RU2126798C1

RU2126798C1 - Производное сахарина или его фармацевтически приемлемая соль, фармацевтическая композиция для ингибирования протеолитических ферментов при лечении дегенеративных заболеваний

Info

Publication number: RU2126798C1
Application number: RU94017851/04A
Authority: RU
Inventors: Джон Ласта Деннис (US); Джон Ласта Деннис; Говард Акерман Джеймс (US); Говард Акерман Джеймс; Джозеф Мура Альберт (US); Джозеф Мура Альберт; Чиманлал Десай Ранджит (IN); Чиманлал Десай Ранджит
Original assignee: Санофи
Priority date: 1993-05-25
Filing date: 1994-05-24
Publication date: 1999-02-27
Also published as: CA2122886A1; AU6328094A; UA44682C2; HU9401571D0; MY129998A; NO941937D0; NZ260585A; JPH0770094A; FI942423A0; DE69432035D1; US5378720A; HUT70760A; EP0626378A1; AU685785B2; ATE231496T1; SK281020B6; KR100334345B1; IL109780A; NO302474B1; CZ289573B6

Abstract

Производное сахарина общей формулы I

где R₁ - низший алкил; R₂ - B = N-(CH₂)_pC(O)O(CH₂)_p, -O-, -O-(CH₂)_p-(5-((CH₂)_p), -B= N-2-фуранил), R - окси(низший)алкилокси, где B = N-ди(низший)алкиламино; R - фенил(низший)алкил; p и p' - цельные числа 1 или 2; R₃ - H; X - H или галоген; Y - группа -N= C(Z'')- или -N=C(R''')-N(R''')-, где группы R''' вместе с атомами углерода или азота, к которым они присоединены, обозначают группу -(CH₂)₄-, а группы Z'', объединенные с атомами углерода или атомами азота, к которым они присоединены, образуют пиридогруппу, или его фармацевтически приемлемая соль как ингибиторы протеолитических ферментов полезны при лечении дегенеративных расстройств, таких как эмфизема, ревматоидный артрит и панкреатит. 2 с. и 5 з.п. ф-лы, 5 табл.

Description

Изобретение относится к производным сахарина, которые ингибируют ферментативную активность протеолитических (расщепляющих белки) ферментов, способам их получения, способам их использования при лечении дегенеративных заболеваний и к содержащим их фармацевтическим композициям.

Ингибиторы протеолитических ферментов полезны при лечении дегенеративных расстройств, таких как эмфизема, ревматоидный артрит и панкреатит, существенным элементом которых является расщепление белков. Наиболее широко распространенным классом протеолитических белков являются серинпротеазы. Некоторые серинпротеазы можно охарактеризовать, основываясь на их специфичности по отношении к определенным субстратам, таким как химотрипсин-подобные или эластаза подобные. Химотрипсин и химотрипсинподобные ферменты обычно расщепляют пептидную связь в белке в месте, где аминокислотой со стороны карбонильной группы является Trp, Tyr, Phe, Met, Leu или другая аминокислотная, которая содержит ароматический фрагмент или большую боковую алкильную цепочку, Эластаза и эластаза подобные ферменты обычно расщепляют пептидную связь в место, где аминокислотным остатком с карбонильной стороны пептидной связи является Ala, Val, Ser, Leu или другие маленькие аминокислоты. Как химотрипсин подобные, так и эластаза подобные ферменты обнаруживаются в лейкоцитах, клетках молочной железы и секрециях поджелудочной железы и могут выделяться многими типами бактерий, дрожжей и паразитов.

Dunlap et al. в Международной заявке WO 90/13549 описывают серию 2-замещенных производных сахарина, полезных в качестве ингибиторов протеолитических ферментов.

Barber et al. в Патенте США 2855401 приводят соединение формулы

где с R₁ и R₂ каждый выбирают из атома водорода, низшего алкила или низшего гидроксиалкила;
n обозначает целое число от 5 до 9;
R₃ является группой, выбранной из метансульфонамидной группы, бензолсульфонамидной группы и о-сульфонбензимидной группы. Указывается, что эти соединения полезны при лечении бильгарциоза.

Brown et al. в Патенте США 3220940 сообщают об использовании кислых никелевых ванн соединения формулы

или его никелевой, натриевой, кобальтовой, калиевой, литиевой, магниевой и т.п. сульфонатных солей, где
A выбирают из группы, включающей бензольное, бифенильное и нафталиновое кольца,
R выбирают из группы, включающей атом водорода, гидроксил, атом хлора, брома, SO₃H и метил,
n является целым числом от 1 до 4 включительно,
n₁ равно 0 или 1, n₂ равно 0, 1 или 2, при этом, если n₂ равно нулю, то и n₁ равно нулю.

Sunket et al. в Европейском патенте 253092 описывают 2-сахаринил-(низший алкил)-1,4-дигидропиридин-3-карбоксилаты, которые препятствуют агрегированию тромбоцитов и обладают антитромботической активностью. Очень похожее описание может быть также найдено в Sunket et al., J.Med Chem., 1886-1890 (1988).

Mylvey et al. в Патенте США 4195023 приводят R₁-2-R₂CO-1,2-бензизотиазол-3-оны, где R₁ обозначает атом галогена, алкокси-группу, алкиламино-группу, диалкиламино-группу, алкоксикарбонильную группу, амино-группу, нитро-группу или атом водорода в бензеноидном кольца, а R₂ обозначает атом водорода, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, галогенфенил, гетероарил или замешенный гетероарил, R₁-2-A-CO сахарины, где R₁ имеет те же значения, что и заместители в бензеноидном кольце 1,2-бензизотиазол-3-онов, а A обозначает алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, фторфенил, гетероарил или замещенный гетероарил. Указывается, что описанные соединения обладают ингибирующей активностью по отношению к эластазе и полезны при лечении эмфиземы. Аналогичное описание может быть найдено в Патенте Франции 2321288.

Dunlap et al, в Европейской заявке на патент 483928 A1 раскрыты 4-R⁴-R⁵ 2-сахаринилметиларилкарбоксилаты и 4,5,6,7-тетрагидро-2-сахаринилметиларилкарбоксилаты, которые, как указывается, обладают ингибирующей активностью по отношению к ферменту протеазе и полезны при лечении дегенеративных болезней. Аналогичное описание может быть найдено в Патенте США 5128339 (авторы Dunlap et al.).

Jones et al. в Патенте США 4276298 приводят 2-R-1,2-бензизотиазолинон-1,1-диоксиды, где: R является фенилом, замещенным атомом фтора, динитро-группой, трифторметильной группой, циано-группой, алкоксикарбонильиой группой, алкилкарбонильной группой, карбоксильной группой, карбамоильной группой, алкилациламино-группой, алкилсульфонильной группой, N,N-диалкилсульфамоильной группой, трифторметокси-группой, трифторметилтио-группой, трифторметилсульфонильной группой и трифторметилсульфинильной группой или пиридилом, замещенным также как и R в том случае, когда R обозначает фенил, за исключением того, что пиридил может быть также мононитрозамещенным. Указывается, что эти соединения обладают ингибирующей активностью по отношению к ферменту протеазе и полезны при лечении эмфиземы, ревматоидного артрита и других воспалительных заболеваний.

В настоящем изобретении заявляется соединение, имеющее следующую структурную формулу:

где R₁ обозначает атом водорода, атом галогена, низший алкил, перфторзамещенный низший алкил, перхлорзамещенный низший алкил, низший алкенил, низший алкинил, цианогруппу, аминогруппу, низшую алкиламиногруппу, ди(низший алкил) аминогруппу, низшую алкоксигруппу, бензилоксигруппу, низшую алкоксикарбонильную группу или фенил;
R₂ обозначает от одного до трех заместителей по любому или во всех 5-, 6- или 7-, положениях выбранных из группы, включающей группу B=N-(CH₂)pC(O)O(CH₂)p'-O-, группу -O-(CH₂)p-(5-((CH₂)p'-B=N-2-фуранил) и R-окси(низший)алкилоксигруппу, где p и p' являются целыми числами от 1 до 4, R обозначает низший алкил, фенил или фенил(низший)алкил, при этом фенил может содержать от одного до трех заместителей, выбранных из группы, включающей низший алкил, B=N-карбонил, группу B=N, низшую алкоксигруппу, B=N-(низшую) алкоксигруппу и атом галогена, а B=N обозначает аминогруппу, низшую алкиламиногруппу, ди(низший)алкиламиногруппу, карбокси(низший)алкиламиногруппу. 1-пирролидинильную группу, 1-пиперидинильную группу, 1-азетидинильную группу, 4-морфолинильную группу, 1-пиреразинильную группу, 4-(низший)алкил-1-пиперазинильную группу, 4-бензил-1-пиперазинильную группу или 1-имидазолинильную группу;
R₃ обозначает атом водорода, низший алкил или фенил;
X обозначает атом водорода, нитрогруппу, атом галогена, низший алкил, перфторзамещенный низший алкил, перхлорзамещенный низший алкил, фенил, фенил(низший)алкил, феникарбонильную группу, пиридил(низший)алкил, формильную группу, низшую алканоильную группу, карбоксильную группу, низшую алкоксикарбонильную группу, аминокарбонильную группу, низшую алкиламинокарбонильную группу, ди(низший)алкиламинокарбонильную группу, цианогруппу, группу B=N', B=N-(низший) алкил, B=N-(низшую) алканоильную группу, B=N-(низшую)алкоксикарбонильную группу, гидроксильную группу, низшую алкоксигруппу, фенилоксигруппу, B=N-(низшую)алкоксигруппу, низшую алкилтиогруппу, фенилтиогруппу, низшую алкилсульфонильную группу, фенилсульфонильную группу или B= N-сульфонильную группу, при этом фенил является незамещенным или содержит от одного до трех заместителей, выбранных из группы, включающей низший алкил, низшую алкоксигруппу и атом галогена, а группа B=N имеет указанное выше значение;
-Y- обозначает остальные атомы моноциклической или бициклической, замещенной или незамещенной карбоциклической или гетероциклической кольцевой системы; или его фармацевтически приемлемая кислотно-аддитивная соль в том случае, если соединение имеет основную функциональную группу или его фармацевтически приемлемая основа - аддитивная соль, если соединение имеет кислотную функциональную группу.

В изобретении далее заявляется способ получения соединения формулы I, который заключается в конденсации соответствующего соединения, имеющего структурную формулу II:

где O обозначает атом хлора или орома,
с соответствующим соединением, имеющим структурную формулу III:

в присутствии основания или с соответствующей основной солью соединения формулы III.

