[go: up one dir, main page]

RU2001115828A - Способ изометричного удлинения праймера и набор для выявления и количественного определения специфичной нуклеиновой кислоты - Google Patents

Способ изометричного удлинения праймера и набор для выявления и количественного определения специфичной нуклеиновой кислоты

Info

Publication number
RU2001115828A
RU2001115828A RU2001115828/13A RU2001115828A RU2001115828A RU 2001115828 A RU2001115828 A RU 2001115828A RU 2001115828/13 A RU2001115828/13 A RU 2001115828/13A RU 2001115828 A RU2001115828 A RU 2001115828A RU 2001115828 A RU2001115828 A RU 2001115828A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
nucleic acid
primer
target nucleic
immobilized
terminating
Prior art date
Application number
RU2001115828/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2265058C2 (ru
Inventor
Ксиао Бинг ВАНГ (US)
Ксиао Бинг ВАНГ
Original Assignee
Ксиао Бинг ВАНГ (US)
Ксиао Бинг ВАНГ
МОРИСАВА Синкацу (JP)
МОРИСАВА Синкацу
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ксиао Бинг ВАНГ (US), Ксиао Бинг ВАНГ, МОРИСАВА Синкацу (JP), МОРИСАВА Синкацу filed Critical Ксиао Бинг ВАНГ (US)
Publication of RU2001115828A publication Critical patent/RU2001115828A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2265058C2 publication Critical patent/RU2265058C2/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/6851Quantitative amplification

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Claims (40)

