RU2018315C1

RU2018315C1 - Method of producing polyphenols having hepatoprotective, cholagogue, antioxidant and analeptic activity

Info

Publication number: RU2018315C1
Authority: RU
Inventors: Н.Н. Гужва; Ю.Г. Пшуков; Л.С. Саркисов; М.Н. Ивашев; А.М. Колпак
Original assignee: Гужва Николай Николаевич
Priority date: 1992-01-22
Filing date: 1992-01-22
Publication date: 1994-08-30

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: Astragalus is extracted by 80% ethanol. Thus prepared extract is evaporated, degreased by chloroform and isolated with the help of ethylacetate. The process is followed by precipitation with dry chloroform and by drying. EFFECT: improves efficiency of the method. 4 tbl

Description

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается способа производства лекарственных препаратов из растительного сырья. The invention relates to the pharmaceutical industry and relates to a method for the production of medicines from plant materials.

Известны способы получения полифенольных суммарных препаратов с гепатозащитными или желчегонными свойствами из растений. Например, силибор используется как гапатозащитное средство [1], а сумма полифенольных соединений из травы вики посевной обладает желчегонной активностью [2]. Known methods for producing polyphenolic total preparations with hepatoprotective or choleretic properties from plants. For example, silibor is used as a hapatoprotective agent [1], and the amount of polyphenolic compounds from the vetch grass has choleretic activity [2].

Способ получения силибора заключается в экстракции семян расторопши пятнистой 80%-ным спиртом с последующим упариванием и растворением остатка 50% -ным этанолом. Раствор обрабатывают четыреххлористым углеродом, затем смесью хлороформ - спирт 2:1. Органическую фазу упаривают, сушат и получают целевой продукт с выходом 4,5-5% по сырью [1]. A method of producing silibor consists in the extraction of milk thistle seeds with spotted 80% alcohol, followed by evaporation and dissolution of the residue with 50% ethanol. The solution is treated with carbon tetrachloride, then with a mixture of chloroform - alcohol 2: 1. The organic phase is evaporated, dried and get the target product with a yield of 4.5-5% by raw material [1].

Однако средство, получаемое этим способом, обладает лишь гепатозащитным действием. However, the agent obtained by this method has only a hepatoprotective effect.

Известен способ получения суммы полифенольных соединений, обладающей желчегонной активностью, путем экстракции 30%-ным гидролизным спиртом травы вики посевной (Vicia Sativa L) при 70^оС. Водно-спиртовое извлечение упаривают и обрабатывают 96%-ным раствором этанола, осадок отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме и сушат [2]. Специфическое действие препарата также одностороннее.A known method of obtaining the amount of polyphenolic compounds with choleretic activity by extraction with 30% hydrolysis alcohol of grass vetch sowing (Vicia Sativa L) at 70 ^about C. Water-alcohol extraction is evaporated and treated with 96% ethanol solution, the precipitate is filtered off, the filtrate evaporated in vacuo and dried [2]. The specific effect of the drug is also one-sided.

Сведений о выделении вещества из растительного сырья, обладающих одновременно гепатозащитной, желчегонной, антиоксидантной и аналептической активностью не обнаружено. Information on the allocation of substances from plant materials with both hepatoprotective, choleretic, antioxidant and analeptic activity was not found.

Сущность способа заключается в экстракции измельченной травы (надземная часть) астрагала бунговского A.Bungeanus Borigs) 80%-ным этанолом в реакторе, с подогревом до 60-70^оС при соотношении сырья и экстрагента (1:4)-(1: 5), с последующей очисткой извлечения этилацетатом, сгущением объединенных извлечений до минимума. Сумму полифенольных соединений осаждают сухим хлороформом.The method consists in the extraction of the crushed grass (aerial part) Astragalus bungovskogo A.Bungeanus Borigs) 80% ethanol in a reactor, heated to 60-70 ^{° C} at a ratio of raw material and the extractant (1: 4) - (1: 5) , followed by purification of the extract with ethyl acetate, thickening the combined extracts to a minimum. The amount of polyphenolic compounds is precipitated with dry chloroform.

