RU2071337C1 - Method of phospholipid complex preparing - Google Patents
Method of phospholipid complex preparing Download PDFInfo
- Publication number
- RU2071337C1 RU2071337C1 RU93040879A RU93040879A RU2071337C1 RU 2071337 C1 RU2071337 C1 RU 2071337C1 RU 93040879 A RU93040879 A RU 93040879A RU 93040879 A RU93040879 A RU 93040879A RU 2071337 C1 RU2071337 C1 RU 2071337C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- chloroform
- ratio
- phospholipids
- impurities
- ethanol
- Prior art date
Links
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 title claims abstract description 73
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 69
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 56
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 53
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims abstract description 49
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 49
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 41
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 32
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 22
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 16
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 16
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- UXTMROKLAAOEQO-UHFFFAOYSA-N chloroform;ethanol Chemical compound CCO.ClC(Cl)Cl UXTMROKLAAOEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims abstract description 11
- 241000252203 Clupea harengus Species 0.000 claims abstract description 10
- 235000019514 herring Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 239000002440 industrial waste Substances 0.000 claims abstract description 10
- QFWWSZLGTLNVMS-UHFFFAOYSA-N acetic acid;ethoxyethane;hexane Chemical compound CC(O)=O.CCOCC.CCCCCC QFWWSZLGTLNVMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 8
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 239000002026 chloroform extract Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 22
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 18
- 241000237852 Mollusca Species 0.000 claims description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 6
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims description 5
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 2
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 17
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 abstract description 17
- 238000010828 elution Methods 0.000 abstract description 15
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 abstract description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 238000003801 milling Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 8
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ZPUCINDJVBIVPJ-LJISPDSOSA-N cocaine Chemical compound O([C@H]1C[C@@H]2CC[C@@H](N2C)[C@H]1C(=O)OC)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZPUCINDJVBIVPJ-LJISPDSOSA-N 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- GHPYJLCQYMAXGG-WCCKRBBISA-N (2R)-2-amino-3-(2-boronoethylsulfanyl)propanoic acid hydrochloride Chemical compound Cl.N[C@@H](CSCCB(O)O)C(O)=O GHPYJLCQYMAXGG-WCCKRBBISA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238366 Cephalopoda Species 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- OAIVIYSBZFEOIU-UHFFFAOYSA-N chloroform;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.ClC(Cl)Cl OAIVIYSBZFEOIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
Abstract
Description
Изобретение относится к пищевой, медицинской, фармацевтической и парфюмерно-косметической промышленности, а именно к способам получения комплекса фосфолипидов. The invention relates to food, medical, pharmaceutical and perfumery and cosmetic industries, and in particular to methods for producing a complex of phospholipids.
Известен способ получения комплекса фосфолипидов из сырья животного происхождения, включая экстракцию общий липидов смесью хлороформа и метанола, отделение нелипидных примесей промывкой экстракта, перерастворение общих липидов и осаждение фосфолипидов (авт. св. N 825084, кл. А 61 К 37/22, А 61 К 35/34, С 07 F 9/10, 1979). A known method of producing a complex of phospholipids from raw materials of animal origin, including extraction of total lipids with a mixture of chloroform and methanol, separation of non-lipid impurities by washing the extract, re-dissolution of total lipids and precipitation of phospholipids (ed. St. N 825084, class A 61 K 37/22, A 61 K 35/34, C 07 F 9/10, 1979).
Следующие существенные признаки данного способа совпадают с существенными признаками заявляемого изобретения, а именно: способ получения комплекса фосфолипидов из сырья животного происхождения предусматривает измельчение сырья, экстракцию общих липидов, отделение нелипидных примесей промывкой экстракта и осаждение фосфолипидов. The following essential features of this method coincide with the essential features of the claimed invention, namely: a method for producing a complex of phospholipids from animal feedstock involves grinding the raw material, extraction of total lipids, separation of non-lipid impurities by washing the extract and precipitation of phospholipids.
Указанный способ не обеспечивает высокий выход фосфолипидов и высокое содержание в их составе фосфатидилхолина, которое не превышает 30-50% т.к. в нем отсутствует двукратная очистка фосфолипидов от примесей. The specified method does not provide a high yield of phospholipids and a high content of phosphatidylcholine in their composition, which does not exceed 30-50% since there is no double purification of phospholipids from impurities.
Наиболее близким к изобретению по совокупности признаков аналогом (прототипом) является способ получения комплекса фосфолипидов их сырья животного происхождения, включающий измельчение сырья, экстракцию общих липидов смесь хлороформа с метанолом отделение нелипидных примесей промывкой экстракта, перерастворение общих липидов и осаждение фосфолипидов, при этом экстракцию общих липидов проводят из промышленных отходов головоногих моллюсков, отделение нелипидных примесей проводят путем промывки экстракта 0,09-0,1%-ным водным раствором хлористого натрия, перерастворяют общие липиды в органическом растворителе, а фосфолипиды осаждают ацетоном при соотношении растворителя и ацетона 1:5-1:10 в течение 1-2 час, кроме того, в качестве растворителя на стадии перерастворения общих липидов используют петролейный эфир, диэтиловый эфир, хлороформ или этиловый спирт (авт. св. N 1080825, кл. A 61 K 37/22, 1982). The closest to the invention, in terms of features, an analogue (prototype) is a method for producing a complex of phospholipids of their animal raw materials, including grinding raw materials, extraction of total lipids, a mixture of chloroform and methanol separation of non-lipid impurities by washing the extract, re-dissolution of total lipids and precipitation of phospholipids, while extraction of total lipids carried out from industrial waste of cephalopods, separation of non-lipid impurities is carried out by washing the extract with a 0.09-0.1% aqueous solution sodium chloride, redissolve total lipids in an organic solvent, and phospholipids precipitate with acetone at a solvent to acetone ratio of 1: 5-1: 10 for 1-2 hours, in addition, petroleum ether and diethyl ether are used as a solvent at the stage of re-dissolution of total lipids chloroform or ethyl alcohol (ed. St. N 1080825, class A 61 K 37/22, 1982).