1. Способ выявления или количественного определения в образце нуклеиновой кислоты-мишени, который включает в себя: (a) приготовление праймера или праймеров, специфично совпадающих с предварительно определенным положением нуклеиновой кислоты-мишени, (b) отжиг праймера или праймеров по пункту (а) с нуклеиновой кислотой-мишенью в условиях высокой жесткости для получения дуплекса праймер-нуклеиновая кислота в предварительно определенном положении нуклеиновой кислоты-мишени, (c) смешивание дуплекса праймер-нуклеиновая кислота по пункту (b) со смесью, содержащей (1) один, или два, или три типа свободных нетерминирующих нуклеотидов и по меньшей мере один тип нетерминирующего нуклеотида, который необязательно мечен регистрируемым маркером, и (2) в присутствии или в отсутствие типа терминирующего нуклеотида, который отличается от одного, или двух, или трех типов нетерминирующих нуклеотидов по пункту (1), (d) выполнение удлинения праймера посредством ферментативной или химической реакции в соответствующем буфере, и (e) выявление или количественное определение количества сигнала метки на нуклеотидах, удлиняющих праймер, или (f) выявление или количественное определение количества удлиненных праймеров с помощью масс-спектрометрии.
2. Способ по п.1, при котором праймер представляет собой праймер нуклеиновой кислоты, олигодезоксирибонуклеотид, олигорибонуклетид или сополимер дезоксирибонуклеиновой кислоты и рибонуклеиновой кислоты.
3. Способ по п.1, при котором интересующей нуклеиновой кислотой является дезоксирибонуклеиновая кислота, рибонуклеиновая кислота или сополимер дезоксирибонуклеиновой кислоты и рибонуклеиновой кислоты.
4. Способ по п.1, при котором нетерминирующим нуклеотидом является дезоксирибонуклеотид или рибонуклеотид.
5. Способ по п.1, при котором терминатором является ди-дезоксирибонуклеотид.
6. Способ по п.1, при котором комбинация нетерминирующих и терминирующих нуклеотидов в смеси представляет собой
(a) dATP, dCTP, dGTP, ddTTP или ddUTP,
(b) dATP, dCTP, dTTP или dUTP, ddGTP,
(c) dATP, dGTP, dTTP или dUTP, ddCTP,
(d) dCTP, dGTP, dTTP или dUTP, ddATP,
(e) dATP, dCTP, dGTP,
(f) dATP, dCTP, dTTP или dUTP,
(g) dATP, dGTP, dTTP или dUTP, или
(h) dCTP, dGTP, dTTP или dUTP.
7. Способ по п.1, при котором по меньшей мере один нетерминирующий нуклеотид метят регистрируемым маркером.
8. Способ по п.1, при котором терминирующий нуклеотид метят с использованием или без использования регистрируемого маркера, который отличается от маркера, которым метят нетерминирующие нуклеотиды.
9. Способ по п.7 или 8, при котором указанный регистрируемый маркер содержит фермент или белковый фрагмент, радиоактивный изотоп, флуоресцентный компонент или химическую группу.
10. Способ по п.1, при котором указанные нетерминирующие и терминирующие нуклеотиды не мечены и стадию выявления или количественного определения выполняют, анализируя количество удлиненных праймеров с использованием масс-спектрометрии.
11. Способ по п.1, при котором указанный фермент является зависимым от матрицы ферментом.
12. Способ по п.11, при котором зависимым от матрицы ферментом является ДНК-полимераза, РНК-полимераза или обратная транскриптаза.
13. Способ по п.12, при котором зависимым от матрицы ферментом является ДНК-полимераза I E.coli, фрагмент Кленова этой полимеразы, ДНК-полимераза Т4, ДНК-полимераза Т7, термофильная ДНК-полимераза, обратная транскриптаза ретровирусов или их комбинация.
14. Способ по п.1, при котором нуклеиновой кислотой-мишенью является нуклеиновая кислота, синтезированная ферментативно in vivo, in vitro или синтезированная не ферментативным путем.
15. Способ по п.1, при котором нуклеиновой кислотой-мишенью является нуклеиновая кислота, синтезированная посредством полимеразной цепной реакции.
16. Способ по п.1, при котором нуклеиновая кислота-мишень содержит неприродные аналоги нуклеотидов.
17. Способ по п.16, при котором неприродные нуклеотидные аналоги включают в себя дезоксиинозин или 7-деаза-2'-дезокси-гуанозин.
18. Способ по п.1, при котором нуклеиновая кислота-мишень включает в себя геномную ДНК организма, ее РНК-транскрипт или кДНК, полученную на ее РНК-транкрипте.
19. Способ по п.18, при котором организмом является растение, микроорганизм, бактерия, вирус.
20. Способ по п.18, при котором организмом является позвоночное или беспозвоночное животное.
21. Способ по п.18, при котором организмом является млекопитающее.
22. Способ по п.21, при котором организмом является организм человека.
23. Способ по п.1, при котором стадия амплификации выполняется на нуклеиновой кислоте-мишени.
24. Способ по п.23, при котором стадия амплификации включает в себя клонирование, транскрипцию, полимеразную цепную реакцию (ПЦР), лигазную цепную реакцию (ЛЦР), амплификацию с вытеснением цепи (SDA) или опосредованную наличием петли изотермическую амплификацию (LAMP).
25. Способ по п.1, при котором праймер содержит один или большее количество фрагментов, позволяющих проводить аффинное разделение праймера и не включившегося реагента и/или интересующей нуклеиновой кислоты.
26. Способ по п.1, при котором праймер содержит один или большее количество фрагментов, позволяющих иммобилизовать праймер на твердом носителе для получения иммобилизованной последовательности праймера.
27. Способ по п.25 или 26, при котором фрагмент включает в себя специальные химические группы, такие как биотин или дигитонин.
28. Способ по п.25 или 26, при котором фрагмент включает в себя последовательность ДНК или РНК, которая позволяет праймеру связываться с твердым носителем посредством спаривания основания с комплементарной последовательностью, присутствующей в твердом носителе.
29. Способ по п.1, при котором праймер непосредственно синтезирован на твердом носителе для получения иммобилизованной праймерной последовательности.
30. Способ по п.29, при котором синтез осуществлен ферментативным, или химическим, или физическим способом.
31. Способ по п.1, при котором праймер иммобилизован на твердом носителе для получения иммобилизованной последовательности нуклеиновой кислоты-мишени.
32. Способ по п.1, при котором праймер обратимо иммобилизован на твердом носителе.
33. Способ по п.32, при котором праймер может быть отщеплен от твердого носителя химическим, ферментативным, или физическим способом.
34. Способ по п.1, при котором нуклеиновой кислотой-мишенью является нуклеиновая кислота, иммобилизованная на твердом носителе для получения иммобилизованной последовательности нуклеиновой кислоты-мишени.
35. Способ по п.1, при котором нуклеиновая кислота-мишень обратимо иммобилизована на твердом носителе.
36. Способ по п.34, при котором нуклеиновая кислота-мишень может быть отщеплена от твердого носителя химическим, ферментативным или физическим способом.
37. Способ по пп.31, 32, 34 или 35, при котором иммобилизация осуществляется посредством фоторазрушаемой связи.
38. Способ по пп.26, 28, 29, 31, 32, 34 или 35, при котором твердый носитель содержит шарики, плоские поверхности, чипы, капилляры, иглы, гребенки или пластинки.
39. Способ по пп.31, 32, 34 или 35, при котором указанная иммобилизация осуществляется посредством гибридизации между комплементарной улавливающей молекулой нуклеиновой кислоты, которая предварительно была иммобилизована на твердом носителе, и частью молекулы нуклеиновой кислоты, которая отличается от последовательности нуклеиновой кислоты-мишени.
40. Способ по пп.31, 32, 34 или 35, при котором указанная иммобилизация осуществляется посредством прямого связывания между твердым носителем и частью молекулы нуклеиновой кислоты, которая отличается от последовательности нуклеиновой кислоты-мишени.
RU2001115828/13A 2000-06-08 2001-06-07 Способ выявления в образце нуклеиновой кислоты-мишени (варианты) RU2265058C2 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US20998700P 2000-06-08 2000-06-08
US60/209,987 2000-06-08
US09/862,417 US6824980B2 (en) 2000-06-08 2001-05-23 Isometric primer extension method and kit for detection and quantification of specific nucleic acid
US09/862,417 2001-05-23

