[go: up one dir, main page]

RU2293988C2 - Способ оценки чувствительности к интерферону у больных раком почки - Google Patents

Способ оценки чувствительности к интерферону у больных раком почки Download PDF

Info

Publication number
RU2293988C2
RU2293988C2 RU2005100610/15A RU2005100610A RU2293988C2 RU 2293988 C2 RU2293988 C2 RU 2293988C2 RU 2005100610/15 A RU2005100610/15 A RU 2005100610/15A RU 2005100610 A RU2005100610 A RU 2005100610A RU 2293988 C2 RU2293988 C2 RU 2293988C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
interferon
sensitivity
neutrophilic granulocytes
area under
chemiluminescence
Prior art date
Application number
RU2005100610/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2005100610A (ru
Inventor
Людмила Михайловна Куртасова (RU)
Людмила Михайловна Куртасова
Екатерина Алексеевна Шкапова (RU)
Екатерина Алексеевна Шкапова
Андрей Анатольевич Савченко (RU)
Андрей Анатольевич Савченко
Альберт Иванович Крыжановский (RU)
Альберт Иванович Крыжановский
Руслан Александрович Зуков (RU)
Руслан Александрович Зуков
Наталь Владимировна Рачкова (RU)
Наталья Владимировна Рачкова
Original Assignee
ГУ Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера СО РАМН
Красноярский краевой онкологический диспансер
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ГУ Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера СО РАМН, Красноярский краевой онкологический диспансер filed Critical ГУ Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера СО РАМН
Priority to RU2005100610/15A priority Critical patent/RU2293988C2/ru
Publication of RU2005100610A publication Critical patent/RU2005100610A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2293988C2 publication Critical patent/RU2293988C2/ru

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и онкологии, может быть использовано при лечении больных раком почки. Чувствительность к интерферону у больных раком почки оценивают путем исследования крови пациента in vitro с помощью хемилюминесцентного анализа по индексу чувствительности (ИЧ). ИЧ представляет собой отношение индекса активации нейтрофильных гранулоцитов при воздействии интерферона (ИАIFN) к индексу активации нейтрофильных гранулоцитов без интерферона (ИА). ИАIFN представляет собой отношение площади под кривой хемилюминесценции индуцированных нейтрофильных гранулоцитов при воздействии интерферона (SIFNинд) к площади под кривой спонтанной хемилюминесценции нейтрофильных гранулоцитов при воздействии интерферона (SIFNспон). ИА представляет собой отношение площади под кривой хемилюминесценции индуцированных нейтрофильных гранулоцитов (Sинд) к площади под кривой спонтанной хемилюминесценции нейтрофильных гранулоцитов (Sспон). О чувствительности к интерферону судят по отклонению ИЧ от 1,0. ИЧ, превышающий 1,0, свидетельствует о чувствительности к интерферону, а ИЧ, меньший или равный 1,0, свидетельствует об отсутствии чувствительности к интерферону. Изобретение обеспечивает повышенную эффективность интерферонотерапии у больных раком почки за счет повышения точности, сокращения времени исследования, снижения стоимости и упрощения способа.

