[go: up one dir, main page]

RU2053494C1 - Method for dewaxing and preparation of histological preparations for embalming in rizhavsky balsam - Google Patents

Method for dewaxing and preparation of histological preparations for embalming in rizhavsky balsam Download PDF

Info

Publication number
RU2053494C1
RU2053494C1 SU5063459A RU2053494C1 RU 2053494 C1 RU2053494 C1 RU 2053494C1 SU 5063459 A SU5063459 A SU 5063459A RU 2053494 C1 RU2053494 C1 RU 2053494C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
alcohol
dewaxing
vegetable oil
balsam
preparation
Prior art date
Application number
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Б.Я. Рыжавский
Original Assignee
Хабаровский государственный медицинский институт
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Хабаровский государственный медицинский институт filed Critical Хабаровский государственный медицинский институт
Priority to SU5063459 priority Critical patent/RU2053494C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2053494C1 publication Critical patent/RU2053494C1/en

Links

Landscapes

  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: sections are dewaxed, colored, dexydrated and freed of alcohol. Dewaxing is carried out for 8-18 h, and alcohol is removed successively by mixture of 100° ethyl alcohol and vegetable oil in ratio of (1:1)-(1:3) and then with vegetable oil. EFFECT: high quality preparations and sharp reduction of effect of ecologically harmful substance on people.

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии, и может быть использовано при окраске и заключении в бальзам гистологических препаратов. The invention relates to medicine, namely to histology, and can be used for staining and imprisonment in histological preparations.

Заявляемое изобретение направлено на решение задачи, состоящей в исключении воздействия на сотрудников гистологических патоморфологических, судебно- медицинских лабораторий вредных для здоровья веществ продуктов перегонки нефти, используемых в процессе окраски парафиновых срезов. The invention is aimed at solving the problem of eliminating the effects on the employees of histological pathomorphological, forensic laboratories of unhealthy substances from oil distillation products used in the process of staining paraffin sections.

Известно, что в процессе окраски парафиновых срезов различными красителями используются продукты перегонки нефти: ксилол, толуол, бензол (Ромейс Б. Микроскопическая техника. М. Иностранная литература, 1954, с. 718. Практикум по гистологии, цитологии и эмбриологии./. Под ред Н. А. Юриной, А. И. Радостиной. М. Изд-во унив. дружбы народов, 1989, с. 253; Х. Луппа. Основы гистохимии. М. Мир, 1980, с. 343; Г. Я. Видершайн, Я. Е. Хесин. Ксилолы. БМЭ, Т. 12, с. 117. 1980). It is known that in the process of staining paraffin sections with various dyes, oil distillation products are used: xylene, toluene, benzene (Romeis B. Microscopic Technique. M. Foreign Literature, 1954, p. 718. Workshop on Histology, Cytology and Embryology. /. Ed. N. A. Yurina, A. I. Radostina, M. Publishing House of the Universities of Peoples' Friendship, 1989, p. 253; H. Luppa. Fundamentals of Histochemistry. M. Mir, 1980, p. 343; G. Ya. Widershine , Y. E. Khesin, Xylenes, BME, T. 12, p. 117. 1980).

Эти вещества используются для депарафинирования среза и перед заключением в бальзам для окончательной дегидратации и удаления спирта, сначала карбол-ксилол, затем ксилол (или толуол или бензол). Недостатком данного способа является то, что эти вещества оказывают сильно выраженное неблагоприятное воздействие на организм. These substances are used for dewaxing the slice and before being put into balm for final dehydration and removal of alcohol, first carbol-xylene, then xylene (or toluene or benzene). The disadvantage of this method is that these substances have a pronounced adverse effect on the body.

Цель изобретения разработка безопасного для людей способа обработки срезов в процессе их окраски и заключении в бальзам, т. е. на одном из этапов приготовления гистологического препарата. The purpose of the invention is the development of a safe way for people to process slices in the process of staining and enclosing them in a balm, i.e., at one of the stages of the preparation of a histological preparation.