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2001115828A true RU2001115828A (ru) 2004-01-27
RU2265058C2 RU2265058C2 (ru) 2005-11-27

Family

ID=26904703

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2001115828/13A RU2265058C2 (ru) 2000-06-08 2001-06-07 Способ выявления в образце нуклеиновой кислоты-мишени (варианты)

Country Status (10)

Country Link
US (2) US6824980B2 (ru)
EP (1) EP1162278B1 (ru)
JP (1) JP3789317B2 (ru)
KR (1) KR20010111020A (ru)
CN (2) CN1277934C (ru)
CA (1) CA2349810C (ru)
DE (1) DE60138242D1 (ru)
HK (1) HK1040769B (ru)
RU (1) RU2265058C2 (ru)
SG (1) SG153624A1 (ru)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001245698A (ja) * 1999-11-22 2001-09-11 Xiao Bing Wang 核酸検出法
CA2515938A1 (en) * 2003-02-12 2004-08-26 Genizon Svenska Ab Methods and means for nucleic acid sequencing
EP1885890A4 (en) * 2005-05-26 2010-01-20 Univ Boston QUANTIFICATION OF NUCLEIC ACIDS AND PROTEINS VIA OLIGONUCLEOTIDE MASS LABELS
WO2007005649A2 (en) * 2005-06-30 2007-01-11 Applera Corporation Proximity probing of target proteins comprising restriction and/or extension field
US8012685B2 (en) * 2006-08-01 2011-09-06 Applied Biosystems, Llc Detection of analytes and nucleic acids
WO2009123494A1 (ru) * 2008-04-01 2009-10-08 Drygin Yury Fedorovich Способ одновременного обнаружения множества рнк последовательностей в биологическом образце
CN106434873B (zh) * 2015-08-13 2021-08-27 生捷科技控股公司 使核酸分子同步化的方法
US11414687B2 (en) * 2017-10-04 2022-08-16 Centrillion Technology Holdings Corporation Method and system for enzymatic synthesis of oligonucleotides
JP2022512058A (ja) * 2018-12-21 2022-02-02 イルミナ インコーポレイテッド ヌクレアーゼを利用したrna枯渇
CN113557298B (zh) * 2019-03-13 2024-08-27 东洋纺株式会社 核酸的生成和扩增
CA3143685A1 (en) * 2019-06-18 2020-12-24 Mammoth Biosciences, Inc. Assays and methods for detection of nucleic acids
TW202120693A (zh) * 2019-08-21 2021-06-01 美商伊路米納有限公司 偵測核苷酸之聚合酶併入的方法
CN116391047A (zh) * 2020-10-26 2023-07-04 Yyz医药科技有限公司 用于核酸检测和疾病诊断的基于质谱的方法和试剂盒
RU2748540C1 (ru) * 2021-02-08 2021-05-26 Автономная некоммерческая образовательная организация высшего образования "Сколковский институт науки и технологий" Способ детектирования вируса SARS-CoV-2 методом масс-спектрометрии
WO2025134188A1 (ja) * 2023-12-18 2025-06-26 株式会社日立ハイテク 変異遺伝子検出方法

