RU2369358C1

RU2369358C1 - Arrangement of construction of transplanted live dermal skin equivalent for treatment of bronchopleurothoracal fistulas in case of fibrous-cavernous lung tuberculosis

Info

Publication number: RU2369358C1
Application number: RU2008107529/14A
Authority: RU
Inventors: Александр Сергеевич Девятов (RU); Александр Сергеевич Девятов; Авенир Михайлович Литвинов (RU); Авенир Михайлович Литвинов; Анатолий Викторович Нефедов (RU); Анатолий Викторович Нефедов
Original assignee: Александр Сергеевич Девятов; Авенир Михайлович Литвинов; Анатолий Викторович Нефедов
Priority date: 2008-02-29
Filing date: 2008-02-29
Publication date: 2009-10-10

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: essence of method consists in use of collage gel with cultivated fibroplasts, covered above with keratinocytes culture, grown human skin cells. Construction of transplanted live dermal or stromal equivalent contains fibroplasts in three-dimensional first type collagen gel, on microcarriers, made on collagen microspheres with diametre 200-300 microns. Construction of live equivalent has sizes corresponding to length of bronchothoracal fistula passage, formed as a result of complication of late inconsistency of trachea bronchus stump, possibly main bronchus, after surgical removal of one lung in case of fibrous-cavernous tuberculosis of patient's lungs. As base for construction of live dermal equivalent, foam-rubber endobronchial obturator of oval form, with size on 1/3 larger than bronchus stump is used. Obturator is sewn, tied up with No3 thread of "prolen" type with end length not shorter than 40 cm, pressed, placed into endoscopic forceps and passed endotracheally to bronchus stump. Ends of obturator threads are taken out through fistula passage into lung pleural cavity, then through thoracostoma outside and are fixed with plaster to skin. From side of pleural cavity between threads foam-rubber "stopper", of round or oval form, 3-4 cm in diametre, is placed, over which threads are tied up for reliable transplant fixation.

EFFECT: application of claimed invention allows to increase efficiency of treatment of late stump inconsistency, especially of main bronchus, with formation of bronchpleurothoracal fistulas in case of fibrous-cavernous lung tuberculosis.

1 dwg

Description

Изобретение относится к области медицины, а именно фтизиохирургии, и предназначено для лечения бронхоплевроторакальных свищей при фиброзно-кавернозном туберкулезе легких.The invention relates to medicine, namely phthisiosurgery, and is intended for the treatment of bronchopleurothoracic fistula with fibro-cavernous pulmonary tuberculosis.

В настоящее время сформировалась новая область исследований - регенеративная медицина, включающая в себя все аспекты восстановления пораженных тканей, в том числе и тканевую инженерию. Тканевая инженерия известна как направление, в задачи которого входит реконструкция тканей и восстановление их функции путем трансплантации выращенных вне организма клеток. Это новое направление биомедицинских исследований, окончательно сложившееся за последние 10-12 лет, однако работы в этом направлении были начаты значительно ранее. Тканевая инженерия - это направление, которое объединяет клеточные технологии по созданию живых эквивалентов тканей in vitro с последующей их трансплантацией in vivo. Первые сведения о создании живого эквивалента кожи были опубликованы в 1981 году. Разработанная группой исследователей из Массачусетского технологического института и Гарвардской медицинской школы конструкция представляла собой коллагеновый гель, включающий культивируемые фибробласты, а сверху покрытый культурой кератиноцитов (Е.Bell, Н.Р.Ehrlich et al., 1981). Последующие публикации о клиническом применении живого эквивалента кожи свидетельствовали о перспективности его применения для лечения ран и ожогов (J.Nanchahal, R.Dover et al., 1989, E.Bell, M.Rosenberg, 1990). В месте с тем, в настоящее время известна одна зарегистрированная торговая марка живого эквивалента кожи - «APLIGRAF» (США). Живой эквивалент кожи - трансплантат «APLIGRAF» - характеризует высокая стоимость, длительность и трудоемкость изготовления, как минимум три недели, короткие сроки хранения, максимум 5 суток, а главное - сложность приготовления и трансплантации. Необходимо также отметить, что американский трансплантат рекомендован только для лечения трофических язв и не применяется для восстановления кожного покрова при ожогах и гортани. В настоящее время разработан целый комплекс способов восстановления тканей при различных патологиях. Общим подходом, лежащим в основе этих способов, является использование для трансплантации клеток кожи человека кератиноцитов и фибробластов.Currently, a new field of research has been formed - regenerative medicine, which includes all aspects of the restoration of affected tissues, including tissue engineering. Tissue engineering is known as a direction whose tasks include the reconstruction of tissues and the restoration of their function by transplantation of cells grown outside the body. This is a new area of biomedical research, which has finally developed over the past 10-12 years, but work in this direction was begun much earlier. Tissue engineering is a field that combines cell technology for the creation of living tissue equivalents in vitro with their subsequent transplantation in vivo. The first information about creating a living skin equivalent was published in 1981. The design, developed by a group of researchers from the Massachusetts Institute of Technology and Harvard Medical School, was a collagen gel that included cultured fibroblasts and was coated with a keratinocyte culture on top (E. Bell, N. P. Ehrlich et al., 1981). Subsequent publications on the clinical use of living skin equivalents have indicated the promise of its use in the treatment of wounds and burns (J. Nanchahal, R. Dover et al., 1989, E. Bell, M. Rosenberg, 1990). In addition, one registered trademark of the living skin equivalent is currently known - “APLIGRAF” (USA). The living equivalent of the skin - the APLIGRAF transplant - is characterized by the high cost, duration and laboriousness of manufacturing, at least three weeks, short shelf life, a maximum of 5 days, and most importantly - the complexity of preparation and transplantation. It should also be noted that the American transplant is recommended only for the treatment of trophic ulcers and is not used to restore the skin with burns and larynx. Currently, a whole range of methods for tissue repair in various pathologies has been developed. The general approach underlying these methods is the use of keratinocytes and fibroblasts for transplantation of human skin cells.

