RU2110066C1 - Method of quantitatively determining angiogenin in biological sample - Google Patents
Method of quantitatively determining angiogenin in biological sample Download PDFInfo
- Publication number
- RU2110066C1 RU2110066C1 RU96124515A RU96124515A RU2110066C1 RU 2110066 C1 RU2110066 C1 RU 2110066C1 RU 96124515 A RU96124515 A RU 96124515A RU 96124515 A RU96124515 A RU 96124515A RU 2110066 C1 RU2110066 C1 RU 2110066C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- angiogenin
- milk
- ribonuclease
- pancreatic
- pancreatic ribonuclease
- Prior art date
Links
- 102100022987 Angiogenin Human genes 0.000 title claims abstract description 43
- 108010072788 angiogenin Proteins 0.000 title claims abstract description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 18
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 title 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims abstract description 18
- 108020002230 Pancreatic Ribonuclease Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 102000005891 Pancreatic ribonuclease Human genes 0.000 claims abstract description 17
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 claims abstract description 11
- 102100037968 Ribonuclease inhibitor Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 claims abstract description 9
- 108010024226 placental ribonuclease inhibitor Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims abstract description 4
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 claims description 13
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 claims description 13
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 claims description 9
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 8
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 7
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 3
- 235000020185 raw untreated milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 2
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 2
- 235000020251 goat milk Nutrition 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 238000011138 biotechnological process Methods 0.000 description 1
- YKCWQPZFAFZLBI-UHFFFAOYSA-N cibacron blue Chemical compound C1=2C(=O)C3=CC=CC=C3C(=O)C=2C(N)=C(S(O)(=O)=O)C=C1NC(C=C1S(O)(=O)=O)=CC=C1NC(N=1)=NC(Cl)=NC=1NC1=CC=CC=C1S(O)(=O)=O YKCWQPZFAFZLBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003161 ribonuclease inhibitor Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к молочной, мясной отраслям промышленности, ветеринарии, медицинской промышленности, а именно к количественной оценке белковых веществ. The invention relates to the dairy, meat industries, veterinary medicine, the medical industry, and in particular to the quantitative assessment of protein substances.
Ангиогенин - белковый активный фактор роста, впервые получен из культуральной среды клеток человека в 1985 году [1]. Позже обнаружен в различных тканях, сыворотке крови животных и человека, коровьем молоке [2]. Зарубежными исследователями достаточно хорошо изучена структура и биохимические свойства ангиогенина. Angiogenin is a protein active growth factor, first obtained from the culture medium of human cells in 1985 [1]. It was later found in various tissues, animal and human serum, and cow's milk [2]. Foreign researchers have studied the structure and biochemical properties of angiogenin quite well.
Однако количественный метод определения ангиогенина и способы его выделения из молочного сырья являются актуальными, но пока нерешенными задачами. However, a quantitative method for the determination of angiogenin and methods for its isolation from dairy raw materials are relevant, but unsolved problems.
Известен способ определения ангиогенина в сыворотке крови человека с использованием моноклональных антител [3]. A known method for the determination of angiogenin in human serum using monoclonal antibodies [3].
Недостатком его является сложная методика проведения исследований и применение дорогостоящей аппаратуры. Its disadvantage is the complex research methodology and the use of expensive equipment.
Известен способ определения бычьего ангиогенина в растворах, взятый в качестве прототипа, в котором используется комбинированная проба конкурентного взаимодействия панкреатической рибонуклеазы и ангиогенина с плацентарным ингибитором РНКазы [4]. Необходимым условием применения данного способа является низкая концентрация панкреатической рибонуклеазы. A known method for determining bovine angiogenin in solutions, taken as a prototype, which uses a combined sample of the competitive interaction of pancreatic ribonuclease and angiogenin with a placental RNase inhibitor [4]. A prerequisite for the application of this method is a low concentration of pancreatic ribonuclease.
Однако этот способ не может быть использован для количественного определения ангиогенина в биологических жидкостях с высоким содержанием панкреатической рибонуклеазы, которая высокогомологична ангиогенину. В связи с этим он не может быть применен для анализа на ангиогенин молочного сырья, содержащего высокие концентрации РНКазы, а именно 10-35 мг/л [5]. However, this method cannot be used to quantify angiogenin in biological fluids with a high content of pancreatic ribonuclease, which is highly homologous to angiogenin. In this regard, it cannot be used for analysis of angiogenin dairy raw materials containing high concentrations of RNase, namely 10-35 mg / l [5].