Еще одной целью настоящего изобретения является фармацевтическая композиция для лечения дегенеративных заболеваний, которая содержит соединение формулы I с концентрацией, достаточной для ингибирования протеолитического фермента, в фармацевтическом носителе.

Наконец, еще одной целью настоящего изобретения является использование соединения формулы I в количестве, достаточном для ингибирования протеолитического фермента, в производстве лекарственного средства для лечения дегеративного заболевания у пациента, нуждающегося в подобном лечении.

Соединение формулы I ингибирует ферментативную активность протеолитических ферментов и полезно при лечении дегенеративных заболеваний.

Часть соединения формулы I, имеющая структурную формулу

ниже описывается далее формулой - Z. Аналогично соединение формулы III описывается далее формулой H-O-Z.

Сахарин является 1,2-бензизотиазол-(1H)-3-он-1,1-ди-оксидом; соединения формулы I, которые представляют собой 2-[Z-O-CH(R₃)]-4-R₁-(5,6 и/или 7)-R₂-1,2-бензизотиазол-(1H)-3-он-1,1-диоксидами, являются соответственной 2-[Z-O-CH(R₃]-4-R₁-(5,6 и/или 7)-R₂-сахаринами.

В соединениях по формулам I-III выражение "соответствующий" означает, что определяемая переменная в одной формуле имеет то же значение и в другой формуле.

Углеродная цепочка, представляющая часть указанных соединений, содержит от одного до десяти атомов углерода, преимущественно от одного до четырех атомов углерода и является разветвленной или неразветвленной в следующих группах - низший алкил, перфторзамещенный низший алкил, перхлорзамещенный низший алкил, низшая алкоксикарбонильная группа, низшая алкиламиногруппа, ди-(низшая)алкиламиногруппа, низшая алкоксигруппа, карбокси (низшая) алкиламиногруппа, 4-(низший алкил)-1-пиперазинильная группа, фенил(низший)алкил, пиридил(низший)алкил, низшая алкиламинокарбонильная группа, низшая алкилтиогруппа и карбокси (низшая) алкиламиногруппы.

В следующих группах часть указанных соединений, представляющая собой углеродную цепочку, содержит от двух до десяти атомов углерода, преимущественно от двух до четырех атомов углерода, и является разветвленной или неразветвленной: низший алкенил, низший алкинил, амино(низший)алкил, низшая алкоксильная часть группы: B=N-(низшая)алкоксикарбонильной группы, низшая алканоильная группа, B=N-(низший) алкил, B=N-(низшая)алканоильная группа и B= N-(низшая)алкоксикарбонильная группа. Галоген обозначает атом фтора, хлора, брома или иода.

В соединениях формулы I R₁ преимущественно обозначает первичный или вторичный алкил, имеющий от двух до четырех атомов углерода, или низшую алкоксигруппу, а R₂ преимущественно присоединяется по положению 6 и наиболее преимущественно является группой B= N-(CH₂)_pC(O)O(CH₂)_p'-O- или R-окси(низший)алкоксилом. Далее -Y- преимущественно обозначает группы -(CH₂)_m-, C=O)-, -(CH₂)_m-O-, CHR-O-, -CR₂-O-, -C[(CH₂)_n]-O-, -C[CH₂CH₂N(R)CH₂CH₂]_c-O-,
-(CH₂)_m-N(R')-, CHR-N(R')-, -CR₂-N(R')-, -C(R')=(R')-O-, -C(R')=(R')-N(R'), -C(=O)-C(R'')=C(R'')-, -C(Z')=C(Z')-, -C(Z')=-C(Z')-O-, -C(Z')=C(Z')-N(R')-, -N(Z'')-C (Z'')=N-, -N=C(Z'')-N-(Z'')-, C(Z'')=C(Z'')-S-, N=C(R'')-NC(R'')- или -C(R''''=C(L)-N(L),
где группы: Z^'', совместно с атомами углерода, к которым они присоединяются, обозначают бензогруппу;
группы R''' вместе с атомами углерода или атомами азота, к которым они присоединены, обозначают группы -(C₂)_n'-, -(CH₂)_qN(R^*) (CH₂)_q' или тиазологруппу, группы L вместе с атомами углерода или атомами азота, к которым они присоединены, обозначают пиридогруппу; n₁ - целое число от 3 до 5; R^* обозначает атом водорода, фенил, фенил(низший)алкил или низший алкил; q равно 1 или 2, q¹ равно 1 или 2; R'''' обозначает атом водорода, цианогруппу, группы CO₂L' SO₂L'' или нитрогруппу; L' обозначает атом водорода, низший алкил или ди(низшую)алкиламиногруппу, L'' обозначает атом водорода, низшую алкоксигруппу, или ди(низшую)алкиламиногруппу или трифторметильную группу; m равно 1, 2, 3 или 4; n равно 3, 4 или 5, R обозначает тот же или отличный низший алкил, фенил или фенил(низший)алкил; R' обозначает атом водорода или группу R, R'' обозначает атом водорода или группу R или же группа R'' объединена с атомом углерода, к которому она присоединена, с образованием фураногруппы,
группы Z' объединены с атомами углерода, к которому они присоединены, и образуют бензогруппу, фураногруппу, пиридогруппу, пиримидиногруппу или пиридазино-группу и
Z'' объединены с атомом углерода или атомом азота, к которому они присоединены, и образуют пиридо-группу, пиримидиногруппу или пиридазиногруппу, в которых фенил, бензогруппа, фураногруппа, пиридогруппа, пиримидиногруппа или пиридазиногруппа могут содержать от одного до трех заместителей, выбранных из группы, включающей низший алкил, B=N -карбонильную группу, группу B=N, низшую алкокси-группу, B=N-(низшую)алкоксигруппу и атом галогена, при этом значение группы В= указано выше.

Предпочтительными соединениями по настоящему изобретению являются, в частности, такие, в которых n' равно 4, R^* обозначает атом водорода; q равно 1; q' равно 2; R'''' обозначает атом водорода, цианогруппу, группу CO₂L' или SO₂L''; L' является низшим алкилом, L'' является ди(низшей)алкиламиногруппой, в частности, если R₁ является низшим алкилом; R₂ является группой ди(низший)алкиламино-(CH₂)^pC(O)O(CH₂)_p'-O- или фенил (низшей) алкилокси(низшей)алкоксигруппой; R₃ обозначает атом водорода, а X является атомом водорода, атомом галогена, низшим алкилом, фенилом, фенил (низшим) алкилом, фенилкарбонильной группой, группой B=N, B=N-(низшим) алкилом, фенилоксигруппой или низшей алкоксикарбонильной группой.

Наиболее предпочтительными соединениями являются такие, в котором, R₁ обозначает изо-пропильную группу; R₂ является группой 6-диметилаглино-CH₂(C(O)O(CH₂)₂-O- или 6-бензилоксиэтоксигруппой, а X является атомом водорода, в частности такие, в которых Z обозначает одну, из следующих структурных формул

При получении соединения формулы I из соответствующего соединения формулы I и соответствующего соединения формулы III в присутствии основания последнее может быть любым основанием, которое само не вступает в реакцию в условиях ее проведения и предпочтительно является гидридом щелочного металла, карбонатом щелочного металла, алкоксидом щелочного металла, три(низшим)алкиламином, талловым низшим алкоксидом, 1,8-диазабицикло 5,4,0 кндец-7-еном или 7-метил-1,5,7-триазабицикло 4,4,0 дец-5-еном. В условиях проведения реакции основание может образовывать соль с соединением формулы III, которая вступает во взаимодействие с соединением формулы II.

Основная соль соединения формулы III может быть также получена отдельно, а затем конденсироваться с соединением формулы II и предпочтительно является солью щелочного металла, в частности цезия, или талловой солью. Реакцию конденсации проводят в органическом растворителе или смеси органических растворителей, которые являются инертными в условиях реакции, например, в ацетоне, метилэтилкетоне, ацетонитриле, тетрагидрофуране, диэтиловом эфире, диметилформамиде, N-метилпирролидоне, дихлорметана, ксилоле, толуоле или низшем алканоле или смеси указанных растворителей, в интервале от комнатной температуры до температуры кипения растворителя или смеси растворителей.

Соединения формулы II и формулы III известны или могут быть получены известными способами, описанными ниже.

Соединение формулы II, в котором R₃ обозначает атом водорода, можно получить диазотированием соответствующего (низший) алкил 2-амино-3,4 или 5-R₂-6-R₁-бензоатного эфира, хлорсульфонилированием полученной 2-диазонивой соли (низший)алкил 3,4 или 5-P₂-6-R₁-бензоатного эфира диоксидом серы в присутствии хлорида меди (II) и циклизацией полученного (низший)алкилового эфира 2-хлорсульфонил-3, 4 или 5-R₂-6-R₁-бензоата аммиаком с образованием соответствующего соединения, имеющего структурную формулу IV:

гидроксиметилированием которого с помощью формальдегида можно получить соответствующий 2-гидроксиметил -4-R₁-(5,6 или 7)-R₂-сахарин, замещением гидроксильной группы в котором хлором или бромом, используя, например, хлористый тионил, бромистый тионил, треххлористый фосфор или трехбромистый фосфор, можно получить соответствующее соединение формулы II.

Соединение формулы II, в котором R₃ обозначает атом водорода, а Q обозначает атом хлора, можно получить в одну стадию из соответствующего соединения формулы IV хлорметилированием формальдегидом и хлортриметилсиланом в присутствии кислоты Льюса, например, хлорида олова.

Соединение формулы II, в котором R₃ обозначает низший алкил, а Q обозначает атом хлора, можно получить винилированием соответствующего соединения формулы IV соответствующим замещенным или незамещенным виниловым эфиром или низшей алкановой кислотой в присутствии динатриевой соли тетрахлорида палладия, обрабатывая затем полученны 2-(замещенный или незамещенный винил)-4-R₁-(5,6 или 7)-R₂-сахарин хлористым водородом. Используя, например, незамещенный винилацетат, можно получить соответствующее соединение формулы II, в котором R₃ - обозначает метил.

Соединение формулы II, в котором R₃ обозначает атом водорода или фенил, можно получить по реакции фенилтио-R₃-метилирования соответствующего соединения формулы IV или его основной соли с соответствующим фенил-R₃- хлорметилсульфидом с образованием соответствующего 2-(фенилтио-R₃-метил)-4-R₁-(5, 6 или 7)-R₂-сахарина с последующим замещением фенилтио-группы в нем на атом хлора или брома, используя, например, хлористый сульфурил или бромистый сульфурил.