Family Cites Families (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4948882A (en) * 1983-02-22 1990-08-14 Syngene, Inc. Single-stranded labelled oligonucleotides, reactive monomers and methods of synthesis
US4965188A (en) 1986-08-22 1990-10-23 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences using a thermostable enzyme
GB8805692D0 (en) 1988-03-10 1988-04-07 Ici Plc Method of detecting nucleotide sequences
US5179198A (en) * 1988-07-11 1993-01-12 Hidechika Okada Glycoprotein and gene coding therefor
US6013431A (en) 1990-02-16 2000-01-11 Molecular Tool, Inc. Method for determining specific nucleotide variations by primer extension in the presence of mixture of labeled nucleotides and terminators
US5846710A (en) * 1990-11-02 1998-12-08 St. Louis University Method for the detection of genetic diseases and gene sequence variations by single nucleotide primer extension
IE66125B1 (en) 1991-01-31 1995-12-13 Zeneca Ltd Detection method for variant nucleotides
US5888819A (en) 1991-03-05 1999-03-30 Molecular Tool, Inc. Method for determining nucleotide identity through primer extension
WO1993014217A1 (en) * 1992-01-10 1993-07-22 Life Technologies, Inc. Use of predetermined nucleotides having altered base pairing characteristics in the amplification of nucleic acid molecules
US5710028A (en) 1992-07-02 1998-01-20 Eyal; Nurit Method of quick screening and identification of specific DNA sequences by single nucleotide primer extension and kits therefor
US5650277A (en) * 1992-07-02 1997-07-22 Diagenetics Ltd. Method of determining the presence and quantifying the number of di- and trinucleotide repeats
US6007987A (en) * 1993-08-23 1999-12-28 The Trustees Of Boston University Positional sequencing by hybridization
JPH09505397A (ja) 1993-11-17 1997-05-27 アマーシャム・インターナショナル・ピーエルシー プライマー伸長質量分光分析による核酸配列決定法
EP0663447B1 (en) 1993-12-28 2003-07-09 Eiken Chemical Co., Ltd. Method of detecting a specific polynucleotide
WO1996030545A1 (en) 1995-03-24 1996-10-03 Mitokor Mutation detection by differential primer extension of mutant and wildtype target sequences
US5830655A (en) * 1995-05-22 1998-11-03 Sri International Oligonucleotide sizing using cleavable primers
US5700642A (en) * 1995-05-22 1997-12-23 Sri International Oligonucleotide sizing using immobilized cleavable primers
US5965363A (en) * 1996-09-19 1999-10-12 Genetrace Systems Inc. Methods of preparing nucleic acids for mass spectrometric analysis
US5885775A (en) * 1996-10-04 1999-03-23 Perseptive Biosystems, Inc. Methods for determining sequences information in polynucleotides using mass spectrometry
CA2270132A1 (en) * 1996-11-06 1998-05-14 Sequenom, Inc. Dna diagnostics based on mass spectrometry
US5888778A (en) 1997-06-16 1999-03-30 Exact Laboratories, Inc. High-throughput screening method for identification of genetic mutations or disease-causing microorganisms using segmented primers
US5994079A (en) * 1998-02-06 1999-11-30 Digene Corporation Direct detection of RNA mediated by reverse transcriptase lacking RNAse H function
US6723564B2 (en) 1998-05-07 2004-04-20 Sequenom, Inc. IR MALDI mass spectrometry of nucleic acids using liquid matrices
US6221592B1 (en) * 1998-10-20 2001-04-24 Wisconsin Alumi Research Foundation Computer-based methods and systems for sequencing of individual nucleic acid molecules
US6156178A (en) * 1999-07-13 2000-12-05 Molecular Dynamics, Inc. Increased throughput analysis of small compounds using multiple temporally spaced injections
JP2001245698A (ja) * 1999-11-22 2001-09-11 Xiao Bing Wang 核酸検出法
US7582420B2 (en) * 2001-07-12 2009-09-01 Illumina, Inc. Multiplex nucleic acid reactions

