RU2210077C2 - Method for evaluating efficiency in treating ischemic cardiac disease - Google Patents
Method for evaluating efficiency in treating ischemic cardiac disease Download PDFInfo
- Publication number
- RU2210077C2 RU2210077C2 RU2000122807A RU2000122807A RU2210077C2 RU 2210077 C2 RU2210077 C2 RU 2210077C2 RU 2000122807 A RU2000122807 A RU 2000122807A RU 2000122807 A RU2000122807 A RU 2000122807A RU 2210077 C2 RU2210077 C2 RU 2210077C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- treatment
- blood serum
- modified
- peg
- blood
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 44
- 208000020446 Cardiac disease Diseases 0.000 title abstract 2
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 title abstract 2
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 title abstract 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 34
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 25
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 24
- 239000008118 PEG 6000 Substances 0.000 claims abstract description 23
- 229920002584 Polyethylene Glycol 6000 Polymers 0.000 claims abstract description 23
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000000326 densiometry Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 claims abstract description 7
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 claims description 29
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 24
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 24
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 20
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 20
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 20
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 10
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 10
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 10
- 108010062497 VLDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 8
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 4
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- 102100040214 Apolipoprotein(a) Human genes 0.000 description 2
- 101710115418 Apolipoprotein(a) Proteins 0.000 description 2
- 101100177544 Arabidopsis thaliana FC2 gene Proteins 0.000 description 2
- 206010008479 Chest Pain Diseases 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SNIOPGDIGTZGOP-UHFFFAOYSA-N Nitroglycerin Chemical compound [O-][N+](=O)OCC(O[N+]([O-])=O)CO[N+]([O-])=O SNIOPGDIGTZGOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000006 Nitroglycerin Substances 0.000 description 2
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 229960003711 glyceryl trinitrate Drugs 0.000 description 2
- -1 mLPONP Proteins 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 102000018616 Apolipoproteins B Human genes 0.000 description 1
- 108010027006 Apolipoproteins B Proteins 0.000 description 1
- 206010003211 Arteriosclerosis coronary artery Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 102000000853 LDL receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 1
- 101100136834 Mus musculus Plin5 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 1
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000010100 anticoagulation Effects 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000036523 atherogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 208000026758 coronary atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 125000005629 sialic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003966 vascular damage Effects 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Способ относится к области медицины и может быть использован в кардиологии и терапии. The method relates to medicine and can be used in cardiology and therapy.
Известны способы оценки эффективности лечения ИБС путем оценки уровня липопротеинов (ЛП) крови (А.Н. Климов, Н.Г. Никульчева. Липиды, липопротеиды и атеросклероз. 1995, Питерпресс, стр. 98-102) и разделения на фракции ЛП в полиакриламидном теле (Н. Н. Шацкая. Биохимические исследования в оценке состояния сердечно-сосудистой системы. В кн. Методы исследований в профпатологии. М., 1988, стр. 95-97). Known methods for assessing the effectiveness of the treatment of coronary artery disease by assessing the level of blood lipoproteins (LP) (A. N. Klimov, N. G. Nikulcheva. Lipids, lipoproteins and atherosclerosis. 1995, Piterpress, pp. 98-102) and separation into LP fractions in polyacrylamide body (NN Shatskaya. Biochemical studies in assessing the state of the cardiovascular system. In the book. Research Methods in Occupational Pathology. M., 1988, pp. 95-97).
Описанные способы не позволяют выявить все фракции ЛП крови, включая ХМ, ЛПВП, ЛПНП, ЛПОНП и ЛП (а), а служат для разделения на фракции ХМ, ЛПВП, ЛПНП, ЛПОНП от комплекса альбумина с неэстерифицированными жирными кислотами. The described methods do not allow to detect all blood LP fractions, including HM, HDL, LDL, VLDL and LP (a), but serve to separate HM, HDL, LDL, VLDL from the complex of albumin with unesterified fatty acids.
Описан также способ разделения на фракции ЛП путем электрофореза в геле агарозы (Лабораторные методы исследования. Под редакцией В.В. Меньшикова. М. : Медицина, 1987, с. 248-249). Also described is a method of separation into LP fractions by agarose gel electrophoresis (Laboratory research methods. Edited by V.V. Menshikov. M.: Medicine, 1987, pp. 248-249).
Данный способ является наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату (прототипом). Однако указанный способ недостаточно точен, так как не позволяет выявить модифицированные ЛП(а), кроме ЛПНП, ЛПОНП. Это связано с исследованием малого образца сыворотки крови, не подготовленного для выявления модифицированных ЛП. Концентрация ЛП(а) в крови очень низкая. В способе-прототипе лунка для внесения исследуемого образца сыворотки крови готовится в объеме металлического (стального) бруска с площадью основания 2•20 мм и высотой 10 мм, что не позволяет внести достаточно большой объем сыворотки крови или преципитатов сыворотки крови для исследования. This method is the closest to the proposed technical essence and the achieved result (prototype). However, this method is not accurate enough, since it does not allow to identify modified drugs (a), except for LDL, VLDL. This is due to the study of a small sample of blood serum, not prepared to detect modified drugs. The concentration of LP (a) in the blood is very low. In the prototype method, the well for introducing the test sample of blood serum is prepared in the volume of a metal (steel) bar with a base area of 2 • 20 mm and a height of 10 mm, which does not allow a sufficiently large volume of blood serum or serum precipitates to be added for research.
