RU2180189C2

RU2180189C2 - Method for determining osteogenesis activity degree

Info

Publication number: RU2180189C2
Application number: RU2000104246A
Authority: RU
Inventors: Д.Ф. Кузнецова
Original assignee: Амурская государственная медицинская академия
Priority date: 2000-02-21
Filing date: 2000-02-21
Publication date: 2002-03-10

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves taking bone fragment samples from human cadavers, fixing the bone fragments, producing histologic preparations, determining bone cell density per one square mm by means of microscope with double interval of C and 5C. Ratio of cell number during two different ontogenesis periods being greater than or less than 30%, conclusions concerning osteogenesis activity degree as high or low are drawn, respectively. EFFECT: high accuracy of the method. 1 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, в частности к анатомии. The invention relates to medicine, in particular to anatomy.

Известно, что исследование гистогенеза костной ткани - одна из серьезных проблем. Разнообразие физиологических функций, в которых участвует костная ткань, привлекает к ней внимание при анализе многих процессов, казалось бы не связанных с органами опоры и движения. Поиск способов, позволяющих ускорять и замедлять резорбцию и новообразование костной ткани, связан с решением таких медицинских задач, как выведение из кости включившихся вредных веществ, преодоление "барьера невесомости", нормализация поврежденной облучением кроветворной ткани. It is known that the study of bone tissue histogenesis is one of the serious problems. The variety of physiological functions in which bone tissue is involved attracts attention to it when analyzing many processes that would seem to be unrelated to the organs of support and movement. The search for ways to accelerate and slow down the resorption and neoplasm of bone tissue is associated with the solution of such medical problems as removing harmful substances from the bone, overcoming the "weightlessness barrier", and normalizing damage to the hematopoietic tissue.

Процессы резорбции и новообразования костной ткани длятся в течение всего периода роста человека. Эту способность к перестройке в зависимости от меняющихся условий функциональной нагрузки или под влиянием различных оперативных вмешательств кость сохраняет и во взрослом состоянии. Интенсивность роста и перестройки меняется на различных этапах онтогенеза, в различных костях скелета. The processes of resorption and neoplasm of bone tissue last throughout the entire period of human growth. The bone retains this ability to restructure depending on the changing conditions of the functional load or under the influence of various surgical interventions in the adult state. The intensity of growth and rearrangement changes at different stages of ontogenesis, in various skeleton bones.

Выяснение факторов, влияющих на остеогенез, невозможно без определения активности костеообразования. Clarification of factors affecting osteogenesis is impossible without determining the activity of bone formation.

Существуют способы определения активности остеогенеза, которые позволяют сравнить процессы костеообразования в разные возрастные периоды путем определения объема кости, устойчивости к перелому, наличия или отсутствия очагов соединительной ткани, очагов оссификации и кальцинации, определяемых на гистопрепаратах. There are methods for determining the activity of osteogenesis, which allow us to compare the processes of bone formation in different age periods by determining the volume of the bone, resistance to fracture, the presence or absence of foci of connective tissue, foci of ossification and calcification, determined on histopathological preparations.

Недостатками данных способов являются - субъективизм в оценке полученных данных, неправильный выбор критериев, при помощи которых исследователи пытаются охарактеризовать процесс остеогенеза. Такие критерии как объем кости, устойчивость к перелому скорее позволяют оценить скорость роста костей, их механические и прочностные качества, а не активность остеогенеза. Исследование же темпов пролиферативного роста ткани, регенерации связано с подсчетом клеток, их типов и патологических признаков. The disadvantages of these methods are subjectivity in evaluating the data obtained, the wrong choice of criteria by which researchers try to characterize the process of osteogenesis. Criteria such as bone volume and fracture resistance are more likely to evaluate bone growth rate, their mechanical and strength properties, and not osteogenesis activity. The study of the rate of proliferative tissue growth, regeneration is associated with the counting of cells, their types and pathological signs.

Целью данного изобретения является определение активности остеогенеза в костях различных отделов скелета человека и животных на трупном материале в различные возрастные периоды. The aim of this invention is to determine the activity of osteogenesis in the bones of various departments of the skeleton of humans and animals on cadaveric material at different age periods.

