RU2192009C1 - Method for detecting activity of inflammatory process in uveitis-patients - Google Patents
Method for detecting activity of inflammatory process in uveitis-patients Download PDFInfo
- Publication number
- RU2192009C1 RU2192009C1 RU2001118897A RU2001118897A RU2192009C1 RU 2192009 C1 RU2192009 C1 RU 2192009C1 RU 2001118897 A RU2001118897 A RU 2001118897A RU 2001118897 A RU2001118897 A RU 2001118897A RU 2192009 C1 RU2192009 C1 RU 2192009C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- supernatant
- inflammatory process
- luminosity
- residue
- total
- Prior art date
Links
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 title claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 15
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 title claims description 23
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 36
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 claims abstract description 11
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims description 19
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 19
- QVLTXCYWHPZMCA-UHFFFAOYSA-N po4-po4 Chemical compound OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=O QVLTXCYWHPZMCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 abstract 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 27
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 7
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 6
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 230000004304 visual acuity Effects 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000002159 anterior chamber Anatomy 0.000 description 2
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000004410 intraocular pressure Effects 0.000 description 2
- 229910000358 iron sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 description 1
- 206010052129 Ciliary hyperaemia Diseases 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 206010022557 Intermediate uveitis Diseases 0.000 description 1
- 206010022941 Iridocyclitis Diseases 0.000 description 1
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010025421 Macule Diseases 0.000 description 1
- 201000010183 Papilledema Diseases 0.000 description 1
- 206010038886 Retinal oedema Diseases 0.000 description 1
- 238000006993 Weiss annulation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 201000004612 anterior uveitis Diseases 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 208000019069 chronic childhood arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 210000000795 conjunctiva Anatomy 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 210000000695 crystalline len Anatomy 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 210000000871 endothelium corneal Anatomy 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 208000016339 iris pattern Diseases 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 201000002215 juvenile rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002577 ophthalmoscopy Methods 0.000 description 1
- 210000001328 optic nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000011369 optimal treatment Methods 0.000 description 1
- -1 oxygen radicals Chemical class 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 210000001747 pupil Anatomy 0.000 description 1
- 238000006862 quantum yield reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000007348 radical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036647 reaction Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 201000011195 retinal edema Diseases 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 210000004127 vitreous body Anatomy 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для исследования свободно-радикальных процессов в слезной жидкости как показателей свободно-радикального окисления в тканях глаза при обследовании больного и для обоснования выбора оптимальной тактики лечения с учетом состояния генерации активных форм кислорода, обоснования включения рекомендуемых в последнее время антиоксидантов в комплекс терапии, контроля эффективности проводимого лечения. The invention relates to medicine, namely to ophthalmology, and can be used to study free radical processes in the lacrimal fluid as indicators of free radical oxidation in the tissues of the eye when examining a patient and to justify the choice of optimal treatment tactics taking into account the state of generation of reactive oxygen species, justification for the inclusion of recently recommended antioxidants in the complex of therapy, monitoring the effectiveness of the treatment.
По современным представлениям одной из важнейших задач при клиническом обследовании больного увеитом различной этиологии является установление активности воспалительного процесса, так как это играет огромное значение в определении тактики лечения больного, необходимой для решения вопроса о возможности оперативного вмешательства для лечения осложнений и последствий увеита. According to modern concepts, one of the most important tasks in a clinical examination of a patient with uveitis of various etiologies is to establish the activity of the inflammatory process, since this plays a huge role in determining the patient's treatment tactics necessary to solve the question of the possibility of surgical intervention to treat the complications and consequences of uveitis.