Цель достигается тем, что предлагаемое изобретение содержит следующие признаки: парафиновые срезы, наклеенные на предметные стекла по стандартной методике, для депарафинизации помещают в плотно закрывающийся сосуд с хлороформом, после этого последовательно в этиловый спирт (100, 96, 70о), затем в дистиллированную воду на несколько минут. Затем срез погружают в краситель на время, требуемое методиками окраски. Затем срез промывается дистиллированной водой, для дегидратации обрабатывается этиловым спиртом. После этого для удаления спирта и последующего заключения в бальзам на срез наносится несколько капель смеси 100о спирта и растительного масла. Предметное стекло при этом покачивают. После этого смесь спирта и растительного масла сливается, а на срез наносится несколько капель растительного масла, затем предметное стекло тщательно вытирается вокруг среза, на срез наносится бальзам, а поверх него покровное стекло.The goal is achieved by the fact that the present invention contains the following features: paraffin sections glued to slides according to the standard method, for dewaxing are placed in a tightly closed vessel with chloroform, then sequentially in ethyl alcohol (100, 96, 70 o ), then in distilled water for a few minutes. Then the slice is immersed in the dye for the time required by the staining techniques. Then the slice is washed with distilled water, and treated with ethanol for dehydration. After that, to remove the alcohol and subsequent conclusion to the balm, a few drops of a mixture of 100 about alcohol and vegetable oil are applied to the cut. Slide the glass while doing this. After this, the mixture of alcohol and vegetable oil is drained, and a few drops of vegetable oil are applied to the slice, then the glass slide is carefully wiped around the slice, a balm is applied to the slice, and on top of it a coverslip.

По отношению к прототипу у заявляемого изобретения имеются следующие отличительные признаки: для депарафинирования среза гистологический препарат помещают в герметично закрытый сосуд с хлороформом и не используют ксилол, толуол, бензол. Для удаления спирта и последующего заключения в бальзам на срез наносится смесь спирта и растительного масла, через несколько минут смесь сливается, на срез наносится растительное масло, излишки его удаляют, затем наносят бальзам и покровное стекло. In relation to the prototype, the claimed invention has the following distinctive features: for dewaxing the section, the histological preparation is placed in a hermetically sealed vessel with chloroform and xylene, toluene, benzene are not used. To remove alcohol and then put it into a balm, a mixture of alcohol and vegetable oil is applied to the cut, a few minutes later the mixture is poured, vegetable oil is applied to the cut, the excess is removed, then a balm and a cover glass are applied.

Между отличительными признаками и целью изобретения существует причинно-следственная связь: гистологический препарат обрабатывается веществами, которые не содержат продукты перегонки нефти ксилол, толуол, бензол, тем самым исключается воздействие на сотрудников лаборатории экологически опасных, вредных для здоровья веществ. There is a causal relationship between the distinguishing features and the purpose of the invention: the histological preparation is processed with substances that do not contain xylene, toluene, benzene oil distillation products, thereby excluding the effects on the laboratory staff of environmentally hazardous substances harmful to health.

Полученные препараты по качеству не уступают изготовленным традиционным методом, в них не обесцвечиваются красители и не меняется цвет примененных красителей. Способ не требует дополнительной аппаратуры. The resulting preparations are not inferior in quality to those made by the traditional method, the dyes do not fade in them and the color of the applied dyes does not change. The method does not require additional equipment.

В качестве растительных масел могут использоваться рафинированные коммерческие подсолнечное, соевое, касторовое и др. масла. Смесь растительного масла и спирта, а также масло могут быть использованы многократно. Применение способа исключает необходимость использовать принудительную вытяжную вентиляцию. As vegetable oils, refined commercial sunflower, soybean, castor and other oils can be used. A mixture of vegetable oil and alcohol, as well as oil can be used repeatedly. The application of the method eliminates the need to use forced exhaust ventilation.

Способ осуществляют следующим образом. The method is as follows.