Целью способа является повышение точности. The aim of the method is to increase accuracy.
Указанная цель достигается техническим решением, представляющим собой проведение дополнительной обработки сыворотки крови 7% ПЭГ-6000 с последующей инкубацией 7% ПЭГ-6000 преципитата сыворотки крови красителем суданом Б при температуре 40oС в темном термостате и исследованием 7% ПЭГ-6000 преципитата сыворотки крови, в 2 раза по объему превышающего таковой по сравнению со способом-прототипом, последующей денситометрией фракций модифицированных ЛП сыворотки крови с их количественной оценкой.This goal is achieved by a technical solution, which is the additional processing of blood serum 7% PEG-6000, followed by incubation of 7% PEG-6000 serum precipitate with dye Sudan B at a temperature of 40 o C in a dark thermostat and the study of 7% PEG-6000 serum precipitate , 2 times in volume exceeding that in comparison with the prototype method, followed by densitometry of fractions of modified blood serum drugs with their quantitative assessment.
Новым в данном способе является дополнительная обработка сыворотки крови 7% ПЭГ-6000, последующая инкубация 7% ПЭГ-6000 преципитата сыворотки крови красителем суданом Б при температуре 40oС в темном термостате, исследование 7% ПЭГ-6000 преципитата сыворотки крови, в 2 раза по объему превышающего таковой по сравнению со способом-прототипом; денситометрия фракций модифицированных ЛП сыворотки крови с их количественной оценкой.New in this method is the additional processing of blood serum 7% PEG-6000, the subsequent incubation of 7% PEG-6000 precipitate of blood serum with dye Sudan B at a temperature of 40 o C in a dark thermostat, the study of 7% PEG-6000 precipitate of blood serum, 2 times in volume exceeding that in comparison with the prototype method; densitometry of fractions of modified blood serum drugs with their quantitative assessment.
Для получения ПЭГ-6000 преципитата сыворотки крови используется 7% ПЭГ-6000. Известно, что 8% ПЭГ-6000 является предельной концентрацией для получения преципитатов сыворотки крови, содержащих иммунные комплексы и не содержащих грубодисперсных белков сыворотки крови. Применение 6% ПЭГ-6000 не позволяет полностью осадить иммунные комплексы сыворотки крови. Поэтому для повышения точности способа экспериментальным путем была выбрана 7% концентрация ПЭГ-6000, позволяющая, с одной стороны, полностью осадить иммунные комплексы (ИК) сыворотки крови с гарантией отсутствия грубодисперсных (высокомолекулярных) белков сыворотки крови, а с другой стороны, позволяющая полностью осадить ИК, присутствующие в сыворотке крови. Так, в случае концентрации ИК в сыворотке крови, равной 2,5 г/л, эта же концентрация ИК выявлялась в 7% ПЭГ-6000 преципитате крови, с результатом ± 3%, что связано с увеличением числа манипуляций, а не с изменением концентрации ИК в преципитатах сыворотки крови. To obtain PEG-6000 precipitate of blood serum, 7% PEG-6000 is used. It is known that 8% PEG-6000 is the limiting concentration for obtaining serum precipitates containing immune complexes and not containing coarse proteins of blood serum. The use of 6% PEG-6000 does not completely precipitate the immune complexes of blood serum. Therefore, to increase the accuracy of the method, a 7% concentration of PEG-6000 was chosen experimentally, which allows, on the one hand, to completely precipitate the immune complexes (IR) of blood serum with a guarantee of the absence of coarse (high molecular weight) proteins of blood serum, and on the other hand, to completely precipitate IR present in blood serum. So, in the case of an IR concentration in serum of 2.5 g / l, the same IR concentration was detected in 7% PEG-6000 blood precipitate, with a result of ± 3%, which is associated with an increase in the number of manipulations, and not with a change in concentration IR in serum precipitates.
Дополнительная инкубация 7% ПЭГ-6000 преципитата сыворотки крови с красителем суданом Б повышает сродство красителя к ЛП крови, а увеличение объема взятого для исследований образца крови позволяет выявить модифицированные ЛП(а), содержащиеся в крови больных ишемической болезнью сердца (ИБС) в очень низких концентрациях, что позволяет повысить точность способа и получить желаемый результат. Предлагаемый способ позволяет выявлять следующие классы модифицированных ЛП: ЛПНП, ЛПОНП и ЛП(а) (мЛПНП, мЛПОНП, мЛП(а)) и проводить последующую денситометрию фракций модифицированных ЛП сыворотки крови с их количественной оценкой. An additional incubation of 7% PEG-6000 serum precipitate with dye Sudan B increases the affinity of the dye for blood LP, and an increase in the volume of the blood sample taken for research allows the detection of modified drugs (a) contained in the blood of patients with coronary heart disease (CHD) in very low concentrations, which improves the accuracy of the method and obtain the desired result. The proposed method allows to identify the following classes of modified drugs: LDL, VLDL and LP (a) (mLDP, mLPONP, mLP (a)) and subsequent densitometry of fractions of modified blood serum drugs with their quantitative assessment.
