RU2271817C1 - Биотрансплантат и способ лечения легочной гипертензии - Google Patents
Биотрансплантат и способ лечения легочной гипертензии Download PDFInfo
- Publication number
- RU2271817C1 RU2271817C1 RU2004125091/15A RU2004125091A RU2271817C1 RU 2271817 C1 RU2271817 C1 RU 2271817C1 RU 2004125091/15 A RU2004125091/15 A RU 2004125091/15A RU 2004125091 A RU2004125091 A RU 2004125091A RU 2271817 C1 RU2271817 C1 RU 2271817C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- treatment
- cells
- biograft
- bone marrow
- fetal
- Prior art date
Links
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 title abstract description 8
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 title abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 23
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 10
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims abstract description 6
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims abstract description 4
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 claims abstract description 4
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 claims abstract description 3
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims description 21
- 208000002815 pulmonary hypertension Diseases 0.000 claims description 19
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 14
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 11
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 claims description 9
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 claims description 9
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 3
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 claims description 3
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical group O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 9
- 210000001147 pulmonary artery Anatomy 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 4
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 4
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 4
- 229940124549 vasodilator Drugs 0.000 description 4
- 239000003071 vasodilator agent Substances 0.000 description 4
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 3
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 208000028831 congenital heart disease Diseases 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 210000005246 left atrium Anatomy 0.000 description 3
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 3
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 3
- 210000003492 pulmonary vein Anatomy 0.000 description 3
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 3
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 2
- 208000002330 Congenital Heart Defects Diseases 0.000 description 2
- 208000003287 Eisenmenger Complex Diseases 0.000 description 2
- 208000020686 Eisenmenger syndrome Diseases 0.000 description 2
- 208000004248 Familial Primary Pulmonary Hypertension Diseases 0.000 description 2
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- 206010064911 Pulmonary arterial hypertension Diseases 0.000 description 2
- 206010047139 Vasoconstriction Diseases 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 229960001123 epoprostenol Drugs 0.000 description 2
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 2
- 208000018875 hypoxemia Diseases 0.000 description 2
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 2
- 230000036244 malformation Effects 0.000 description 2
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 2
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 2
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 201000008312 primary pulmonary hypertension Diseases 0.000 description 2
- 210000004003 subcutaneous fat Anatomy 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000025033 vasoconstriction Effects 0.000 description 2
- LSLYOANBFKQKPT-DIFFPNOSSA-N 5-[(1r)-1-hydroxy-2-[[(2r)-1-(4-hydroxyphenyl)propan-2-yl]amino]ethyl]benzene-1,3-diol Chemical compound C([C@@H](C)NC[C@H](O)C=1C=C(O)C=C(O)C=1)C1=CC=C(O)C=C1 LSLYOANBFKQKPT-DIFFPNOSSA-N 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000033116 Asbestos intoxication Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 229940127291 Calcium channel antagonist Drugs 0.000 description 1
- 206010008479 Chest Pain Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010056370 Congestive cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 201000010046 Dilated cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 102000002045 Endothelin Human genes 0.000 description 1
- 108050009340 Endothelin Proteins 0.000 description 1
- 229940118365 Endothelin receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000003956 Fibroblast growth factor 8 Human genes 0.000 description 1
- 108090000368 Fibroblast growth factor 8 Proteins 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010024119 Left ventricular failure Diseases 0.000 description 1
- 208000020128 Mitral stenosis Diseases 0.000 description 1
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 1
- 208000033766 Prolymphocytic Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000000924 Right ventricular hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 201000010001 Silicosis Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000005392 Spasm Diseases 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N albuterol Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(CO)=C1 NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002821 alveolar epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000003510 anti-fibrotic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940127218 antiplatelet drug Drugs 0.000 description 1