Задачей изобретения является разработка достоверного, чувствительного и эффективного способа количественного определения ангиогенина в молочном сырье. The objective of the invention is to develop a reliable, sensitive and effective method for the quantitative determination of angiogenin in milk raw materials.
Это достигается хроматографической очисткой сырья от избытка РНКазы перед проведением комбинированной пробы конкурентного взаимодействия панкреатической рибонуклеазы и ангиогенина с плацентарным ингибитором РНКазы. Согласно изобретению молочное сырье обезжиривают центрифугированием, т.к. содержащийся в нем жир мешает проведению дальнейших процедур. Следующий этап включает хроматографическую очистку исследуемых проб от РНКазы, содержащихся в них в высоких концентрациях, что не позволяет в присутствии больших количеств эндогенной рибонуклеазы определение ангиогенина с помощью комбинированной пробы конкурентного взаимодействия панкреатической рибонуклеазы и ангиогенина с плацентарным ингибитором РНКазы. This is achieved by chromatographic purification of raw materials from excess RNase before conducting a combined sample of competitive interaction of pancreatic ribonuclease and angiogenin with a placental RNase inhibitor. According to the invention, the raw milk is degreased by centrifugation, because the fat contained in it interferes with further procedures. The next step involves the chromatographic purification of the studied samples from RNase containing in high concentrations, which does not allow the determination of angiogenin in the presence of large amounts of endogenous ribonuclease using a combined sample of competitive interaction of pancreatic ribonuclease and angiogenin with a placental RNase inhibitor.
В молоке и в продуктах молочного производства содержание панкреатической РНКазы на порядок выше, чем ангиогенина. Поэтому возникает необходимость снижения концентрации эндогенной рибонуклеазы в молочном сырье до значений, позволяющих при допустимых расходах ингибитора применять комбинированную пробу конкурентного взаимодействия панкреатической рибонуклеазы и ангиогенина с плацентарным ингибитором РНКазы. Для хроматографической очистки молочного сырья от панкреатической РНКазы в качестве сорбента используют голубую агарозу (Cibacron blue GA Agarose). Хроматография на голубой агарозе позволяет значительно очистить молочное сырье от рибонуклеазы. Общую РНКазную активность сырья до хроматографической очистки на голубой агарозе и после нее определяют против субстрата суммарной дрожжевой РНК. После хроматографии на голубой агарозе молочное сырье анализируют на количество ангиогенина, применяя комбинированную пробу конкурентного взаимодействия панкреатической рибонуклеазы и ангиогенина с плацентарным ингибитором РНКазы. In milk and in dairy products, the content of pancreatic RNase is an order of magnitude higher than angiogenin. Therefore, there is a need to reduce the concentration of endogenous ribonuclease in milk raw materials to values that make it possible to use a combined sample of competitive interaction of pancreatic ribonuclease and angiogenin with a placental RNase inhibitor at acceptable costs of the inhibitor. For chromatographic purification of milk raw materials from pancreatic RNase, blue agarose (Cibacron blue GA Agarose) is used as a sorbent. Chromatography on blue agarose can significantly clean milk raw materials from ribonuclease. The total RNase activity of the raw material before chromatographic purification on blue agarose and after it is determined against the substrate of total yeast RNA. After chromatography on blue agarose, the raw milk is analyzed for the amount of angiogenin using a combined sample of competitive interaction of pancreatic ribonuclease and angiogenin with a placental RNase inhibitor.
Способ осуществляется следующим образом. The method is as follows.
Молочное сырье обезжиривают центрифугированием. Затем подвергают хроматографической очистке от избытка панкреатической рибонуклеазы на колонке, заполненной сорбентом голубая агароза. До и после пропускания обезжиренного молочного сырья через колонку с голубой агарозой контролируют в нем содержание панкреатической рибонуклеазы. Количественное содержание ангиогенина определяют, используя комбинированную пробу конкурентного взаимодействия панкреатической рибонуклеазы и ангиогенина с плацентарным ингибитором РНКазы. Dairy raw materials are degreased by centrifugation. Then subjected to chromatographic purification from excess pancreatic ribonuclease on a column filled with blue agarose sorbent. Before and after passing skim milk raw materials through a column of blue agarose, the content of pancreatic ribonuclease is controlled in it. The quantitative content of angiogenin is determined using a combined sample of competitive interaction of pancreatic ribonuclease and angiogenin with a placental RNase inhibitor.