В случае снижения уровня модифицированных ЛП(а) у больных ИБС после лечения на 50% и более терапию заболевания считают эффективной. Впервые эффективность терапии ИБС оценивалась по изменению уровня модифицированных ЛП(а) после денситометрии электрофореграммы модифицированных ЛП крови. In the case of a decrease in the level of modified LP (a) in patients with coronary heart disease after treatment by 50% or more, the treatment of the disease is considered effective. For the first time, the effectiveness of the treatment of coronary heart disease was evaluated by changing the level of modified drugs (a) after densitometry of the electrophoregram of modified blood drugs.
Каждый вновь введенный в формулу изобретения признак выполняет функцию повышения точности и эффективности способа. Each feature newly introduced into the claims performs the function of increasing the accuracy and efficiency of the method.
Отличительные признаки проявили в заявленной совокупности новые свойства. Distinctive features showed in the claimed combination of new properties.
Идентичной совокупности признаков в известных решениях не обнаружено. No identical set of features was found in the known solutions.
Данный способ возможно использовать в клинической практике. This method can be used in clinical practice.
Таким образом, данное решение соответствует критериям изобретения: "новизна", "практическая применимость", "изобретательский уровень". Thus, this solution meets the criteria of the invention: "novelty", "practical applicability", "inventive step".
В настоящее время особое внимание уделяется исследованию модифицированных ЛП(а), в связи с чем разрабатываются способы лабораторной диагностики, позволяющие исследовать этот липопротеин крови, относящийся к апо-B-содержащим липопротеннам, богатым холестеролом (ХС). ЛП(а) идентичен "тонущим" пре-β-ЛП (sinking pre-β-Lp), имеющим при электрофорезе подвижность пре-β-ЛП. ЛП(а) содержат 27% белка, 8% углеводов и 65% липидов, из которых ЭХС составляют 59%, НЭХС - 14%, ФЛ - 14%. Currently, special attention is paid to the study of modified drugs (a), in connection with which laboratory diagnostic methods are being developed that allow the study of this blood lipoprotein, related to apo-B-containing lipoprotennes rich in cholesterol (cholesterol). PL (a) is identical to “sinking” pre-β-LP (sinking pre-β-Lp), which has the mobility of pre-β-LP during electrophoresis. PL (a) contains 27% protein, 8% carbohydrates and 65% lipids, of which 59% are ECS, 14% are NECS, 14% are PL.
Белковым компонентом ЛП(а) является высокогликозилированный полипептид - апо(а), имеющий близкое структурное сродство к плазминогену - одному из факторов системы свертывания - противосвертывания крови. При росте концентрации как ЛП(а), так и его модифицированных форм в крови нарушаются процессы микроциркуляции в кровеносных артериях с возможным образованием микротромбов. The protein component of LP (a) is a highly glycosylated polypeptide - apo (a), which has a close structural affinity for plasminogen - one of the factors of the coagulation system - anticoagulation of blood. With an increase in the concentration of both LP (a) and its modified forms in the blood, the microcirculation processes in the blood arteries are disrupted with the possible formation of microthrombi.
Благодаря наличию в структуре aпo(a) сиаловых кислот, ЛП(а) более отрицательно заряжен по сравнению с β-ЛП в электрическом поле, лучше растворим в воде, может взаимодействовать с ионами металлов (кальция). Этот липопротеин и его модифицированные формы гетерогенны. Все это свидетельствует об особой роли мЛП(а) в атерогенезе. Due to the presence of sialic acids in the apo (a) structure, PL (a) is more negatively charged than β-PL in an electric field, it is better soluble in water, and can interact with metal ions (calcium). This lipoprotein and its modified forms are heterogeneous. All this indicates the special role of MLP (a) in atherogenesis.
мЛП(а) может взаимодействовать с ЛПНП-рецепторами, оказывая слабое влияние на B,Е - активность ГМК - Ко А редуктазы, на эстерификацию ХС. Период полураспада ЛП(а) длиннее, чем у ЛПНП и составляет 3,3 суток. Содержание ЛП(а) в крови в норме не превышает 30 мг/л, и обычными методами исследования ЛП(а) определить невозможно. При высокой концентрации в крови ЛП(а) выявляется в местах поражения сосудов в области скопления фибриногена. Повышенная концентрация ЛП(а) часто сочетается с IIа, IIб типами гиперлипопротеидемий, при которых достаточно часто выявляются модифицированные ЛП. Поэтому в клинической практике крайне важно определение ЛП(а) и его модифицированных форм. Установлено, что большинство гиполипидемических препаратов не влияет на повышенный уровень ЛП(а). Результаты мировых популяционных исследований показали, что ЛП(а) представляет собой самостоятельный и независимый фактор риска ИБС - наиболее тяжелого проявления атеросклероза. У здоровых лиц в 7% ПЭГ-6000 преципитатах крови модифицированные ЛП отсутствуют Модифицированные ЛПН, ЛПОПН, ЛП(а) могут появляться в их составе при атеросклерозе.mLP (a) can interact with LDL receptors, exerting a weak effect on B, E - activity of MMC - Co A reductase, on cholesterol esterification. The half-life of the drug (a) is longer than that of LDL and is 3.3 days. The content of LP (a) in the blood normally does not exceed 30 mg / l, and it is impossible to determine by conventional methods of investigation of LP (a). At a high concentration in the blood, PL (a) is detected at the sites of vascular damage in the area of accumulation of fibrinogen. Increased concentration of Lp (a) is often associated with II a, II b hyperlipidemia types for which quite often detected modified LP. Therefore, in clinical practice, the determination of LP (a) and its modified forms is extremely important. It was found that most lipid-lowering drugs do not affect elevated levels of LP (a). The results of world population studies have shown that LP (a) is an independent and independent risk factor for coronary heart disease - the most severe manifestation of atherosclerosis. In healthy individuals, in 7% PEG-6000 blood precipitates, there are no modified LPs. Modified LDLs, LPOPN, and LP (a) can appear in their composition during atherosclerosis.