- 230000004872 arterial blood pressure Effects 0.000 description 1
- 208000037849 arterial hypertension Diseases 0.000 description 1
- 210000002565 arteriole Anatomy 0.000 description 1
- 206010003441 asbestosis Diseases 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 230000001746 atrial effect Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 1
- 229960003065 bosentan Drugs 0.000 description 1
- GJPICJJJRGTNOD-UHFFFAOYSA-N bosentan Chemical compound COC1=CC=CC=C1OC(C(=NC(=N1)C=2N=CC=CN=2)OCCO)=C1NS(=O)(=O)C1=CC=C(C(C)(C)C)C=C1 GJPICJJJRGTNOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124630 bronchodilator Drugs 0.000 description 1
- 239000000168 bronchodilator agent Substances 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 229940097217 cardiac glycoside Drugs 0.000 description 1
- 239000002368 cardiac glycoside Substances 0.000 description 1
- 235000019994 cava Nutrition 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 229940030606 diuretics Drugs 0.000 description 1
- 210000003017 ductus arteriosus Anatomy 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 238000013156 embolectomy Methods 0.000 description 1
- 238000013171 endarterectomy Methods 0.000 description 1
- 239000002308 endothelin receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- ZUBDGKVDJUIMQQ-UBFCDGJISA-N endothelin-1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]2CSSC[C@@H](C(N[C@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2)=O)NC(=O)[C@@H](CO)NC(=O)[C@H](N)CSSC1)C1=CNC=N1 ZUBDGKVDJUIMQQ-UBFCDGJISA-N 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- KAQKFAOMNZTLHT-VVUHWYTRSA-N epoprostenol Chemical compound O1C(=CCCCC(O)=O)C[C@@H]2[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)[C@H](O)C[C@@H]21 KAQKFAOMNZTLHT-VVUHWYTRSA-N 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 229960001022 fenoterol Drugs 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 108010071644 fragmentin Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008696 hypoxemic pulmonary vasoconstriction Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 230000008069 intimal proliferation Effects 0.000 description 1
- 229960001888 ipratropium Drugs 0.000 description 1
- OEXHQOGQTVQTAT-JRNQLAHRSA-N ipratropium Chemical compound O([C@H]1C[C@H]2CC[C@@H](C1)[N@@+]2(C)C(C)C)C(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 OEXHQOGQTVQTAT-JRNQLAHRSA-N 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 229940127215 low-molecular weight heparin Drugs 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 208000006887 mitral valve stenosis Diseases 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000008289 pathophysiological mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 210000004976 peripheral blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000106 platelet aggregation inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 150000003815 prostacyclins Chemical class 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 210000005245 right atrium Anatomy 0.000 description 1
- 229960002052 salbutamol Drugs 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000002784 sclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 229960002578 sitaxentan Drugs 0.000 description 1
- PHWXUGHIIBDVKD-UHFFFAOYSA-N sitaxentan Chemical compound CC1=NOC(NS(=O)(=O)C2=C(SC=C2)C(=O)CC=2C(=CC=3OCOC=3C=2)C)=C1Cl PHWXUGHIIBDVKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 229930002534 steroid glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000008143 steroidal glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000000304 vasodilatating effect Effects 0.000 description 1
- 201000003130 ventricular septal defect Diseases 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и биофармакологии. Биотрансплантат для лечения легочной гипертензии содержит мезенхимальные стволовые клетки (МСК), полученные из фетального, донорского или аутологичного материала, при этом ткань дезагрегируют, полученную клеточную суспензию ресуспендируют и культивируют на ростовой среде, содержащей трансферин, инсулин, фактор роста фибробластов и гепарин до накопления в культуре клеток зрелой стромы. Способ лечения легочной гипертензии заключается во внутривенном капельном введении МСК от 50 до 500 млн в 50-100 мл физиологического раствора. Изобретение обеспечивает повышение эффективности лечения без нежелательных эффектов. 2 н. и 4 з.п. ф-лы.
Description
Изобретение касается получения культуры генетически немодифицированных мезенхимальных стволовых клеток и метода лечения легочной гипертензии (ЛГ).
Легочная гипертензия - это патологический синдром, вызванный увеличением среднего АД в легочной артерии более 20 мм рт.ст. в покое и более 30 мм рт.ст. при нагрузке. Легочная гипертензия по частоте занимает третье место среди сердечно-сосудистой патологии у лиц старше 50 лет (после ИБС и артериальной гипертензии).
Легочная гипертензия может быть как приобретенной (вторичной), так и врожденной (первичной).
Причинами повышения давления в легочной артерии могут быть заболевания сердца (врожденные и приобретенные пороки, сердечная недостаточность), хронические заболевания легких (ХОБЛ, бронхиальная астма, интерстициальный фиброз легких, саркоидоз, асбестоз, силикоз, туберкулез), васкулиты, пребывание в высокогорной местности, ТЭЛА, воздействие ЛС.
