RU2170937C1

RU2170937C1 - METHOD FOR DIAGNOSING CHRONIC HEPATOPATHY IN HBsAg CARRIERS SUFFERING FROM ALCOHOLISM

Info

Publication number: RU2170937C1
Application number: RU2000117481/14A
Authority: RU
Inventors: В.К. Макаров
Original assignee: Тверская государственная медицинская академия; Макаров Виктор Константинович
Priority date: 2000-07-05
Filing date: 2000-07-05
Publication date: 2001-07-20

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves examining biological substrate like blood serum, determining relative phospholipid fraction contents in blood serum. Relative lysophosphatidylcholine content is determined. Its value being below 5%, chronic hepatopathy is considered to be diagnosed. Relative lysophosphatidyl ethanolamine contents is determined. Its value being below 6%, chronic hepatopathy is considered to be diagnosed. EFFECT: simplified method; high accuracy of diagnosis. 2 cl

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, гепатологии. The invention relates to medicine, namely to infectious diseases, hepatology.

Своевременное выявление хронической гепатопатии у носителей HB_sAg больных алкоголизмом является актуальной проблемой, так как позволяет провести комплекс социально-оздоровительных мероприятий и не допустить дальнейшее прогрессирование поражения печени, результатом которого может быть потеря трудоспособности и инвалидизация пациента.The timely detection of chronic hepatopathy in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism is an urgent problem, as it allows a complex of social and health measures to prevent further progression of liver damage, which may result in disability and patient disability.

Наиболее близким к заявленному способу является способ диагностики хронической гепатопатии у носителей HBsAg, заключающийся в том, что диагноз хронической гепатопатии выставляют по гистологическим признакам (Майер К.П. Гепатит и последствия гепатита. - ГЭОТАР. - Медицина. - М. - 1999. - с. 130 (прототип)). Closest to the claimed method is a method for the diagnosis of chronic hepatopathy in HBsAg carriers, which consists in the fact that the diagnosis of chronic hepatopathy is made by histological signs (Mayer K.P. Hepatitis and the effects of hepatitis. - GEOTAR. - Medicine. - M. - 1999. - p. 130 (prototype)).

Недостатком известного способа является то, что диагностика хронической гепатопатии (хронического гепатита и цирроза печени) производится путем субъективной оценки гистологического материала, полученного в результате "слепой" чрезкожной биопсии печени. Субъективность оценки заключается в случайности выбора места взятия кусочка ткани печени, случайности вариантов изменений в нем и необходимостью выявления и оценки большого числа параметров (более 10), широкой гаммой гистологических изменений. Задача полноценного анализа этих параметров напрямую зависит от квалификации специалиста гистолога, то есть от субъекта. The disadvantage of this method is that the diagnosis of chronic hepatopathy (chronic hepatitis and cirrhosis) is carried out by subjective evaluation of histological material obtained as a result of a "blind" percutaneous liver biopsy. The subjectivity of the assessment is the randomness of the choice of the place of taking a piece of liver tissue, the randomness of the variations in it and the need to identify and evaluate a large number of parameters (more than 10), a wide range of histological changes. The task of a full analysis of these parameters directly depends on the qualifications of a histologist, that is, on the subject.

Степень ошибки зависит от многих случайных величин и может перекрыть разрешающую способность метода. The degree of error depends on many random variables and may overlap the resolution of the method.

