[go: up one dir, main page]

RU2008131742A - METHOD FOR CULTIVATION OF EMBRYONIC CELLS AND OBTAINING CELL MATRICES - Google Patents

METHOD FOR CULTIVATION OF EMBRYONIC CELLS AND OBTAINING CELL MATRICES Download PDF

Info

Publication number
RU2008131742A
RU2008131742A RU2008131742/13A RU2008131742A RU2008131742A RU 2008131742 A RU2008131742 A RU 2008131742A RU 2008131742/13 A RU2008131742/13 A RU 2008131742/13A RU 2008131742 A RU2008131742 A RU 2008131742A RU 2008131742 A RU2008131742 A RU 2008131742A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
chitosan
collagen
nutrient medium
growth factor
bfgf
Prior art date
Application number
RU2008131742/13A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2391399C2 (en
Inventor
Артем Валерьевич Еремеев (RU)
Артем Валерьевич Еремеев
Надежда Викторовна Зотова (RU)
Надежда Викторовна Зотова
Алексей Александрович Власов (RU)
Алексей Александрович Власов
Игорь Николаевич Большаков (RU)
Игорь Николаевич Большаков
Анатолий Васильевич Светлаков (RU)
Анатолий Васильевич Светлаков
Original Assignee
Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Красноярская Государственная Медицинская Академи
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярская государственная медицинская академия имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Красноярская Государственная Медицинская Академи, Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярская государственная медицинская академия имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" filed Critical Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Красноярская Государственная Медицинская Академи
Priority to RU2008131742/13A priority Critical patent/RU2391399C2/en
Publication of RU2008131742A publication Critical patent/RU2008131742A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2391399C2 publication Critical patent/RU2391399C2/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)

Abstract

1. Способ культивирования эмбриональных клеток и получения клеточной матрицы с целью трансплантации путем использования биополимерных подложек в присутствии факторов роста в полной питательной среде, отличающийся тем, что в качестве подложки используют коллаген-хитозановую конструкцию, состоящую из 2% раствора ацетата коллагена, 2% раствора аскорбата хитозана молекулярной массы 100-700 kD и степенью дезацеталирования свыше 95%, содержащего в своем составе аскорбиновую кислоту - 1,8 г/г сухого хитозана, хондроитинсерную кислоту - 5-100 мг/г сухого хитозана, D-глюкуроновую кислоту - 10-100 мг/г сухого хитозана, гепарин - 2,5-5 мг/г сухого хитозана и сывороточный фактор роста крупного рогатого скота «адгелон» - 11-220 мкг/г сухого хитозана, которую подвергают предварительной нейтрализации в стерильном бикарбонатном буфере. ! 2. Способ по п.1 отличающийся тем, что коллаген-хитозановая конструкция представляет собой губку, пленку, микросферы, волокна. ! 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что на коллаген-хитозановую конструкцию наносят эмбриональные фибробласты в полной питательной среде без присутствия основного фактора роста фибробластов (bFGF). ! 4. Способ по пп.1 - 3, отличающийся тем, что на эмбриональные фибробласты после их прикрепления на коллаген-хитозановой конструкции наслаивают кондиционированную питательную среду без присутствия основного фактора роста фибробластов (bFGF), эмбриональные стволовые или стволовые мультипотентные клетки в полной питательной среде без присутствия основного фактора роста фибробластов (bFGF). ! 5. Способ по п.4, отличающийся тем, что культивирование на клеточной матрице осуществляют в течение 72 ч. ! 6. Спос1. A method of culturing embryonic cells and obtaining a cell matrix for transplantation using biopolymer substrates in the presence of growth factors in a complete nutrient medium, characterized in that the collagen-chitosan construct consisting of a 2% solution of collagen acetate, 2% solution is used as a substrate chitosan ascorbate of molecular weight 100-700 kD and a degree of deacetalization of more than 95%, containing ascorbic acid in its composition - 1.8 g / g dry chitosan, chondroitin acid - 5-100 mg / g dry chitosan, D-glucuronic acid - 10-100 mg / g dry chitosan, heparin - 2.5-5 mg / g dry chitosan and serum cattle growth factor "gelon" - 11-220 μg / g dry chitosan, which is subjected pre-neutralization in sterile bicarbonate buffer. ! 2. The method according to claim 1, characterized in that the collagen-chitosan design is a sponge, film, microspheres, fibers. ! 3. The method according to claim 1, characterized in that the collagen-chitosan design is applied to embryonic fibroblasts in a complete nutrient medium without the presence of basic fibroblast growth factor (bFGF). ! 4. The method according to claims 1 to 3, characterized in that the embryonic fibroblasts after their attachment to the collagen-chitosan construct are layered with conditioned nutrient medium without the presence of the main fibroblast growth factor (bFGF), embryonic stem or stem multipotent cells in a complete nutrient medium without the presence of major fibroblast growth factor (bFGF). ! 5. The method according to claim 4, characterized in that the cultivation on the cell matrix is carried out for 72 hours! 6. Spos