Соединение формулы IV можно получить обработкой соответствующего 2-R₁-3, 4 или 5-R₂-N, N-ди(низший)алкилбензамида низшим алкиллитием и аминосульфонилированием полученного 2-R₁-3, 4 или 5-R₂-литий-N,N-ди(низший)алкилбензамида диоксидом серы, с последующей обработкой гидроксиламин-O-сульфоновой кислотой или хлористым сульфурилом и аммифком, а затем циклизуя полученный 2-R₁-3, 4 или 5-R₂-3, 4 или 5-R₂-6-аминосульфонил-N,N-ди(низший)алкилбензамид кипячением с обратным холодильником в уксусной кислоте.

Соединение формулы IV, в котором R₁ обозначает первичный или вторичный алкил, содержащий от двух до четырех атомов углерода, может быть получено металлированием соответствующего соединения формулы IV, в котором R₁ обозначает метил, двумя молярными эквивалентами низшего алкиллития в инертном растворителе, например, в тетрагидрофуране, и алкированием полученного 4-литийметил-5, 6 или 7-R₂-сахарина подходящим галоидным алкилом. Обе указанные реакции проводят в интервале температур от -80^oC до -50^oC. Приведенный выше 2-R₁-3, 4 или 5-R₂-N,N-ди (низший)алкилбензамид, в котором R₁ обозначает первичный или вторичный алкил, имеющий от двух до четырех атомов углерода, может быть получен по аналогичной последовательности превращений металлирование-алкилирование, начиная с соответствующего 2-метил, этил или пропил-3, 4 или 5-R₂-N,N-ди(низший) алкилбензамида.

Соединение формулы IV, в котором R₁ обозначает первичный или вторичный алкил, содержащий от двух до четырех атомов углерода, может быть также получено введением группы R₁ на более ранних стадиях синтеза. Сопряженным присоединением соответствующего R₁-купрата к 2-циклогексанону и последующим метоксикарбонилированием полученного енолята меди с помощью метилцианоформиата по методу Winkler et al., (Tetrapedron Letters, p. 1051, 1987; Journal of Organic Chemistry, Vol. 54, р. 4491, 1989) получают соответствующий 2-метоксикарбонил-3-R₁-циклогексанон, енольной этерификацией которого бензилтиолом в присутствии кислой глины получают смесь соответствующих метилового эфира 6-R₁-2-бензилтио-1-циклогексенкарбоновой кислоты и метилового эфира 6-R₁-2-бензилитио-3-циклогексенкарбоновой кислоты, ароматизация которых дихлордицианобенхохиноном позволяет получить соответствующий метиловый эфир 2-R₁-6-бензилтиобензойной кислоты; последовательным окислением-хлорированием-дебензилированием полученного соединения хлором в водной уксусной кислоте получают метиловый эфир 2-R₁-6-хлорсульфонбензойной кислоты, циклизацией которой с помощью аммиака получают соответствующий 4R₁-сахарин формулы IV.

Приготовление некоторых соединений формулы IV требует связывания обоих колец. Например, для получения соединения формулы IV, в котором R₁ является низшей алкоксигруппой, а R₂ является гидроксилом, 3,3-тиобиспропионовую кислоту с помощью хлористого тионила переводят в бис-хлорангидрид кислоты, который далее с помощью бензиламина переводят в бис-бензиламид, циклизация которого с помощью хлористого сульфурила позволяет получить 5-хлор-2-бензил-2H-изотиазол-3-он. Окислением с помощью одного молярного эквивалента надкислоты получают 5-хлор-2-бензил-2H-изотиазол-3-он-1-оксид, нагреванием которого под давлением вместе с 2-(низшим)алкоксифураном получают 4-(низший)алкокси-7-гидрокси-2-бензил-1,2-бензоизотиазол-2H-3-он-1- оксид, а окислением одним молярным эквивалентом надкислоты получают соответствующий 4-(низший)алкокси-7-гидрокси-2-бензил-1,2-бензоизотиазол-2H-3-он-1-ди- оксид. С помощью каталитического гидрирования затем получают соответствующий 4-(низший)алкокси-7-гидроксисахарин формулы IV.

Аналогично алкилированием полученного указанным способом 4-(низший)алкокси-7-гидрокси-2-бензил-2-бензил-1,2-бензоизотиазол- 2H-3-он-1-оксида низшим галоидным алкилом или подходящим замещенным низшим галоидным алкилом с последующим окислением и дебензилированием получают соответствующий 4-(низший)алкокси-R₂-сахарил формулы IV, в котором R₂ является низшей алкоксигруппой, циклоалкоксигруппой, B=N-(низшей) алкоксигруппой, гидрокси (низшей) алкоксигруппой, полигидрокси (низшей) алкоксигруппой или ее ацеталем или кеталем, (низшей)алкокси(низшей) алкоксигруппой, поли(низшей)алкокси (низшей)алкоксигруппой, гидроксиполи(низшей)алкиленоксигруппой или (низшей)алкоксиноли(низшей)алкиленоксигруппой.

Простые химические превращения, которые являются обычными и хорошо известным специалистам в области химии, могут быть осуществлены для проведения изменений в функциональных группах соединений по настоящему изобретению. Например, каталитическим восстановлением гетероциклической системы с образованием соответствующей частично насыщенной гетероциклической системы, каталитическим дебензилированием бензиловых эфиров с образованием соответствующих спиртов, конденсацией спиртов с кислотами в присутствии конденсирующего агента с образованием соответствующих эфиров, десилилированием силиловых эфиров с образованием соответствующих спиртов.

Фармацевтически приемлемой кислотно- или основно-аддитивной солью может быть любая фармацевтически приемлемая кислотно- или основно-аддитивная, однако предпочтительно она содержит простой анион, например, является гидрохлоридной солью, или катион, например, является натриевой или калиевой солью, соответственно. Если соль, содержащая простой анион или катион, неприемлема, поскольку не является кристаллической или не обладает достаточной растворимостью или гигроскопичностью, то можно использовать соль со сложным анионом, например, метансульфонат, или сложным катионом, например, диэтиламмониевую соль, соответственно. В любом случае при использовании для лечения человека кислотно- или основно-аддитивная соль должна быть нетоксичной и не должна препятствовать ингибирующему воздействию на эластазу свободной основной или кислотной формы соединения формулы I.

В приводимых ниже способах получения и примерах продукты получены исходя из известных используемых материалов и ожидаемых путей протекания реакций в процессе синтеза. Очистка или чистота и подтверждение структуры исходных соединений и продуктов реакций проводили или измеряли путем измерения интервала температуры плавления, оптического вращения, элементным анализом, инфракрасным спектральным анализом, ультрафиолетовым спектральным анализом, масс-спектральным анализом, спектроскопией ядерного магнитного резонанса, газовой хроматографией, колоночной хроматографией, жидкостной хроматографией высокого давления, жидкостной хроматографией среднего давления и/или тонкослойной хроматографией.

Изобретение далее поясняется следующими примерами, которые ни в коем случае не ограничивают настоящее изобретение.

Пример 1.

Получение исходных соединений
а) Получение 2-хлорметил-4-изо-пропилсахарина
(II, R₁ = i -Pr, R₂ = H, R₃ = H, Q = C1) н-Бутиллитий (2,5 М, 10 мл) добавляют в течение 10 мин при перемешивании в токе азота при температуре 0-5^oC к раствору 2-изо-пропилбромбензола в безводном эфире (500 мл). Дают смеси нагреться до комнатной температуры, перемешивают при комнатной температуре в течение шести часов и охлаждают до -60^oC. В течение 20 мин, поддерживая температуру не выше -50^oC добавляют раствор диэтилкарбамилхлорида (34 г) в безводном эфире (50 мл). В течение одного часа дают температуре смеси подняться до комнатной. Добавляют воду (100 мл). Эфирный слой отделяют, промывают насыщенным водным раствором соли (200 мл), сушат над сульфатом магния и эфир отгоняют. Остаток перегоняют (80-90^o/0,1 мм рт.ст.) и получают 2-изопропил- N,N-диэтилбензамид (44 г, выход 80%).

К раствору N, N, N', N'-тетраметилэтилендиамина (25,5 г) в безводном эфире (600 мл) добавляют S-бутиллитий (1,3 М, 170 мл) и смеси охлаждают в токе азота до -70^oC. По каплям добавляют раствор 2-изо-пропил-N,N-диэтилбензамида (44 г) в безводном эфире (300 мл) в течение 20 мин. В процессе прикапывания поддерживают температуру на уровне -60^oC или ниже. По завершении указанной операции смесь перемешивают при температуре -70^oC в течение 30 мин, затем в течение 30 мин дают нагреться до температуры -50^oC, выдерживают при этой температуре в течение 10 мин и вновь охлаждают до -70^oC. При помощи избыточного давления азота в течение 10 минут подают через трубку предварительно охлажденный до -60^oC раствор диоксида серы (50 г) в безводном эфире (50 мл). Температуру реакционной смеси в процессе добавления поддерживают на уровне -50^oC. Практически мгновенно выпадает белый порошкообразный осадок сульфината ариллития. Дают температуре в течение часа подняться до комнатной температуры. По каплям в течение 15 мин при непрерывном перемешивании добавляют хлористый сульфурил (54 г). Перемешивают при - 0-5^oC еще в течение 30 минут, белый осадок отфильтровывают и промывают безводным эфиром (2л). Растворитель удаляют в вакууме и получают бледно-желтое масло, которое растворяют в тетрагидрофуране (150 мл). Полученный раствор охлаждают до 0^oC и порциями в течение 15 минут порциями добавляют концентрированный водный раствор аммиака (28%, 60 мл). В течение этой операции поддерживают температуру не выше 10^oC. После перемешивания в течение 15 мин при комнатной температуре тетрагидрофуран и избыток аммиака удаляют, а остаток подкисляют соляной кислотой (2N раствор) до pH 1. Полученное твердое вещество белого цвета отделяют, промывают водой (200 мл) и гексаном (200 мл) и сушат, получая 2-аминосульфонил-6,-изо-пропил-N,N-диэтилбензамид (54 г, выход 90%).

Раствор 2-аминосульфонил-6, -изо-пропил-N, N-диэтилбензамида (60 г) в уксусной кислоте (400 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 24 ч, а затем охлаждают до комнатной температуры. Растворитель удаляют в вакууме. Маслянистый остаток растворяют в воде (500 мл) и доводят pH до 1 с помощью 2 раствора соляной кислоты. Сырой продукт отделяют фильтрованием, промывают водой (300 мл), сушат в вакууме при 60^oC в течение 18 ч и перекристаллизовывают из смеси эфир - гексан, получая 4-изо-пропилсахарин (40 г, выход 90%, т.пл. 177^oC). (IV; R₁ = i - Pr; R₂ = H).

