RU2362581C2 - Состав раствора эритропоэтина - Google Patents
Состав раствора эритропоэтина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2362581C2 RU2362581C2 RU2006123317/15A RU2006123317A RU2362581C2 RU 2362581 C2 RU2362581 C2 RU 2362581C2 RU 2006123317/15 A RU2006123317/15 A RU 2006123317/15A RU 2006123317 A RU2006123317 A RU 2006123317A RU 2362581 C2 RU2362581 C2 RU 2362581C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- composition according
- tris
- composition
- epo
- nacl
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 41
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims abstract description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 46
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical group [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 23
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 claims description 11
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 claims description 11
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 claims description 11
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 7
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 claims description 6
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 claims description 6
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 5
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 5
- 239000012928 buffer substance Substances 0.000 claims description 4
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 claims description 4
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 3
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 3
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 claims description 3
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 claims description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 claims description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 abstract 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 abstract 1
- 102100031939 Erythropoietin Human genes 0.000 description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 16
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 6
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 5
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 5
- 108010074604 Epoetin Alfa Proteins 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 208000003670 Pure Red-Cell Aplasia Diseases 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 2
- 229960003388 epoetin alfa Drugs 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 2
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- 208000032274 Encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 238000011993 High Performance Size Exclusion Chromatography Methods 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010058116 Nephrogenic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Chemical class 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 229920005549 butyl rubber Polymers 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 1
- 210000003013 erythroid precursor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical group 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000006068 polycondensation reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Chemical class 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1816—Erythropoietin [EPO]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармакологии и представляет собой устойчивый фармацевтический состав эритропоэтина, который содержит трис-(гидроксиметил)-аминометан в качестве стабилизатора и не содержит аминокислоты или человеческий сывороточный альбумина. Изобретение обеспечивает получение стабильного устойчивого состава эритропоэтина, в котором образование агрегатов даже при повышенных температурах в значительной мере подавлено или полностью устраненою. 11 з.п. ф-лы, 3 табл., 4 ил.
Description
Эритропоэтин (далее ЭПО) является гликопротеиновым гормоном, который способствует дифференциации и пролиферации эритроидных клеток-предшественников. Эритроциты существуют в крови в течение определенного отрезка времени. По истечении среднего времени жизни в человеческом организме, составляющего примерно 120 дней, красные кровяные клетки разрушаются и выводятся из организма. С другой стороны, красные кровяные клетки постоянно поступают из костного мозга, так что общее число эритроцитов поддерживается на нормальном уровне. У пациентов, страдающих почечными заболеваниями, наблюдается недостаточное число эритроцитов в крови. ЭПО играет центральную роль в образовании эритроцитов и поэтому часто используется при лечении пациентов с анемией.
Состав лекарственного препарата ЭПО, поставляемый на рынок, должен обеспечивать стабильность препарата, в нем не должны происходить, насколько это возможно, химические изменения, такие как гидролиз, реакции обмена дисульфида, и физические изменения, такие как денатурирование, образование агрегатов или адсорбция, которые характерны для составов ЭПО. Поскольку ЭПО представляет собой гликозилированный полипептид, для его стабилизации часто используют лиофилизацию. Однако процесс лиофилизации увеличивает стоимость производства, кроме того, для получения водного раствора лиофилизированный лекарственный препарат необходимо растворять непосредственно перед употреблением. Это является дополнительной работой для медиков и может представлять определенные трудности, если твердые частицы трудно растворимы в водном растворе.
Было сделано несколько предложений по устранению проблем устойчивости. Продукты, поставляемые на рынок, содержали в качестве стабилизатора человеческий сывороточный альбумин или очищенный желатин. Однако, поскольку в этом случае практически невозможно исключить риск загрязнения препарата вирусом или трансмиссионной спонгиоформной энцефалопатией, эти стабилизаторы были заменены.
