[go: up one dir, main page]

RU2115658C1 - Гибридный олигонуклеотид, содержащий фосфоротиоатную и/или фосфородитиоатную связи, терапевтическая фармацевтическая композиция, способ ингибирования генной экспрессии - Google Patents

Гибридный олигонуклеотид, содержащий фосфоротиоатную и/или фосфородитиоатную связи, терапевтическая фармацевтическая композиция, способ ингибирования генной экспрессии Download PDF

Info

Publication number
RU2115658C1
RU2115658C1 RU95107191A RU95107191A RU2115658C1 RU 2115658 C1 RU2115658 C1 RU 2115658C1 RU 95107191 A RU95107191 A RU 95107191A RU 95107191 A RU95107191 A RU 95107191A RU 2115658 C1 RU2115658 C1 RU 2115658C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
oligonucleotide
oligonucleotides
ribonucleoside
virus
substituted
Prior art date
Application number
RU95107191A
Other languages
English (en)
Other versions
RU95107191A (ru
Inventor
Валерий Метелев
Судхир АГРАВАЛ
Original Assignee
Ворсестер фаундейшн фор байомедикал рисеч, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=25440047&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2115658(C1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Ворсестер фаундейшн фор байомедикал рисеч, Инк. filed Critical Ворсестер фаундейшн фор байомедикал рисеч, Инк.
Publication of RU95107191A publication Critical patent/RU95107191A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2115658C1 publication Critical patent/RU2115658C1/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1131—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against viruses
    • C12N15/1132—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against viruses against retroviridae, e.g. HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
    • C12N2310/313—Phosphorodithioates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
    • C12N2310/315—Phosphorothioates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/321—2'-O-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
    • C12N2310/341—Gapmers, i.e. of the type ===---===
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
    • C12N2310/346—Spatial arrangement of the modifications having a combination of backbone and sugar modifications
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/35—Nature of the modification
    • C12N2310/352—Nature of the modification linked to the nucleic acid via a carbon atom
    • C12N2310/3521—Methyl

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

Гибридный олигонуклеотид относится к синтетическим олигонуклеотидам, которые используются при исследовании генной экспрессии, а также в терапевтических целях. Олигонуклеотид содержит фосфоротиоатные и/или фосфородитиоатные связи и включает дезоксирибонуклеозид, рибонуклеозид или 2'-замещенный рибонуклеозид и фосфоротиоатную и/или фосфородитиоатную межнуклеотидную связь. При использовании в терапевтической композиции используют эффективное количество олигонуклеотида, имеющего последовательность, комплементарную последовательности нуклеиновой кислоты вируса, патогенного организма или клеточного гена, и фармацевтически приемлемый носитель. Олигонуклеотид имеет фосфоротиоатную и/или фосфородитиоатную связи, а также дезоксирибонуклеозид, рибонуклеозид или 2'-замещенный рибонуклеозид. Полученный гибридный олигонуклеотид позволяет эффективно регулировать генную экспрессию. 3 с. и 9 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 табл.

