RU2385158C2

RU2385158C2 - Agent "colimac" for treating diarrhea in piglets, method for making thereof and method of treating diarrhea

Info

Publication number: RU2385158C2
Application number: RU2007124827/15A
Authority: RU
Inventors: Андрей Борисович Лисицин (RU); Андрей Борисович Лисицин; Ирина Михайловна Чернуха (RU); Ирина Михайловна Чернуха; Александр Николаевич Макаренко (UA); Александр Николаевич Макаренко; Василий Иванович Золотухин (RU); Василий Иванович Золотухин; Владимир Николаевич Загорельский (BY); Владимир Николаевич Загорельский
Priority date: 2007-07-03
Filing date: 2007-07-03
Publication date: 2010-03-27
Also published as: RU2007124827A

Abstract

FIELD: medicine, pharmaceutics.

SUBSTANCE: invention relates to veterinary science. Specified agent represents mixed lyophilised aqueous extracts of pyloric and fundic gastric, duodenal and pancreatic tissues of pigs and contains a complex of proteolytic enzymes with molecular weight 35000-40000 Da, consisting of pepsin and pepsinogen in the ratio 1:12-1:17 with pH 7.0, others proteolytic enzymes, carboproteinase and other proteases, and also tripsinogen, chemotrypsinogen, trypsin, pantrypsin, chemotrypsin, amylase, lipase, nuclease, elastase, collagenase, dominant amino acids - asparaginic, glutaminic, alanine, glycine, lysine, leucine and valine. The method for making said agent provides aqueous extraction of biological raw materials followed with recovery and further lyophilisation of a supernatant. Method of treating diarrhoea in piglets is characterised by that 25-30 ml of the agent under cl.1 dissolved in 1.5% sodium chloride is orally introduced to piglets with diarrhoea.

EFFECT: development of an effective remedy for treating diarrhoea in piglets

3 cl, 1 tbl, 1 ex

Description

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к препаратам, используемым для лечения желудочно-кишечных расстройств у сельскохозяйственных животных - молочных поросят и поросят-отъемышей.The invention relates to the field of veterinary medicine, in particular to drugs used to treat gastrointestinal disorders in farm animals - milk pigs and weaned piglets.

В настоящее время диарея рассматривается как инфекционное заболевание, развивающееся в желудочно-кишечном тракте и требующее для своего лечения специальные медикаментозные средства, в первую очередь, антибиотики и ряд других препаратов. Однако применение антибиотиков в ветеринарной практике имеет ряд существенных недостатков, в частности длительность курса их применения (обычно 5-7 дней), высокая стоимость лечения и большое количество побочных эффектов. Кроме того, антибиотикам свойственно ослаблять репродуктивную функцию многих видов животных, угнетать функциональную деятельность иммунной системы организма. К тому же некоторые антибиотики плохо всасываются в кровь из желудочно-кишечного тракта при их применении внутрь либо индивидуально плохо переносимы.At present, diarrhea is considered as an infectious disease that develops in the gastrointestinal tract and requires special medications for its treatment, primarily antibiotics and a number of other drugs. However, the use of antibiotics in veterinary practice has a number of significant drawbacks, in particular the length of the course of their use (usually 5-7 days), the high cost of treatment and a large number of side effects. In addition, it is common for antibiotics to weaken the reproductive function of many animal species, to inhibit the functional activity of the body's immune system. In addition, some antibiotics are poorly absorbed into the blood from the gastrointestinal tract when used internally or are individually poorly tolerated.

В связи с этим в странах Евросоюза с 2006 г. использование антибиотиков для лечения диарейного синдрома официально запрещено, а решение этой проблемы осуществляется путем выбраковки больных животных.In this regard, since 2006, the use of antibiotics for the treatment of diarrheal syndrome has been officially prohibited in the EU countries, and the solution to this problem is carried out by culling sick animals.