Прототипом предлагаемого нами способа определения активности воспалительного процесса у больных увеитами послужил метод, предложенный BenEzra D. с соавт. (BenEzra D., Forrester J.V., Nussenblatt R.B., Tabbara К., Timonen P. Uveitis scoring system. Berlin: Springer-Verlag, 1992; p. 1-9). Известный метод основан на определении активности воспалительного процесса клиническими приемами, основным из которых является непрямая бинокулярная офтальмоскопия. Данным способом оценивается степень помутнения оптических сред в баллах, степень клеточной реакции, наличие очагов на глазном дне, состояние сосудов глазного дна, макулы, диска зрительного нерва, на основании чего устанавливается активность воспалительного процесса. За основу взятой нами классификации активности увеита принята классификация Л.А.Кацнельсона, В.Э. Танковского (Л.А.Кацнельсон, В.Э.Танковский. Увеиты. (Клиника, лечение). М., 4-й филиал Воениздата. 1998. 208 с., С. 22-23), также базирующаяся на клинических характеристиках воспалительного процесса. The prototype of our proposed method for determining the activity of the inflammatory process in patients with uveitis was the method proposed by BenEzra D. et al. (BenEzra D., Forrester J.V., Nussenblatt R. B., Tabbara K., Timonen P. Uveitis scoring system. Berlin: Springer-Verlag, 1992; p. 1-9). The known method is based on determining the activity of the inflammatory process by clinical methods, the main of which is indirect binocular ophthalmoscopy. In this way, the degree of clouding of the optical media in points, the degree of cellular reaction, the presence of foci on the fundus, the state of the vessels of the fundus, macula, optic nerve disc, are estimated, on the basis of which the activity of the inflammatory process is established. The classification of uveitis activity we have adopted is based on the classification of L.A. Katsnelson, V.E. Tankovsky (L.A. Katsnelson, V.E. Tankovsky. Uveitis. (Clinic, treatment). M., 4th branch of the Military Publishing House. 1998. 208 p., S. 22-23), also based on the clinical characteristics of inflammatory process.
Технический результат предлагаемого изобретения - повышение точности диагностики, ее достоверности. The technical result of the invention is to increase the accuracy of diagnosis, its reliability.
Метод основан на определении свободных радикалов - активных форм кислорода в слезной жидкости методом регистрации люминолзависимой хемилюминесценции, отражающей состояние свободно-радикального окисления в тканях глаза и его изменения в зависимости от активности воспалительного процесса и проводимого лечения. The method is based on the determination of free radicals - active forms of oxygen in the lacrimal fluid by the method of recording luminol-dependent chemiluminescence, which reflects the state of free-radical oxidation in the tissues of the eye and its change depending on the activity of the inflammatory process and the treatment.
Способ осуществляется следующим образом. Хемилюминесценцию изучают на приборе ХЛМ-003. Проверку стабильности работы установки проводят перед каждым измерением по излучению вторичного эталона СФХМ 1 (ГОСТ 9411-81). Интенсивность свечения контроля составила 5,1•105 квантов/с. Для удобства эта величина принимается за одну условную единицу.The method is as follows. Chemiluminescence is studied on the device HLM-003. A check of the stability of the installation is carried out before each measurement by the radiation of the secondary standard SFHM 1 (GOST 9411-81). The luminescence intensity of the control was 5.1 • 10 5 quanta / s. For convenience, this value is taken as one conventional unit.
Готовят модельную систему, состоящую из фосфатного буфера (20 мМ КН2РO4, 105 мМ КС1, рН 7,5) с добавлением цитрата натрия (50 мМ) и люминола (10-5 М). Данная модельная система состоит из физико-химически стабильных компонентов, поэтому не требуется ее приготовление перед каждым анализом заново, что существенно сокращает время исследования и повышает его достоверность.A model system is prepared consisting of a phosphate buffer (20 mM KH 2 PO 4 , 105 mM KC1, pH 7.5) with the addition of sodium citrate (50 mM) and luminol (10 -5 M). This model system consists of physically-chemically stable components, therefore, it is not necessary to prepare it before each analysis again, which significantly reduces the study time and increases its reliability.
Готовят раствор для исследования люминолзависимого свечения, который представляет собой смесь физиологического раствора 2 мл (рН 7,2) с люминолом (10-5 М). Все приготовленные растворы стабильны, что позволяет существенно сократить время исследования и повысить его точность.A solution is prepared for the study of luminol-dependent luminescence, which is a mixture of physiological saline 2 ml (pH 7.2) with luminol (10 -5 M). All prepared solutions are stable, which can significantly reduce the study time and increase its accuracy.