Парафиновые срезы, наклеенные на предметные стекла по стандартной методике, для депарафинизации помещают на 8-18 ч (на ночь) в плотно закрывающийся сосуд с хлороформом. Затем они одномоментно, для уменьшения времени контакта с хлороформом, извлекаются и помещаются последовательно в этиловый спирт крепостью 100, 96, 70о, дистиллированную воду по 3-5 мин (время может быть при необходимости увеличено). После этого срез помещают в краситель на время, требуемое методиками окраски. При окраске гематоксилином-эозином, после окраски эозином препарат промывают дистиллированной водой. Для дегидратации срез обрабатывают 70, 96 и 100о этиловым спиртом. Для удаления спирта и последующего заключения в бальзам на срез наносят 3-4 капли смеси 100о спирта и растительного масла в соотношении 1:3. Предметное стекло при этом покачивают в течение 1-3 мин. После этого смесь сливается во флакон, а на срез наносится 1-2 капли растительного масла. Через 1-3 мин масло сливается во флакон, предметное стекло тщательно вытирается вокруг среза салфеткой для удаления масла, на срез наносится бальзам, а поверх него покровное стекло. Слитые смесь спирт-масло, а также масло могут использоваться многократно.Paraffin sections glued to slides according to the standard method are placed for 8–18 hours (overnight) in a tightly closed vessel with chloroform for dewaxing. Then they are simultaneously, to reduce the contact time with chloroform, removed and placed sequentially in ethyl alcohol with a strength of 100, 96, 70 about , distilled water for 3-5 minutes (time can be increased if necessary). After this, the slice is placed in the dye for the time required by the staining techniques. When stained with hematoxylin-eosin, after staining with eosin, the drug is washed with distilled water. For dehydration, the slice is treated with 70, 96 and 100 about ethyl alcohol. To remove the alcohol and then conclude in a balm, 3-4 drops of a mixture of 100 about alcohol and vegetable oil in a ratio of 1: 3 are applied to the cut. In this case, the glass slide is shaken for 1-3 minutes. After this, the mixture is poured into a bottle, and 1-2 drops of vegetable oil are applied to the cut. After 1-3 minutes, the oil is poured into the bottle, the glass slide is carefully wiped around the cut with a tissue to remove oil, a balm is applied to the cut, and on top of it a coverslip. The merged alcohol-oil mixture, as well as oil, can be used repeatedly.

Согласно данным проведенных экспериментов заявляемое изобретение может быть использовано в медицине и в сравнении с другими способами обладает следующими преимуществами: резко уменьшается вредное воздействие экологически опасных веществ на человека, качество препарата не снижается, имеется экономический эффект, так как отпадает необходимость в использовании вытяжной вентиляции и вытяжных шкафов; применяемые для удаления спирта масла экологически чисты и доступны. According to the data of the experiments, the claimed invention can be used in medicine and, in comparison with other methods, has the following advantages: the harmful effects of environmentally hazardous substances on humans are sharply reduced, the quality of the drug is not reduced, there is an economic effect, since there is no need to use exhaust ventilation and exhaust cabinets; The oils used to remove alcohol are environmentally friendly and affordable.

Предлагаемое изобретение представляет значительный интерес для народного хозяйства, так как позволяет получать качественные препараты и резко снизить воздействие на людей экологически вредных веществ, не оказывает отрицательного воздействия на состояние окружающей среды. The present invention is of significant interest to the national economy, as it allows to obtain high-quality drugs and dramatically reduce the impact on people of environmentally harmful substances, does not adversely affect the state of the environment.

Claims (1)

Способ депарафинирования и подготовки гистологических препаратов к заключению в бальзам, включающий депарафинизацию срезов, их окраску, дегидротацию и даление спирта с последующим заключением их в бальзам, отличающийся тем, что депарафинизацию срезов проводят хлороформ в течение 8 - 18 ч, а удаление спирта осуществляют последовательно смесью 100-градусного этилового спирта и растительного масла, взятых в соотношении 1 : 1 - 1 : 3, а затем растительным маслом. A method for dewaxing and preparing histological preparations for balsam, including dewaxing sections, staining, dehydrating and adding alcohol to them, followed by chloroform dewaxing sections for 8 to 18 hours, and the alcohol is removed sequentially with a mixture 100-degree ethyl alcohol and vegetable oil, taken in a ratio of 1: 1 - 1: 3, and then with vegetable oil.
SU5063459 1992-05-06 1992-05-06 Method for dewaxing and preparation of histological preparations for embalming in rizhavsky balsam RU2053494C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU5063459 RU2053494C1 (en) 1992-05-06 1992-05-06 Method for dewaxing and preparation of histological preparations for embalming in rizhavsky balsam