Известен препарат для лечения диареи новорожденных поросят, содержащий в качестве активного начала вещества нитрофуранового ряда, в частности семикарбазон-5-нитрофурфурол (Патент РФ 2075971, А61К 31/00), который наносят на кожу молочной железы свиноматки на второй-третий день после опороса за 2-3 ч перед кормлением поросят в течение 2 дней по 2 раза в день. Недостатком данного препарата является сложность и трудоемкость способа его применения, а также большие затраты времени, которые неизбежны при использовании этого препарата в условиях крупных свинокомплексов.A known drug for the treatment of diarrhea of newborn piglets, containing as an active principle a substance of the nitrofuran series, in particular semicarbazone-5-nitrofurfural (RF Patent 2075971, A61K 31/00), which is applied to the skin of the mammary gland of a sow on the second or third day after farrowing 2-3 hours before feeding piglets for 2 days, 2 times a day. The disadvantage of this drug is the complexity and the complexity of the method of its use, as well as the high cost of time, which are inevitable when using this drug in large pig farms.

Известно средство для лечения и профилактики желудочно-кишечных болезней разной этиологии с синдромом диареи сельскохозяйственных животных, включающее активное вещество - производное бензимидазола и вспомогательные компоненты (Патент РФ 2128994, А61К 31/41). Недостатком этого препарата является то, что он лишен способности повышать антимикробную резистентность и быстро восстанавливать баланс микро- и макроэлементов в организме.Known agent for the treatment and prevention of gastrointestinal diseases of various etiologies with diarrhea syndrome of farm animals, including the active substance is a derivative of benzimidazole and auxiliary components (RF Patent 2128994, A61K 31/41). The disadvantage of this drug is that it lacks the ability to increase antimicrobial resistance and quickly restore the balance of micro and macro elements in the body.

Известны также препараты для лечения диареи новорожденных поросят - антибиотики ампициллин и тетрациклин и способы их применения (Методические указания по профилактике и лечению желудочно-кишечных болезней у новорожденных поросят. ВНИИ незаразных болезней животных. Воронеж, 1988, с.17). Недостатком использования данных препаратов и способа их применения является то, что они вводятся непосредственно каждому поросенку, данные препараты малоэффективны и не приводят к полному выздоровлению больных животных. Курс лечения поросят этими препаратами продолжителен и составляет не менее 5-6 дней. Довольно частым побочным эффектом лечения антибиотиками является их передозировка.Drugs for the treatment of diarrhea of newborn piglets are also known - antibiotics ampicillin and tetracycline and methods for their use (Guidelines for the prevention and treatment of gastrointestinal diseases in newborn piglets. All-Russian Research Institute of Non-communicable Animal Diseases. Voronezh, 1988, p.17). The disadvantage of using these drugs and the method of their use is that they are administered directly to each piglet, these drugs are ineffective and do not lead to the full recovery of sick animals. The course of treatment for piglets with these drugs is long and lasts at least 5-6 days. A fairly common side effect of antibiotic treatment is their overdose.

Наиболее близкими по технической сущности к заявленному изобретению являются ветеринарный препарат для лечения болезней сельскохозяйственных животных бактериальной этиологии, который представляет собой маточный раствор гумата натрия и содержит белки, липиды, минералы, аминокислоты и ферменты (Патент РФ 2214253, А61К 35/10). Главным недостатком этого препарата является длительность его применения из-за низкой терапевтической эффективности.The closest in technical essence to the claimed invention are a veterinary preparation for the treatment of diseases of farm animals of bacterial etiology, which is a mother liquor of sodium humate and contains proteins, lipids, minerals, amino acids and enzymes (RF Patent 2214253, A61K 35/10). The main disadvantage of this drug is the duration of its use due to low therapeutic efficacy.

