RU2004113450A - Кристаллическая структура фосфодиэстеразы 5 и ее использование - Google Patents
Кристаллическая структура фосфодиэстеразы 5 и ее использование Download PDFInfo
- Publication number
- RU2004113450A RU2004113450A RU2004113450/13A RU2004113450A RU2004113450A RU 2004113450 A RU2004113450 A RU 2004113450A RU 2004113450/13 A RU2004113450/13 A RU 2004113450/13A RU 2004113450 A RU2004113450 A RU 2004113450A RU 2004113450 A RU2004113450 A RU 2004113450A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pde5
- catalytic domain
- crystal
- ligand
- complex
- Prior art date
Links
- 239000013078 crystal Substances 0.000 title claims 37
- 102000011016 Type 5 Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases Human genes 0.000 claims 98
- 108010037581 Type 5 Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases Proteins 0.000 claims 98
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 claims 49
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims 25
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 14
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims 6
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims 4
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims 4
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 claims 3
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 3
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 claims 3
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 claims 3
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims 3
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims 3
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims 3
- 101100296720 Dictyostelium discoideum Pde4 gene Proteins 0.000 claims 2
- 239000007987 MES buffer Substances 0.000 claims 2
- 101100082610 Plasmodium falciparum (isolate 3D7) PDEdelta gene Proteins 0.000 claims 2
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 claims 2
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 claims 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 claims 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 claims 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims 1
- 238000005094 computer simulation Methods 0.000 claims 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 claims 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 claims 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- 208000012201 sexual and gender identity disease Diseases 0.000 claims 1
- 208000015891 sexual disease Diseases 0.000 claims 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/44—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving esterase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y301/00—Hydrolases acting on ester bonds (3.1)
- C12Y301/04—Phosphoric diester hydrolases (3.1.4)
- C12Y301/04035—3',5'-Cyclic-GMP phosphodiesterase (3.1.4.35)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2299/00—Coordinates from 3D structures of peptides, e.g. proteins or enzymes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
- G01N2500/04—Screening involving studying the effect of compounds C directly on molecule A (e.g. C are potential ligands for a receptor A, or potential substrates for an enzyme A)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Claims (50)
1. Кристалл каталитического домена фосфодиэстеразы 5 (PDE5).
2. Кристалл каталитического домена PDE5 по п.1, отличающийся тем, что указанный каталитический домен PDE5 происходит от млекопитающего.
3. Кристалл каталитического домена PDE5 по п.2, отличающийся тем, что указанный каталитический домен PDE5 происходит от человека.
4. Кристалл каталитического домена PDE5 по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что указанный каталитический домен PDE5 представляет собой изоформу, выбранную из группы, состоящей из PDE5А1, PDE5А2, PDE5А3 и PDE5А4.
5. Кристалл каталитического домена PDE5 по п.4, отличающийся тем, что указанный каталитический домен PDE5 содержит последовательность SEQ ID NO:1 или ее гомолог, фрагмент, вариант, аналог или производное.
6. Кристалл каталитического домена PDE5 по п.4, отличающийся тем, что указанный каталитический домен PDE5 содержит SEQ ID NO:2 или ее гомолог, фрагмент, вариант, аналог или производное.
7. Кристалл каталитического домена PDE5 по п.4, отличающийся тем, что указанный каталитический домен PDE5 содержит последовательность SEQ ID NO:4 или ее гомолог, фрагмент, вариант, аналог или производное.
8. Кристалл каталитического домена PDE5 по п.4, отличающийся тем, что указанный каталитический домен PDE5 содержит последовательность SEQ ID NO:5 или ее гомолог, фрагмент, вариант, аналог или производное.
9. Кристалл каталитического домена PDE5 по любому из п.5 или 6, отличающийся тем, что имеет одну или более из нижеследующих характеристик:
(а) спейсерную группу Р62;
(b) размеры элементарной ячейки а~95Е±1%, b~95Е±1%, c~82Е±1%, α=β=90°, γ=120°;
(с) 1 молекулу на один ассиметричный элемент;
(d) содержит каталитический домен PDE5 с молекулярной массой приблизительно 40 кДа ± 2 кДа;
(е) вычисленное содержание растворителя составляет приблизительно 43 ± 5%; и
(f) гексагональную кристаллическую систему.