В ЕР-А909564 фирмы Chugai предлагается препарат раствора ЭПО, содержащий в качестве стабилизатора аминокислоту. В WO 00/61169 описаны фармацевтические составы ЭПО, в которых отсутствуют продукты сыворотки человеческой крови и которые стабилизируют с помощью аминокислоты и поли(окси-1,2-этанедил)производного сорбита моно-9-октадеценоата.
Было замечено, однако, что известные составы все-таки имеют тенденцию к образованию агрегатов. Образование агрегатов может быть связано со структурой ЭПО, хотя это не подтверждено теорией. Хорошо известная цепочка ЭПО содержит четыре цистеиновых остатка, в которых имеется два дисульфидных мостика цис7-цис161 и цис29-цис33. Можно предположить, что из-за окислительно-восстановительных процессов, имеющих место в частности при длительном хранении в водном растворе, могут происходить перегруппировки дисульфидных мостиков, приводящие к образованию агрегатов, которые невозможно растворить. Этот эффект может вызывать побочные иммунные реакции. Недавно такие побочные эффекты были описаны для некоторых пациентов с хронической почечной анемией, которые подвергались лечению ЭПО (Eprex®, эпоетин-альфа). В процессе лечения у этих больных развивалась истинная эритроцитарная аплазия, тяжелый побочный иммунологический эффект, приводящий к посттрансфузионной анемии (Casadevall 2002 "Antibodies against rHuEPO: native and recombinant." Nephrol Dial Transplant 17 Suppl 5: Casadevall, Nataf и др. 2002 "Pure red-cell aplasia and antierytropoietin antibodies in patients treated with recombinant erythropoietin" N Engi J Med 346 (7): 469-75). Очень похоже, что этот неблагоприятный эффект был вызван фармацевтическим составом Eprex®(Schellekens 2003 "Relationship between biopharmaceutical imunogenicity of epoetin alfa and pure red-cell aplasia." Curr Med Res Opin 19(5): 433-4).
Таким образом, целью настоящего изобретения является разработка устойчивого состава раствора эритропоэтина, в котором образование агрегатов даже при повышенных температурах в значительной мере подавлено или полностью устранено.
Таким образом, настоящее изобретение относится к устойчивым фармацевтическим составам эритропоэтина, отличительные признаки которых перечислены в формуле изобретения.
Устойчивый раствор ЭПО содержит фармацевтическое количество ЭПО, которое составляет от 1000 до 40000 МЕ/мл. В зависимости от необходимости клиницисты также предпочитают для внутривенной и подкожной инъекций концентрации 2000 МЕ/мл, 5000 МЕ/мл и 10000 МЕ/мл. Термин «эритропоэтин» в настоящем изобретении относится к тем протеинам, которые обладают биологической активностью эритропоэтина для человека, а также аналогам эритропоэтина, изоформам эритропоэтина, мемам эритропоэтина, фрагментам эритропоэтина, гибридным белкам эритропоэтина или сшитым белкам. Гликозилированная структура ЭПО обладает сильным воздействием и, следовательно, может оказывать влияние на части молекул, которые имеют определенное количество ЭПО.
В настоящем растворе в качестве буферного вещества используют фосфат натрия. Буферное вещество применяют для поддержания pH раствора на уровне от примерно 5,9 до примерно 6,8, предпочтительно от 6,2 до 6,6 и наиболее предпочтительно от 6,4 до 6,5. Уровень pH можно установить с помощью соответствующего основания. В фосфатной буферной системе настоящего изобретения для этой цели используют NaOH или фосфорную кислоту. Также вместо NaOH можно добавлять КОН. Количество буферного вещества в фармацевтическом составе составляет от примерно 5 до примерно 50 мМ, предпочтительно от примерно 10 до примерно 30 мМ.