Стимулированную вдыханием паров 10% нашатырного спирта слезную жидкость в объеме 0,15 мл забирают канюлей из слезного озера и нижнего конъюнктивального свода, не касаясь конъюнктивы и роговицы, утром после пробуждения больного, чтобы исключить влияние на состав слезной жидкости гигиенических процедур, а также различных физических и психоэмоциональных факторов. Полученную слезную жидкость помещают в центрифужную пробирку и центрифугируют при 2000 об/мин 5 минут. Слезная жидкость разделяется на 2 фракции - надосадочную жидкость (супернатант) и осадок, которые затем исследуют раздельно. A tear fluid in the volume of 0.15 ml, stimulated by inhalation of vapors of 10% ammonia, is taken by a cannula from the lacrimal lake and lower conjunctival arch, without touching the conjunctiva and cornea, in the morning after the patient wakes up to exclude the effect of hygienic procedures on the composition of the tear fluid, as well as various physical and psychoemotional factors. The resulting tear fluid was placed in a centrifuge tube and centrifuged at 2000 rpm for 5 minutes. The tear fluid is divided into 2 fractions - the supernatant (supernatant) and sediment, which are then examined separately.
Отбирают надосадочную жидкость в объеме 0,1 мл и определяют ее суммарную антиокислительную активность. Для этого 5 мл модельной системы цитрат-фосфат-люминол (с 0,1 мл физиологического раствора) помещают в термостатируемую кювету хемилюминомера ХЛМ-003, в которой поддерживается температура 37oС. При постоянном перемешивании реакционной смеси вводят активатор окисления - 1 мл 10 мМ раствора сернокислого железа. Определяют светосумму люминесценции, характеризующую генерацию радикалов кислорода в реакции Гебера-Вайсса. Светосумму регистрируют за 5 минут измерения по площади под кривой записи. Показатели светосуммы модельной системы служат контролем. Супернатант слезной жидкости в объеме 0,1 мл помещают в модельную систему и в кювету хемилюминомера, после чего начинают процесс регистрации хемилюминесценции. При постоянном перемешивании вводят 1 мл 10 мМ раствора сернокислого железа и записывают в течение 5 минут хемилюминограмму. Интегральной величиной является светосумма свечения, которая отражает квантовый выход произошедших в модельной системе свободно-радикальных реакций. Полученные цифровые показатели светосуммы оценивают в процентах от контроля, что является численным выражением суммарной антиокислительной активности супернатанта. Чем выше суммарная антиокислительная активность супернатанта, тем в большей степени угнетается генерация свободных радикалов в модельной системе и тем меньше светосумма хемилюминесценции модельной системы.Select a supernatant in a volume of 0.1 ml and determine its total antioxidant activity. For this, 5 ml of the model system of citrate-phosphate-luminol (with 0.1 ml of physiological solution) is placed in a thermostatically controlled cell of the chemiluminomer HLM-003, in which the temperature is maintained at 37 o C. With constant stirring of the reaction mixture, an oxidation activator is introduced - 1 ml 10 mM iron sulfate solution. The luminescence light sum characterizing the generation of oxygen radicals in the Heber-Weiss reaction is determined. The light sum is recorded after 5 minutes of measuring the area under the recording curve. Indicators of the light sum of the model system serve as a control. The supernatant of the tear fluid in a volume of 0.1 ml is placed in a model system and in a chemiluminomer cuvette, after which the process of registering chemiluminescence is started. With constant stirring, 1 ml of a 10 mM iron sulfate solution is introduced and a chemiluminogram is recorded for 5 minutes. The integral value is the luminosity of the glow, which reflects the quantum yield of free-radical reactions that occurred in the model system. The obtained digital indicators of the light sum are estimated as a percentage of the control, which is a numerical expression of the total antioxidant activity of the supernatant. The higher the total antioxidant activity of the supernatant, the more the generation of free radicals in the model system is inhibited and the less the light sum of the chemiluminescence of the model system.