Когда причину легочной гипертензии выявить не удается, говорят о первичной легочной гипертензии.
При клапанных пороках возникает пассивная легочная гипертензия в результате передачи давления из левого предсердия на легочные вены, а затем на систему легочной артерии. При стенозе митрального отверстия в ряде случаев возникает рефлекторный спазм артериол легких из-за повышения давления в устьях легочных вен и в левом предсердии (рефлекс Эйлера-Лилиестрандта). При длительно существующей легочной гипертензии формируются необратимые органические склеротические изменения атериол с их облитерацией.
При врожденных пороках сердца легочная гипертензия возникает в результате увеличения кровотока в системе легочной артерии и увеличения сопротивления кровотоку в легочных сосудах. При ИБС, дилятационной кардиомиопатии, гипертонической болезни возникающая левожелудочковая недостаточность также приводит к легочной гипертензии в результате повышения давления в левом предсердии и легочных венах.
При хронических заболеваниях органов дыхания легочная гипертензия длительное время носит компенсаторный характер, так как гипоксическая легочная вазоконстрикция (рефлекс Эйлера-Лилиестрандта) выключает из перфузии невентилируемые участки легких, чем устраняет шунтирование в них крови, уменьшает гипоксемию. При прогрессировании заболевания легких легочная гипертензия в условиях гипоксемии (гипоксии миокарда) становится фактором патогенеза формирования хронического легочного сердца.
Лечение ЛГ должно быть этиотропным и комплексным. В первую очередь необходима коррекция основного заболевания, приведшего к развитию ЛГ. Так, при ХОЗЛ применяют антибиотики, бронходилататоры (сальбутамол, фенотерол, ипратропиум и др.), иногда глюкокортикостероиды. При митральных пороках необходима вальвулопластика или протезирование клапана. У больных с врожденными пороками сердца с увеличенным легочным кровотоком, особенно при дефекте межжелудочковой перегородки (мембранозной части), открытом артериальном протоке для предотвращения развития необратимых изменений в сосудах легких должна проводиться хирургическая коррекция в раннем возрасте (до года). При хронической ТЭЛА необходима ликвидация источника тромбов, своевременная операция по установке кава-фильтра.
Медикаментозное лечение ЛГ, в т.ч. первичной, направлено на основные патофизиологические механизмы ее формирования - вазоконстрикцию, пролиферацию интимы и нарушение свертывания крови.
В настоящее время из всех вазодилататоров наиболее эффективными и обоснованными считаются антагонисты кальция.
Мощным вазодилатирующим действием обладают простагландины (E1 и простациклин).
В клинической практике применяются также аналоги простациклина - эпопростенол и илопростенол. Первый назначается внутривенно, второй - ингаляционно в виде аэрозоля. Опыт лечения ЛГ этими препаратами невелик, стоимость очень высока.
В комплексной терапии ЛГ широко применяют антикоагулянты и антиагреганты.
Альтернативой непрямым антикоагулянтам являются низкомолекулярные гепарины (фраксипарин, клексан, фрагмин).
Известно, что основным сосудорасширяющим веществом в организме является вырабатываемый эндотелием оксид азота (NO). В настоящее время ведутся активные исследования возможности ингаляционного применения NO для лечения ЛГ. Препарат используют при остром респираторном дистресс-синдроме, эмболии ЛА, первичной и вторичной ЛГ.
Ингаляции NO используют как для оценки реактивности сосудов легких в острой пробе, так и для длительного лечения ЛГ. Значительный опыт пока не накоплен. Рассматривается возможность амбулаторного применения ингаляций NO.
Делаются попытки применения для лечения ЛГ антагонистов рецепторов эндотелина (босентан, ситаксентан), т.к. известно, что эндотелин вызывает легочную и системную вазоконстрикцию с развитием ЛГ и гипертрофии правого желудочка сердца. Об их положительном действии при ЛГ имеются единичные сообщения.
При выраженных признаках сердечной недостаточности кроме вазодилататоров используют диуретики. Эффективность сердечных гликозидов при лечении ЛГ не доказана.