Все сказанное свидетельствует о крайней важности разработки способов лабораторной диагностики, позволяющих выявлять ЛП(а). All of the above indicates the extreme importance of the development of laboratory diagnostic methods that allow the detection of drugs (a).
В настоящее время в широкой клинической лабораторной практике отсутствуют способы определения модифицированных ЛП(а). В то же время популярность способа электрофоретического разделения на фракции модифицированных ЛП крови в геле агарозы обусловлена его высокой чувствительностью, простотой осуществления и достаточной адекватностью получаемых результатов (Лаб. Дело, 1980, 5, стр. 287-290). Currently, in a wide clinical laboratory practice, there are no methods for the determination of modified drugs (a). At the same time, the popularity of the method of electrophoretic separation into fractions of modified blood LP in agarose gel is due to its high sensitivity, ease of implementation and sufficient adequacy of the results obtained (Lab. Delo, 1980, 5, p. 287-290).
Метод основан на электрофоретической подвижности модифицированных ЛП крови. The method is based on the electrophoretic mobility of modified blood LPs.
Изобретение будет понятно из следующего описания приложенных чертежей. The invention will be clear from the following description of the attached drawings.
Способ осуществляется следующим образом поэтапно:
1) приготовление раствора судана Б: 400 мг судана Б растворяют в 20 мг этиленгликоля на кипящей водяной бане в течение 50 мин, фильтруют, хранят в стеклянной посуде;
2) приготовление геля агарозы: 320 мг агарозы А фирмы "Sigma" растворяют в 20 мл воды при кипячении, затем помещают в термостат при 55oС; добавляют 20 мл раствора альбумина (1 г альбумина в 200 мл веронал-мединалового буфера, рН 8,6). 3 мл геля агарозы наносят на обезжиренное горизонтально установленное предметное стекло, помещают металлический стальной стержень-брусок 20•4 мм (высотой 10 мм), который после застывания геля убирают магнитом;
3) к 1 мл сыворотки крови добавляют 40 мл 7% ПЭГ-6000, инкубируют 1 час при 20oС, центрифугируют 40 мин при 18000 g. Осадок дважды промывают фосфатным буфером с рН 7,25. Раствор преципитата используют для электрофоретического исследования;
4) к 0,25 мл 7% ПЭГ-6000 преципитата сыворотки крови добавляют 0,15 мл раствора судана Б, помещают на 1 час в темный термостат при 40oС, затем добавляют 0,2 мл горячего раствора геля агарозы, смешивают, подогревают при 55oС и подогретым вносят в желобок геля агарозы;
5) предметное стекло помещают в камеру для электрофореза слоем агарозы вниз, электрофорез проводят в течение часа в холодильной камере при температуре 4oС при напряжении 100 В и силе тока 40-45 мА.The method is as follows in stages:
1) preparation of a solution of Sudan B: 400 mg of Sudan B is dissolved in 20 mg of ethylene glycol in a boiling water bath for 50 minutes, filtered, stored in a glass dish;
2) preparation of agarose gel: 320 mg of Sigma A agarose A is dissolved in 20 ml of water by boiling, then placed in a thermostat at 55 ° C; add 20 ml of albumin solution (1 g of albumin in 200 ml of veronal-medinal buffer, pH 8.6). 3 ml of agarose gel is applied to a fat-free horizontally mounted glass slide, a metal steel rod-bar 20 • 4 mm (10 mm high) is placed, which, after gel setting, is removed with a magnet;
3) to 1 ml of blood serum add 40 ml of 7% PEG-6000, incubate for 1 hour at 20 o C, centrifuged for 40 min at 18000 g. The precipitate is washed twice with phosphate buffer with a pH of 7.25. The precipitate solution is used for electrophoretic research;
4) 0.15 ml of Sudan B solution is added to 0.25 ml of 7% PEG-6000 blood serum precipitate, placed for 1 hour in a dark thermostat at 40 o C, then 0.2 ml of a hot agarose gel solution is added, mixed, heated at 55 o C and heated, make agarose gel in the groove;
5) a glass slide is placed in an electrophoresis chamber with an agarose layer down, electrophoresis is carried out for an hour in a refrigerator at a temperature of 4 ° C at a voltage of 100 V and a current of 40-45 mA.
У пациентов I группы до лечения выявились модифицированные ЛПНП и ЛПОНП (фиг.3, 4). In patients of group I before treatment, modified LDL and VLDL were detected (Figs. 3, 4).