Description

Изобретение относится к синтетическим олигонуклеотидам, которые полезны в исследованиях генной экспрессии, и возможности использования антисмысловых олигонуклеотидов в терапевтических целях. Более конкретно, изобретение относится к синтетическим олигонуклеотидам, которые обладают улучшенными качествами для таких применений, являющимися результатом модификаций сахарофосфатного остова олигонуклеидов.
Возможность разработки терапевтического применения антисмысловых олигонуклеотидов была впервые предложена в трех статьях, опубликованных в 1977 и 1978 г, Paterson и др. Proc. Natl. Acad. Sci. США 74: 4370-4374 (1987) раскрывает, что трансляция мРНК в бесклеточной системе может быть ингибирована связыванием олигонуклеотида, комплементарного мРНК. Zamecnik и Stephenson, Proc. Natl. Acad. Sci. США 75: 280-284 и 285-288 (1978) раскрывает, что 13-мерный синтетический олигонуклеотид, который является комплементарным части генома вируса саркомы Рауса (RSV), ингибирует репликацию RSV в инфицированных фибробластах цыплят и ингибирует RSV - опосредованную трансформацию первичных фибробластов цыплят в злокачественные клетки саркомы.
Эти ранние указания того, что синтетические олигонуклеотиды можно использовать для ингибирования размножения вируса и неоплазии, сопровождались использованием синтетических олигонуклеотидов в ингибировании многих вирусов. Goodchild и др., патент США N 4806463 раскрывает ингибирование вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) синтетическими олигодезоксинуклеотидами, комплементарными разным областям генома ВИЧ. Leiter и др. Proc. Natl. Acad. Sci США 87; 3430-3434 (1990) раскрывает торможение вируса гриппа синтетическими олигонуклеотидами. Agris и др. Biochemistry 25: 6268-6275 (1986) раскрывает использование синтетических олигонуклеотидов в торможении вируса везикулярного стоматита (VSV). GaO и др. Antimicrob. Agents Chem. 34: 808-812 (1990) раскрывает торможение вируса простого герпеса синтетическими олигонуклеотидами. Birg и др. Nucleic Acids Res. 18: 2901-2908 (1990) раскрывает торможение вируса обезьян (SV40) синтетическими олигонуклеотидами. Storey и др. Nucleic Acids Res. 19: 4109-4114 (1991) раскрывает торможение вируса папилломы человека (HPV) синтетическими олигонуклеотидами. Применение синтетических олигонуклеотидов и их аналогов в качестве противовирусных агентов недавно было подробно описано Agrawal, Tibtech 10: 152-158 (1992).
Кроме того, синтетические олигонуклеотиды использовались для торможения множества невирусных патогенов, а также селективного торможения экспрессии некоторых клеточных генов.
Таким образом, полезность синтетических олигонуклеотидов как агентов в торможении размножения вирусов, размножения невирусных патогенов и селективной экспрессии клеточных генов конкретно установлена. Однако существует необходимость в улучшенных олигонуклеотидах, которые обладали бы большей эффективностью в торможении таких вирусов, патогенов и селективной экспрессии генов. Исследователи делали попытки получить и тестировать олигонуклеотиды с модификациями в их межнуклеотидных связях. Некоторые исследователи показали, что такие модифицированные олигонуклеотиды были эффективны, чем их немодифицированные аналоги. Sarin и др., Proc. Natl. Acad. Sci. США 85: 7448-7451 (1988) указывает, что метилфосфонаты олигодеоксинуклеозида более активны как ингибиторы ВИЧ-1, нежели обычные олигодеоксинуклеотиды. Agrawal и др., Proc. Natl. Acad. Sci. США 85: 7079-7083 (1988) утверждает, что фосфоротиоаты олигонуклеотидов и различные фосфорамидаты олигонуклеотидов более эффективны в торможении ВИЧ-1, чем обычные олигодезоксинуклеотиды. Agrawal и др. Proc. Natl. Acad. Sci. США 86: 7790-7794 (1989) раскрывает преимущество фосфоротиоатов олигонуклеотидов в торможении ВИЧ-1 в ранних и хронически инфицированных клетках.
Кроме того, были получены химерные олигонуклеотиды, имеющие более одного типа межнуклеотидной связи внутри олигонуклеотида. Химерные олигонуклеотиды содержат только деоксирибонуклеозиды, но имеют области, содержащие различные межнуклеотидные связи. Pederson и др. (патент США N 5XXXXXX /Сер. N 07/480269, выданный 12.24.91) раскрывает химерные олигонуклеотиды, имеющие сердцевинный олигонуклеотид с фосфодиэфирной или фосфоротиоатной связями, фланкированный фосфорамидатами, метилфосфонатами или фосфорамидатами олигонуклеотидов Furdon и др. Nucleic Acids Res. 17: 9193-9204 (1989) раскрывает химерные олигонуклеотиды, имеющие области фосфодиэфироволигонуклеотида в дополнение к другим областям фосфоротиоата или метилфосфоната олигонуклеотида. Quartin и др. Nucleic Acids Res. 17: 7523-7562 (1989) раскрывает химерные олигонуклеотиды, имеющие области фосфодиэфиров олигонуклеотида и метидфосфонатов олигонуклеотида. Каждое из вышеупомянутых соединений использует фосфоротиоаты деоксирибонуклеотида, которые снижают стабильность дуплекса. Atabekov и др. FEBS Letters 232: 9698 (1988) раскрывает химерные олигонуклеотиды, в которых все межнуклеотидные связи являются фосфодиэфирными связями, но в которых области олигорибонуклеотидов и олигодезоксирибонуклеотидов смешаны. Inoune и др. FEBS Letters 215: 237-250 (1967) раскрывает химерные олигонуклеотиды, имеющие только фосфодиэфирные связи, и области олигодезоксирибонуклеотидов и 2'-OMe-рибонуклеотидов. Ни одно из этих соединений, имеющих только фосфодиэфирные связи, не демонстрируют устойчивости ни к эндонуклеазе, ни к экзонуклеазе.
Многие из этих модифицированных олигонуклеотидов улучшили потенциальную эффективность терапевтического аспекта антисмыслового олигонуклеотида. Однако в известных олигонуклеотидах имеются определенные недостатки и эти недостатки могут ограничивать эффективность таких олигонуклеотидов как терапевтических агентов. Wickstrom, J. Biochem. Biophys. Methods 13: 97-0102 (1986) указывает, что олигонуклеиды с фосфодиэфирными связями восприимчивы к действию нуклеазы. Такая восприимчивость к нуклеазе может ограничить биопригодность олигонуклеидов ин виво. Agrawal и др. Proc. Natl. Acad. Sci. США 87: 1401-1405 (1990) указывает, что фосфорамидаты или метилфосфонаты олигонуклеотида при гибридизации с РНК не активируют РНКазу H, активация которой может быть важной для функции антисмысловых олигонуклеотидов. Agrawal и др. Nucleosides и Nucleotides 8: 5-6 (1989) утверждает, что фосфоротиоаты олигодезоксирибонуклеотида снижают стабильность дуплекса при гибридизации с РНК.
Следовательно существует потребность в улучшенных олигонуклеотидах, которые будут свободны от недостатков? известных в данной области техники. В идеале такие олигонуклеотиды должны быть устойчивы к нуклеолитическому распаду, должны образовывать стабильные дуплексы с РНК, и должны активировать РНКазу H при гибридизации с РНК.
Изобретение предлагает гибридные олигонуклеотиды, которые устойчивы к нуклеолитическому расщеплению, образуют стабильные дуплексы с РНК или ДНК, и активируют РНКазу H при гибридизации с РНК. Олигонуклеотидам в соответствии с изобретением такие характерные признаки прида.т наличие фосфоротиоатных или/и фосфородитиоатных межнуклеотидных связей и сегментов из олигодезоксирибонуклеотидов, а также сегментов из других олигорибонуклеотидов или 2'-замещенных-олигорибонуклеотидов. Для целей изобретения термин "2'-замещенный" означает замещение 2'-ОН молекулы рибозы, например, 2'-OMe, 2'-аллилом, 2'-арилом, 2'-алкилом, 2'-гало, или 2'-амино, но не 2'-H, в которых аллильные, арильные или алкильные группы могут быть незамещенными или замещенными, например, гало-, гидрокси-, трифторметилом-, циано-, нитро-, ацильной, ацилокси-, алкокси-, карбоксильной, карболкоксильной или аминогруппами.
Целью изобретения является получение олигонуклеотидов, которые можно использовать для анализа и объяснения важности эффективности параметров устойчивости к нуклеазе, стабильности дуплекса и активации РНКазы H в дантисмысловых олигонуклеотидах.
Другой целью изобретения является получение олигонуклеотидов, которые эффективны в регулировании клеточной, патогенной или вирусной генной экспрессии на уровне мРНК.
И еще одна цель изобретения - получение терапевтических олигонуклеотидов, которые обладают большей эффективностью.
Олигонуклеотиды по изобретению удовлетворяют всем поставленным целям и задачам изобретения.
На фиг. 1 показан ионообменный анализ ЖХВР олигонуклеотидов, обработанных нуклеазой. На панели A представлены профили A, B и C олигонуклеотидов F, C и A, соответственно после расщепления SVPD в течение 420 мин.
На фиг. 2 (панель B) профиль A представляет собой нерасщепленный олигонуклеотид с фосфодиэфирными связями профиль B - того же олигонуклеотида после 1-минутного расщепления SVPD.
На фиг. 3 и 4 представлены результаты исследований активации РНКазы H для олигонуклеотидов, как описано в примере 4.
В первом аспекте изобретение предусматривает олигонуклеотиды, которые нужны для изучения параметров, важных для эффективного действия антисмысловых олигонуклеотидов. Для целей изобретения термин олигонуклеотид включает полимеры из двух или нескольких рибонуклеотидов, дезоксирибонуклеотидов или тех и других с мономерами рибонуклеотида и/или деоксирибонуклеотида, соединенными через 5' - 3' связи, которые могут включать любые из связей, известных для антисмысловых олигонуклеотидов. Кроме того, термин олигонуклеотиды включает такие молекулы, которые имеют модифицированные основания нуклеиновой кислоты и/или сахара, а также молекулы с дополнительными заместителями, такими, как диамины, холестерил или другие липофильные группы. Некоторые предпочтительные комбинации мономеров и межмономерных связей подробно обсуждаются ниже.
Обычно считается, что активность антисмыслового олигонуклеотида зависит от связывания олигонуклеотида с целевой нуклеиновой кислотой, что нарушает функцию мишени либо остановкой гибридизации, либо разрушением целевой РНК РНКазой H. Эти механизмы действия предполагают, что для активности антисмыслового олигонуклеотида должны быть важны два параметра: стабильность дуплекса и активация РНКазы H. Стабильность дуплекса важна, поскольку предполагается, что олигонуклеотид должен образовать дуплекс (или триплекс в механизме хугстиновского спаривания) с целевой нуклеиновой кислотой, который направлен либо на остановку гибридизации, либо на разрушение мишени посредством РНКазы H. Активация РНКазы H (способность активировать РНКазу H при гибридизации с целевой РНК) имеет место, когда мишенью-нуклеиновой кислотой является РНК, и эта активация может повлечь эффективное разрушение молекулы мишени РНК. Кроме того, для того, чтобы антисмысловой олигонуклеотид действовал ин виво, он должен достаточно долго сохраняться, чтобы взаимодействовать с целевой нуклеиновой кислотой. Учитывая факт, что в среде ин виво сохраняется активность эндонуклеазы и экзонуклеазы, отсюда возникает третий параметр: а именно то, что антисмысловой олигонуклеотид должен быть устойчивым к нуклеолитическому расщеплению.
Чтобы проанализировать и объяснить важность каждого из этих параметров для эффективности антисмысловых олигонуклеотидов, нужно иметь олигонуклеотиды, которые меняются в каждом из этих параметров. Свойства нескольких известных олигонуклеотидов показаны в табл. 1.
1. Стабильность дуплекса олигонуклеотида к комплементарному олигорибонуклеотиду в физиологических условиях в сравнении с ДНК-РНК стабильностью.
2. Сравнение с ДНК (переваривание фосфодиэестеразой).
3. Активация РНКазы дуплексом, образованным между олигонуклеотидом и РНК.
Гибридные олигонуклеотиды по изобретению образуют более стабильные дуплексы с комплементарной РНК, чем фосфоротиоаты олигодезоксирибонуклеотида. Кроме того, они более устойчивы к эндонуклеазному и экзонуклеазному расщеплению, чем фосфоротиоаты олигодезоксирибонуклеотида, и они нормально активируют РНКазу H. Следовательно, олигонуклеотиды по изобретению дополняют олигонуклеотиды, показанные в табл.1 по параметрам, участвующим в эффективности антисмысловых олигонуклеотидов.
Что касается первого аспекта изобретения, олигонуклеотиды по изобретению могут иметь любую последовательность олигонуклеотида, так как комплементарные олигонуклеотиды, используемые в этом исследовании, можно получить с любой последовательностью олигонуклеотида. Олигонуклеотиды в соответствии с этим аспектом изобретения характеризуются только следующими характерными признаками. Первый, по меньшей мере некоторые из межнуклеотидных связей, присутствующих в олигонуклеотидах по изобретению, представляют собой фосфоротиоатные и/или фосфородитиоатные связи. В различных вариантах число межнуклеотидных связей фосфоротиоата и/или фосфородитиоата может колебаться от 1 до той цифры межнуклеотидных связей, которые присутствуют в олигонуклеотиде. Таким образом, для целей изобретения термин фосфоротиоат и/или фосфородитиоат охватывает любой такой вариант. В предпочтительном варианте число нуклеотидов по изобретению будет колебаться от около 2 до около 50 нуклеотидов, и более предпочтительно от около 6 до около 50 нуклеотидов. Таким образом, в этом предпочтительном варианте олигонуклеотиды по изобретению будут иметь от около 1 до 49 межнуклеотидных из фосфоротиоатных и/или фосфородитиоатных связей.
Второй чертой олигонуклеотидов по этому аспекту изобретения является наличие дезоксирибонуклеозидов. Олигонуклеотиды по изобретению содержат по меньшей мере один дезоксирибонуклеозид. Предпочтительно олигонуклеотиды по изобретению содержат четыре или больше дезоксирибонуклеозидов в смежном блоке, с тем, чтобы обеспечить активирующий сегмент для РНКазы H. В некоторых предпочтительных вариантах такой активирующий сегмент может быть не один, а несколько. Такие сегменты могут присутствовать в любом месте внутри олигонуклеотида. В олигонуклеотидах большинство может составлять дезоксирибонуклеозиды. В действительности нуклеозидами могут быть все, кроме одного, нуклеозида, который является дезоксирибонуклеозидом. Итак, в предпочтительном варианте при количестве от 2 до 50 нуклеозидов или лучше от 6 до 50 нуклеозидов, число присутствующих дезоксирибонуклеозидов будет составлять от 1 до около 49 деоксирибонуклеозидов.
Третьей характерной чертой олигонуклеотидов по этому аспекту изобретения является наличие рибонуклеозидов, 2'-замещенных рибонуклеозидов или их комбинаций. Для целей изобретения термин "2'-замещенный" означает замещение 2' - OH в молекуле рибозы, например, 2' - OMe, 2'- аллилом, 2'- арилом, 2' - алкилом, 2' - гало или 2' - амино, но не 2' - H, где аллильные, арильные или алкильные группы могут быть незамещенными или замещенными, например, гало-, гидрокси-, трифторметил-, циано-, нитро-, ацил-, ацилокси-, карбоксил-, карбалкоксил-, или аминогруппами. Олигонуклеотиды по изобретению содержат по меньшей мере один рибонуклеозид и/или 2'-замещенный рибонуклеозид. В предпочтительном варианте такие олигонуклеотиды имеют 6 или больше рибонуклеозидов и/или 2'-замещенных рибонуклеозидов для усиления стабильности дуплекса. Такие рибонуклеозиды и/или 2'-замещенные рибонуклеозиды могут присутствовать как единицы, парами или большими смежными сегментами, и могут находиться в любой позиции внутри олигонуклеотида или во множественных позициях внутри олигонуклеотида. Такими рибонуклеозидами и/или 2'-замещенными рибонуклеозидами могут быть все, кроме одного нуклеозида внутри олигонуклеозидов. Таким образом, в предпочтительном варианте с числом от 2 до 50 нуклеозидов, количество рибонуклеозидов или 2'-замещенных рибонуклеозидов будет колебаться от около 1 до около 49 деоксирибонуклеозидов.
Возможность изменять количества и позиции фосфоротиоатных и/или фосфородитиоатных межнуклеотидных сцеплений, деоксирибонуклеозидов и рибонуклеозидов или 2'-замещенных рибонуклеозидов позволяет исследователю подробно рассмотреть, как каждая из этих переменных влияет на параметры устойчивости к нуклеазе, стабильности дуплекса и активации РНКазы H. Способность менять размер олигонуклеотида позволяет рассмотреть еще один параметр. Кроме того, небольшие олиго (например, димеры) можно использовать как строительные блоки для более крупных олиго. Таким образом, каждый такой возможный вариант, описанный выше, полезен в таких исследованиях.
Во втором аспекте изобретение предусматривает гибридные олигонуклеотиды, которые эффективны в ингибировании вирусов, патогенных организмов или экспрессии клеточных генов. Способность ингибировать такие агенты очень важна для лечения ряда болезней. Олигонуклеотиды по этому аспекту изобретения разделяют характеристики вышеописанных олигонуклеотидов, за исключением того, что последовательность олигонуклеотидов по этому аспекту изобретения является комплементарной последовательности нуклеиновой кислоты вируса, патогенного организма или клеточного гена. Предпочтительно такие олигонуклеотиды по длине составляют от 6 до около 50 нуклеотидов. Для целей изобретения термин "последовательность олигонуклеотида, которая комплементарна последовательности нуклеиновой кислоты" означает последовательность олигонуклеотида (2 - около 50 нуклеотидов), которая гибридизируется с последовательностью нуклеиновой кислоты в физиологических условиях, например, спариванием оснований по Уотсону-Крику (взаимодействие между олигонуклеотидом и одноцепочечной нуклеиновой кислотой) или хугстиновским спариванием оснований (взаимодействие между олигонуклеотидом и двухцепочечной нуклеиновой кислотой) или другими способами. Такая гибридизация в физиологических условиях измеряется практически наблюдением интерференции с функцией последовательности нуклеиновой кислоты.
Последовательность нуклеиновой кислоты, к которой по изобретению олигонуклеотид является комплементарным, будет меняться в зависимости от агента, который тормозится.
Во многих случаях последовательность нуклеиновой кислоты будет последовательностью вирусной нуклеиновой кислоты. Использование антисмысловых олигонуклеотидов для торможения активности различных вирусов хорошо известно и недавно упоминалось в Agrawal, Tibteеh 10:152 - 158 (1992). Последовательности вирусной нуклеиновой кислоты, которые комплементарны эффективным антисмысловым олигонуклеотидам, описывались для многих вирусов, включая вирус иммунодефицита человека типа I (патент США N 4806463), вирус простого герпеса (патент США N 4689320), вирус гриппа (патент США N 5XXXXXX сер N 07/516275, выданный 30.06.92), вирус папилломы человека (Storey и др., Nucleic Acids Res. 19:4109 - 4114 (1991)). Последовательности, комплементарные любой из последовательностей нуклеиновой кислоты, можно использовать для олигонуклеотидов по изобретению, как и последовательности олигонуклеотида могут быть комплементарными последовательностями нуклеиновой кислоты из любого другого вируса. Дополнительные вирусы, которые имеют известные последовательности нуклеиновой кислоты, против которых можно получить антисмысловые олигонуклеотиды, включают вирус ящура (cм. Robertson и др., J. Virology 54:651 /1985/; Harris и др. J. Virology 36:659/1980/), вирус желтой лихорадки (cм. Rice и др. Science 229:726 /1985/), вирус ветряной оспы (c м. Davison и Scott, J. Gen. Virology 67:2279 /1986/), и вирус мозаики огурца (см. Richards и др., Virology 89:395 /1978/).
В другом варианте олигонуклеотиды по изобретению могут иметь олигонуклеотидную последовательность, комплементарную последовательность нуклеиновой кислоты патогенного организма. Были описаны последовательности нуклеиновой кислоты многих патогенных организмов, включая малярийный патоген, Plasmodium falciparum многих патогенных бактерий. Олигонуклеотидные последовательности, комплементарные последовательностям нуклеиновой кислоты из любого такого патогенного организма, можно использовать в олигонуклеотидах по изобретению. Примеры патогенных эукариотов, имеющих известные последовательности нуклеиновой кислоты, против которых можно получить антисмысловые олигонуклеотиды, включают Trypanosoma brucei gambience и Leishmania (см. Campbell и др., Nature 311: 350 /1984/), Fasciola hepatica см, Zurita и др. Proc. Natl. Acad. Sci. США 84: 2340 /1987/). Противогрибковые олигонуклеотиды могут быть приготовлены, используя гибридизующийся район, имеющий олигонуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности, например, гена хитинсинтетазы, и противобактериальные олигонуклеотиды можно получить, используя, например, ген аланинрацемазы.
Еще в одном варианте олигонуклеотиды по изобретению могут иметь олигонуклеотидную последовательность, комплементарную клеточному гену или транскрипту гена, аномальная экспрессия или продукт которого приводит к состоянию заболевания. Были описаны нуклеотидные последовательности нескольких таких клеточных генов, включая прион-белок (Stahl и Prosiner, FASEB J.5: 2799 - 2807 /1991/), амилоидподобный белок, связанный с болезнью Альцгеймера (патент США N 5015570), и различные хорошо известные онкогены и прото-онкогены, такие как c-myb, c-myc, c-abe и n-ras. Кроме того, олигонуклеотиды, которые тормозят синтез структурных белков или ферментов, исключительно или значительно вовлеченных в сперматогенез, подвижность спермы и связанные спермы с яйцеклеткой или любую другую стадию, влияющую на жизнеспособность спермы, можно использовать как контрацептивы для мужчин. Аналогичным образом контрацептивами для женщин могут быть олигонуклеотиды, которые тормозят белки или ферменты, вовлеченные в овуляцию, оплодотворение, имплантацию или в биосинтез гормонов, участвующих в этих процессах.
Гипертензию можно контролировать олигодезоксинуклеотидами, которые подавляют синтез фермента, преобразующего ангиотензин или родственные ферменты в системе ренин/ангиотензин; агрегацию тромбоцитов можно контролировать подавлением синтеза ферментов, необходимых для синтеза тромбоксана A2 для использования в миокардических и церебральных нарушениях кровообращения, при инфарктах, атеросклерозе, эмболии и тромбозе; отложения холестерина в артериальных стенках можно затормозить подавлением синтеза ко-фермента A: холестеролацилтрансферазы при артериосклерозе; торможение синтеза холинфосфотрансферазы может быть полезным в гиполипидемии.
Существует много нервных расстройств, для которых остановка гибридизации может использоваться для снижения или снятия вредных воздействий расстройств. Например, подавление синтеза моноаминоксидазы можно использовать в болезни Паркинсона; подавление катехол о-метилтрансферазы можно использовать в лечении депрессии; и подавление индол N-метилтрансферазы можно использовать в лечении шизофрении.
Подавление выбранных ферментов в каскаде активации арахидоновой кислоты, который ведет к простагландинам и лейкотриенам, может быть полезным в контроле агрегации тромбоцитов, аллергии, воспалений, боли и астмы.
Подавление белка, экспрессированного геном устойчивости ко многим лекарствам (mdr), который отвечает за развитие устойчивости к множеству противораковых лекарственных средств и является основным сдерживающим фактором в химиотерапии, может оказаться полезным в лечении рака. Последовательности олигонуклеотида, комплементарные нуклеотидным последовательностям любого из этих генов, можно использовать для олигонуклеотидов по изобретению, как и последовательности олигонуклеотида могут быть комплементарными любому другому клеточному гену или транскрипту гена, аномальная экспрессия или продукт которого приводит к состоянию болезни.
Антисмысловая регуляция экспрессии гена в клетках растений была описана в патенте США N 5107065.
В третьем аспекте изобретение предлагает терапевтические фармацевтические препараты олигонуклеотидов, которые эффективны в лечении вирусных инфекций, инфекций, вызванных патогенными организмами, или заболевания, являющегося результатом аномальной экспрессии гена или экспрессии продукта аномального гена. Такие фармацевтические терапевтические препараты включают олигонуклеотиды в соответствии со вторым аспектом изобретения в фармацевтически приемлемом носителе.
В четвертом аспекте изобретение предусматривает способ торможения экспрессии гена вируса, патогенного организма или клеточного гена, при этом способ включает этап задачи олигонуклеотидов к клеткам, зараженным вирусом или патогенным организмом в первых двух случаях, или к клеткам вообще в последнем случае. Такие методы полезны в изучении генной экспрессии и функции специфических генов.
В пятом аспекте изобретение предусматривает метод лечения больного человека или животного, болезнь которого является результатом заражения вирусом или патогенным организмом, или аномальной экспрессии или аномального продукта клеточного гена. Метод включает назначение терапевтических фармацевтических препаратов олигонуклеотидов в соответствии с изобретением заболевшему человеку или животному. Предпочтительно способы такого назначения будут включать оральное, внутриносовое, ректальное и местное назначения. В таких методах лечения по изобретению олигонуклеотиды могут назначаться вместе с другими терапевтическими агентами, например AZT в случае СПИДА.
Множество вирусных заболеваний можно лечить методом в соответствии с изобретением, включая СПИД, ARC, оральный или генитальный герпес, бородавки папилломы, грипп, ящур, желтую лихорадку, ветряную оспу, опоясывающий лишай, лейкемию, вызванную вирусом человеческого T-клеточного лейкоза и гепатит. Среди грибковых заболеваний, поддающихся лечению методом по изобретению, такие заболевания, как кандидоз, криптококкоз, гистоплазмоз, бластомикоз, аспергиллез, споротрихоз, хромомикоз, дерматофитоз и кокцидиоидоз. Метод может также использоваться для лечения заболеваний, вызванных риккетсиями (например, тифа, американского клещевого риккетсиоза), а также заболеваний, передающихся половым путем, вызванных Chlamydia trachomatis или Lymphogranuloma venereum. Многие паразитарные заболевания можно лечить способом по изобретению, включая амебиаз, болезнь Шагаса, токсоплазмоз, пневмоцистоз, лямблиоз, криптоспоридиоз, трихомоноз и пневмонию Pheumocystis carini, а также гельминтозы, такие как аскаридоз, филяриатоз, трихинеллез, шистосомоз и заражения нематодами и цестодами. Малярию можно лечить способом, который предлагает изобретение, независимо от того, вызывается ли она P. falciparum, P. vivax, P. orale или P. malarial.
Все инфекционные заболевания, указанные выше, можно лечить способом по изобретению, поскольку инфекционные агенты этих заболеваний известны и можно получить олигонуклеотиды в соответствии с изобретением с такой нуклеотидной последовательностью, которая комплементарна нуклеотидной последовательности, являющейся существенной для размножения инфекционного агента, такой как существенный ген.
Другие состояния болезни, которые лечатся способом по изобретению, являются результатом аномальной экспрессии или аномального продукта клеточного гена. Эти состояния можно лечить назначением олигонуклеотидов по изобретению и обсуждалось в этом раскрытии выше.
Олигонуклеотиды по изобретению можно синтезировать процедурами, которые хорошо известны в области техники. Другим предпочтительным способом синтеза таких олигонуклеотидов является способ, использующий подход H-фосфоната, описанный в патенте США N 5XXXXXX, Сер. N 07/334679, выданный 10.03.92, и в Agrawal и Tang, Tetrahedron Lett. 31: 7541-7544 (1990). Олигонуклеотиды по изобретению можно сделать еще более устойчивыми к нуклеолитическому расщеплению добавлением кэп-структур на 5' и/или 3' конца.
Следующие примеры далее иллюстрируют некоторые предпочтительные варианты изобретения и не являются ограничительными.
Пример 1. Синтез гибридных олигонуклеотидов с фосфоротионатными связями.
Гибридные олигонуклеотидфосфоротиоаты были синтезированы на CPG на 5-6 μ мольной шкале автоматизированного синтезатора/модель 8700, Millipore, Milford МА/ с использованием подхода H-фосфоната, описанного в патенте США N 5XXXXXX (Сер. N 07/344679, выдан 19.03.92 г), H-фосфонаты деоксинуклеозида были получены от Millipore 2' - OMe H-фосфонаты рибонуклеотида были синтезированы стандартными процедурами. Сегменты олигонуклеотидов, содержащих 2'-OMe нуклеозид, собирались с использованием H-фосфонатов 2'-OMe рибонуклеозида для нужных циклов. Аналогичным образом сегменты олигонуклеотидов, содержащих деоксирибонуклеозиды, собирались с использованием H-фосфонатов деоксинуклеозида для нужных циклов. После сборки связанный с CPC H-фосфонат олигонуклеотида окислялся серой, чтобы образовать фосфоротиоатную связь. Затем олигонуклеотиды подвергались снятию защиты в концентрированной H4OH при 40oC 48 ч.
Сырой олигонуклеотид (около A260 единиц) анализировался жидкостной хроматографией низкого давления с обращенной фазой на среде обращенной фазы C18. Группы ДМТ удалялись обработкой 80%-ной водной уксусной кислотой, затем олигонуклеотиды диализовались против дистиллированной воды и лиофилизировались.
Пример 2. Относительная устойчивость к нуклеазе гибридных олигонуклеотидов с фосфоротиоатными связями.
Чтобы проверить относительную устойчивость к нуклеазе гибридных олигонуклеотидов с фосфонотиоатными связями олигонуклеотиды обрабатывались фосфодиэстеразой змеиного яда (SVPD). Около 0.2 A260 единиц олигонуклеотидов A, C и F растворялись в 500 μл буфера (49 мМ NH4CO3, pH 0.4 + 20 мМ MgCl2) и смешивались с 0.002 единицами SVPD. Смесь инкубировалась при 37oC 420 мин. После 0, 200 и 420 мин брались аликвоты в 165 μл и анализировались с использованием ионообменной ЖХВР. Результаты показаны на фиг.1. Олигонуклеотид F был очень устойчив к фосфодиэстеразе, в то время как олигонуклеотид A расщеплялся почти полностью и олигонуклеотид C расщеплялся на 50% (панель A).
Олигонуклеотид с фосфодиэкрирными связями расщеплялся примерно на 80% в течение минуты с использованием 1/10 части концентрации SVPD.
Эти результаты показывают, что присутствие 2'-OMe рибонуклеозидов в фосфоротиоате олигонуклеотида усиливает устойчивость к экзонуклеазному расщеплению, и что эта усиленная устойчивость повышается при использовании большей пропорции 2'-OMe рибонуклеотидов. Учитывая схожий характер и поведение рибонуклеотидов, других 2'-замещенных рибонуклеотидов и 2'-OMe рибонуклеотидов, эти результаты также предполагают, что подобное усиление устойчивости к нуклеазе будет иметь место и в фосфоротиоатах и/или фосфородитиоатах гибридного олигонуклеотида, имеющего рибонуклеотиды, 2'-замещенные рибонуклеотиды или смесь рибонуклеотидов и 2'-замещенных рибонуклеотидов.
Пример 3. Относительная стабильность дуплекса гибридных олигонуклеотидов с фосфоротиоатными связями.
Олигонуклеотиды A - F тестировались на относительную стабильность дуплексов, образованных с комплементарными олигодезоксирибонуклеотидами, и с комплементарными олигорибонуклеотидами. В отдельных реакциях каждый олигонуклеотид A - F смешивался с эквивалентным количеством (0.2 A260 единиц) его комплементарного олигонуклеотида в 150 мМ NaCl, 10 мМ Na2PO4, 1 мМ ЭТДК, pH 7. Смесь нагревалась до 85oC 5 мин, затем охлаждалась до 30oC. Затем температура повышалась с 30 до 80oC со скоростью 1oC в минуту и A260 регистрировалась как функция температуры. Результаты показаны в табл.3.
Эти результаты выявляют, что если комплементарным олигонуклеотидом является олигорибонуклеотид, присутствие 2'-OMe рибонуклеотидов усиливает стабильность дуплекса, и что это усиление повышается с увеличением пропорций 2'-OMe рибонуклеозидов. Эти результаты следует аналогичным образом относить и к фосфоротиоатам и/или фосфородитиоатам гибридного олигонуклеотида, содержащим рибонуклеотиды, 2'-замещенные рибонуклеотиды или смеси рибонуклеотидов и 2'-замещенных рибонуклеотидов. Таким образом, фосфоротиоаты и/или фосфородитиоаты гибридного олигонуклеотида по изобретению должны связывать вирусную РНК или вирус, патогенный организм или клеточную мРНК с большим сродством, чем обычные фосфоротиоаты олигодеоксинуклеотида.
Пример 4. Активация РНКазы H гибридными олигонуклеотидами с фосфоротиоатными связями
Олигонуклеотидфосфоротиоаты и различные гибридные олигонуклеотидфосфоротиоаты исследовались на свои свойства активации РНКазы H. Олигонуклеотид A (табл. 2), фосфоротиоат олигонуклеотида, который, как известно, активирует РНКазу H, использовался как контроль. Олигонуклеотид F/2'-OMe аналог фосфоротиоата олигонуклеотида/ и олигонуклеотиды C, B и E, гибридные олигонуклеотиды, исследовались на способность активировать РНКазу H.
Для проведения эксперимента комплементарный 32-мерный олигорибонуклеотид был синтезирован (фиг. 3) и обрабатывался киназой на 5'-конце, 32P-меченая 32-мерная РНК /0.003 A260 единиц; 0.01 μг / и олигонуклеотиды /0.0635 A260 единиц; 1.9 μг / смешивались в 20 μл буфера /0.15 М NaCl, 0.01 MgCl2, 0.01 М хлорида Трис, pH 7.9/, содержащие 0.001М ДТТ. Смесь инкубировалась с 6 единицами РНКазы H /E.coli/ при 37oC. Аликвоты в 4.5 μл отбирались на 0, 15, 30 и 60 мин и анализировались электрофорезом на полиакриламидном геле.
Олигонуклеотид A (Дуплекс A) показал сайт-специфическое расщепление РНК РНКазой H. Олигонуклеотид F/2'-OMe аналог; Дуплекс B/ не показал расщепления РНК в присутствии РНКазы H. Гибридные олигонуклеотиды B, C и E /Дуплексы C, D, E соответственно/ показали сайт-специфическое расщепление РНК РНКазой H. Дуплекс F, в котором исследовался несовместимый фосфоротиоат олигонуклеотида, не показал расщепления РНК. Ряд C показывает, что в присутствии РНКазы H РНК не расщепилась.
Пример 5. Торможение ВИЧ гибридными олигонуклеотидами с фосфоротиоатными связями
Гибридные олигонуклеотидфосфоротиоаты тестировались на их способность тормозить ВИЧ-1 в тканевой культуре, H9 лимфоциты инфицировались вирионами ВИЧ-1 /=0.01 - 0.1 TCID50/ клетку/ 1ч при 37oC. После 1 ч неадсорбированные варионы смывались и инфицированные клетки делились по лункам 24-луночного планшета. К инфицированным клеткам добавлялась соответствующая концентрация (из исходного раствора) олигонуклеотида, чтобы получить нужную концентрацию в среде 2 мл. В положительном контрольном эксперименте добавлялись ddC или AZT. Затем клетки культивировались 3 дня. В конце трех дней надосадочный слой с инфицированной культуры собирался и измерялся на экспрессию p 24 твердофазным иммуноферментным анализом (ELISA). Уровень экспрессии p24 сравнивался между обработанными и необработанными (без лекарств) инфицированными клетками олигонуклеотида.
Все тестируемые гибридные олигонуклеотидфосфоротиоаты показали значительное торможение экспрессии p 24 при μг г/мл концентрациях без значительной цитотоксичности (данные не показаны). Эти результаты указывают, что фосфоротиоаты гибридного олигонуклеотида, содержащие 2'-OMe рибонуклеотиды, эффективны как ингибиторы экспрессии генов. Аналогичной эффективности следует ожидать от фосфоротиоатов и/или фосфородитиоатов олигонуклеотида, содержащих рибонуклеозиды, 2'-замещенные рибонуклеозиды или смесь рибонуклеозидов и 2'-замещенных рибуноклеозидов.