10. Кристалл каталитического домена PDE5 по любому из п.7 или 8, отличающийся тем, что имеет одну или более из нижеследующих характеристик:
(а) спейсерную группу Р21;
(b) размеры элементарной ячейки а~55Е±1%, b~78Е±1%, c~82Е±1%, α=γ=90°, β~101°±2°;
(с) 2 молекулы на один ассиметричный элемент;
(d) содержит каталитический домен PDE5 с молекулярной массой приблизительно 38 кДа ± 2 кДа;
(е) вычисленное содержание растворителя составляет приблизительно 46±5%; и
(f) моноклинную кристаллическую систему.
11. Кристалл каталитического домена PDE5 по любому из пп. 5-7, отличающийся тем, что указанный каталитический домен PDE5 имеет трехмерную структуру, характеризующуюся атомными координатами, представленными в таблице 3, или производное, выраженное в любой системе отсчета.
12. Кристалл каталитического домена PDE5 по любому из п. 7 или 8, отличающийся тем, что указанный каталитический домен PDE5 имеет трехмерную структуру, характеризующуюся атомными координатами, представленными в таблице 5, или производное, выраженное в любой системе отсчета.
13. Кристалл каталитического домена PDE5 по п.1, отличающийся тем, что активный сайт на PDE5 находится в третьем субдомене белка и ограничен спиралями 15 (Н15 813-824) и 14 (Н14 772-797), С-концом спирали 13 (Н13 749-765) и С-концом спирали 11 (Н11 706-721) вместе с областью петли, расположенной между спиралями 11 и 12а (Н12а 725-731), как показано на фиг.2.
14. Кристалл каталитического домена PDE5 по п.1, отличающийся тем, что активный сайт на PDE5 содержит Leu 765, Ala 767 и Ile 768 и один или более из Phe 820, Val 782, Phe 786, Tyr 612, Leu 804, Ala 779, Ala 783, Ile 813, Met 816 и Gln 817.
15. Кристалл каталитического домена PDE5 по п.1, отличающийся тем, что кристаллическая система указанного кристалла характеризуется тем, что она является моноклинной, орторомбической или гексагональной.
16. Кристалл комплекса “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5”.
17. Кристалл комплекса “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5” по п.16, отличающийся тем, что указанный каталитический домен PDE5 представляет собой домен по любому из п.5 или 6.
18. Кристалл комплекса “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5” по п.16, отличающийся тем, что указанный каталитический домен PDE5 представляет собой домен по любому из п. 7 или 8.
19. Кристалл комплекса “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5” по п.17, отличающийся тем, что имеет одну или более из нижеследующих характеристик:
(а) спейсерную группу Р212121;
(b) размеры элементарной ячейки а~94Е±1%, b~104Е±1%, c~142Е±1%, α=β=γ=90°;
(с) 4 молекулы на один ассиметричный элемент;
(d) содержит каталитический домен PDE5 с молекулярной массой приблизительно 40 кДа ± 2 кДа;
(е) вычисленное содержание растворителя составляет приблизительно 43 ± 5%; и
(f) орторомбическую кристаллическую систему.
20. Кристалл комплекса каталитический домен PDE5/лиганд PDE5 по п.18, отличающийся тем, что имеет одну или более из нижеследующих характеристик:
(а) спейсерную группу Р21;
(b) размеры элементарной ячейки а~55Е±1%, b~78Е±1%, c~82Е±1%, α=γ=90°, β~101°±2°;
(с) 2 молекулы на один ассиметричный элемент;
(d) содержит каталитический домен PDE5 с молекулярной массой приблизительно 38 кДа ± 2 кДа;
(е) вычисленное содержание растворителя составляет приблизительно 46±5%; и
(f) моноклинную кристаллическую систему.