П р и м е р 1. 1 кг воздушно-сухого измельченного сырья помещают в реактор и исчерпывающе (5 раз) экстрагируют 80%-ным этанолом в соотношении сырья и экстрагент 1:5 при нагревании до 70^оС. Объединенные спиртовые извлечения (23,8 л) упаривают в вакууме при температуре 70-80^оС до 300 мл и очищают этот остаток 10 раз по 100 мл хлороформа от хлорофилла, липидов и других балластных веществ. Затем очищенную фракцию исчерпывающе экстрагируют 10 раз по 100 мл этилацетатом. Этилацетатные извлечения суммируют, сушат над безводным сульфатом натрия, раствор фильтруют и отгоняют в вакууме до объема 50 мл. Сумму полифенолов осаждают 5-кратным объемом сухого хлороформа. Осадок отделяют на стеклянном фильтре N 2-4, высушивают в сушильном шкафу при 60^оС в течение 12 ч. Выход составил 5,9-6,2% (59,00-62,00/г).EXAMPLE EXAMPLE 1 1 kg of air-dry crushed material is placed in a reactor and exhaustively (5 times) was extracted with 80% ethanol in a ratio of extractant feed and 1: 5 by heating to 70 ^C. The combined alcoholic extract (23 8 l) was evaporated under vacuum at a temperature of 70-80 ^{° C} up to 300 ml and the residue is purified by 10 times with 100 ml of chloroform from chlorophyll, lipids and other ballast substances. Then, the purified fraction was exhaustively extracted 10 times with 100 ml of ethyl acetate. The ethyl acetate extracts are summarized, dried over anhydrous sodium sulfate, the solution is filtered and distilled off in vacuo to a volume of 50 ml. The amount of polyphenols precipitated with 5 times the volume of dry chloroform. The precipitate was isolated on a glass filter N 2-4, dried in an oven at ⁶⁰ ° C for 12 h. The yield is 5,9-6,2% (59,00-62,00 / g).

Изучение гепатозащитной, антиоксидантной и желчегонной активности, а также токсичности суммарного полифенольного извлечения из астрагала проводилось на белых крысах массой 130-185 г линии Вистар. The study of hepatoprotective, antioxidant and choleretic activity, as well as the toxicity of total polyphenol extraction from astragalus, was carried out on white rats weighing 130-185 g of the Wistar line.

Определение гепатопротекторного и антиоксидантного действия заявляемого вещества проводили на модели острой жировой дистрофии печени, вызванной тетрахлорметаном (внутрижелудочное введение 50% -ного масляного раствора 0,75 мл (100 г массы тела). О степени гепатозащитного действия исследуемых веществ судили по их способности уменьшать активность индикаторного фермента аланин-аминотрансферазы (АЛАТ) в сыворотке крови. Концентрацию АЛАТ в сыворотке крови определяли по методу Reitmans и Frankols, 1957 г. Реферанс-препаратом для этого вида активности был выбран силибор. Determination of the hepatoprotective and antioxidant effects of the claimed substance was carried out on a model of acute fatty liver caused by carbon tetrachloride (intragastric administration of a 50% oil solution of 0.75 ml (100 g body weight). The degree of hepatoprotective effect of the test substances was judged by their ability to reduce the activity of the indicator serum alanine aminotransferase (ALAT) enzyme. Serum ALAT concentration was determined by the method of Reitmans and Frankols, 1957. The reference drug for this type of activity was Silibor selected.

Изучение желчегонной активности проводили по методике Скакун Н.П. и Олейник А.Н. для этого белым крысам под наркозом (1%-ный р-р барбамила внутрибрюшинно из расчета 0,8 мл/100 г массы тела) вводили канюлю в желчный проток и собирали желчь в течение 3 ч. Исследуемое вещество и референс-препарат (фламин) вводили в двенадцатиперстную кишку. Скорость секреции желчи выражали в мг/мин/100 и сравнивали с аналогичным у контрольной группы животных. Полученные данные статистически обрабатывали. The study of choleretic activity was carried out according to the method Skakun N.P. and Oleinik A.N. To do this, white rats under anesthesia (1% barbamyl solution intraperitoneally at the rate of 0.8 ml / 100 g body weight) were injected with a cannula in the bile duct and bile was collected for 3 hours. Test substance and reference preparation (flaming) injected into the duodenum. The rate of bile secretion was expressed in mg / min / 100 and compared with the same in the control group of animals. The data obtained were statistically processed.

