kg to mice. The life span of the animals was recorded. The test substances were administered once intraperitoneally (ip) 30 (amtizol) or 60 minutes (all other substances) before the experiment. Animals of the control groups were injected with a 0.9% sodium chloride (NaCl) solution in the same volume.
На модели острой нормобарической гипоксической гипоксии с гиперкапнией (в гермокамере) ЭМОП-АГ в дозах 10 и 30 мг/кг значимо (р<0,05) увеличивал продолжительность жизни мышей на 25% и 30% соответственно, примерно также действовали мексидол (100 мг/кг - на 27%) и эталонный антигипоксант амтизол (30 мг/кг - на 28%) (табл.2).In the model of acute normobaric hypoxic hypoxia with hypercapnia (in a pressure chamber), EMOP-AG in doses of 10 and 30 mg / kg significantly (p <0.05) increased the life expectancy of mice by 25% and 30%, respectively, mexidol (100 mg / kg - by 27%) and the reference antihypoxant amtizol (30 mg / kg - by 28%) (Table 2).
На модели острой гипобарической гипоксии ЭМОП-АГ в дозах 10 и 30 мг/кг значимо (р<0,05) увеличивал продолжительность жизни мышей на 90% и 121% соответственно, превосходя в дозе 10 мг/кг эталонный антигипоксант амтизол (10 мг/кг, в 1,5 раза, р<0,05), а в дозе 30 мг/кг - мексидол (100 мг/кг, в 2,2 раза, р<0,05) (табл.3).In the model of acute hypobaric hypoxia, EMOP-AH at doses of 10 and 30 mg / kg significantly (p <0.05) increased the life expectancy of mice by 90% and 121%, respectively, exceeding the standard antihypoxant amtizol at a dose of 10 mg / kg (10 mg / kg, 1.5 times, p <0.05), and at a dose of 30 mg / kg - Mexidol (100 mg / kg, 2.2 times, p <0.05) (Table 3).
На модели острой гемической гипоксии ЭМОП-АГ в дозах 10 и 30 мг/кг значимо (р<0,05) увеличивал продолжительность жизни мышей на 26% и 29% соответственно, превосходя в дозе 10 мг/кг эталонный антигипоксант амтизол (10 мг/кг, в 1,2 раза, р<0,05), а в дозе 30 мг/кг - мексидол (100 мг/кг, в 1,2 раза, р<0,05) (табл.4).In the model of acute hemic hypoxia, EMOP-AH at doses of 10 and 30 mg / kg significantly (p <0.05) increased the life expectancy of mice by 26% and 29%, respectively, exceeding the standard antihypoxant amtizol at a dose of 10 mg / kg (10 mg / kg, 1.2 times, p <0.05), and at a dose of 30 mg / kg - Mexidol (100 mg / kg, 1.2 times, p <0.05) (Table 4).
На модели острой гистотоксической гипоксии ЭМОП-АГ в дозах 10 и 30 мг/кг значимо (р<0,05) увеличивал продолжительность жизни мышей на 25% и 33% соответственно, превосходя в дозе 10 мг/кг эталонный антигипоксант амтизол (10 мг/кг, в 1,1 раза, р<0,05), а в дозе 30 мг/кг - мексидол (100 мг/кг, в 1,3 раза, р<0,05) (табл.5).In the model of acute histotoxic hypoxia, EMOP-AH at doses of 10 and 30 mg / kg significantly (p <0.05) increased the life expectancy of mice by 25% and 33%, respectively, exceeding the standard antihypoxant amtizol at a dose of 10 mg / kg (10 mg / kg, 1.1 times, p <0.05), and at a dose of 30 mg / kg - Mexidol (100 mg / kg, 1.3 times, p <0.05) (Table 5).
Итак, на разных моделях острой гипоксии ЭМОП-АГ при однократном введении превосходит и/или не уступает эталонному антигипоксанту амтизолу и мексидолу.So, on different models of acute hypoxia, EMOP-AG with a single administration is superior to and / or not inferior to the reference antihypoxant amtizol and mexidol.
Также оценивали противогипоксическое действие ЭМОП-АГ при курсовом введении на модели острой гипобарической гипоксии. Острую гипобарическую гипоксию моделировали у мышей в проточно-вытяжной барокамере; животных поднимали со скоростью 20 м/с до высоты 11000 м. Экспозиция составляла 10 минут, затем в течение 5 минут животных "спускали" до исходных условий. В течение всей экспозиции оценивали состояние и поведение мышей, регистрировали продолжительность жизни животных и количество выживших мышей. ЭМОП-АГ вводили в/б в дозах 5, 10, 20 мг/кг ежедневно в течение 5 суток (сут) в 10 часов утра, последний раз введение осуществляли за 40 минут до опыта. Препарат сравнения мексидол вводили в/б в дозах 150 и 250 мг/кг ежедневно в течение 5 сут в 10 часов утра (последний раз - за 40 минут до опыта). Контрольным животным в течение 5 сут вводили в/б 0,9% раствор NaCl в эквивалентном объеме.The antihypoxic effect of EMOP-AH was also evaluated in the course of course administration in a model of acute hypobaric hypoxia. Acute hypobaric hypoxia was modeled in mice in a flow-exhaust pressure chamber; the animals were raised at a speed of 20 m / s to a height of 11000 m. The exposure was 10 minutes, then the animals were "lowered" to the initial conditions for 5 minutes. During the entire exposure, the state and behavior of mice were evaluated, and the life span of the animals and the number of surviving mice were recorded. EMOP-AG was administered ip in doses of 5, 10, 20 mg / kg daily for 5 days (days) at 10 a.m., the last time the introduction was carried out 40 minutes before the experiment. The comparison drug Mexidol was administered ip in doses of 150 and 250 mg / kg daily for 5 days at 10 a.m. (last time - 40 minutes before the experiment). Control animals were injected with a 0.9% NaCl solution in an equivalent volume for 5 days.
Обнаружено, что ЭМОП-АГ после курсового применения в дозе 10 мг/кг/сут (в течение 5 сут) достоверно (р<0,05) увеличивал продолжительность жизни мышей в условиях острой гипобарической гипоксии в 1,6 раза, а в дозе 20 мг/кг/сут - в 2,3 раза по сравнению с контролем (табл.6). Мексидол оказывал значимое (р<0,05) противогипоксическое действие только в дозе 250 мг/кг, увеличивая продолжительность жизни животных в 1,6 раза. По выраженности действия мексидол в дозе 250 мг/кг/сут уступал ЭМОП-АГ в дозе 20 мг/кг.It was found that EMOP-AG after course administration at a dose of 10 mg / kg / day (for 5 days) significantly (p <0.05) increased the life expectancy of mice in acute hypobaric hypoxia by 1.6 times, and at a dose of 20 mg / kg / day - 2.3 times compared with the control (table.6). Mexidol had a significant (p <0.05) antihypoxic effect only at a dose of 250 mg / kg, increasing the life expectancy of animals by 1.6 times. In terms of severity of action, Mexidol at a dose of 250 mg / kg / day was inferior to EMOP-AH at a dose of 20 mg / kg.
После 10-минутного нахождения мышей в барокамере на критической «высоте» 11000 м в контроле погибли все животные (100%). ЭМОП-АГ в дозе 10 мг/кг/сут достоверно (р<0,05) увеличивал количество выживших мышей до 50% по сравнению с контролем, а в дозе 20 мг/кг/сут - до 67% (табл.6). Мексидол в дозе 250 мг/кг/сут также достоверно уменьшал процент гибели животных (до 50%, р<0,05), но по эффекту он уступал ЭМОП-АГ (табл.6).After a 10-minute stay of mice in a pressure chamber at a critical "height" of 11,000 m, all animals died in the control (100%). EMOP-AG at a dose of 10 mg / kg / day significantly (p <0.05) increased the number of surviving mice to 50% compared with the control, and at a dose of 20 mg / kg / day to 67% (Table 6). Mexidol at a dose of 250 mg / kg / day also significantly reduced the percentage of death of animals (up to 50%, p <0.05), but it was inferior to EMOP-AG in effect (Table 6).
В условиях острой гипобарической гипоксии у всех контрольных животных наблюдались двигательные нарушения. Так, например, уже на «высоте» 6800 м у мышей появлялся тремор, а в течение времени нахождения на «высоте» 11000 м у контрольных мышей выявлялись четкие эпизоды периодического тремора (средний показатель - 12 эпизодов).In conditions of acute hypobaric hypoxia in all control animals, motor disorders were observed. So, for example, tremor appeared in mice already at a “height” of 6800 m, and during the time spent at a “height” of 11000 m, clear episodes of periodic tremor were revealed in control mice (average 12 episodes).
У мышей, получавших ЭМОП-АГ в дозах 5, 10 и 20 мг/кг/сут, тремор появлялся однократно (только при подъеме - на «высоте» 10500 м и не наблюдался на «высоте» 11000 м). Мексидол (250 мг/кг/сут) уменьшал количество эпизодов тремора: на «высоте» 11000 м наблюдалось 4 эпизода. Следовательно, ЭМОП-АГ в отличие от мексидола практически полностью предупреждает возникновение тремора и других двигательных нарушений, возникающих в условиях острой гипобарической гипоксии.In mice treated with EMOP-AH at doses of 5, 10 and 20 mg / kg / day, tremor appeared only once (only when lifting it was at a “height” of 10,500 m and was not observed at a “height” of 11,000 m). Mexidol (250 mg / kg / day) reduced the number of episodes of tremor: at the “height” of 11,000 m, 4 episodes were observed. Therefore, EMOP-AG, unlike Mexidol, almost completely prevents the occurrence of tremor and other motor disorders that occur in acute hypobaric hypoxia.
Таким образом, ЭМОП-АГ при курсовом применении в дозах 10 и 20 мг/кг/сут (ежедневно в течение 5 сут) оказывает выраженное противогипоксическое действие при острой гипобарической гипоксии. При этом ЭМОП-АГ существенно увеличивает продолжительность жизни и выживаемость животных, предупреждает возникновение двигательных нарушений, возникающих при подъеме на «высоту», и улучшает общее состояние животных. ЭМОП-АГ значительно превосходит мексидол по противогипоксической активности, давая эффект в значительно (в 25 раз) меньших дозах: одинаковое по выраженности противогипоксическое действие достигается при курсовом введении ЭМОП-АГ в дозе 10 мг/кг/сут, а мексидола - в дозе 250 мг/кг/сут.Thus, EMOP-AG with course use in doses of 10 and 20 mg / kg / day (daily for 5 days) has a pronounced antihypoxic effect in acute hypobaric hypoxia. In this case, EMOP-AG significantly increases the life expectancy and survival of animals, prevents the occurrence of motor disorders that occur when climbing to "height", and improves the general condition of animals. EMOP-AG significantly exceeds Mexidol in antihypoxic activity, giving an effect in significantly (25 times) lower doses: the same antihypoxic effect is achieved with the course administration of EMOP-AG in a dose of 10 mg / kg / day, and Mexidol in a dose of 250 mg / kg / day
Пример 4. Нейропротекторное действие 2-этил-6-метил-3-оксипиридиния N-ацетил-L-глутамината (ЭМОП-АГ) (табл.7-8)Example 4. The neuroprotective effect of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridinium N-acetyl-L-glutaminate (EMOP-AG) (table 7-8)
Исследования выполнены на белых нелинейных крысах-самцах массой 220-290 г, содержащихся в виварных условиях, у которых моделировали два вида инсульта - ишемический и геморрагический.The studies were performed on white non-linear male rats weighing 220-290 g, contained in vivaric conditions, in which two types of stroke were simulated - ischemic and hemorrhagic.