Исследование осадка слезной жидкости объемом 0,05 мл заключается в следующем. Осадок ресуспендируют в 0,5 мл раствора для исследования люминолзависимого свечения, затем помещают в кювету, куда дополнительно добавляют еще 1,5 мл раствора для исследования люминолзависимого свечения. Кювету помещают в термостатируемую камеру хемилюминомера и в течение 5 минут регистрируют хемилюминесценцию. Записывают основные параметры хемилюминограммы - светосумму свечения, максимальную интенсивность свечения и величину спонтанного излучения. Учитывают основной, наиболее информативный показатель - светосумму свечения (светимость). The study of the sediment of the tear fluid with a volume of 0.05 ml is as follows. The precipitate is resuspended in 0.5 ml of a solution for studying the luminol-dependent glow, then placed in a cuvette, to which an additional 1.5 ml of a solution for studying the luminol-dependent glow is added. The cuvette is placed in a temperature-controlled chamber of a chemiluminomer and chemiluminescence is recorded for 5 minutes. The main parameters of the chemiluminogram are recorded — the light sum of the glow, the maximum intensity of the glow, and the magnitude of the spontaneous emission. Take into account the main, most informative indicator - the luminosity of the glow (luminosity).
Весь процесс измерения хемилюминесценции и обработка результатов проводятся автоматически, что повышает точность и объективность полученной информации. Полученные данные обрабатываются специальной компьютерной программой и фиксируются в цифрах и графически на экране монитора. The entire process of measuring chemiluminescence and processing the results are carried out automatically, which increases the accuracy and objectivity of the information received. The data obtained are processed by a special computer program and recorded in numbers and graphically on a monitor screen.
Таким образом, методом регистрации люминолзависимой хемилюминесценции исследуются 2 фракции слезной жидкости - супернатант и осадок и определяются соответственно 2 группы показателей - суммарная антиокислительная активность супернатанта и светимость осадка. Данным методом обследовано 46 человек (15 здоровых и 31 больной увеитом). Осадок здоровых обладает минимальной светимостью 1,83±0,85 условных единиц и ниже. Светимость осадка слезной жидкости больных увеитами обусловлена наличием в нем свободных радикалов, вырабатываемых фагоцитирующими клетками, мигрирующими в слезу при воспалении. Thus, 2 lacrimal fluid fractions — supernatant and sediment — are studied by luminol-dependent chemiluminescence registration, and 2 groups of indicators are determined, respectively, total antioxidant activity of the supernatant and precipitate luminosity. This method examined 46 people (15 healthy and 31 patients with uveitis). Healthy sediment has a minimum luminosity of 1.83 ± 0.85 conventional units or less. The luminosity of the lacrimal sediment of patients with uveitis is due to the presence in it of free radicals produced by phagocytic cells that migrate to the tear during inflammation.
Наоборот, супернатант слезной жидкости здоровых людей обладает антиокислительной активностью и при добавлении к модельной системе, в которой протекают реакции свободно-радикального окисления, приводит к уменьшению количества свободных радикалов и сопровождается соответственно уменьшением светосуммы свечения модельной системы. В среднем уменьшение светосуммы свечения модельной системы в присутствии супернатанта слезной жидкости здорового человека составляет более 50%. При увеитах светосумма свечения модельной системы в присутствии супернатанта слезной жидкости в процентах от контроля составляет менее 50%, что говорит о снижении суммарной антиокислительной активности супернатанта, которое связано с расходованием антиоксидантов слезы на утилизацию свободных радикалов. Анализ записей хемилюминесценции слезной жидкости 31 больного увеитом вкупе с клиническими данными позволил выделить основные параметры активности увеального воспаления. On the contrary, the supernatant of the tear fluid of healthy people has antioxidant activity and, when added to the model system in which free radical oxidation reactions occur, leads to a decrease in the number of free radicals and is accompanied by a corresponding decrease in the light sum of the luminescence of the model system. On average, the decrease in the luminosum of the glow of the model system in the presence of the supernatant of the tear fluid of a healthy person is more than 50%. In case of uveitis, the luminosum of the luminescence of the model system in the presence of the tear fluid supernatant as a percentage of the control is less than 50%, which indicates a decrease in the total antioxidant activity of the supernatant, which is associated with the consumption of tear antioxidants for the disposal of free radicals. An analysis of the records of chemiluminescence of the lacrimal fluid of 31 patients with uveitis, coupled with clinical data, made it possible to identify the main parameters of the activity of uveal inflammation.