Пример 1. 15 мл коровьего молока обезжиривают центрифугированием (10000 об/мин, 15 мин). Перед хроматографической очисткой определяют общую рибонуклеазную активность При этом используют буфер Трис-HCL, pH 7,0, а в качестве субстрата 1%-ный раствор суммарной дрожжевой РНК. Затем через хроматографическую колонку с внутренним объемом 100 мл, заполненную голубой агарозой, пропускают 2 мл обезжиренного молока. На выходе с колонки получают фракцию, в которой определяют активность остаточной рибонуклеазы против субстрата суммарной дрожжевой РНК. Содержание ангиогенина в молоке определяют, используя комбинированную пробу конкурентного взаимодействия панкреатической рибонуклеазы и ангиогенина с плацентарным ингибитором РНКазы. О концентрации ангиогенина в молоке судят по количеству не связанной с ингибитором РНКазы. Количественное определение ангиогенина проводится в пятикратной повторности. По результатам анализа в исследуемом образце коровьего молока концентрация ангиогенина составляет 1,2 мг/л. Example 1. 15 ml of cow's milk is degreased by centrifugation (10000 rpm, 15 min). Before chromatographic purification, the total ribonuclease activity is determined. Tris-HCL buffer, pH 7.0, is used. A 1% solution of total yeast RNA is used as a substrate. Then through a chromatographic column with an internal volume of 100 ml, filled with blue agarose, 2 ml of skim milk is passed. At the column outlet, a fraction is obtained in which the activity of residual ribonuclease against the substrate of total yeast RNA is determined. The angiogenin content in milk is determined using a combined sample of competitive interaction of pancreatic ribonuclease and angiogenin with a placental RNase inhibitor. The concentration of angiogenin in milk is judged by the amount of unrelated RNase inhibitor. Quantitative determination of angiogenin is carried out in five repetitions. According to the results of the analysis, the concentration of angiogenin in the test sample of cow's milk is 1.2 mg / l.
Пример 2. Осуществляется по примеру 1, используя в качестве сырья для количественного определения ангиогенина молозиво. При этом концентрация ангиогенина в молозиве, согласно способа количественного определения ангиогенина в молочном сырье, составляет 2,2 мг/л. Example 2. It is carried out according to example 1, using colostrum as a raw material for the quantitative determination of angiogenin. Moreover, the concentration of angiogenin in colostrum, according to the method for the quantitative determination of angiogenin in milk raw materials, is 2.2 mg / L.
Пример 3. Осуществляется по примеру 1, используя в качестве сырья для количественного определения ангиогенина стародойное молоко. При этом концентрация ангиогенина в стародойном молоке, согласно способа количественного определения ангиогенина в молочном сырье, составляет 1,6 мг/л. Example 3. It is carried out according to example 1, using old-milk milk as a raw material for the quantitative determination of angiogenin. The concentration of angiogenin in old-milk milk, according to the method for the quantitative determination of angiogenin in milk raw materials, is 1.6 mg / L.
Пример 4. Осуществляется по примеру 1, используя в качестве сырья для определения ангиогенина козье молоко. При этом концентрация ангиогенина в козьем молоке, согласно способа количественного определения ангиогенина в молочном сырье, составляет 0,27 мг/л. Example 4. It is carried out according to example 1, using goat milk as a raw material for determining angiogenin. The concentration of angiogenin in goat milk, according to the method for the quantitative determination of angiogenin in milk raw materials, is 0.27 mg / L.
Сравнительная оценка определения количества ангиогенина в различных видах молочного сырья, согласно способа количественного определения ангиогенина, представлена в таблице. A comparative assessment of the determination of the amount of angiogenin in various types of raw milk, according to the method for the quantitative determination of angiogenin, is presented in the table.