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU5063459 RU2053494C1 (en) 1992-05-06 1992-05-06 Method for dewaxing and preparation of histological preparations for embalming in rizhavsky balsam

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2053494C1 true RU2053494C1 (en) 1996-01-27

Family

ID=21613886

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU5063459 RU2053494C1 (en) 1992-05-06 1992-05-06 Method for dewaxing and preparation of histological preparations for embalming in rizhavsky balsam

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2053494C1 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2168938C2 (en) * 1999-04-05 2001-06-20 Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН Method of determining lysosomal cationic proteins in tissue granulocytes
RU2180189C2 (en) * 2000-02-21 2002-03-10 Амурская государственная медицинская академия Method for determining osteogenesis activity degree
CN102507284A (en) * 2011-11-11 2012-06-20 福州迈新生物技术开发有限公司 Tissue paraffin removing liquid

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Ромейс Б. Микроскопическая техника. М.: Иностранная литература, 1953, с.139-183. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2168938C2 (en) * 1999-04-05 2001-06-20 Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН Method of determining lysosomal cationic proteins in tissue granulocytes
RU2180189C2 (en) * 2000-02-21 2002-03-10 Амурская государственная медицинская академия Method for determining osteogenesis activity degree
CN102507284A (en) * 2011-11-11 2012-06-20 福州迈新生物技术开发有限公司 Tissue paraffin removing liquid

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Casselman The in vitro preparation and histochemical properties of substances resembling ceroid
Houghton et al. Laboratory handbook for the fractionation of natural extracts
Ramamoorthy et al. Natural alternatives for chemicals used in histopathology lab-A literature review
RU2053494C1 (en) Method for dewaxing and preparation of histological preparations for embalming in rizhavsky balsam
Cheng et al. Alternative staining using extracts of hibiscus (Hibiscus rosa-sinensis L.) and red beet (Beta vulgaris L.) in diagnosing ova of intestinal nematodes (Trichuris trichiura and Ascaris lumbricoides)
US8551532B2 (en) Method of making an anti-inflammatory composition
Nelson Isolation and Purification of Lipids
Grncarevic Effect of various dipping treatments on the drying rate of grapes for raisins
Spearman et al. Some ultrastructural observations on keratohyalin granules of guinea pig epidermis
Cisne et al. Tannic acid solution: a better fixative solution than formalin for elastin and collagen—toxic and morphological assessment
CN110779758A (en) A kind of preparation method of shiitake mushroom paraffin slices
Majumdar Tissue preservation with natural fixatives: An immunohistochemical evaluation
DE684256C (en) Process for the separation of biologically valuable components from plant or animal substances
Asra et al. Application of red dragon fruit dyes as staining in histological study
Herr Jr Recent advances in clearing techniques for study of ovule and female gametophyte development
RU2593343C1 (en) Method for staining the histological cuts in diagnosing trichinosis
SU92222A1 (en) The method of manufacture of histological preparations
SU1264040A1 (en) Method for preparing histological preparations for microscopic investigations
Little Permanent staining with iodine vapor
Bracegirdle The development of biological preparative techniques for light microscopy, 1839–1989
SU719560A1 (en) Composition of preserving liquid for storing plant preparations
Berlin et al. Euparal as a permanent mounting medium for helminth eggs and proglottids
CN109864931A (en) A kind of Pickering lotion and its preparation method and application stable using theabrownin
Hutchins et al. Staining Scab Actinomyces in Potato Tuber Tissues
US20130273600A1 (en) Stain for Microscopic Tissue Sections