Следующие существенные признаки данного способа совпадают с существенными признаками заявляемого изобретения, а именно: Способ получения комплекса фосфолипидов из сырья животного происхождения предусматривает измельчение сырья, экстракцию общих липидов, отделение нелипидных примесей промывкой экстракта и осаждение фосфолипидов. The following essential features of this method coincide with the essential features of the claimed invention, namely: A method for producing a complex of phospholipids from animal feedstock involves grinding the raw material, extraction of total lipids, separation of non-lipid impurities by washing the extract and precipitation of phospholipids.
Указанный способ не обеспечивает высокий выход фосфолипидов и высокое содержание в их составе фосфатидилхолина при использовании в качестве сырья икры сельди или промышленных отходов двустворчатых моллюсков. This method does not provide a high yield of phospholipids and a high content of phosphatidylcholine in their composition when using herring or industrial waste of bivalve mollusks as raw materials.
Задача, на решение которой направлено заявляемое изобретение, заключается в обеспечении более высокого выхода фосфолипидов и более высокого содержания в их составе фосфатидилхолина при использовании в качестве сырья икры сельди при промышленных отходов двустворчатых моллюсков. The problem to which the invention is directed, is to provide a higher yield of phospholipids and a higher content of phosphatidylcholine in their composition when herring caviar is used as a raw material in industrial waste of bivalve mollusks.
В заявляемом способе получения комплексам фосфолипидов технический результат заключается в обеспечении более высокого выхода фосфолипидов и более высокого содержания их в составе фосфатидилхолина при использовании в качестве сырья икры сельди или промышленных отходов двустворчатых моллюсков. In the claimed method for producing phospholipid complexes, the technical result is to provide a higher yield of phospholipids and their higher content in the composition of phosphatidylcholine when using herring or industrial waste of bivalve mollusks as raw materials.
В предлагаемом способе технический результат достигается тем, что в способе получения комплекса фосфолипидов из сырья животного происхождения, предусматривающем измельчение сырья, экстракцию общих липидов органическими растворителями, отделение нелипидных примесей промывкой экстракта и осаждение фосфолипидов, при этом экстракцию общих липидов проводят из икры сельди или промышленных отходов двустворчатых моллюсков смесью хлороформа с этанолом, отделение нелипидных примесей проводят промывкой экстракта 0,5-0,7%-ным водным раствором хлористого кальция, затем осаждают примеси и путем растворения общих липидов гексане при соотношении 1:5-1:6, после чего раствор перемешивают, отстаивают, осадок примесей общих липидов удаляют центрифугированием, гексановый раствор упаривают, сухой остаток фосфолипидов очищают от примесей путем перерастворения в хлороформе и осаждении фосфолипидов ацетоном при соотношении хлороформного экстракта и ацетона 1:6-1:8, затем полученный раствор отстаивают фильтруют осадок промывают ацетоном, сушат а сухой остаток растворяют в хлороформе и повторно очищают фосфолипиды от примесей хроматографией на колонке с окисью алюминия смесью гексан-эфир уксусной кислоты при соотношении 35:15:1, после чего выделяют фосфатидилэтаноламин последовательно хлороформ этанолом при соотношении 1:1 и хлороформ-этанол-концентрированным водным аммиаком при соотношении 1:1,5:0,15, а затем фосфатидилхолин хлороформ-этанол-концентрированным водным аммиаком при соотношении 1:1,5:0,3. In the proposed method, the technical result is achieved by the fact that in the method for producing a complex of phospholipids from animal feed, which involves grinding the raw materials, extraction of total lipids with organic solvents, separation of non-lipid impurities by washing the extract and precipitation of phospholipids, while the extraction of total lipids is carried out from herring caviar or industrial waste bivalve mollusks with a mixture of chloroform and ethanol; separation of non-lipid impurities is carried out by washing the extract with a 0.5-0.7% aqueous solution calcium loride, then the impurities are precipitated and by dissolving the total lipids in hexane at a ratio of 1: 5-1: 6, after which the solution is stirred, settling, the precipitate of the impurities of the general lipids is removed by centrifugation, the hexane solution is evaporated, the dry phospholipid residue is purified from the impurities by redissolution in chloroform and precipitation of phospholipids with acetone at a ratio of chloroform extract and acetone of 1: 6-1: 8, then the resulting solution is left to stand, the precipitate is filtered, washed with acetone, dried and the dry residue is dissolved in chloroform and repeated The phospholipids are thoroughly purified from impurities by column chromatography on alumina with hexane-ether acetic acid at a ratio of 35: 15: 1, after which phosphatidylethanolamine is sequentially chloroform-ethanol is isolated at a ratio of 1: 1 and chloroform-ethanol-concentrated aqueous ammonia at a ratio of 1: 1 , 5: 0.15, and then phosphatidylcholine chloroform-ethanol-concentrated aqueous ammonia in a ratio of 1: 1.5: 0.3.
