Claims (39)
1. Способ, предусматривающий замораживание образца биохимически активной ткани, причем замораживание включает погружение образца ткани в охлаждающую среду, циркулирование охлаждающей среды вокруг образца ткани при по существу постоянной заданной скорости и температуре для замораживания образца ткани так, чтобы образец ткани витрифицировался и при этом образец ткани сохраняет свою анатомическую структуру и остается биохимически активным после размораживания, размораживание образца ткани, и исследование размороженного образца ткани.1. A method comprising freezing a biochemically active tissue sample, wherein freezing involves immersing a tissue sample in a cooling medium, circulating a cooling medium around the tissue sample at a substantially constant predetermined speed and temperature to freeze the tissue sample so that the tissue sample is vitrified and the tissue sample retains its anatomical structure and remains biochemically active after thawing, thawing a tissue sample, and examining a thawed tissue sample .
2. Способ по п.1, дополнительно предусматривающий приготовление срезов образца ткани.2. The method according to claim 1, additionally providing for the preparation of slices of a tissue sample.
3. Способ по п.1, в котором исследование образца размороженной ткани включает гистологическое исследование.3. The method according to claim 1, in which the study of a sample of thawed tissue includes a histological examination.
4. Способ по п.1, в котором исследование размороженного образца ткани включает ультраструктурное исследование.4. The method according to claim 1, in which the study thawed tissue sample includes ultrastructural examination.
5. Способ по п.1, в котором исследование включает использование иммуногистохимического исследования.5. The method according to claim 1, in which the study includes the use of immunohistochemical studies.
6. Способ по п.5, в котором иммуногистохимическое исследование включает окрашивание флуоресцентно мечеными антителами.6. The method according to claim 5, in which the immunohistochemical study includes staining with fluorescently labeled antibodies.
7. Способ по п.1, в котором более чем около 55 процентов образца ткани демонстрируют отсутствие повреждений клеточной анатомической структуры и остаются биохимически активными после размораживания.7. The method according to claim 1, in which more than about 55 percent of the tissue sample demonstrate the absence of damage to the cellular anatomical structure and remain biochemically active after thawing.
8. Способ по п.1, в котором более чем около 45 процентов образца ткани демонстрируют отсутствие повреждения клеточной анатомической структуры и остаются биохимически активными после размораживания.8. The method according to claim 1, in which more than about 45 percent of the tissue sample demonstrate the absence of damage to the cellular anatomical structure and remain biochemically active after thawing.
9. Способ по п.1, в котором более чем около 85 процентов образца ткани сохраняют свою анатомическую структуру и остаются неповрежденными после размораживания.9. The method according to claim 1, wherein more than about 85 percent of the tissue sample retains its anatomical structure and remains intact after thawing.
10. Способ по п.1, в котором охлаждающую среду поддерживают при температуре от около -20 градусов Цельсия до около -30 градусов Цельсия.10. The method according to claim 1, in which the cooling medium is maintained at a temperature of from about -20 degrees Celsius to about -30 degrees Celsius.
11. Способ по п.1, в котором скорость охлаждающей среды вокруг образца ткани составляет около 35 литров в минуту на фут охлаждающей среды через площадь не более чем около 24 дюйма в ширину и 48 дюймов в глубину.11. The method according to claim 1, in which the speed of the cooling medium around the tissue sample is about 35 liters per minute per foot of cooling medium through an area of not more than about 24 inches in width and 48 inches in depth.
12. Способ по п.1, в котором охлаждающую среду циркулируют посредством узла с мотором и крыльчаткой, погруженного в охлаждающую среду.12. The method according to claim 1, in which the cooling medium is circulated through a node with a motor and an impeller immersed in a cooling medium.
13. Способ по п.1, дополнительно предусматривающий циркулирование охлаждающей среды вокруг многозаходного змеевика теплообменника, погруженного в охлаждающую среду, причем змеевик теплообменника способен удалять по меньшей мере такое же количество тепла из охлаждающей среды, какое охлаждающая среда удаляет из образца ткани.13. The method according to claim 1, further comprising circulating a cooling medium around a multi-way coil of the heat exchanger immersed in the cooling medium, the heat exchanger coil being able to remove at least the same amount of heat from the cooling medium as the cooling medium removes from the tissue sample.