Claims (12)

1. Гибридный олигонуклеотид, содержащий фосфоротиоатную и/или фосфородитиоатную связи и включающий дезоксирибонуклеозид, рибонуклеозид или 2'-замещенный рибонуклеозид и фосфоротиоатную и/или фосфородитиоатную межнуклеотидную связь.
2. Олигонуклеотид по п. 1, отличающийся тем, что дезоксирибонуклеозид присутствует в сегменте по меньшей мере четырех смежных дезоксирибонуклеозидов.
3. Олигонуклеотид по п.1, отличающийся тем, что рибонуклеозид или 2'-замещенный рибонуклеозид присутствует в сегменте по меньшей мере двух смежных рибонуклеозидов и/или 2'-замещенных рибонуклеозидов.
4. Олигонуклеотид по п.1, отличающийся тем, что имеет последовательность олигонуклеотида, которая комплементарна нуклеотидной последовательсности вируса, патогенного организма или клеточного гена.
5. Олигонуклеотид по п.2, отличающийся тем, что имеет последовательность олигонуклеотида, которая комплементарна нуклеотидной последовательности вируса, патогенного организма или клеточного гена.
6. Олигонуклеотид по п.3, отличающийся тем, что имеет последовательность олигонуклеотида, которая комплементарна нуклеотидной последовательности вируса, патогенного организма или клеточного гена.
7. Терапевтическая фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество олигонуклеотида, имеющего последовательность, комплементарную последовательности нуклеиновой кислоты вируса, патогенного организма или клеточного гена, и фармацевтически приемлемый носитель, отличающаяся тем, что упомянутый олигонуклеотид представляет собой олигонуклеотид по п.1.
8. Композиция по п. 7, отличающаяся тем, что дезоксирибонуклеозид присутствует в сегменте из по крайней мере четырех смежных дезоксирибонуклеозидов.
9. Композиция по п.7, отличающаяся тем, что рибонуклеозид или 2'-замещенный рибонуклеозид присутствует в сегменте из по крайней мере двух смежных рибонуклеозидов и/или 2'-замещенных рибонуклеозидов.
10. Способ ингибирования генной экспрессии вируса, патогенного организма или клеточного газа, включающий контактирование клетки, инфицированной упомянутым вирусом или содержащей упомянутый организм или ген, с устойчивой к нуклеазе, однонитевой, не встречающейся в природе молекулой олигонуклеотида, включающей в себя дезоксирибонуклеозид, рибонуклеозид или 2'-замещенный рибонуклеозид, причем нуклеотидная последовательность упомянутой молекулы комплементарна последовательности нуклеиновой кислоты вируса, патогенного организма или клеточного гена, отличающийся тем, что контактирование клетки осуществляют с молекулой олигонуклеотида, содержащей фосфоротиоатную и/или фосфородитиоатную межнуклеотидную связь.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что дезоксирибонуклеозид присутствует в сегменте из по крайней мере четырех смежных дезоксирибонуклеозидов.
12. Способ по п.10, отличающийся тем, что рибонуклеозид или 2'-замещенный рибонуклеозид присутствует в сегменте из по крайней мере двух смежных рибонуклеозидов и/или 2'-замещенных рибонуклеозидов.
RU95107191A 1992-07-23 1993-07-22 Гибридный олигонуклеотид, содержащий фосфоротиоатную и/или фосфородитиоатную связи, терапевтическая фармацевтическая композиция, способ ингибирования генной экспрессии RU2115658C1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/918,239 US5652355A (en) 1992-07-23 1992-07-23 Hybrid oligonucleotide phosphorothioates
US07/918239 1992-07-23

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU95107191A RU95107191A (ru) 1996-12-10
RU2115658C1 true RU2115658C1 (ru) 1998-07-20

Family

ID=25440047

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU95107191A RU2115658C1 (ru) 1992-07-23 1993-07-22 Гибридный олигонуклеотид, содержащий фосфоротиоатную и/или фосфородитиоатную связи, терапевтическая фармацевтическая композиция, способ ингибирования генной экспрессии

Country Status (17)

Country Link
US (1) US5652355A (ru)
EP (1) EP0650493B1 (ru)
JP (1) JPH08502040A (ru)
AT (1) ATE198073T1 (ru)
AU (1) AU674158B2 (ru)
BR (1) BR9306775A (ru)
CA (1) CA2140649C (ru)
CZ (1) CZ292299B6 (ru)
DE (1) DE69329755T2 (ru)
DK (1) DK0650493T3 (ru)
ES (1) ES2154649T3 (ru)
FI (1) FI950254L (ru)
HU (1) HUT73323A (ru)
NZ (1) NZ255087A (ru)
PL (1) PL307232A1 (ru)
RU (1) RU2115658C1 (ru)
WO (1) WO1994002498A1 (ru)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2286801C2 (ru) * 2001-05-01 2006-11-10 Институт Нефтехимического Синтеза Имени А.В. Топчиева Российской Академии Наук Двухфазные биоадгезионные композиции, абсорбирующие воду
WO2018156056A1 (ru) * 2017-02-21 2018-08-30 Дмитрий Александрович СТЕЦЕНКО Модифицированные олигонуклеотиды, активирующие рнказу н
US11208430B2 (en) 2014-08-22 2021-12-28 Noogen Llc Modified oligonucleotides and methods for their synthesis