Claims (8)

1. Способ культивирования эмбриональных клеток и получения клеточной матрицы с целью трансплантации путем использования биополимерных подложек в присутствии факторов роста в полной питательной среде, отличающийся тем, что в качестве подложки используют коллаген-хитозановую конструкцию, состоящую из 2% раствора ацетата коллагена, 2% раствора аскорбата хитозана молекулярной массы 100-700 kD и степенью дезацеталирования свыше 95%, содержащего в своем составе аскорбиновую кислоту - 1,8 г/г сухого хитозана, хондроитинсерную кислоту - 5-100 мг/г сухого хитозана, D-глюкуроновую кислоту - 10-100 мг/г сухого хитозана, гепарин - 2,5-5 мг/г сухого хитозана и сывороточный фактор роста крупного рогатого скота «адгелон» - 11-220 мкг/г сухого хитозана, которую подвергают предварительной нейтрализации в стерильном бикарбонатном буфере.1. A method of culturing embryonic cells and obtaining a cell matrix for transplantation using biopolymer substrates in the presence of growth factors in a complete nutrient medium, characterized in that the collagen-chitosan construct consisting of a 2% solution of collagen acetate, 2% solution is used as a substrate chitosan ascorbate of molecular weight 100-700 kD and a degree of deacetalization of more than 95%, containing ascorbic acid in its composition - 1.8 g / g dry chitosan, chondroitin acid - 5-100 mg / g dry chitosan, D-glucuronic acid - 10-100 mg / g dry chitosan, heparin - 2.5-5 mg / g dry chitosan and serum cattle growth factor "gelon" - 11-220 μg / g dry chitosan, which is subjected pre-neutralization in sterile bicarbonate buffer. 2. Способ по п.1 отличающийся тем, что коллаген-хитозановая конструкция представляет собой губку, пленку, микросферы, волокна.2. The method according to claim 1, characterized in that the collagen-chitosan design is a sponge, film, microspheres, fibers. 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что на коллаген-хитозановую конструкцию наносят эмбриональные фибробласты в полной питательной среде без присутствия основного фактора роста фибробластов (bFGF).3. The method according to claim 1, characterized in that the collagen-chitosan design is applied to embryonic fibroblasts in a complete nutrient medium without the presence of basic fibroblast growth factor (bFGF). 4. Способ по пп.1 - 3, отличающийся тем, что на эмбриональные фибробласты после их прикрепления на коллаген-хитозановой конструкции наслаивают кондиционированную питательную среду без присутствия основного фактора роста фибробластов (bFGF), эмбриональные стволовые или стволовые мультипотентные клетки в полной питательной среде без присутствия основного фактора роста фибробластов (bFGF).4. The method according to claims 1 to 3, characterized in that the embryonic fibroblasts after their attachment to the collagen-chitosan construct are layered with conditioned nutrient medium without the presence of the main fibroblast growth factor (bFGF), embryonic stem or stem multipotent cells in a complete nutrient medium without the presence of major fibroblast growth factor (bFGF). 5. Способ по п.4, отличающийся тем, что культивирование на клеточной матрице осуществляют в течение 72 ч.5. The method according to claim 4, characterized in that the cultivation on the cell matrix is carried out for 72 hours 6. Способ по п.4, отличающийся тем, что для получения кондиционированной питательной среды отдельно осуществляют культивирование in vitro эмбриональных фибробластов в полной питательной среде в присутствии основного фактора роста фибробластов (bFGF) с последующим его удалением путем фильтрации.6. The method according to claim 4, characterized in that in order to obtain a conditioned nutrient medium, in vitro cultivation of embryonic fibroblasts in a complete nutrient medium is carried out separately in the presence of basic fibroblast growth factor (bFGF), followed by its removal by filtration. 7. Способ по п.4, отличающийся тем, что для получения стволовых эмбриональных или стволовых мультипотентных клеток осуществляют их предварительное культивирование in vitro в полной питательной среде с добавлением основного фактора роста фибробластов (bFGF) с последующим его удалением путем фильтрации.7. The method according to claim 4, characterized in that to obtain embryonic stem or stem multipotent cells, they are pre-cultured in vitro in a complete nutrient medium with the addition of basic fibroblast growth factor (bFGF) followed by its removal by filtration. 8. Способ по п.4, отличающийся тем, что трансплантацию эмбриональных клеток или их дифференцированных производных осуществляют вместе с коллаген-хитозановой матрицей без предварительного снятия клеток с ее поверхности. 8. The method according to claim 4, characterized in that the transplantation of embryonic cells or their differentiated derivatives is carried out together with a collagen-chitosan matrix without first removing the cells from its surface.
RU2008131742/13A 2008-07-31 2008-07-31 Method of preparing skin cell matrix RU2391399C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2008131742/13A RU2391399C2 (en) 2008-07-31 2008-07-31 Method of preparing skin cell matrix