21. Кристалл комплекса “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5” по п.17, отличающийся тем, что указанный комплекс “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5” имеет трехмерную структуру, характеризующуюся атомными координатами, представленными в таблице 4, или производное, выраженное в любой системе отсчета.
22. Кристалл комплекса “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5” по п.18, отличающийся тем, что указанный комплекс “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5” имеет трехмерную структуру, характеризующуюся атомными координатами, представленными в таблице 6, или производное, выраженное в любой системе отсчета.
23. Кристалл комплекса “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5” по п.17, отличающийся тем, что активный сайт на PDE5 находится в третьем субдомене белка и ограничен спиралями 15 (Н15 813-824) и 14 (Н14 772-797), С-концом спирали 13 (Н13 749-765) и С-концом спирали 11 (Н11 706-721) вместе с областью петли, расположенной между спиралями 11 и 12а (Н12а 725-731), как показано на фиг.2.
24. Кристалл комплекса “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5”, по п.17, отличающийся тем, что активный сайт на PDE5 содержит Leu 765, Ala 767 и Ile 768 и один или более из Phe 820, Val 782, Phe 786, Tyr 612, Leu 804, Ala 779, Ala 783, Ile 813, Met 816 и Gln 817.
25. Кристалл комплекса “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5” по п.17, отличающийся тем, что кристаллическая система указанного кристалла характеризуется тем, что она является моноклинной или орторомбической.
26. Применение атомных координат, определенных исходя из кристалла каталитического домена PDE5 по п.11 или 12, или из кристалла комплекса “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5” по п.21 или 22, для установления трехмерной структуры (i) полноразмерного PDE5 дикого типа или его мутанта, производного, фрагмента, варианта, аналога или гомолога, или (ii) субдомена PDE5 дикого типа или его мутанта, производного, фрагмента, варианта, аналога или гомолога.
27. Применение трехмерной структуры (i) полноразмерного PDE5 дикого типа или его мутанта, производного, фрагмента, варианта, аналога или гомолога, или (ii) субдомена PDE5 дикого типа или его мутанта, производного, фрагмента, варианта, аналога или гомолога по п.26 для компьютерной оценки или какой-либо иной оценки взаимодействий связывания лиганда PDE5 с активным сайтом на PDE5.
28. Применение по п.27, отличающееся тем, что указанный активный сайт на PDE5 находится в третьем субдомене белка и ограничен спиралями 15 (Н15 813-824) и 14 (Н14 772-797), С-концом спирали 13 (Н13 749-765) и С-концом спирали 11 (Н11 706-721) вместе с областью петли, расположенной между спиралями 11 и 12а (Н12а 725-731), как показано на фиг.2.
29. Применение по п. 27 или 28, отличающееся тем, что указанный активный сайт на PDE5 содержит Leu 765, Ala 767 и Ile 768 и один или более из Phe 820, Val 782, Phe 786, Tyr 612, Leu 804, Ala 779, Ala 783, Ile 813, Met 816 и Gln 817.
30. Применение по п.27 или 28 для конструирования соединения, способного связываться с PDE5.
31. Применение по п.27 или 28 для конструирования соединения, способного связываться с любым активным сайтом PDE5.
32. Способ идентификации соединения, способного связываться с PDE5, включающий совместную кристаллизацию или погружение указанного соединения в кристалл каталитического домена PDE5 по любому из пп.1-8 и определение трехмерной структуры для установления факта связывания указанного соединения с PDE5.
33. Соединение, сконструированное с помощью применения по любому из пп. 27-31, или идентифицированное способом по п.32.
34. Способ отбора лиганда PDE5 из группы потенциальных лигандов PDE5, включающий следующие стадии:
(а) компьютерного моделирования трехмерного представления структуры PDE5, полученной исходя из атомных координат, определенных в п.26, и трехмерного представления структуры потенциального лиганда PDE5;
(b) совместного отображения трехмерного представления потенциального лиганда PDE5 вместе с трехмерным представлением структуры PDE5; и
(с) установления факта соответствия трехмерного представления потенциального лиганда PDE5 трехмерному представлению активного сайта структуры PDE5.