Смесь 4-изо-пропилсахарина (37,9 г), фенилхлорметилсульфида (33,3 г), тетрабутиламмонийбромида (5,4 г) и толуола (200 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 24 ч, а затем летучие вещества отгоняют, колоночной хроматографией на силикагеле (485 г), элюируя вначале гексаном, затем смесью гексан-дихлорметан (1:1), а затем дихлорметаном получают из гексан-дихлорметанового элюита 2-фенилтиометил-4-изопропилсахарин в виде масла бледно-желтого цвета (53,5 г, выход 92%).

2-фенилтиометил-4-изопропилсахарин (53,5 г), хлористый сульфурил (40 мл, 67,2 г) и дихлорметан (250 мл) смешивают при комнатной температуре. Начинается слабая экзотермическая реакция и смесь оставляют при комнатной температуре на 17 ч, а затем летучие вещества отгоняют. Остаток перекристаллизовывают из гексана и получают три порции (33,55 г, Т.пл. 101-102^oC; 3,45 г. Т. пл. 100-101^oC; 0,45 г, Т.пл. 99-100^oC; всего 38,55 г, выход 91%). Все три порции объединяют и перекристаллизовывают из смеси изо-пропиловый спирт (30 мл)-гексан (270 мл) и получают 2-хлорметил-4-изо-пропилсахарил в виде двух порций (33,5 г. Т.пл. 101-102,5^oC; 2,65 г, Т.пл. 100-101^oC).

б) Получение 2-хлорметил-4-изо-пропил-6-метоксисахарина
(II, R₁ = i -Pr, R₂ = 6-OMe, R₃ = H, Q = C1)
К раствору N, N, N', N'-тетраметилэтилендиамина (300 мл) в безводном эфире (4 л) добавляют втор-бутиллитий (1,3 М раствор, 4 л) и смесь охлаждают в токе азота до -70^oC. По каплям в течение 30 минут добавляют раствор 2-изо-пропил-4-метокси-N, N-диэтилбензамида (454,2 г) в безводном эфире (300 мл). Во время проведения этой операции температуру поддерживают ниже -60^oC. По окончании добавления смесь перемешивают при -70^oC в течение часа, дают нагреться до температуры -50^oC, выдерживают при этой температуре в течение 30 мин и вновь охлаждают до -70^oC. При помощи избыточного давления азота в течение 20 минут подают через трубку предварительно охлажденный до -40^oC раствор диоксида серы (200 г) в безводном эфире (200 мл). Температуру реакционной смеси в процессе добавления поддерживают на уровне -40^oC. Практически мгновенно выпадает белый порошкообразный осадок сульфината ариллития. По окончании добавления охлаждающую баню убирают и перемешивают смесь при комнатной температуре двух часов, а затем охлаждают до -5^oC. По каплям в течение 15 мин при непрерывном перемешивании добавляют хлористый сульфурил (190 г), поддерживая температуру не выше 10^oC. Перемешивают при 0-5^oC еще в течение 30 минут, белый осадок отфильтровывают и промывают безводным эфиром (2 л). Растворитель удаляют при обычном давлении и получают темное масло, которое растворяют в тетрагидрофуране (1,4 л). Полученный раствор охлаждают до -10^oC и порциями в течение 15 мин добавляют концентрированный водный раствор аммиака (28%, 540 мл). В течение этой операции поддерживают температуру не выше 15^oC. После перемешивания в течение 15 минут при комнатной температуре тетрагидрофуран и избыток аммиака удаляют в вакууме, получая темное масло, которое разбавляют водой (6,0 л) и подкисляют соляной кислотой (3 раствор) до pH 1. Полученное твердое вещество светло-желтого цвета отделяют фильтрованием, промывают водой (800 мл), сушат при 60^oC в вакууме в течение 18 ч, перекристаллизовывают из смеси этилацетат - гексан (800 мл - 3 л) и получают 2-аминосульфонил-6-изо-пропил-4-метокси-N, N-диэтилбензамид (429 г, выход 72%, Т.пл. 122-125^oC).

Раствор 2-аминосульфонил-6-изо-пропил-4-метокси-N, N-диэтилбензамида (429,6 г) в уксусной кислоте (1,5 л) кипятят с обратным холодильником в течение 20 ч, а затем охлаждают до комнатной температуры. Растворитель удаляют в вакууме. Маслянистый остаток растворяют в воде (6 л) и доводят pH до 1 с помощью раствора соляной кислоты. Сырой продукт отделяют фильтрованием, промывают водой (2 л), сушат в вакууме при 60^oC в течение 18 час и перекристаллизовывают из смеси этилацетат - гексан, получая 4-изо-пропил-6-метоксисахарин (303 г, выход 91%, Т.пл. 188 С). (IV; R₁ = i -Pr, R₂ = 6-OMe).

К суспензии параформальдегида (24 г) и хлортриметилсилана (86,4 г) в 1,2-дихлорэтана (200 мл) прибавляют безводным хлорид олова (IV) (0,8 мл) и полученный раствор перемешивают при нагревании на паровой бане в течение одного час. К полученному прозрачному раствору добавляют 4-изо-пропил-6-метоксисахарин (51,4 г) и кипятят смесь в течение 18 час, охлаждают до комнатной температуры и выливают в воду. Органический слой отделяют, промывают водным раствором едкого натра (2N, 50 мл), сушат над сульфатом магния и упаривают в вакууме. Остаток перекристаллизовывают из смеси этилацетат - гексан и получают 2-хлорметил-4-изо-пропил-6-метоксисахарин (57 г, выход 87%. Т.пл. 151^oC).

в) Получение 2-хлорметил-4-изопропил-6- 2-(бензилокси) этокси сахарина
(II, R₁ = i -Pr, R₂ = 6-OCH₂CH₂OCH₂Ph, R₃ = H, Q = Cl)
К раствору 1,0 г (0,0039 моль) 4-изо-пропил-6-метоксисахарина в 15 мл хлористого метилена при комнатной температуре добавляют 1,28 г (5,122 мл) 1 M раствора трехбромистого бора в хлористом метилене. По окончании добавления реагента смесь кипятят с обратным холодильником в течение пяти часов, охлаждают, упаривают досуха в вакууме и к остатку добавляют лед и насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Водный раствор один раз экстрагируют этилацетатом, а затем подкислят до pH 1 с помощью концентрированной соляной кислоты. После экстракции смесью этилацетат/диэтиловый эфир (8:2), сушки органического экстракта и удаления растворителя в вакууме получают 0,9 г (96%) 6-гидрокси-4-изо-пропилсахарина (IV, R₁ = i -Pr, R₂ = 6-OH) в виде кристаллического вещества белого цвета, которое без дальнейшей очистки используют на следующей стадии.

Используют также альтернативную методику. К перемешиваемой суспензии 62,74 г (0,47 моль) хлорида алюминия (III) в 500 мл хлороформа при 0^oC добавляют 43,9 г (0,7 моль) этантиола. В течение одной минуты образуется прозрачный раствор. К полученному раствору в течение 30 мин добавляют раствор 20,0 г (0,078 моль) 4-изо-пропил-6-метоксисахарина. Дают раствору нагреться до комнатной температуры и перемешивают при 60^oC в течение 3-4 ч. После охлаждения смесь выливают в ледяную воду и подкисляют разбавленным раствором соляной кислоты. Выделившийся осадок отделяют фильтрованием, промывают водой и сушат, получая 18,4 г (970) 6-гидрокси-4-изо-пропилсахарина.

6-Гидрокси-4-изо-пропилсахарина (30,0 г, 0,12 моль) в метаноле обрабатывают карбонатом цезия (20,28 г, 0,062 моль). Перемешивают смесь при комнатной температуре в течение 3-4 ч, избыток метанола удаляют при пониженном давлении и остаток сушат в вакууме. Его растворяют в ДМФА и добавляют хлорметилфенилсульфид (21,72 г, 0,14 моль). Нагревают смесь до 70-80^oC в течение 24 ч, охлаждают, выливают в ледяную воду и экстрагируют смесью этилацетат/эфир. Органические вытяжки промывают водой, насыщенным раствором соли и сушат. Растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью этилацетат/гексан, и получают 30,5 г (67%) 4-изо-пропил-6-гидрокси-2-фенилтиометилсахарина.

К раствору 4-изо-пропил-6-гидрокси-2-фенилтиометилсахарина (2,0 г, 5,5 ммоль) в ТГФ (40 мл) добавляют трифетилфосфин (1,46 г. 5,56 ммоль), 2-бензилоксиэтанол (0,87 г, 5,71 ммоль) и диэтилазодикарбоксилат (0,99 г, 5,68 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов, растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 20%-ным раствором этилацетата в гексане, и получают 2,1 г (77%) 4-изо-пропил-6-2-(бензилокси)этокси 2-фенилтиометилсахарина с Т.пл. 98-99^oC.

К раствору полученного соединения (2,1 г, 4,22 ммол) в хлористом метилене при комнатной температуре добавляют хлористый сульфурил (0,37 мл, 4,65 ммоль) и смесь перемешивают в течение 3 ч. Растворитель удаляют в вакууме, остаток растирают с гексаном, полученное при этом твердое вещество отделяют фильтрованием и получают 1,67 г (93%) 2-хлорметил-4-изо-пропил-6- 2-(бензилокси)этокси сахарина с Т.пл. 101-102^oC.

г) Получение 2-хлорметил-4-изопропил-6- 2-(три-изопроилсилилокси)этокси сахарина
(II, R₁ = i -Pr, R₂ = 6-OCH₂CH₂OSi(i-Pr)₃, R₃ = H, Q = CI)
К раствору 4-изо-пропил-6-гидрокси-2-фенилтиометилсахарина (2,0 г, 5,509 ммоль) в ТГФ (35 мл), содержащему трифенилфосфин (1,59 г, 6,06 моль) и 2-(три-изо-пропилсилилокси)этанол (1,13 г, 6,0 ммоль), при комнатной температуре добавляют диэтилазодикарбоксилат (1,04 мл, 6,6 ммоль). Смесь оставляют перемешиваться на ночь (16 ч), растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 10%-ным раствором этилацетата в гексане, и получают 2,66 г (86%) 4-изо-пропил-6- 2-(три-изо-пропилсилилокси)этокси -2-фенилтиометилсахарина в виде масла.

Раствор полученного соединения (2,6 г, 4,62 ммоль) в хлористом метилене обрабатывают хлористым сульфурилом (0,65 г, 4,51 ммол) и перемешивают смесь в течение 3 час. Растворитель удаляют в вакууме, остаток растирают с гексаном. Продукт отделяют фильтрованием и получают 1,73 г (76%) 2-хлорметил-4-изо-пропил-6- 2- (три-изопропилсилилокси)этокси сахарина с Т.пл. 85-86^oC.