Другим важным недостатком известного способа является то, что процедура биопсии печени травматична и опасна в плане развития тяжелых осложнений, которые могут стоить жизни человеку: перелом иглы, бактериальное инфицирование, пневмоторакс, перфорация внутриреберной артерии, желчный плеврит, гепатобилия, вторичные атериовенозные фистулы, неожиданная биопсия других органов, неврогенная печеночная гипотония, немедленные и замедленные кровотечения, внутрипеченочные кровотечения, бактеремия, обсеменение опухолью (Chiprut R.О. et al. Intrahepatic Hematoma Resulting in Obstractiv Jaundice: An unusual Complication of Liver Biopsy. -Gastroenterology. - 1978. - v.74. - N 1, p. 124-127). Главным недостатком является то, что гистологические изменения наступают достаточно поздно и выявляются у малого числа (1,2%) носителей HB_sAg с нормальной активностью трансаминаз ((Майер К.П. Гепатит и последствия гепатита. - ГЭОТАР. - Медицина. - М. - 1999. - с. 130). Кроме того, данный способ не учитывает влияния длительного употребления больших доз алкоголя, который также вызывает изменение гистологической картины печени.Another important disadvantage of this method is that the liver biopsy procedure is traumatic and dangerous in terms of the development of serious complications that can cost a person life: a broken needle, bacterial infection, pneumothorax, perforation of the intracostal artery, biliary pleurisy, hepatobilia, secondary atherovenous fistula, unexpected biopsy other organs, neurogenic hepatic hypotension, immediate and delayed bleeding, intrahepatic bleeding, bacteremia, tumor seeding (Chiprut R.O. et al. Intrahepatic Hematoma R esulting in Obstractiv Jaundice: An unusual Complication of Liver Biopsy. -Gastroenterology. - 1978.- v. 74.- N 1, p. 124-127). The main disadvantage is that histological changes occur late enough and are detected in a small number (1.2%) of HB _s Ag carriers with normal transaminase activity ((Mayer K.P. Hepatitis and the effects of hepatitis. - GEOTAR. - Medicine. - M . - 1999. - p. 130). In addition, this method does not take into account the effect of prolonged use of large doses of alcohol, which also causes a change in the histological picture of the liver.

При создании изобретения решалась задача расширения арсенала способов диагностики хронической гепатопатии у носителей HB_sAg больных алкоголизмом.When creating the invention, the problem was solved of expanding the arsenal of methods for diagnosing chronic hepatopathy in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism.

Технический результат - разработка нетравматичных и безопасных для пациента способов, которые бы позволили бы врачу диагностировать хроническую гепатопатию у носителей HB_sAg больных алкоголизмом с более высокой точностью до появления гистологических изменений в печени при отсутствии изменений общепринятых биохимических тестов.The technical result is the development of non-traumatic and safe for the patient methods that would allow the doctor to diagnose chronic hepatopathy in HB _s Ag carriers of patients with alcoholism with higher accuracy until histological changes in the liver occur in the absence of changes in generally accepted biochemical tests.

Указанный результат достигается тем, что в способе диагностики хронической гепатопатии у носителей HB_sAg больных алкоголизмом, заключающегося в исследовании биологического субстрата, согласно изобретению, в качестве биологического субстрата берут сыворотку крови, определяют относительное содержание в ней фракций фосфолипидов, выделяют показатель относительного содержания лизофосфатидилхолина и при уровне его ниже 5% диагностируют хроническую гепатопатию у носителей HB_sAg больных алкоголизмом.This result is achieved by the fact that in the method for the diagnosis of chronic hepatopathy in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism, consisting in the study of a biological substrate, according to the invention, blood serum is taken as a biological substrate, the relative content of phospholipid fractions is determined in it, an indicator of the relative content of lysophosphatidylcholine is isolated and at a level below 5%, chronic hepatopathy is diagnosed in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism.

Указанный результат достигается тем, что в способе диагностики хронической гепатопатии у носителей HB_sAg больных алкоголизмом, заключающегося в исследовании биологического субстрата, согласно изобретению, в качестве биологического субстрата берут сыворотку крови, определяют относительное содержание в ней фракций фосфолипидов, выделяют показатель относительного содержания лизофосфатидилэтаноламина и при уровне его ниже 6% диагностируют хроническую гепатопатию у носителей HB_sAg больных алкоголизмом.This result is achieved by the fact that in the method for the diagnosis of chronic hepatopathy in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism, consisting in the study of a biological substrate, according to the invention, blood serum is taken as a biological substrate, the relative content of phospholipid fractions is determined in it, an indicator of the relative content of lysophosphatidylethanolamine and at a level below 6%, chronic hepatopathy is diagnosed in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism.

