RS61790B1 - Proces pripreme farmaceutskih sastava za lečenje bolesti na koje utiče cftr - Google Patents

Description

Opis

TEHNIČKA OBLAST PRONALASKA

[0001] Pronalazak se odnosi na proces pripreme farmaceutskih sastava koji sadrže 3-(6-(1-(2,2-difluor-obenzo [d] [1,3] dioksol-5-il) ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il) benzoevu kiselinu (Jedinjenje 1) Oblika I i čvrstu disperziju koja sadrži suštinski amorfni N-(5-hidroksi-2,4-ditert-butil-fenil) -4-okso-1H-kinolin-3-karboksamid (Jedinjenje 2), metode lečenja, metode primene i njihove komplete.

POZADINA PRONALASKA

[0002] Cistična fibroza (CF) je recesivna genetska bolest koja pogađa približno 30.000 dece i odraslih u Sjedinjenim Državama i približno 30.000 dece i odraslih u Evropi. Uprkos napretku u lečenju CF, leka nepostoji.

[0003] Kod pacijenata sa CF, mutacije u CFTR endogeno izražene u respiratornom epitelu dovode do smanjenja apikalne sekrecije anjona što dovodi do neravnoteže u transportu jona i tečnosti. Rezultujuć e smanjenje transporta anjona doprinosi poveć anom nakupljanju sluzi u plu ć ima i prate ć im mikrobnim infekcijama koje na kraju uzrokuju smrt kod pacijenata sa CF. Pored respiratornih bolesti, pacijenti sa CF obično pate od gastrointestinalnih problema i pankreasne insuficijencije, što ako se ne leči, rezultira smrć u. Pored toga, ve ć ina muškaraca sa cističnom fibrozom je neplodna i plodnost je smanjena kod žena sa cističnom fibrozom. Za razliku od teških efekata dve kopije gena povezane sa CF, osobe sa jednom kopijom gena povezanom sa CF pokazuju poveć anu otpornost na koleru i dehidraciju koja je posledica dijareje -što možda objašnjava relativno visoku učestalost gena CF u populaciji.

[0004] Analiza sekvence CFTR gena CF hromozoma otkrila je niz mutacija koje uzrokuju bolesti (Cutting, GR et al. (1990) Nature 346: 366-369; Dean, M. et al. (1990) Cell 61: 863: 870 i Kerem, BS et al. (1989) Science 245: 1073-1080; Kerem, BS et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 8447-8451). Do danas je identifikovano više od 1000 mutacija uzrokovanih bolestima u genu CF (http://vvv.genet.sickkids.on.ca/cftr/app). Najrasprostranjenija mutacija je brisanje fenilalanina na položaju 508 CFTR sekvence aminokiselina, i obično se naziva ΔF508-CFTR. Ova mutacija se javlja u približno 70% slučajeva cistične fibroze i povezana je sa teškom bolešć u.

[0005] Brisanje ostatka 508 u ΔF508-CFTR sprečava pravilno nastajanje proteina u nastajanju. To rezultira nemoguć noš ć u mutantnog proteina da izađe iz ER i transportuje se do plazmatske membrane. Kao rezultat, broj kanala prisutnih u membrani je daleko manji nego što se primeć uje u ć elijama koje eksprimiraju CFTR divljeg tipa. Pored oslabljenog transporta, mutacija dovodi do ošteć enja kanala. Zajedno, smanjeni broj kanala u membrani i ošte ć eni prolaz dovode do smanjenog transporta anjona kroz epitele što dovodi do ošteć enja transporta jona i tečnosti. (Kuinton, P. M. (1990), FASEB J. 4: 2709-2727). Studije su, međutim, pokazale da je smanjeni broj ΔF508-CFTR u membrani funkcionalan, iako manji od CFTR divljeg tipa. (Dalemans et al. (1991), Nature Lond.354: 526-528; Denning et al., Gore; Pasik i Foskett (1995), J. Cell. Biochem. 270: 12347-50). Pored ΔF508-CFTR, druge mutacije koje uzrokuju bolest u CFTR, a koje rezultiraju neispravnim prometom, sintezom i/ili prolaskom kanala, mogu se regulisati nagore ili nadole kako bi izmenile sekreciju aniona i modifikovale napredovanje i/ili težinu bolesti.