Сопоставительный анализ с наиболее близким аналогом (прототипом) позволяет сделать вывод, что заявляемый способ получения комплекс фосфолипидов, отличается тем, что экстракцию общих липидов проводят из икры сельди или промышленных отходов двустворчатых моллюсков смесью хлороформа с этанолом, отделение нелипидных примесей проводят промывкой экстракта 0,5-0,7%-ным водным раствором хлористого кальция, затем осаждают примеси путем растворения общих липидов в гексане при соотношении 1:5-1:6, после чего раствор перемешивают, отстаивают, осадок примесей общих липидов удаляют центрифугированием, гексановый раствор упаривают, сухой остаток фосфолипидов очищают от примесей путем перерастворения в хлороформе и осаждения фосфолипидов ацетоном при соотношении хлороформного экстракта и ацетона 1:6-1:8, затем полученный раствор отстаивают, фильтруют, осадок промывают ацетоном, сушат, а сухой остаток растворяют в хлороформе и повторно очищают фосфолипиды от примесей хроматографией на колонке с окисью алюминия смесью гексан-эфир-уксусной кислоты при соотношении 35:15:1, после чего выделяют фосфатидилэтаноламин последовательно хлороформ-этанолом при соотношении 1:1 и хлороформ-этанол-концентрированным водным аммиаком при соотношении 1:1,5:0,15, а затем фосфатидилхолин хлороформ-этанол-концентрированным водным аммиаком при соотношении 1:1,5: 0,3. Comparative analysis with the closest analogue (prototype) allows us to conclude that the claimed method for producing a complex of phospholipids differs in that the extraction of total lipids is carried out from herring eggs or industrial waste of bivalve mollusks with a mixture of chloroform and ethanol, the separation of non-lipid impurities is carried out by washing the extract with 0.5 -0.7% aqueous solution of calcium chloride, then impurities are precipitated by dissolving the total lipids in hexane at a ratio of 1: 5-1: 6, after which the solution is stirred, defended, the precipitate of the total lipid species is removed by centrifugation, the hexane solution is evaporated, the dry phospholipid residue is purified from impurities by redissolution in chloroform and precipitation of phospholipids with acetone at a ratio of chloroform extract and acetone of 1: 6-1: 8, then the resulting solution is settled, filtered, the precipitate is washed with acetone, dried and the dry residue is dissolved in chloroform and phospholipids are again purified from impurities by chromatography on a column of aluminum oxide with hexane-ether-acetic acid mixture at a ratio of 35: 15: 1, after which they are isolated phosphatidylethanolamine successively with chloroform-ethanol in a 1: 1 ratio and chloroform-ethanol-concentrated aqueous ammonia in a ratio of 1: 1.5: 0.15, and then phosphatidylcholine chloroform-ethanol-concentrated aqueous ammonia in a ratio of 1: 1.5: 0. 3.
Все существенные признаки, отличительные от наиболее близкого аналога (прототипа), являются достаточными во всех случаях, на которые испрашивается объем правовой охраны. All essential features distinguishing from the closest analogue (prototype) are sufficient in all cases for which the scope of legal protection is sought.
Сырье измельчают для обеспечения более полной экстракции общих липидов органическими растворителями. Raw materials are ground to provide a more complete extraction of total lipids with organic solvents.
Для более полного отделения нелипидных примесей проводят промывку экстракта 0,5-0,7%-ным водным раствором хлористого кальция затем осаждают примеси путем растворения общих липидов в гексане при соотношении 1:5-1:6, после чего раствор перемешивают, отстаивают, осадок примесей общих липидов удаляют центрифугированием, гексановый раствор упаривают. For a more complete separation of non-lipid impurities, the extract is washed with a 0.5-0.7% aqueous solution of calcium chloride, then impurities are precipitated by dissolving the total lipids in hexane at a ratio of 1: 5-1: 6, after which the solution is stirred, settled, and the precipitate impurities of total lipids are removed by centrifugation, the hexane solution is evaporated.
Для обеспечения более высокого выхода фосфолипидов осуществляют их двукратную очистку от примесей сначала путем перерастворения в хлороформе и осаждения фосфолипидов ацетоном при соотношении хлороформного экстракта и ацетона 1: 6-1: 8, затем полученный раствор отстаивают, фильтруют, осадок промывают ацетоном сушат, а сухой остаток растворяют в хлороформе и повторно очищают фосфолипиды от примесей хроматографией на колонке с окисью алюминия смесью гексан-эфир уксусной кислоты при соотношении 35:15:1. To ensure a higher yield of phospholipids, they are twice purified from impurities, first by redissolution in chloroform and precipitation of phospholipids with acetone at a ratio of chloroform extract and acetone of 1: 6-1: 8, then the resulting solution is settled, filtered, the precipitate is washed with acetone, dried and the dry residue dissolved in chloroform and re-purified phospholipids from impurities by chromatography on a column of aluminum oxide with hexane-ether acetic acid in a ratio of 35: 15: 1.
Для более полного выделения фосфатидилэтаноламина и фосфатидилхолина сначала выделяют фосфатидилэтаноламин хроматографией на колонке с окисью алюминия последовательно хлороформ-этанолом при соотношении 1:1 и хлороформ-этанол-концентрированным водным аммиаком при соотношении 1:1,5:0,15, затем фосфатидилхолин хлороформ-этанол-концентрированным водным аммиаком при соотношении 1:1,5:0,3. For a more complete separation of phosphatidylethanolamine and phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine is first isolated by chromatography on an alumina column with successively chloroform-ethanol at a ratio of 1: 1 and chloroform-ethanol-concentrated aqueous ammonia at a ratio of 1: 1.5: 0.15, then phosphatidylcholine chloroform-ethanol -concentrated aqueous ammonia in a ratio of 1: 1.5: 0.3.
Заявляемый способ осуществляют следующим образом. The inventive method is as follows.