В I серии опытов исследовали нейропротекторное действие ЭМОП-АГ и препаратов сравнения у крыс (массой 220-290 г) с экспериментальной ишемией головного мозга. В качестве препаратов сравнения были выбраны мексидол и семакс, широко используемые сегодня в неврологии при лечении ишемического инсульта, а также эталонный антигипоксант амтизол. Ишемию головного мозга у крыс воспроизводили путем одномоментной перевязки (под эфирным наркозом) обеих общих сонных артерий. У ложнооперированных животных (контрольная группа №1) операция была ограничена этапом доступа к общим сонным артериям. В контрольной группе №2 крысы получали только 0,9% раствор NaCl. В подопытных группах животным вводили в/б различные вещества (ЭМОП-АГ и препараты сравнения) в разных дозах 1 раз в сутки (сут) в течение 7 сут; в первые сутки - через 1, 3 и 6 часов (ч) после операции. Животных после операции наблюдали в течение 2 недель с учетом выживаемости крыс. Неврологический дефицит у животных определяли (слепым методом) по шкале McGraw et al. [18] (в баллах) каждый час в течение 24 ч, а затем 1 раз в сутки. Тяжесть состояния определяли по сумме соответствующих баллов. У ложнооперированных животных неврологический дефицит отсутствовал.In the first series of experiments, the neuroprotective effect of EMOP-AH and comparison drugs in rats (weighing 220-290 g) with experimental cerebral ischemia was studied. Mexidol and Semax, which are widely used today in neurology in the treatment of ischemic stroke, as well as the reference antihypoxant amtizol, were chosen as comparison drugs. Brain ischemia in rats was reproduced by simultaneous ligation (under ether anesthesia) of both common carotid arteries. In false-operated animals (control group No. 1), the operation was limited to the stage of access to the common carotid arteries. In control group No. 2 rats received only 0.9% NaCl solution. In the experimental groups, animals were injected with various substances (EMOP-AH and comparison preparations) in various doses once a day (day) for 7 days; on the first day - after 1, 3 and 6 hours (h) after surgery. Animals after surgery were observed for 2 weeks, taking into account the survival of rats. Neurological deficits in animals were determined (blind) on the McGraw et al. [18] (in points) every hour for 24 hours, and then 1 time per day. The severity of the condition was determined by the sum of the corresponding points. False-operated animals had no neurological deficit.
Результаты исследования нейропротекторного действия веществ представлены в табл.7. Из нее видно, что у крыс контрольной группы №2 неврологический дефицит был наиболее выражен (8,8±0,1 балла) через 2 и 3 сут после двусторонней перевязки общих сонных артерий; при этом в контроле погибло 24% (16 крыс из 67) животных.The results of the study of the neuroprotective effect of substances are presented in table.7. It can be seen that in rats of the control group No. 2, the neurological deficit was most pronounced (8.8 ± 0.1 points) 2 and 3 days after bilateral ligation of the common carotid arteries; however, 24% (16 rats out of 67) animals died in the control.
Было обнаружено, что мексидол оказывает доза-зависимое нейропротекторное действие. Так, например, препарат уменьшал летальность крыс в дозах 30 и 60 мг/кг/сут до 14% и 10% (р>0,05) соответственно, в дозе 90 мг/кг/сут - до 5% (р<0,05), а в дозе 120 мг/кг/сут - даже до 0% (р<0,05). Сходные достоверные изменения происходили под влиянием мексидола и с неврологическим дефицитом.Mexidol has been found to have a dose-dependent neuroprotective effect. So, for example, the drug reduced the mortality of rats at doses of 30 and 60 mg / kg / day to 14% and 10% (p> 0.05), respectively, at a dose of 90 mg / kg / day to 5% (p <0, 05), and at a dose of 120 mg / kg / day - even up to 0% (p <0.05). Similar significant changes occurred under the influence of Mexidol and with a neurological deficit.
Семакс оказал наиболее выраженное действие в дозе 0,3 мг/кг/сут: снижал летальность животных до 7% (р<0,05) и уменьшал неврологический дефицит. В более высокой дозе - 0,6 мг/кг/сут - эффект препарата был существенно слабее (летальность составляла 15%; р>0,05).Semax had the most pronounced effect at a dose of 0.3 mg / kg / day: it reduced the mortality rate of animals to 7% (p <0.05) and reduced neurological deficit. At a higher dose - 0.6 mg / kg / day - the effect of the drug was significantly weaker (mortality was 15%; p> 0.05).
Амтизол в дозах 10 и 30 мг/кг/сут оказал незначительное благоприятное действие: незначимо (р>0,05) снижал летальность крыс до 22% и 18% соответственно и несколько уменьшал (р<0,05) неврологический дефицит.Amtizol at doses of 10 and 30 mg / kg / day had an insignificant beneficial effect: insignificantly (p> 0.05) reduced mortality of rats to 22% and 18%, respectively, and slightly decreased (p <0.05) neurological deficit.
Было установлено, что ЭМОП-АГ (в дозах 10 и 30 мг/кг/сут) оказывает выраженное нейропротекторное действие, превосходя по выраженности действия в отношении неврологического дефицита эталонный антигипоксант амтизол (10 и 30 мг/кг/сут), а также другие препараты сравнения (мексидол и семакс) (табл.7). При этом эффект ЭМОП-АГ в дозе 10 мг/кг/сут соответствовал таковому мексидола в дозе 90 мг/кг/сут, а в дозе 30 мг/кг/сут - мексидола в дозе 120 мг/кг/сут. ЭМОП-АГ также превосходил и семакс в дозах 0,3 и 0,6 мг/кг/сут. Уровень летальности при использовании ЭМОП-АГ в дозе 30 мг/кг/сут был достоверно (р<0,05) ниже на 18% по сравнению с амтизолом в аналогичной дозе. Более того, в большинстве сроков наблюдения ЭМОП-АГ по уменьшению неврологического дефицита значимо превосходил мексидол в указанных дозах.It was found that EMOP-AG (at doses of 10 and 30 mg / kg / day) has a pronounced neuroprotective effect, exceeding the standard antihypoxant amtizole (10 and 30 mg / kg / day) in terms of severity of action against neurological deficiency, as well as other drugs comparisons (Mexidol and Semax) (Table 7). Moreover, the effect of EMOP-AH at a dose of 10 mg / kg / day corresponded to that of mexidol at a dose of 90 mg / kg / day, and at a dose of 30 mg / kg / day, mexidol at a dose of 120 mg / kg / day. EMOP-AG was also superior to Semax at doses of 0.3 and 0.6 mg / kg / day. The mortality rate when using EMOP-AH at a dose of 30 mg / kg / day was significantly (p <0.05) lower by 18% compared to amtizol in a similar dose. Moreover, in the majority of follow-up periods, EMOP-AG significantly reduced Mexidol in the indicated doses to reduce neurological deficit.
Итак, можно заключить, что наиболее выражено действуют ЭМОП-АГ (30 мг/кг/сут), мексидол (120 мг/кг/сут) и семакс (0,3 мг/кг/сут). При этом ЭМОП-АГ по влиянию на неврологический дефицит значимо превосходит указанные препараты в большинстве случаев наблюдения.So, we can conclude that EMOP-AG (30 mg / kg / day), Mexidol (120 mg / kg / day) and Semax (0.3 mg / kg / day) are most pronounced. In this case, EMOP-AG in terms of its effect on neurological deficit significantly exceeds these drugs in most cases of observation.
Во II серии опытов у крыс (массой 250-270 г) воспроизводили геморрагический инсульт (ГИ; интрацеребральная посттравматическая гематома). Моделирование локального кровоизлияния в головном мозге - создание ГИ с ишемией мозга (интрацеребральной посттравматической гематомы) проводили по известной методике [17].In the II series of experiments in rats (weighing 250-270 g), a hemorrhagic stroke (GI; intracerebral post-traumatic hematoma) was reproduced. Modeling of local hemorrhage in the brain — the creation of HI with cerebral ischemia (intracerebral post-traumatic hematoma) was carried out by a known method [17].
Операцию на мозге крыс проводили под наркозом (400 мг/кг хлоралгидрата внутримышечно). У крыс, закрепленных в стереотаксисе, проводили трепанацию черепа, а затем осуществляли деструкцию мозговой ткани в области внутренней капсулы с последующим (через 2-3 минуты) введением в место повреждения крови, взятой из-под языка этого же животного (0,02-0,03 мл). Таким способом достигается локальный аутогеморрагический билатеральный инсульт в области внутренней капсулы (диаметр - 2 мм, глубина - 3 мм) без существенных повреждений вышерасположенных образований мозга, в том числе неокортекса.The operation on the brain of rats was performed under anesthesia (400 mg / kg of chloral hydrate intramuscularly). In rats fixed in stereotaxis, trepanation of the skull was performed, and then brain tissue was destroyed in the region of the internal capsule, followed by (after 2-3 minutes) injection of blood taken from under the tongue of the same animal (0.02-0 , 03 ml). In this way, a local autohemorrhagic bilateral stroke in the area of the internal capsule (diameter - 2 mm, depth - 3 mm) is achieved without significant damage to the upstream brain formations, including the neocortex.
Выживших животных с ГИ разделили на 3 группы: 1 - животные с ГИ; 2 - крысы с ГИ, которым вводили ЭМОП-АГ; 3 - животные с ГИ, которым вводили препарат сравнения мексидол. 4-ю группу составили ложнооперированные крысы (их наркотизировали, им проводили трепанацию черепа, но не осуществляли разрушения мозговой ткани), 5-ю группу - интактные животные.Surviving animals with GI were divided into 3 groups: 1 - animals with GI; 2 - rats with GI, which were introduced EMOP-AG; 3 - animals with GI, which were administered mexidol comparison drug. The 4th group consisted of pseudo-operated rats (they were anesthetized, they underwent trepanation of the skull, but did not destroy the brain tissue), and the 5th group — intact animals.
ЭМОП-АГ вводили животным в дозе 20 мг/кг, а мексидол в дозе 150 мг/кг в/б. Схема их введения была следующей: первую инъекцию осуществляли через 2 ч после операции, потом еще 3 раза каждые 4 ч (всего 4 инъекции в первые сутки). Затем ЭМОП-АГ или мексидол вводили ежедневно (в 10 часов утра) однократно в течение 14 сут. Контрольным животным 1-й, 4-й и 5-й групп вводили в/б 0,9% раствор NaCl в эквивалентном объеме по схеме введения препаратов.EMOP-AG was administered to animals at a dose of 20 mg / kg, and Mexidol at a dose of 150 mg / kg ip. The scheme of their administration was as follows: the first injection was carried out 2 hours after the operation, then another 3 times every 4 hours (a total of 4 injections on the first day). Then EMOP-AG or Mexidol was administered daily (at 10 a.m.) once for 14 days. Control animals of the 1st, 4th, and 5th groups were injected with a 0.9% NaCl solution in an equivalent volume in an equivalent volume according to the drug administration schedule.
Нарушение состояния и поведения крыс в постинсультный период оценивали в течение 14 сут после операции. Для оценки нарушений у крыс с ГИ использовали традиционный комплекс методов. Неврологический дефицит определяли так, как описано выше; также оценивали координацию движений и способность препаратов повышать выживаемость животных.Violation of the state and behavior of rats in the post-stroke period was evaluated within 14 days after surgery. A traditional set of methods was used to assess abnormalities in rats with HI. Neurological deficit was determined as described above; coordination of movements and the ability of drugs to increase animal survival were also evaluated.