Гепатозащитная активность суммарного полифенольного препарата из астрагала бунговского приведена в табл.1. The hepatoprotective activity of the total polyphenolic drug from Astragalus Bungovsky is shown in Table 1.

Желчегонная активность суммарного полифенольного препарата из астрагала бунговского дана в табл. 2. The choleretic activity of the total polyphenol drug from Astragalus bungovsky is given in table. 2.

Антиоксидантную активность оценивали по степени уменьшения концентрации конечного продукта перекисного окисления липидов малонового альдегида (МДА) в тканях печени. Antioxidant activity was evaluated by the degree of decrease in the concentration of the final product of lipid peroxidation of malondialdehyde (MDA) in the tissues of the liver.

Антиоксидантная активность суммарного полифенольного извлечения из астрагала бунговского приведена в табл. 3. The antioxidant activity of total polyphenol extraction from Bungovsky astragalus is given in table. 3.

Концентрацию МДА определяли по методу Стальной И.Д. и Гаришвили Т.Г. The concentration of MDA was determined by the method of Steel I.D. and Garishvili T.G.

В качестве препарата сравнения использовался витамин Е. Vitamin E was used as a comparison drug.

Определение аналептической активности проводилось на модели нембуталового сна. Эталонным препаратом для сравнения аналептической активности был выбран кофеин-бензоат натрия в дозе 10 мг/кг массы тела (внутрибрюшинное введение). Определение проводилось на белых крысах-самцах. Одновременно ставилось несколько серий экспериментов на шесть животных в каждой серии: первая серия - контроль (физраствор), вторая - стандартная (кофеин-бензоат натрия), третья - опытная (соответствующая сумма полифенолов). Дозы препарата и вещества подбирались с учетом средней смертельной LD₅₀). Результаты обрабатывались статистически (табл.4).Determination of analeptic activity was carried out on a model of nembutal sleep. The reference drug for comparing analeptic activity was sodium caffeine-benzoate at a dose of 10 mg / kg body weight (intraperitoneal administration). The determination was carried out on white male rats. At the same time, several series of experiments were performed on six animals in each series: the first series - control (saline), the second - standard (caffeine-sodium benzoate), the third - experimental (the corresponding amount of polyphenols). Doses of the drug and substance were selected taking into account the average lethal LD ₅₀ ). The results were processed statistically (Table 4).

Как видно из таблиц, желчегонная, гепатозащитная и антиоксидантная активность суммы полифенолов из астрагала бунговского несколько ниже соответствующих активностей препаратов сравнения. Однако аналептическая активность суммы полифенолов из астрагала бунговского более чем в 1,5 раза превышает действие кофеина-бензоата натрия. As can be seen from the tables, the choleretic, hepatoprotective and antioxidant activity of the sum of the polyphenols from Astragalus bungovsky is slightly lower than the corresponding activities of the comparison drugs. However, the analeptic activity of the sum of the polyphenols from Astragalus Bungovsky is more than 1.5 times the effect of caffeine-sodium benzoate.

LD₅₀, вычисленная по методу пробит-анализа В.Б.Прозоровского, для заявляемого вещества составляет 10650 мг/кг.LD ₅₀ , calculated by the method of probit analysis of VB Prozorovsky, for the claimed substance is 10,650 mg / kg

Claims

METHOD FOR PRODUCING POLYPHENOLS HAVING HEPATOPROTECTIVE, CHOLESAPONIC, ANTIOXIDANT AND ANALEPTIC ACTIVITY, by extraction of Astragalus grass (A. Bungeanus Boriss) with 80% ethanol, evaporation of its dry solvent, evaporation of the chlorine solution, evaporation of the solvent.