В качестве сырья используют икру сельди или промышленные отходы двустворчатых моллюсков. 1 кг измельченного сырья заливают 5 объемами хлороформ-этанола при соотношении 2:1 интенсивно перемешивают в растворе с мешалкой в течение 1,0-1,5 ч при температуре 30-35oC, после чего фильтруют. Фильтрат помещают в холодильник в колбе с притертой пробкой и выдерживают при температуре 0-1oC. К полученному осадку приливают 5 объемов хлороформ-этанола при соотношении 2:1, интенсивно перемешивают в реакторе с мешалкой в течение 1-1,5 ч при температуре 30-35oC, после чего фильтруют. Проводят еще четыре экстракции с указанным способом. Достигают из холодильника колбу с первым экстрактом и выливают его вместе с пятью полученными экстрактами в делительную колонку для отделения нелипидных примесей. Объединенные экстракты промывают 0,2-0,3 объемами 0,5-0,7%-ным водным раствором хлористого кальция путем перемешивания смеси в делительной колонке в течение 30-35 мин. Затем смесь отстаивают в течение 12-14 ч при температуре 0-1oC для разделения фаз и получения двухфазной системы. Верхнюю фазу образовавшейся двухфазной системы сливают. Нижнюю фазу фильтруют, упаривают досуха. Полученный сухой остаток липидов немедленно растворяют в гексане при соотношении сухой остаток общих липидов гексан 1:5-1:6. Раствор интенсивно перемешивают в реакторе с мешалкой в течение 10-15 мин при температуре 0-4oC. Затем смесь выдерживают в течение 2-3 ч для осаждения примесей белков, нейтральных липидов и незначительной части фосфолипидов (например, сфингомиэлина). Осадок удаляют центрифугированием. Гексановый раствор фосфолипидов упаривают досуха и полученный сухой остаток фосфолипидов немедленно перерастворяют в хлороформе при соотношении сухой остаток фосфолипидов-хлороформ 1:5-1:6 и осаждают фосфолипиды ацетоном при соотношении хлороформный экстракт-ацетон 1:6-1:8. Полученный раствор отстаивают в течение 1-2 ч при температуре от -10 до -7oC. Выпавший осадок отделяют фильтрацией и промывают его три раза ацетоном при соотношении осадок-ацетон 1:3-1:4. Осадок высушивают от ацетона при температуре 15-20oC в течение 15-20 мин и полученный сухой остаток фосфолипидов растворяют в хлороформе при соотношении сухой остаток-хлороформ 1:5-1:6. Для элюирования полученного хлороформного раствора фосфолипидов используют хроматографическую колонку, в которую загружают окись алюминия при соотношении сухой остаток фосфолипидов-окись алюминия 1:20. Диаметр колонки 4,5 см, высота адсорбционного столба 35 см, объем 556 мл.As raw materials, herring caviar or industrial waste of bivalve mollusks is used. 1 kg of crushed raw material is poured with 5 volumes of chloroform-ethanol at a ratio of 2: 1 is intensively mixed in a solution with a stirrer for 1.0-1.5 hours at a temperature of 30-35 o C, and then filtered. The filtrate is placed in a refrigerator in a flask with a ground stopper and kept at a temperature of 0-1 o C. 5 volumes of chloroform-ethanol are added to the resulting precipitate at a ratio of 2: 1, intensively stirred in a reactor with a stirrer for 1-1.5 hours at a temperature 30-35 o C, after which it is filtered. Spend four more extraction with the specified method. A flask with the first extract is reached from the refrigerator and poured together with the five extracts obtained into a separation column to separate non-lipid impurities. The combined extracts are washed with 0.2-0.3 volumes of 0.5-0.7% aqueous calcium chloride solution by stirring the mixture in a dividing column for 30-35 minutes. Then the mixture is left to stand for 12-14 hours at a temperature of 0-1 o C to separate phases and obtain a two-phase system. The upper phase of the resulting two-phase system is drained. The lower phase is filtered, evaporated to dryness. The resulting dry lipid residue is immediately dissolved in hexane at a ratio of dry residue of total hexane lipids of 1: 5-1: 6. The solution is intensively stirred in a reactor with a stirrer for 10-15 minutes at a temperature of 0-4 o C. Then the mixture is kept for 2-3 hours to precipitate impurities of proteins, neutral lipids and a small part of phospholipids (for example, sphingomyelin). The precipitate is removed by centrifugation. The hexane solution of phospholipids is evaporated to dryness and the resulting dry phospholipid residue is immediately redissolved in chloroform at a dry phospholipid-chloroform ratio of 1: 5-1: 6 and phospholipids are precipitated with acetone at a ratio of chloroform extract-acetone of 1: 6-1: 8. The resulting solution was left to stand for 1-2 hours at a temperature of from -10 to -7 o C. The precipitate formed was filtered off and washed three times with acetone at a precipitate-acetone ratio of 1: 3-1: 4. The precipitate is dried from acetone at a temperature of 15-20 o C for 15-20 minutes and the resulting dry phospholipid residue is dissolved in chloroform at a dry residue-chloroform ratio of 1: 5-1: 6. To elute the obtained chloroform solution of phospholipids, a chromatographic column is used, in which aluminum oxide is loaded at a dry residue ratio of phospholipids-alumina of 1:20. The diameter of the column is 4.5 cm, the height of the adsorption column is 35 cm, the volume is 556 ml.
Хлороформный раствор фосфолипидов вносят в колонку и начинают процесс элюирования. Для элюирования используют: 10 колоночных объемов (5560 мл) смеси гексан-эфир-уксусной кислоты при соотношении 35:15:1. Вымывают все остатки примеси нейтральных липидов. A chloroform solution of phospholipids is introduced into the column and the elution process begins. For elution using: 10 column volumes (5560 ml) of a mixture of hexane-ether-acetic acid at a ratio of 35: 15: 1. All residual impurities of neutral lipids are washed.
20-25 колоночных объемов (11120-13900 мл) смеси хлороформ-этанола при соотношении 1:1. Вымывают фосфатидилэтаноламин. 20-25 column volumes (11120-13900 ml) of a mixture of chloroform-ethanol at a ratio of 1: 1. Wash out phosphatidylethanolamine.
На выходе хроматографической колонки смесь собирают в колбы с притертыми пробками. Заполненные колбы помещают в холодильник при температуре 0-1oC. После окончания элюирования хроматографически определяют состав фосфолипидов в каждой колбе. Объединяют смеси с одинаковыми компонентами фосфолипидов и упаривают досуха, для получения фосфатидилэтаноламина. 10-20 колоночных объемов (5560-11120 мл) смеси хлороформ-этанол-концентрированного водного аммиака при соотношении 1:1,5:0,14.At the exit of the chromatographic column, the mixture is collected in flasks with ground stoppers. Filled flasks are placed in a refrigerator at a temperature of 0-1 o C. After the elution is complete, the composition of phospholipids in each flask is chromatographically determined. Combine the mixtures with the same components of the phospholipids and evaporate to dryness to obtain phosphatidylethanolamine. 10-20 column volumes (5560-11120 ml) of a mixture of chloroform-ethanol-concentrated aqueous ammonia at a ratio of 1: 1.5: 0.14.
Вымывают остатки фосфатидилэтаноламина. 10-20 колоночных объемов (5560-11120 мл) смеси хлороформ-этанол-концентрированного водного аммиака (при соотношении 1:1,5:0,28). The residues of phosphatidylethanolamine are washed. 10-20 column volumes (5560-11120 ml) of a mixture of chloroform-ethanol-concentrated aqueous ammonia (at a ratio of 1: 1.5: 0.28).