14. Способ для использования при приготовлении образца ткани для исследования, предусматривающий погружение образца биологически активной ткани в охлаждающую среду, и непосредственное замораживание образца ткани до температуры, более высокой, чем около -30 градусов Цельсия, путем циркулирования охлаждающей среды вокруг образца ткани, при по существу постоянной заданной скорости и температуре так, что образец ткани витрифицируется, при этом образец ткани поддерживает свою анатомическую структуру и остается биохимически активным после размораживания.14. A method for use in preparing a tissue sample for research, comprising immersing a biologically active tissue sample in a cooling medium and directly freezing the tissue sample to a temperature higher than about -30 degrees Celsius by circulating the cooling medium around the tissue sample, while a constant target speed and temperature so that the tissue sample is vitrified, while the tissue sample maintains its anatomical structure and remains biochemically active after p freezing.
15. Способ по п.14, дополнительно предусматривающий приготовление срезов образца ткани.15. The method according to 14, further comprising preparing sections of a tissue sample.
16. Способ по п.14, дополнительно предусматривающий размораживание образца ткани.16. The method according to 14, further comprising thawing a tissue sample.
17. Способ по п.14, в котором исследование включает гистологическое исследование.17. The method according to 14, in which the study includes histological examination.
18. Способ по п.14, в котором исследование включает ультраструктурное исследование.18. The method according to 14, in which the study includes ultrastructural research.
19. Способ по п.14, в котором исследование включает использование иммуногистохимического исследования.19. The method according to 14, in which the study includes the use of immunohistochemical studies.
20. Способ по п.19, в котором иммуногистохимическое исследование включает окрашивание флуоресцентно мечеными антителами.20. The method according to claim 19, in which the immunohistochemical study includes staining with fluorescently labeled antibodies.
21. Способ по п.14, в котором более чем около 40 процентов образца ткани сохраняет свою анатомическую структуру и остается биохимически активным после размораживания.21. The method according to 14, in which more than about 40 percent of the tissue sample retains its anatomical structure and remains biochemically active after thawing.
22. Способ по п.14, в котором более чем около 80 процентов образца ткани сохраняет свою анатомическую структуру и остается биохимически активным после размораживания.22. The method according to 14, in which more than about 80 percent of the tissue sample retains its anatomical structure and remains biochemically active after thawing.
23. Способ по п.14, в котором более чем около 85 процентов образца ткани сохраняет свою анатомическую структуру и остается неповрежденным после размораживания.23. The method according to 14, in which more than about 85 percent of the tissue sample retains its anatomical structure and remains intact after thawing.
24. Способ по п.14, в котором охлаждающую среду поддерживают при температуре от около -20 градусов Цельсия до около -30 градусов Цельсия.24. The method according to 14, in which the cooling medium is maintained at a temperature of from about -20 degrees Celsius to about -30 degrees Celsius.
25. Способ по п.14, в котором скорость охлаждающей среды вокруг образца ткани составляет около 35 литров в минуту на фут охлаждающей среды через площадь не более чем около 24 дюйма в ширину и 48 дюймов в глубину.25. The method according to 14, in which the speed of the cooling medium around the tissue sample is about 35 liters per minute per foot of cooling medium through an area of not more than about 24 inches in width and 48 inches in depth.
26. Способ по п.14, в котором охлаждающую среду циркулируют посредством узла с мотором и крыльчаткой, погруженного в охлаждающую среду.26. The method according to 14, in which the cooling medium is circulated through a node with a motor and an impeller immersed in a cooling medium.
27. Способ по п.14, дополнительно предусматривающий циркулирование охлаждающей среды вокруг многозаходного змеевика теплообменника, погруженного в охлаждающую среду, причем змеевик теплообменника способен удалять по меньшей мере такое же количество тепла из охлаждающей среды, какое охлаждающая среда удаляет из образца ткани.27. The method according to 14, further comprising circulating a cooling medium around a multi-way coil of the heat exchanger immersed in the cooling medium, the heat exchanger coil being able to remove at least the same amount of heat from the cooling medium as the cooling medium removes from the tissue sample.