Воспалительный процесс при увеитах расценивается как активный, если светимость осадка слезной жидкости превышает 8,75±3,91 условных единиц и суммарная антиокислительная активность супернатанта слезной жидкости менее 25%. Воспалительный процесс при увеитах субактивный, если светимость осадка составляет 8,75±3,91 - 1,83±0,85 условных единиц и суммарная антиокислительная активность супернатанта 50-25%. Воспалительный процесс при увеитах неактивный, если светимость осадка составляет 1,83±0,85 условных единиц и ниже и суммарная антиокислительная активность супернатанта слезной жидкости 50% и более. The inflammatory process in uveitis is regarded as active if the luminosity of the tear fluid sediment exceeds 8.75 ± 3.91 conventional units and the total antioxidant activity of the tear fluid supernatant is less than 25%. The inflammatory process in uveitis is subactive if the luminosity of the sediment is 8.75 ± 3.91 - 1.83 ± 0.85 conventional units and the total antioxidant activity of the supernatant is 50-25%. The inflammatory process with uveitis is inactive if the luminosity of the sediment is 1.83 ± 0.85 conventional units or less and the total antioxidant activity of the tear fluid supernatant is 50% or more.
На фигуре 1 представлена типичная запись хемилюминесценции модельной системы с 0,1 мл физиологического раствора (а - контроль) и в присутствии 0,1 мл супернатанта слезной жидкости с различной суммарной антиокислительной активностью (б - здорового человека, в - больного увеитом с субактивным воспалительным процессом, г - больного увеитом с активным воспалительным процессом). The figure 1 presents a typical record of the chemiluminescence of a model system with 0.1 ml of physiological saline (a - control) and in the presence of 0.1 ml of tear fluid supernatant with different total antioxidant activity (b - a healthy person, c - a patient with uveitis with a subactive inflammatory process , g - a patient with uveitis with an active inflammatory process).
На фигуре 2 представлена запись хемилюминесценции осадка слезной жидкости при увеитах с различной активностью воспалительного процесса (а - кривая записи хемилюминесценции здорового человека, б - больного увеитом с субактивным воспалительным процессом, в - больного увеитом с активным воспалительным процессом). The figure 2 presents the record of chemiluminescence of the sediment of the lacrimal fluid in uveitis with different activity of the inflammatory process (a - curve recording chemiluminescence of a healthy person, b - patient with uveitis with a subactive inflammatory process, c - patient with uveitis with an active inflammatory process).
Пример 1. Больная Н., 17 лет, поступила с жалобами на снижение остроты зрения левого глаза. Из анамнеза известно, что пациентка больна ювенильным ревматоидным артритом. Острота зрения левого глаза при поступлении 0,04 не корригирует. Внутриглазное давление OS 22 mmHg. OS-значительная смешанная инъекция глазного яблока, на эндотелии роговицы пылевидные преципитаты, влага передней камеры опалесцирует, клеточная реакция во влаге 2-3 степени, задние стромальные синехии на 4-6 часах, помутнение и деструкция стекловидного тела. Глазное дно OS: диск зрительного нерва бледно-розовый, границы четкие. Вены среднего калибра, артерии извитые. На периферии глазного дна, больше в наружном секторе, мутный отек сетчатки. В общем анализе крови эритроциты 5,1•1012, гемоглобин 103 г/л, лейкоциты 10,3•109, сегментоядерные 81, лимфоциты 13, моноциты 2, скорость оседания эритроцитов 27 мм/ч. Гиперпродукция иммуноглобулинов всех классов, предельное количество ЦИК, высокие титры аутоантител к тканям сердца, соединительной ткани, печени, хрусталика.Example 1. Patient N., 17 years old, was admitted with complaints of decreased visual acuity of the left eye. From the anamnesis it is known that the patient is sick with juvenile rheumatoid arthritis. Visual acuity of the left eye at admission 0.04 does not correct. Intraocular pressure OS 22 mmHg. OS-significant mixed injection of the eyeball, dusty precipitates on the corneal endothelium, moisture in the anterior chamber opalescent, cell reaction in moisture 2-3 degrees, posterior stromal synechia at 4-6 hours, clouding and destruction of the vitreous body. The fundus of the OS: the optic disc is pale pink, the borders are clear. Veins of medium caliber, convoluted arteries. On the periphery of the fundus, more in the outer sector, a cloudy retinal edema. In the general blood test, erythrocytes 5.1 • 10 12 , hemoglobin 103 g / l, leukocytes 10.3 • 10 9 , segmented 81, lymphocytes 13, monocytes 2, erythrocyte sedimentation rate 27 mm / h. Hyperproduction of immunoglobulins of all classes, the maximum amount of CEC, high titers of autoantibodies to the tissues of the heart, connective tissue, liver, lens.