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2008131742/13A RU2391399C2 (en) 2008-07-31 2008-07-31 Method of preparing skin cell matrix

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2008131742A true RU2008131742A (en) 2010-02-10
RU2391399C2 RU2391399C2 (en) 2010-06-10

Family

ID=42123430

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2008131742/13A RU2391399C2 (en) 2008-07-31 2008-07-31 Method of preparing skin cell matrix

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2391399C2 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2430159C1 (en) * 2010-04-12 2011-09-27 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" Method of obtaining cardiomyocytal matrix
RU2431666C1 (en) * 2010-04-06 2011-10-20 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" Method for producing neuronal matrix
CN118750654A (en) * 2024-09-06 2024-10-11 西部生科生物医学科技(成都)有限公司双流医疗分公司 A process for preparing human adipose stem cell preparation and its clinical application

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2478299C2 (en) * 2011-05-27 2013-04-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет пищевых производств" Method for production of collagen-containing matrix for biologically active substances immobilisation
RU2489176C1 (en) * 2012-02-14 2013-08-10 Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Красноярский Государственный Медицинский Университет Имени Профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства Здравоохранения И Социального Развития Method of spinal tissue engineering following anatomical rupture
RU2505602C1 (en) * 2012-06-04 2014-01-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский кардиологический научно-производственный комплекс" Министерства здравоохранения и социального развития РФ (ФГБУ "РКНПК" Минздравсоцразвития России) Method for obtaining resident stem cells of mammal heart from myocard sample

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE552867T1 (en) * 2006-06-16 2012-04-15 Fmc Biopolymer As ALGINATE COATED COLLAGEN MATRIX CELL DEVICE, PRODUCTION METHOD THEREOF AND USES THEREOF