У 22 пациентов II группы до лечения с наличием гиперхолестеролемии (ГХС) в пределах 7,5-14,6 ммоль/л холестерола в крови (среднее значение ХС 9,8±0,7 ммоль/л), кроме фракций модифицированных ЛПНП и ЛПОНП в зоне между мЛПНП и мЛПОНП выявлена фракция мЛП(а). In 22 patients of group II before treatment with the presence of hypercholesterolemia (GHS) in the range of 7.5-14.6 mmol / L of cholesterol in the blood (average cholesterol of 9.8 ± 0.7 mmol / L), except for fractions of modified LDL and VLDL in the zone between MLPNP and MLPNP, the MLP fraction (a) was detected.
В случае же использования дополнительно к способу-прототипу только добавочной инкубации исследуемого образца с суданом Б 1 ч в темном термостате при температуре 40oС и внесения его в лунку 2•20мм либо только увеличения объема лунки до 4•20мм без дополнительной инкубации пробы фракции мЛПНП и мЛПОНП выявлялись несколько лучше, чем в контроле, а мЛП(а) определялась в виде следовой полосы, что не позволяло ее денситометрировать и, следовательно, оценивать количественно (фиг.5, 6).In the case of using, in addition to the prototype method, only additional incubation of the test sample with Sudan B for 1 h in a dark thermostat at a temperature of 40 ° C and adding it to a 2 × 20 mm well or only increasing the volume of a hole to 4 • 20 mm without additional incubation of the sample of the mLDPE fraction and mLPONP were detected slightly better than in the control, and mLP (a) was determined in the form of a trace band, which did not allow its densitometry and, therefore, to quantify (Fig.5, 6).
У остальных пациентов этой группы фракция мЛП(а) не выявлена. Их было 7 человек из 29 больных ИБС. In the remaining patients of this group, the fraction of mLP (a) was not detected. There were 7 of 29 patients with coronary heart disease.
После лечения ИБС через 24 дня у пациентов I группы фракции модифицированные ЛПНП и ЛПОНП были менее интенсивными (фиг.7 и 8). After treatment of coronary heart disease after 24 days in patients of group I fractions, the modified LDL and VLDL were less intense (Figs. 7 and 8).
После лечения ИБС через 24 дня у пациентов II группы выявились менее интенсивно выраженные фракции модифицированных ЛПНП и ЛПОНП, как и в предыдущей группе. Фракция же мЛП(а) либо полностью отсутствовала у 15 пациентов, либо ее интенсивность снижалась более чем на 50% и более чем у 7 больных ИБС этой группы (см. клинические примеры). Среднее значение:
6) электрофореграмму фиксируют в 5% растворе уксусной кислоты в течение одного часа, затем высушивают между листами фильтровальной бумаги, непрерывно смачивая 96% этиловым спиртом;
7) денситометрию проводят на микрофотометре МФ-4.After treatment of coronary heart disease after 24 days, patients of group II revealed less intensely expressed fractions of modified LDL and VLDL, as in the previous group. The fraction of mLP (a) was either completely absent in 15 patients, or its intensity decreased by more than 50% and in more than 7 patients with coronary heart disease of this group (see clinical examples). Mean:
6) the electrophoregram is fixed in a 5% solution of acetic acid for one hour, then dried between sheets of filter paper, continuously wetting with 96% ethyl alcohol;
7) densitometry is carried out on an MF-4 microphotometer.
Количественную оценку фракций при денситометрии проводят следующим образом: определяют площадь каждого пика на хроматограмме по формуле S= h•B1/2h, где S - площадь пика, h - высота пика, B1/2h - ширина пика на половине ею высоты. The densities are quantified by densitometry as follows: the area of each peak in the chromatogram is determined by the formula S = h • B1 / 2h, where S is the peak area, h is the peak height, B1 / 2h is the peak width at half its height.
Расчет проводится автоматически по соответствующей программе и конечным результатом является процентное содержание каждой фракции ЛП, если она есть по отношению ко всей сумме фракций, принятой за 100%. The calculation is carried out automatically according to the appropriate program and the final result is the percentage of each drug fraction, if it is in relation to the total amount of fractions, taken as 100%.
При проведении повторного исследования после лечения величина фракции модифицированных ЛП(а) до лечения принимается за 100% и рассчитывается процентное значение величины снижения фракции модифицированных ЛП(а) после проведенной терапии ИБС. When conducting a second study after treatment, the value of the fraction of modified drugs (a) before treatment is taken as 100% and the percentage value of the reduction in the fraction of modified drugs (a) after the treatment of coronary heart disease is calculated.
В группе контроля в 7% ПЭГ-6000 преципитатах сыворотки крови в случае использования способа-прототипа (n=10) и предлагаемого способа (n=12) не выявлены модифицированные ЛП (фиг.1 и 2). In the control group in 7% PEG-6000 serum precipitates in the case of using the prototype method (n = 10) and the proposed method (n = 12), no modified drugs were detected (Figs. 1 and 2).