Проведено исследование слезной жидкости. Стимулированная вдыханием паров 10% нашатырного спирта слезная жидкость забиралась из нижнего конъюнктивального свода, центрифугировалась. Методом регистрации люминолзависимой хемилюминесценции исследовалась светимость осадка и суммарная антиокислительная активность супернатанта. Осадок помещался в раствор для исследования люминолзависимой хемилюминесценции и записывалась светимость. Проводилась регистрация железоиндуцированной хемилюминесценции модельной системы с 0,1 мл физиологического раствора (контроль), затем - с 0,1 мл супернатанта, вычислялся процент светосуммы свечения модельной системы в присутствии супернтатанта от контроля. При исследовании слезной жидкости обнаружено следующее: светосумма свечения осадка составила 36,29 у.е., суммарная антиокислительная активность супернатанта менее 25%. Был выставлен диагноз: OS: Рецидивирующий периферический увеит, активный, ревматоидной этиологии. Проведена комплексная терапия с применением глюкокортикоидов местно и системно. После проведенного лечения процесс был купирован. Показатели хемилюминесценции слезной жидкости составили: светимость осадка 2,56 у.е., суммарная антиокислительная активность супернатанта 40%. A study of the lacrimal fluid. Stimulated by inhalation of vapors of 10% ammonia, the lacrimal fluid was taken from the lower conjunctival arch, centrifuged. The method of recording luminol-dependent chemiluminescence was used to study the luminosity of the precipitate and the total antioxidant activity of the supernatant. The precipitate was placed in a solution for studying luminol-dependent chemiluminescence and the luminosity was recorded. The iron-induced chemiluminescence of the model system was recorded with 0.1 ml of physiological saline (control), then with 0.1 ml of supernatant, and the percentage of the light sum of the luminescence of the model system in the presence of supernatant from the control was calculated. When examining the tear fluid, the following was found: the total amount of sediment luminescence was 36.29 cu, the total antioxidant activity of the supernatant was less than 25%. The diagnosis was made: OS: Recurrent peripheral uveitis, active, rheumatoid etiology. Conducted complex therapy using glucocorticoids locally and systemically. After treatment, the process was stopped. Indicators of lacrimal fluid chemiluminescence amounted to: sediment luminosity 2.56 cu, total antioxidant activity of the supernatant 40%.