Вымывают фосфатидилхолин. На выходе хроматографической колонки смесь собирают в колбы с притертыми пробками. Заполненные колбы помещают в холодильник при температуре 0-1oC. После окончания элюирования хроматографически определяют состав фосфолипидов в каждой колбе. Объединяют смеси с одинаковыми компонентами фосфолипидов и упаривают досуха для получения фосфатидилхолина.Wash out phosphatidylcholine. At the exit of the chromatographic column, the mixture is collected in flasks with ground stoppers. Filled flasks are placed in a refrigerator at a temperature of 0-1 o C. After the elution is complete, the composition of phospholipids in each flask is chromatographically determined. Combine the mixtures with the same components of phospholipids and evaporate to dryness to obtain phosphatidylcholine.
Пример 1. В качестве сырья используют внутренности двустворчатых моллюсков, включающий гонады и мозг. 1 кг измельченного сырья заливают 5000 мл хлороформ-этанола при соотношении 2:1 интенсивного перемешивают в реакторе с мешалкой в течение 1 ч при температуре 30oC, после чего фильтруют. Фильтрат помещают в холодильник в колбе с притертой пробкой и выдерживают при температуре 0oC. К полученному осадку приливают 5000 мл хлороформ-этанола при соотношении 2:1, интенсивно перемешивают в реакторе с мешалкой в течение 1 ч при температуре 30oC, после чего фильтруют. Проводят еще четыре экстракции указанным способом. Достают из холодильника колбу с первым экстрактом и вымывают его вместе с пятью полученными экстрактами в делительную колонку для отделения нелипидных примесей. Объединенные экстракты промывают 0,2 объемами 0,5% -ного раствора хлористого кальция путем перемешивания смеси в делительной колонке в течение 30 мин. Затем смесь отстаивают в течение 12 ч при температуре 0oC для разделения фаз и получения двухфазной системы. Верхнюю фазу образовавшейся двухфазной системы сливают. Нижнюю фазу фильтруют, фильтрат упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 35oC в токе азота и остаточном давлении 15 мм рт.ст.Example 1. As raw materials use the interior of bivalve mollusks, including gonads and the brain. 1 kg of crushed raw material is poured into 5000 ml of chloroform-ethanol at a ratio of 2: 1 intense, stirred in a reactor with a stirrer for 1 h at a temperature of 30 o C, and then filtered. The filtrate was placed in a refrigerator in a flask with a ground stopper and kept at a temperature of 0 o C. 5000 ml of chloroform-ethanol were added to the resulting precipitate at a ratio of 2: 1, stirred vigorously in a stirred reactor for 1 h at a temperature of 30 o C, after which filtered. Spend four more extraction in this way. A flask with the first extract is taken from the refrigerator and washed with the five extracts obtained in a separation column to separate non-lipid impurities. The combined extracts are washed with 0.2 volumes of a 0.5% solution of calcium chloride by stirring the mixture in a dividing column for 30 minutes. Then the mixture is left to stand for 12 hours at a temperature of 0 o C to separate phases and obtain a two-phase system. The upper phase of the resulting two-phase system is drained. The lower phase is filtered, the filtrate is evaporated to dryness on a rotary evaporator at a temperature of 35 o C in a stream of nitrogen and a residual pressure of 15 mm Hg
Полученный сухой остаток общих липидов 30 г немедленно растворяют в 150 мл гексана (при соотношении сухой остаток общих липидов-гексан 1:5). Раствор интенсивно перемешивают в реакторе с мешалкой в течение 10 мин при температуре 0oC. Затем смесь выдерживают в течение 2 ч для осаждения примесей белков, нейтральных липидов и незначительной части фосфолипидов (например, сфингомиэлина). Осадок удаляют центрифугированием. Гексановый раствор фосфолипидов упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 35oC в токе азота и остаточном давлении 15 мм рт.ст. Полученный сухой остаток фосфолипидов 5 г немедленно перерастворяют в 50 мл хлороформа (при соотношении сухой остаток фосфолипидов-хлороформ 1:10) и осаждают фосфолипиды 300 мл ацетона (при соотношении хлороформный экстракт-ацетон 1:6).The resulting dry residue of total lipids 30 g immediately dissolved in 150 ml of hexane (with a ratio of dry residue of total lipids-hexane 1: 5). The solution was vigorously stirred in a stirred reactor for 10 minutes at a temperature of 0 ° C. Then, the mixture was kept for 2 hours to precipitate protein impurities, neutral lipids and a small fraction of phospholipids (for example, sphingomyelin). The precipitate is removed by centrifugation. The hexane solution of phospholipids is evaporated to dryness on a rotary evaporator at a temperature of 35 o C in a stream of nitrogen and a residual pressure of 15 mm Hg The resulting dry phospholipid residue of 5 g is immediately redissolved in 50 ml of chloroform (with a dry phospholipid-chloroform ratio of 1:10) and phospholipids precipitated with 300 ml of acetone (with a 1: 6 ratio of chloroform extract-acetone).
Полученный раствор отстаивают в течение 1 часа при температуре -10oC. Выпавший осадок отделяют фильтрацией и промывают его три раза 150 мл ацетона (при соотношении осадок-ацетон 1:3). Осадок высушивают от ацетонам при температуре 15oC в течение 20 мин и полученный сухой остаток фосфолипидов 3,7 г растворяют в 20 мл хлороформа (при соотношении сухой остаток-хлороформ 1:5).The resulting solution was left to stand for 1 hour at a temperature of -10 ° C. The precipitate formed was filtered off and washed three times with 150 ml of acetone (with a precipitate-acetone ratio of 1: 3). The precipitate is dried from acetones at a temperature of 15 o C for 20 min and the resulting dry phospholipid residue of 3.7 g is dissolved in 20 ml of chloroform (with a ratio of dry residue-chloroform 1: 5).