д) Получение 2-хлорметил-4-изопропил-6-(бензилоксикарбонилметокси)сахарина
(II, R₁ = i -Pr, R₂ = 6-OCH₂(CO)OCH₂Ph), R₃ = H, Q = CI)
Смесь 4-изопропил-6-гидрокси-2-фенилтиометилсахарина (3,5 г, 9,63 ммоль), ацетона (25 мл) и карбоната калия (2,66 г, 19,26 ммоль) перемешивают в токе азота в течение 2 мин, а затем добавляют бензилбромацетат (2,4 мл, 14,45 ммоль). Смесь перемешивают в течение 6 ч, отфильтровывают и фильтрат упаривают в вакууме. Остаток очищают жидкостной хроматографией среднего давления, элюируя 20%-ным раствором этилацетата в гексане, и получают 4,67 г (100) 4-изо-пропил-6-(бензилоксикарбонилметокси)- 2-фенилметилтиометилсахарина.

К раствору полученного соединения (0,5 г, 1,043 ммоль) в хлористом метилене (5 мл) при комнатной температуре добавляют хлористый сульфурил. Смесь перемешивают в течение 4 ч, растворитель отгоняют в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле градиентным элюированием, начиная с гексана (100%) и заканчивая 20%-ным раствором этилацетата в гексане, и получают 0,37 г (81%) 2-хлорметил-4-изопропил-6-(бензилоксикарбонилметокси)сахарина.

е) Получение 2-хлорметил-4-изопропил-6-гидроксисахарина
(II, R₁ = i -Pr, R₂ = 6-OH, R₃ = H, Q = CI)
4-изопропил-6-гидрокси-2-фенилтиометилсахарин (1,78 г) в хлористом метилене обрабатывают хлористым сульфурилом (0,43 мл, 0,73 г) и получают 1,2 г (84%) 2-хлорметил-4-изопропил-6-гидроксисахарина с Т.пл. 149-150^oC.

ж) Получение 2-хлорметил-4-втор-бутил-6-метоксисахарина
(II, R₁ = втор.-Bu, R₂ = 6-OMe, R₃ = H, Q = CI)
К смеси диэтиламина (89,1 мл), триэтиламина (120,2 мл) и хлористого метилена (500 мл), охлажденной в бане со льдом, по каплям в течение 40 мин добавляют п-анизоилхлорид (133,8 г). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 40 мин, отфильтровывают, промывают эфиром и растворитель удаляют в вакууме. Добавляют эфир, а затем воду, органический слой отделяют и промывают 5%-ным раствором едкого натра, затем соляной кислотой, насыщенным раствором соли и сушат над сульфатом натрия. Растворитель удаляют в вакууме и остаток перегоняют на колонке Kugelrohr при температуре 140-180^oC в условиях глубокого вакуума и получают 164,8 г 4-метокси-, -диэтилбензамида с Т.пл. 40-42^oC.

К раствору тетраметилэтилендиамина (50,3 мл) в ТГФ (800 мл) при -78^oC добавляют вторбутиллитий (308 мл, 1,08 М), а затем 4-метокси-N,N-диэтилбензамида (62,2 г). Полученную смесь перемешивают при -78^oC в течение 70 мин и в течение 35 мин добавляют этилиодид (26,63 г, 333 ммоля). Нагревают реакционную смесь до комнатной температуры и перемешивают в течение 1,5 час. Реакцию прерывают, добавляя насыщенный раствор хлорида аммония (100 мл). Органический слой отделяют, сушат над сульфатом натрия и упаривают в вакууме. Остаток очищают перегонкой на колонке Kugelrohr при температуре 190-210^oC в условиях глубокого вакуума и получают 58,1 г 2-этил-4-метокси-N,N-диэтилбензамида.

К смеси ди-изопропиламина (40,7 мл, 290 ммоль) в ТГФ (800 мл) при -78^oC добавляют н-бутиллитий (100 мл, 2,15 М раствор). Смесь перемешивают в течение 1/4 ч, а затем при -78^oC добавляют 2-этил-4-метокси-N,N-диэтилбензамид (235,3 г) в ТГФ (300 мл). Полученную смесь перемешивают при -78^oC в течение 2,5 ч, а затем в течение 1 ч при температуре 0^oC и в течение 10 мин при -78^oC добавляют этилиодид (23,2 мл) в ТГФ (150 мл). Реакцию прерывают добавлением насыщенного раствора хлорида аммония (100 мл) и растворитель удаляют в вакууме. К остатку добавляют эфир (500 мл), эфирный слой промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл), 1N раствором соляной кислоты, водой, насыщенным раствором соли, эфирный слой сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют в вакууме. Остаток очищают перегонкой под вакуумом (2 мм рт.ст.) и получают 46,6 г (76%) 2-втор-бутил-4-метокси-N,N-диэтилбензамида.

К раствору тетраметилэтилендиамина (31 мл) в ТГФ (500 мл) при -78^oC добавляют втор-бутиллитий (170 мл, 1,1 М раствор), а затем 2-втор-бутил-4-метокси-N, N-диэтилбензамид (45 г) в ТГФ (150 мл). Смесь перемешивают при -78^oC в течение 15 мин; затем в течение 30 мин при температуре 0^oC и в смесь при -78^oC конденсируют диоксид серы (50 мл). Нагревают смесь до -10^oC, добавляют хлористый сульфурил (17 мл), смесь медленно при перемешивании нагревают до комнатной температуре и оставляют перемешиваться на ночь. Реакционную смесь добавляют к раствору гидроокиси аммония (94 мл) в ТГФ (200 мл), смесь отфильтровывают через слой силикат ель/сульфат натрия/песок и получают 51,8 г 2-аминосульфонил-6,-втор-бутил-4-метокси-N,N-диэтилбензамида.

Смесь уксусной кислоты (200 мл) и 2-аминосульфонил-6-втор-бутил-4-метокси-N, N-диэтилбензамида (51,7 г) оставляют на ночь кипеть с обратным холодильником. Уксусную кислоту удаляют отгонкой, остаток выливают в смесь льда и 2 М раствора едкого (80 мл). Водный слой промывают хлористым метиленом, подкисляют концентрированной соляной кислотой и образовавшийся осадок отделяют фильтрованием, получая 4-втор-бутил-6-метоксисахарин (IV; R₁ = вторбутил, R₂ = OMe).

Смесь 4-втор-бутил-6-метоксисахарина (3 г), толуола, третбутоксида калия (1,4 г) и тетрабутиламмонийбромида (0,4 г) нагревают до кипения и вносят фенилхлорметилсульфид (1,8 мл). Полученную смесь кипятят с обратным холодильником приблизительно в течение 27 ч, растворитель удаляют в вакууме, остаток экстрагируют этилацетатом, промывают насыщенным раствором соли и сушат над сульфатом натрия. Растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 10%-ным раствором этилацетата в гексане, и получают 2,63 г (60%) 2-фенилтиометрил-4-втор-бутил-6-метоксисахарина.

К раствору 2-фенилтиометил-4-втор-бутил-6-метоксисахарина (2,6 г) в хлористом метилене (20 мл) добавляют хлористый сульфурил (0,7 мл). Смесь оставляют при комнатной температуре перемешиваться на ночь, затем растворитель упаривают в вакууме. Остаток обрабатывают гексаном и смесь обрабатывают ультразвуком в течение 6 ч. Образовавшийся осадок отделяют фильтрованием и получают 1,33 г 2-хлорметил-4-втор-бутил-6-метоксисахарина.

з) Получение 2-хлорметил-4-втор-бутилсахарина
(II, R₁ = вторбутил, R₂=H, R₃=H, Q=CI)
К раствору 4,74 мл (0,031 мол) тетраметилэтилендиамина в 300 мл ТГФ (пропускают перед использованием через слой оксида алюминия) добавляют 5,8 г (0,03 моль) 2-этил-N,N/-диэтилбензамида. Раствор охлаждают до -78^oC и обрабатывают 34,9 мл (0,031 моль) 0,9 М раствора бутиллития в циклогексане. По завершении добавления перемешивают смесь в течение 20 мин, а затем обрабатывают раствором 3,2 мл (0,04 моль) этилиодида, поддерживая температуру на уровне -78^oC. Дают смеси нагреться до комнатной температуры, перемешивают в течение 16 ч и выливают в воду. Полученное масло отделяют и хроматографируют на силикагеле, элюируя 19%-ным раствором этилацетата в гексане, и получают 2,86 (43%) 2-втор-бутил-N,N-диэтилбензамида в виде масла желтого цвета.

Полученное вещество (10,45 г, 0,045 моль) растворяют в 70 мл ТГФ и добавляют к смеси 39,2 мл (0,047 моль) 1,2 М раствора втор-бутиллития в циклогексане и 7,1 мл (0,047 мол) тетраметилэтилендиамина в 250 мл ТГФ, поддерживая температуру на уровне -78^oC. По окончании добавления смесь перемешивают еще в течение получаса при -78^oC, а затем обрабатывают при -70^oC диоксидом серы и дают нагреться до комнатной температуры. Смесь упаривают досуха в вакууме, остаток растворяют в воде и добавляют при перемешивании к холодному раствору 15,2 г (0,134 моль) гидроксиламино-O-сульфоновой кислоты и 15,4 мл (0,134 моль) 35%-ного раствора едкого натра, получая 10,1 г (72%) 2-аминосульфонил-6-втор-бутил-N,N-диэтилбензамида.

Полученное соединение (6,83 г, 0,22 моль) растворяют в 100 мл ледяной уксусной кислоты и кипятят полученный раствор с обратным холодильником в течение тринадцати часов, а затем упаривают досуха. Остаток обрабатывают диэтиловым эфиром и продукт отделяют фильтрованием, получая 5,7 г (83%) диэтиламмониевой соли 4-втор-бутилсахарина.

Полученное вещество (3,0 г, 0,0096 моль) после взаимодействия с 1,13 мл (0,012 моль) хлорметилфенилсульфида в толуоле дает 3,47 г (100%) 2-фенилтиометил-4-втор-бутилсахарина.

Взаимодействием полученного соединения (3,2 г, 0,00097 моль) с 2,3 мл (0,029 моль) хлористого сульфурила в 20 мл хлористого метилена получают 2,4 г (87%) 2-хлорметил-4-втор-бутилсахарина.