Families Citing this family (503)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6399754B1 (en) * 1991-12-24 2002-06-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Sugar modified oligonucleotides
US5955589A (en) * 1991-12-24 1999-09-21 Isis Pharmaceuticals Inc. Gapped 2' modified oligonucleotides
US5623065A (en) * 1990-08-13 1997-04-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped 2' modified oligonucleotides
US7015315B1 (en) 1991-12-24 2006-03-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped oligonucleotides
US5965722A (en) * 1991-05-21 1999-10-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibition of ras gene with chimeric and alternating oligonucleotides
US6335434B1 (en) 1998-06-16 2002-01-01 Isis Pharmaceuticals, Inc., Nucleosidic and non-nucleosidic folate conjugates
US8153602B1 (en) 1991-11-19 2012-04-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Composition and methods for the pulmonary delivery of nucleic acids
US5856455A (en) * 1991-12-24 1999-01-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped 2'-modified oligonucleotides
DK1695979T3 (da) 1991-12-24 2011-10-10 Isis Pharmaceuticals Inc Gappede modificerede oligonukleotider
US20070032446A1 (en) * 1991-12-24 2007-02-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped 2' modified oligonucleotides
US6346614B1 (en) * 1992-07-23 2002-02-12 Hybridon, Inc. Hybrid oligonucleotide phosphorothioates
TW244371B (ru) * 1992-07-23 1995-04-01 Tri Clover Inc
IL107150A0 (en) * 1992-09-29 1993-12-28 Isis Pharmaceuticals Inc Oligonucleotides having a conserved g4 core sequence
DE69334100T2 (de) * 1992-11-13 2007-07-19 Immunex Corp., Seattle Elk ligand, ein cytokin
DE69433036T2 (de) 1993-09-03 2004-05-27 Isis Pharmaceuticals, Inc., Carlsbad Aminoderivatisierte nukleoside und oligonukleoside
US5591721A (en) * 1994-10-25 1997-01-07 Hybridon, Inc. Method of down-regulating gene expression
US6645943B1 (en) 1994-10-25 2003-11-11 Hybridon, Inc. Method of down-regulating gene expression
US6608035B1 (en) 1994-10-25 2003-08-19 Hybridon, Inc. Method of down-regulating gene expression
JPH11511112A (ja) * 1995-02-10 1999-09-28 ユニバーシティ・オブ・マサチューセッツ 外因性化合物の送達
AU5325696A (en) * 1995-04-03 1996-10-23 Hybridon, Inc. Method of modulating gene expression without depleting compl ement
US5750341A (en) * 1995-04-17 1998-05-12 Lynx Therapeutics, Inc. DNA sequencing by parallel oligonucleotide extensions
US6458940B2 (en) * 1995-06-06 2002-10-01 Hybridon, Inc. HPV-specific oligonucleotides
US6509149B2 (en) * 1995-06-06 2003-01-21 Hybridon, Inc. HPV-specific oligonucleotides
US20030055240A1 (en) * 1995-06-06 2003-03-20 Roberts Peter C. HPV specific oligonucleotides
US5969117A (en) * 1995-08-17 1999-10-19 Hybridon, Inc. Modified protein kinase a-specific oligonucleotide
US7074768B2 (en) 1995-08-17 2006-07-11 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modified protein kinase A-specific oligonucleotides and methods of their use
US6624293B1 (en) 1995-08-17 2003-09-23 Hybridon, Inc. Modified protein kinase A-specific oligonucleotides and methods of their use
US5652356A (en) * 1995-08-17 1997-07-29 Hybridon, Inc. Inverted chimeric and hybrid oligonucleotides
US6440660B1 (en) 1995-11-17 2002-08-27 Hybridon, Inc. Oligonucleotide mediated reversal of drug resistance
ES2221039T3 (es) 1996-02-14 2004-12-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotidos abiertos modificados con azucar.
AU2215097A (en) * 1996-03-14 1997-10-01 Hybridon, Inc. Selected oligonucleotides with anti-cytomegalovirus activity
US7812149B2 (en) 1996-06-06 2010-10-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2′-Fluoro substituted oligomeric compounds and compositions for use in gene modulations
US20030044941A1 (en) 1996-06-06 2003-03-06 Crooke Stanley T. Human RNase III and compositions and uses thereof
US5898031A (en) 1996-06-06 1999-04-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligoribonucleotides for cleaving RNA
US6776986B1 (en) 1996-06-06 2004-08-17 Novartis Ag Inhibition of HIV-1 replication by antisense RNA expression
US9096636B2 (en) * 1996-06-06 2015-08-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation
US5856462A (en) * 1996-09-10 1999-01-05 Hybridon Incorporated Oligonucleotides having modified CpG dinucleosides
US5849902A (en) * 1996-09-26 1998-12-15 Oligos Etc. Inc. Three component chimeric antisense oligonucleotides
US6958239B2 (en) 1996-11-21 2005-10-25 Oligos Etc Inc. Three component chimeric antisense oligonucleotides
US6291667B1 (en) 1997-01-31 2001-09-18 Parkash S. Gill Method and composition for treatment of kaposi's sarcoma
US20020165174A1 (en) * 1997-01-31 2002-11-07 Gill Parkash S. Methods and compositions for antisense VEGF oligonucleotides
AU6328498A (en) * 1997-02-21 1998-09-09 Hybridon, Inc. Oligonucleotides specific for the (marorab) operon
WO1998049287A2 (en) * 1997-04-30 1998-11-05 Hybridon, Inc. Antisense oligonucleotides specific for thymidylate synthase
ATE321882T1 (de) 1997-07-01 2006-04-15 Isis Pharmaceuticals Inc Zusammensetzungen und verfahren zur verabreichung von oligonukleotiden über die speiseröhre
CA2300352A1 (en) * 1997-08-19 1999-02-25 Hybridon, Inc. Novel hiv-specific synthetic oligonucleotides and methods of their use
US6013786A (en) * 1997-08-22 2000-01-11 Hybridon, Inc. MDM2-specific antisense oligonucleotides
US6066625A (en) 1998-02-03 2000-05-23 Methylgene, Inc. Optimized antisense oligonucleotides complementary to DNA methyltransferase sequences
US6238921B1 (en) * 1998-03-26 2001-05-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide modulation of human mdm2 expression
AU3465599A (en) * 1998-04-01 1999-10-18 Hybridon, Inc. Mixed-backbone oligonucleotides containing pops blocks to obtain reduced phosphorothioate content
US20040186071A1 (en) 1998-04-13 2004-09-23 Bennett C. Frank Antisense modulation of CD40 expression
US7321828B2 (en) 1998-04-13 2008-01-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. System of components for preparing oligonucleotides
EP1071753A2 (en) 1998-04-20 2001-01-31 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Nucleic acid molecules with novel chemical compositions capable of modulating gene expression
CA2329130A1 (en) 1998-05-21 1999-11-25 Isis Pharmaceuticals Inc. Compositions and methods for non-parenteral delivery of oligonucleotides
US6841539B1 (en) 1998-05-21 2005-01-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for topical delivery of oligonucleotides
US6077709A (en) 1998-09-29 2000-06-20 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of Survivin expression
BR9914465A (pt) 1998-09-29 2001-10-09 Gamida Cell Ltd Métodos para controlar a proliferação e a diferenciação de células-tronco e células progenitoras e uma composição farmacêutica para induzir a diferenciação em uma população de células
US6172216B1 (en) * 1998-10-07 2001-01-09 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of BCL-X expression
US6214986B1 (en) * 1998-10-07 2001-04-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of bcl-x expression
US20040242521A1 (en) * 1999-10-25 2004-12-02 Board Of Regents, The University Of Texas System Thio-siRNA aptamers
US6867289B1 (en) * 1998-10-26 2005-03-15 Board Of Regents, The University Of Texas Systems Thio-modified aptamer synthetic methods and compositions
US6087112A (en) * 1998-12-30 2000-07-11 Oligos Etc. Inc. Arrays with modified oligonucleotide and polynucleotide compositions
US20030180789A1 (en) * 1998-12-30 2003-09-25 Dale Roderic M.K. Arrays with modified oligonucleotide and polynucleotide compositions
US6127124A (en) 1999-01-20 2000-10-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Fluorescence based nuclease assay
US20030220486A1 (en) * 1999-04-01 2003-11-27 Wen-Qiang Zhou Mixed backbone oligonucleotides containing pops blocks to obtain reduced phosphorothioate content
US6140124A (en) * 1999-04-06 2000-10-31 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of P38 mitogen activated protein kinase expression
US20040171566A1 (en) * 1999-04-06 2004-09-02 Monia Brett P. Antisense modulation of p38 mitogen activated protein kinase expression
US7098192B2 (en) 1999-04-08 2006-08-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide modulation of STAT3 expression
US20030078216A1 (en) * 1999-05-03 2003-04-24 Macleod A. Robert Inhibition of histone deactylase
US6656730B1 (en) 1999-06-15 2003-12-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides conjugated to protein-binding drugs
US6677445B1 (en) 1999-08-27 2004-01-13 Chiron Corporation Chimeric antisense oligonucleotides and cell transfecting formulations thereof
US6617442B1 (en) 1999-09-30 2003-09-09 Isis Pharmaceuticals, Inc. Human Rnase H1 and oligonucleotide compositions thereof
US20030190644A1 (en) 1999-10-13 2003-10-09 Andreas Braun Methods for generating databases and databases for identifying polymorphic genetic markers
US6261840B1 (en) 2000-01-18 2001-07-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of PTP1B expression
US20020055479A1 (en) 2000-01-18 2002-05-09 Cowsert Lex M. Antisense modulation of PTP1B expression
WO2003006652A2 (en) 2000-03-24 2003-01-23 Methylgene, Inc. Inhibition of specific histone deacetylase isoforms
ES2410907T5 (es) † 2000-03-30 2019-08-20 The Whitehead Institute For Biomedical Res Mediadores de interferencia por ARN específicos de secuencias de ARN
EP1309726B2 (en) 2000-03-30 2018-10-03 Whitehead Institute For Biomedical Research Rna sequence-specific mediators of rna interference
CA2405549A1 (en) * 2000-04-03 2001-10-11 Hybridon, Inc. Sensitization of cells to cytotoxic agents using oligonucleotides directed to nucleotide excision repair or transcription coupled repair genes
US6680172B1 (en) 2000-05-16 2004-01-20 Regents Of The University Of Michigan Treatments and markers for cancers of the central nervous system
US6958214B2 (en) 2000-07-10 2005-10-25 Sequenom, Inc. Polymorphic kinase anchor proteins and nucleic acids encoding the same
US8178304B2 (en) * 2000-10-06 2012-05-15 Smith Terry J Diagnostic methods relating to Graves' disease and other autoimmune disorders
US8153121B2 (en) 2000-10-06 2012-04-10 Los Angeles Biomedical Research Institute at Harbor—UCLA Medical Center Diagnosis and therapy of antibody-mediated inflammatory autoimmune disorders
WO2002040477A2 (en) * 2000-11-03 2002-05-23 President And Fellows Of Harvard College Saframycins, analogues and uses thereof
RU2322500C2 (ru) 2000-12-01 2008-04-20 Макс-Планк-Гезелльшафт Цур Фердерунг Дер Виссеншафтен Е.Ф. Малые молекулы рнк, опосредующие интерференцию рнк
US20030152557A1 (en) * 2001-01-12 2003-08-14 Besterman Jeffrey M. Methods for inhibiting histone deacetylase-4
US20030148970A1 (en) * 2001-01-12 2003-08-07 Besterman Jeffrey M. Methods for specifically inhibiting histone deacetylase-4
WO2002059337A1 (en) * 2001-01-26 2002-08-01 Georgetown University School Of Medicine Anti-apoptopic gene scc-s2 and diagnostic and therapeutic uses thereof
WO2002081640A2 (en) * 2001-04-06 2002-10-17 Georgetown University Gene shinc-1 and diagnostic and therapeutic uses thereof
AU2002305151A1 (en) * 2001-04-06 2002-10-21 Georgetown University Gene scc-112 and diagnostic and therapeutic uses thereof
WO2002081642A2 (en) 2001-04-06 2002-10-17 Georgetown University Gene brcc-3 and diagnostic and therapeutic uses thereof
WO2002081639A2 (en) * 2001-04-06 2002-10-17 Georgetown University Gene brcc2 and diagnostic and therapeutic uses thereof
CA2446606A1 (en) * 2001-05-11 2002-11-21 Methylgene, Inc. Inhibitors of dna methyltransferase isoforms
CA2633595A1 (en) 2001-06-20 2003-01-03 Genentech, Inc. Antibodies against tumor-associated antigenic target (tat) polypeptides
US7803915B2 (en) 2001-06-20 2010-09-28 Genentech, Inc. Antibody compositions for the diagnosis and treatment of tumor
AU2002315393A1 (en) 2001-06-21 2003-01-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of superoxide dismutase 1, soluble expression
US6964950B2 (en) 2001-07-25 2005-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of C-reactive protein expression
US7425545B2 (en) 2001-07-25 2008-09-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of C-reactive protein expression
US20030096772A1 (en) 2001-07-30 2003-05-22 Crooke Rosanne M. Antisense modulation of acyl CoA cholesterol acyltransferase-2 expression
US7407943B2 (en) 2001-08-01 2008-08-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein B expression
US20040266718A1 (en) * 2001-08-06 2004-12-30 Zuomei Li Inhibition of specific histone deacetylase isoforms
US7227014B2 (en) 2001-08-07 2007-06-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein (a) expression
US20030096781A1 (en) * 2001-08-31 2003-05-22 University Of Southern California IL-8 is an autocrine growth factor and a surrogate marker for Kaposi's sarcoma
CA2465978C (en) * 2001-09-14 2015-04-07 Soon Hyung Woo Inhibitors of histone deacetylase
US6897220B2 (en) * 2001-09-14 2005-05-24 Methylgene, Inc. Inhibitors of histone deacetylase
US7868204B2 (en) * 2001-09-14 2011-01-11 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
KR101008758B1 (ko) 2001-09-18 2011-01-14 제넨테크, 인크. 종양의 진단 및 치료를 위한 방법 및 이를 위한 조성물
US6750019B2 (en) 2001-10-09 2004-06-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of insulin-like growth factor binding protein 5 expression
AU2002334895B2 (en) 2001-10-09 2006-10-19 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of insulin-like growth factor binding protein 5 expression
US7276489B2 (en) * 2002-10-24 2007-10-02 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5′ ends
US20050037955A1 (en) * 2001-11-27 2005-02-17 Hooper Laura Virginia Therapeutic protein and treatments
US20040091893A1 (en) * 2001-11-27 2004-05-13 Jeffrey Gordon Method for studying the effects of commensal microflora on mammalian intestine and treatments of gastrointestinal-associated disease based thereon
US6965025B2 (en) 2001-12-10 2005-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of connective tissue growth factor expression
KR100801388B1 (ko) 2002-01-02 2008-02-05 제넨테크, 인크. 종양의 진단 및 치료 방법 및 이를 위한 조성물
IL152904A0 (en) 2002-01-24 2003-06-24 Gamida Cell Ltd Utilization of retinoid and vitamin d receptor antagonists for expansion of renewable stem cell populations
WO2003062404A1 (en) * 2002-01-25 2003-07-31 Gamida-Cell Ltd. Methods of expanding stem and progenitor cells and expanded cell populations obtained thereby
US7244565B2 (en) 2002-04-10 2007-07-17 Georgetown University Gene shinc-3 and diagnostic and therapeutic uses thereof
US7138512B2 (en) * 2002-04-10 2006-11-21 Georgetown University Gene SHINC-2 and diagnostic and therapeutic uses thereof
NZ535925A (en) 2002-04-16 2008-06-30 Genentech Inc An isolated antibody that binds to a particular polypeptide
US7432342B2 (en) 2002-05-03 2008-10-07 Sequenom, Inc. Kinase anchor protein muteins, peptides thereof and related documents
US20030228317A1 (en) * 2002-05-22 2003-12-11 Prafulla Gokhale Gene BRCC-1 and diagnostic and therapeutic uses thereof
US7199107B2 (en) 2002-05-23 2007-04-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of kinesin-like 1 expression
US20050221326A1 (en) * 2002-06-12 2005-10-06 Avi Orr-Urtreger Oligonucleotides antibodies and kits including same for treating prostate cancer and determining predisposition thereto
US20040072770A1 (en) * 2002-07-03 2004-04-15 Besterman Jeffrey M. Methods for specifically inhibiting histone deacetylase-7 and 8
US20050196382A1 (en) * 2002-09-13 2005-09-08 Replicor, Inc. Antiviral oligonucleotides targeting viral families
AU2003267785C1 (en) * 2002-09-13 2009-12-24 Replicor, Inc. Non-sequence complementary antiviral oligonucleotides
WO2004031350A2 (en) 2002-09-26 2004-04-15 Amgen, Inc. Modulation of forkhead box o1a expression
WO2005003291A2 (en) * 2002-10-16 2005-01-13 Board Of Regents Of The University Of Texas System Bead bound combinatorial oligonucleoside phosphorothioate and phosphorodithioate aptamer libraries
KR20050074487A (ko) * 2002-10-17 2005-07-18 메틸진, 인크. 히스톤 데아세틸라아제의 억제제
US9150605B2 (en) * 2002-11-05 2015-10-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising alternating 2′-modified nucleosides for use in gene modulation
CA2504720C (en) 2002-11-05 2013-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation
EP1560840B1 (en) 2002-11-05 2015-05-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising alternating 2'-modified nucleosides for use in gene modulation
US9150606B2 (en) 2002-11-05 2015-10-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising alternating 2'-modified nucleosides for use in gene modulation
EP1569695B1 (en) 2002-11-13 2013-05-15 Genzyme Corporation Antisense modulation of apolipoprotein b expression
DK2336318T3 (da) 2002-11-13 2013-07-15 Genzyme Corp Antisense-modulering af apolipoprotein b-ekspression
EP1572971B1 (en) * 2002-11-15 2009-09-30 Morphotek Inc. Methods of generating high-production of antibodies from hybridomas created by in vitro immunization
US7144999B2 (en) 2002-11-23 2006-12-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of hypoxia-inducible factor 1 alpha expression
US7371840B2 (en) * 2003-01-08 2008-05-13 The University Of Southern California Isolation and characterization of ECA1, a gene overexpressed in endometrioid carcinomas of ovary and endometrium
CA2512484A1 (en) * 2003-01-16 2004-05-08 Hybridon, Inc. Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by utilizing modified immunostimulatory dinucleotides
CA2515484C (en) 2003-02-11 2011-09-20 Antisense Therapeutics Ltd Modulation of insulin like growth factor i receptor expression
US7803781B2 (en) 2003-02-28 2010-09-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of growth hormone receptor expression and insulin-like growth factor expression
US20040185559A1 (en) 2003-03-21 2004-09-23 Isis Pharmaceuticals Inc. Modulation of diacylglycerol acyltransferase 1 expression
US20040198640A1 (en) * 2003-04-02 2004-10-07 Dharmacon, Inc. Stabilized polynucleotides for use in RNA interference
US7598227B2 (en) 2003-04-16 2009-10-06 Isis Pharmaceuticals Inc. Modulation of apolipoprotein C-III expression
US7399853B2 (en) 2003-04-28 2008-07-15 Isis Pharmaceuticals Modulation of glucagon receptor expression
JP2006528697A (ja) * 2003-05-16 2006-12-21 イデラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド イムノマーを化学療法剤と組み合わせて用いる、癌の相乗的処置
WO2005037053A2 (en) * 2003-05-23 2005-04-28 Board Of Regents - The University Of Texas System High throughput screening of aptamer libraries for specific binding to proteins on viruses and other pathogens
WO2005032455A2 (en) * 2003-05-23 2005-04-14 Board Of Regents Combinatorially selected phosphorodithioate aptamer targeting ap-1
US7183054B2 (en) * 2003-06-03 2007-02-27 President And Fellows Of Harvard College Assay for identifying biological targets of polynucleotide-binding compounds
US7541344B2 (en) 2003-06-03 2009-06-02 Eli Lilly And Company Modulation of survivin expression
EP2371834B1 (en) * 2003-06-11 2016-02-17 Idera Pharmaceuticals, Inc. Stabilized immunomodulatory oligonucleotides
US7790691B2 (en) * 2003-06-20 2010-09-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Double stranded compositions comprising a 3′-endo modified strand for use in gene modulation
KR101126030B1 (ko) 2003-07-15 2012-03-19 이데라 파마슈티칼즈, 인코포레이티드 사이토킨 및/또는 화학치료제 또는 방사선 치료와 연계하여면역자극 올리고누클레오티드 및/또는 이뮤노머 화합물을이용하여 면역계를 공동 상승 자극시키는 방법
US20050118611A1 (en) * 2003-07-24 2005-06-02 Board Of Regents, The University Of Texas System Thioaptamers enable discovery of physiological pathways and new therapeutic strategies
EP1648914A4 (en) 2003-07-31 2009-12-16 Regulus Therapeutics Inc OLIGOMERIC COMPOUNDS AND COMPOSITIONS USEFUL FOR MODULATING SMALL NON-CODING RNA
US7825235B2 (en) 2003-08-18 2010-11-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of diacylglycerol acyltransferase 2 expression
US20050053981A1 (en) 2003-09-09 2005-03-10 Swayze Eric E. Gapped oligomeric compounds having linked bicyclic sugar moieties at the termini
BRPI0413930A (pt) 2003-09-18 2006-10-24 Isis Pharmaceuticals Inc composto oligomérico ou sal farmaceuticamente aceitável deste, composição farmacêutica ou veterinária, métodos para inibir a expressão de eif4e em uma célula, tecido ou órgão, para diminuir a proliferação de uma célula em que eif4e é expressado, e para prevenir ou tratar uma condição ou doença métodos para prevenir ou diminuir a angiogênese, e o crescimento de tumor em um paciente, oligonucleotìdeo de anti-sentido, composição farmacêutica ou veterinária, e, uso de um composto oligomérico ou sal farmaceuticamente aceitável deste
WO2005027962A1 (en) 2003-09-18 2005-03-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. 4’-thionucleosides and oligomeric compounds
WO2005030705A1 (en) * 2003-09-24 2005-04-07 Methylgene, Inc. Inhibitors of histone deacetylase
PT1678194E (pt) 2003-10-10 2013-09-30 Alchemia Oncology Pty Ltd Modulação da síntese e degradação de hialuronano no tratamento de doença
JP2007529199A (ja) 2003-10-23 2007-10-25 イルミジェン バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド ウイルス感染に対する抵抗性に関連する遺伝子である、ｏａｓ１における変異の検出
US20050191653A1 (en) 2003-11-03 2005-09-01 Freier Susan M. Modulation of SGLT2 expression
NZ596984A (en) 2003-11-17 2013-10-25 Genentech Inc Compositions and methods for the treatment of tumor of hematopoietic origin
US20050120397A1 (en) * 2003-11-24 2005-06-02 Hermann Steller Compounds and methods for regulation of spermatid differentiation
EP1699814A4 (en) * 2003-12-08 2009-01-14 Hybridon Inc MODULATION OF IMMUNOSTIMULATORY PROPERTIES OF COMPOUNDS FORMED FROM SMALL OLIGONUCLEOTIDES
WO2005062923A2 (en) * 2003-12-24 2005-07-14 Massachusetts Institute Of Technology Gene targets for enhanced carotenoid production
US7741070B2 (en) * 2003-12-24 2010-06-22 Massachusetts Institute Of Technology Gene targets for enhanced carotenoid production