Среди ложнооперированных крыс ни одна крыса не погибла. В группе контрольных животных с ГИ в течение первых суток погибло 30%, а через 14 сут - 70%.Among the false-operated rats, not one rat died. In the group of control animals with HI, 30% died during the first day, and 70% died after 14 days.
ЭМОП-АГ (по 20 мг/кг/сут ежедневно в течение 14 сут) предупреждал гибель крыс с ГИ - через 14 сут после операции гибель наблюдалась только у 30% крыс, т.е. в 2,3 раза (р<0,05) меньше по сравнению с нелеченными животными. После курсового введения мексидола в дозе 150 мг/кг/сут гибель наблюдалась также у 30% животных (р<0,05).EMOP-AG (20 mg / kg / day daily for 14 days) prevented the death of rats with GI - 14 days after surgery, death was observed only in 30% of rats, i.e. 2.3 times (p <0.05) less compared to untreated animals. After a course of administration of Mexidol at a dose of 150 mg / kg / day, death was also observed in 30% of animals (p <0.05).
При оценке неврологического дефицита у животных через 1 сут после операции было установлено, что у ложнооперированных крыс (без ГИ) легкие неврологические нарушения в виде вялости и замедленности движений наблюдаются у 10-20% животных. Тяжелых неврологических нарушений, проявляющихся в виде манежных движений, парезов/параличей конечностей, у ложнооперированных крыс отмечено не было. У интактных животных неврологических нарушений не выявили.When assessing neurological deficit in animals 1 day after the operation, it was found that in false-operated rats (without HI), mild neurological disturbances in the form of lethargy and slow movement were observed in 10-20% of the animals. Severe neurological disorders, manifested in the form of arena movements, paresis / paralysis of the extremities, were not observed in mock-operated rats. In intact animals, neurological disorders were not detected.
У контрольных крыс с ГИ через 1 сут после операции у всех (100%) животных были отмечены легкие неврологические нарушения. Тяжелые неврологические нарушения также были выявлены у большого числа животных: манежные движения - у 40%, парезы - у 40%, параличи конечностей - у 30% (р<0,05 по сравнению с ложнооперированными крысами).In control rats with HI 1 day after surgery, all (100%) animals showed mild neurological impairment. Severe neurological abnormalities were also detected in a large number of animals: ring movements - in 40%, paresis - in 40%, paralysis of the limbs - in 30% (p <0.05 compared with mock-operated rats).
ЭМОП-АГ после 4-кратного введения (по 20 мг/кг) при регистрации нарушений через 1 сут после операции на максимуме их выраженности достоверно уменьшал неврологический дефицит. Так, например, после применения ЭМОП-АГ легкие нарушения регистрировали лишь у 50% животных (в контроле у 100%, т.е. в 2 раза чаще, р<0,05). Наряду с этим ЭМОП-АГ значимо (р<0,05) уменьшал число крыс с тяжелыми неврологическими нарушениями: манежными движениями (наблюдали у 0%) и парезом/параличом 1-4 конечностей (у 10-20%).EMOP-AG after 4-fold administration (20 mg / kg each) during the registration of violations 1 day after surgery at the maximum of their severity significantly reduced neurological deficit. So, for example, after the use of EMOP-AH, mild disorders were registered only in 50% of animals (in the control, in 100%, i.e. 2 times more often, p <0.05). In addition, EMOP-AG significantly (p <0.05) reduced the number of rats with severe neurological impairment: ring movements (observed in 0%) and paresis / paralysis of 1-4 limbs (in 10-20%).
Мексидол (по 150 мг/кг 4 раза) также значимо (р<0,05) ослаблял легкие неврологические нарушения, в частности вялость и замедленность движений (наблюдали у 60%), а также тяжелые неврологические нарушения в виде манежных движений (у 0%), пареза/паралича конечностей (у 10-20%). Однако по активности мексидол (доза 150 мг/кг) значительно уступает ЭМОП-АГ (доза 20 мг/кг).Mexidol (150 mg / kg 4 times) also significantly (p <0.05) attenuated mild neurological disorders, in particular lethargy and slow movement (observed in 60%), as well as severe neurological disorders in the form of ring movements (in 0% ), paresis / paralysis of the extremities (in 10-20%). However, the activity of Mexidol (dose of 150 mg / kg) is significantly inferior to EMOP-AG (dose of 20 mg / kg).
Сходным образом в отношении неврологического дефицита действовали оба вещества и в другие сроки наблюдения. Следовательно, ЭМОП-АГ вызывает существенное уменьшение неврологического дефицита у крыс с ГИ в разные сроки наблюдения и по активности значительно превосходит мексидол.Similarly, in relation to neurological deficit, both substances acted at different times of observation. Therefore, EMOP-AH causes a significant decrease in neurological deficit in rats with HI at different observation times and significantly exceeds Mexidol in activity.
Нарушение координации движений оценивали в тесте вращающегося стержня: крыс помещали на горизонтальный стержень диаметром 4 см, вращающийся со скоростью 3 оборота в минуту; неспособность животных удерживать равновесие на стержне в течение 2 минут рассматривалось как проявление нарушения координации движений [10].Violation of coordination of movements was evaluated in the test of a rotating rod: rats were placed on a horizontal rod with a diameter of 4 cm, rotating at a speed of 3 revolutions per minute; the inability of animals to maintain equilibrium on the rod for 2 minutes was considered as a manifestation of impaired coordination of movements [10].
Интактные животные не имели нарушений координации движений, а у ложнооперированных крыс нарушения наблюдали только у 10% (табл.8). У контрольных крыс с ГИ наблюдалось отчетливое нарушение координации движений: на 2-е сутки после операции нарушение координации движений выявили у 64% животных, на 3-й сутки - у 58%, на 7-е - у 50% и на 14-е - у 33% крыс (табл.8).Intact animals had no coordination disruptions, and in false-operated rats only 10% showed disturbances (Table 8). In control rats with HI, a distinct violation of coordination of movements was observed: on the 2nd day after surgery, a violation of coordination of movements was detected in 64% of animals, on the 3rd day - in 58%, on the 7th - in 50% and on the 14th - in 33% of rats (Table 8).
ЭМОП-АГ (по 20 мг/кг/сут в течение 14 сут) значимо (р:<0,05) восстанавливал нарушенную у крыс в результате ГИ координацию движений на 3-й и 7-е сутки после операции (табл.8). Мексидол (по 150 мг/кг/сут в течение 14 сут) достоверно не изменял этот показатель (табл.8). Следовательно, ЭМОП-АГ в отличие от мексидола обладает способностью восстанавливать нарушенную ГИ координацию движений.EMOP-AG (at 20 mg / kg / day for 14 days) significantly (p: <0.05) restored impaired motor coordination in rats as a result of GI on the 3rd and 7th day after surgery (Table 8) . Mexidol (150 mg / kg / day for 14 days) did not significantly change this indicator (Table 8). Consequently, EMOP-AG, in contrast to Mexidol, has the ability to restore impaired GI coordination of movements.
Таким образом, у крыс с ГИ ЭМОП-АГ (по 20 мг/кг/сут в течение 14 сут) вызывает значительное уменьшение неврологического дефицита, улучшает координацию движений и в 2,3 раза уменьшает гибель животных. Препарат сравнения мексидол при аналогичном курсовом применении также уменьшает неврологический дефицит и летальность крыс, но в значительно более высокой дозе - 150 мг/кг/сут. Следовательно, ЭМОП-АГ значительно превосходит мексидол по нейропротекторной активности (по крайней мере в 7,5 раз) на модели ГИ.Thus, in rats with a GI, EMOP-AH (20 mg / kg / day for 14 days) causes a significant decrease in neurological deficit, improves coordination of movements, and reduces animal death by 2.3 times. Mexidol comparison drug with a similar course application also reduces the neurological deficit and mortality of rats, but at a significantly higher dose - 150 mg / kg / day. Therefore, EMOP-AG significantly exceeds Mexidol in neuroprotective activity (at least 7.5 times) in the HI model.
Пример 5. Антиамнестическое действие 2-этил-6-метил-3-оксипиридиния N-ацетил-L-глутамината (ЭМОП-АГ) на различных моделях амнезии у мышей и крыс (табл.9-13)Example 5. Antiamnestic effect of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridinium N-acetyl-L-glutaminate (EMOP-AG) on various amnesia models in mice and rats (Table 9-13)
Исследования выполнены на белых нелинейных мышах-самцах массой 20-28 г.Влияние ЭМОП-АГ и препаратов сравнения на процессы обучения и памяти у животных исследовали, используя условную реакцию пассивного избегания (УРПИ) электрокожного раздражения [1]. Выработку УРПИ у мышей производили на основе электрокожного подкрепления по методу Cumin et al. (1982) [16] с учетом рекомендаций Mondadori et al. (1990) [19]. Мышей подвергали воздействию электросудорожного шока (ЭСШ) (50 Гц, 50 мА, 0,3 с, транспиннеально) сразу после обучения УРПИ [10]. У животных контрольной группы вызывали псевдоЭСШ. Для воспроизведения модели скополаминовой амнезии м-холиноблокатор вводили мышам в/б в дозе 1 мг/кг сразу после обучения УРПИ [10]. Острую нормобарическую гипоксическую гипоксию с гиперкапнией воспроизводили путем помещения мышей (поодиночке) в гермокамеру. В качестве комплексного экстремального воздействия использовали плавание мышей в холодной воде (ПМХВ) с одновременным вращением колеса до изнеможения. Исследуемые вещества вводили однократно в/б за 30 (амтизол) или 60 минут (все остальные вещества) до обучения мышей. Животные контрольных групп получали (в/б) в том же объеме 0,9% раствор NaCl. Сохранность УРПИ проверяли через 24 ч после амнезирующего воздействия.The studies were performed on white non-linear male mice weighing 20-28 g. The influence of EMOP-AH and comparison drugs on the learning and memory processes in animals was studied using the conditional passive avoidance reaction (passive avoidance reaction) of electric skin irritation [1]. The passive avoidance reaction in mice was performed based on electrodermal reinforcement according to the method of Cumin et al. (1982) [16] taking into account the recommendations of Mondadori et al. (1990) [19]. Mice were exposed to electroconvulsive shock (ESH) (50 Hz, 50 mA, 0.3 s, transpineally) immediately after learning of passive avoidance reaction [10]. In animals of the control group, pseudo-ESH was induced. To reproduce the scopolamine amnesia model, the m-anticholinergic blocker was injected into the mice i.v. at a dose of 1 mg / kg immediately after learning passive avoidance reaction [10]. Acute normobaric hypoxic hypoxia with hypercapnia was reproduced by placing mice (alone) in a pressure chamber. As a complex extreme effect, swimming of mice in cold water (PMHV) with simultaneous rotation of the wheel to exhaustion was used. The test substances were administered once intravenously 30 (amtizol) or 60 minutes (all other substances) before the mice were trained. Animals of the control groups received (ip) in the same volume of 0.9% NaCl solution. The safety of passive avoidance reaction was checked 24 hours after the amnesiac effect.
На модели амнезии, вызванной электросудорожным шоком, было обнаружено, что у мышей ЭМОП-АГ (30 мг/кг), препараты сравнения пирацетам (800 мг/кг) и мексидол (100 мг/кг), но не эталонный антигипоксант амтизол, полностью или почти полностью (мексидол, пирацетам) предупреждают развитие амнезии УРПИ (табл.9).In a model of amnesia caused by electroconvulsive shock, it was found that in mice EMOP-AG (30 mg / kg), piracetam (800 mg / kg) and mexidol (100 mg / kg) comparisons, but not the reference antihypoxant amtizol, completely or almost completely (mexidol, piracetam) prevent the development of amnesia of passive avoidance reaction (Table 9).