[0006] Jedinjenje 1 u obliku soli je otkriveno u Međunarodnoj PCT publikaciji WO2007056341 i patentu Sjedinjenih Država br. 7,741,321 kao induktor aktivnosti CFTR i stoga kao koristan tretman za bolesti na koje utiče CFTR, kao što je cistična fibroza. Jedinjenje 1 Oblik I, koji je u osnovi kristalni i bez soli, otkriven je u Međunarodnoj PCT publikaciji WO2009073757 i patentu Sjedinjenih Država br. 8,507,534. Jedinjenje 2 je otkriveno u Međunarodnoj PCT publikaciji WO20066002421 i patentu Sjedinjenih Država br. 7,495,103 kao induktor aktivnosti CFTR i stoga kao koristan tretman za bolesti na koje utiče CFTR, poput cistične fibroze. Čvrsta disperzija koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2 otkrivena je u Međunarodnoj PCT publikaciji WO2010019239 i patentnoj prijavi Sjedinjenih Država br. US20100074949.

[0007] Pokazalo se da jedinjenja koja su CFTR potencijatori, kao što je Jedinjenje 2, i jedinjenja koja su CFTR korektori, kao što je Jedinjenje 1, imaju koristi u lečenju bolesti na koje utiče CFTR, kao što je cistična fibroza.

[0008] Shodno tome, postoji potreba za novim tretmanima bolesti na koje utiče CFTR koji uključuju jedinjenja CFTR korektora i potencijatora.

[0009] Naročito je potrebna kombinovana terapija za lečenje bolesti na koje utiče CFTR, kao što je cistična fibroza, koje uključuju CFTR potencijatorska i korektorska jedinjenja.

[0010] Preciznije, postoji potreba za kombinovanim terapijama za lečenje bolesti na koje utiče CFTR, kao što je cistična fibroza, koje uključuju jedinjenja za pojačavanje CFTR-a, kao što je suštinski amorfno Jedinjenje 2, u kombinaciji sa CFTR korektorskim jedinjenjima, kao što je Jedinjenje 1, Oblik I.

[0011] Jedinjenje 1 kao deo kombinacije sa Jedinjenjem 2 je od Uprave za hranu i lekove (FDA) dobilo oznaku probojne terapije za lečenje cistične fibroze, jedno od samo dva takva odobrenja u vreme podnošenja ove prijave (drugo što je za Jedinjenje 2). Ovo pokazuje značajnu nezadovoljenu potrebu za efikasnim lečenjem uzroka cistične fibroze u odnosu na simptomatske tretmane. Pored toga, uobičajeni izazov za lekove koje je odobrila FDA je povremeni nedostatak lekova za pacijente kojima je to potrebno. Shodno tome, postoji značajna nezadovoljena potreba za trenutno otkrivenim formulacijama Jedinjenja 1 i Jedinjenja 2 i postupcima za njihovu kontinuiranu i kontrolisanu pripremu.

[0012] Pored toga, poštovanje pacijenta sa rasporedom lečenja i količinama doziranja u velikoj meri zavisi od lakoć e primene leka. Farmaceutski sastav koji sadrži fiksne dozne količine CFTR korektora i CFTR potencijatora, pri čemu su čvrsti oblici navedenog korektora i potencijatora stabilni, značajan je proboj u lečenju bolesti na koje utiče CFTR, kao što je cistična fibroza.