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и онкологии. Может быть использовано при лечении больных раком почки.
Известен способ определения чувствительности к интерферонотерапии при раке почек путем использования моноклональных антител для формирования комплекса антиген-антитело на поверхности опухолевых клеток (US 5145773). Объектом исследований являются замороженные клетки или ткани почечной карциномы. Чувствительность к интерферону определяется по уровню экспрессии gp 160, который выявляется моноклональными антителами, например F33 (АТСС № HB 10156). Снижение экспрессии gp 160 на клетках рака почки свидетельствует о прогнозируемом положительном эффекте интерферонотерапии.
Известный способ является достаточно информативным, поскольку определение чувствительности к интерферону осуществляется по уровню онкомаркера, характерного именно для карциномы почки. Однако в известном способе оценивается воздействие интерферона только на опухолевые клетки (антипролиферативный, цитотоксический эффект), но не рассматривается воздействие интерферона на клетки иммунной системы пациентов (иммуномодулирующий эффект). То есть данный способ не предназначен для профилактики возникновения метастазов после радикальной нефрэктомии. Кроме того, к недостаткам известного способа относятся его высокая стоимость, необходимость наличия стерильного бокса (для культивирования клеточных культур), длительность и сложность выполнения.
Задачей изобретения является повышение эффективности интерферонотерапии у больных раком почки.
Задача решается тем, что в способе оценки чувствительности к интерферону у больных раком почки, заключающемся в биологическом исследовании терапевтической активности интерферона, согласно изобретению при исследовании крови пациента in vitro осуществляют хемилюминесцентный анализ функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов. После чего определяют индекс чувствительности (ИЧ), представляющий собой отношение индекса активации нейтрофильных гранулоцитов при воздействии интерферона (ИАIFN) к индексу активации нейтрофильных гранулоцитов без интерферона (ИА).
Т.е.: ИЧ=ИАIFN/ИА
Индекс активации нейтрофильных гранулоцитов при воздействии интерферона (ИАIFN) представляет собой отношение площади под кривой хемилюминесценции индуцированных нейтрофильных гранулоцитов при воздействии интерферона (SIFNинд) к площади под кривой спонтанной хемилюминесценции нейтрофильных гранулоцитов при воздействии интерферона (SIFNспон). Индекс активации нейтрофильных гранулоцитов без интерферона (ИА) представляет собой отношение площади под кривой хемилюминесценции индуцированных нейтрофильных гранулоцитов (Sинд) к площади под кривой спонтанной хемилюминесценции нейтрофильных гранулоцитов (Sспон).
Т.е.: ИАIFN=SIFNинд/SIFNспон; ИА=Sинд/Sспон
О чувствительности к интерферону судят по отклонению ИЧ от 1,0. ИЧ, превышающий 1,0, свидетельствует о чувствительности к интерферону, а ИЧ, меньший или равный 1,0, свидетельствует об отсутствии чувствительности к интерферону.
Высокая реактивность нейтрофильных гранулоцитов, их способность к быстрой функциональной перестройке в ответ на воздействие агентов различной природы позволяет рассматривать эти клетки как индикатор нарушений иммунного гомеостаза. Кроме того, после активации нейтрофильные гранулоциты сами становятся мощными эффекторами каскадных реакций, обеспечивающих развитие воспаления и проявление цитотоксической активности данной клеточной популяции, в частности к опухолевым клеткам. Помимо этого нейтрофильные гранулоциты несут на своей поверхности специфические рецепторы к интерферону, что делает возможным оценивать влияние интерферона на эти клетки в экспериментах in vitro.
Индекс активации является показателем соотношения интегральных характеристик синтеза активных форм кислорода в измеряемом диапазоне времени, полученных от стимулированных клеток, и клеток, находящихся в состоянии покоя.
Индекс чувствительности выше 1,0, характеризует положительную функциональную реакцию нейтрофильных гранулоцитов на интерферон. Индекс чувствительности равен 1,0 в тех случаях, когда реакция клеток на интерферон отсутствует. Индекс чувствительности ниже 1,0 определяется ингибирующим воздействием интерферона на клетку, сопровождается развитием отрицательной функциональной реакции.