Неожиданно было обнаружено, что раствор ЭПО можно стабилизировать путем добавления или NaCl или трис-(гидроксиметил)-аминометана (Трис) или обоих этих компонентов. Термин «Трис» относится ко всем формам этого соединения, таким как трис основание или трис НСl. Растворы, которые вводят в тело человека, предпочтительно должны иметь соответствующее осмотическое давление. Необходимое осмотическое давление можно получить путем добавления хлорида натрия. В контексте настоящего изобретения необходимо отметить, что добавление NaCl к буферному веществу фосфату значительно уменьшает образование агрегатов. Количество добавляемого NaCl составляет от примерно 20 до примерно 150 мМ, предпочтительно от 30 до 120 мМ и наиболее предпочтительно от 50 до 100 мМ.
Стабилизирующий эффект можно также получить путем добавления трис-(гидроксиметил)-аминометана в количестве от примерно 10 до примерно 150 мМ, предпочтительно от примерно 40 до примерно 100 мМ. Трис-(гидроксиметил)-аминометан является хорошо известной буферной системой для фармацевтических составов протеина (см., например, WO 03/072060). Обычно его используют при значениях pH от 7 до 9. При pH от 5,9 до 6,8 трис-(гидроксиметил)-аминометан проявляет очень слабые буферные свойства или не имеет их совсем. Таким образом, неожиданный стабилизирующий эффект трис-(гидроксиметил)-аминометана не связан с его буферными свойствами.
Стабилизирующий эффект может быть получен путем добавления или хлорида натрия или трис-(гидроксиметил)-аминометана. Вместе с тем при совместном добавлении к раствору обоих стабилизирующих компонентов, а именно NaCl и Трис, стабилизирующее воздействие значительно усиливается.
Кроме того, раствор ЭПО предпочтительно содержит неионное поверхностно-активное вещество (ПАВ), предпочтительно полисорбат. Полисорбаты представляют собой продукты поликонденсации эфиров сорбита и полиэтиленгликоля. Используемые в соответствии с настоящим изобретением остатки жирных кислот выделяют исключительно из растений, а не из животных, что является очень важным фактором для улучшения сохранности раствора ЭПО. Кроме того, очень важно, чтобы содержание пероксида, определенное в соответствии правилами п.2.5.5 Европейской фармакопеи (Ph Eur), составляло менее 1,00 мкМоль/г, предпочтительно менее 0,5 мкМоль/г, что соответствует содержанию пероксида в конечном фармацевтическом составе от 0,01 до 1 мкМоль, предпочтительно менее 0,5 мкМоль. Полисорбаты серийно выпускаются под торговыми марками соответственно TWEEN® 20 или TWEEN® 80.
Необходимо отметить, что состав раствора ЭПО в соответствии с настоящим изобретении не содержит продукты, полученные из человеческой крови, в частности человеческого сывороточного альбумина. Предпочтительно состав настоящего изобретения не содержит мочевину. Состав настоящего изобретения также не содержит аминокислоты, которые добавляют в другие составы в качестве стабилизатора.
Растворы ЭПО применяют для инъекций. Таким образом, составы предпочтительно приготавливают в форме растворов, предназначенных для внутривенных и подкожных инъекций. В зависимости от применения состав может также содержать обычные для таких растворов для инъекций добавки.
Далее изобретение будет продемонстрировано на примерах.
Пример 1
Приготовление растворов ЭПО
Чтобы получить составы, приведенные в таблицах 1 и 2, основной объем растворов лекарственного препарата ЭПО разбавляли различными растворами до концентрации 100 мкг/мл.
В таблице 1 представлен известный состав. Этот состав имеет pH от 6,6 до 7,2 и содержит в качестве стабилизатора глицин.
| Таблица 1 | ||||||
| Состав | ЭПО (мкг/мл) | БФ (мМ) | NaCl (мас.%) | Глицин (мМ) | TWEEN 80 (мас.%) | pH |
| Известный состав | 100 | 20 | 0,438 | 67 | 0,03 | 7,0 |
БФ обозначает буферное вещество фосфат.