Наиболее близким техническим решением, выбранным в качестве прототипа, является способ лечения мочевых свищей /1/ путем трансплантации в мочевые ходы выращенных вне организма клеток аллогенных фибробластов человека на микроносителях, заключенных в коллагеновый гель 1 типа, за счет искусственного отведения мочи и систематического воздействия физиотерапии на больного с помощью лазерного излучения длиной волны 0,89 мкм при средней мощности излучения на частоте повторения импульсов 1500 Гц не менее 3 Вт, полной расходимости лазерного излучения не менее 150 градусов и длительности импульсов в диапазоне 70-300 нс, с расстояния 10-12 см по двум полям воздействия при экспозиции каждой процедуры 5 мин, курсом 10-12 процедур с помощью отечественного лазерного терапевтического аппарата типа «Орион» через сутки после трансплантации фибробластов с продолжительностью 2 раза в день через 12 часов перед сменой стерильных повязок. При этом низкоэнергетическое лазерное излучение применяют одновременно с медикаментозной терапией биологически активного липидостеролового комплекса «Трианол», экстрагированного из коры Pygeut africanum, не обладающего андрогенными и экстрогенными свойствами, по 2 капсулы два раза в день в течение 4-х недель.The closest technical solution, selected as a prototype, is a method of treating urinary fistulas / 1 / by transplanting into the urinary passages of cells of human allogenic fibroblasts grown outside the body on microcarriers enclosed in type 1 collagen gel due to artificial urine diversion and the systematic effect of physiotherapy on a patient using laser radiation with a wavelength of 0.89 microns with an average radiation power at a pulse repetition rate of 1500 Hz of at least 3 W, the total divergence of laser radiation I have at least 150 degrees and pulse durations in the range of 70-300 ns, from a distance of 10-12 cm in two exposure fields during each procedure exposure for 5 minutes, a course of 10-12 procedures using the Orion-type domestic laser therapeutic apparatus a day after fibroblast transplantation with a duration of 2 times a day after 12 hours before changing sterile dressings. At the same time, low-energy laser radiation is used simultaneously with drug therapy of the biologically active lipidosterol complex “Trianol”, extracted from the bark of Pygeut africanum, which does not have androgenic and extrogenic properties, 2 capsules twice a day for 4 weeks.

Основным недостатком известного способа /1/ является недостаточная эффективность воздействия физиотерапии на больного с помощью лазерного излучения длиной волны 0,89 мкм при средней мощности излучения на частоте повторения импульсов 1500 Гц не менее 3 Вт.The main disadvantage of this method / 1 / is the lack of effectiveness of physiotherapy on a patient using laser radiation with a wavelength of 0.89 microns with an average radiation power at a pulse repetition rate of 1500 Hz of at least 3 watts.