Also Published As

Publication number Publication date
CN1333465A (zh) 2002-01-30
EP1162278B1 (en) 2009-04-08
JP3789317B2 (ja) 2006-06-21
US6824980B2 (en) 2004-11-30
EP1162278A2 (en) 2001-12-12
DE60138242D1 (de) 2009-05-20
JP2002027993A (ja) 2002-01-29
HK1040769B (zh) 2005-08-12
CA2349810C (en) 2010-10-26
HK1040769A1 (en) 2002-06-21
SG153624A1 (en) 2009-07-29
CA2349810A1 (en) 2001-12-08
US20040137497A1 (en) 2004-07-15
US20030148525A1 (en) 2003-08-07
EP1162278A3 (en) 2004-04-14
CN1198145C (zh) 2005-04-20
RU2265058C2 (ru) 2005-11-27
CN1537955A (zh) 2004-10-20
KR20010111020A (ko) 2001-12-15
CN1277934C (zh) 2006-10-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6300070B1 (en) Solid phase methods for amplifying multiple nucleic acids
US7378242B2 (en) DNA sequence detection by limited primer extension
FI111554B (fi) Reagenssikoostumus ja -kitti nukleiinihapon tietyssä asemassa olevan nukleotidiemäksen tunnistamiseksi
AU624601B2 (en) Amplification and detection of nucleic acid sequences
KR102843262B1 (ko) 자가-발광을 기초로 하는 단일-채널 시퀀싱 방법
RU2001115828A (ru) Способ изометричного удлинения праймера и набор для выявления и количественного определения специфичной нуклеиновой кислоты
WO1997046703A1 (en) Optimally fluorescent oligonucleotides
KR20200084866A (ko) 올리고뉴클레오타이드의 다양한 라이브러리를 사용한 폴리뉴클레오타이드의 신규 합성 방법
WO2018048911A1 (en) Tri-nucleotide rolling circle amplification
WO2000042223A1 (en) Method for controlling the distribution of dna sequencing termination products
CN105063190A (zh) 微小rna的固相芯片恒温检测方法
RU2000127095A (ru) Способ детекции варианта последовательности нуклеиновой кислоты с помощью анализа терминации со сдвигом
US20250115960A1 (en) Nucleic acid testing method and system
RU2794177C1 (ru) Способ одноканального секвенирования на основе самолюминесценции
CN119432989A (zh) 对多核苷酸进行测序的方法
JP3145169B2 (ja) 核酸検出法及びキット
CN113564235A (zh) 脱氧核糖寡核苷酸测序方法和试剂盒
EP1679381A1 (en) Isometric primers extension method and kit for detection and quantification of specific nucleic acid
WO1999037820A1 (en) An exponential nucleic acid amplification method using a single primer of opposing polarity
HK1035004A (en) Detection of sequence variation of nucleic acid by shifted termination analysis
JPH078300A (ja) Dna解析法

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20120608