US7608699B2 (en) * 2003-12-29 2009-10-27 Rockefeller University Synthetic nuclear localization signal derived from lentiviral integrase and methods of use thereof
JP2007520222A (ja) 2004-01-20 2007-07-26 アイシス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド グルココルチコイドレセプター発現の調節
US7468431B2 (en) 2004-01-22 2008-12-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of eIF4E-BP2 expression
US20050222072A1 (en) * 2004-02-20 2005-10-06 Hybridon, Inc. Potent mucosal immune response induced by modified immunomodulatory oligonucleotides
US8569474B2 (en) 2004-03-09 2013-10-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Double stranded constructs comprising one or more short strands hybridized to a longer strand
EP1730309B1 (en) 2004-03-15 2016-05-04 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for optimizing cleavage of rna by rnase h
US7253204B2 (en) * 2004-03-26 2007-08-07 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
KR101147147B1 (ko) * 2004-04-01 2012-05-25 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 Ｒｎａ 간섭의 오프 타겟 효과 감소를 위한 변형된폴리뉴클레오타이드
CA2561741C (en) 2004-04-05 2016-09-27 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Processes and reagents for oligonucleotide synthesis and purification
US20050244869A1 (en) 2004-04-05 2005-11-03 Brown-Driver Vickie L Modulation of transthyretin expression
US20050239134A1 (en) * 2004-04-21 2005-10-27 Board Of Regents, The University Of Texas System Combinatorial selection of phosphorothioate single-stranded DNA aptamers for TGF-beta-1 protein
CA2568735A1 (en) * 2004-06-03 2005-12-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Double strand compositions comprising differentially modified strands for use in gene modulation
US8394947B2 (en) 2004-06-03 2013-03-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Positionally modified siRNA constructs
HUE036894T2 (hu) 2004-06-15 2018-08-28 Idera Pharmaceuticals Inc Immunstimuláló oligonukleotid multimerek
US7427405B2 (en) * 2004-06-15 2008-09-23 Idera Pharmaceuticals, Inc. Immunostimulatory oligonucleotide multimers
US8680062B2 (en) 2004-07-06 2014-03-25 Deliversir Ltd. System for delivering therapeutic agents into living cells and cells nuclei
AU2005272912A1 (en) 2004-08-10 2006-02-23 Genzyme Corporation Antisense modulation of apolipoprotein B expression
US7884086B2 (en) 2004-09-08 2011-02-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Conjugates for use in hepatocyte free uptake assays
WO2006030442A2 (en) 2004-09-16 2006-03-23 Gamida-Cell Ltd. Methods of ex vivo progenitor and stem cell expansion by co-culture with mesenchymal cells
EP2397563A3 (en) 2004-09-17 2012-07-18 Isis Pharmaceuticals, Inc. Enhanced antisense oligonucleotides
JP2008516991A (ja) 2004-10-20 2008-05-22 アンチセンス セラピューティクス リミテッド インテグリンα４発現のアンチセンス調節
US7923207B2 (en) 2004-11-22 2011-04-12 Dharmacon, Inc. Apparatus and system having dry gene silencing pools
US7923206B2 (en) 2004-11-22 2011-04-12 Dharmacon, Inc. Method of determining a cellular response to a biological agent
US7935811B2 (en) 2004-11-22 2011-05-03 Dharmacon, Inc. Apparatus and system having dry gene silencing compositions
AU2005313883B2 (en) * 2004-12-09 2011-03-31 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inducing an immune response in a mammal and methods of avoiding an immune response to oligonucleotide agents such as short interfering RNAs
EP1864134A4 (en) * 2005-02-07 2010-10-20 Univ Columbia METHOD FOR TREATING OR PREVENTING HORMONRESISTENT PROSTATE CANCER USING PROTOCADHERINE PC SPECIFIC SIRNA OR OTHER INHIBITORS OF PROTOCADHERINE PC EXPRESSION OR ACTIVITY
EP1869076A2 (en) 2005-03-10 2007-12-26 Genentech, Inc. Methods and compositions for modulating vascular integrity
AU2006228957A1 (en) * 2005-04-01 2006-10-05 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
EP1879626A4 (en) * 2005-04-19 2011-03-23 Massachusetts Inst Technology AMPHIPHILIC POLYMERS AND METHOD FOR USE THEREOF
AU2006243218B2 (en) 2005-05-05 2009-09-17 Antisense Pharma Gmbh Use of low doses of oligonucleotides antisense to TGF-beta, VEGF, interleukin-10, c-jun, c-fos or prostaglandin E2 genes in the treatment of tumors
US9505867B2 (en) 2005-05-31 2016-11-29 Ecole Polytechmique Fédérale De Lausanne Triblock copolymers for cytoplasmic delivery of gene-based drugs
WO2006138145A1 (en) 2005-06-14 2006-12-28 Northwestern University Nucleic acid functionalized nanoparticles for therapeutic applications
DE602006015963D1 (de) 2005-07-01 2010-09-16 Index Pharmaceuticals Ab Immunstimulatorisches verfahren
DK2179737T3 (da) * 2005-07-01 2013-11-11 Index Pharmaceuticals Ab Modulering af respons på steroider
AU2006306805A1 (en) * 2005-10-28 2007-05-03 Index Pharmaceuticals Ab Composition and method for the prevention, treatment and/or alleviation of an inflammatory disease
EP1942945B1 (en) 2005-11-07 2011-10-19 Idera Pharmaceuticals Immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds comprising modified immunostimulatory dinucleotides
US7470674B2 (en) * 2005-11-07 2008-12-30 Idera Pharmaceuticals, Inc. Immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds comprising modified immunostimulatory dinucleotides
US7776834B2 (en) * 2005-11-07 2010-08-17 Idera Pharmaceuticals, Inc. Immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds comprising modified immunostimulatory dinucleotides
JP2009516710A (ja) 2005-11-21 2009-04-23 アイシス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド ｅＩＦ４Ｅ−ＢＰ２の発現のモジュレート
US8846393B2 (en) 2005-11-29 2014-09-30 Gamida-Cell Ltd. Methods of improving stem cell homing and engraftment
JP2009520502A (ja) * 2005-12-20 2009-05-28 イデラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｃｇジヌクレオチド修飾物を含有するトール様受容体の新規な合成アゴニスト
CA2632940A1 (en) * 2005-12-20 2007-07-05 Idera Pharmaceuticals, Inc. Immunostimulatory activity of palindromic immune modulatory oligonucleotides (imo tm) contiaining different lengths of palindromic segments
EP1976567B1 (en) 2005-12-28 2020-05-13 The Scripps Research Institute Natural antisense and non-coding rna transcripts as drug targets
EP2161038B1 (en) 2006-01-26 2013-12-25 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and their uses directed to Huntingtin
ES2516815T3 (es) 2006-01-27 2014-10-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. Análogos de ácidos nucleicos bicíclicos modificados en la posición 6
US7569686B1 (en) 2006-01-27 2009-08-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for synthesis of bicyclic nucleic acid analogs
EP2388327A1 (en) 2006-01-27 2011-11-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds and compositions for the use in modulation of micrornas
JP5554988B2 (ja) 2006-04-07 2014-07-23 メチルジーン インコーポレイテッド ヒストンデアセチラーゼの阻害剤
WO2007136989A2 (en) * 2006-05-05 2007-11-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating expression of dgat2
CA2651453C (en) * 2006-05-11 2014-10-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5'-modified bicyclic nucleic acid analogs
US7666854B2 (en) * 2006-05-11 2010-02-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bis-modified bicyclic nucleic acid analogs
WO2008011473A2 (en) 2006-07-19 2008-01-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and their uses directed to hbxip
HUE037173T2 (hu) 2006-08-08 2018-08-28 Univ Bonn Rheinische Friedrich Wilhelms 5'-Foszfát-oligonukleotidok szerkezete és alkalmazása
US8454948B2 (en) 2006-09-14 2013-06-04 Medgenics Medical Israel Ltd. Long lasting drug formulations
KR101470472B1 (ko) 2006-09-14 2014-12-09 메드제닉스 메디칼 이스라엘 리미티드 장기 지속형 약물 제형
US9127084B2 (en) 2006-09-14 2015-09-08 Medgenics Medical Israel Ltd. Long lasting drug formulations
EP2064223B1 (en) 2006-09-22 2013-04-24 Dharmacon, Inc. Duplex oligonucleotide complexes and methods for gene silencing by RNA interference
EP2338499A1 (en) 2006-10-10 2011-06-29 Gunther Hartmann 5' triphosphate oligonucleotide induces anti-viral response
CA2667826C (en) 2006-10-28 2013-10-08 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
US8093222B2 (en) 2006-11-27 2012-01-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating hypercholesterolemia
JP2010510807A (ja) * 2006-11-27 2010-04-08 アイシス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド 高コレステロール血症を治療するための方法
EP1973872A4 (en) 2006-12-19 2012-05-09 Methylgene Inc HISTONDEACETYLASE HEMMER AND PROPHARMAKA THEREOF
EP1935428A1 (en) * 2006-12-22 2008-06-25 Antisense Pharma GmbH Oligonucleotide-polymer conjugates
KR101488800B1 (ko) 2007-02-09 2015-02-04 노오쓰웨스턴 유니버시티 세포내 타겟 검출용 입자
US8030344B2 (en) * 2007-03-13 2011-10-04 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
US9156865B2 (en) 2007-04-23 2015-10-13 Deliversir Ltd System for delivering therapeutic agents into living cells and cells nuclei
ES2516827T3 (es) 2007-04-23 2014-10-31 Deliversir Ltd Un sistema para entregar agentes terapéuticos a células vivas y núcleos de células
US9556210B2 (en) 2007-04-23 2017-01-31 Sabag-Rfa Ltd. System for delivering therapeutic agents into living cells and cells nuclei
BRPI0811170B8 (pt) * 2007-05-22 2021-05-25 Arcturus Therapeutics Inc oligonucleotídeos de rna e complexos de rna substituídos por hidroximetila
WO2008150729A2 (en) 2007-05-30 2008-12-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs
CA3055145A1 (en) 2007-05-30 2008-12-11 Northwestern University Nucleic acid functionalized nanoparticles for therapeutic applications
EP2173760B2 (en) 2007-06-08 2015-11-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Carbocyclic bicyclic nucleic acid analogs
AU2008272918B2 (en) * 2007-07-05 2012-09-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. 6-disubstituted bicyclic nucleic acid analogs
EP2188298B1 (en) * 2007-08-15 2013-09-18 Isis Pharmaceuticals, Inc. Tetrahydropyran nucleic acid analogs
WO2009039442A1 (en) 2007-09-21 2009-03-26 California Institute Of Technology Nfia in glial fate determination, glioma therapy and astrocytoma treatment
US20100280098A1 (en) * 2007-10-05 2010-11-04 Juliano Rudolph L Receptor targeted oligonucleotides
EP2219680A2 (en) * 2007-11-13 2010-08-25 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating protein expression
EP2222851B1 (en) 2007-11-20 2017-06-28 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of cd40 expression
US8546556B2 (en) * 2007-11-21 2013-10-01 Isis Pharmaceuticals, Inc Carbocyclic alpha-L-bicyclic nucleic acid analogs
US7845686B2 (en) * 2007-12-17 2010-12-07 S & B Technical Products, Inc. Restrained pipe joining system for plastic pipe
US8530640B2 (en) * 2008-02-07 2013-09-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic cyclohexitol nucleic acid analogs
US8188060B2 (en) 2008-02-11 2012-05-29 Dharmacon, Inc. Duplex oligonucleotides with enhanced functionality in gene regulation
WO2009117589A1 (en) 2008-03-21 2009-09-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds comprising tricyclic nucleosides and methods for their use
EP2285819B1 (en) * 2008-04-04 2013-10-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds comprising neutrally linked terminal bicyclic nucleosides
US8082730B2 (en) * 2008-05-20 2011-12-27 Caterpillar Inc. Engine system having particulate reduction device and method
EP2297323A1 (en) 2008-05-21 2011-03-23 Hartmann, Gunther 5' triphosphate oligonucleotide with blunt end and uses thereof
WO2010017248A2 (en) 2008-08-04 2010-02-11 University Of Miami Sting (stimulator of interferon genes), a regulator of innate immune responses
EP2331141B1 (en) 2008-08-25 2016-01-06 Excaliard Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotides directed against connective tissue growth factor and uses thereof
WO2010036696A1 (en) 2008-09-24 2010-04-01 Isis Pharmaceuticals, Inc. Cyclohexenyl nucleic acid analogs
WO2010036698A1 (en) * 2008-09-24 2010-04-01 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted alpha-l-bicyclic nucleosides
CN104212799B (zh) 2008-10-15 2018-11-23 Ionis制药公司 因子11表达的调节
US8883752B2 (en) 2008-10-24 2014-11-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5′ and 2′ BIS-substituted nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
WO2010048585A2 (en) 2008-10-24 2010-04-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds and methods
CN106955360A (zh) 2008-11-24 2017-07-18 西北大学 多价rna纳米颗粒组合物
US20110237649A1 (en) 2008-12-04 2011-09-29 Opko Curna, Llc Treatment of sirtuin 1 (sirt1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to sirtuin 1
EP2370582B1 (en) 2008-12-04 2017-05-10 CuRNA, Inc. Treatment of tumor suppressor gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to the gene
CN102317458B (zh) 2008-12-04 2018-01-02 库尔纳公司 通过红细胞生成素(epo)天然反义转录物的抑制对epo相关疾病的治疗
WO2010080554A1 (en) 2008-12-17 2010-07-15 Avi Biopharma, Inc. Antisense compositions and methods for modulating contact hypersensitivity or contact dermatitis
US20100233270A1 (en) 2009-01-08 2010-09-16 Northwestern University Delivery of Oligonucleotide-Functionalized Nanoparticles
KR101546673B1 (ko) * 2009-01-15 2015-08-25 삼성전자주식회사 전자 사진용 토너 및 그의 제조방법
US20120021515A1 (en) 2009-02-06 2012-01-26 Swayze Eric E Oligomeric compounds and methods
US8536320B2 (en) 2009-02-06 2013-09-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Tetrahydropyran nucleic acid analogs
PT2396038E (pt) 2009-02-12 2016-02-19 Curna Inc Tratamento das doenças associadas com o factor neurotrófico derivado do cérebro (bdnf) por inibição do produto antisenso natural da transcrição para bdnf
CN102439149B (zh) 2009-02-12 2018-01-02 库尔纳公司 通过抑制针对胶质细胞衍生神经营养因子(gdnf)的天然反义转录物来治疗gdnf相关的疾病
US20110319317A1 (en) 2009-03-04 2011-12-29 Opko Curna, Llc Treatment of sirtuin 1 (sirt1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to sirt1
CA2755409C (en) 2009-03-16 2019-04-30 Joseph Collard Treatment of nuclear factor (erythroid-derived 2)-like 2 (nrf2) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to nrf2
JP5904935B2 (ja) 2009-03-17 2016-04-20 クルナ・インコーポレーテッド デルタ様１ホモログ（ｄｌｋ１）に対する天然アンチセンス転写物の抑制によるｄｌｋ１関連疾患の治療
EP3248618A1 (en) 2009-04-22 2017-11-29 Massachusetts Institute Of Technology Innate immune suppression enables repeated delivery of long rna molecules
JP6250930B2 (ja) 2009-05-06 2017-12-20 クルナ・インコーポレーテッド トリステトラプロリン（ｔｔｐ）に対する天然アンチセンス転写物の抑制によるｔｔｐ関連疾患の治療
EP2427553A4 (en) 2009-05-06 2012-11-07 Opko Curna Llc TREATMENT OF LIPID TRANSPORT AND METABOLISM-RELATED DISEASES BY INHIBITING THE NATURAL ANTISENSE TRANSCRIPT AGAINST A LIPID TRANSPORT AND METABOLIC TREATMENT
ES2664590T3 (es) 2009-05-18 2018-04-20 Curna, Inc. Tratamiento de enfermedades relacionadas con factores de reprogramación por inhibición del tránscrito antisentido natural a un factor de reprogramación
CN102549158B (zh) 2009-05-22 2017-09-26 库尔纳公司 通过抑制针对转录因子e3(tfe3)的天然反义转录物来治疗tfe3和胰岛素受体底物蛋白2(irs2)相关的疾病
KR101704988B1 (ko) 2009-05-28 2017-02-08 큐알엔에이, 인크. 항바이러스 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 항바이러스 유전자 관련된 질환의 치료
CN102695797B (zh) 2009-06-16 2018-05-25 库尔纳公司 通过抑制针对胶原基因的天然反义转录物来治疗胶原基因相关的疾病
ES2629339T3 (es) 2009-06-16 2017-08-08 Curna, Inc. Tratamiento de enfermedades relacionadas con la paraoxonasa 1 (pon1) por inhibición de transcrito antisentido natural a pon1
ES2618894T3 (es) 2009-06-24 2017-06-22 Curna, Inc. Tratamiento de enfermedades relacionadas con el receptor del factor de necrosis tumoral 2 (tnfr2) por inhibición del transcrito natural antisentido para tnfr2
KR101807324B1 (ko) 2009-06-26 2017-12-08 큐알엔에이, 인크. 다운 증후군 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 다운 증후군 유전자 관련된 질환의 치료
KR101802536B1 (ko) 2009-08-05 2017-11-28 큐알엔에이, 인크. 인슐린 유전자 (ｉｎｓ)에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 인슐린 유전자 (ｉｎｓ) 관련된 질환의 치료
US9012421B2 (en) 2009-08-06 2015-04-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic cyclohexose nucleic acid analogs
CN102482671B (zh) 2009-08-25 2017-12-01 库尔纳公司 通过抑制‘含有iq模体的gtp酶激活蛋白’(iqgap)的天然反义转录物而治疗iqgap相关疾病
HRP20150566T1 (hr) 2009-08-27 2015-07-17 Idera Pharmaceuticals, Inc. Kompozicija za inhibiciju ekspresije gena i njegova upotreba
US9321823B2 (en) 2009-09-02 2016-04-26 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
CA2778442A1 (en) 2009-10-22 2011-04-28 Genentech, Inc. Methods and compositions for modulating hepsin activation of macrophage-stimulating protein
US20120270930A1 (en) 2009-10-29 2012-10-25 Academisch Ziekenhuis Leiden H.O.D.N. Lumc Methods and compositions for dysferlin exon-skipping
CA2779099C (en) 2009-10-30 2021-08-10 Northwestern University Templated nanoconjugates
WO2011060320A1 (en) 2009-11-13 2011-05-19 Avi Biopharma, Inc. Antisense antiviral compound and method for treating influenza viral infection
AU2010324686B2 (en) 2009-11-30 2016-05-19 Genentech, Inc. Antibodies for treating and diagnosing tumors expressing SLC34A2 (TAT211 = SEQID2 )
KR101823702B1 (ko) 2009-12-16 2018-01-30 큐알엔에이, 인크. 막 결합 전사 인자 펩티다제, 부위 １(ｍｂｔｐｓ１)에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 ｍｂｔｐｓ１ 관련 질환의 치료
KR101793753B1 (ko) 2009-12-23 2017-11-03 큐알엔에이, 인크. 커플링방지 단백질 ２(ｕｃｐ２)에 대한 천연 안티센스 전사체의 저해에 의한 ｕｃｐ２ 관련 질환의 치료
DK2516648T3 (en) 2009-12-23 2018-02-12 Curna Inc TREATMENT OF HEPATOCYTE GROWTH FACTOR (HGF) RELATED DISEASES BY INHIBITION OF NATURAL ANTISENSE TRANSCRIPT AGAINST HGF
CN102770540B (zh) 2009-12-29 2017-06-23 库尔纳公司 通过抑制肿瘤蛋白63(p63)的天然反义转录物而治疗p63相关疾病
ES2657452T3 (es) 2009-12-29 2018-03-05 Curna, Inc. Tratamiento de enfermedades relacionadas con el factor respiratorio nuclear 1 (NRF1) mediante inhibición de transcrito antisentido natural a NRF1
DK2521784T3 (en) 2010-01-04 2018-03-12 Curna Inc TREATMENT OF INTERFERON REGULATORY FACTOR 8- (IRF8) RELATED DISEASES BY INHIBITION OF NATURAL ANTISENCE TRANSCRIPT TO IRF8
WO2011085066A2 (en) 2010-01-06 2011-07-14 Curna, Inc. Treatment of pancreatic developmental gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a pancreatic developmental gene
CA2786535C (en) 2010-01-11 2019-03-26 Curna, Inc. Treatment of sex hormone binding globulin (shbg) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to shbg
WO2011085102A1 (en) 2010-01-11 2011-07-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Base modified bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
US8946182B2 (en) 2010-01-25 2015-02-03 Curna, Inc. Treatment of RNASE H1 related diseases by inhibition of natural antisense transcript to RNASE H1
JP5976548B2 (ja) 2010-02-22 2016-08-23 カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド Ｐｙｃｒ１に対する天然アンチセンス転写物の阻害によるピロリン−５−カルボン酸レダクターゼ１（ｐｙｃｒ１）関連疾患の治療
WO2011105900A2 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Antagonists of complement component 8-alpha (c8-alpha) and uses thereof
WO2011105902A2 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Antagonists of complement component 8-beta (c8-beta) and uses thereof
MX2012009215A (es) 2010-02-23 2012-11-23 Genentech Inc Composiciones y metodos para el diagnostico y tratamiento de tumores.
WO2011105901A2 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Antagonists of complement component 9 (c9) and uses thereof
ES2743600T3 (es) 2010-03-12 2020-02-20 Brigham & Womens Hospital Inc Métodos de tratamiento de los trastornos inflamatorios vasculares
EP2545173A2 (en) 2010-03-12 2013-01-16 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense modulation of nuclear hormone receptors
WO2011115818A1 (en) 2010-03-17 2011-09-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5'-substituted bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
US9044494B2 (en) 2010-04-09 2015-06-02 Curna, Inc. Treatment of fibroblast growth factor 21 (FGF21) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to FGF21
JP6066900B2 (ja) 2010-04-26 2017-01-25 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド システイニルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
US8961960B2 (en) 2010-04-27 2015-02-24 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of isoleucyl tRNA synthetases
EP3173419A1 (en) 2010-04-28 2017-05-31 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modified nucleosides, analogs thereof and oligomeric compounds prepared therefrom
WO2011139699A2 (en) 2010-04-28 2011-11-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5' modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
JP6008837B2 (ja) 2010-04-28 2016-10-19 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド アラニルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
US8986680B2 (en) 2010-04-29 2015-03-24 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of Asparaginyl tRNA synthetases
NZ603339A (en) 2010-04-29 2015-01-30 Isis Pharmaceuticals Inc Modulation of transthyretin expression
WO2011139907A2 (en) 2010-04-29 2011-11-10 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of valyl trna synthetases
AU2011248227B2 (en) 2010-05-03 2016-12-01 Pangu Biopharma Limited Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of phenylalanyl-alpha-tRNA synthetases
US9089588B2 (en) 2010-05-03 2015-07-28 Curna, Inc. Treatment of sirtuin (SIRT) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a sirtuin (SIRT)
US8961961B2 (en) 2010-05-03 2015-02-24 a Tyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related protein fragments of arginyl-tRNA synthetases
MX342239B (es) 2010-05-03 2016-09-21 Genentech Inc * Composiciones y metodos para el diagnostico y tratamiento de tumores.
JP6008841B2 (ja) 2010-05-03 2016-10-19 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド メチオニルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
EP2566499B1 (en) 2010-05-04 2017-01-25 aTyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of p38 multi-trna synthetase complex
CN103429739B (zh) 2010-05-12 2018-11-13 哥伦比亚大学纽约管理委员会 制备产生和分泌胰岛素的肠内分泌细胞的方法
CA3090304A1 (en) 2010-05-13 2011-11-17 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense modulation of interleukins 17 and 23 signaling
EP2568996B1 (en) 2010-05-14 2017-10-04 aTyr Pharma, Inc. Therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of phenylalanyl-beta-trna synthetases