Новыми, ранее неизвестными признаками заявленного способа диагностики хронической гепатопатии у носителей HB_sAg больных алкоголизмом являются:
1. использование в качестве биологического субстрата сыворотки крови;
2. определение относительного содержания фракций фосфолипидов;
3. учет влияния длительного употребления больших доз алкоголя на организм человека и, в частности, на изменение в уровне лизофосфатидилхолина и лизофосфатидилэтаноламина;
4. использование в качестве показателей для диагностики хронической гепатопатии у носителей HB_sAg больных алкоголизмом объективной характеристики - показателей фракций лизофосфатидилхолина и лизофосфатидилэтаноламина фосфолипидного спектра сыворотки крови;
5. границы показателей относительного содержания в сыворотке крови лизофосфатидилхолина и лизофосфатидилэтаноламина.New, previously unknown signs of the claimed method for the diagnosis of chronic hepatopathy in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism are:
1. use as a biological substrate of blood serum;
2. determination of the relative content of fractions of phospholipids;
3. taking into account the effect of long-term use of large doses of alcohol on the human body and, in particular, on the change in the level of lysophosphatidylcholine and lysophosphatidylethanolamine;
4. use as an indicator for the diagnosis of chronic hepatopathy in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism an objective characteristic - indicators of fractions of lysophosphatidylcholine and lysophosphatidylethanolamine phospholipid spectrum of blood serum;
5. The boundaries of the indicators of the relative serum levels of lysophosphatidylcholine and lysophosphatidylethanolamine.

Способ по варианту 1 разработан на основе определения относительного содержания фракции лизофосфатидилхолина у носителей HB_sAg больных алкоголизмом и сравнения его с показателями аналогичных фракций у больных с хронической гепатопатией (включает в себя больных хроническим вирусным гепатитом и циррозом печени). Данные по фосфолипидному спектру крови получены от 30 носителей HB_sAg больных алкоголизмом и 50 больных с хронической гепатопатией (30 больных хроническим вирусным гепатитом В и 20 - мелкоузловым циррозом печени). Для больных с гепатопатией характерен уровень лизофосфатидилхолина 5% и ниже.The method according to option 1 is developed on the basis of determining the relative content of the lysophosphatidylcholine fraction in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism and comparing it with similar fractions in patients with chronic hepatopathy (includes patients with chronic viral hepatitis and liver cirrhosis). Data on the phospholipid spectrum of blood was obtained from 30 carriers of HB _s Ag patients with alcoholism and 50 patients with chronic hepatopathy (30 patients with chronic viral hepatitis B and 20 with small-cirrhosis of the liver). Patients with hepatopathy are characterized by a level of lysophosphatidylcholine of 5% or lower.

Способ по варианту 2 разработан на основе определения относительного содержания фракции лизофосфатидилэтаноламина у носителей HB_sAg больных алкоголизмом и сравнения его с показателями аналогичных фракций у больных с хронической гепатопатией (включает в себя больных хроническим вирусным гепатитом и циррозом печени). Данные по фосфолипидному спектру крови получены от 30 носителей HB_sAg больных алкоголизмом и 50 больных с хронической гепатопатией (30 больных хроническим вирусным гепатитом В и 20 - мелкоузловым циррозом печени). Для больных с гепатопатией характерен уровень лизофосфатидилэтаноламина 6% и ниже.The method according to option 2 is developed on the basis of determining the relative content of the lysophosphatidylethanolamine fraction in HB _s Ag carriers of alcoholism and comparing it with similar fractions in patients with chronic hepatopathy (includes patients with chronic viral hepatitis and liver cirrhosis). Data on the phospholipid spectrum of blood was obtained from 30 carriers of HB _s Ag patients with alcoholism and 50 patients with chronic hepatopathy (30 patients with chronic viral hepatitis B and 20 with small-cirrhosis of the liver). Patients with hepatopathy are characterized by a level of lysophosphatidylethanolamine of 6% or lower.