Способ выполняют следующим образом. Из венозной крови обследуемого больного, выделяют нейтрофильные гранулоциты. Для этого к 5 мл крови с гепарином добавляют 1 мл полиглюкина. Смесь инкубируют в течение 30 мин при 37°С для ускорения осаждения эритроцитов. Полученный лейкоцитарный супернатант дважды отмывают в растворе Хенкса без фенолового красного по 10 мин при 400 g. Супернатант сливают, оставшиеся нейтрофильные гранулоциты разводят в 1 мл Хенкса и получают взвесь. Подсчитывают количество нейтрофильных гранулоцитов в камере Горяева. Проводят хемилюминесцентный анализ взвеси. Готовят опытную пробу следующего состава для регистрации индуцированной хемилюминесценции: донорская сыворотка (группа крови АВ, резус-фактор отрицательный), раствор Хенкса (без фенолового красного), люминол в концентрации 100 мкг/мл, интерферон, например реаферон, в концентрации 1 млн МЕ/мл (соответствует лечебной дозе 3 млн ME), неспецифический стимулятор выработки активных форм кислорода фагоцитирующих клеток, например зимозан в концентрации 2 мг/мл. Готовят контрольную пробу следующего состава для регистрации спонтанной хемилюминесценции: 200 мкл взвеси нейтрофильных гранулоцитов, 20 мкл донорской сыворотки, 240 мкл раствора Хенкса и 50 мкл люминола. Опытная проба включает 200 мкл взвеси нейтрофильных гранулоцитов, 20 мкл донорской сыворотки, 220 мкл раствора Хенкса, 20 мкл реаферона и 50 мкл люминола. Спонтанную хемилюминесценцию регистрируют в течение 45 мин. Затем добавляют в обе пробы 40 мкл зимозана и регистрируют индуцированную хемилюминесценцию нейтрофильных гранулоцитов. Регистрацию хемилюминесценции проводят на хемилюминесцентном анализаторе, например, "CL3604". Управление хемилюминесцентным анализатором и регистрацию результатов ведут через компьютер. Получают кривые хемилюминесценции опытной (с реафероном) и контрольной (без реаферона) проб, каждая из которых имеет по два пика. Первый пик на каждой из кривых соответствует максимальному уровню спонтанной хемилюминесценции, второй - индуцированной.
Определяют величины площади под первым (Sспон) и вторым (Sинд) пиком хемилюминесцентной кривой в контрольной пробе. Рассчитывают индекс активации нейтрофильных гранулоцитов в контрольной пробе
ИА=Sинд/Sспон
Определяют величины площади под первым (SIFNспон) и вторым (SIFNинд) пиком хемилюминесцентной кривой в опытной пробе. Рассчитывают индекс активации нейтрофильных гранулоцитов в опытной пробе
ИАIFN=SIFNинд/SIFNспон
Рассчитывают индекс чувствительности
ИЧ=ИАIFN/ИА
ИЧ, превышающий 1,0, свидетельствует о чувствительности нейтрофильных гранулоцитов к интерферону: больному рекомендуют интерферонотерапию. ИЧ, равный или меньший 1,0, свидетельствует об отсутствии чувствительности: интерферонотерапия неэффективна.
Клинический пример 1. Больной Т., 44 года. История болезни №.1496/125. Находился на стационарном лечении в урологическом отделении ККОД с 2.03.04. по 26.03.04. с диагнозом: рак правой почки, Т3М0М0. Операция 16.03.04., проведена лапаротомия, радикальная нефрэктомия справа, дренирование забрюшинного пространства. Гистологическое исследование №:11760-77 в препарате картина светлоклеточного почечно-клеточного рака. Течение послеоперационного периода гладкое.
Проведен хемилюминесцентный анализ реактивности нейтрофильных гранулоцитов и чувствительности к интерферону in vitro. Определен ИЧ.
ИЧ=11,63/6,73=1,73, что отражает наличие чувствительности нейтрофильных гранулоцитов у данного пациента при воздействии интерферона in vitro.
Дополнительно проведен контрольный анализ интерферонового статуса. Выявлена недостаточность спонтанной и стимулированной продукции интерферона-α. Пациент получил курс иммунотерапии реафероном.
Клинический пример 2. Больная X., 47 лет. История болезни №.1624/436. Находилась на стационарном лечении в урологическом отделении ККОД с 03.03.04. по 30.03.04. с диагнозом: рак правой почки, Т3Т0М0. Операция 23.03.04, проведена лапаротомия, радикальная нефрэктомия справа, дренирование забрюшинного пространства. Гистологическое исследование №:12459-77 в препарате картина почечноклеточного рака, светлоклеточный вариант, инвазия в капсулу. Течение послеоперационного периода гладкое.
Проведен хемилюминесцентный анализ функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов и чувствительности к интерферону in vitro. Определен ИЧ.
ИЧ=0,70/0,78=0,90, что отражает наличие отрицательной функциональной реакции у пациентки при воздействии интерферона in vitro.
Дополнительно проведен контрольный анализ интерферонового статуса. Не выявлено недостаточности продукции интерферона-α. Пациентке курс интерферонотерапии не рекомендован.
Предлагаемым способом обследовано 132 человека. Достоверность различий определялась по критерию Манна-Уитни.
Способ позволяет повысить эффективность интерферонотерапии у больных раком почки за счет сокращения времени исследования (2,5 часа вместо 6-7 дней в способе-прототипе), упрощения способа и снижения стоимости, так как не требует наличия стерильного бокса и дорогостоящих реактивов.