TWI531370B (zh) 2010-05-14 2016-05-01 可娜公司 藉由抑制ｐａｒ４天然反股轉錄本治療ｐａｒ４相關疾病
AU2011256366C1 (en) 2010-05-17 2017-06-15 Pangu Biopharma Limited Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of leucyl-tRNA synthetases
EP3299464B1 (en) 2010-05-26 2019-10-02 CuRNA, Inc. Treatment of atonal homolog 1 (atoh1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to atoh1
CN103096913B (zh) 2010-05-27 2017-07-18 Atyr 医药公司 与谷氨酰胺酰‑tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现
US8957200B2 (en) 2010-06-07 2015-02-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
US8846637B2 (en) 2010-06-08 2014-09-30 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted 2′-amino and 2′-thio-bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
CA2804416C (en) 2010-07-12 2020-04-28 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of glycyl-trna synthetases
CN103068982B (zh) 2010-07-14 2017-06-09 库尔纳公司 通过抑制盘状大同系物(dlg)的天然反义转录物而治疗dlg相关疾病
JP5964304B2 (ja) 2010-08-25 2016-08-03 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド チロシルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
EP2625197B1 (en) 2010-10-05 2016-06-29 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
US8993533B2 (en) 2010-10-06 2015-03-31 Curna, Inc. Treatment of sialidase 4 (NEU4) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to NEU4
US20140031250A1 (en) 2010-10-07 2014-01-30 David Tsai Ting Biomarkers of Cancer
WO2012054723A2 (en) 2010-10-22 2012-04-26 Opko Curna Llc Treatment of alpha-l-iduronidase (idua) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to idua
JP6073795B2 (ja) 2010-10-27 2017-02-01 カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド インターフェロン関連発生制御因子１（ｉｆｒｄ１）への天然アンチセンス転写物の阻害によるｉｆｒｄ１関連疾患の治療
US9920317B2 (en) 2010-11-12 2018-03-20 The General Hospital Corporation Polycomb-associated non-coding RNAs
DK2638163T3 (en) 2010-11-12 2017-07-24 Massachusetts Gen Hospital POLYCOMB-ASSOCIATED NON-CODING RNAs
EP2453017A1 (en) 2010-11-12 2012-05-16 Antisense Pharma GmbH Oligonucleotides for use in prophylaxis and/or treatment of TGF-beta1 and TGF-beta2, TGF-beta2 and TGF-beta3, TGF-beta1 and TGF-beta3, or TGF-beta1, TGF-beta2, and TGF-beta3 mRNA overexpressing diseases
AU2011329777B2 (en) 2010-11-17 2016-06-09 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of alpha synuclein expression
EP2643463B1 (en) 2010-11-23 2017-09-27 CuRNA, Inc. Treatment of nanog related diseases by inhibition of natural antisense transcript to nanog
US9045749B2 (en) 2011-01-14 2015-06-02 The General Hospital Corporation Methods targeting miR-128 for regulating cholesterol/lipid metabolism
US9688719B2 (en) 2011-01-27 2017-06-27 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Glycogen synthase kinase-3 inhibitors
US9243034B2 (en) 2011-01-27 2016-01-26 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Glycogen synthase kinase-3 inhibitors
MX365647B (es) 2011-02-02 2019-06-10 Excaliard Pharmaceuticals Inc El uso de compuestos antisentido dirigidos al factor de crecimiento del tejido conectivo (ctgf) para tratar queloides o cicatrices hipertroficas.
US20130338178A1 (en) 2011-02-02 2013-12-19 The Trustees Of Princeton University Sirtuin modulators as inhibitors of cytomegalovirus
US8877722B2 (en) 2011-03-25 2014-11-04 Idera Pharmaceuticals, Inc. Compositions for inhibiting gene expression and uses thereof
EP2508530A1 (en) 2011-03-28 2012-10-10 Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn Purification of triphosphorylated oligonucleotides using capture tags
EP2718439B1 (en) 2011-06-09 2017-08-09 CuRNA, Inc. Treatment of frataxin (fxn) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to fxn
WO2012170347A1 (en) 2011-06-09 2012-12-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
EP3533873A1 (en) 2011-09-14 2019-09-04 Translate Bio MA, Inc. Multimeric oligonucleotide compounds
EP2755692B1 (en) 2011-09-14 2020-11-25 Northwestern University Nanoconjugates able to cross the blood-brain barrier
MX2014004516A (es) 2011-10-11 2015-01-16 Brigham & Womens Hospital Micro-arns en trastornos neurodegenerativos.
CA2895077A1 (en) 2011-12-12 2013-06-20 Beverly Packard In vivo delivery of oligonucleotides
JP6348848B2 (ja) 2012-02-13 2018-06-27 ガミダ セル リミテッド 間葉系幹細胞の増殖
HK1210211A1 (en) 2012-03-15 2016-04-15 科纳公司 Treatment of brain derived neurotrophic factor (bdnf) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to bdnf
US9610362B2 (en) 2012-03-16 2017-04-04 Valerion Therapeutics, Llc Antisense conjugates for decreasing expression of DMPK
WO2013154799A1 (en) 2012-04-09 2013-10-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Tricyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
US9221864B2 (en) 2012-04-09 2015-12-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Tricyclic nucleic acid analogs
WO2013159091A2 (en) 2012-04-20 2013-10-24 Aptamir Therapeutics, Inc. Mirna modulators of thermogenesis
WO2013163628A2 (en) 2012-04-27 2013-10-31 Duke University Genetic correction of mutated genes
JP2015518713A (ja) 2012-05-16 2015-07-06 ラナ セラピューティクス インコーポレイテッド Ｕｔｒｎ発現を調節するための組成物及び方法
US10837014B2 (en) 2012-05-16 2020-11-17 Translate Bio Ma, Inc. Compositions and methods for modulating SMN gene family expression
EP2850188A4 (en) 2012-05-16 2016-01-20 Rana Therapeutics Inc COMPOSITIONS AND METHOD FOR MODULATING THE EXPRESSION OF THE HEMOGLOBIN GENE FAMILIES
WO2013173638A1 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Rana Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating smn gene family expression
EA201492114A1 (ru) 2012-05-16 2015-04-30 Рана Терапьютикс, Инк. Композиции и способы для модулирования экспрессии генов
CN104583401A (zh) 2012-05-16 2015-04-29 Rana医疗有限公司 用于调节atp2a2表达的组合物和方法
JP2015518712A (ja) 2012-05-16 2015-07-06 ラナ セラピューティクス インコーポレイテッド Ｍｅｃｐ２発現を調節するための組成物及び方法
WO2013184209A1 (en) 2012-06-04 2013-12-12 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Mif for use in methods of treating subjects with a neurodegenerative disorder
US9567569B2 (en) 2012-07-23 2017-02-14 Gamida Cell Ltd. Methods of culturing and expanding mesenchymal stem cells
US9175266B2 (en) 2012-07-23 2015-11-03 Gamida Cell Ltd. Enhancement of natural killer (NK) cell proliferation and activity
WO2014022852A1 (en) 2012-08-03 2014-02-06 Aptamir Therapeutics, Inc. Cell-specific delivery of mirna modulators for the treatment of obesity and related disorders
KR102237882B1 (ko) 2012-08-15 2021-04-07 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 변형된 캡핑 프로토콜을 이용하는 올리고머 화합물 제조 방법
WO2014043544A1 (en) 2012-09-14 2014-03-20 Rana Therapeutics, Inc. Multimeric oligonucleotide compounds
EP2712870A1 (en) 2012-09-27 2014-04-02 Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn Novel RIG-I ligands and methods for producing them
US9029335B2 (en) 2012-10-16 2015-05-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted 2′-thio-bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
EP2908864B1 (en) 2012-10-22 2019-12-11 Sabag-Rfa Ltd. Phosphate compounds for delivering therapeutic agents into living cells and cells nuclei
US9828582B2 (en) 2013-03-19 2017-11-28 Duke University Compositions and methods for the induction and tuning of gene expression
KR102482890B1 (ko) 2013-05-01 2022-12-30 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 아포지질단백질 (a) 발현을 조절하는 조성물 및 방법
DK3007704T3 (da) 2013-06-13 2021-03-29 Antisense Therapeutics Ltd Kombinationsterapi til akromegali
WO2014207743A2 (en) 2013-06-24 2014-12-31 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Glycogen synthase kinase-3 inhibitors
US11162096B2 (en) 2013-10-14 2021-11-02 Ionis Pharmaceuticals, Inc Methods for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript
CA2844640A1 (en) 2013-12-06 2015-06-06 The University Of British Columbia Method for treatment of castration-resistant prostate cancer
US9636298B2 (en) 2014-01-17 2017-05-02 Methylgene Inc. Prodrugs of compounds that enhance antifungal activity and compositions of said prodrugs
SI3099333T1 (sl) 2014-01-31 2021-04-30 Temple University of the Commonwealth System of Higher Education 1938 Liacouras Walk BAG3 kot tarča za terapijo srčne odpovedi
WO2015120075A2 (en) 2014-02-04 2015-08-13 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
WO2015142910A1 (en) 2014-03-17 2015-09-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic carbocyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
WO2015143246A1 (en) 2014-03-19 2015-09-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for modulating ataxin 2 expression
US10006027B2 (en) 2014-03-19 2018-06-26 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Methods for modulating Ataxin 2 expression
MY192634A (en) 2014-04-01 2022-08-29 Biogen Ma Inc Compositions for modulating sod-1 expression
WO2015164693A1 (en) 2014-04-24 2015-10-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds comprising alpha-beta-constrained nucleic acid
PE20170010A1 (es) 2014-05-01 2017-03-04 Ionis Pharmaceuticals Inc Composiciones y metodos para modular la expresion del factor b del complemento
US10434064B2 (en) 2014-06-04 2019-10-08 Exicure, Inc. Multivalent delivery of immune modulators by liposomal spherical nucleic acids for prophylactic or therapeutic applications
EP3155100B1 (en) 2014-06-10 2021-12-22 Erasmus University Medical Center Rotterdam Antisense oligonucleotides useful in treatment of pompe disease
WO2015200697A1 (en) 2014-06-25 2015-12-30 The General Hospital Corporation Targeting human satellite ii (hsatii)
WO2015200901A1 (en) 2014-06-26 2015-12-30 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Inhibition of serotonin expression in gut enteroendocrine cells results in conversion to insulin-positive cells
WO2016033424A1 (en) 2014-08-29 2016-03-03 Genzyme Corporation Methods for the prevention and treatment of major adverse cardiovascular events using compounds that modulate apolipoprotein b
US10436802B2 (en) 2014-09-12 2019-10-08 Biogen Ma Inc. Methods for treating spinal muscular atrophy
WO2016049512A1 (en) 2014-09-26 2016-03-31 University Of Massachusetts Rna-modulating agents
MX391478B (es) 2014-10-10 2025-03-21 Idera Pharmaceuticals Inc Composiciones de agonista de tlr9 e inhibidores de punto de control para usarse en la respuesta inmune contra el cáncer.
US10858650B2 (en) 2014-10-30 2020-12-08 The General Hospital Corporation Methods for modulating ATRX-dependent gene repression
CA2968531A1 (en) 2014-11-21 2016-05-26 Northwestern University The sequence-specific cellular uptake of spherical nucleic acid nanoparticle conjugates
US9688707B2 (en) 2014-12-30 2017-06-27 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic morpholino compounds and oligomeric compounds prepared therefrom
WO2016112132A1 (en) 2015-01-06 2016-07-14 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for modulating expression of c9orf72 antisense transcript
WO2016115490A1 (en) 2015-01-16 2016-07-21 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulation of dux4
EP3256487A4 (en) 2015-02-09 2018-07-18 Duke University Compositions and methods for epigenome editing
WO2016130943A1 (en) 2015-02-13 2016-08-18 Rana Therapeutics, Inc. Hybrid oligonucleotides and uses thereof
US11129844B2 (en) 2015-03-03 2021-09-28 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulating MECP2 expression
WO2016149455A2 (en) 2015-03-17 2016-09-22 The General Hospital Corporation The rna interactome of polycomb repressive complex 1 (prc1)
US10961532B2 (en) 2015-04-07 2021-03-30 The General Hospital Corporation Methods for reactivating genes on the inactive X chromosome
US10407678B2 (en) 2015-04-16 2019-09-10 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript
CN108139375A (zh) 2015-06-26 2018-06-08 贝斯以色列女执事医疗中心股份有限公司 靶向髓样衍生的抑制细胞中的四跨膜蛋白33(tspan33)的癌症疗法
US10590425B2 (en) 2015-06-29 2020-03-17 Caris Science, Inc. Therapeutic oligonucleotides
US10941176B2 (en) 2015-07-28 2021-03-09 Caris Science, Inc. Therapeutic oligonucleotides
US10533175B2 (en) 2015-09-25 2020-01-14 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulating Ataxin 3 expression
EP4089175A1 (en) 2015-10-13 2022-11-16 Duke University Genome engineering with type i crispr systems in eukaryotic cells
WO2017075670A1 (en) 2015-11-05 2017-05-11 Children's Hospital Los Angeles "mobilizing leukemia cells"
US11001622B2 (en) 2015-11-19 2021-05-11 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Method of treating autoimmune disease with lymphocyte antigen CD5-like (CD5L) protein
MX2018005377A (es) 2015-11-30 2018-11-09 Univ Duke Dianas terapeuticas para la correccion del gen de la distrofina humana por edicion genica y metodos de uso.
WO2017096395A1 (en) 2015-12-04 2017-06-08 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating breast cancer
US10993995B2 (en) 2015-12-07 2021-05-04 Erasmus University Medical Center Rotterdam Enzymatic replacement therapy and antisense therapy for pompe disease
EP3397288A4 (en) 2015-12-31 2019-09-11 Ionis Pharmaceuticals, Inc. PROCESS FOR REDUCING ATAXIN-2 EXPRESSION
EP3400300A4 (en) 2016-01-05 2019-08-07 Ionis Pharmaceuticals, Inc. PROCESS FOR REDUCING LRRK2 EXPRESSION
WO2017136558A1 (en) 2016-02-04 2017-08-10 Curis, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
DK3419665T3 (da) 2016-02-25 2025-01-13 Brigham & Womens Hospital Inc Behandlingsfremgangsmåder til fibrose ved målretning af SMOC2
US10577607B2 (en) 2016-03-16 2020-03-03 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of DYRK1B expression
EP3429690A4 (en) 2016-03-16 2019-10-23 Ionis Pharmaceuticals, Inc. METHOD FOR MODULATING KEAP1
AU2017235661B2 (en) 2016-03-18 2023-06-08 Caris Science, Inc. Oligonucleotide probes and uses thereof
WO2017180915A2 (en) 2016-04-13 2017-10-19 Duke University Crispr/cas9-based repressors for silencing gene targets in vivo and methods of use
EP3449001B1 (en) 2016-04-29 2021-12-08 Aptamir Therapeutics, Inc. Inhibition of mir-22 mirna by apt-110
US11293017B2 (en) 2016-05-25 2022-04-05 Caris Science, Inc. Oligonucleotide probes and uses thereof
WO2017219017A1 (en) 2016-06-17 2017-12-21 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of gys1 expression
WO2018013525A1 (en) 2016-07-11 2018-01-18 Translate Bio Ma, Inc. Nucleic acid conjugates and uses thereof
EP3487523B1 (en) 2016-07-19 2023-09-06 Duke University Therapeutic applications of cpf1-based genome editing
NL2017295B1 (en) 2016-08-05 2018-02-14 Univ Erasmus Med Ct Rotterdam Antisense oligomeric compound for Pompe disease
NL2017294B1 (en) 2016-08-05 2018-02-14 Univ Erasmus Med Ct Rotterdam Natural cryptic exon removal by pairs of antisense oligonucleotides.
CN109661233A (zh) 2016-10-06 2019-04-19 Ionis 制药公司 缀合低聚化合物的方法
US11459568B2 (en) 2016-10-31 2022-10-04 University Of Massachusetts Targeting microRNA-101-3p in cancer therapy
JOP20190104A1 (ar) 2016-11-10 2019-05-07 Ionis Pharmaceuticals Inc مركبات وطرق لتقليل التعبير عن atxn3
WO2018102745A1 (en) 2016-12-02 2018-06-07 Cold Spring Harbor Laboratory Modulation of lnc05 expression
WO2018165564A1 (en) 2017-03-09 2018-09-13 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Morpholino modified oligomeric compounds
EP3612215B1 (en) 2017-04-20 2024-08-28 aTyr Pharma, Inc. Compositions for treating lung inflammation
US12208140B2 (en) 2017-04-21 2025-01-28 The Broad Institute, Inc. Targeted delivery to beta cells
US11197884B2 (en) 2017-08-18 2021-12-14 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of the notch signaling pathway for treatment of respiratory disorders
US10517889B2 (en) 2017-09-08 2019-12-31 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of SMAD7 expression
WO2019055460A1 (en) 2017-09-13 2019-03-21 The Children's Medical Center Corporation COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF TRANSPOSON-ASSOCIATED DISEASES
TWI809004B (zh) 2017-11-09 2023-07-21 美商Ionis製藥公司 用於降低snca表現之化合物及方法
WO2019126641A2 (en) 2017-12-21 2019-06-27 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of frataxin expression
US20200332289A1 (en) * 2017-12-22 2020-10-22 Roche Innovation Center Copenhagen A/S Gapmer oligonucleotides comprising a phosphorodithioate internucleoside linkage
WO2019140102A1 (en) 2018-01-10 2019-07-18 Translate Bio Ma, Inc. Compositions and methods for facilitating delivery of synthetic nucleic acids to cells
AU2019206731A1 (en) 2018-01-15 2020-07-30 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of DNM2 expression
EP3759127A4 (en) 2018-03-02 2022-03-30 Ionis Pharmaceuticals, Inc. COMPOUNDS AND METHODS FOR MODULATING AMYLOID BETA PRECURSOR PROTEIN
TWI840345B (zh) 2018-03-02 2024-05-01 美商Ionis製藥公司 Irf4表現之調節劑
WO2019183440A1 (en) 2018-03-22 2019-09-26 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Methods for modulating fmr1 expression
WO2019186514A2 (en) 2018-03-30 2019-10-03 Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universitat Bonn Aptamers for targeted activaton of t cell-mediated immunity
WO2019195738A1 (en) 2018-04-06 2019-10-10 Children's Medical Center Corporation Compositions and methods for somatic cell reprogramming and modulating imprinting
US11365416B2 (en) 2018-04-11 2022-06-21 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of EZH2 expression
US20210355497A1 (en) 2018-05-09 2021-11-18 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for reducing fxi expression
WO2019217708A1 (en) 2018-05-09 2019-11-14 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for reducing atxn3 expression
WO2019241648A1 (en) 2018-06-14 2019-12-19 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for increasing stmn2 expression
TWI833770B (zh) 2018-06-27 2024-03-01 美商Ionis製藥公司 用於減少 lrrk2 表現之化合物及方法
WO2020010059A1 (en) 2018-07-02 2020-01-09 Aptamir Therapeutics, Inc. Targeted delivery of therapeutic agents to human adipocytes
MX2021000922A (es) 2018-07-25 2021-03-31 Ionis Pharmaceuticals Inc Compuestos y metodos para reducir la expresion de la atxn2.
WO2020047229A1 (en) 2018-08-29 2020-03-05 University Of Massachusetts Inhibition of protein kinases to treat friedreich ataxia
TW202028222A (zh) 2018-11-14 2020-08-01 美商Ionis製藥公司 Foxp3表現之調節劑
WO2020102630A1 (en) 2018-11-15 2020-05-22 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of irf5 expression
MY205095A (en) 2018-11-21 2024-10-01 Ionis Pharmaceuticals Inc Compounds and methods for reducing prion expression
US11214803B2 (en) 2019-01-31 2022-01-04 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of YAP1 expression
WO2020171889A1 (en) 2019-02-19 2020-08-27 University Of Rochester Blocking lipid accumulation or inflammation in thyroid eye disease
KR20210134686A (ko) 2019-02-27 2021-11-10 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 Malat1 발현의 조절인자
EP3941483A4 (en) * 2019-03-21 2023-10-18 Arnay Sciences, Llc ANTISEN OLIGONUCLEOTIDES FOR ALLEL SPECIFICITY
CN117431244A (zh) 2019-03-29 2024-01-23 Ionis制药公司 用于调节ube3a-ats的化合物和方法
EP4660307A2 (en) 2019-07-26 2025-12-10 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating gfap
WO2021030778A1 (en) 2019-08-15 2021-02-18 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Linkage modified oligomeric compounds and uses thereof
CN114929336A (zh) * 2019-09-19 2022-08-19 阿尔奈科学有限责任公司 用于调节基因剪接的化合物和方法
US12241830B2 (en) 2019-12-06 2025-03-04 Broad Institute, Inc. Living biosensors
AR121446A1 (es) 2020-02-28 2022-06-08 Ionis Pharmaceuticals Inc Compuestos y métodos para modular smn2
JP7738573B2 (ja) 2020-05-01 2025-09-12 アイオーニス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド Ａｔｘｎ１を調節するための化合物及び方法
CN116096899A (zh) 2020-06-29 2023-05-09 Ionis制药公司 调节plp1的化合物和方法
UY39344A (es) 2020-07-28 2022-02-25 Ionis Pharmaceuticals Inc Compuestos y métodos para reducir la expresión de app
CA3186935A1 (en) 2020-08-07 2022-02-10 Paymaan JAFAR-NEJAD Compounds and methods for modulating scn2a
TW202227101A (zh) 2020-11-18 2022-07-16 美商Ionis製藥公司 用於調節血管收縮素原表現之化合物及方法
TW202242111A (zh) 2020-12-18 2022-11-01 美商Ionis製藥公司 用於調節因子ｘｉｉ之化合物及方法
EP4271816A4 (en) 2020-12-31 2025-04-02 Dyne Therapeutics, Inc. MUSCLE TARGETING COMPLEXES AND RELATED USES FOR THE TREATMENT OF MYOTONIC DYSTROPHY
MX2023015230A (es) 2021-06-18 2024-01-18 Ionis Pharmaceuticals Inc Compuestos y metodos para reducir la expresion de ifnar1.
WO2023043220A1 (ko) 2021-09-16 2023-03-23 주식회사 큐마인 Wfdc2의 발현을 조절하는 안티센스 화합물
JP2025528052A (ja) 2022-07-29 2025-08-26 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 脳及び筋肉へのトランスフェリン受容体（ｔｆｒ）媒介送達のための組成物及び方法
WO2024044352A1 (en) 2022-08-26 2024-02-29 The General Hospital Corporation Methods and compositions for prognosis and treatment of dilated cardiomyopathy and heart failure
KR20250075637A (ko) 2022-09-23 2025-05-28 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 Mecp2 발현을 감소시키기 위한 화합물 및 방법(compounds and methods for reducing mecp2 expression)
CN120693347A (zh) 2022-11-04 2025-09-23 瑞泽恩制药公司 钙电压门控通道辅助亚基γ1(CACNG1)结合蛋白和CACNG1介导的向骨骼肌的递送
EP4619438A2 (en) 2022-11-14 2025-09-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for fibroblast growth factor receptor 3-mediated delivery to astrocytes
WO2025088117A1 (en) 2023-10-25 2025-05-01 Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn Ribonucleic acid construct capable of inducing an immune response, as well as pharmaceutical composition and kit comprising same
WO2025158069A1 (en) 2024-01-25 2025-07-31 Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn CONSTRUCT COMPRISING mRNA-STRAND AND RETINOIC ACID-INDUCIBLE GENE I (RIG-I)-LIGAND(S), PHARMACEUTICAL COMPOSITION AND KIT COMPRISING THE SAME
WO2025184324A1 (en) 2024-02-28 2025-09-04 The General Hospital Corporation Methods and compositions for prognosis and treatment of cancer therapy-related cardiac dysfunction
WO2025184318A1 (en) 2024-02-28 2025-09-04 The General Hospital Corporation Methods and compositions for prognosis and treatment of peripartum cardiomyopathy