35. Способ по п.34, отличающийся тем, что дополнительно включает следующие стадии:
(d) включения потенциального лиганда PDE5 в анализе на биологическую активность PDE5; и
(е) установления факта модуляции активности PDE5 потенциальным лигандом PDE5 в указанном анализе.
36. Лиганд PDE5, выбранный в соответствии со способом по п.34 или 35.
37. Применение лиганда PDE5 по п.36 в качестве фармацевтического средства.
38. Применение лиганда PDE5 по п.36 для производства лекарственного средства для профилактики или лечения состояния, заболевания, расстройства или дисфункции, при которых ингибирование PDE5 оказывает профилактически или терапевтически благоприятное действие.
39. Применение по п.38, отличающееся тем, что указанным расстройством является сексуальное расстройство у млекопитающих.
40. Применение атомных координат, определенных исходя из кристалла каталитического домена PDE5 по п.11 или 12, или кристалла комплекса “каталитический домен PDE5/лиганд PDE5” по п.21 или 22, для установления кристаллической структуры мутанта, производного, фрагмента, варианта, аналога, гомолога или комплекса PDE-родственного белка, или для получения модели трехмерной структуры PDE-родственного белка.
41. Применение трехмерной структуры каталитического домена PDE5, полученного в соответствии с п.26, для сайт-направленного конструирования мутантов, имитирующих другие изоформы PDE5 или его варианты.
42. Способ генетического конструирования структурно стабилизированного PDE-родственного белка, включающий:
(а) сопоставление аминокислотной последовательности PDE-родственного белка с аминокислотной последовательностью (i) PDE4, (ii) каталитического домена PDE4, показанного на фиг.1, или (iii) SEQ ID NO:4;
(b) идентификацию структурно эквивалентного субдомена PDE-родственного белка, который соответствует последовательности SEQ ID NO:4; и
(с) осуществление методами генной инженерии замены структурно эквивалентного субдомена PDE-родственного белка или его части последовательностью на SEQ ID NO:4 или ее гомологом, фрагментом, вариантом, аналогом или производным.
43. Способ продуцирования структурно стабилизированного PDE-родственного белка, включающий экспрессию генетически сконструированного PDE-родственного белка, определенного способом по п.42 в клетке-хозяине.
44. Способ по п.43, отличающийся тем, что дополнительно включает очистку экспрессированного генетически сконструированного PDE-родственного белка.
45. Способ кристаллизации структурно стабилизированного PDE-родственного белка, определенного в п.44, где указанным PDE-родственным белком является белок PDE5, включающий выращивание кристалла указанного белка PDE5 в растворе, содержащем:
(а) трис- или MES-буфер, фосфат аммония и/или PEG2KMME;
(b) трис-буфер, ацетат натрия и/или PEG4K; или
(с) 0,16М ацетат натрия, 80 мМ трис-гидрохлорид, рН 8,5,
24% мас./об PEG8KMME.
46. Способ по п.45, отличающийся тем, что рН (а) составляет 6,0-8,4, а рН (b) составляет 6,5-8,6.
47. Способ по п.45 или 46, отличающийся тем, что рН (b) составляет 8,2-8,6.
48. Способ по п.45 или 46, отличающийся тем, что указанный раствор содержит 0,1М трис, рН 8,0; 50 мМ фосфата аммония, рН 7,0; 16-26% мас./об PEG2KMME.
49. Способ по п.45 или 46, отличающийся тем, что указанный раствор содержит 0,1М MES, рН 6,0-6,5; 50 мМ фосфата аммония, рН 7,5; 22-34% мас./об PEG2KMME.