Для элюирования полученного хлороформного раствора фосфолипидов используют хроматографическую колонку, в которую загружают 80 г окиси алюминия (при соотношении сухой остаток фосфолипидов-окись алюминия 1:20). Диаметр колонки 4,5 см, высота адсорбционного столба 35 см, объем 556 мл. To elute the obtained chloroform solution of phospholipids, a chromatographic column is used, in which 80 g of aluminum oxide is loaded (with a ratio of dry phospholipids-alumina of 1:20). The diameter of the column is 4.5 cm, the height of the adsorption column is 35 cm, the volume is 556 ml.
Хлороформный раствор фосфолипидов вносят в колонку и начинают процесс элюирования. A chloroform solution of phospholipids is introduced into the column and the elution process begins.
Для элюирования используют: 5560 мл (10 колоночных объемов) смеси гексан-эфир-уксусной кислоты (при соотношении 35:15:1). Вымывают все остатки примесей нейтральных липидов. 11120 мл (20 колоночных объемов) смеси хлороформ-этанола (при соотношении 1:1). Вымывают фосфатидилэтаноламин. For elution using: 5560 ml (10 column volumes) of a mixture of hexane-ether-acetic acid (at a ratio of 35: 15: 1). All residual impurities of neutral lipids are washed. 11120 ml (20 column volumes) of a mixture of chloroform-ethanol (at a ratio of 1: 1). Wash out phosphatidylethanolamine.
На выходе хроматографической колонки смесь собирают в колбы с притертыми пробками, емкостью 25 мл. Заполненные колбы помещают в холодильник при температуре 0oС. После окончания элюирования хроматографически определяют состав фосфолипидов в каждой колбе. Объединяют смеси с одинаковыми компонентами фосфолипидов и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 35oC в токе азота и остаточном давлении 15 мл рт.ст. Выход около 1,1 г фосфатидилэтаноламина.At the exit of the chromatographic column, the mixture is collected in flasks with ground stoppers, with a capacity of 25 ml. Filled flasks are placed in a refrigerator at a temperature of 0 o C. After the elution is complete, the composition of phospholipids in each flask is chromatographically determined. Combine the mixtures with the same components of phospholipids and evaporate to dryness on a rotary evaporator at a temperature of 35 o C in a stream of nitrogen and a residual pressure of 15 ml of mercury Yield 1.1 g of phosphatidylethanolamine.
5560 мл (10 колоночных объемов) смеси хлороформ-этанол-концентрированного водного аммиака (при соотношении 1:1,5:0,14). Вымывают остатки фосфатидилэтаноламина. Выход около 0,1 г фосфатидилэтаноламина. 5560 ml (10 column volumes) of a mixture of chloroform-ethanol-concentrated aqueous ammonia (at a ratio of 1: 1.5: 0.14). The residues of phosphatidylethanolamine are washed. Yield about 0.1 g of phosphatidylethanolamine.
5560 мл (10 колоночных объемов) смеси хлороформ-этанол-концентрированного водного аммиака (-) (при соотношении 1:1,5:0,28). Вымывают фосфатидилхолин. 5560 ml (10 column volumes) of a mixture of chloroform-ethanol-concentrated aqueous ammonia (-) (at a ratio of 1: 1.5: 0.28). Wash out phosphatidylcholine.
На выходе хроматографической колонки смесь собирают в колбы с притертыми пробками, емкостью 25 мл. Заполненные колбы помещают в холодильник при температуре 0oC. После окончания элюирования хроматографически определяют состав фосфолипидов в каждой колбе. Объединяют смеси с одинаковыми компонентами фосфолипидов и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 35oC в токе азота и остаточном давлении 15 мл рт.ст. Выход около 2,35 г фосфатидилхолина (60%).At the exit of the chromatographic column, the mixture is collected in flasks with ground stoppers, with a capacity of 25 ml. Filled flasks are placed in a refrigerator at 0 ° C. After elution is complete, the composition of phospholipids in each flask is chromatographically determined. Combine the mixtures with the same components of phospholipids and evaporate to dryness on a rotary evaporator at a temperature of 35 o C in a stream of nitrogen and a residual pressure of 15 ml of mercury Yield about 2.35 g of phosphatidylcholine (60%).
Пример 2. В качестве сырья используют икру сельди 1 кг измельченного сырья заливают 5000 мл хлороформ-этанола при соотношении 2:1, интенсивно перемешивают в реакторе с мешалкой в течение 1,5 ч при температуре 35oC, после чего фильтруют. Фильтрат помещают в холодильник в колбе с притертой пробкой и выдерживают при температуре 1oC. К полученному осадку приливают 5000 мл хлороформ-этанола при соотношении 2:1, интенсивно перемешивают в реакторе с мешалкой в течение 1,5 ч при температуре 35oC, после чего фильтруют. Проводят еще четыре экстракции указанным способом. Достают из холодильника колбу с первым экстрактом и выливают его вместе с пятью полученными экстрактами в делительную колонку для отделения нелипидных примесей.Example 2. As a raw material, herring caviar is used. 1 kg of crushed raw material is poured into 5000 ml of chloroform-ethanol at a ratio of 2: 1, intensively stirred in a reactor with a stirrer for 1.5 hours at a temperature of 35 o C, and then filtered. The filtrate was placed in a refrigerator in a flask with a ground stopper and kept at a temperature of 1 o C. 5000 ml of chloroform-ethanol were added to the resulting precipitate at a ratio of 2: 1, stirred vigorously in a stirred reactor for 1.5 h at a temperature of 35 o C, then filtered. Spend four more extraction in this way. A flask with the first extract is taken from the refrigerator and poured together with the five extracts obtained into a dividing column to separate non-lipid impurities.