Кроме того, в таблице 2 приведены составы, которые были приготовлены в соответствии с настоящим изобретением. Эти составы отличаются содержанием NaCl и Трис.
| Таблица 2 | ||||||
| Состав | ЭПО (мкг/мл) | БФ (мМ) | NaCl (мас.%) | Трис (мМ) | Tween 80 (мас.%) | pH |
| А | 100 | 20 | 128 | 0 | 0,03 | 6,5 |
| Б | 100 | 20 | 113 | 20 | 0,03 | 6,5 |
| В | 100 | 20 | 67 | 70 | 0,03 | 6,5 |
| Г | 100 | 20 | 0 | 140 | 0,03 | 6,5 |
Приготовленные растворы фильтровали (PALL Gelman, Acrodisc, 0,2 мкм мембрана Supor, непирогенная, стерильная) и по 1 мл заливали в стеклянные флаконы вместимостью 2 мл. При этом не наблюдалось никакого поглощения ЭПО фильтром. Закупоренные (для закупоривания использовали 13 мм пробки Daiichi Flurotec из силанизированного бутилкаучука) и запечатанные флаконы хранили при условиях, соответствующих требованиями ICH (Международной конференции по согласованию технических требований к лекарственных препаратов, предназначенных для человека): в течение 8 недель в помещении при температуре 40±3°С и относительной влажности 80%.
Для получения сравнительных составов использовали TWEEN 80 и TWEEN 20 соответственно. Все используемые препараты TWEEN имели низкое исходное содержание пероксида.
Пример 2 - определение агрегатов
Степень агрегации измеряли методом высокоэффективной эксклюзионной хроматографии. Использование этого метода позволяет с высокой точностью определять количество мономера ЭПО. Димеры и полимеры элюируются различными пиками. Анализ выполняли на колонке TSK G3000 SWXL, 5 мкм, 300×7,8 мм. В качестве подвижной фазы использовали буферный раствор, содержащий 150 мМ NaCl, 10 мМ NaH2PO4×2H2O, с рН 7,2. Рассчитывали площадь пиков и определяли количество мономера ЭПО в течение 8 недель. Образцы хранились при 40°С. Полученные результаты приведены в таблице 3.
| Таблица 3 | |||
| А | |||
| БФ, NaCl рН 6,5 | |||
| Образование агрегатов, % | Неделя, 40°С | Стандартное отклонение | |
| 0 | 0 | 0,15 | |
| 4 | 1,05 | 0,42 | |
| 6 | 2,38 | 0,42 | |
| БФ, NaCl pH 6,5 | |||
| Образование агрегатов, % | Неделя, 40°С | Стандартное отклонение | |
| 0 | 0 | 0,15 | |
| 8 | 2,27 | 0,53 | |
| Б | |||
| БФ, 20 мМ Трис, NaCl pH 6.5, 0,03% TWEEN 20 | |||
| Образование агрегатов, % | Неделя, 40°С | Стандартное отклонение | |
| 0 | 0 | 0,15 | |
| 4 | 0,53 | 0,47 | |
| 6 | 1,35 | 0,41 | |
| 8 | 1,98 | 0,43 | |
| В | |||
| БФ, 70 мМ Трис, NaCl pH 6,5, 0,03% TWEEN 20 | |||
| Образование агрегатов, % | Неделя, 40°С | Стандартное отклонение | |
| 0 | 0 | 0,15 | |
| 4 | 0,31 | 0,43 | |
| 6 | 0,77 | 0,43 | |
| 8 | 2,14 | 0,61 | |
| Г | |||
| БФ, 140 мМ Трис, NaCl pH 6,5, 0,03% TWEEN 20 | |||
| Образование агрегатов, % | Неделя, 40°С | Стандартное отклонение | |
| 0 | 0 | 0,33 | |
| 4 | 0,49 | 0,6 | |
| 6 | 1,06 | 0,59 | |
| 8 | 0,13 | 0,68 | |
| Известный состав | |||
| Известный состав ЭПО, БФ, Глицин, pH 7,0, 0,03% TWEEN 80 | |||
| Образование агрегатов, % | Неделя, 40°С | Стандартное отклонение | |
| 0 | 0 | ||
| 4 | 6,11 | 0,96 | |
| 6 | 10,29 | 0,26 | |
| 8 | |||
Из таблицы 3 видно, что при замене глицина на NaCl и/или Трис образование агрегатов значительно уменьшается. Результаты, приведенные в таблице 3, показаны на фиг.1-4. Все опыты проводили с фосфатным буферным веществом.