В качестве наиболее близкого аналога для технического решения и способа лечения поросят является способ получения препарата для лечения желудочно-кишечных заболеваний и расстройств у молодняка сельскохозяйственных животных из сычужной ткани двенадцатиперстной кишки и поджелудочной железы (патент RU 2299736 С1, 27.05.2007). По назначению совокупности признаков и достигаемому результату являются наиболее близкими аналогами соответственно заявленных средства и способа его получения, а также способа лечения диареи у поросят. Основными недостатками данного способа от предложенного является то, что экстракция биологических веществ в нем осуществляется при кислых значениях pH в течение длительного периода времени с использованием ряда режимов обработки и значительными трудо- и энергозатратами, неудобство хранения.As the closest analogue for the technical solution and method for treating piglets, there is a method for preparing a preparation for treating gastrointestinal diseases and disorders in young farm animals from rennet of the duodenum and pancreas (patent RU 2299736 C1, 05.27.2007). According to the purpose of the totality of the signs and the achieved result, they are the closest analogues of the claimed means and the method of its production, as well as the method of treating diarrhea in piglets, respectively. The main disadvantages of this method from the proposed one is that the extraction of biological substances in it is carried out at acidic pH values for a long period of time using a number of processing modes and significant labor and energy costs, inconvenience of storage.

Задачей настоящего изобретения является создание средства для лечения диареи у сельскохозяйственных животных, которое было бы свободно от вышеперечисленных недостатков, имело высокую специфическую активность, обладало иммунокорригирующим действием, а его использование быстро повышало бы эффективность лечения диарейного синдрома у молочных поросят и поросят-отъемышей. Кроме того, задачей настоящего изобретения является расширение существующего арсенала ветеринарных лекарственных средств, направленных на лечение диарейного синдрома.An object of the present invention is to provide an agent for treating diarrhea in farm animals that would be free of the above disadvantages, have a high specific activity, have an immunocorrective effect, and its use would quickly increase the effectiveness of the treatment of diarrhea syndrome in dairy pigs and weaned piglets. In addition, the present invention is the expansion of the existing arsenal of veterinary drugs aimed at the treatment of diarrheal syndrome.

Поставленная задача достигается тем, что средство для лечения диареи у сельскохозяйственных животных получают из отходов мясной промышленности, а именно тканей пилорического и фундального отделов желудка, двенадцатиперстной кишки и поджелудочной железы свиней. Для этого ткани вышеуказанных органов очищают от сопутствующих тканей, механически измельчают и гомогенизируют в 0,85% растворе хлорида натрия (физраствор), после чего гомогенаты тканей разбавляют физраствором в отдельных стеклянных емкостях объемом 10 л в следующих весообъемных соотношениях: гомогенат тканей желудка/физраствор - 1/10, гомогенат тканей двенадцатиперстной кишки/физраствор - 1/20, гомогенат тканей поджелудочной железы/физраствор - 1/10. Осуществляют водную экстракцию биологически активных веществ в течение 24 ч при температуре 4°С и значении pH 7,35. После этого гомогенаты центрифугируют в течение 10 мин при 1500g и температуре 1,5°С. Полученные супернатанты смешивают между собой в соотношении 1:1:1, разливают в емкости по 100 мл и лиофилизируют.This object is achieved in that the agent for treating diarrhea in farm animals is obtained from waste from the meat industry, namely, tissues of the pyloric and fundus of the stomach, duodenum and pancreas of pigs. To do this, the tissues of the above organs are cleaned of accompanying tissues, mechanically crushed and homogenized in a 0.85% sodium chloride solution (saline), after which the tissue homogenates are diluted with saline in separate 10 L glass containers in the following weight and volume ratios: stomach tissue homogenate / saline - 1/10, duodenal tissue homogenate / saline solution - 1/20, pancreatic tissue homogenate / saline solution - 1/10. Aqueous extraction of biologically active substances is carried out for 24 hours at a temperature of 4 ° C and a pH value of 7.35. After that, the homogenates are centrifuged for 10 min at 1500 g and a temperature of 1.5 ° C. The resulting supernatants are mixed with each other in a 1: 1: 1 ratio, poured into 100 ml containers and lyophilized.