На модели скополаминовой амнезии было обнаружено, что у мышей ЭМОП-АГ (30 мг/кг), препараты сравнения пирацетам (800 мг/кг) и мексидол (100 мг/кг), но не эталонный антигипоксант амтизол, полностью предупреждают развитие амнезии УРПИ (табл.10).In a scopolamine amnesia model, it was found that in mice EMOP-AH (30 mg / kg), piracetam (800 mg / kg) and mexidol (100 mg / kg) comparisons, but not the reference antihypoxant amtizol, completely prevent the development of amniosis of passive avoidance reaction ( table 10).
На модели амнезии, вызванной острой нормобарической гипоксической гипоксии с гиперкапнией (в гермокамере), было обнаружено, что у мышей ЭМОП-АГ (30 мг/кг) препараты сравнения оксирацетам (100 мг/кг) и мексидол (100 мг/кг) практически полностью предупреждают развитие амнезии УРПИ (табл.11). Эталонный антигипоксант амтизол (30 мг/кг) был менее эффективным - ослаблял выраженность амнезии в 2 раза (р<0,05).On a model of amnesia caused by acute normobaric hypoxic hypoxia with hypercapnia (in a pressure chamber), it was found that in mice EMOP-AG (30 mg / kg), comparisons of oxiracetam (100 mg / kg) and mexidol (100 mg / kg) were almost completely prevent the development of amnesia passive avoidance reaction (table 11). The standard antihypoxant amtizol (30 mg / kg) was less effective - it reduced the severity of amnesia by 2 times (p <0.05).
На модели амнезии, вызванной ПМХВ с одновременным вращением колеса до изнеможения, было обнаружено, что у мышей ЭМОП-АГ (30 мг/кг) препараты сравнения пирацетам (800 мг/кг) и мексидол (100 мг/кг), но не эталонный антигипоксант амтизол полностью предупреждают развитие амнезии УРПИ (табл.12).In a model of amnesia caused by PMHV with simultaneous rotation of the wheel to exhaustion, it was found that in mice EMOP-AG (30 mg / kg) comparison drugs piracetam (800 mg / kg) and mexidol (100 mg / kg), but not a reference antihypoxant amtizol completely prevent the development of amnesia passive avoidance reaction (table 12).
Также исследовали антиамнестическую активность ЭМОП-АГ в тесте скополаминовой амнезии у крыс.The anti-amnestic activity of EMOP-AG was also investigated in the rat scopolamine amnesia test.
Исследование выполнено на белых нелинейных крысах самцах массой 250-270 г с использованием сертифицированной установки "Lafayette Instrument Co" (США). Установка представляет собой темную камеру размером 400×400×400 мм с электродным полом. Темная камера соединена через квадратную гильотинную дверцу размером 60×60 мм с навесной платформой размером 250×70 мм. Навесная платформа освещена лампой 60 Вт, расположенной на высоте 400 мм. Темная камера располагается на лабораторном столе, а платформа висит над полом на высоте 800 мм. Крысу сажали на ярко освещенную платформу хвостом к открытой гильотинной двери, ведущей в темную камеру. Вследствие норкового рефлекса после нахождения входа в темный отсек камеры крыса переходила в темный отсек. Регистрировали латентный период (ЛП) выполнения этого навыка. Затем крысу оставляли на 180 секунд (с) в темной камере с целью ее освоения, и животное почти все время проводило в темной камере. По истечении 180 с осуществляли обучение. С этой целью в момент, когда крыса находилась в темном отделении, отверстие закрывали и наносили животному неизбегаемое электроболевое раздражение через пол (5 ударов, сила обучающего тока 0,45 мА, длительность каждого импульса составляла 1 с, интервал между последовательными импульсами 2 с). После получения болевого раздражения (обучение) крыса выскакивала из темного отсека на освещенную платформу. Следовательно, животное было обучено тому, что в темной камере оно получает болевое раздражение и помнит об этом. Крысу снимали с платформы и помещали в обычную клетку. Тест на воспроизведение обученного проводили через 24 ч после обучения, для чего крысу опять сажали на платформу хвостом к отверстию и регистрировали ЛП захода животного в темное отделение, а также число животных (в течение 180 с), совсем не зашедших в опасный темный отсек и остававшихся на освещенной висячей платформе (крысы, хорошо помнящие ситуацию).The study was performed on white non-linear rats males weighing 250-270 g using a certified installation "Lafayette Instrument Co" (USA). The installation is a dark chamber 400 × 400 × 400 mm in size with an electrode floor. The dark chamber is connected through a 60 × 60 mm square guillotine door to a 250 × 70 mm mounted platform. The mounted platform is illuminated by a 60 W lamp located at a height of 400 mm. A dark chamber is located on the laboratory bench, and the platform hangs above the floor at a height of 800 mm. The rat was seated on a brightly lit platform with its tail toward the open guillotine door leading into a dark chamber. Due to the mink reflex, after finding the entrance to the dark compartment of the chamber, the rat passed into the dark compartment. The latent period (LP) of this skill was recorded. Then the rat was left for 180 seconds (s) in a dark chamber for the purpose of its development, and the animal spent almost all the time in a dark chamber. After 180 s, training was provided. For this purpose, at the moment when the rat was in the dark compartment, the hole was closed and the animal was treated with unavoidable electric pain stimulation through the floor (5 strokes, the strength of the training current 0.45 mA, the duration of each pulse was 1 s, the interval between consecutive pulses was 2 s). After receiving pain irritation (training), the rat jumped out of the dark compartment onto the illuminated platform. Therefore, the animal was trained in the fact that in a dark chamber it receives painful irritation and remembers this. The rat was removed from the platform and placed in an ordinary cage. A test for reproducing the trained was performed 24 hours after the training, for which the rat was again placed on the platform with its tail to the hole, and the PL of the animal entering the dark compartment, as well as the number of animals (for 180 s) that did not enter the dangerous dark compartment and remained at all, were recorded on a lighted hanging platform (rats who remember the situation well).
Амнезию вызывали посредством введения м-холиноблокатора скополамина, вызывающего холинергический дефицит. Скополамин (в/б 1,0 мг/кг) вводили за 30 минут до обучения. Исследуемые вещества вводили крысам однократно в/б в объеме 0,2 мл на 100 г массы за 40 минут до обучения. ЭМОП-АГ вводили в дозах 10, 20 и 30 мг/кг, а препарат сравнения мексидол - в дозах 50, 100 и 200 мг/кг.Amnesia was caused by the administration of m-anticholinergic scopolamine, causing cholinergic deficiency. Scopolamine (ip 1.0 mg / kg) was administered 30 minutes before training. The studied substances were administered to rats once i.v. in a volume of 0.2 ml per 100 g of mass 40 minutes before training. EMOP-AG was administered at doses of 10, 20 and 30 mg / kg, and the comparison drug Mexidol was administered at doses of 50, 100 and 200 mg / kg.
При помещении на освещенную платформу крысы с коротким ЛП (в среднем по группам от 12 до 17 с) заходили в темную камеру. При воспроизведении рефлекса через 24 ч после обучения крысы без амнезии помнят обученное и при помещении их на освещенную платформу животные остаются там основное время эксперимента (177±13 с) и не заходят в темную опасную камеру, где они накануне получили болевое раздражение (обучение) (табл.13).When placed on a lighted platform, rats with a short PL (on average for groups from 12 to 17 s) entered a dark chamber. When the reflex is reproduced 24 hours after training, the rats without amnesia remember the trained one and when they are placed on the illuminated platform, the animals remain there for the main time of the experiment (177 ± 13 s) and do not enter the dark dangerous chamber, where they received pain irritation (training) the day before ( tab. 13).
Скополамин достоверно укорачивал ЛП захода в темную камеру при воспроизведении (в 2,6 раза, р<0,001) и значимо (р<0,001) уменьшал число животных (с 85% до 20%), совсем не зашедших в темный отсек камеры, т.е. помнящих о нанесенном там накануне аверсивном стимуле (табл.13). Эти показатели характеризуют выраженную амнезию.Scopolamine significantly shortened the LP of entry into the dark chamber during reproduction (2.6 times, p <0.001) and significantly (p <0.001) reduced the number of animals (from 85% to 20%) that did not enter the dark compartment of the chamber at all, i.e. e. remembering the aversive stimulus applied there the day before (Table 13). These indicators characterize severe amnesia.
ЭМОП-АГ в дозе 10 мг/кг не оказывал достоверного влияния на амнезию, вызванную скополамином (табл.13). ЭМОП-АГ в дозе 20 мг/кг значимо (р<0,05) увеличивал ЛП (в 1,7 раза) захода в темный отсек при воспроизведении и число животных (в 3 раза), не зашедших в темный отсек камеры, т.е. помнящих о нанесенном аверсивном стимуле (табл.13). В дозе 30 мг/кг ЭМОП-АГ оказывал более выраженное антиамнестическое действие: наблюдалось значимое (р<0,05) увеличение ЛП (в 2 раза) захода в темную камеру при воспроизведении и процента животных (в 3,5 раза), не зашедших в темную камеру (табл.13). Эти данные свидетельствуют о выраженном достоверном антиамнестическом эффекте ЭМОП-АГ в дозах 20 и 30 мг/кг.EMOP-AH at a dose of 10 mg / kg did not significantly affect the amnesia caused by scopolamine (Table 13). EMOP-AG at a dose of 20 mg / kg significantly (p <0.05) increased PL (1.7 times) entering the dark compartment during reproduction and the number of animals (3 times) that did not enter the dark compartment of the chamber, t. e. remembering the applied aversive stimulus (Table 13). At a dose of 30 mg / kg, EMOP-AG exerted a more pronounced antiamnestic effect: there was a significant (p <0.05) increase in PL (2 times) entering the dark chamber during reproduction and the percentage of animals (3.5 times) that did not enter into the dark chamber (Table 13). These data indicate a pronounced significant antiamnestic effect of EMOP-AH at doses of 20 and 30 mg / kg.
Мексидол в дозе 50 мг/кг увеличивал ЛП воспроизведения УРПИ в 1,3 раза по сравнению с контролем с амнезией (контроль 2), но недостоверно (табл.13). В дозе 100 мг/кг мексидол достоверно (р<0,05) увеличивал ЛП (в 2,1 раза) захода в темный отсек и число животных (в 3,5 раза), не зашедших в темный отсек камеры, т.е. помнящих о нанесенном аверсивном стимуле (табл.13). В дозе 200 мг/кг мексидол оказывал более выраженное антиамнестическое действие: наблюдалось достоверное (р<0,01) увеличение ЛП (в 2,2 раза) захода в темную камеру при воспроизведении и процента животных (в 4 раза), не зашедших в темную камеру (табл.13). Полученные данные свидетельствуют о выраженном антиамнестическом эффекте мексидола в дозах 100 и 200 мг/кг.Mexidol at a dose of 50 mg / kg increased the PL reproduction of passive avoidance reaction by 1.3 times compared with the control with amnesia (control 2), but not significantly (Table 13). At a dose of 100 mg / kg, Mexidol significantly (p <0.05) increased PL (2.1 times) entering the dark compartment and the number of animals (3.5 times) that did not enter the dark compartment of the chamber, i.e. remembering the applied aversive stimulus (Table 13). At a dose of 200 mg / kg, Mexidol had a more pronounced anti-amnestic effect: there was a significant (p <0.01) increase in PL (2.2 times) entering the dark chamber during reproduction and the percentage of animals (4 times) that did not go into the dark camera (tab. 13). The data obtained indicate a pronounced antiamnestic effect of mexidol in doses of 100 and 200 mg / kg.