На фиг.1 показан процесс образования агрегатов во времени (до 6 недель). Наибольшее количество агрегатов было найдено в составе, в котором в качестве стабилизатора использовали глицин (известный состав). Этот состав сравнивали с составами, предлагаемыми в настоящем изобретении, в которых использовали или NaCl или 70 мМ Трис и NaCl.
На фиг.2 в увеличенном масштабе показан эффект добавления к уже имеющемуся NaCl 70 мМ Трис и 0,03% TWEEN.
На фиг.3 показано влияние количества Трис, добавляемого в составы, содержащие также NaCl и TWEEN. Как видно, хорошие результаты могут быть получены для количества Трис от 20 до 140 мМ, причем оптимальные результаты достигнуты для примерно 70 мМ Трис. На Фиг.4 приведено сравнение известного состава и составов, приготовленных в соответствии с настоящим изобретением. Самое низкое образование агрегатов наблюдалось для состава с pH 6,5, содержащего примерно 70 мМ Трис, NaCl и 0,03% TWEEN 20.
Claims (12)
1. Устойчивый фармацевтический состав эритропоэтина, который содержит от 10 до 200 мМ трис-(гидроксиметил)-аминометана в качестве стабилизатора и не содержит аминокислоты или человеческого сывороточного альбумина.
2. Устойчивый фармацевтический состав по п.1, содержащий:
а) фосфат натрия в качестве буферного вещества для поддержания необходимого уровня pH;
б) от 10 до 200 мМ трис-(гидроксиметил)-аминометана в качестве стабилизатора;
в) фармацевтически эффективное количество эритропоэтина.
а) фосфат натрия в качестве буферного вещества для поддержания необходимого уровня pH;
б) от 10 до 200 мМ трис-(гидроксиметил)-аминометана в качестве стабилизатора;
в) фармацевтически эффективное количество эритропоэтина.
3. Состав по любому из предыдущих пунктов, содержащий от 20 до 150 мМ NaCl.
4. Состав по по любому из предыдущих пунктов, который содержит NaCl в количестве от 50 до 100 мМ.
5. Состав по п.1, который представляет собой водный состав.
6. Состав по п.2, в котором буферное вещество, поддерживающее необходимый уровень pH, имеет формулу NaxHyPO4, где x равно 1 или 2 и у равно 1 или 2, и сумма x и у равна 3, и в котором количество буферного вещества составляет от 5 до 50 мМ.
7. Состав по п.1, в котором pH составляет от 5,9 до 6,8, предпочтительно от 6,2 до 6,6.
8. Состав по п.2, который содержит от 20 до 100 мМ трис-(гидроксиметил)-аминометана.
9. Состав по п.1, который также содержит неионное поверхностно-активное вещество в количестве от 0,005 до 0,1 мас.%.
10. Состав по п.9, в котором неионным поверхностно-активным веществом является полисорбат, предпочтительно TWEEN 20 или TWEEN 80.
11. Состав по п.10, в котором полисорбат получен не из животных и содержание в нем пероксида составляет менее 1,00 мкмоль/г.