Полученное средство, названное авторами «Колимак», содержит комплекс протеолитических ферментов с молекулярной массой 35000-40000 Да, состоящий из пепсина и пепсиногена в соотношении 1:12- 1:17 при pH 7,0, других протеолитических ферментов, карбопротеиназы и других протеаз. Кроме того, в состав полученного средства входят проферменты трипсиноген и химотрипсиноген, а также трипсин, пантрипсин, химотрипсин, амилаза, липаза, нуклеазы - ДНКаза и РНКаза, эластаза, коллагеназа и значительное количество «балластных» белков. Авторами настоящего изобретения определено, что аминокислотный состав заявляемого средства представлен 17 аминокислотами, доминирующими среди которых, а поэтому в значительной степени влияющими на его свойства являются аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, аланин, глицин, лизин, лейцин и валин (табл.1).The resulting product, called by the authors "Kolimak", contains a complex of proteolytic enzymes with a molecular weight of 35000-40000 Da, consisting of pepsin and pepsinogen in a ratio of 1: 12-1:17 at pH 7.0, other proteolytic enzymes, carboproteinases and other proteases. In addition, the composition of the product contains proenzymes trypsinogen and chymotrypsinogen, as well as trypsin, pantripsin, chymotrypsin, amylase, lipase, nuclease - DNase and RNase, elastase, collagenase and a significant amount of "ballast" proteins. The authors of the present invention determined that the amino acid composition of the claimed drug is represented by 17 amino acids, the dominant of which, and therefore, significantly affect its properties, are aspartic acid, glutamic acid, alanine, glycine, lysine, leucine and valine (Table 1).

Для определения активности и эффективности заявляемого средства были проведены опыты на 42 разновозрастных поросятах обоих полов, страдающих диареей. Животные были разделены на 4 группы - две контрольные, (п=10, в случае отъемышей, и п=9, в случае молочных поросят) и 2 опытные по 12 голов отъемышей и 11 голов молочных поросят, которые получали средство "Колимак" однократно перорально с помощью резиновой груши в объеме 25-30 мл.To determine the activity and effectiveness of the claimed funds, experiments were conducted on 42 pigs of different ages of both sexes suffering from diarrhea. The animals were divided into 4 groups - two control (n = 10, in the case of weaners, and n = 9, in the case of dairy pigs) and 2 experimental animals, 12 weaners each and 11 heads of dairy piglets, who received Kolimak once oral using a rubber bulb in a volume of 25-30 ml.

Изучение лечебной активности средства показало, что у контрольных животных с диареей без лечения развивались обезвоживание организма, потеря веса, нарушение аппетита и 100% гибель животных обеих групп: у молочных поросят - на 3-5 сутки, а у отъемышей - на 10-15 сутки заболевания. При использовании средства «Колимак» полностью выздоравливали 75% молочных поросят и 67% отъемышей. Из приведенных данных видно, что средство «Колимак» обладает ярко выраженными лечебными антидиарейными свойствами.A study of the therapeutic activity of the drug showed that in control animals with diarrhea without dehydration, dehydration, weight loss, impaired appetite and 100% death of animals of both groups developed: in milk piglets - by 3-5 days, and in weaners - by 10-15 days diseases. When using the Kolimak remedy, 75% of milk pigs and 67% of weaners fully recovered. From the above data it is seen that the tool "Kolimak" has pronounced therapeutic antidiarrheal properties.

Таблица 1Table 1 Аминокислотный состав заявляемого средства «Колимак»Amino acid composition of the claimed funds "Kolimak" АминокислотыAmino acids Содержание аминокислот, % мМThe amino acid content,% mm АргининArginine 0,730.73 Аспарагиновая кислотаAspartic acid 9,049.04 АланинAlanine 11,7011.70 ВалинValine 6,886.88 ГистидинHistidine 1,261.26 Глутаминовая кислотаGlutamic acid 17,2117.21 ГлицинGlycine 8,798.79 ИзолейцинIsoleucine 4,704.70 ЛейцинLeucine 9,059.05 ЛизинLysine 7,967.96 МетионинMethionine 0,440.44 ПролинProline 3,893.89 СеринSerine 4,194.19 ТирозинTyrosine 0,340.34 ТреонинThreonine 4,864.86 ФенилаланинPhenylalanine 2,372,37 ЦистеинCysteine 0,200.20

Способ получения средства «Колимак» поясняется конкретным примером.The method of obtaining funds "Kolimak" is illustrated by a specific example.