Задача изобретения - повышение эффективности лечения поздней несостоятельности культи, особенно главного бронха, с формированием бронхоплевроторакальных свищей при фиброзно-кавернозном туберкулезе легких путем выращивания вне организма клеток аллогенных фибробластов человека и создания устройства конструкции живого дермального-стромального эквивалента для трансплантации в бронхиальные свищевые ходы. Поставленная задача решается за счет оказания влияния на заживление бронхоплевроторакальных свищей, восстановления кожного покрова культи бронха с помощью продукции большого числа факторов роста и микромолекул вне клеточного матрикса. Для этого сначала аллогенные фибробласты человека для живого дермального эквивалента культивируют в искусственно созданной среде с 10%-ной сывороткой крупнорогатого скота с добавлением 100 ед./мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина и 40 мкг/мл гентамицина. Перед пересадкой на раневой дефект в бронхиальные свищевые ходы фибробласты в течение суток выращивают в биореакторе объемом 250 мл³ на микроносителях «Цитомар-1», имеющих средние размеры 140-230 мкм и удельную плотность 1,045±0,005 г/см³, при скорости перемешивания среды в пределах 45-50 об/мин. После того, как фибробласты покрывают не менее 50% площади микроносителей, их извлекают из питательной среды, переносят в чашку Петри и заключают в коллагеновый гель 1 типа, приготовленный в среде без сыворотки. Затем трансплантат-гель с фибробластами в течение суток инкубируют при температуре 37 градусов Цельсия, после чего трансплантат готов к применению в клинике.The objective of the invention is to increase the effectiveness of the treatment of late stump insolvency, especially the main bronchus, with the formation of bronchopleurothoracic fistula in fibrocavernous pulmonary tuberculosis by growing allogenic human fibroblast cells outside the body and creating a device for constructing a living dermal-stromal equivalent for transplantation into bronchial fistulous passages. The problem is solved by exerting influence on the healing of bronchopleurothoracic fistulas, restoring the skin of the bronchus stump using the production of a large number of growth factors and micromolecules outside the cell matrix. For this, first, allogeneic human fibroblasts for live dermal equivalent are cultured in an artificially created medium with 10% cattle serum with the addition of 100 units / ml penicillin, 100 μg / ml streptomycin and 40 μg / ml gentamicin. Before transplanting to a wound defect in the bronchial fistulous passages, fibroblasts are grown for 24 hours in a 250 ml ³ bioreactor on microcarriers “Tsitomar-1” having average sizes of 140-230 microns and specific gravity of 1,045 ± 0,005 g / cm ³ , with medium mixing speed in the range of 45-50 rpm. After fibroblasts cover at least 50% of the microcarrier area, they are removed from the nutrient medium, transferred to a Petri dish and enclosed in type 1 collagen gel prepared in serum-free medium. Then the transplant gel with fibroblasts is incubated for a day at a temperature of 37 degrees Celsius, after which the transplant is ready for use in the clinic.