Claims (1)

  1. Способ оценки чувствительности к интерферону у больных раком почки, заключающийся в биологическом исследовании терапевтической активности интерферона, отличающийся тем, что при исследовании крови пациента in vitro с помощью хемилюминесцентного анализа функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов определяют индекс чувствительности (ИЧ), представляющий собой отношение индекса активации нейтрофильных гранулоцитов при воздействии интерферона (ИАIFN) к индексу активации нейтрофильных гранулоцитов без интерферона (ИА), причем ИАIFN представляет собой отношение площади под кривой хемилюминесценции индуцированных нейтрофильных гранулоцитов при воздействии интерферона (SIFNинд.) к площади под кривой спонтанной хемилюминесценции нейтрофильных гранулоцитов при воздействии интерферона (SIFNспон.), а ИА представляет собой отношение площади под кривой хемилюминесценции индуцированных нейтрофильных гранулоцитов (Sинд) к площади под кривой спонтанной хемилюминесценции нейтрофильных гранулоцитов (Sспон.), о чувствительности к интерферону судят по отклонению ИЧ от 1,0, при этом ИЧ, превышающий 1,0, свидетельствует о чувствительности к интерферону, а ИЧ, меньший или равный 1,0, свидетельствует об отсутствии чувствительности к интерферону.
RU2005100610/15A 2005-01-11 2005-01-11 Способ оценки чувствительности к интерферону у больных раком почки RU2293988C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2005100610/15A RU2293988C2 (ru) 2005-01-11 2005-01-11 Способ оценки чувствительности к интерферону у больных раком почки

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2005100610/15A RU2293988C2 (ru) 2005-01-11 2005-01-11 Способ оценки чувствительности к интерферону у больных раком почки

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2005100610A RU2005100610A (ru) 2005-09-10
RU2293988C2 true RU2293988C2 (ru) 2007-02-20

Family

ID=35847711

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2005100610/15A RU2293988C2 (ru) 2005-01-11 2005-01-11 Способ оценки чувствительности к интерферону у больных раком почки

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2293988C2 (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2437101C1 (ru) * 2010-07-13 2011-12-20 Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера Сибирского отделения РАМН Способ прогноза чувствительности к интерферону у больных почечно-клеточным раком
RU2480760C2 (ru) * 2011-08-04 2013-04-27 Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера Сибирского отделения РАМН Способ индивидуального подбора иммуноактивных препаратов при лечении инфекционно-воспалительных заболеваний

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2314123C2 (ru) * 2005-12-14 2008-01-10 ГУ научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера СО РАМН (РФ) Способ индивидуального подбора и коррекции лечебной дозы интерферона у больных раком почки

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5145773A (en) * 1989-05-25 1992-09-08 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Method to detect sensitivity to alpha-interferon therapy
RU2003334C1 (ru) * 1988-07-26 1993-11-30 Хем Рисерч, Инк, (US) Способ лечени больных с опухол ми
RU98105888A (ru) * 1998-03-30 2000-02-20 Р.Ю. Ариненко Способ выбора типа иммуномодулирующей терапии и определения прогноза исхода заболевания на основе анализа интерферонового статуса больного
RU2175769C2 (ru) * 1997-07-08 2001-11-10 Тузанкина Ирина Александровна Способ определения стадии патологического процесса в тестах оценки функциональной активности лимфоцитов
RU2181889C1 (ru) * 2000-12-05 2002-04-27 Ершов Феликс Иванович Способ определения чувствительности живого организма к цитокину
RU2216739C2 (ru) * 2001-12-20 2003-11-20 Владивостокский государственный медицинский университет Способ подбора иммунокорректора и прогнозирования эффективности иммунотерапии при урогенитальных инфекциях

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2159936C2 (ru) * 1998-03-30 2000-11-27 Ариненко Руслан Юрьевич Способ выбора типа иммуномодулирующей терапии и определения прогноза исхода заболевания на основе анализа интерферонового статуса больного