Получение целевых продуктов
Пример 1A 2-(2,5-дигидро-5-оксо-3-фуранил)оксиметил -4-изопропил-сахарин

Раствор тетроновой кислоты (0,22 г) в диметилформамиде (5 мл) добавляют к суспензии гидрида натрия (60%-ная дисперсия в минеральном масле, 0,10 г) в диметилформамиде (4 мл) в токе азота перемешивают на бане со льдом. Баню со льдом удаляют и перемешивание продолжают еще в течение 15 мин, а затем по каплям добавляют раствор 2-хлорметил-4-изопропилсахарина (0,547 г) в диметилформамиде (10 мл), перемешивают еще в течение двух с половиной дней, а затем выливают в воду. Полученную смесь экстрагируют этилацетатом, слой этилацетата сушат над сульфатом магния и этилацетат удаляют. Перекристаллизацией полученного бесцветного твердого вещества (0,60 г) из этилацетата получают целевое соединение (0,34 г, выход 51%, Т.пл.174-175^o
Примеры 1B-1
По методикам, аналогичным приведенной выше в Примере 1A, из 2-хлорметил-4-изопропилсахарина или 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарина и соответствующего соединения формулы III (H-O-Z) получают соединения, обозначенные в Таблице 1.

(a) Продукт перед проведением перекристаллизации очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя хлористым метиленом, а затем изменяющимся по соотношению компонентов растворами этилацетата в гексане.

(b) Продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя хлористым метиленом, а затем изменяющимися по соотношению компонентов растворами этилацетата в гексане.

(c) Продукт очищают колоночной хроматографией (2 x) на силикагеле, элюируя хлористым метиленом, а затем изменяющимися по соотношению компонентов растворами этилацетата в гексане.

(d) Продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесями этилацетат/гексан (от 1/3 до 1/2).

Кроме соединения по Примеру 1M с выходом 38% выделяют 2-(1-метил-2,6-диоксоциклогексил)метил-4-изопропил-6-метоксисахарин (Т. пл. 159,5-161,5^oC, из этилацетата).

Пример 2
2-(1-метилкарбостирил-4-ил)оксиметил-4-изо-пропил-6-метоксисахарин

4-Гидрокси-1-метилкарбостирил (1,44 г) добавляют при перемешивании к суспензии гидрида натрия (60%-ная дисперсия в минеральном масле, 0,36 г) в диметилформамиде. Смесь в течение 3/4 час при непрерывном перемешивании нагревают до температуры 100^oC, а затем обрабатывают при комнатной температуре ультразвуком в течение получаса. Добавляют 2-хлор-4-изопропил-6-метоксисахарин (1,83 г). Подученную смесь при перемешивании в течение 2 ч нагревают до температуры 100^oC, а затем выливают в воду (300 мл). Добавляют соляную кислоту (1N раствор, 25 мл) и экстрагируют хлороформом. Хлороформенный экстракт сушат сульфатом натрия и хлороформ упаривают. Тонкослойной испарительной хроматографией полученного твердого вещества (3,3 г) на силикагеле, используя в качестве элюента смесь этилацетат - гексан (1:1), и перекристаллизацией полученного твердого вещества (0,7 г, 2Q%) из этанола (90%) получают целевое соединение в виде твердого вещества желтого цвета (0,39 г, выход 15%, Т.пл.198- 200^oC).

Пример 3A
2-(1-фенил-3-ацетилкарбостирил-4-ил)оксиметил-4- изопропил-6-метоксисахарин

Смесь 3-ацетокси-4-гидрокси-1-фенилкарбостирила (0,52 г), карбоната калия (0,28 г) и диметилформамида (7 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение получаса. Добавляют 2-хлорметил-4-изо-пропил-6-метоксисахарин (0,71 г) и смесь обрабатывают ультразвуком при 40^oC в течение часа, а затем перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Дальнейшая обработка ультразвуком не влияет на степень полноты протекания реакции, что показано с помощью тонкослойной хроматографии. Реакционную смесь выливают в воду и экстрагируют этилацетатом. Органические вытяжки сушат и растворитель упаривают. Жидкостной хроматографией среднего давления остатка (0,5 г) на силикагеле, используя в качестве элюента смесь этилацетат - гексан (3:7), и перекристаллизацией продукта из метанола получают целевое соединение (0,24 г, выход 24%, Т.пл.210-212^oC).

Пример 3B
2-(1-метил-3-ацетилкарбостирил-4-ил)оксиметил-4- изопропил-6-метоксисахарин

По методике, аналогичной приведенной выше в Примере 3A, конденсируют 3-ацетил-4-гидрокси-1-метилкарбостирил (0,63 г) с 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарином (1,10 г) и очищают продукт перекристаллизацией из смеси метанол - эфир, получая целевое соединение в виде порошка белого цвета (0,28 г, выход 20%. Т.пл. 194-196^oC).

Пример 4A
2-(2,5-дигидро-2-оксо-3-фенилфуран-4-ил)оксиметил-4- изо-пропил-6-метоксисахарин

К раствору 3-фенил-2(5H)-фуранона (0,88 г) в метаноле (15 мл) добавляют карбонат цезия (0,82 г) и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение часа, а затем метанол удаляют. Остаток растворяют в диметилформамиде (15 мл), добавляют к нему 2-хлор-4-изопропил-6-метоксисахарин (1,52 г) и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение двух дней. Добавляют силикагель (4,4 г), летучие вещества отгоняют в вакууме и полученное твердое вещество подвергают испарительной хроматографии на силикагеле, используя смесь этилацетат - гексан (3:7) в качестве элюента. Перекристаллизацией продукта из смеси этанол - эфир получают целевое соединение в виде бесцветного твердого вещества (0,45 г, выход 20%, Т.пл.180-182^oC).

Примеры 4B-41
По методикам, аналогичным приведенной выше в Примере 4A, из 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарина и соответствующего соединения формулы III (H-O-Z) получают соединения, обозначенные в таблице II.

(a) Реакционную смесь обрабатывают, выливая в воду со льдом, экстрагируя ж этилацетатом, промывая органический слой 5%-ным раствором едкого натра, 1N раствором соляной кислоты, водой, затем насыщенным раствором соли и удаляя растворитель в вакууме. Затем остаток перед кристаллизацией предварительно очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 40%- ным раствором этилацетата в гексане.

(b) Реакционную смесь обрабатывают, выливая в воду, добавляя 5%-ный раствор едкого натра и экстрагируя смесью этилацетат - хлористый метилен. Органические вытяжки объединяют, промывают и сушат сульфатом натрия. Растворитель удаляют в вакууме и остаток перед кристаллизацией предварительно очищают колоночной хроматографией на силикагеле, градиентно элюируя, начав с 25%-ного раствора этилацетата в гексане и заканчивая чистым этилацетатом.

Пример 4J 2-4-оксо-4H--пиридо 1,2-a пиримидин-2-ил оксиметил-4-изопропил-6-(бензилоксикарбонилметокси)сахарин

Используя методику, аналогичную приведенной в Примере 4A, получают 0,71 г (62,8%) целевого соединения с Т.пл. 69-71^oC, исходя из 2-хлорметил-4-изо-пропил-6-(бензилоксикарбонилметокси)сахарина (0,876 г), карбоната цезия (0,326 г), метанола, 2-гидроксипиридо- 1,2-a пиримидин-4-она (0,324 г) и ДМФА (5 мл). Реакционную смесь разрабатывают, выливая ее в воду со льдом, экстрагируя этилацетатом и отделяя органический слой, который промывают насыщенным раствором соли и сушат над сульфатом натрия.

Пример 4K
2-4-оксо-4H--пиридо 1,2a пиримидин-2-ил оксиметил-4-втор-бутил-6-метоксисахарин

Используя методику, аналогичную приведенной в Примере 4A, получают 0,267 г (58%) целевого соединения с Т.пл. 160-185^oC, исходя из 2-хлорметил-4-втор-бутил-6-метоксисахарина (0,318 г, 1,0 ммоль), карбоната цезия (0,18 г, 0,56 ммоль), метанола (5 мл), 2-гидроксипиридо- 1,2-a пиримидин-4-она (0,18 г, 1,11 ммоль) и ДМФА. Реакционную смесь разрабатывают, выливая ее в насыщенный раствор хлорида аммония, экстрагируя этилацетатом, упаривая органический слой в вакууме и очищая остаток колоночной хроматографией на силикагеле элюированием вначале 50%-ным раствором этилацетата в гексане, а затем 5%-ным раствором метанола в этилацетате.

Пример 5
2-3-(4-морфолинилметил)-4-оксо-4н-пиридо[1,2-а] пиримидин-2-ил оксиметил-4-изопропил-6-метоксисахарин

Смесь гидрохлорида 3-(4-морфолинилметил)пиридо 1,2-а пиримидин-2,4-диона (0,6 г) и трет-бутоксида калия (0,49 г) в диметилформамиде (20 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение пяти минут. Добавляют 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарин (0,61 г) и перемешивание при комнатной температуре продолжают в течение часа. Разбавляют реакционную смесь водой (50 мл) и экстрагируют дихлорметаном (3 х 200 мл). Органические вытяжки объединяют, сушат над сульфатом натрия и летучие вещества отгоняют, а потом высушивают в глубоком вакууме. Сырой продукт (780 мг) объединяют с 0,65 г этого же продукта, полученного в другом эксперименте при той же загрузке исходных соединений, но при использовании гидрида натрия (60%-ная дисперсия в масле, 0,19 г) вместо трет-бутоксида калия, и очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью дихлорметанметанол (95:5), и получают целевое соединение (500 мг, выход 23%), часть которого перекристаллизовывают из этанола (Т.пл. 177-180^oC).

Пример 6
2- 3,5,6-триметил-1,4-диоксо-2,5-циклогексадике-2-ил) оксиметил-4-изопропил-6-метоксисахарин

При перемешивании при комнатной температуре добавляют 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарин (0,34 г) к раствору 2-гидрокси-3,5-триметил-1,4-гидрохинона (0,182 г) и метилтриазабициклодецена (0,18 г) в ацетонитриле (20 мл). Перемешивание при комнатной температуре продолжают в течение 24 ч и образовавшийся темно окрашенный раствор выливают в ледяную воду, содержащую несколько капель соляной кислоты. Полученное твердое вещество коричневого цвета очищают вначале колоночной хроматографией на силикагеле, а затем перекристаллизацией из горящего этанола и получают целевое соединение (60 мл, выход 12,7%. Т.пл. 164-166^oC).