50. Способ по п.45 или 46, отличающийся тем, что указанный раствор содержит 0,1М трис, рН 8,2-8,6; 0,2М ацетата натрия и 26-30% мас./об PEG4K.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB0126417.5A GB0126417D0 (en) | 2001-11-02 | 2001-11-02 | Crystal structure |
| GB0126417.5 | 2001-11-02 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2004113450A true RU2004113450A (ru) | 2005-04-20 |
| RU2301259C2 RU2301259C2 (ru) | 2007-06-20 |
Family
ID=9925082
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2004113450/13A RU2301259C2 (ru) | 2001-11-02 | 2002-10-24 | Кристаллическая структура фосфодиэстеразы 5 и ее использование |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20070015205A1 (ru) |
| EP (1) | EP1468082A1 (ru) |
| KR (1) | KR20050039728A (ru) |
| CN (1) | CN1585821A (ru) |
| BR (1) | BR0213717A (ru) |
| CA (1) | CA2478059A1 (ru) |
| GB (1) | GB0126417D0 (ru) |
| IL (1) | IL163926A0 (ru) |
| PL (1) | PL370513A1 (ru) |
| RU (1) | RU2301259C2 (ru) |
| WO (1) | WO2003038080A1 (ru) |
| YU (1) | YU36104A (ru) |
| ZA (1) | ZA200403198B (ru) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MXPA05011769A (es) * | 2003-05-01 | 2006-01-26 | Pfizer | Estructura cristalina. |
| CA2565308A1 (en) * | 2003-05-06 | 2004-11-25 | New Century Pharmaceuticals | Albumin binding sites for evaluating drug interactions and methods of evaluating or designing drugs based on their albumin binding properties |
| WO2005041895A2 (en) * | 2003-11-03 | 2005-05-12 | New Century Pharmaceuticals, Inc. | Albumin binding sites for evaluating drug interactions and methods of evaluating or designing drugs based on their albumin binding properties |
| ATE470681T1 (de) * | 2006-07-12 | 2010-06-15 | Novartis Ag | Aktinisch vernetzbare copolymere zur herstellung von kontaktlinsen |
| AR064286A1 (es) * | 2006-12-13 | 2009-03-25 | Quiceno Gomez Alexandra Lorena | Produccion de dispositivos oftalmicos basados en la polimerizacion por crecimiento escalonado fotoinducida |
| CN103865914B (zh) * | 2012-12-14 | 2016-05-25 | 上海美迪西生物医药股份有限公司 | Pde2催化结构域/pde2特异性抑制剂复合物的晶体及其生长方法 |
| KR102141542B1 (ko) | 2013-12-31 | 2020-09-14 | 엘지디스플레이 주식회사 | 표시장치 |
| FR3039297B1 (fr) * | 2015-07-20 | 2018-05-18 | Roam Data, Inc | Lecteur de carte compact |
| KR102576402B1 (ko) | 2016-05-31 | 2023-09-11 | 엘지디스플레이 주식회사 | 액정표시장치 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1038963B1 (en) * | 1993-05-27 | 2009-08-05 | Board Of Regents Of The University Of Washington | Cyclic GMP-binding, cyclic GMP-specific phosphodiesterase materials and methods |
| RU2174123C2 (ru) * | 1996-10-28 | 2001-09-27 | Новартис Аг | Производные 8-арил-1,7-нафтиридина и фармацевтическая композиция, обладающая противовоспалительной активностью |
| GB9923968D0 (en) * | 1999-10-11 | 1999-12-15 | Pfizer Ltd | Therapeutic agents |
| MXPA02006240A (es) * | 1999-12-24 | 2003-01-28 | Bayer Ag | Nuevas imidazo[1,3,5,) triazinonas y su uso. |
-
2001
- 2001-11-02 GB GBGB0126417.5A patent/GB0126417D0/en not_active Ceased
-
2002
- 2002-10-24 BR BR0213717-8A patent/BR0213717A/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-10-24 KR KR1020047006733A patent/KR20050039728A/ko not_active Ceased
- 2002-10-24 CA CA002478059A patent/CA2478059A1/en not_active Abandoned
- 2002-10-24 CN CNA028266528A patent/CN1585821A/zh active Pending
- 2002-10-24 US US10/415,839 patent/US20070015205A1/en not_active Abandoned
- 2002-10-24 PL PL02370513A patent/PL370513A1/xx unknown
- 2002-10-24 YU YU36104A patent/YU36104A/sh unknown