Выбор показателей фосфолипидных фракций сыворотки крови был продиктован тем, что фосфолипиды входят в состав мембран клеток печени и соответственно всякое изменение содержания их на мембране приводит к изменению содержания их в сыворотке крови. Изменение их на уровне мембран происходят максимально рано по всей печени, как органу, что и позволяет диагностировать хроническую гепатопатию до появления гистологических изменений. The choice of indicators of serum phospholipid fractions was dictated by the fact that phospholipids are part of the membranes of liver cells and, accordingly, any change in their content on the membrane leads to a change in their content in blood serum. Their change at the membrane level occurs as early as possible throughout the liver, as an organ, which allows you to diagnose chronic hepatopathy before the appearance of histological changes.

Фосфолипидный спектр имеет в своем составе лизофосфатидилхолин (ЛФХ), лизофосфатидилэтаноламин (ЛФЭА), сфингомиелин (СМ), фосфатидилхолин (ФХ), фосфатидилэтаноламин (ФЭА). Проведенные исследования показали, что при повреждении печени (гепатопатии) происходит понижение относительного содержания лизофосфатидилхолина и лизофосфатидилэтаноламина. The phospholipid spectrum includes lysophosphatidylcholine (LPC), lysophosphatidylethanolamine (LFEA), sphingomyelin (SM), phosphatidylcholine (PX), phosphatidylethanolamine (PEA). Studies have shown that with liver damage (hepatopathy), a decrease in the relative content of lysophosphatidylcholine and lysophosphatidylethanolamine occurs.

Предлагаемый способ диагностики хронической гепатопатии у носителей HB_sAg больных алкоголизмом по варианту 1, осуществляют в следующей последовательности.The proposed method for the diagnosis of chronic hepatopathy in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism according to option 1, is carried out in the following sequence.

Кровь для исследования берут утром натощак из вены в количестве 5 мл, центрифугируют, отбирают 0,8 мл сыворотки и экстрагируют липиды добавлением смеси хлороформ-метанола (1:2), фильтруют, выпаривают и разгоняют в камерах в парах смеси гептан-эфир-этилацетат (12:3:1) на специальных пластинках с силикагелем и затем денситометрируют. Получают относительное содержание фракций фосфолипидов в сыворотке крови и при уровне ЛФХ 5% и ниже диагностируют хроническую гепатопатию. Blood samples were taken in the morning on an empty stomach in the amount of 5 ml in the morning, centrifuged, 0.8 ml of serum was taken and lipids were extracted by adding a mixture of chloroform-methanol (1: 2), filtered, evaporated and dispersed in chambers in heptane-ether-ethyl acetate pairs (12: 3: 1) on special silica gel plates and then densitometric. The relative content of serum phospholipids fractions is obtained, and chronic hepatopathy is diagnosed at an LPC level of 5% or lower.

Предлагаемый способ диагностики хронической гепатопатии у носителей HB_sAg больных алкоголизмом по варианту 2, осуществляют в следующей последовательности.The proposed method for the diagnosis of chronic hepatopathy in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism according to option 2, is carried out in the following sequence.

Кровь для исследования берут утром натощак из вены в количестве 5 мл, центрифугируют, отбирают 0,8 мл сыворотки и экстрагируют липиды добавлением смеси хлороформ-метанола (1:2), фильтруют, выпаривают и разгоняют в камерах в парах смеси гептан-эфир-этилацетат (12:3:1) на специальных пластинках с силикагелем и затем денситометрируют. Получают относительное содержание фракций фосфолипидов в сыворотке крови и при уровне ЛФЭА 6% и ниже диагностируют хроническую гепатопатию. Blood samples were taken in the morning on an empty stomach in the amount of 5 ml in the morning, centrifuged, 0.8 ml of serum was taken and lipids were extracted by adding a mixture of chloroform-methanol (1: 2), filtered, evaporated and dispersed in chambers in heptane-ether-ethyl acetate pairs (12: 3: 1) on special silica gel plates and then densitometric. The relative content of phospholipid fractions in the blood serum is obtained and chronic hepatopathy is diagnosed at a level of LPEA of 6% and lower.