Объединенные экстракты промывают 0,3 объемами 0,7%-ным водным раствором хлористого кальция путем перемешивания смеси в делительной колонке в течение 35 мин. Затем смесь отстаивают в течение 14 ч при температуре 1oC для разделения фаз и получения двухфазной системы. Верхнюю фазу образовавшейся двухфазной системы сливают. Нижнюю фазу фильтруют, фильтрат упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 35oC в токе азота и остаточном давлении 15 мм рт.ст.The combined extracts are washed with 0.3 volumes of a 0.7% aqueous solution of calcium chloride by stirring the mixture in a dividing column for 35 minutes. The mixture is then left to stand for 14 hours at a temperature of 1 ° C. to separate phases and obtain a two-phase system. The upper phase of the resulting two-phase system is drained. The lower phase is filtered, the filtrate is evaporated to dryness on a rotary evaporator at a temperature of 35 o C in a stream of nitrogen and a residual pressure of 15 mm Hg
Полученный сухой остаток общих липидов 92 г немедленно растворяют в 550 мл гексана (при соотношении сухой остаток общих липидов-гексан 1:6). Раствор интенсивно перемешивают в реакторе с мешалкой в течение 15 мин при температуре 4oC. Затем смесь выдерживают в течение 3 ч для осаждения примесей белков, нейтральных липидов и незначительной части фосфолипидов (например, сфингомиэлина). Осадок удаляют центрифугированием.The resulting dry residue of total lipids 92 g immediately dissolved in 550 ml of hexane (with a ratio of dry residue of total lipids-hexane 1: 6). The solution was vigorously stirred in a stirred reactor for 15 minutes at a temperature of 4 ° C. The mixture was then allowed to stand for 3 hours to precipitate protein impurities, neutral lipids and a small fraction of phospholipids (e.g., sphingomyelin). The precipitate is removed by centrifugation.
Гексановый раствор фосфолипидов упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 35oC в токе азота и остаточном давлении 15 мл.рт.ст. Полученный сухой остаток фосфолипидов 57 г немедленно перерастворяют в 285 мл хлороформа (при соотношении сухой остаток фосфолипидов-хлороформ 1:5) и осаждают фосфолипиды 2300 мл ацетона (при соотношении хлороформный экстракт-ацетон 1: 8). Полученный раствор отстаивают в течение 2 ч при температуре -7oC. Выпавший осадок отделяют фильтрацией и промывают его три раза 240 мл ацетона (при соотношении осадок-ацетон 1:4). Осадок высушивают от ацетона при температуре 20oC в течение 15 мин и полученный сухой остаток фосфолипидов 50 г растворяют в 300 мл хлороформа (при соотношении сухой остаток хлороформ 1:6).The hexane solution of phospholipids is evaporated to dryness on a rotary evaporator at a temperature of 35 o C in a stream of nitrogen and a residual pressure of 15 ml Hg The resulting dry phospholipid residue 57 g was immediately redissolved in 285 ml of chloroform (with a dry phospholipid-chloroform ratio of 1: 5) and phospholipids 2300 ml of acetone precipitated (with a chloroform-acetone ratio of 1: 8). The resulting solution was left to stand for 2 hours at a temperature of -7 ° C. The precipitate formed was filtered off and washed three times with 240 ml of acetone (with a precipitate-acetone ratio of 1: 4). The precipitate is dried from acetone at a temperature of 20 o C for 15 min and the resulting dry residue of phospholipids 50 g is dissolved in 300 ml of chloroform (with a ratio of dry residue chloroform 1: 6).
Для элюирования полученного хлороформного раствора фосфолипидов используют хроматографическую колонку, в которую загружают 1000 г окиси алюминия (при соотношении сухой остаток фосфолипидов-окись алюминия 1:20). Диаметр колонки 4,5 см, высота адсорбционного столба 35 см, объем 556 мл. Хлороформный раствор фосфолипидов вносят в колонку и начинают процесс элюирования. For the elution of the obtained chloroform solution of phospholipids, a chromatographic column is used, in which 1000 g of aluminum oxide is loaded (with a ratio of the dry residue of phospholipids-alumina 1:20). The diameter of the column is 4.5 cm, the height of the adsorption column is 35 cm, the volume is 556 ml. A chloroform solution of phospholipids is introduced into the column and the elution process begins.
Для элюирования используют:
5560 мл (10 колоночных объемов) смеси гексан-эфир-уксусной кислоты при соотношении 35:15:1. Вымывают все остатки примесей нейтральных липидов.For elution use:
5560 ml (10 column volumes) of a mixture of hexane-ether-acetic acid at a ratio of 35: 15: 1. All residual impurities of neutral lipids are washed.
13900 мл (25 колоночных объемов) смеси хлороформ-этанола при соотношении 1:1. Выливают фосфатидилэтаноламин. 13900 ml (25 column volumes) of a mixture of chloroform-ethanol in a ratio of 1: 1. Phosphatidylethanolamine is poured.
На выходе хроматографической колонки смесь собирают в колбы с притертыми пробками, емкостью 25 мл. Заполненные колбы помещают в холодильник при температуре 1oC. После окончания элюирования хроматографически определяют состав фосфолипидов в каждой колбе. Объединяют смеси с одинаковыми компонентами фосфолипидов и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 35oC в токе азота и остаточном давлении 15 мл рт.ст. Выход около 10 г фосфатидилэтаноламина
11120 мл (20 колоночных объемов) смеси хлороформ-этанол-концентрированного водного аммиака (при соотношении 1:1,5:0,14). Вымывают остатки фосфатидилэтаноламина. Выход около 1 г фосфатидилэтаноламина.At the exit of the chromatographic column, the mixture is collected in flasks with ground stoppers, with a capacity of 25 ml. The filled flasks are placed in a refrigerator at a temperature of 1 o C. After the elution is complete, the composition of phospholipids in each flask is chromatographically determined. Combine the mixtures with the same components of phospholipids and evaporate to dryness on a rotary evaporator at a temperature of 35 o C in a stream of nitrogen and a residual pressure of 15 ml of mercury Yield about 10 g of phosphatidylethanolamine
11120 ml (20 column volumes) of a mixture of chloroform-ethanol-concentrated aqueous ammonia (at a ratio of 1: 1.5: 0.14). The residues of phosphatidylethanolamine are washed. Yield about 1 g of phosphatidylethanolamine.
11120 мл (20 колоночных объемов) смеси хлороформ-этанол-концентрированного водного аммиака (при соотношении 1:1,5:0,28). Вымывают фосфатидилхолин. 11120 ml (20 column volumes) of a mixture of chloroform-ethanol-concentrated aqueous ammonia (at a ratio of 1: 1.5: 0.28). Wash out phosphatidylcholine.