28. Система для использования при приготовлении образца ткани для исследования, содержащая резервуар с охлаждающей средой, выполненный с возможностью приема образца биохимически активной ткани для погружения в охлаждающую среду, одно или более устройств для циркуляции охлаждающей среды, выполненных для циркулирования указанной охлаждающей среды, змеевик теплообменника для удаления тепла из указанной охлаждающей среды, замораживающий узел, выполненный для удаления тепла из указанного змеевика теплообменника, причем указанный резервуар для охлаждающей среды, указанные одно или более циркуляционных устройств и указанный замораживающий узел взаимодействуют для непосредственного замораживания образца ткани до температуры более высокой, чем около -30 градусов Цельсия, путем циркулирования охлаждающей среды вокруг образца ткани, с по существу постоянной заданной скоростью и температурой так, что образец ткани витрифицируется, при этом образец ткани сохраняет свою анатомическую структуру и остается биохимически активным после размораживания.28. System for use in the preparation of a tissue sample for research, containing a reservoir with a cooling medium, configured to receive a sample of biochemically active tissue for immersion in a cooling medium, one or more devices for circulating a cooling medium, made for circulating a specified cooling medium, a heat exchanger coil to remove heat from the specified cooling medium, a freezing unit made to remove heat from the specified coil of the heat exchanger, and the specified reservoir ar for a cooling medium, said one or more circulating devices and said freezing unit interact to directly freeze a tissue sample to a temperature higher than about -30 degrees Celsius by circulating a cooling medium around the tissue sample with a substantially constant predetermined speed and temperature so that the tissue sample is vitrified, while the tissue sample retains its anatomical structure and remains biochemically active after thawing.
29. Система по п.28, в которой исследование включает гистологическое исследование.29. The system of claim 28, wherein the study includes histological examination.
30. Система по п.28, в которой исследование включает ультраструктурное исследование.30. The system of claim 28, wherein the study includes ultrastructural study.
31. Система по п.28, в которой исследование включает использование иммуногистохимического исследования.31. The system of claim 28, wherein the study includes the use of an immunohistochemical study.
32. Система по п.31, в которой иммуногистохимическое исследование включает окрашивание флуоресцентно мечеными антителами.32. The system of claim 31, wherein the immunohistochemical study comprises staining with fluorescently labeled antibodies.
33. Система по п.28, в которой более чем около 40 процентов образца ткани сохраняет свою анатомическую структуру и остается биохимически активным после размораживания.33. The system of claim 28, wherein more than about 40 percent of the tissue sample retains its anatomical structure and remains biochemically active after thawing.
34. Система по п.28, в которой более чем около 80 процентов образца ткани сохраняет свою анатомическую структуру и остается биохимически активным после размораживания.34. The system of claim 28, wherein more than about 80 percent of the tissue sample retains its anatomical structure and remains biochemically active after thawing.
35. Система по п.28, в которой более чем около 85 процентов образца ткани сохраняет свою анатомическую структуру и остается неповрежденными.35. The system of claim 28, wherein more than about 85 percent of the tissue sample retains its anatomical structure and remains intact.
36. Система по п.28, в которой охлаждающую среду поддерживают при температуре от около -20 до около -30 градусов Цельсия.36. The system of claim 28, wherein the cooling medium is maintained at a temperature of from about −20 to about −30 degrees Celsius.
37. Система по п.28, в которой скорость охлаждающей среды вокруг образца ткани составляет около 35 литров в минуту на фут охлаждающей среды через площадь не более чем около 24 дюйма в ширину и 48 дюймов в глубину.37. The system of claim 28, wherein the speed of the cooling medium around the tissue sample is about 35 liters per minute per foot of cooling medium through an area of not more than about 24 inches wide and 48 inches deep.
38. Система по п.28, в которой циркуляционное устройство представляет собой узел с мотором и крыльчаткой, погруженный в охлаждающую среду.38. The system of claim 28, wherein the circulation device is a unit with a motor and an impeller immersed in a cooling medium.
39. Система по п.28, в которой охлаждающую среду циркулируют вокруг многозаходного змеевика теплообменника, погруженного в охлаждающую среду, причем змеевик теплообменника способен удалять по меньшей мере такое же количество тепла из охлаждающей среды, какое охлаждающая среда удаляет из образца ткани.39. The system of claim 28, wherein the cooling medium is circulated around a multi-way coil of the heat exchanger immersed in the cooling medium, the heat exchanger coil being able to remove at least the same amount of heat from the cooling medium as the cooling medium removes from the tissue sample.