Пример 1 (по варианту 1) . Больной Зуев А.П., 35 лет, история болезни N 93, носитель HB_sAg. Находился на лечении в наркологическом отделении с диагнозом: алкоголизм II стадии в форме запойного пьянства с повышенной толерантностью. Данные фосфолипидного спектра сыворотки крови: ЛФХ - 5%, Уровень ЛФХ, равный 5%, позволяет выставить диагноз хронической гепатопатии.Example 1 (option 1). Patient Zuev A.P., 35 years old, medical history N 93, carrier HB _s Ag. He was treated in the drug treatment department with a diagnosis of stage II alcoholism in the form of drunken drunkenness with increased tolerance. Serum phospholipid spectrum data: LPC - 5%, LPC level of 5% allows you to diagnose chronic hepatopathy.

Пример 2 (по варианту 1). Больной Разинков Ю.А., 32 лет, история болезни N 69, носитель HB_sAg. Поступил на лечение в наркологическое отделение с диагнозом: алкоголизм II стадии в форме запойного пьянства с повышенной толерантностью. Показатели общепринятых биохимических тестов были в пределах нормы. Данные фосфолипидного спектра сыворотки крови: ЛФХ - 2,6%. Уровень ЛФХ был ниже 5% и позволил поставить диагноз хронической гепатопатии.Example 2 (option 1). Patient Razinkov Yu.A., 32 years old, medical history N 69, carrier HB _s Ag. He was admitted for treatment to the narcological department with a diagnosis of stage II alcoholism in the form of drunken drunkenness with increased tolerance. Indicators of generally accepted biochemical tests were within normal limits. Serum phospholipid spectrum data: LFH - 2.6%. The level of LPC was below 5% and allowed to diagnose chronic hepatopathy.

Пример 3 (по варианту 2). Больной Орлов B.C., 48 лет, история болезни N 131, носитель HB_sAg. Находился на лечении в наркологическом отделении с диагнозом: алкоголизм II стадии в форме запойного пьянства с повышенной толерантностью. Показатели общепринятых биохимических тестов были в пределах нормы. Данные фосфолипидного спектра сыворотки крови: ЛФЭА - 5,4%, уровень ЛФЭА ниже 5% позволяет выставить диагноз хронической гепатопатии.Example 3 (option 2). Patient Orlov BC, 48 years old, medical history N 131, carrier HB _s Ag. He was treated in the drug treatment department with a diagnosis of stage II alcoholism in the form of drunken drunkenness with increased tolerance. Indicators of generally accepted biochemical tests were within normal limits. The data of the phospholipid spectrum of blood serum: LFEA - 5.4%, the level of LFEA below 5% allows you to diagnose chronic hepatopathy.

Возможность диагностики с высокой точностью хронической гепатопатии у носителей HB_sAg больных алкоголизмом в максимально ранний (доклинический и догистологический) период позволяет врачу своевременно определить диету, назначить лечение, устранить хроническое отравление алкоголем, приостановить дальнейшее развитие болезни, стабилизировать состояние и даже привести к полному восстановлению здоровья, избежать травматизации пациента и развития тяжелых осложнений при процедуре биопсии.The possibility of diagnosing with high accuracy chronic hepatopathy in HB _s Ag carriers of patients with alcoholism at the earliest (preclinical and prehistoric) period allows the doctor to determine the diet in time, prescribe treatment, eliminate chronic alcohol poisoning, stop the further development of the disease, stabilize the condition and even lead to a full recovery health, to avoid trauma to the patient and the development of serious complications during the biopsy procedure.

Claims

1. A method for the diagnosis of chronic hepatopathy in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism, consisting in the study of a biological substrate, characterized in that the blood serum is taken as a biological substrate, the relative content of phospholipid fractions is determined in it, an indicator of the relative content of lysophosphatidylcholine is isolated and at a level lower 5% diagnose chronic hepatopathy.

2. A method for the diagnosis of chronic hepatopathy in carriers of HB _s Ag patients with alcoholism, consisting in the study of a biological substrate, characterized in that the blood serum is taken as a biological substrate, the relative content of phospholipid fractions is determined in it, an indicator of the relative content of lysophosphatidylethanolamine is isolated and at a level lower 6% diagnose chronic hepatopathy.