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2003334C1 (ru) * 1988-07-26 1993-11-30 Хем Рисерч, Инк, (US) Способ лечени больных с опухол ми
US5145773A (en) * 1989-05-25 1992-09-08 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Method to detect sensitivity to alpha-interferon therapy
RU2175769C2 (ru) * 1997-07-08 2001-11-10 Тузанкина Ирина Александровна Способ определения стадии патологического процесса в тестах оценки функциональной активности лимфоцитов
RU98105888A (ru) * 1998-03-30 2000-02-20 Р.Ю. Ариненко Способ выбора типа иммуномодулирующей терапии и определения прогноза исхода заболевания на основе анализа интерферонового статуса больного
RU2181889C1 (ru) * 2000-12-05 2002-04-27 Ершов Феликс Иванович Способ определения чувствительности живого организма к цитокину
RU2216739C2 (ru) * 2001-12-20 2003-11-20 Владивостокский государственный медицинский университет Способ подбора иммунокорректора и прогнозирования эффективности иммунотерапии при урогенитальных инфекциях

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2437101C1 (ru) * 2010-07-13 2011-12-20 Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера Сибирского отделения РАМН Способ прогноза чувствительности к интерферону у больных почечно-клеточным раком
RU2480760C2 (ru) * 2011-08-04 2013-04-27 Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера Сибирского отделения РАМН Способ индивидуального подбора иммуноактивных препаратов при лечении инфекционно-воспалительных заболеваний

Also Published As

Publication number Publication date
RU2005100610A (ru) 2005-09-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Itoh et al. Impact of immune response on outcomes in hepatocellular carcinoma: association with vascular formation
Sundström et al. Tumor-infiltrating mucosal-associated invariant T (MAIT) cells retain expression of cytotoxic effector molecules
Guilherme et al. Rheumatic heart disease: proinflammatory cytokines play a role in the progression and maintenance of valvular lesions
Mentula et al. Decreased HLA (human leucocyte antigen)-DR expression on peripheral blood monocytes predicts the development of organ failure in patients with acute pancreatitis
US10578619B2 (en) Methods and kits for identifying effector Treg cells
US10161936B2 (en) Method and kit for cytokine analysis from a human whole blood sample
Cabrera et al. Hepatocellular carcinoma immunopathogenesis: clinical evidence for global T cell defects and an immunomodulatory role for soluble CD25 (sCD25)
RU2293988C2 (ru) Способ оценки чувствительности к интерферону у больных раком почки
Jagodzinska et al. Analysis of circulating vascular endothelial growth factor and its soluble receptors in patients with different forms of chronic urticaria
JP2021523351A (ja) レンバチニブ及びpd−1アンタゴニストを含む組み合わせ療法のためのバイオマーカー
EP4184169A1 (en) Predicting responders to cyclophosphamide therapy
Kaneko et al. T-cell activation modified by parathyroid hormone (PTH) in patients with end-stage renal disease
RU2523418C1 (ru) Способ оценки нарушений клеточного иммунитета при воздействии фенола
RU2314123C2 (ru) Способ индивидуального подбора и коррекции лечебной дозы интерферона у больных раком почки
JPH11118792A (ja) マクロファージの分類方法、免疫性疾患等の検定方法及び免疫性疾患治療剤のスクリーニング方法
WO2013169913A1 (en) Predictors of patient response to interferon-a therapy
Liu et al. Circulating follicular T helper cells and humoral reactivity in rheumatic heart disease
RU2137137C1 (ru) Способ определения m.leprae у больных с регрессом заболевания
Li et al. Clinical significance and role of CXCL16 in anti-neutrophil cytoplasmic autoantibody-associated vasculitis
RU2498311C2 (ru) Способ оценки активности туберкулеза у детей и подростков
Heltberg et al. A study of some immunological variables in twins, discordant for multiple sclerosis
CN204989188U (zh) 评价机体免疫能力试剂盒
RU2480760C2 (ru) Способ индивидуального подбора иммуноактивных препаратов при лечении инфекционно-воспалительных заболеваний
CN118443940A (zh) Sp70在制备肺癌pd-1/pd-l1阻断治疗疗效预测试剂中的应用
RU2790962C1 (ru) Способ прогнозирования тяжелого течения геморрагической лихорадки с почечным синдромом на ранних этапах заболевания

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20070112