12. Состав по одному из предыдущих пунктов, который дополнительно содержит этилендиаминтетрауксусную кислоту в количестве от 0,1 до 0,5 мМ.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP03027460.9 | 2003-12-01 | ||
| EP03027460A EP1537876A1 (en) | 2003-12-01 | 2003-12-01 | Erythropoietin solution formulation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2006123317A RU2006123317A (ru) | 2008-01-20 |
| RU2362581C2 true RU2362581C2 (ru) | 2009-07-27 |
Family
ID=34442909
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006123317/15A RU2362581C2 (ru) | 2003-12-01 | 2004-12-01 | Состав раствора эритропоэтина |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7468351B2 (ru) |
| EP (2) | EP1537876A1 (ru) |
| AT (1) | ATE355081T1 (ru) |
| AU (1) | AU2004294289B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0416679B8 (ru) |
| CA (1) | CA2545880C (ru) |
| DE (1) | DE602004005072T2 (ru) |
| DK (1) | DK1689437T3 (ru) |
| ES (1) | ES2280057T3 (ru) |
| HR (1) | HRP20070062T3 (ru) |
| NZ (1) | NZ546451A (ru) |
| PL (1) | PL1689437T3 (ru) |
| PT (1) | PT1689437E (ru) |
| RU (1) | RU2362581C2 (ru) |
| SI (1) | SI1689437T1 (ru) |
| WO (1) | WO2005053745A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA200602340B (ru) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011035914A1 (en) | 2009-09-23 | 2011-03-31 | Biogenerix Ag | Process for the purification of recombinant human erythropoietin (epo), epo thus purified and pharmaceutical compositions comprising same |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4806524A (en) * | 1984-10-18 | 1989-02-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Stable erythropoietin preparation and process for formulating the same |
| RU2043118C1 (ru) * | 1987-09-05 | 1995-09-10 | Берингер Маннхайм ГмбХ | Способ получения инъекционной формы эритропоэтина |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5978124A (ja) * | 1982-10-28 | 1984-05-04 | Green Cross Corp:The | エリスロポエチンの製法 |
| GB8822857D0 (en) * | 1988-09-29 | 1988-11-02 | Patralan Ltd | Pharmaceutical formulations |
| GB9001987D0 (en) * | 1990-01-29 | 1990-03-28 | Janssen Pharmaceutica Nv | Improved cyclodextrin based erythropietin formulation |
| DE4014654A1 (de) * | 1990-05-08 | 1991-11-14 | Behringwerke Ag | Galenische waessrige formulierungen von erythropoietin und ihre verwendung |
| TWI240627B (en) * | 1996-04-26 | 2005-10-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Erythropoietin solution preparation |
| DK0937456T3 (da) * | 1998-02-23 | 2004-11-08 | Cilag Ag Int | Liposomal dispersion af erytropoietin |
| PT988861E (pt) * | 1998-08-17 | 2004-06-30 | Pfizer Prod Inc | Formulacoes de proteina estabilizadas |
| US6979442B1 (en) * | 1998-08-17 | 2005-12-27 | Pfizer Inc. | Stabilized protein compositions |
| US20040022861A1 (en) * | 2001-01-30 | 2004-02-05 | Williams Robert O. | Process for production of nanoparticles and microparticles by spray freezing into liquid |
| US6818613B2 (en) * | 2001-11-07 | 2004-11-16 | Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. | Aqueous sustained-release formulations of proteins |
| DE10161577B4 (de) * | 2001-12-14 | 2008-01-10 | Scil Proteins Gmbh | Verfahren zur Renaturierung von Proteinen |
-
2003
- 2003-12-01 EP EP03027460A patent/EP1537876A1/en not_active Withdrawn
-
2004