Таким образом, ЭМОП-АГ в дозах 20 и 30 мг/кг оказывает сходное антиамнестическое действие с мексидолом в дозах 100 и 200 мг/кг, что свидетельствует о том, что ЭМОП-АГ по крайней мере в 3 раза превосходит мексидол по активности в тесте скополаминовой амнезии у крыс.Thus, EMOP-AG at doses of 20 and 30 mg / kg has a similar antiamnestic effect with mexidol at doses of 100 and 200 mg / kg, which indicates that EMOP-AG is at least 3 times higher than mexidol in activity in the test scopolamine amnesia in rats.
Пример 6. Противоукачивающее действие 2-этил-6-метил-3-оксипиридиния N-ацетил-L-глутамината (ЭМОП-АГ) (табл.14).Example 6. The anti-pumping effect of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridinium N-acetyl-L-glutaminate (EMOP-AG) (table 14).
Исследования выполнены на крысах-самцах линии Вистар массой 180-200 г.The studies were performed on male Wistar rats weighing 180-200 g.
Моделирование болезни движения (БД) у крыс производили в течение 90 минут на модифицированной установке ПАСА США [15], позволяющей вращать животных в двух перпендикулярных плоскостях с частотой 0,33 Гц. Выраженность БД у крыс оценивали по количеству потребляемой ими пищи за 2 ч после вращения [14].Modeling of motion sickness (DB) in rats was performed for 90 minutes on a modified US PASA setup [15], which allowed animals to rotate in two perpendicular planes with a frequency of 0.33 Hz. The severity of DB in rats was evaluated by the amount of food they consumed 2 hours after rotation [14].
Исследование противоукачивающих свойств ЭМОП-АГ у крыс показало наличие вестибулопротекторной активности в дозе 30 мг/кг. По выраженности противоукачивающего действия ЭМОП-АГ превосходил эталонный вестибулопротектор скополамин в 1,3 раза (р<0,05). Эталонный антигипоксант амтизол был неэффективен (табл.14).The study of the anti-pumping properties of EMOP-AH in rats showed the presence of vestibuloprotective activity at a dose of 30 mg / kg. EMOP-AH exceeded the standard vestibuloprotector scopolamine by 1.3 times in severity of the anti-pumping action (p <0.05). The reference antihypoxant amtizol was ineffective (Table 14).
Пример 7. Способность 2-этил-6-метил-3-оксипиридиния N-ацетил-L-глутамината (ЭМОП-АГ) улучшать когнитивные функции (табл.15-17)Example 7. The ability of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridinium N-acetyl-L-glutaminate (EMOP-AG) to improve cognitive function (table 15-17)
Исследования выполнены на белых нелинейных крысах-самцах массой 250-270 г.The studies were performed on white non-linear male rats weighing 250-270 g.
В I серии опытов исследовали влияние ЭМОП-АГ на обучение условному рефлексу пассивного избегания (УРПИ) крыс-недоучек с использованием сертифицированной установки "Lafayette Instrument Co" (США). Описание установки и методики обучения УРПИ приведено выше (см. пример 5). Следует подчеркнуть, что для получения крыс-недоучек сила обучающего тока составляла не 0,45 мА (это обычно требуется для получения хорошей степени обученности), а только 0,3 мА, т.е. обучение было нежестким.In the first series of experiments, we studied the effect of EMOP-AH on learning the conditioned passive avoidance reflex (SIR) of half-rats using a certified Lafayette Instrument Co installation (USA). A description of the installation and teaching methods of passive avoidance reaction is given above (see example 5). It should be emphasized that to obtain half-rats, the strength of the training current was not 0.45 mA (this is usually required to obtain a good degree of training), but only 0.3 mA, i.e. the training was not rigid.
Исследуемые вещества вводили крысам однократно в/б в объеме 0,2 мл на 100 г массы за 40 минут до обучения. ЭМОП-АГ вводили в дозах 20 и 30 мг/кг, а препарат сравнения мексидол - в дозах 100 и 200 мг/кг.The studied substances were administered to rats once i.v. in a volume of 0.2 ml per 100 g of mass 40 minutes before training. EMOP-AG was administered at doses of 20 and 30 mg / kg, and the comparison drug Mexidol at doses of 100 and 200 mg / kg.
Установлено, что когда крысу впервые помещали на ярко освещенную платформу хвостом к открытой гильотинной двери, ведущей в темную камеру, она вследствие норкового рефлекса с коротким латентным периодом (ЛП) переходила в темный отсек. ЛП выполнения норкового рефлекса в различных контрольных группах колебался от 10 до 18 с. ЭМОП-АГ и мексидол не изменяли ЛП выполнения навыка захода в темную камеру. После этого осуществляли обучение УРПИ, для чего крыса получала в темной камере меньшее (0,3 мА), чем обычно (0,45 мА), болевое раздражение, чтобы получились крысы-недоучки. Контрольные животные-недоучки (контроль 2) при воспроизведении обученного через 24 ч после обучения плохо помнили о раздражении, полученном в темной камере, и заходили туда с гораздо меньшим ЛП (в 2,4 раза, р<0,05), чем хорошо обученные крысы (контроль 1) (табл.15).It was established that when the rat was first placed on a brightly lit platform with its tail to the open guillotine door leading to the dark chamber, it, due to the mink reflex with a short latent period (PL), passed into the dark compartment. The LP of performing a mink reflex in various control groups ranged from 10 to 18 s. EMOP-AG and Mexidol did not alter the PL performance of entering the dark chamber. After this, the passive avoidance reaction was studied, for which the rat received less pain (0.3 mA) than usual (0.45 mA) in the dark chamber, so that half-rats were obtained. The control half-animals (control 2) when playing the trained 24 hours after the training didn’t remember the irritation received in the dark chamber and entered it with a much lower LP (2.4 times, p <0.05) than well trained rats (control 1) (table 15).
ЭМОП-АГ достоверно (р<0,05) увеличивал ЛП воспроизведения УРПИ крысами-недоучками: в дозе 20 мг/кг - в 1,8 раза, а в дозе 30 мг/кг - в 2,2 раза по сравнению с контролем 2 крыс-недоучек (табл.15). Под влиянием ЭМОП-АГ также значительно увеличивалось количество животных, совсем не зашедших в темный отсек камеры: в дозе 20 мг/кг в темную камеру не зашло 30% крыс, в дозе 30 мг/кг - 60% (р<0,05) (табл.15).EMOP-AG significantly (p <0.05) increased the PL reproduction of passive avoidance reaction by rats half-educated: at a dose of 20 mg / kg - 1.8 times, and at a dose of 30 mg / kg - 2.2 times compared with control 2 half-rat rats (Table 15). Under the influence of EMOP-AG, the number of animals that did not enter the dark compartment of the chamber also increased significantly: at a dose of 20 mg / kg, 30% of rats did not enter the dark chamber, at a dose of 30 mg / kg - 60% (p <0.05) (table 15).
Следовательно, ЭМОП-АГ улучшает процесс обучения УРПИ у крыс-недоучек, что выражается в значительном увеличении количества животных, совсем не зашедших в темную камеру, и в достоверном увеличении ЛП захода в темную камеру.Therefore, EMOP-AG improves the learning process of passive avoidance reaction in rat-poor rats, which is reflected in a significant increase in the number of animals that have not entered the dark chamber at all, and in a significant increase in the LP of entry into the dark chamber.
Мексидол в дозах 100 и 200 мг/кг также улучшал обучение крыс-недоучек УРПИ. Он значимо (р<0,05) в дозе 100 мг/кг увеличивал ЛП воспроизведения рефлекса в 2,2 раза, в дозе 200 мг/кг - в 2,4 раза, а также в последней дозе и число крыс (70%), совсем не зашедших в темную камеру (табл.15).Mexidol in doses of 100 and 200 mg / kg also improved the learning of passive rats with passive avoidance reaction. It significantly (p <0.05) at a dose of 100 mg / kg increased the PL of the reproduction of the reflex by 2.2 times, at a dose of 200 mg / kg - by 2.4 times, and in the last dose the number of rats (70%) that didn’t enter the dark chamber at all (Table 15).
Таким образом, ЭМОП-АГ в дозах 20 и 30 мг/кг обладает способностью улучшать обучение крыс-недоучек и по выраженности это действие ЭМОП-АГ соответствует таковому мексидола в дозах 100 и 200 мг/кг.Thus, EMOP-AH in doses of 20 and 30 mg / kg has the ability to improve the education of rat-less rats and, in terms of severity, this action of EMOP-AH corresponds to that of mexidol in doses of 100 and 200 mg / kg.
Во II серии опытов исследовали влияние ЭМОП-АГ на нарушение когнитивных функций в результате геморрагического инсульта (ГИ). Для оценки нарушений когнитивных функций после операции использовали обучение УРПИ у крыс в установке "Lafayette Instrument Co" (США) так, как описано выше. Описание методики воспроизведения ГИ у крыс приведено выше - см. пример 4. Сила обучающего тока составляла 0,45 мА. Воспроизведение УРПИ осуществляли через 24 ч после обучения, а также через 3, 7 и 14 сут после операции. Испытанные вещества вводили так же, как в примере 4.In the II series of experiments, the effect of EMOP-AH on cognitive impairment as a result of hemorrhagic stroke (HI) was investigated. To assess cognitive impairment after surgery, passive avoidance reaction study in rats was used in the Lafayette Instrument Co installation (USA) as described above. A description of the GI reproduction technique in rats is given above - see Example 4. The strength of the training current was 0.45 mA. The passive avoidance reaction was performed 24 hours after training, as well as 3, 7, and 14 days after surgery. The tested substances were administered in the same manner as in Example 4.
Установлено, что интактные и ложнооперированные крысы при помещении их на освещенную платформу быстро (с коротким ЛП) переходили в темную камеру, т.е. осуществляли норковый рефлекс. ГИ не нарушал выполнение природного норкового рефлекса: у контрольных крыс с ГИ было только несколько повышен ЛП выполнения норкового рефлекса. ЭМОП-АГ и мексидол также не изменяли выполнение норкового рефлекса, и ЛП его выполнения не отличался от показателей интактных и ложнооперированных животных.It was found that intact and false-operated rats, when placed on an illuminated platform, quickly (with short PL) passed into a dark chamber, i.e. carried out a mink reflex. GI did not interfere with the performance of the natural mink reflex: in control rats with GI there was only a slightly increased LP of the performance of the mink reflex. EMOP-AG and Mexidol also did not change the performance of the mink reflex, and the LP of its implementation did not differ from the indicators of intact and falsely operated animals.
Среди интактных и ложнооперированных крыс при воспроизведении УРПИ через 24 ч после обучения 70-80% животных помнили об ударе током и не заходили в опасную темную камеру.Among intact and false-operated rats, when reproducing passive avoidance reaction 24 hours after training, 70-80% of the animals remembered the electric shock and did not enter a dangerous dark chamber.