Пример 2. Пациент Л., 11 лет. Поступил с диагнозом OD: Подострый иридоциклит неясной этиологии, субактивный. Осложненная катаракта. Острота зрения OD 0,02 не корригирует, внутриглазное давление 17 mmHg. Цилиарная инъекция сосудов глазного яблока, пигментированные преципитаты различной давности, передняя камера средней глубины, влага опалесцирует, множественные задние синехии, зрачок неправильной формы, рисунок радужки стушеван, дисперсия пигмента. Хрусталик диффузно-мутный, глублежащие среды не офтальмоскопируются. При исследовании слезной жидкости обнаружено следующее: светосумма свечения осадка составила 6,13 у.е., суммарная антиокислительная активность супернатанта - 32%. Example 2. Patient L., 11 years old. Received with a diagnosis of OD: Subacute iridocyclitis of unknown etiology, subactive. Complicated cataract. Visual acuity OD 0.02 does not correct, intraocular pressure 17 mmHg. Ciliary injection of the vessels of the eyeball, pigmented precipitates of various prescriptions, anterior chamber of medium depth, moisture opalescent, multiple posterior synechiae, pupil of irregular shape, iris pattern fuzzy, pigment dispersion. The lens is diffuse-cloudy, the underlying environment is not ophthalmoscopic. When examining the tear fluid, the following was found: the total amount of sediment luminescence was 6.13 cu, the total antioxidant activity of the supernatant was 32%.
Существенным отличием предлагаемого метода исследования является то, что при определении активности воспалительного процесса при увеитах используется экспресс-метод хемилюминесцентного анализа, при котором определяется суммарная антиокислительная активность супернатанта слезной жидкости в стабильной модельной системе на цитрат-фосфатном буфере и светимость осадка слезной жидкости. Применение предлагаемого способа дает возможность точно определять степень активности воспалительного процесса у больных увеитами на основании показателей хемилюминесценции двух фракций слезной жидкости - осадка и супернатанта, что позволяет обоснованно и дифференцирование применять традиционные препараты для лечения увеитов и антиоксиданты, осуществлять контроль за течением заболевания и оценивать эффективность проводимого лечения. Определение активности воспалительного процесса методом исследования фракций слезной жидкости неинвазивно, не требует больших материальных затрат, просто в проведении. Все процессы регистрации протокола исследования производятся с помощью компьютерной обработки специальным пакетом программ без вмешательства персонала, что повышает точность исследования. A significant difference of the proposed research method is that when determining the activity of the inflammatory process in uveitis, the express method of chemiluminescent analysis is used, which determines the total antioxidant activity of the tear fluid supernatant in a stable model system on citrate-phosphate buffer and the luminosity of the tear fluid sediment. The application of the proposed method makes it possible to accurately determine the degree of activity of the inflammatory process in patients with uveitis on the basis of chemiluminescence indicators of two tear fluid fractions - sediment and supernatant, which makes it possible to reasonably and differentiate the use of traditional drugs for the treatment of uveitis and antioxidants, to monitor the course of the disease and evaluate the effectiveness of treatment. Determination of the activity of the inflammatory process by the method of the study of tear fluid fractions is non-invasive, does not require large material costs, it is simple to carry out. All processes for registering a research protocol are performed using computer processing with a special software package without personnel intervention, which increases the accuracy of the study.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2001118897A RU2192009C1 (en) | 2001-07-06 | 2001-07-06 | Method for detecting activity of inflammatory process in uveitis-patients |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2001118897A RU2192009C1 (en) | 2001-07-06 | 2001-07-06 | Method for detecting activity of inflammatory process in uveitis-patients |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2192009C1 true RU2192009C1 (en) | 2002-10-27 |
Family
ID=20251520
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2001118897A RU2192009C1 (en) | 2001-07-06 | 2001-07-06 | Method for detecting activity of inflammatory process in uveitis-patients |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2192009C1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2278382C2 (en) * | 2004-04-19 | 2006-06-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "БАШКИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ Федерального Агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО БГМУ РОСЗДРАВА) | Method for determining total antioxidant spermatoplasm activity for estimating male fertility |