Данная цель разрешается тем, что определение активности остеогенеза проводят следующим образом: от трупов людей различных периодов остеогенеза забирают фрагменты костей, фиксируют в растворе формалина, заливают в целлоидин, готовят гистологические срезы, окрашивают гематоксилин-эозином. Затем при помощи микроскопа и квадратной решетки с двойным периодом С и 5С определяют плотность костных клеток в одном квадратном миллиметре по формуле Р= 1,01•Х/4,41, где Р - плотность костных клеток; Х - количество клеток в квадратной решетке с двойным периодом С и 5С; 1,01 - цена деления при увеличении 7•8; 4,41 - площадь квадратной решетки с двойным периодом С и 5С в миллиметрах. Увеличение плотности костных клеток на 30% и более свидетельствует об активности остеогенеза. Уменьшение плотности костных клеток на 30% и более свидетельствует о снижении интенсивности остеогенеза. This goal is allowed by the fact that the determination of osteogenesis activity is carried out as follows: from the corpses of people of different periods of osteogenesis, bone fragments are taken, fixed in formalin solution, poured into celloidin, histological sections are prepared, stained with hematoxylin-eosin. Then, using a microscope and a square lattice with a double period C and 5C, determine the density of bone cells in one square millimeter according to the formula P = 1.01 • X / 4.41, where P is the density of bone cells; X is the number of cells in a square lattice with a double period C and 5C; 1.01 - division price with an increase of 7 • 8; 4.41 - square lattice area with a double period C and 5C in millimeters. An increase in bone cell density of 30% or more indicates osteogenesis activity. A decrease in bone cell density of 30% or more indicates a decrease in the intensity of osteogenesis.

Способ осуществляют следующим образом. От трупов плодов человека 6-7 недель и 14 недель беременности забирали и маркировали фрагменты различных костей черепа. The method is as follows. From the corpses of human fetuses of 6-7 weeks and 14 weeks of pregnancy, fragments of various bones of the skull were taken and marked.

Предварительно фиксированные в растворе формалина препараты заливали в целлоидин, гистологические срезы окрашивали гематоксилин-эозином и заключали в бальзам. При помощи микроскопа и квадратной решетки с двойным интервалом С и 5С определяли плотность костных клеток в одном квадратном миллиметре (см. таблицу) по формуле Р=1,01•Х/4,41. Плотность костных клеток у эмбрионов 6-7 недель беременности составила в среднем 2416,78 клеток в одном квадратном миллиметре, у плодов 14 недель - 906,97. Полученные данные сравнивали по формуле: К= (Рс2-Рс1)/Рс1•100%, где Pс1 - средняя арифметическая плотность костных клеток у 6-7 недельных эмбрионов; Рс2 - средняя арифметическая плотность костных клеток у 14 недельных плодов. К=(906,97-2416,78)/2416,78•100%= -66%. Количество костных клеток у 14 недельных плодов по сравнению с эмбрионами 6-7 недель беременности уменьшилось на 66%. Следовательно, на 14 неделе беременности произошло снижение активности остеогенеза по сравнению с 6-7 недельными эмбрионами. Preparations preliminarily fixed in formalin solution were poured into celloidin, histological sections were stained with hematoxylin-eosin and enclosed in a balm. Using a microscope and a square lattice with a double interval C and 5C, the bone density in one square millimeter was determined (see table) using the formula P = 1.01 • X / 4.41. The density of bone cells in embryos of 6-7 weeks of pregnancy averaged 2416.78 cells per square millimeter, in fetuses of 14 weeks - 906.97. The data obtained were compared by the formula: K = (Pc2-Pc1) / Pc1 • 100%, where Pc1 is the arithmetic mean density of bone cells in 6-7 week old embryos; Pc2 is the arithmetic mean density of bone cells in 14 weekly fetuses. K = (906.97-2416.78) / 2416.78 • 100% = -66%. The number of bone cells in 14 week old fetuses decreased by 66% compared with embryos of 6-7 weeks of gestation. Therefore, at the 14th week of pregnancy, there was a decrease in osteogenesis activity compared to 6-7 week old embryos.

Определение активности остеогенеза путем подсчета плотности костных клеток с использованием квадратной решетки с двойным интервалом С и 5С и критерии К позволяет усилить объективизацию сравнительного анализа интенсивности костеообразования. Использование счетного признака цитометрических данных точнее характеризует процессы резорбции и новообразования костной ткани длящиеся в течении онтогенеза организма человека. Determining the activity of osteogenesis by calculating the density of bone cells using a square lattice with a double interval C and 5C and criteria K allows you to strengthen the objectification of the comparative analysis of the intensity of bone formation. The use of a countable trait of cytometric data more accurately characterizes the processes of bone resorption and neoplasm, which last during the ontogenesis of the human body.

Claims

A method for determining the activity of osteogenesis by collecting bone fragments from a human corpse, fixing them in formalin solution, manufacturing histological preparations and counting, characterized in that the determination is carried out on the corpses of human embryos, the number of bone cells per unit area using a square lattice with double interval C and 5C according to the formula
P = 1.01 • X / 4.41,
while comparing the results according to the formula
K = Pc2-Pc1 / Pc1 • 100%,
where Pc1 is the arithmetic mean density of bone cells of one group;
Pc2 is the arithmetic mean density of bone cells of another group,
however, an increase in K by 30% indicates the activity of osteogenesis, and a decrease in K by 30% indicates a decrease in the intensity of osteogenesis.