- 2004-12-01 ES ES04803390T patent/ES2280057T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2004-12-01 NZ NZ546451A patent/NZ546451A/en not_active IP Right Cessation
- 2004-12-01 AT AT04803390T patent/ATE355081T1/de active
- 2004-12-01 HR HR20070062T patent/HRP20070062T3/xx unknown
- 2004-12-01 SI SI200430243T patent/SI1689437T1/sl unknown
- 2004-12-01 RU RU2006123317/15A patent/RU2362581C2/ru active
- 2004-12-01 WO PCT/EP2004/013619 patent/WO2005053745A1/en not_active Ceased
- 2004-12-01 AU AU2004294289A patent/AU2004294289B2/en not_active Expired
- 2004-12-01 PT PT04803390T patent/PT1689437E/pt unknown
- 2004-12-01 BR BRPI0416679A patent/BRPI0416679B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2004-12-01 US US10/581,269 patent/US7468351B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-12-01 EP EP04803390A patent/EP1689437B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-12-01 PL PL04803390T patent/PL1689437T3/pl unknown
- 2004-12-01 CA CA2545880A patent/CA2545880C/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-12-01 DE DE602004005072T patent/DE602004005072T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2004-12-01 DK DK04803390T patent/DK1689437T3/da active
-
2006
- 2006-03-22 ZA ZA200602340A patent/ZA200602340B/xx unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4806524A (en) * | 1984-10-18 | 1989-02-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Stable erythropoietin preparation and process for formulating the same |
| RU2043118C1 (ru) * | 1987-09-05 | 1995-09-10 | Берингер Маннхайм ГмбХ | Способ получения инъекционной формы эритропоэтина |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2006123317A (ru) | 2008-01-20 |
| CA2545880A1 (en) | 2005-06-16 |
| CA2545880C (en) | 2011-08-30 |
| AU2004294289A1 (en) | 2005-06-16 |
| EP1537876A1 (en) | 2005-06-08 |
| PT1689437E (pt) | 2007-03-30 |
| WO2005053745A1 (en) | 2005-06-16 |
| NZ546451A (en) | 2008-08-29 |
| ATE355081T1 (de) | 2006-03-15 |
| ZA200602340B (en) | 2007-08-29 |
| HRP20070062T3 (hr) | 2008-05-31 |
| BRPI0416679B8 (pt) | 2021-05-25 |
| AU2004294289B2 (en) | 2010-07-22 |
| BRPI0416679A (pt) | 2007-02-13 |
| PL1689437T3 (pl) | 2007-06-29 |
| EP1689437B1 (en) | 2007-02-28 |
| SI1689437T1 (sl) | 2007-06-30 |
| DE602004005072T2 (de) | 2007-06-21 |
| ES2280057T3 (es) | 2007-09-01 |
| BRPI0416679B1 (pt) | 2018-02-06 |
| EP1689437A1 (en) | 2006-08-16 |
| US7468351B2 (en) | 2008-12-23 |
| US20070128231A1 (en) | 2007-06-07 |
| DK1689437T3 (da) | 2007-05-21 |
| DE602004005072D1 (de) | 2007-04-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3927248B2 (ja) | Ｈｇｆ凍結乾燥製剤 | |
| EP1641486B1 (en) | Stable, aqueous solution of human erythropoietin, not containing serum albumin | |
| CN114746439A (zh) | 整合蛋白抗体的稳定制剂 | |
| US20170360891A1 (en) | Stable, Benzyl Alcohol-free Aqueous Solution Formulations Containing Alpha-type Interferon | |
| RU2362581C2 (ru) | Состав раствора эритропоэтина | |
| AU2003251284B9 (en) | Stable pharmaceutical composition comprising erythropoietin | |
| CA2492470C (en) | Stable pharmaceutical composition comprising erythropoietin | |
| MXPA06005791A (en) | Erythropoietin solution formulation | |
| HK1093012B (en) | Stable, aqueous solution of human erythropoietin, not containing serum albumin | |
| KR20180049887A (ko) | 페길레이션된 에리스로포이에틴을 포함하는 신규한 제제 | |
| JPWO2001017542A1 (ja) | タンパク質溶液製剤およびその安定化方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20160322 |