Пример. После промышленного забоя свиней - самок в возрасте 9-11 месяцев весом 90-110 кг у забитых животных извлекают желудок, двенадцатиперстную кишку и поджелудочную железу. Затем 1 кг тканей пилорического и фундального отделов желудка, 0,5 кг ткани двенадцатиперстной кишки и 1 кг ткани поджелудочной железы очищают от сопутствующих тканей, механически измельчают и гомогенизируют каждую ткань в отдельности в 0,85% растворе хлорида натрия. Далее гомогенаты органов разбавляют 0,85% раствором хлорида натрия в отдельных стеклянных емкостях объемом 10 л в следующих весообъемных соотношениях: гомогенат тканей желудка/0,85% раствор хлорида натрия - 1/10, гомогенат тканей двенадцатиперстной кишки/0,85% раствор хлорида натрия - 1/20, гомогенат тканей поджелудочной железы/0,85% раствор хлорида натрия - 1/10 и осуществляют водную экстракцию биологически активных веществ в течение 24 ч при температуре 4°С и значении pH 7,35. После этого гомогенаты центрифугируют в течение 10 мин при 1500 g и температуре 1,5°С, полученные супернатанты смешивают между собой в соотношении 1:1:1, разливают в емкости по 100 мл и лиофилизируют.Example. After the industrial slaughter of pigs - females aged 9-11 months weighing 90-110 kg, the stomach, duodenum and pancreas are removed from slaughtered animals. Then, 1 kg of tissue of the pyloric and fundic sections of the stomach, 0.5 kg of tissue of the duodenum and 1 kg of pancreatic tissue are cleaned of associated tissues, each tissue is mechanically ground and homogenized separately in a 0.85% sodium chloride solution. Further, organ homogenates are diluted with a 0.85% sodium chloride solution in separate glass containers of 10 l in the following weight ratios: stomach tissue homogenate / 0.85% sodium chloride solution - 1/10, duodenal tissue homogenate / 0.85% chloride solution sodium - 1/20, pancreatic tissue homogenate / 0.85% sodium chloride solution - 1/10 and carry out water extraction of biologically active substances for 24 hours at a temperature of 4 ° C and a pH value of 7.35. After that, the homogenates are centrifuged for 10 min at 1500 g and a temperature of 1.5 ° C, the obtained supernatants are mixed with each other in a ratio of 1: 1: 1, poured into 100 ml containers and lyophilized.

Claims

1. An agent for treating diarrhea in piglets, characterized in that it is a mixture of freeze-dried aqueous extracts of tissues of the pyloric and fundic sections of the stomach, duodenum and pancreas of pigs and contains a complex of proteolytic enzymes with a molecular weight of 35000-40000 Yes, including pepsin and pepsinogen in a ratio of 1: 12-1: 17 at pH 7.0, carboproteinase, as well as trypsinogen, chymotrypsinogen, trypsin, pantrypsin, chymotrypsin, amylase, lipase, nuclease, elastase, collagenase, dominant amino isloty - aspartic, glutamic, alanine, glycine, lysine, leucine, and valine.

2. The method of obtaining funds according to claim 1, characterized in that the tissue of the pyloric and fundus of the stomach, duodenum and pancreas of pigs is mechanically crushed and homogenized in a 0.85% sodium chloride solution, after which the organ homogenates are diluted with a 0.85% solution sodium chloride in separate glass containers in the following weight ratios: stomach tissue homogenate / 0.85% sodium chloride solution - 1/10, duodenal tissue homogenate / 0.85% sodium chloride solution - 1/20, pancreatic tissue homogenate gland / 0.85% sodium chloride solution - 1/10, water extraction is carried out for 24 hours at a temperature of 4 ° C and a pH value of 7.35, centrifugation is carried out for 10 minutes at 1500 g and a temperature of 1.5 ° C, the resulting supernatants are mixed with each other in a 1: 1: 1 ratio, poured into 100 ml containers and lyophilized.

3. A method of treating diarrhea in piglets, characterized in that piglets suffering from diarrhea are orally administered 25-30 ml of the drug according to claim 1, dissolved in a 1.5% solution of sodium chloride.