Хирургическое лечение при симптоматической ЛГ показано у больных с приобретенными пороками сердца. Для профилактики развития необратимых изменений в сосудах легких при врожденных пороках (дефект межжелудочковой перегородки и открытый артериальный проток) коррекция должна быть проведена в первый год жизни. При постэмболической ЛГ проводят эмболэктомию и эндартерэктомию, которые позволяют увеличить выживаемость и улучшить качество жизни больных. В случае неэффективности медикаментозного лечения у больных с высокой ЛГ и необратимыми изменениями в легких (ПЛГ, врожденные пороки в фазе синдрома Эйзенменгера) проводят трансплантацию комплекса "сердце-легкие" или трансплантацию одного или обоих легких. Эти методы хирургического лечения ЛГ не получили широкого распространения из-за ограниченного числа доноров, а также недостатка хирургических стационаров, где возможны также операции. Не обеспечивается в должной мере последующее наблюдение этих больных. С середины 90-х годов XX столетия изучается возможность проведения у больных ПЛГ предсердной септостомии при помощи эндоваскулярной балонной технологии в тех случаях, когда больные резистентны к терапии вазодилататорами [Коноплева Л.Ф., 2001].
Прогноз при ЛГ зависит от характера и стадии основного заболевания, степени повышения давления в ЛА, обратимости изменений сосудов малого круга. Наиболее тяжелый прогноз для больных с сосудистыми формами ЛГ (ПЛГ, синдром Эйзенменгера). Ухудшение прогноза наблюдается при повышении давления в правом предсердии, снижении сердечного выброса. Пятилетняя смертность больных с хроническими заболеваниями легких при среднем давлении в легочной артерии 25 мм рт.ст. составляет 10-15%, а при 30-45 мм рт.ст. - 60%. При первичной легочной гипертензии пятилетняя выживаемость больных составляет 22-38% [Мухин Н.А. et al., 2003].
Таким образом, отсутствие возможности терапевтической коррекции большинства заболеваний, вызывающих легочную гипертензию, невозможность в ряде случаев проводить хирургическое лечение, дефицит донорских органов, высокая смертность заставляют искать альтернативные способы лечения легочной гипертензии.
Возможность использования мезенхимальных стволовых клеток (МСК) для лечения ЛГ обусловлена, в первую очередь, возможностью МСК трансдифференцироваться в альвеолярный эпителий. Являясь уникальной "фабрикой" цитокинов и факторов роста, донорские МСК обеспечивают активизацию собственных резервов организма. Способность МСК стимулировать неоангиогенез, а также их антифибротическое действие являются основным звеном патогенетического лечения легочной гипертензии.
Мезенхимальные стволовые клетки, в основном, получают из донорского костного мозга, однако существуют и другие источники - скелетные мышцы, подкожная жировая ткань, фетальные органы гемопоэза (печень, тимус, селезенка). МСК из фетальных органов гемопоэза и методики их получения практически не изучены. Описанные методики выращивания МСК из костного мозга и липоаспиратов позволяют получить гетерогенные популяции клеток стромы, лишь небольшой процент которых являются стволовыми. Клетки зрелой стромы не обладают свойством дифференцироваться в различные клеточные линии и, таким образом, терапевтически неэффективны. После трансплантации стромальные клетки мигрируют преимущественно в соединительную ткань и там накапливаются. При стандартном пассировании в высоких посевных дозах доля зрелых стромальных клеток быстро увеличивается.
Использование в качестве трансплантата гомогенной (не менее 80%) популяции плюрипотентных МСК позволяет повысить эффективность лечения, увеличить воспроизводимость результатов и избежать нежелательных эффектов.
Большинство исследователей предпочитают аутогенные клетки (костный мозг, клетки периферической крови). Преимущества аутотрансплантатов не вызывают сомнений, однако имеется ряд ограничений по их применению. В частности, длительность выращивания клеточных культур - более 2 месяцев, может являться критической для ряда пациентов; клетки, полученные от пожилых и тяжелобольных людей, обладают низкой способностью к пролиферации и самообновлению.
В сравнении с аутологичным клеточным трансплантационным материалом донорские (в том числе фетальные) клетки обладают рядом преимуществ:
фетальные клетки имеют больший потенциал роста и пролиферации, выраженную способность к дифференцировке и функционально более активны, продуцируют факторы роста и регенерации;
пересаженные фетальные клетки стимулируют ангиогенез;
фетальные клетки и ткани лучше переносят гипоксию и холодовую консервацию;
культуры донорских клеток могут быть приготовлены заранее и использоваться по первому требованию.