Во время дыхания пациента происходит движение воздушных масс при вдохе и выдохе как через естественные дыхательные пути, так и через бронхиальные свищи у наблюдаемых нами пациентов. В связи с эти нами разработан, изготовлен и испытан на практике опытный образец устройства конструкции трансплантируемого живого дермального-стромального эквивалента кожи для лечения бронхоплевроторакальных свищей при туберкулезе легких, который обеспечивает надежную фиксацию трансплантируемого живого дермального эквивалента в бронхиальном свищевом ходе. Устройство для лечения свищей, включающее живой эквивалент кожи, содержащий коллагеновый гель с культивируемыми фибробластами и сверху покрытый культурой кератиноцитов, выращенных клеток кожи человека на микроносителях - коллагеновых микросферах диаметром 200-300 микрон, отличается тем, что оно конструктивно выполнено в виде конструкции трансплантируемого живого дермального или стромального эквивалента, который содержит фибробласты в трехмерном коллагеновом геле 1 типа и имеет размеры, соответствующие длине бронхоторакального свищевого хода, сформированного вследствие осложнения поздней несостоятельности культи главного или другого бронха трахеи после операции удаления одного легкого при фиброзно-кавернозном туберкулезе легких пациента. При этом за основу конструкции живого дермального эквивалента использован поролоновый эндобронхиальный обтуратор овальной формы, размером на 1/3 больше культи бронха, причем поролоновый обтуратор прошит, перевязан нитью № 3 типа «пролен» с длиной концов не менее 40 см, сжат, помещен в эндоскопический зажим-фарцепт и проведен эндотрахеально к культе бронха, а концы нитей обтуратора выведены через бронхиальный свищевой ход в плевральную полость легкого, затем через торакостому наружу и зафиксированы пластырем к кожному покрову, при этом со стороны плевральной полости между нитями помещена поролоновая «пробка», круглой или овальной формы, 3-4 см в диаметре, над которой находятся завязанные нити для надежной фиксации трансплантата - живого дермального эквивалента в свищевой ходе, путем обтурации просвета культи бронха эндобронхиально с одной стороны и закрытия места трансплантации интраплеврально через торакостому с другой стороны.During the patient’s breathing, air masses move during inhalation and exhalation both through the natural airways and through the bronchial fistula in the patients we observe. In connection with these, we have developed, manufactured and tested in practice a prototype device for the construction of a transplanted live dermal-stromal equivalent of the skin for the treatment of bronchopleurothoracic fistula with pulmonary tuberculosis, which provides reliable fixation of the transplanted live dermal equivalent in the bronchial fistulous course. A device for treating fistulas, including a living skin equivalent containing a collagen gel with cultured fibroblasts and top coated with a culture of keratinocytes, grown human skin cells on microcarriers - collagen microspheres with a diameter of 200-300 microns, differs in that it is structurally made in the form of a transplanted living dermal construct or stromal equivalent, which contains fibroblasts in a three-dimensional type 1 collagen gel and has dimensions corresponding to the length of the bronchothoracic fistula of course, formed due to the late complications of failure of the stump or other main bronchus trachea after removal of the lung fibrocavernous pulmonary tuberculosis patient. At the same time, an oval-shaped foam rubber endobronchial obturator was used as the basis for the construction of the living dermal equivalent, 1/3 larger than the bronchus stump, and the foam obturator was stitched, tied with thread "Prolene" type 3 with a length of at least 40 cm, compressed, placed in an endoscopic the clamp-farcept was carried out endotracheally to the bronchus stump, and the ends of the obturator threads were brought out through the bronchial fistulous passage into the pleural cavity of the lung, then through the thoracic outward and fixed with a plaster to the skin, while between the threads of the pleural cavity there is a foam plug “round”, round or oval, 3-4 cm in diameter, over which there are knotted threads for reliable fixation of the graft — the living dermal equivalent in the fistulous course, by obturation of the lumen of the bronchial stump endobronchially on one side and closing the transplantation site intrapleurally through the thoracostomy on the other hand.

На чертеже приведена функциональная схема устройства конструкции трансплантируемого живого дермального или стромального эквивалента с фибробластами в трехмерном коллагеновом геле первого типа.The drawing shows a functional diagram of the device design transplanted live dermal or stromal equivalent with fibroblasts in a three-dimensional collagen gel of the first type.

Устройство конструкции 1 содержит следующие основные элементы: 2 - живой дермальный-стромальный эквивалент, трансплантированный между культей 3 бронха трахеи 4 и плевральной полостью 5 легкого, 6 - поролоновый обтуратор, 7 - нить №3 типа «пролен», 8 - поролоновую пробку, 9 - плевральные наложения, 10 - эндоскопический зажим.Construction device 1 contains the following basic elements: 2 - live dermal-stromal equivalent transplanted between the stump 3 of the bronchus 4 of the trachea and the pleural cavity 5 of the lung, 6 - foam rubber obturator, 7 - thread No. 3 of the Prolene type, 8 - foam rubber plug, 9 - pleural overlays, 10 - endoscopic clamp.