Анализ данных таблицы свидетельствует о том, что метод является достоверным и может быть применен для различных видов молочного сырья. Предложенный способ, включающий очистку молочного сырья от РНКазы, позволяет оценить содержание ангиогенина в биологических жидкостях с высоким содержанием рибонуклеазы, а именно превышающим содержание ангиогенина в 8-20 раз. Нижний предел чувствительности метода составляет сотые доли мг/л. Достоверность измерений соответствует уровню значимости для биотехнологических процессов. An analysis of the data in the table indicates that the method is reliable and can be applied to various types of dairy raw materials. The proposed method, including the purification of dairy raw materials from RNase, allows us to estimate the content of angiogenin in biological fluids with a high content of ribonuclease, namely, exceeding the content of angiogenin by 8-20 times. The lower limit of the sensitivity of the method is hundredths of mg / L. The reliability of the measurements corresponds to the level of significance for biotechnological processes.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе. Sources of information taken into account during the examination.
1. Fett J. W. , Strydom D.J., Lobb R.R., Aiderman E.V., Bethune J.L., Rioran J.F., Vallee B.L. 1985, Biochemistry, V.24, p.5480-5486. 1. Fett J. W., Strydom D.J., Lobb R.R., Aiderman E.V., Bethune J.L., Rioran J.F., Vallee B.L. 1985, Biochemistry, V.24, p. 5480-5486.
2. Maes P. , Damart D., Rommens C., e.a., 1988, FEBS Lett, V. 24, p. 41-45. 2. Maes P., Damart D., Rommens C., e.a., 1988, FEBS Lett, V. 24, p. 41-45.
3. Blaser J. Triebe S., Kopp C., Jscheshe H., 1993, Eur. J. Clin. Chem. Clin. Bio-chem., V.31, p. 513-516. 3. Blaser J. Triebe S., Kopp C., Jscheshe H., 1993, Eur. J. Clin. Chem. Clin. Bio-chem., V.31, p. 513-516.
4. Bond M.D., 1988, Anai Biochemistry, V.173, p.166-173 (прототип). 4. Bond M.D., 1988, Anai Biochemistry, V.173, p.166-173 (prototype).
5. Шидловская В.П. Ферменты молока. M.: Агропромиздат, 1985, с. 152. 5. Shidlovskaya V.P. Enzymes of milk. M .: Agropromizdat, 1985, p. 152.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96124515A RU2110066C1 (en) | 1996-12-27 | 1996-12-27 | Method of quantitatively determining angiogenin in biological sample |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96124515A RU2110066C1 (en) | 1996-12-27 | 1996-12-27 | Method of quantitatively determining angiogenin in biological sample |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2110066C1 true RU2110066C1 (en) | 1998-04-27 |
| RU96124515A RU96124515A (en) | 1998-09-20 |
Family
ID=20188631
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU96124515A RU2110066C1 (en) | 1996-12-27 | 1996-12-27 | Method of quantitatively determining angiogenin in biological sample |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2110066C1 (en) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2133464C1 (en) * | 1998-06-25 | 1999-07-20 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Method for quantitatively determining angiogenine in milk material |
| RU2175195C1 (en) * | 2000-06-23 | 2001-10-27 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Method of isolating anigiogenin-rich protein fraction |
| RU2182791C2 (en) * | 2000-07-06 | 2002-05-27 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Sterilized angiogenine-enriched milk |
| EP2293678A4 (en) * | 2008-05-14 | 2011-06-22 | Agriculture Victoria Serv Pty | Angiogenin-enriched milk fractions |
| US8551547B2 (en) | 2006-11-10 | 2013-10-08 | Murray Goulburn Co-Operative Co., Limited | Process for the preparation of angiogenin |
| US9789168B2 (en) | 2008-05-14 | 2017-10-17 | Agriculture Victoria Services Pty Ltd | Use of angiogenin or angiogenin agonists for treating diseases and disorders |
| US9839676B2 (en) | 2012-05-10 | 2017-12-12 | Murray Goulburn Co-Operative Co., Limited | Methods of treating cancer using angiogenin or an angiogenin agonist |
-
1996
- 1996-12-27 RU RU96124515A patent/RU2110066C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Bond M.D. Anai Biochemistry. 1988 - v.173, p.166-173. * |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2133464C1 (en) * | 1998-06-25 | 1999-07-20 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Method for quantitatively determining angiogenine in milk material |