Задачами настоящего изобретения являются получение биотрансплантата для комплексного, патогенетического метода лечения легочной гипертензии, содержащего гомогенную, не менее 80%, популяцию плюрипотентных МСК, что позволяет повысить эффективность лечения, увеличить воспроизводимость результатов и избежать нежелательных эффектов.
Для решения поставленной задачи предложена группа изобретений, объединенных общим изобретательским замыслом.
Предложен биотрансплантат для лечения легочной гипертензии, представляющий собой гомогенную, не менее 80%, популяцию плюрипотентных мезенхимальных стволовых клеток (МСК), полученную из фетального, донорского или аутологичного материала, при этом ткань дезагрегируют, полученную клеточную суспензию ресуспендируют и культивируют на ростовой среде, содержащей трансферин, инсулин, фактор роста фибробластов и гепарин до накопления в культуре клеток зрелой стромы.
В качестве фетального материала используют ткани: костный мозг, тимус, печень, жировая ткань эмбрионов человека 1-го триместра беременности.
В качестве донорского материала используют ткани: костный мозг, тимус, печень, жировая ткань.
В качестве аутологичного материала используют ткани: костный мозг, жировая ткань.
Биотрансплантат предназначен для внутривенного введения.
Предложен также способ лечения легочной гипертензии, заключающийся в том, что пациенту внутривенно, капельно вводят биотрансплантат в количестве от 50 до 500 млн мезенхимальных стволовых клеток в 50-100 мл физиологического раствора со скоростью 10 мл/мин.
МСК выделяют из фетальных (костный мозг, тимус, печень, жировая ткань) или донорских (костный мозг, жировая ткань, тимус) тканей или аутологичного материала (костный мозг, жировая ткань). Для выделения фетальных клеток используют абортивный материал, полученный при искусственном прерывании беременности у здоровых женщин, предварительно обследованных на наличие вирусных и бактериальных инфекций.
Возможность использования биоматериала достигается на следующих сроках гестации: печень - 5-8 недель, тимус - 18-20 недель, костный мозг - 17-20 недель, подкожная жировая ткань - 17-19 недель. Если выделение клеток производится не из аспиратов (костный мозг, липоаспират), а из плотных тканей - например, тимуса, орган предварительно измельчают и ферментативно дезагрегируют. Суспензию фильтруют через мелкоячеистое сито из нержавеющей стали. Клеточную суспензию (аспират) разводят 1:1 солевым раствором Хэнкса, центрифугируют в режиме 1,500×g, 10 минут и ресуспендируют в ростовой среде DMEM/F12, содержащей 15% эмбриональной телячьей сыворотки, селектированной для выращивания клеток в низкой плотности, 2 мМ глутамина. Суспензию клеток высевают на пластиковые чашки Петри с диаметром 100 мм. Плотность посева первичной клеточной суспензии составляет 1-20 миллионов мононуклеарных клеток на 1 см2 в зависимости от источника выделения. Через 1 сутки неприкрепившиеся клетки удаляют, ростовую среду заменяют. Культуры инкубируют при 37°С в атмосфере 5% СО2. Через 6 дней наблюдают рост гетерогенных клеточных популяций. По достижении культурой 50% конфлуентности монослой трипсинизируют и пересевают на новые чашки с плотностью 10-30 клеток на 1 см2 в ростовой среде, дополнительно содержащей 10 мкг/мл трансферрина, 1 мкг/мл инсулина, 10 нг/мл фактора роста фибробластов - 2 и 8 ЕД/мл гепарина. Через 7-10 дней отбирают плотные колонии мелких клеток (диаметром 7-10 мкм) с большим количеством митозов. Отобранные колонии рассевают в новые чашки с плотностью 20 клеток/см2 и выращивают до состояния преконфлуентности. Замену среды производят через каждые 2 дня. Последующие пассажи производят в том же режиме. Увеличение посевной дозы или изменение состава ростовой среды приводят к быстрому накоплению в культуре клеток зрелой стромы. Экспериментально подобранные условия, объединяющие критерии отбора исходного материала и режим культивирования, являются оптимальными для достижения следующих результатов:
Режим культивирования и селективные культуральные среды позволяют при многократном пассировании максимально наращивать гомогенную клеточную культуру недифференцированных клеток;
Режим культивирования и селективные культуральные среды позволяют сохранить плюрипотентность клеточных культур;
Режим культивирования и селективные культуральные среды позволяют получить большое количество клеток для трансплантации (серию), что обеспечивает воспроизводимость результатов лечения.