У крыс с ГИ (контроль) через 24 ч, 3, 7 и 14 сут после операции память существенно нарушалась. У этих животных при оценке сохранности памятного следа резко уменьшалось количество крыс, помнящих обученное: через 1, 3, 7 и 14 сут только 17-25% животных совсем не зашли в темную камеру, т.е. помнили об ударе током, а у 75-83% крыс память была нарушена и поэтому они заходили в опасную темную камеру. У заходящих в темный отсек крыс достоверно (р<0,05) уменьшался ЛП воспроизведения УРПИ (табл.16-17).In rats with HI (control), 24 hours, 3, 7, and 14 days after surgery, memory was significantly impaired. In these animals, when assessing the safety of the memorial trail, the number of rats remembering the trained one sharply decreased: after 1, 3, 7, and 14 days only 17-25% of the animals did not enter the dark chamber at all, i.e. they remembered the electric shock, and in 75-83% of the rats the memory was impaired and therefore they entered a dangerous dark chamber. In rats entering the dark compartment, the PL reproduction of passive avoidance reaction was significantly reduced (p <0.05) (Tables 16-17).
ЭМОП-АГ (курсовое введение) восстанавливал нарушенную ГИ память. ЭМОП-АГ через на 1 и 3 сут после операции увеличивал ЛП выполнения УРПИ в 1,6 раза, но недостоверно (р>0,05). Через 7 и 14 сут отмечалось значимое (р<0,05) улучшение когнитивных функций, что характеризовалось существенным увеличением (в 2,6 и 3,3 раза соответственно) ЛП воспроизведения УРПИ (табл.16) и числа животных (в 3,9 раза), совсем не зашедших в опасную темную камеру (табл.17). Следовательно, действие ЭМОП-АГ на нарушенную ГИ память зависело от времени, прошедшего после операции, и от курса введения вещества. Наибольший эффект ЭМОП-АГ выявлялся после его курсового применения через 7 и 14 сут после операции.EMOP-AG (course introduction) restored impaired GI memory. EMOP-AG at 1 and 3 days after the operation increased the LP of the passive avoidance reaction by 1.6 times, but not significantly (p> 0.05). After 7 and 14 days, a significant (p <0.05) improvement in cognitive functions was noted, which was characterized by a significant increase (2.6 and 3.3 times, respectively) in the LP of the passive avoidance reaction (Table 16) and the number of animals (3.9 times) that did not enter the dangerous dark chamber at all (Table 17). Therefore, the effect of EMOP-AG on impaired GI memory depended on the time elapsed after the operation and on the course of administration of the substance. The greatest effect of EMOP-AG was detected after its course application 7 and 14 days after surgery.
Мексидол (курсовое введение) значимо (р<0,05) восстанавливал нарушенные ГИ когнитивные функции только через 14 сут после операции и не оказывал достоверного влияния на память через 1-7 сут (табл.16-17).Mexidol (course administration) significantly (p <0.05) restored impaired cognitive function GI only 14 days after surgery and did not have a significant effect on memory after 1-7 days (Tables 16-17).
Таким образом, ЭМОП-АГ (курсовое введение) восстанавливает нарушенные ГИ когнитивные функции в тесте УРПИ через 7 и 14 сут после операции. По всем показателям оценки когнитивных функций ЭМОП-АГ превосходит мексидол. При этом ЭМОП-АГ имеет гораздо большую активность (по крайней мере в 7,5 раз выше), поскольку он вызывает эффект в дозе в 7,5 раз меньше дозы мексидола. Следовательно, ЭМОП-АГ превосходит мексидол как по способности восстанавливать нарушенные ГИ когнитивные функции, так и по активности.Thus, EMOP-AG (course introduction) restores impaired cognitive function in the GI in the passive avoidance reaction test 7 and 14 days after surgery. EMOP-AG is superior to mexidol in all indicators of cognitive function assessment. In this case, EMOP-AG has much greater activity (at least 7.5 times higher), since it causes an effect in a dose 7.5 times less than the dose of Mexidol. Consequently, EMOP-AG is superior to Mexidol both in its ability to restore impaired cognitive function GI and in activity.
Пример 8. Электрофизиологическое исследование действия 2-этил-6-метил-3-оксипиридиния N-ацетил-L-глутамината (ЭМОП-АГ) на переживающих срезах гиппокампа крысExample 8. Electrophysiological study of the action of 2-ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridinium N-acetyl-L-glutaminate (EMOP-AG) in surviving sections of the rat hippocampus
В настоящее время в качестве объекта нейрофармакологических исследований in vitro для расшифровки механизма действия веществ, влияющих на центральную нервную систему, часто используют переживающие поперечные срезы гиппокампа [центральная структура лимбической системы, участвующая в процессах памяти и обучения и др.], сохраняющие нормально функционирующие внутренние системы связей, на которые в эксперименте можно локально воздействовать различным образом [8, 9, 20].At present, surviving cross sections of the hippocampus [the central structure of the limbic system participating in the processes of memory and learning, etc.], which preserve normally functioning internal systems, are often used as objects of in vitro neuropharmacological studies to decipher the mechanism of action of substances that affect the central nervous system. bonds, which in the experiment can be locally influenced in various ways [8, 9, 20].
Для расшифровки действия ЭМОП-АГ в сравнении с мексидолом проводили электрофизиологические исследования на переживающих поперечных срезах гиппокампа 27 крыс-самцов линии Вистар массой 150-200 г [8]. Суммарную электрическую активность регистрировали в пирамидном слое поля СА1 с помощью одноканальных стеклянных микроэлектродов, заполненных 0,15 М раствором NaCl. Орто- и антидромную электрическую стимуляцию осуществляли посредством платиновых биполярных электродов (прямоугольные импульсы длительностью 0,1 мс, амплитудой 3-8 В, одиночные или парные), которые помещали в области колатералей Шаффера и альвеуса соответственно. Регистрировали одиночные или парные орто- и антидромные популяционные ответы.To decipher the effects of EMOP-AG in comparison with Mexidol, electrophysiological studies were performed on surviving transverse sections of the hippocampus of 27 Wistar male rats weighing 150-200 g [8]. The total electrical activity was recorded in the pyramidal layer of the CA1 field using single-channel glass microelectrodes filled with 0.15 M NaCl solution. Ortho- and antidromic electrical stimulation was performed using platinum bipolar electrodes (rectangular pulses with a duration of 0.1 ms, an amplitude of 3-8 V, single or paired), which were placed in the area of the Shaffer and alveus collaterals, respectively. Single or paired ortho- and antidromic population responses were recorded.
ЭМОП-АГ в концентрации 4 мМ (n=8) подавлял первый ортодромный популяционный ответ на 80±5% (мексидол в той же концентрации - на 61±4%, n=7), второй - 74±5% (мексидол - на 57±4%). Следовательно, ЭМОП-АГ оказывает более выраженное угнетающее действие, чем мексидол (в 1,3 раза, р<0,05). После отмывания веществ (до 1 ч) ортодромные популяционные ответы полностью восстанавливались.EMOP-AG at a concentration of 4 mM (n = 8) suppressed the first orthodromic population response by 80 ± 5% (mexidol at the same concentration - by 61 ± 4%, n = 7), the second - 74 ± 5% (mexidol - by 57 ± 4%). Therefore, EMOP-AG has a more pronounced inhibitory effect than Mexidol (1.3 times, p <0.05). After washing the substances (up to 1 h), orthodromic population responses were completely restored.
Значит ЭМОП-АГ, как и мексидол, способен влиять на синаптическую передачу в системе коллатерали Шаффера - пирамидные нейроны поля СА1 гиппокампа крыс.So EMOP-AG, like Mexidol, is able to influence synaptic transmission in the Schaffer collateral system — the pyramidal neurons of the rat hippocampus CA1 field.
На основании данных, представленных выше в примерах 4, 7 и 8, свидетельствующих о наличии у ЭМОП-АГ нейропротекторной активности и способности улучшать когнитивные функции и влиять на синаптическую передачу, можно отнести ЭМОП-АГ к нейротропным средствам.Based on the data presented in examples 4, 7, and 8 above, indicating that EMOP-AG has neuroprotective activity and the ability to improve cognitive functions and influence synaptic transmission, EMOP-AG can be classified as neurotropic drugs.
Итак, в модельной системе многослойных липосом из липопротеинов желтка куриных яиц ЭМОП-АГ по антиоксидантной активности превосходит ближайший аналог заявляемого средства мексидол почти в 2 раза, а также эталонный антигипоксант амтизол в 3 раза.So, in the model system of multilayer liposomes from lipoproteins of the yolk of chicken eggs, EMOP-AG in antioxidant activity exceeds the closest analogue of the claimed drug Mexidol almost 2 times, as well as the reference antihypoxant amtizol 3 times.
На разных моделях острой гипоксии у мышей ЭМОП-АГ при однократном введении превосходит и/или не уступает эталонному антигипоксанту амтизолу и мексидолу. ЭМОП-АГ при курсовом применении (по 10 или 20 мг/кг/сут в течение 5 сут) оказывает выраженное противогипоксическое действие при острой гипобарической гипоксии: существенно увеличивает продолжительность жизни и выживаемость мышей, предупреждает возникновение двигательных нарушений и улучшает общее состояние животных. При этом ЭМОП-АГ значительно превосходит мексидол по противогипоксической активности, давая эффект в значительно (в 25 раз) меньших дозах: одинаковое по выраженности противогипоксическое действие достигается при курсовом введении ЭМОП-АГ в дозе 10 мг/кг/сут, а мексидола - в дозе 250 мг/кг/сут.On different models of acute hypoxia in mice, EMOP-AG with a single administration is superior to and / or not inferior to the reference antihypoxant amtizol and mexidol. EMOP-AG with course application (10 or 20 mg / kg / day for 5 days) has a pronounced antihypoxic effect in acute hypobaric hypoxia: it significantly increases the life expectancy and survival of mice, prevents the occurrence of motor disorders and improves the general condition of animals. In this case, EMOP-AG significantly exceeds mexidol in antihypoxic activity, giving an effect in significantly (25 times) lower doses: the same antihypoxic effect is achieved with the course administration of EMOP-AG in a dose of 10 mg / kg / day, and mexidol in a dose 250 mg / kg / day.
На модели ишемического инсульта у крыс ЭМОП-АГ (по 10 или 30 мг/кг/сут в течение 7 сут) оказывает выраженное нейропротекторное действие, превосходя по выраженности действия в отношении неврологического дефицита эталонный антигипоксант амтизол (10 и 30 мг/кг/сут), а также другие препараты сравнения (мексидол и семакс). У крыс с геморрагическим инсультом ЭМОП-АГ (по 20 мг/кг/сут в течение 14 сут) вызывает значительное уменьшение неврологического дефицита, улучшает координацию движений и уменьшает гибель животных. Мексидол при аналогичном курсовом применении также уменьшает неврологический дефицит и летальность крыс, но в значительно более высокой дозе - 150 мг/кг/сут. Значит на модели геморрагического инсульта ЭМОП-АГ значительно превосходит мексидол по нейропротекторной активности (по крайней мере в 7,5 раз).On a model of ischemic stroke in rats, EMOP-AH (10 or 30 mg / kg / day for 7 days) has a pronounced neuroprotective effect, exceeding the reference antihypoxant amtizol (10 and 30 mg / kg / day) in terms of severity of action , as well as other comparison drugs (Mexidol and Semax). In rats with hemorrhagic stroke, EMOP-AH (20 mg / kg / day for 14 days) causes a significant decrease in neurological deficit, improves coordination of movements and reduces animal death. Mexidol with a similar course application also reduces the neurological deficit and mortality of rats, but at a significantly higher dose - 150 mg / kg / day. Therefore, in the model of hemorrhagic stroke, EMOP-AG significantly exceeds Mexidol in neuroprotective activity (at least 7.5 times).