- 2002-10-24 WO PCT/IB2002/004426 patent/WO2003038080A1/en not_active Ceased
- 2002-10-24 IL IL16392602A patent/IL163926A0/xx unknown
- 2002-10-24 RU RU2004113450/13A patent/RU2301259C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2002-10-24 EP EP02775155A patent/EP1468082A1/en not_active Withdrawn
-
2003
- 2003-05-01 US US10/427,222 patent/US20040082052A1/en not_active Abandoned
-
2004
- 2004-04-28 ZA ZA200403198A patent/ZA200403198B/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BR0213717A (pt) | 2004-08-31 |
| CA2478059A1 (en) | 2003-05-08 |
| GB0126417D0 (en) | 2002-01-02 |
| CN1585821A (zh) | 2005-02-23 |
| US20070015205A1 (en) | 2007-01-18 |
| ZA200403198B (en) | 2005-11-18 |
| RU2301259C2 (ru) | 2007-06-20 |
| PL370513A1 (en) | 2005-05-30 |
| WO2003038080A1 (en) | 2003-05-08 |
| KR20050039728A (ko) | 2005-04-29 |
| IL163926A0 (en) | 2005-12-18 |
| EP1468082A1 (en) | 2004-10-20 |
| US20040082052A1 (en) | 2004-04-29 |
| YU36104A (sh) | 2006-08-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lee et al. | TACE/ADAM17 processing of EGFR ligands indicates a role as a physiological convertase | |
| US6753176B2 (en) | Aggrecan degrading metallo proteases | |
| Tyas et al. | Naturally-occurring and recombinant forms of the aspartic proteinases plasmepsins I and II from the human malaria parasite Plasmodium falciparum | |
| Ichiba et al. | Functional regions of ornithine decarboxylase antizyme | |
| RU2004113450A (ru) | Кристаллическая структура фосфодиэстеразы 5 и ее использование | |
| Shimoyama et al. | Characterization of secretory type IIA phospholipase A2 (sPLA2-IIA) as a glycyrrhizin (GL)-binding protein and the GL-induced inhibition of the CK-II-mediated stimulation of sPLA2-IIA activity in vitro | |
| US5861297A (en) | Detergent-free hepatitis C protease | |
| Nomura et al. | Sea urchin hatching enzyme (envelysin): cDNA cloning and deprivation of protein substrate specificity by autolytic degradation | |
| DE60131423T2 (de) | Ratten-spezifische cathepsin, dipeptidyl peptidase i (dppi): kristallstruktur, hemmstoffe und deren anwendungen | |
| Johnson et al. | Comprehensive screening of a North American Parkinson’s disease cohort for LRRK2 mutation | |
| CN101291953A (zh) | 突变的timp-3 | |
| CA2183253A1 (en) | Rna editing enzyme and methods of use thereof | |
| Miller et al. | Human mast cell proteases and mast cell heterogeneity | |
| JP4739192B2 (ja) | Ｂａｃｅのグリコシル化変異体 | |
| PT1018559E (pt) | Enzimas fosfodiesterases | |
| US20080199447A1 (en) | Catalytic domain of adam33 and methods of use thereof | |
| JPH08509380A (ja) | ヒトＳｙｋ | |
| CA2587061A1 (en) | Deamidated interferon-beta | |
| US7590494B1 (en) | Drug design based on the structure of LTA4 hydrolase | |
| Alibhai et al. | 239 Re-engineeting patatin (Sot 1) protein to eliminate IgE bind | |
| Harris et al. | Aminoacylation of undermethylated mammalian transfer RNA | |
| Selvatici et al. | Adaptative value of a PKC–PKI55 feedback loop of inhibition that prevents the kinase’s deregulation | |
| Döhler et al. | Crystallization of ectonucleotide phosphodiesterase/pyrophosphatase-3 and orientation of the SMB domains in the full-length ectodomain | |
| US5242807A (en) | Recombinant gene encoding human Charcot-Leyden crystal protein | |
| ES2307933T3 (es) | Proteina de 35 kda. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TK4A | Correction to the publication in the bulletin (patent) |
Free format text: AMENDMENT TO CHAPTER -FG4A- IN JOURNAL: 17-2007 FOR TAG: (57) |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20071025 |