Нами обследованы 2 группы больных ИБС по 12 для способа-прототипа - I группа и 29 пациентов - II группа для проведения электрофореза ЛП 7% ПЭГ-6000 преципитата сыворотки крови с помощью предлагаемого способа снижения уровня мЛП(а) у вольных ИБС этой группы после лечения по сравнению с исходным составило 62±5%. Результаты лабораторного исследования анализировались в комплексе с клиническими данными. Заключение специалистов - лечение ИБС эффективное, о чем свидетельствуют не только данные клинического обследования пациентов, но и результаты лабораторных анализов. We examined 2 groups of patients with coronary artery disease 12 for the prototype method - group I and 29 patients - group II for electrophoresis of LP 7% PEG-6000 precipitate of blood serum using the proposed method to reduce the level of mLP (a) in free coronary artery disease of this group after treatment in comparison with the initial one, it was 62 ± 5%. Laboratory results were analyzed in conjunction with clinical data. The expert conclusion is that the treatment of coronary heart disease is effective, as evidenced not only by the data of the clinical examination of patients, but also by the results of laboratory tests.
Пример 1. Больной Г., 42 года, история болезни 117, поступил в отделение ИБС и атеросклероза НИИ кардиологии г. Томска. Жалобы при поступлении на боли в области сердца колющего характера, иррадиирующие под лопатку. На ЭКГ выявлены рубцовые изменения в миокарде. Велоэргометрия была прекращена при нагрузке 50 Вт по причине усиления загрудинных болей. АД 150/100 мм рт.ст., пульс в покое 63 уд. в мин. Боли купируются нитроглицерином. Example 1. Patient G., 42 years old, medical history 117, was admitted to the Department of IHD and Atherosclerosis, Institute of Cardiology, Tomsk. Complaints upon receipt of pain in the region of the heart stitching, radiating under the shoulder blade. An ECG revealed cicatricial changes in the myocardium. Bicycle ergometry was stopped at a load of 50 watts due to increased chest pain. HELL 150/100 mm Hg, pulse at rest 63 beats. in minutes Pain is stopped by nitroglycerin.
Результаты лабораторного исследования:
ХС общий - 7,9 м моль/л
Триацилглицериды - 1,5 ммоль/л
ХСЛПВП - 1,1 ммоль/л.Laboratory test results:
Total cholesterol - 7.9 mol / L
Triacylglycerides - 1.5 mmol / L
HSLPVP - 1.1 mmol / L.
Результаты электрофоретического исследования ЛП 7% ПЭГ-6000 преципитата сыворотки крови по способу-прототипу представлены на фиг.9, а по предлагаемому способу на фиг.10. Выявлены фракции мЛПНП, мЛПОНП и мЛП(а). The results of an electrophoretic study of a medicinal product of 7% PEG-6000 precipitate of blood serum by the prototype method are presented in Fig. 9, and by the proposed method in Fig. 10. The fractions of MLPNP, MLPONP and MLP (a) were revealed.
Диагноз при поступлении: ишемическая болезнь сердца, стенокардия напряжения, ФКШ. Diagnosis at admission: coronary heart disease, angina pectoris, FCS.
После проведенного лечения результаты лабораторного исследования:
ХС общий - 6,2 ммоль/л
Триацилглицериды - 1,1 ммоль/л
ХСЛПВП - 1,4 ммоль/л.After treatment, the results of a laboratory study:
Total cholesterol - 6.2 mmol / l
Triacylglycerides - 1.1 mmol / L
HSLPVP - 1.4 mmol / L.
При электрофоретическом исследовании ЛП 7% ПЭГ-6000 преципитата сыворотки крови по предлагаемому способу фракции ЛП не выявлены. Фиг.11 содержит только линию старта. When electrophoretic study of the drug 7% PEG-6000 precipitate of blood serum by the proposed method, the fractions of the drug were not detected. 11 contains only the start line.
Диагноз при выписке: ишемическая болезнь, стенокардия напряжения, ФК II. Заключение: лечение эффективное. Diagnosis at discharge: coronary artery disease, angina pectoris, FC II. Conclusion: the treatment is effective.
Пример 2. Больной К., 51 лет, история болезни 124, поступил в отделение ИБС и атеросклероза НИИ кардиологии г. Томска с жалобами на боли в области сердца, иррадиирующие под лопатку. На ЭКГ явления ишемии миокарда. ВЭМ прекращена при нагрузке 60 Вт по причине загрудинной боли и одышки. АД 150/110 мм рт.ст., пульс в покое 64 уд. в мин. Боли купируются нитроглицерином. Example 2. Patient K., 51 years old, medical history 124, was admitted to the department of coronary heart disease and atherosclerosis of the Institute of Cardiology of Tomsk with complaints of pain in the heart that radiates under the shoulder blade. On the ECG manifestations of myocardial ischemia. VEM was discontinued at a load of 60 watts due to chest pain and shortness of breath. HELL 150/110 mm Hg, pulse at rest 64 beats. in minutes Pain is stopped by nitroglycerin.
Результаты лабораторного исследования:
ХС общий - 8,7 ммоль/л
Триацилглицериды - 1,3 ммоль/л
ХС ЛПВП - 0,9 ммоль/л.Laboratory test results:
Total cholesterol - 8.7 mmol / l
Triacylglycerides - 1.3 mmol / L
HDL cholesterol - 0.9 mmol / L.