У крыс в тесте скополаминовой амнезии ЭМОП-АГ в дозах 20 и 30 мг/кг оказывает сходное антиамнестическое действие с мексидолом в дозах 100 и 200 мг/кг, при этом ЭМОП-АГ по крайней мере в 3 раза превосходит мексидол по активности. На различных моделях амнезии у мышей ЭМОП-АГ при однократном введении превосходит и/или не уступает мексидолу и другим препаратам сравнения (пирацетам, оксирацетам, амтизол).In rats in the scopolamine amnesia test, EMOP-AG at doses of 20 and 30 mg / kg has a similar anti-anesthetic effect with mexidol at doses of 100 and 200 mg / kg, while EMOP-AG is at least 3 times higher than mexidol in activity. On various amnesia models in mice, EMOP-AG, when administered once, is superior to and / or not inferior to Mexidol and other comparison drugs (piracetam, oxiracetam, amtizol).
У крыс по выраженности противоукачивающего действия ЭМОП-АГ превосходит эталонный вестибулопротектор скополамин.In rats, the severity of the anti-pumping action of EMOP-AG exceeds the reference vestibuloprotector scopolamine.
ЭМОП-АГ в дозах 20 и 30 мг/кг улучшает обучение крыс-недоучек и по выраженности это действие ЭМОП-АГ соответствует таковому мексидола в дозах 100 и 200 мг/кг. ЭМОП-АГ (курсовое введение) восстанавливает нарушенные геморрагическим инсультом когнитивные функции в тесте УРПИ через 7 и 14 сут после операции. По всем показателям оценки когнитивных функций ЭМОП-АГ превосходит мексидол, при этом ЭМОП-АГ имеет гораздо большую активность (по крайней мере в 7,5 раз выше). Следовательно, ЭМОП-АГ превосходит мексидол как по способности восстанавливать нарушенные геморрагическим инсультом когнитивные функции, так и по активности.EMOP-AG in doses of 20 and 30 mg / kg improves the education of rat-half-rats and in severity this effect of EMOP-AG corresponds to that of mexidol in doses of 100 and 200 mg / kg. EMOP-AG (course introduction) restores cognitive functions impaired by hemorrhagic stroke in the passive avoidance reaction test 7 and 14 days after surgery. EMOP-AG is superior to mexidol in all indicators of cognitive function assessment, while EMOP-AG has much greater activity (at least 7.5 times higher). Consequently, EMOP-AG is superior to Mexidol both in its ability to restore cognitive function impaired by hemorrhagic stroke, and in activity.
На переживающих срезах гиппокампа крыс ЭМОП-АГ, как и мексидол, способен влиять на синаптическую передачу в системе коллатерали Шаффера - пирамидные нейроны поля СА1; при этом ЭМОП-АГ оказывает более выраженное действие, чем мексидол.On surviving sections of the rat hippocampus, EMOP-AG, like Mexidol, is able to influence synaptic transmission in the Schaffer collateral system — pyramidal neurons of the CA1 field; however, EMOP-AG has a more pronounced effect than mexidol.
Таким образом, на разных моделях ЭМОП-АГ превосходит и/или не уступает ближайшему аналогу заявляемого средства мексидолу, а также другим препаратам сравнения. При этом у животных в зависимости от теста ЭМОП-АГ может превосходить мексидол по активности в 3-25 раз.Thus, on different models, EMOP-AG is superior to and / or not inferior to the closest analogue of the claimed drug to Mexidol, as well as to other comparison drugs. Moreover, in animals, depending on the test, EMOP-AG can exceed Mexidol in activity by 3-25 times.
ЛитератураLiterature
1. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон П.Д. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения: пер. с англ./Под. ред. Батуева А.С. - М.: Высш. шк., 1991. - 399 с.1. Buresh Y., Bureshova O., Houston P.D. Methods and basic experiments on the study of the brain and behavior: Per. from English / Under. ed. Batueva A.S. - M .: Higher. school., 1991 .-- 399 p.
2. Владимиров Ю.А., Шерстнев М.П., Азимбаев Т.К. Оценка антиокислительной и антирадикальной активностей веществ и биологических объектов с помощью железоинициированной хемилюминесценции // Биофизика. - 1992. - Т.37, вып.6. - С.1041-1047.2. Vladimirov Yu.A., Sherstnev M.P., Azimbaev T.K. Evaluation of antioxidant and antiradical activities of substances and biological objects using iron-initiated chemiluminescence // Biophysics. - 1992. - T.37, issue 6. - S.1041-1047.
3. Воронина Т.А. Отечественный препарат нового поколения мексидол: основные эффекты, механизм действия, применение. - М., 2004. - 21 с.3. Voronina T.A. Domestic drug of the new generation Mexidol: main effects, mechanism of action, application. - M., 2004 .-- 21 p.
4. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга. - М.: Медицина, 2001.4. Gusev E.I., Skvortsova V.I. Cerebral ischemia. - M .: Medicine, 2001.
5. Инсульт: диагностика, лечение, профилактика/Под редакцией З.И.Суслиной, М.А.Пирадова. - М.: «МЕДпресс-информ», 2008. 288 с.5. Stroke: diagnosis, treatment, prevention / Edited by Z. I. Suslina, M. A. Piradov. - M.: MEDpress-inform, 2008.288 s.
6. Машковский М.Д. Лекарственные средства. 15-е изд. - М.: «Новая Волна», 2008. 1206 с.6. Mashkovsky M.D. Medicines 15th ed. - M.: “New Wave”, 2008. 1206 p.
7. Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств/Под редакцией Л.Д.Лукьяновой. - М., 1990. - 18 с.7. Guidelines for the experimental study of drugs proposed for clinical study as antihypoxic drugs / Edited by L. D. Lukyanova. - M., 1990. - 18 p.
8. Мотин В.Г., Яснецов В.В., Ковалев С.М., Крылова И.Н. Влияние ноотропов на электрическую активность в поле СА1 гиппокампа крыс // Бюл. экспер. биол. и мед. - 2000. - Т. 130, №9. - С.252-254.8. Motin V.G., Yasnetsov V.V., Kovalev S.M., Krylova I.N. The effect of nootropics on electrical activity in the CA1 field of rat hippocampus // Bull. expert. biol. and honey. - 2000. - T. 130, No. 9. - S.252-254.
9. Петров В.И., Пиотровский Л.Б., Григорьев И.А. Возбуждающие аминокислоты (нейрохимия, фармакология и терапевтический потенциал ВАКергических средств). - Волгоград, 1997. - 167 с.9. Petrov V.I., Piotrovsky LB, Grigoryev I.A. Exciting amino acids (neurochemistry, pharmacology and therapeutic potential of VACergic agents). - Volgograd, 1997 .-- 167 p.
10. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ/Под редакцией Р.У.Хабриева. - М.: Минздрав РФ, 2005.10. Guidance on the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances / Edited by R.U. Khabriev. - M.: Ministry of Health of the Russian Federation, 2005.
11. Скворцова В.И. Ишемический инсульт: патогенез ишемии, терапевтические подходы // Невролог, журн. - 2001. - Т.6, №3. - С.4-9.11. Skvortsova V.I. Ischemic stroke: pathogenesis of ischemia, therapeutic approaches // Neurologist, Zh. - 2001. - T. 6, No. 3. - S. 4-9.
12. Суслина З.А., Смирнова И.Н., Танашян М.М. и др. Клиническая эффективность мексидола и влияние его на реологические свойства крови и гемоперфузию головного мозга при хронических формах цереброваскулярных заболеваний. - М., 2002. - 19 с.12. Suslina Z.A., Smirnova I.N., Tanashyan M.M. et al. Clinical efficacy of Mexidol and its effect on the rheological properties of blood and cerebral hemoperfusion in chronic forms of cerebrovascular diseases. - M., 2002 .-- 19 p.
13. Федин А.И., Румянцева С.А., Миронова О.П., Евсеев В.П. Применение антиоксиданта мексидола у больных с острыми нарушениями мозгового кровообращения. Методические рекомендации. - М., 2002. - 16 с.13. Fedin A.I., Rumyantseva S.A., Mironova O.P., Evseev V.P. The use of the antioxidant Mexidol in patients with acute cerebrovascular accident. Guidelines. - M., 2002 .-- 16 p.
14. Яснецов В.В., Киселева Н.М. О вестибулопротекторной активности специфического антагониста N-метил-L-аспартата (NMDA) // Авиакосм, и экол. мед. - 1994. - Т.28, №5. - С.66-67.14. Yasnetsov V.V., Kiseleva N.M. On the vestibuloprotective activity of a specific antagonist of N-methyl-L-aspartate (NMDA) // Aviakosm and ekol. honey. - 1994. - T.28, No. 5. - S.66-67.
15. Crampton G.H., Lucot J.B. A stimulator for laboratory studies of motion sickness in cats // Aviat. Space Environ. Med. - 1985. - Vol.56, No 5. - P.462-465.15. Crampton G.H., Lucot J.B. A stimulator for laboratory studies of motion sickness in cats // Aviat. Space Environ. Med. - 1985. - Vol. 56, No 5. - P.462-465.
16. Cumin R., Bandle E.F., Gamzu E., Haefely W.E. Effect of the novel compound antiracetam (Ro 13-5057) upon impared learning and memory in rodents // Psychopharmacol. - 1982. - Vol.78. - P.104-111.16. Cumin R., Bandle E.F., Gamzu E., Haefely W.E. Effect of the novel compound antiracetam (Ro 13-5057) upon impared learning and memory in rodents // Psychopharmacol. - 1982. - Vol. 78. - P.104-111.
17. Jackowski A., Crockard A., Burnstock G. et al. The time course of intracranial pathophysiological changes following experimental subarachnoid haemorrage in the rat // J Cereb Blood Flow Metab. - 1990. - Vol.10 - P.835-849.17. Jackowski A., Crockard A., Burnstock G. et al. The time course of intracranial pathophysiological changes following experimental subarachnoid haemorrage in the rat // J Cereb Blood Flow Metab. - 1990. - Vol.10 - P.835-849.
18. McGraw C.P., Pashayan A.G., Wendel O.T. Cerebral infarction in the Mongolian gerbil exacerbated by phenoxybenzaminetreatment // Stroke. - 1976 - Vol.7, No 5. - P.485-488.18. McGraw C.P., Pashayan A.G., Wendel O.T. Cerebral infarction in the Mongolian gerbil exacerbated by phenoxybenzaminetreatment // Stroke. - 1976 - Vol.7, No 5. - P.485-488.
19. Mondadori C., Bhatnagar A., Borkovski J., Häusler A. Involvement of a steroidal component in the mechanism of action of piracetam-like nootropics // Brain Res. - 1990. - Vol.506 - P.101-108.19. Mondadori C., Bhatnagar A., Borkovski J., Häusler A. Involvement of a steroidal component in the mechanism of action of piracetam-like nootropics // Brain Res. - 1990. - Vol.506 - P.101-108.
20. Sobrado M., Roda J.M., Lopez M.G. et al. Galantamine and memantine produce different degrees of neuroprotection in rat hippocampal slices subjected to oxygen-glucose deprivation //Neurosci Lett. - 2004. - Vol.365, No 2. - P.132-136.20. Sobrado M., Roda J.M., Lopez M.G. et al. Galantamine and memantine produce different degrees of neuroprotection in rat hippocampal slices overcome to oxygen-glucose deprivation // Neurosci Lett. - 2004 .-- Vol.365, No. 2 .-- P.132-136.