Пример 7
2- 5-ацетил-4,7-дигидро-4,7-диоксобензофуран-6-ил) оксиметил-4-изопропил-6-метоксисахарин

При перемешивании при комнатной температуре добавляют 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарин (0,5 г) к раствору 4,7-диметокси-5-ацетил-6-гидроксибензофурана (0,39 г) и метилтриазабициклодецена (0,28 г) в ацетонитриле (20 мл). Полученную смесь оставляют на ночь перемешиваться при комнатной температуре. Поскольку тонкослойная хроматография показывает наличие непрореагировавшего 4,7-диметокси-5-ацетил-6-гидроксибензофурана, то добавляют еще некоторое количество 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарина и одну каплю основания и перемешивание продолжают еще в течение 24 ч, а затем смесь выливают в ледяную воду, содержащую соляную кислоту. Полученное твердое вещество золотистого цвета частично очищают, используя в качестве элюента дихлорметан. Реакцию повторяют, оставляя перемешиваться не при комнатной температуре, а при температуре 35-40^oC. Продукт и частично очищенный продукт из первого синтеза объединяют и очищают колоночной хроматографией на силикагеле, получая 2-(4,7-диметокси-5-ацетилбензофуран-6-ил)оксиметил-4- изопропил-6-метоксисахарин (0,4 г, выход 24%).

К раствору 2-(4,7-диметокси-5-ацетилбензофуран-6-ил)оксиметил-4-изопропил -6-метоксисахарина (0,3 г) в ацетонитриле (5 мл) добавляют по каплям раствор трицерийтетрааммоний-гексанитрата (0,98 г) в воде (3 мл). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин и выливают в ледяную воду. Полученное твердое вещество золотистого цвета очищают быстрой хроматографией на силикагеле, элюируя смесью дихлорметан - эфир (95:5), и перекристаллизовывают при одновременной обработке ультразвуковом из этанола, получая целевое соединение (0,13 г, выход 46,6%, Т.пл. 193-195^oC, с разложением).

Пример 8
2-(3-хлор-6-метил-2-оксо-2H-пиран-4-ил)оксиметил- 4-изопропил-6-метоксисахарин

Смесь 3-хлор-4-гидрокси-6-метил-2H-пиран-2-она (0,493 г, 3,07 ммоль), ДМФА и карбоната калия (0,467 г, 3,38 ммоль) перемешивают при комнатной температуре в токе азота в течение 0,5 ч, а затем в одну порцию добавляют 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарин (0,978 г, 3,22 ммоль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, а затем 3 ч при температуре 75^oC. Выливают в воду, экстрагируют этилацетатом и органические вытяжки промывают насыщенным раствором соли и сушат. Растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 30%-ным раствором этилацетата в гексане, и после перекристаллизации из смеси эфир - гексан получают 0,25 г (18,1%) целевого соединения с Т.пл.182,5-183,5^oC.

Примеры 9A-9J
Соединения, приведенные ниже в Таблице III, получают по следующей методике.

Смесь подходящего соединения формулы III (H-O-Z), приблизительно 1,0-1,5 эквивалентов подходящего основания и подходящего растворителя перемешивают при комнатной температуре в течение приблизительно 0-60 мин, а затем добавляют приблизительно 1,0-1,2 эквивалентов соответствующего 2-хлорметил-4-изопропил-6-P₂-сахарина. Смесь перемешивают при температуре, близкой к комнатной, или при нагревании до температуры приблизительно 90^oC в течение 1-48 ч, а затем разрабатывают следующим образом.

Метод 1: реакционную смесь выливают в воду со льдом и либо (а) экстрагируют подходящим растворителем (в частности, этилацетатом, хлороформом или хлористым метиленом), органический слой отделяют, сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и упаривают, а полученный остаток очищают так, как указано в Таблице III; либо (б) продукт осаждают из смеси льда с водой и отделяют фильтрованием, а затем очищают так, как указано в Таблице III.

Метод 2: растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают так, как указано в Таблице III.

(a) Продукт очищают перед кристаллизацией методом колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 5%-ным раствором метанола в хлороформе.

(b) Продукт перед последней перекристаллизацией очищают перекристаллизацией из ацетонитрила, а затем колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 5%-ным раствором этилацетата в хлористом метилене.

(c) Перед образованием гидрохлоридной соли обработкой 4,6N раствором хлористого водорода в этаноле свободное основание очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью 65% этилацетата/ 30% метанола/ 5% триэтиламина.

(d) Продукт перед кристаллизацией очищают методом колоночной хроматографией на силикагеле, градиентно элюируя смесью гексан/этилацетат (от 3/1 до 2/1).

(e) Продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 60%-ным раствором этилацетата в гексане.

(f) Продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 60%-ным раствором этилацетата в гексане.

(g) Продукт перед кристаллизацией очищают методом колоночной хроматографией на силикагеле, градиентно элюируя смесью этилацетат/гексан (от 1/7 до 1/6).

Пример 10

Смесь соединения по Примеру 4H (0,359 г, 0,834 ммоль), этилацетата (35 мл) и палладия на угле гидрируют под давлением 50 фунтов/дюйм² в аппарате гидрирования Парра в течение 1 и 3/4 ч. Добавляют дополнительное количество палладия на угле (0,16 г) и реакцию продолжают еще в течение 2 ч. Катализатор удаляют фильтрованием и фильтрат упаривают в вакууме. Сырой продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью этилацетат/метанол/триэтиламин (88,5/7,5/4) и получают 0,132 г (36,5%) целевого продукта в виде свободного основания, которое растворяют в этаноле и обрабатывают раствором лимонной кислоты в метаноле, получая 0,142 г продукта в виде лимоннокислой соли с Т.пл.198-200^oC.

Пример 11
2- 3-(этоксикарбонил)-4-оксо-4H-пиридо 1,2-а пиримидин-2ил оксиметил-4-изопропил-6-метоксисахарин

К смеси трет-бутоксида калия (0,37 г, 3,3 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляют этил 5-оксо-2-(пиримидинил-2-ил)-2,5-дигидроизоксазол-4-карбоксилат (0,70 г, 3,0 ммоль) и перемешивают смесь в токе азота при температуре 40^oC в течение 0,5 ч. Растворитель удаляют в вакууме и остаток высушивают в глубоком вакууме. Сырой продукт смешивают с ДМФА (20 мл) и добавляют 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарин (0,91 г, 3,0 ммол) в ДМФА (5 мл). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре приблизительно в течение 23 дней, выливают в воду со льдом и экстрагируют этилацетатом. Органический слой отделяют, сушат над сульфатом натрия и упаривают в вакууме. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 5%-ным раствором метанола в этилацетате, и после перекристаллизации из смеси толуолгекса, получают 0,17 г (12%) целевого соединения с Т.пл.189-191^oC.

Пример 12
2- 4-оксо-6,7,8,9-тетрагидро-4H-пиридо 1,2-а пиримидин-2ил оксиметил-4-изопропил-6-(2-гидроксиэтокси)сахарин

Смесь продукта по Примеру 9G (1,35 г) в этилацетате (200 мл) и метаноле (5 мл) и 10%-ного палладия на угле (0,5 г) гидрируют в аппарате Парра под давлением 50 фунтов/дюйм² в течение 3 ч. Добавляют дополнительное количество палладия на угле (0,5 г) и смесь гидрируют еще в течение 8-9 ч. Отфильтровывают и фильтрат упаривают в вакууме, а остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя этилацетатом, и получают 0,89 г целевого продукта в виде пенообразного вещества.

Пример 13
2- 4-оксо-6,7,8,9-тетрагидро-4H-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-4-изопропил-6- 2-(диметиламинометилкарбонилокси)этокси сахарин

В раствор соединения по Примеру 12 (0,8 г, 1,72 ммоль) в хлористом метилене (25 мл), содержащем 1,3-дициклогексилкарбодимид (1,06 г, 5,14 ммоль, добавляют глицерин (0,19 г, 1,9 ммоль), а затем 4-диметиламинопиридин (0,21 г, 1,72 ммоль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 10%-ным раствором метанола в этилацетате, и получают 0,64 г (68%) целевого соединения в виде пенообразного вещества.

Пример 14
2- 3-хлор-4-оксо-4H-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-4-изопропил-6-2-гидроксиэтокси сахарин

К суспензии соединения по Примеру 9H (0,76 г) в метаноле (30 мл) добавляют ТГФ, а затем 2 раствор соляной кислоты (20-30 мл). Смесь перемешивают в течение 4-5 ч, добавляют дополнительно количество 2 раствора соляной кислоты и смесь оставляют перемешиваться на ночь. Растворитель удаляют в вакууме, остаток разбавляют тетрагидрофураном и обрабатывают концентрированной соляной кислотой (2 мл). После перемешивания в течение 5-6 ч растворитель удаляют в вакууме и остаток экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают водой, насыщенным раствором соли и сушат. Растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 80%-ным раствором этилацетата в гексане, и получают 0,43 г целевого соединения с Т.пл. 214-215,5^oC.

Примеры 15A-15C
Предполагается, что используя методику, аналогичную приведенной в Примере 9D, но взяв в качестве исходного подходящее соединение формулы III (H-O-Z), можно получить следующие соединения:

Пример 16
(а) 2- 3-хлор-4-оксо-4H-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-6-гидрокси-4-изопропилсахарин

Предполагается, что используя методику, аналогичную приведенной в Примере 6, можно получить целевое соединение из 3-хлор-пиридо 1,2-а пиримидин-2,4-диона (2 эквивалента), метилтриазабициклодецена (2 эквивалента), ДМФА и 2-хлорметил-4-изопропил-6-гидроксисахарина.

(б) 2- 3-хлор-4-оксо-4H-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-4-изопропил-6- 1-(5-диметиламинометил-2-фуранил)метокси сахарин

Предполагается, что целевое соединение может быть получено обработкой раствора 2- 3-хлор-4-оксо-4H-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-6-гидрокси-4-изопропилсахарина в ДМФА трифенилфосфином, 5-диметиламинометил-2-гидроксиметилфураном и диэтилазодикарбоксилатом.

Пример 17
2- 4-оксо-6,7,8,9-тетрагидро-4H-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-4-изопропил-6-метоксисахарин

Смесь соединения по Примеру 4C (0,3 г, 0,708 ммоль), этилацетата (14 мл) и 10%-ного палладия на угле (0,3 г) гидрируют в аппарате Парра под давлением 50 фунтов/дюйм² в течение 7 ч. Реакционную смесь отфильтровывают через целит, фильтрат упаривают в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле градиентным элюированием, начав с 50%-ного раствора и заканчивая 70%-ным раствором этилацетата в гексане, и получают после перекристаллизации из смеси этилацетат - гексан 0,165 г (54%) целевого соединения с Т.пл. 183,5-185,5^oC.

Пример 18
2 - 3-хлор-4-оксо-4H-пиридо[1,2-а]пиримидин-2-ил]оксиметилсахарин

К смеси 2-гидрокси-З-хлорпиридо 1,2-пиримидин-4-она (0,324 г) и метилтриазабициклодецена (0,24 мл) в ДМФА (15 мл) добавляют 2-брометилсахарин (0,414 г). Смесь оставляют перемешиваться на ночь, выливают в воду и образовавшийся осадок выделяют фильтрованием и перекристаллизовывают из ДМФА, получая 0,371 г (65%) целевого соединения.