Результаты электрофореза 7% ПЭГ-6000 преципитата сыворотки крови выявили наличие мЛПНП, мЛПОНП и мЛП(а) (фиг.12). Результаты денситометрии мЛП: мЛПНП - 74%, мЛПОНП - 20%, мЛП(а) - 6%. The results of electrophoresis of 7% PEG-6000 precipitate of blood serum revealed the presence of mLPNP, mLPONP and mLP (a) (Fig. 12). Densitometry results for mLP: mLDPE - 74%, mLPONP - 20%, mLP (a) - 6%.
Диагноз при поступлении: ИБС, стенокардия напряжения, ФК III-IV. Diagnosis at admission: coronary heart disease, angina pectoris, FC III-IV.
После проведенного лечения результаты лабораторного исследования:
ХС общий - 6,5 ммоль/л
Триацилглицериды - 1,0 ммоль/л
ХСЛПВП - 1,3 ммоль/л.After treatment, the results of a laboratory study:
Total cholesterol - 6.5 mmol / l
Triacylglycerides - 1.0 mmol / L
HSLPVP - 1.3 mmol / L.
Результаты электрофоретического исследования мЛП крови по предлагаемому способу после лечения представлены на фиг.13. The results of electrophoretic studies of blood MLP according to the proposed method after treatment are presented in Fig.13.
Результаты денситометрии мЛП: мЛПНП - 78%, мЛПОНП - 20%, мЛП(а) - 2%. Densitometry results for mLP: mLDPE - 78%, mLPONP - 20%, mLP (a) - 2%.
Диагноз при выписке: ИБС, стенокардия напряжения, ФК II. Снижение уровня мЛП(а) на 67% по сравнению с исходным свидетельствовало об эффективности лечения ИБС. Diagnosis at discharge: coronary heart disease, exertional angina, FC II. A decrease in the level of MLP (a) by 67% compared with the initial testified to the effectiveness of the treatment of coronary artery disease.
Итак, при применении способа-прототипа оценка эффективности терапии ИБС проводилась по клинической картине заболевания и уровню липидов крови без выявления мЛП, что свидетельствовало о недостаточной точности способа (см. фиг. 7 и 8). Оценка эффективности терапии по способу-прототипу не превышала 60%. So, when applying the prototype method, the effectiveness of the treatment of coronary heart disease was evaluated according to the clinical picture of the disease and the level of blood lipids without detecting mLP, which indicated insufficient accuracy of the method (see Fig. 7 and 8). Evaluation of the effectiveness of therapy by the prototype method did not exceed 60%.
У 7 пациентов II группы из 29 человек мЛП(а) не были выявлены, поэтому оценка эффективности терапии в этой подгруппе пациентов проводилась по клинико-лабораторным данным. У остальных 22 больных ИБС фракция мЛП(а) была выявлена и точность определения эффективности лечения ИБС составила в этой подгруппе 100%, т.к. после лечения фракция мЛП(а) либо не выявлялась, либо снижалась на 50% и более. Способ применен у 51 пациента. In 7 patients of group II from 29 people, mLP (a) were not detected, therefore, the effectiveness of therapy in this subgroup of patients was evaluated according to clinical and laboratory data. In the remaining 22 patients with coronary heart disease, the fraction of mLP (a) was detected and the accuracy of determining the effectiveness of the treatment of coronary heart disease was 100% in this subgroup, after treatment, the fraction of MLP (a) was either not detected, or decreased by 50% or more. The method was applied in 51 patients.
Применение предлагаемого способа определения эффективности лечения ИБС в отличие от способа прототипа позволило выявить дополнительную фракцию модифицированных ЛП(а), оценить ее снижение после проведенной курсовой терапии ИБС и повысить точность способа. С помощью способа-прототипа такие результаты получить не удалось, т.к. фракцию мЛП(а) выявить было невозможно ни до, ни после лечения. Ложноположительных случаев оценки эффективности лечения ИБС не наблюдалось. При этом предлагаемый способ прост в использовании и интерпретации полученных результатов и может быть внедрен в клиническую практику. The application of the proposed method for determining the effectiveness of the treatment of coronary heart disease, in contrast to the prototype method, made it possible to identify an additional fraction of modified drugs (a), evaluate its decrease after course therapy of coronary artery disease, and increase the accuracy of the method. Using the prototype method, such results could not be obtained, because it was impossible to identify the MLP (a) fraction either before or after treatment. False positive cases of assessing the effectiveness of the treatment of coronary heart disease were not observed. Moreover, the proposed method is easy to use and interpret the results and can be implemented in clinical practice.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000122807A RU2210077C2 (en) | 2000-09-01 | 2000-09-01 | Method for evaluating efficiency in treating ischemic cardiac disease |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000122807A RU2210077C2 (en) | 2000-09-01 | 2000-09-01 | Method for evaluating efficiency in treating ischemic cardiac disease |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2000122807A RU2000122807A (en) | 2003-01-27 |
| RU2210077C2 true RU2210077C2 (en) | 2003-08-10 |
Family
ID=29245229
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000122807A RU2210077C2 (en) | 2000-09-01 | 2000-09-01 | Method for evaluating efficiency in treating ischemic cardiac disease |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2210077C2 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2396567C1 (en) * | 2009-02-02 | 2010-08-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of estimating clinical effectiveness in chronic heart disease |