(контроль 2)0.9% NaCl + ESH solution
(control 2)
(контроль 2)0.9% NaCl + scopolamine
(control 2)
(контроль 1)0.9% NaCl solution + 0.9% NaCl solution
(control 1)
(контроль 2)0.9% NaCl + scopolamine (1)
(control 2)
/n=20/GI + 0.9% NaCl solution (control)
/ n = 20 /
/n=20/GI + EMOP-AG (20 mg / kg / day)
/ n = 20 /
/n=20/GI + Mexidol (150 mg / kg / day)
/ n = 20 /
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008146322A RU2394816C3 (en) | 2008-11-25 | A NEUROTROPIC AGENT WITH ANTIOXIDANT, ANTI-HYPOXIC, NEUROPROTECTIVE, ANTIAMNESTIC AND ANTI-PUMPING ACTIVITY AND THE ABILITY TO IMPROVE COGNITIVE FUNCTIONS |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008146322A RU2394816C3 (en) | 2008-11-25 | A NEUROTROPIC AGENT WITH ANTIOXIDANT, ANTI-HYPOXIC, NEUROPROTECTIVE, ANTIAMNESTIC AND ANTI-PUMPING ACTIVITY AND THE ABILITY TO IMPROVE COGNITIVE FUNCTIONS |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2394816C1 true RU2394816C1 (en) | 2010-07-20 |
| RU2394816C3 RU2394816C3 (en) | 2020-09-09 |
Family
ID=
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2468813C1 (en) * | 2011-08-08 | 2012-12-10 | Градстейн Инвестментс Лимитед | Agent for prevention and treatment of acute and chronic cerebrovascular disease, use and method of treating |
| WO2014087231A2 (en) | 2012-11-08 | 2014-06-12 | Замертон Холдингс Лимитед | Pharmaceutical composition having a neuroprotective, nootropic, antiamnesic effect, and method for preventing and/or treating states associated with cerebral circulation disorders, cerebrovascular and neurodegenerative diseases |
| RU2637168C2 (en) * | 2015-03-12 | 2017-11-30 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Pharmaceutical composition in form of solute for intravenous and intramuscular injection and its production process |
| RU2664453C1 (en) * | 2017-11-24 | 2018-08-17 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тверской государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Derivative of 3-hydroxypyridine with anxiolytic and nootropic effect |
| EA030655B1 (en) * | 2015-12-07 | 2018-09-28 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Method of producing 6-methyl-2-ethylpyridine-3-ol(2s)-2-acetaminopentanedioic acid |
| RU2668499C2 (en) * | 2015-03-12 | 2018-10-01 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Pharmaceutical composition in form of tablets with enteric coating and method of preparation thereof |
| RU2692063C2 (en) * | 2015-03-12 | 2019-06-20 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Medicinal agent for preventing and treating cerebral diseases and method of treating cerebral diseases |
| WO2021101409A3 (en) * | 2019-11-22 | 2021-07-15 | Владимир Леонидович ПАСТУШЕНКОВ | Method for preventing and treating motion sickness |
| RU2796005C2 (en) * | 2018-12-18 | 2023-05-16 | Аэлис Фарма | 3β-(Benzyloxy)-17α-METHYL-PREGN-5-EN-20-ONE FOR USE IN THE TREATMENT OF COGNITIVE DISORDERS |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2003133173A (en) * | 2003-11-14 | 2005-05-10 | Государственное предпри тие институт иммунологии Федерального управлени медико-биологических и экстремальных проблем при Министерстве здравоохранени РФ (RU) | Sodium 2-Ethyl-6-Methyl-3-Hydroxypyridine Complex N, N-Diethylthithiocarbamate, Which Has Anti-Allergic Activity |
| RU2284993C2 (en) * | 2002-06-14 | 2006-10-10 | Леонид Дмитриевич Смирнов | 2-ethyl-6-methyl-3-oxypyrodine salts with organic carboxylic acids possessing anxiolytic, antidepressive, antihypoxic, anti-amnestic and anti-oxidative activity and method for their preparing |
| WO2006115436A1 (en) * | 2005-04-28 | 2006-11-02 | Galina Victorovna Sukoyan | Medicinal agent for preventing progression of apoptotic and jugulating necrotic changes in the organism tissues |
| RU2006113431A (en) * | 2006-04-21 | 2007-11-10 | Леонид Дмитриевич Смирнов (RU) | 2-Ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine n-acetylcysteinate possessing antioxidant, hypoglycemic, hypolipidemic, and anti-shock properties |
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2284993C2 (en) * | 2002-06-14 | 2006-10-10 | Леонид Дмитриевич Смирнов | 2-ethyl-6-methyl-3-oxypyrodine salts with organic carboxylic acids possessing anxiolytic, antidepressive, antihypoxic, anti-amnestic and anti-oxidative activity and method for their preparing |
| RU2003133173A (en) * | 2003-11-14 | 2005-05-10 | Государственное предпри тие институт иммунологии Федерального управлени медико-биологических и экстремальных проблем при Министерстве здравоохранени РФ (RU) | Sodium 2-Ethyl-6-Methyl-3-Hydroxypyridine Complex N, N-Diethylthithiocarbamate, Which Has Anti-Allergic Activity |
| WO2006115436A1 (en) * | 2005-04-28 | 2006-11-02 | Galina Victorovna Sukoyan | Medicinal agent for preventing progression of apoptotic and jugulating necrotic changes in the organism tissues |
| RU2006113431A (en) * | 2006-04-21 | 2007-11-10 | Леонид Дмитриевич Смирнов (RU) | 2-Ethyl-6-methyl-3-hydroxypyridine n-acetylcysteinate possessing antioxidant, hypoglycemic, hypolipidemic, and anti-shock properties |
Cited By (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2468813C1 (en) * | 2011-08-08 | 2012-12-10 | Градстейн Инвестментс Лимитед | Agent for prevention and treatment of acute and chronic cerebrovascular disease, use and method of treating |
| WO2014087231A2 (en) | 2012-11-08 | 2014-06-12 | Замертон Холдингс Лимитед | Pharmaceutical composition having a neuroprotective, nootropic, antiamnesic effect, and method for preventing and/or treating states associated with cerebral circulation disorders, cerebrovascular and neurodegenerative diseases |
| EA034722B1 (en) * | 2015-03-12 | 2020-03-12 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Pharmaceutical composition in the form of intravenous and intramuscular solution and method of production thereof |
| RU2637168C2 (en) * | 2015-03-12 | 2017-11-30 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Pharmaceutical composition in form of solute for intravenous and intramuscular injection and its production process |
| EA036126B1 (en) * | 2015-03-12 | 2020-10-01 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Method of treating cerebral diseases |
| EA034816B1 (en) * | 2015-03-12 | 2020-03-25 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Pharmaceutical composition in the form of an enteric-coated tablet and method of producing same |
| RU2668499C2 (en) * | 2015-03-12 | 2018-10-01 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Pharmaceutical composition in form of tablets with enteric coating and method of preparation thereof |
| RU2692063C2 (en) * | 2015-03-12 | 2019-06-20 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Medicinal agent for preventing and treating cerebral diseases and method of treating cerebral diseases |
| RU2671200C2 (en) * | 2015-12-07 | 2018-10-30 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Method of obtaining 6-methyl-2-ethylpyridine-3-ol salt of (2s)-2-acetaminopentanedioic acid |
| EA030655B1 (en) * | 2015-12-07 | 2018-09-28 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Method of producing 6-methyl-2-ethylpyridine-3-ol(2s)-2-acetaminopentanedioic acid |
| RU2664453C1 (en) * | 2017-11-24 | 2018-08-17 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тверской государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Derivative of 3-hydroxypyridine with anxiolytic and nootropic effect |
| RU2800802C2 (en) * | 2018-09-28 | 2023-07-28 | Юниверсите Де Кан Норманди | Donecoprid as a neuroprotective agent in the treatment of neurodegerative diseases |
| RU2796005C2 (en) * | 2018-12-18 | 2023-05-16 | Аэлис Фарма | 3β-(Benzyloxy)-17α-METHYL-PREGN-5-EN-20-ONE FOR USE IN THE TREATMENT OF COGNITIVE DISORDERS |
| WO2021101409A3 (en) * | 2019-11-22 | 2021-07-15 | Владимир Леонидович ПАСТУШЕНКОВ | Method for preventing and treating motion sickness |
| RU2753952C2 (en) * | 2019-11-22 | 2021-08-24 | Общество с ограниченной ответственностью "Фарм-ТРИСАН" | Method for preventing and treating motion sickness and agent for preventing and treating motion sickness (variants) |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sasaki et al. | Biological role of lutein in the light-induced retinal degeneration | |
| Cervantes-Llanos et al. | Beneficial effects of oral administration of C-Phycocyanin and Phycocyanobilin in rodent models of experimental autoimmune encephalomyelitis | |
| Tateishi | Subacute myelo‐optico‐neuropathy: clioquinol intoxication in humans and animals | |
| TWI452039B (en) | Anti-neurodegenerative diseases agents | |
| Berry et al. | A critical evaluation of claimed relationships between alcohol intake and aggression in infra-human animals | |
| Machle | Tetra-ethyl lead intoxication and poisoning by related compounds of lead | |
| Yang et al. | Cognitive improvement induced by environment enrichment in chronic cerebral hypoperfusion rats: a result of upregulated endogenous neuroprotection? | |
| RU2460529C1 (en) | Drug possessing actoprotective, antihypoxic, neuroprotective, antiamnestic and thermoprotective activity | |
| EP4037684A1 (en) | Medicinal cognitive treatments | |
| Subaiea et al. | Reduction of amyloid-β deposition and attenuation of memory deficits by tolfenamic acid | |
| US20120302526A1 (en) | Methods for treating post-traumatic stress disorder | |
| RU2696203C1 (en) | Method for preventing cerebral ischemia | |
| RU2394816C1 (en) | Neurotropic agent with antioxidant, antihypoxic, neuroprotector, antiamnesic and anti-motion sickness activity and capable of enhancing cognitive functions | |
| RU2462245C1 (en) | Drug possessing antihypoxic, actoprotective, nootropic activities and having effect on physical efficiency, and based pharmaceutical composition | |
| CN1239486C (en) | Acridine derivative and its application | |
| Mishchenko et al. | Experimental research of cerebroprotective activity of the new 4-aminobutatanoic acid derivative | |
| CA2340745A1 (en) | Azepinyland linear compounds and their use for vision and memory disorders | |
| RU2842681C1 (en) | Composition for improving cognitive functions | |
| RU2782133C2 (en) | USE OF PHARMACEUTICAL COMPOSITION OF β-CYCLODEXTRIN WITH 9-PHENYL-2,3,4,5,6,7,8,9-OCTAHYDRO-1H-SELENOXANTHENE FOR INCREASING/RESTORING LIBIDO | |
| CN119055674B (en) | Composition capable of improving cognition and application thereof in Alzheimer disease prevention and treatment | |
| RU2556637C1 (en) | Potassium n-(4-acetoxybenzoyl)glycinate possessing cerebroprotective activity | |
| CN101500998B (en) | Monovalent and divalent salts of N-(5-hydroxynicotinoyl)-L-glutamic acid exhibiting psychomodulatory (antidepressant and anxiolytic), neuroprotective, anti-aging and brain-protective functions | |
| Flak et al. | Memory aid—/INS; Computer based working memory training in elderly with mild cognitive impairment (MCI). A randomized, controlled trial | |
| RU2570644C1 (en) | Disodium salt of salicyluric acid, possessing cerebroprotective activity | |
| Zhao et al. | Grape Seed Proanthocyanins Extract Ameliorates the Neurotoxicity Induced by Fluoride Through mTOR/p70s6k Signaling Pathway in Vivo and in Vitro |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20110707 |
|
| ND4A | Extension of patent duration |
Effective date: 20200909 |