Пример 19a
2- 3-хлор-4-оксо-4H-пиридо 1,2-а пиримидин-2ил оксиметил-4-втор-бутилсахарин Пример 19(b)
2- 3-хлор-4-оксо-4H-пиридо 1,2-а пиримидин-4-ил оксиметил-4-втор-бутилсахарин

К смеси 2-гидрокси-3-хлорпиридо 1,2-а пиримидин-4-она (0,29 г) и метилтриазабициклодефена (0,22 мл) в ДМФА (12 мл) добавляют 2-хлорметил-4-втор-бутилсахарин (0,39 г). Смесь перемешивают в течение 8 час, выливают в воду и образовавшийся осадок выделяют фильтрованием. Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле градиентным элюированием смесями этилацетат - гексан (от 2/1 и до 1/1) и получают после перекристаллизации из этилацетата 0,284 г (46,7%) целевого соединения по Примеру 19a с Т. пл. 211-212^oC; а после перекристаллизации из хлористого метилена 0,027 г целевого соединения по Примеру 19a с Т.пл.268-271^oC (с разложением).

Примеры препаративных форм фармацевтической композиции
Пример 20
Таблетка
Ингредиенты - Количество, мг
Соединение Примера 96 - 50,0
Маннит, USP - 223,75
Натрий кроскармелоза - 6,0
Кукурузный крахмал - 15,0
Гидроксипропилметилцеллюлоза, USP - 2,25
Стеарат магния - 3,0
Пример 21
Капсула
Ингредиенты - Количество, мг
Соединение Примера 13 - 10,0
Маннит, USP - 448,5
Натрий кроскармелоза - 15,0
Стеарат магния - 1,5
Пример 22
Раствор для инъекций
Ингредиенты - Количество, мг/гл
Соединения Примера 16b - 2,0
Декстроза - 39,5
Стерильная вода для инъекций - До 1 мл
Как указывалось ранее, соединения формулы 1 ингибируют ферментативную активность протеолитических ферментов и полезны при лечении дегенеративных заболеваний. В частности, они ингибируют эластазу лейкоцитов человека и химотрипсин подобные ферменты и полезны при лечении эмфиземы, ревматоидного артрита, пакреатита, кистоизного фиброза, хронического бронхита, респираторного дистресс-синдрома у взрослых, воспалительных заболеваний кишечника, псориаза, пузырчатого пемфигоида и альфа-1-антитрипсиновой недостаточности. Полезность соединений формулы I была показана в тестах по ингибированию в условиях in vitro эластазы лейкоцитов человека.

Измерение константы ингибирования (K_i) эластазы лейкоцитов человека ингибируюшим комплексом описано (Cha, Biochemical Pharmacology, vol. 24, p. 2177-2185, 1975) для истинных обратных констант ингибирования, обычно по отношению к конкурентным ингибиторам. Соединения формулы I не дают истинно обратимых ингибирующих комплексов, а скорее могут рассматриваться как своего рода ферменты. По этой причине вычисляют значение K_i*, которое определяют как отношение скорости реактивирования фермента и скорости инактивирования фермента (K_off/K_on). Измеряют значения (K_off) и K_on и вычисляют K_i*.

Значение K_on определяют, измеряя ферментативную активность аликвоты фермента как функции времени, прошедшего после добавления испытуемого соединения (ингибитора). Построив график логарифмической зависимости величины активности фермента относительно времени, определяют наблюдаемую скорость инактивирования по уравнению K_obs=ln 2/t_1/2, где t_1/2 обозначает время, в течение которого активность фермента снижается на 50%. Затем вычисляют значение K_on по уравнению K_on = K_obs[I], где [I] обозначает концентрацию ингибитора. Значение K_off определяют аналогичным образом, а значение K_i* выводят из уравнения K_i* = K_off/K_on
Результаты, приведенные в таблице IV, получены для соединений формулы 1, приведенных в примерах.

Ингибирующая активность представленных соединений по отношению к эластазе лейкоцитов человека была также продемонстрирована в следующем тесте:
Испытуемое соединение (ингибитор) растворяют в ДМСО в пробирке, получая исходный раствор с концентрацией в интервале 200-1000 мМ. Исходный раствор ингибитора разбавляют (1:4, 1:16 и 1:64) в пробирках для анализа (пробирки 1, 2 и 3, соответственно), содержащих 2,4 мл буферного раствора (50 мМ N-2-гидроксиэтил] пиперазин-N'[2этансульфоновая] кислота/NaOH, 500 мМ хлорида натрия, pH 7,8 при 25^oC), и добавляют ДМСО, так чтобы общий объем жидкости в каждой пробирке составлял 3,2 мл 70 мкл, 35 мкл и 25 мкл ингибитора из пробирки для анализа 1 помещают в первые четыре ячейки микролитической пластины с 96 ячейками и доводят объем каждой ячейки до 90 мкл с помощью смеси 25% ДМСО/буферный раствор. С ингибитором из пробирок 2 и 3 поступают аналогичным образом и помешают в ячейки 5-12, соответственно, получая 12 различных концентраций ингибитора. Аналогично в качестве контрольные готовят четыре ячейки (ячейки 13-16), содержащие 90 мкл смеси 25% ДМСО/буферный раствор без добавления ингибитора. Затем одновременно в каждую из 16 ячеек добавляют по 150 мкл раствора субстрата (получают добавлением 500 мкл субстрата эластазы лейкоцитов человека MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-pNA (18,7 мМ в ДМСО) к 19,5 мл буферного раствора) и раствор в каждой ячейки тщательно перемешивают.

Пластину с 96 ячейками помещают в спектрофотометр Microplate Reader # 89815A и в каждую из 16 ячеек одновременно добавляют по 110 мкл раствора фермента (получают следующим образом: смесь 20 мл буферного раствора и 20 мг бычьего сывороточного альбумина осторожно встряхивают в сосуде для проведения сцинтилляционных измерений) и 5 мкл исходного раствора эластазы лейкоцитов человека (1 мг/мл в деионизованной воде). Каждый из растворов в ячейках тщательно перемешивают и получают значения поглощения в зависимости от времени при 410 нм до тех пор, пока анализ не закончится. Следует отметить, что хотя анализ можно проводить вручную, однако более предпочтительным является автоматизированное проведение анализа с использованием работа для проведения микроанализа фирмы "Hewlett Packard".

Полученный указанным образом график зависимости поглощения от времени позволяет получить кривые прогрессии, наклон которых определяет конечную равновесную скорость (V_F), Используя программу ENZFITTER (программное обеспечение фирмы "Elsevier"), кривые прогрессии для четырех контрольных образцов ([I] = 0) согласовывают методом линейной регрессии и получают значения скорости реакции фермента в отсутствии ингибитора (V₀), которые усредняют и получают фиксированное значение. Константу ингибирования K_i (нМ) далее получают из графика функции:

который позволяет получить линейную зависимость, где

[S] обозначает концентрацию субстрата,
M_m - константа Михаэлиса.

В следующей таблице V суммированы результаты, полученные при проведении испытаний представленных соединений по изобретению описанным выше методом.

Количество соединений формулы I, ингибирующее протеолитические ферменты, можно определить из результатов испытаний по ингибированию эластазы лейкоцитов человека и может дополнительно меняться для конкретного пациента в зависимости от физического состояния пациента, способа введения, продолжительности курса лечения и реакции пациента. Эффективная доза соединения формулы I может быть определена лишь врачом после оценки всех необходимых критериев и должна быть оптимальной для пациента.

Соединение формулы I может быть приготовлено для фармацевтического использования путем включения его в фармацевтическую композицию для орального и парентерального введения или ингаляции аэрозоля и может быть в твердой или жидкой дозировочной форме, включая таблетки, капсулы, растворы, суспензии и эмульсии, а также может содержать подходящие вспомогательные добавки. Предпочтительной единичной дозировочной формой для орального назначения являются таблетки или капсулы. С этой целью в качестве одной или более добавок можно использовать, например, карбонат кальция, крахмал, лактозу, тальк, стеарат магния и камедь. Композиции получают обычными способами, принятыми в фармацевтической практике.

Claims

1. Производное сахарина общей формулы I

где R₁ - низший алкил,
R₂ - заместитель в 5-, 6- или 7-положениях, выбранный из группы, состоящей из:
B = N-(CH₂)_pC(O)O(CH₂)_p, -O-,
-O-(CH₂)_p-(5-((CH₂)_p, -B = N-2-фуранил)
и R - окси(низший)алкокси, где B = N-ди-(низший)алкиламино,
R-фенил(низший)алкил,
p и p' - целые числа 1 или 2,
R₃ - атом водорода,
X - атом водорода или галоген,
Y обозначает группу -N=C(Z'')-N(Z'')- или -N=C(R''')-N(R''')-, где группы R''' вместе с атомами углерода или азота, к которым они присоединены, обозначают группу -(CH₂)₄-, а группы Z'', объединенные с атомами углерода или атомами азота, к которым они присоединены, образуют пиридогруппу,
или его фармацевтически приемлемая основно-аддитивная соль, если соединение имеет кислотную функциональную группу или его фармацевтически приемлемая кислотно-аддитивная соль, если соединение имеет основную функциональную группу.

2. Соединение по п.1, где R₂ выбирают из группы, состоящей из B = N-(CH₂)_pC(O)O(CH₂)_p, -O- и R-окси(низший)алкилокси.

3. Соединение по п. 1, в котором R₁ является изопропилом; R₂ является группой 6-диметиламино-CH₂C(O)O(CH₂)₂-O- или 6-бензилоксиэтокси-группой; а X является водородом.

4. Соединение по п.3, имеющее структурную формулу

где R₂ является диметиламино-CH₂C(O)O(CH₂)₂-O- или бензилоксиэтокси-группой, а Z обозначает следующие структурные формулы:

5. Фармацевтическая композиция для ингибирования протеолитических ферментов при лечении дегенеративных заболеваний, отличающаяся тем, что включает соединение формулы 1 по любому из пп.1 - 4 в эффективной дозе и фармацевтически приемлемый носитель.

6. Соединение по любому из пп.1 - 4, отличающееся тем, что является полезным для приготовления лекарственного средства для лечения пациента, страдающего от дегенеративного заболевания.

7. Фармацевтическая композиция по п.5, отличающаяся тем, что является полезной для приготовления лекарственного средства для лечения пациента, страдающего от дегенеративного заболевания.