| RU2400759C1 (en) * | 2009-02-02 | 2010-09-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of estimating efficiency of coronary heart disease treatment |
| RU2439581C1 (en) * | 2010-06-11 | 2012-01-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | Method of estimating efficiency of ischemic heart disease treatment |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2613298C1 (en) * | 2016-04-21 | 2017-03-15 | Лариса Анатольевна Хаишева | Method for therapy effectiveness prediction for patients with coronary artery disease 12 months after acute coronary syndrome |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1467516A1 (en) * | 1986-07-14 | 1989-03-23 | Белорусский Научно-Исследовательский Институт Туберкулеза | Method of analyzing disturbance of lipoprotein spectrum of blood plasma |
| RU2031408C1 (en) * | 1992-09-10 | 1995-03-20 | Учайкина Людмила Васильевна | Method for determination of individual sensitivity to laser therapy at patients having cardiac ischemia |
| RU2115366C1 (en) * | 1997-04-24 | 1998-07-20 | Александр Николаевич Елизаров | Method of estimation of efficiency of sanatorium treatment of patients with diseases accompanied by tissue hypoxia |
| RU2126541C1 (en) * | 1996-06-14 | 1999-02-20 | Институт медицинской климатологии и восстановительного лечения СО РАМН | Method of predicting efficiency of diet therapy in patients with ischemic heart diseases |
-
2000
- 2000-09-01 RU RU2000122807A patent/RU2210077C2/en active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1467516A1 (en) * | 1986-07-14 | 1989-03-23 | Белорусский Научно-Исследовательский Институт Туберкулеза | Method of analyzing disturbance of lipoprotein spectrum of blood plasma |
| RU2031408C1 (en) * | 1992-09-10 | 1995-03-20 | Учайкина Людмила Васильевна | Method for determination of individual sensitivity to laser therapy at patients having cardiac ischemia |
| RU2126541C1 (en) * | 1996-06-14 | 1999-02-20 | Институт медицинской климатологии и восстановительного лечения СО РАМН | Method of predicting efficiency of diet therapy in patients with ischemic heart diseases |
| RU2115366C1 (en) * | 1997-04-24 | 1998-07-20 | Александр Николаевич Елизаров | Method of estimation of efficiency of sanatorium treatment of patients with diseases accompanied by tissue hypoxia |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2396567C1 (en) * | 2009-02-02 | 2010-08-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of estimating clinical effectiveness in chronic heart disease |
| RU2400759C1 (en) * | 2009-02-02 | 2010-09-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of estimating efficiency of coronary heart disease treatment |
| RU2439581C1 (en) * | 2010-06-11 | 2012-01-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | Method of estimating efficiency of ischemic heart disease treatment |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Vorderwinkler et al. | Release of cyclic guanosine monophosphate evaluated as a diagnostic tool in cardiac diseases | |
| RU2200950C2 (en) | Method of determination of blood lipoproteid fractions in patients with heart ischemic disease | |
| Thompson et al. | Plasma concentrations of quinidine, its major metabolites, and dihydroquinidine in patients with torsades de pointes | |
| RU2210075C2 (en) | Method for evaluating efficiency in treating ischemic cardiac disease | |
| RU2210076C2 (en) | Method for predicting the flow of ischemic cardiac disease | |
| RU2210079C2 (en) | Method of determination of blood modified lipoprotein fractions | |
| RU2360256C1 (en) | Method of determination of lipoproteins fractions of blood at patients with ischemic heart disease | |
| RU2210077C2 (en) | Method for evaluating efficiency in treating ischemic cardiac disease | |
| RU2398239C1 (en) | Method of predicting course of coronary heart disease | |
| RU2413952C2 (en) | Method of determining fractions of modified lipoproteins in blood | |
| Curzon et al. | Unesterified fatty acids and the binding of tryptophan in human plasma | |
| WO2019097089A1 (en) | Methods for prediction and early detection of diabetes | |
| RU2400759C1 (en) | Method of estimating efficiency of coronary heart disease treatment | |
| RU2462718C1 (en) | Method for evaluating clinical effectiveness in lipidemia | |
| RU2210078C2 (en) | Method for predicting the flow of ischemic cardiac disease | |
| RU2364873C1 (en) | Method of fractional analysis of modified blood lipoproteins | |
| RU2462722C1 (en) | Method for estimating clinical effectiveness of ischemic heart disease | |
| RU2439582C1 (en) | Method of predicting ischemic heart disease course | |
| RU2396567C1 (en) | Method of estimating clinical effectiveness in chronic heart disease | |
| RU2439580C1 (en) | Method of determining blood lipoprotein fractions in patients with ischemic heart disease | |
| RU2400751C1 (en) | Method of determining fractions of blood lipoproteins in patients with coronary heart disease | |
| RU2517054C1 (en) | Method for prediction of clinical course of lipidemia | |
| Zhang et al. | Association between fast-migrating low-density lipoprotein subfraction as characterized by capillary isotachophoresis and intima-media thickness of carotid artery | |
| RU2476883C1 (en) | Method for estimating clinical effectiveness of ischemic heart disease | |
| RU2439581C1 (en) | Method of estimating efficiency of ischemic heart disease treatment |