На выходе хроматографической колонки смесь собирают в колбы с притертыми пробками емкостью 25 мл. Заполненные колбы помещают в холодильник при температуре 1oC. После окончания элюирования хроматографически определяют состав фосфолипидов в каждой колбе. Объединяют смеси с одинаковыми компонентами фосфолипидов и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 35oC в токе азота и остаточном давлении 15 мл рт.ст. Выход около 28 г фосфатидилхолина (56%).At the exit of the chromatographic column, the mixture is collected in flasks with ground stoppers with a capacity of 25 ml. The filled flasks are placed in a refrigerator at a temperature of 1 o C. After the elution is complete, the composition of phospholipids in each flask is chromatographically determined. Combine the mixtures with the same components of phospholipids and evaporate to dryness on a rotary evaporator at a temperature of 35 o C in a stream of nitrogen and a residual pressure of 15 ml of mercury Yield about 28 g of phosphatidylcholine (56%).
Использование предлагаемого способа позволяет получать из икры сельди или промышленных отходов двустворчатых моллюсков комплекс фосфолипидов с содержанием фосфатидилэтаноламина, равным 22-32% и фосфатидилхолина 55-60% Using the proposed method allows to obtain a complex of phospholipids with phosphatidylethanolamine equal to 22-32% and phosphatidylcholine 55-60% from herring caviar or industrial waste of bivalve mollusks
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU93040879A RU2071337C1 (en) | 1993-08-12 | 1993-08-12 | Method of phospholipid complex preparing |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU93040879A RU2071337C1 (en) | 1993-08-12 | 1993-08-12 | Method of phospholipid complex preparing |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2071337C1 true RU2071337C1 (en) | 1997-01-10 |
| RU93040879A RU93040879A (en) | 1997-02-10 |
Family
ID=20146468
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU93040879A RU2071337C1 (en) | 1993-08-12 | 1993-08-12 | Method of phospholipid complex preparing |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2071337C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2192265C2 (en) * | 2000-04-12 | 2002-11-10 | Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт | Method for obtaining the complex of phospholipids |
| WO2006057629A1 (en) * | 2004-11-23 | 2006-06-01 | A.V. Palladin Biochemistry Institute Of The National Academy Of Sciences Of Ukraine | Agent for prophylaxis and treatment of a human reproductive system disorders filomek and method for the production thereof |
| RU2335769C1 (en) * | 2006-12-25 | 2008-10-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный университет" | Method of determining phosphatidylcholine content in phospholipide complexes |
-
1993
- 1993-08-12 RU RU93040879A patent/RU2071337C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Авторское свидетельство СССР N 1080825, кл. A 61 K 37/22, 1984. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2192265C2 (en) * | 2000-04-12 | 2002-11-10 | Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт | Method for obtaining the complex of phospholipids |
| WO2006057629A1 (en) * | 2004-11-23 | 2006-06-01 | A.V. Palladin Biochemistry Institute Of The National Academy Of Sciences Of Ukraine | Agent for prophylaxis and treatment of a human reproductive system disorders filomek and method for the production thereof |
| EA011616B1 (en) * | 2004-11-23 | 2009-04-28 | Институт Биохимии Им. А.В. Палладина Национальной Академии Наук Украины | Medical agent for prophylaxis and treatment of a human reproductive system disorders and method for the production thereof |
| RU2335769C1 (en) * | 2006-12-25 | 2008-10-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежский государственный университет" | Method of determining phosphatidylcholine content in phospholipide complexes |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2909508B2 (en) | Krill phospholipid fractionation method | |
| JP2004507582A (en) | Effective preparation of anthocyanin-rich compositions | |
| FI68160B (en) | FOERFARANDE FOER AVSKILJNING AV OLJA OCH / ELLER FOSFATIDYLETANOLAMIN FRAON ALKOHOLLOESLIGA FOSFATIDYLKOLINPRODUKTER INNEHAOLLANDE DESSA | |
| JPS5942655B2 (en) | Method for producing oil-containing high-purity phosphatidylcholine | |
| EP0073616A2 (en) | Marine organism extracts, their extraction and use | |
| JPH064653B2 (en) | Method for isolating phosphatidylcholine | |
| US5453523A (en) | Process for obtaining highly purified phosphatidylcholine | |
| US5677472A (en) | Method for extracting sphingomyelin | |
| KR101393359B1 (en) | Grape seeds extracts obtainable by fractioning on a resin | |
| US6007823A (en) | Simmondsin concentrate from jojoba | |
| JP2002521340A (en) | Method for obtaining cartilage extract using solution containing or not containing organic solvent and extract separated therefrom | |
| FI93123B (en) | Method for separating glycolipids from a lipid mixture and use of the fractions thus obtained | |
| RU2071337C1 (en) | Method of phospholipid complex preparing | |
| FI68159C (en) | FOERFARANDE FOER AVSKILJNING AV ACYLERADE FOSFOLIPIDER FRAON PHOSPHATIDYLKOLINPRODUKTER INNEHAOLLANDE DESSA | |
| US3869482A (en) | Method of producing highly purified phosphatides | |
| CA1296322C (en) | Active principle isolated from shark tissue | |
| KR100431376B1 (en) | Extracts from Ginkgobiloba leaves | |
| US3436413A (en) | Process for the isolation of phosphatidyl serine | |
| KR20080031273A (en) | Willow extract, uses thereof, and preparations containing the same | |
| Hnilica | The fractionation of arginine-rich histones from calf thymus | |
| PL194252B1 (en) | Cyclosporin purification process | |
| RU2240329C2 (en) | Method for preparing biologically active acid sulfated polysaccharide fucoidan from marine brown algae | |
| IL39924A (en) | Hormone isolated from the parathyroid gland,its preparation and compositions containing it | |
| GB2084569A (en) | Extraction of Silymarin | |
| RU93040879A (en) | METHOD FOR PRODUCING PHOSPHOLIPID COMPLEX |