Устройство конструкции 1 трансплантируемого живого дермального или стромального эквивалента 2 с фибробластами в трехмерном коллагеновом геле первого типа работает следующим образом. Поролоновый обтуратор 6 овальной формы, размером на 1/3 больше культи 3 бронха трахеи 4 посередине обвязывают нитью 7 № 3 типа «пролен» с длиной концов 30-40 см. Затем обтуратор 6 сжимают и помещают в фарцепт-эндоскопический зажим 10, проводят эндотрахеально к культе 3 бронха. При этом концы нитей 7 выводят через бронхиальные свищевые ходы в плевральную полость 5 перед плевральными наложениями 9. Удерживая за нить 7, в бронхиальный свищевой ход помещают живой дермальный-стромальный эквивалент 2, размером, соотвествующим длине свищевого хода. Со стороны плевральной полости 5 между нитями 7 помещают поролоновую «пробку» 8 круглой или овальной формы, 3-4 см в диаметре, над которой завязывают нити 7. Созданная, таким образом, конструкция 1 трансплантируемого живого дермального или стромального эквивалента 2 с фибробластами в трехмерном коллагеновом геле первого типа надежно фиксирует трансплантат в свищевом ходе. Концы нитей 7 выводят через торакостому наружу и фиксируют пластырем к кожным покровам. Дежурный медперсонал и сам пациент инструктируются на случай миграции поролонового обтуратора 6 и асфиксации им единственного легкого - потянуть за нити 7, выдернуть конструкцию 1 либо подтянуть и зафиксировать ее вторично вызванным к этому моменту хирургом.The design device 1 transplanted live dermal or stromal equivalent 2 with fibroblasts in a three-dimensional collagen gel of the first type works as follows. A foam rubber obturator 6 is oval, 1/3 larger than the stump 3 of the bronchus of the trachea 4 in the middle is tied with thread 7 No. 3 of the Prolene type with a length of 30-40 cm. Then the obturator 6 is compressed and placed in a farcept-endoscopic clamp 10, carried out endotracheally to the cult of 3 bronchi. At the same time, the ends of the filaments 7 are brought out through the bronchial fistulous passages into the pleural cavity 5 before the pleural overlays 9. Holding the thread 7, a live dermal-stromal equivalent 2 is placed in the bronchial fistulous passage, the size corresponding to the length of the fistulous passage. On the side of the pleural cavity 5, between the threads 7 is placed a foam rubber "cork" 8 of round or oval shape, 3-4 cm in diameter, over which the threads 7 are tied. Thus created, the design 1 transplanted live dermal or stromal equivalent 2 with fibroblasts in three-dimensional the collagen gel of the first type reliably fixes the graft in the fistulous course. The ends of the filaments 7 are brought out through the thoracic outward and fixed with a plaster to the skin. The medical staff on duty and the patient himself are instructed in case of migration of the foam rubber obturator 6 and their only lung asphyxiation - pull on the threads 7, pull out the structure 1 or tighten it and fix it again with the surgeon called up to this moment.

Нами исследовано применение трансплантатов живого дермального-стромального эквивалента, подготовленных в различных видах, для лечения бронхоплевроторакальных свищей у пяти больных. Установлено, что бронхоплевроторакальные свищи диаметром до 0,5 см, имеющие длину не менее 1 см, после трех-четырехкратной трансплантации живого дермального эквивалента закрываются без оперативного вмешательства. В контрольной группе у 15 пациентов потребовалось оперативное пособие - ушивание несостоятельности культи бронха по одному из известных методов. У двух больных с наличием бронхоплевроторакальных свищей, диаметр которых был более 10 мм и длина свищевого хода не менее 10 мм, отмечено уменьшение свищевого хода за счет бурного роста грануляционных тканей, но закрыть их в течении 2-х месяцев не удалось. Поэтому они были оперированы, произведена известная трансстернальная трансперикардиальная окклюзия главного бронха в обоих случаях с благоприятным исходом.We have studied the use of live dermal-stromal equivalent grafts prepared in various forms for the treatment of bronchopleurothoracic fistula in five patients. It was found that bronchopleurothoracic fistulas with a diameter of up to 0.5 cm, having a length of at least 1 cm, after three to four times the transplantation of a live dermal equivalent are closed without surgical intervention. In the control group, 15 patients required a surgical allowance - suturing insolvency of the bronchus stump according to one of the known methods. Two patients with bronchopleurothoracic fistulas with a diameter of more than 10 mm and a fistulous course of at least 10 mm showed a decrease in the fistulous course due to the rapid growth of granulation tissues, but it was not possible to close them within 2 months. Therefore, they were operated on, the well-known transsternal transpericardial occlusion of the main bronchus was performed in both cases with a favorable outcome.