Способ лечения базируется на экспериментально доказанном факте репаративного действия мезенхимальных стволовых клеток.
Трансплантацию осуществляют в условиях терапевтического или любого профильного отделения в присутствии врача-терапевта. Перед началом трансплантации осуществляют биологическая пробу. Раствор мезенхимальных стволовых клеток подключают к пациенту, струйно переливается 0,5 мл, после чего систему перекрывают. У реципиента выясняют жалобы на состояние, болевые ощущения, измеряют артериальное давление и подсчитывают пульс. Признаками биологической несовместимости являются: появление болей - в поясничной, эпигастральной областях, головных, загрудинных болей, чувства страха, наличие пота и отечности лица, снижение артериального давления, учащение пульса. Пробу повторяют три раза. При отрицательном результате приступают к трансплантации.
Культура мезенхимальных стволовых клеток разводится в 50 мл физиологического раствора, тщательно перемешивается, вводится внутривенно капельно со скоростью 10 мл/мин.
В течение 24 часов после трансплантации за пациентом необходимо наблюдение в терапевтическом отделении.
Claims (6)
1. Биотрансплантат для лечения легочной гипертензии, характеризующийся тем, что он представляет собой гомогенную не менее 80% популяцию плюрипотентных мезенхимальных стволовых клеток (МСК), полученную из фетального, донорского или аутологичного материала, при этом ткань дезагрегируют, полученную клеточную суспензию ресуспендируют и культивируют на ростовой среде, содержащей трансферрин, инсулин, фактор роста фибробластов и гепарин до накопления в культуре клеток зрелой стромы.
2. Биотрансплантат по п.1, в качестве фетального материала используют ткани: костный мозг, тимус, печень, жировая ткань эмбрионов человека 1-го триместра беременности.
3. Биотрансплантат по п.1, в качестве донорского материала используют ткани: костный мозг, тимус, печень, жировая ткань.
4. Биотрансплантат по п.1, в качестве аутологичного материала используют ткани: костный мозг, жировая ткань.
5. Биотрансплантат по п.1 предназначен для внутривенного введения.
6. Способ лечения легочной гипертензии, характеризующийся тем, что пациенту внутривенно капельно вводят биотрансплантат по п.1 в количестве от 50 до 500 млн. мезенхимальных стволовых клеток в 50-100 мл физиологического раствора со скоростью 10 мл/мин.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004125091/15A RU2271817C1 (ru) | 2004-08-18 | 2004-08-18 | Биотрансплантат и способ лечения легочной гипертензии |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004125091/15A RU2271817C1 (ru) | 2004-08-18 | 2004-08-18 | Биотрансплантат и способ лечения легочной гипертензии |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2271817C1 true RU2271817C1 (ru) | 2006-03-20 |
Family
ID=36117169
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2004125091/15A RU2271817C1 (ru) | 2004-08-18 | 2004-08-18 | Биотрансплантат и способ лечения легочной гипертензии |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2271817C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014037863A1 (en) * | 2012-09-04 | 2014-03-13 | Pluristem Ltd. | Methods for prevention and treatment of preeclampsia |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2039581C1 (ru) * | 1992-09-18 | 1995-07-20 | Московский областной научно-исследовательский клинический институт | Способ лечения гормонорезистентной бронхиальной астмы |
| RU2137484C1 (ru) * | 1993-12-14 | 1999-09-20 | Центр эмбриональных тканей "ЕмСелл" | Лекарственный препарат иммунозамещающего действия на основе клеточной суспензии и способ лечения синдрома приобретенного иммунодефицита (вич-инфекции) с использованием этого препарата |