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2431666C1 (en) * 2010-04-06 2011-10-20 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" Method for producing neuronal matrix
WO2011142691A2 (en) 2010-04-06 2011-11-17 ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "КРАСНОЯРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ ПРОФЕССОРА В. Ф. ВОИНО-ЯСЕНЕЦКОГд МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ" Method for producing a neural matrix
WO2011142691A3 (en) * 2010-04-06 2012-01-26 ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "КРАСНОЯРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ ПРОФЕССОРА В. Ф. ВОИНО-ЯСЕНЕЦКОГд МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ" Method for producing a neural matrix
EP2557153A4 (en) * 2010-04-06 2013-10-02 G Obrazovatel Noye Uchrezhdeniye Vysshyego Propyhsessional Nogo Obrazovanija Krasnojarskij G Myedits Method for producing a neural matrix
RU2430159C1 (en) * 2010-04-12 2011-09-27 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" Method of obtaining cardiomyocytal matrix
WO2011129719A2 (en) 2010-04-12 2011-10-20 Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Красноярский Государственный Медицинский Университет Имени Профессора В. Ф. Воино-Ясенецкого Министерства Здравоохранения И Социального Развития Российской Федерации" Method for preparation of a cardiomyocyte matrix
WO2011129719A3 (en) * 2010-04-12 2012-02-16 Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Красноярский Государственный Медицинский Университет Имени Профессора В. Ф. Воино-Ясенецкого Министерства Здравоохранения И Социального Развития Российской Федерации" Method for preparation of a cardiomyocyte matrix
CN118750654A (en) * 2024-09-06 2024-10-11 西部生科生物医学科技(成都)有限公司双流医疗分公司 A process for preparing human adipose stem cell preparation and its clinical application

Also Published As

Publication number Publication date
RU2391399C2 (en) 2010-06-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Katsen-Globa et al. Towards ready-to-use 3-D scaffolds for regenerative medicine: adhesion-based cryopreservation of human mesenchymal stem cells attached and spread within alginate–gelatin cryogel scaffolds
CA2751985C (en) Method for the cryopreservation of cells, artificial cell constructs or three-dimensional complex tissues assemblies
CN101757690B (en) Method for preparing tissue engineering cornea
RU2008131742A (en) METHOD FOR CULTIVATION OF EMBRYONIC CELLS AND OBTAINING CELL MATRICES
CN106730034B (en) Artificial nerve graft constructed based on sliced acellular scaffold and preparation method
CN107988158B (en) A three-dimensional tumor model decellularized porous scaffold, construction method and application thereof
CN102367434B (en) Amniotic membrane microcarrier capable of simulating niche microenvironment for growth of epidermal stem cells and skin substitute thereof
CN101302486A (en) Acetobacter xylinum and method for preparing nanocellulose skin tissue repair material using it
CN105013013A (en) Preparation method of skin ulcer repairing matrix
CN1775304A (en) Preparation method of biologically active artificial biological valve
Shen et al. The progress in techniques for culturing human limbal epithelial stem cells
CN104877954B (en) A method of by stem cell alcove culture stem cell
Viveiros et al. Physical, functional and biochemical features of Nanoskin® bacterial cellulose scaffold as a potential carrier for cell transference
Cao et al. Study on surface modification of porous apatite-wollastonite bioactive glass ceramic scaffold
CN118755667A (en) A culture medium for menstrual blood mesenchymal stem cells and a method for extracting and culturing the same
CN105963795A (en) Method for preparing tissue engineering epidermis based on collagen
JP5224440B2 (en) Three-dimensional cultured elastic fiber tissue and method for producing three-dimensional cultured elastic fiber tissue
CN105238740A (en) In-vitro screening and culturing method for tissue engineering skin seed epidermal keratinocyte high-simulation in-vivo cell extracellular matrix attachment
CN1363398A (en) Stratified artificial skin using chitosan or its derivative as matrix clathrum
JP2007528252A5 (en)
JP6029102B2 (en) Method for producing three-dimensional cultured elastic fiber tissue
US8426196B2 (en) Method for regulating proliferation of cells
CN100415307C (en) Allogeneic or xenogeneic acellular dermal substitute modified by human fibroblasts
CN110038160A (en) A kind of timbering material and its application with delaying cell aging effect
CN105169484A (en) Cell transplantation culture method for forming bone tissue in vivo

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20180801