Главным преимуществом разработанного и заявленного в изобретении устройства конструкции трансплантируемого живого дермального эквивалента кожи для лечения бронхоплевроторакальных свищей при фиброзно-кавернозном туберкулезе легких является возможность использования трансплантата через 3-5 суток после его приготовления. При наличии всех компонентов приготовление трансплантата, размер живого дермального-стромального эквивалента не имеет значения, занимает около 4 часов при выведении кератиноцитов из кожи при помощи диспазы или 1 сутки при выделении с помощью трипсина. Другим важным преимуществом является широкий спектр показаний для использования изобретения: лечение ран, ожогов. Возможность доставки в любую полость организма и одномоментного закрытия трехмерных дефектов, например бронхиальных свищевых ходов. Принципиальным отличием является также выращивание клеток на микроносителях - коллагеновых микросферах диаметром 200-300 микрон, что позволяет интенсифицировать и масштабировать процесс культивирования и снизить затраты на реактивы и материалы. Общим подходом, лежащим в основе заявляемого способа лечения, является использование клеток кожи человека - кератиноцитов и фибробластов. Наши исследования показали, что использование трансплантатов кератиноцитов и фибробластов позволяет повысить эффективность лечения не только таких заболеваний как ожоги, трофические язвы, длительно не заживающие раны, свищи различного генеза, некоторые гинекологические, отоларингологические, офтальмологические, урологические, но и другие заболевания пациентов.The main advantage of the device developed and claimed in the invention for the construction of a transplanted living dermal equivalent of the skin for the treatment of bronchopleurothoracic fistula in fibro-cavernous pulmonary tuberculosis is the possibility of using the transplant 3-5 days after its preparation. In the presence of all the components, the preparation of the graft, the size of the living dermal-stromal equivalent does not matter, takes about 4 hours when removing keratinocytes from the skin using dispase or 1 day when isolating with trypsin. Another important advantage is a wide range of indications for using the invention: treatment of wounds, burns. Possibility of delivery to any cavity of the body and simultaneous closure of three-dimensional defects, such as bronchial fistulous passages. A fundamental difference is also the cultivation of cells on microcarriers - collagen microspheres with a diameter of 200-300 microns, which allows to intensify and scale the cultivation process and reduce the cost of reagents and materials. The general approach underlying the proposed method of treatment is the use of human skin cells - keratinocytes and fibroblasts. Our studies have shown that the use of keratinocyte and fibroblast transplants can increase the effectiveness of the treatment of not only diseases such as burns, trophic ulcers, non-healing wounds, fistulas of various origins, some gynecological, otolaryngological, ophthalmic, urological, but also other diseases of patients.

Источник информацииThe source of information

1. Девятов А.С., Литвинов A.M., Шаплыгин Л.В. Способ лечения мочевых свищей. Патент RU № 2162001 С2. - Бюл. № 2, 20.01.2001. - ГВКГ им. акад. Н.Н.Бурденко. - С.1-17 (прототип).1. Devyatov A.S., Litvinov A.M., Shaplygin L.V. A method for the treatment of urinary fistulas. Patent RU No. 2162001 C2. - Bull. No. 2, 01/20/2001. - GVKG them. Acad. N.N. Burdenko. - S.1-17 (prototype).

Claims

A device for treating fistulas, comprising as a living skin equivalent a collagen gel with cultured fibroblasts, top coated with a culture of keratinocytes, grown human skin cells, characterized in that it is made in the form of a transplanted live dermal or stromal equivalent construct containing fibroblasts in a three-dimensional collagen gel of the first type, on microcarriers made on collagen microspheres with a diameter of 200-300 microns, and the design of a living equivalent has the sizes corresponding corresponding to the length of the bronchothoracic fistulous passage formed due to complications of late insolvency of the stump of the bronchus of the trachea, possibly the main bronchus, after surgical removal of one lung with fibro-cavernous tuberculosis of the patient’s lungs, while an oval-shaped foam rubber endobronchial obturator of size 1 is used as the basis for the construction of the living dermal equivalent / 3 more than the stump of the bronchus, moreover, the obturator is stitched, bandaged with thread No. 3 of the “prolene” type with a length of ends of at least 40 cm, squeezed, placed they are inserted into the endoscopic clamp-farcept and carried out endotracheally to the bronchus stump, and the ends of the obturator threads are brought out through the fistulous passage into the pleural cavity of the lung, then through the thoracic outward and fixed with a plaster to the skin, and a round foam rubber tube is placed between the threads from the pleural cavity or oval, 3-4 cm in diameter, over which the threads are tied for reliable fixation of the transplant - a living dermal equivalent.