| CA2457632A1 (en) * | 2001-08-15 | 2003-02-27 | Peter Maccallum Cancer Institute | Identification and isolation of somatic stem cells and uses thereof |
| RU2002122108A (ru) * | 2000-01-19 | 2004-03-27 | Юниверсити Оф Норт Каролина Эт Чепел Хилл (Us) | Способ обработки донорских тканей |
-
2004
- 2004-08-18 RU RU2004125091/15A patent/RU2271817C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2039581C1 (ru) * | 1992-09-18 | 1995-07-20 | Московский областной научно-исследовательский клинический институт | Способ лечения гормонорезистентной бронхиальной астмы |
| RU2137484C1 (ru) * | 1993-12-14 | 1999-09-20 | Центр эмбриональных тканей "ЕмСелл" | Лекарственный препарат иммунозамещающего действия на основе клеточной суспензии и способ лечения синдрома приобретенного иммунодефицита (вич-инфекции) с использованием этого препарата |
| RU2002122108A (ru) * | 2000-01-19 | 2004-03-27 | Юниверсити Оф Норт Каролина Эт Чепел Хилл (Us) | Способ обработки донорских тканей |
| CA2457632A1 (en) * | 2001-08-15 | 2003-02-27 | Peter Maccallum Cancer Institute | Identification and isolation of somatic stem cells and uses thereof |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Коноплева Л.Ф., "Легочная гипертензия. Диагностика и лечение", Ж. "Лечение и диагностика", 2004, №1. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014037863A1 (en) * | 2012-09-04 | 2014-03-13 | Pluristem Ltd. | Methods for prevention and treatment of preeclampsia |
| US9950014B2 (en) | 2012-09-04 | 2018-04-24 | Pluristem Ltd. | Methods for prevention and treatment of preeclampsia |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7658951B2 (en) | Method of improving cardiac function of a diseased heart | |
| US20050214259A1 (en) | Corneal endothelium-like sheet and method of constructing the same | |
| US8685724B2 (en) | In vitro techniques for use with stem cells | |
| CN107384857A (zh) | 自体脂肪间充质干细胞的培养方法和使用的培养基 | |
| KR100960173B1 (ko) | 인간 원종 줄기세포들을 자가 배양하기 위한 배지와 그의응용 | |
| CN108865986A (zh) | 用于修复关节软骨损伤/缺损的间充质干细胞制剂及其制备方法和应用 | |
| US20220347346A1 (en) | Mesenchymal stem cell sheet and use thereof | |
| CN112402458A (zh) | 一种间充质干细胞和外泌体联合制剂在制备心肌梗死药物中的应用 | |
| RU2271817C1 (ru) | Биотрансплантат и способ лечения легочной гипертензии | |
| CN107913290B (zh) | 一种复合细胞制剂、制备方法及其用途 | |
| CN108066750A (zh) | 干细胞及其分泌物用于治疗皮肤烧烫伤的新用途 | |
| US20220226390A1 (en) | Clinical-grade autologous bronchial basal cell, deliverable formulation, and preparation process | |
| RU2268061C1 (ru) | Биотрансплантат, способ его получения (варианты) и способ лечения ишемической болезни сердца | |
| RU2299073C1 (ru) | Биотрансплантат и способ лечения хронической сердечной недостаточности (варианты) | |
| EP4275703B1 (en) | Pd1 inhibitor for use for treating myocardial infarction by inhibition of cardiac fibroblast transdifferentiation | |
| CN108066824A (zh) | 一种制备表皮缺损治疗药物的新方法 | |
| RU2265442C1 (ru) | Биотрансплантат и способ лечения остеопороза | |
| RU2268062C1 (ru) | Биотрансплантат, способ его получения (варианты) и способ лечения дилятационной кардиомиопатии | |
| KR20230153161A (ko) | 호흡기 점막 재생을 위한 제형 | |
| RU2265443C1 (ru) | Биотрансплантат и способ лечения сахарного диабета i и ii типа (варианты) | |
| CN101151362B (zh) | 使用干细胞的体外技术 | |
| CN108057131A (zh) | 一种含有干细胞的新型试剂盒 | |
| CN111944749A (zh) | 一种用于治疗心肌梗死的人脂肪间充质干细胞外泌体的制备方法 | |
| RU2314816C2 (ru) | Биотрансплантат, содержащий ядросодержащие клетки костного мозга, в том числе преддифференцированные в эндотелиальном и кардиомиоцитарном направлении, способ его получения (варианты) и способ лечения сердечной недостаточности (варианты) | |
| CN116920069B (zh) | 一种中药提取液及其在促进脐带干细胞分泌vegf中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150819 |