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0260032B1 (en) * 1986-09-08 1994-01-26 Ajinomoto Co., Inc. Compounds for the cleavage at a specific position of RNA, oligomers employed for the formation of said compounds, and starting materials for the synthesis of said oligomers
US4908307A (en) * 1986-12-19 1990-03-13 Karin D. Rodland Hybridization method and probe for detecting nucleic acid sequences
DE3814095A1 (de) * 1988-04-26 1989-11-09 Hans F W Spradau Verfahren zur herstellung von ethylacetat
DE68929361T2 (de) * 1988-04-27 2002-06-20 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligoribonukleotid-Derivate und Verwendung davon als Antiviral Arzneimittel
DE3915462A1 (de) * 1989-03-03 1990-09-06 Europ Lab Molekularbiolog Verwendung von 2-tert.-alkylimino-2-di-c(pfeil abwaerts)1(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)-(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)4(pfeil abwaerts)-alkylamino- 1,3-di-c(pfeil abwaerts)1(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)-(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)3(pfeil abwaerts)-alkyl-perhydro-1,3,2-diazaphosphorin fuer 0-substituierungsreaktionen von ribonukleosiden
DE3916871A1 (de) * 1989-05-24 1990-11-29 Boehringer Mannheim Gmbh Modifiziertes phosphoramidit-verfahren zur herstellung von modifizierten nukleinsaeuren
AU5931290A (en) * 1989-06-20 1991-01-08 Meiogenics, Inc. Nuclease resistant, single-stranded, non-naturally occurring nucleic acid molecules
US5134066A (en) * 1989-08-29 1992-07-28 Monsanto Company Improved probes using nucleosides containing 3-dezauracil analogs
DE69033495T2 (de) * 1989-10-24 2000-07-20 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2'-modifizierte nukleotide
JPH03240795A (ja) * 1990-02-15 1991-10-28 Ajinomoto Co Inc 新規オリゴヌクレオチド誘導体及び抗ウイルス剤への使用
US5149797A (en) * 1990-02-15 1992-09-22 The Worcester Foundation For Experimental Biology Method of site-specific alteration of rna and production of encoded polypeptides
DE4037363A1 (de) * 1990-04-09 1991-10-10 Europ Lab Molekularbiolog 2-0-alkylnukleotide sowie polymere, die solche nukleotide enthalten
DE69123979T2 (de) * 1990-10-12 1997-04-30 Max Planck Gesellschaft Abgeänderte ribozyme
DE4110085A1 (de) * 1991-03-27 1992-10-01 Boehringer Ingelheim Int 2'-o-alkyl-oligoribonukleotide, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung als antisense-oligonukleotide
GB9126339D0 (en) * 1991-12-11 1992-02-12 Ici Plc Chemical process