| RU2175195C1 (en) * | 2000-06-23 | 2001-10-27 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Method of isolating anigiogenin-rich protein fraction |
| RU2182791C2 (en) * | 2000-07-06 | 2002-05-27 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Sterilized angiogenine-enriched milk |
| US8551547B2 (en) | 2006-11-10 | 2013-10-08 | Murray Goulburn Co-Operative Co., Limited | Process for the preparation of angiogenin |
| EP2293678A4 (en) * | 2008-05-14 | 2011-06-22 | Agriculture Victoria Serv Pty | Angiogenin-enriched milk fractions |
| US9247766B2 (en) | 2008-05-14 | 2016-02-02 | Murray Goulburn Co-Operative Co., Limited | Angiogenin-enriched milk fractions |
| US9789168B2 (en) | 2008-05-14 | 2017-10-17 | Agriculture Victoria Services Pty Ltd | Use of angiogenin or angiogenin agonists for treating diseases and disorders |
| US10456453B2 (en) | 2008-05-14 | 2019-10-29 | Agriculture Victoria Services Pty Ltd | Use of angiogenin or angiogenin agonists for treating diseases and disorders |
| US9839676B2 (en) | 2012-05-10 | 2017-12-12 | Murray Goulburn Co-Operative Co., Limited | Methods of treating cancer using angiogenin or an angiogenin agonist |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Anema | The use of “lab-on-a-chip” microfluidic SDS electrophoresis technology for the separation and quantification of milk proteins | |
| Bonfatti et al. | Validation of a new reversed-phase high-performance liquid chromatography method for separation and quantification of bovine milk protein genetic variants | |
| Das et al. | Milk adulteration and detection: a review | |
| Erbersdobler et al. | Forty years of furosine–Forty years of using Maillard reaction products as indicators of the nutritional quality of foods | |
| Nouri et al. | Designing a direct ELISA kit for the detection of Staphylococcus aureus enterotoxin A in raw milk samples | |
| US20040092027A1 (en) | Rapid test for biological substances using ftir | |
| RU2110066C1 (en) | Method of quantitatively determining angiogenin in biological sample | |
| CN108414628A (en) | The detection method of A2- beta-caseins in a kind of milk | |
| Veloso et al. | Evaluation of cheese authenticity and proteolysis by HPLC and urea–polyacrylamide gel electrophoresis | |
| Friedman | Comparison of four different silver-staining techniques for salivary protein detection in alkaline polyacrylamide gels | |
| JPH05133938A (en) | Method for separating glycosylated hemoglobin hb alc by agarose gel | |
| Montalbano et al. | Quantitative determination of casein genetic variants in goat milk: Application in Girgentana dairy goat breed | |
| Jenkins | Clinical application of capillary electrophoresis to unconcentrated human urine proteins | |
| NL8200587A (en) | METHOD FOR AN IMMUNOCHEMICAL ENZYME DETERMINATION. | |
| Krizkova et al. | Comparison of Metallothionein Detection by Using Brdicka Reaction and Enzyme‐Linked Immunosorbent Assay Employing Chicken Yolk Antibodies | |
| EP1169647B1 (en) | Method for analyzing the amount of intraabdominal adipose tissue | |
| CN101294148B (en) | Method for extracting and purifying high ferro myohemoglobin reductase from myocardium | |
| Saud et al. | Identification of chicken meat quality via rapid array isoelectric focusing with extraction of hemoglobin and myoglobin in meat sample | |
| Borgese et al. | Concentration of NADH-cytochrome b5 reductase in erythrocytes of normal and methemoglobinemic individuals measured with a quantitative radioimmunoblotting assay. | |
| Soler et al. | Serum amyloid A3 (SAA3), not SAA1 appears to be the major acute phase SAA isoform in the pig | |
| JP4144117B2 (en) | Method and apparatus for measuring glucose | |
| Arfuso et al. | Comparison of refractometric and biuretic methods for the assay of total protein in horse serum and plasma under various storage conditions | |
| JP3490715B2 (en) | Method for detecting hemoglobin-promoting glucosylated end products | |
| NZ525905A (en) | Method to diagnose transmissible spongiform encephalopathy (TSE) by determining amount of hematopoietic cells i.e. erythoid, megakaryocyte or platelet lineage present | |
| EP0965043B1 (en) | Detection of cardiac muscle necrosis by immunoassay and appropriate antibodies therefor |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20101228 |