| RU2356053C1 (en) * | 2008-02-29 | 2009-05-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of differential diagnostics of infectious-inflammatory complications in case of eye injury |
| RU2533216C1 (en) * | 2013-03-27 | 2014-11-20 | Эдуард Борисович Абдулганиев | Method of determining degree of inflammatory process expression in case of knee joint osteoarthrosis |
| RU2805940C1 (en) * | 2023-04-12 | 2023-10-24 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) | Method of assessing inflammatory process in children with endogenous uveitis |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2104546C1 (en) * | 1996-08-20 | 1998-02-10 | Давлетов Равиль Гирусович | Method for evaluating nature of inflammatory process in inflammatory diseases of maxillary sinuses |
| RU2131608C1 (en) * | 1998-07-29 | 1999-06-10 | Государственный научный центр пульмонологии | Method for diagnosing inflammation processes in bronchopneumonic system |
-
2001
- 2001-07-06 RU RU2001118897A patent/RU2192009C1/en active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2104546C1 (en) * | 1996-08-20 | 1998-02-10 | Давлетов Равиль Гирусович | Method for evaluating nature of inflammatory process in inflammatory diseases of maxillary sinuses |
| RU2131608C1 (en) * | 1998-07-29 | 1999-06-10 | Государственный научный центр пульмонологии | Method for diagnosing inflammation processes in bronchopneumonic system |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| BENEZRA D. et al. Uveitis scoring system, Berlin, Springer-Verlag, 1992, p.1-9. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2278382C2 (en) * | 2004-04-19 | 2006-06-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "БАШКИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ Федерального Агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО БГМУ РОСЗДРАВА) | Method for determining total antioxidant spermatoplasm activity for estimating male fertility |
| RU2356053C1 (en) * | 2008-02-29 | 2009-05-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of differential diagnostics of infectious-inflammatory complications in case of eye injury |
| RU2533216C1 (en) * | 2013-03-27 | 2014-11-20 | Эдуард Борисович Абдулганиев | Method of determining degree of inflammatory process expression in case of knee joint osteoarthrosis |
| RU2805940C1 (en) * | 2023-04-12 | 2023-10-24 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) | Method of assessing inflammatory process in children with endogenous uveitis |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Armaly | Ocular pressure and visual fields: a ten-year follow-up study | |
| Flynn et al. | Retinopathy of prematurity: diagnosis, severity, and natural history | |
| BECKER et al. | Clinical aqueous outflow | |
| Thomas et al. | Correlation of epinephrine use and macular edema in aphakic glaucomatous eyes | |
| Heath et al. | Chemical composition of subretinal fluid | |
| Traustason et al. | Anterior ischemic optic neuropathy: classification of field defects by Octopus™ automated static perimetry | |
| Khramenko et al. | Features of hemodynamic and immunological parameters in patients with recurrent uveitis complicated by hypertension, Fuchs heterochromic uveitis and Posner-Schlossman syndrome | |
| RU2614971C1 (en) | Method for determination of indications for primary open-angle glaucom surgical treatment | |
| RU2195297C2 (en) | Method for treating dystrophic diseases of eyes | |
| RU2192009C1 (en) | Method for detecting activity of inflammatory process in uveitis-patients | |
| JACKS et al. | Retinal haemorrhage caused by" ecstasy" | |
| Weatherhead | Use of the Arden grating test for screening. | |
| Hittner et al. | Dominant cone-rod dystrophy | |
| Dereci et al. | Evaluation of eye health in children with type 1 diabetes mellitus and celiac disease | |
| RU2346644C1 (en) | Method of prediction of primary glaucoma course character following intraocular pressure normalisation | |
| RU2126540C1 (en) | Method of forecasting infectious complication development in cases of eyeball penetrating wounds | |
| RU2230481C1 (en) | Method for predicting pathological state of optic nerve at progressing myopia | |
| RU2695891C1 (en) | Method for evaluating the clinical course of partial atrophy of the optic nerve | |
| RU2505812C1 (en) | Method for determining nuclear lens density | |
| RU2077726C1 (en) | Method of diagnosis of eye posterior part inflammatory disease in children with retinoblastoma suspection | |
| BROOKS | Experiences with fluorophotometry | |
| Qing et al. | Ocular neovascularization: Tissue culture studies | |
| RU2262882C1 (en) | Method for determining primary open angle glaucoma treatment tactics | |
| RU2186392C1 (en) | Method for diagnosing senile macular retinal dystrophy | |
| RU2169371C1 (en) | Differential diagnosis method for distinguishing retinoblastoma from coats retinitis |