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PCT, заявка, 90/15814, C 07 H 21/04, 1990. *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2286801C2 (ru) * 2001-05-01 2006-11-10 Институт Нефтехимического Синтеза Имени А.В. Топчиева Российской Академии Наук Двухфазные биоадгезионные композиции, абсорбирующие воду
US11208430B2 (en) 2014-08-22 2021-12-28 Noogen Llc Modified oligonucleotides and methods for their synthesis
US12415828B2 (en) 2014-08-22 2025-09-16 Noogen Llc Modified oligonucleotides and methods for their synthesis
WO2018156056A1 (ru) * 2017-02-21 2018-08-30 Дмитрий Александрович СТЕЦЕНКО Модифицированные олигонуклеотиды, активирующие рнказу н
RU2740501C2 (ru) * 2017-02-21 2021-01-14 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук (ИХБФМ СО РАН) МОДИФИЦИРОВАННЫЕ ОЛИГОНУКЛЕОТИДЫ, АКТИВИРУЮЩИЕ РНКазу Н

Also Published As

Publication number Publication date
RU95107191A (ru) 1996-12-10
CA2140649C (en) 2004-12-21
CZ14395A3 (en) 1996-07-17
FI950254A0 (fi) 1995-01-20
FI950254A7 (fi) 1995-01-20
US5652355A (en) 1997-07-29
WO1994002498A1 (en) 1994-02-03
NZ255087A (en) 1997-02-24
BR9306775A (pt) 1998-12-08
HUT73323A (en) 1996-07-29
EP0650493B1 (en) 2000-12-13
EP0650493A1 (en) 1995-05-03
CZ292299B6 (cs) 2003-09-17
ES2154649T3 (es) 2001-04-16
FI950254L (fi) 1995-01-20
ATE198073T1 (de) 2000-12-15
AU4780193A (en) 1994-02-14
DK0650493T3 (da) 2001-03-19
AU674158B2 (en) 1996-12-12
HU9500194D0 (en) 1995-03-28
CA2140649A1 (en) 1994-02-03
DE69329755D1 (de) 2001-01-18
PL307232A1 (en) 1995-05-15
JPH08502040A (ja) 1996-03-05
DE69329755T2 (de) 2001-07-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2115658C1 (ru) Гибридный олигонуклеотид, содержащий фосфоротиоатную и/или фосфородитиоатную связи, терапевтическая фармацевтическая композиция, способ ингибирования генной экспрессии
US6143881A (en) Hybrid oligonucleotide phosphorothioates
US7045609B2 (en) Hybrid oligonucleotide phosphorothioates
WO1994002498A9 (en) Hybrid oligonucleotide phosphorothioates
EP0649467B1 (en) Self-stabilized oligonucleotides as therapeutic agents
EP0677056B1 (en) Oligonucleotide alkylphosphonates and alkylphosphonothioates
US5929226A (en) Antisense oligonucleotide alkylphosphonothioates and arylphospohonothioates
US5739308A (en) Integrated oligonucleotides
US6015886A (en) Oligonucleotide phosphate esters
Cohen Antisense oligodeoxynucleotides as antiviral agents
CA2490644A1 (en) Hybrid oligonucleotide phosphorothioates