REZIME

[0013] Pronalazak obuhvata proces pripreme farmaceutskih sastava koji sadrže 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo [d] [1,3] dioksol-5-il) ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il ) benzojevu kiselinu, Jedinjenje 1, Oblik I, koje ima donju strukturu:

Jedinjenje 1; i

čvrsta disperzija suštinski amorfnog N-(5-hidroksi-2,4-ditert-butil-fenil)-4-okso-1H-kinolin-3-karboksamid, Jedinjenja 2, koje ima donju strukturu:

Jedinjenje 2

metode lečenja, metode primene i njihovi kompleti.

[0014] U jednom aspektu, ovaj pronalazak obuhvata proces pripreme farmaceutskog sastava koji sadrži:

a. Jedinjenje 1 Oblik I;

b. čvrstu dispreziju koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2;

c. punilo;

d. dezintegrant;

e. surfaktant; i

f. vezivo;

naziva se PC-I.

[0015] U jednom izvođenju, proces pripreme farmaceutskih sastava predmetnog pronalaska obuhvata 30 do 55 težinskih procenata Jedinjenja 1 Oblika I i 10 do 45 težinskih procenata čvrste disperzije koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2.

[0016] U jednom izvođenju, punilo se bira između celuloze, modifikovane celuloze, natrijum karboksimetil celuloze, etil celuloze hidroksimetil celuloze, hidroksipropilceluloze, celuloznog acetata, mikrokristalne celuloze, dvobaznog kalcijum fosfata, saharoze, laktoze, kukuruznog skroba, krompirovog skroba ili bilo koje njihove kombinacije. U još jednom izvođenju, punilo je mikrokristalna celuloza i prisutno je u količini u rasponu od 10 do 20 težinskih procenata.

[0017] U jednom izvođenju, sredstvo za dezintegraciju je izabrano između agar-agara, algina, kalcijum karbonata, karboksmetilceluloze, celuloze, hidroksipropilceluloze, nisko supstituisane hidroksipropilceluloze, glina, natrijum kroskarmeloze, krospovidona, gume, magnezijum aluminijum silikata, metilceluloze, polacrilin kalijuma, natrijum alginata, natrijum skrob glikolata, kukuruznog skroba, krompirovog skroba, tapioka skroba ili bilo koje njihove kombinacije. U još jednom izvođenju, sredstvo za dezintegraciju je natrijum kroskarmeloza i prisutno je u količini u rasponu od 1 do 3 težinskih procenata.

[0018] U jednom izvođenju, surfaktant je izabran od natrijum lauril sulfata, natrijum stearil fumerata, polioksietilen 20 sorbitan mono-oleata ili bilo koje njihove kombinacije. U još jednom izvođenju, surfaktant je natrijum lauril sulfat i prisutan je u količini koja se kreć e od 0,5 do 2 težinskih procenata.

[0019] U jednom izvođenju, vezivo je izabrano između polivinilpirolidona, dvobaznog kalcijum fosfata, saharoze, kukuruznog skroba, modifikovane celuloze ili bilo koje njihove kombinacije. U još jednom izvođenju, vezivo je polivinilpirolidon i prisutno je u količini koja se kreć e od 0 do 5 težinskih procenata.

[0020] U jednom izvođenju, ovaj pronalazak obuhvata proces pripreme farmaceutskog sastava koji ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-II.

[0021] U drugom aspektu, ovaj pronalazak obuhvata proces pripreme farmaceutskog sastava koji se sastoji od:

a. Jedinjenja 1 Oblika I;

b. čvrste disprezije koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2;

c. punila;

d. dezintegranta;

e. surfaktanta;

f. veziva; i

g. lubrikanta;

naziva se PC-III.

[0022] U jednom izvođenju, proces pripreme farmaceutskih sastava ovog pronalaska sadrži oko 100 do 250 mg Jedinjenja 1 Oblika I i oko 100 do 150 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. U drugom izvođenju, farmaceutski sastavi ovog pronalaska sadrže oko 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I i oko 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. U sledeć em izvođenju, farmaceutski sastavi ovog pronalaska sadrže oko 150 mg Jedinjenja 1 Oblika I i oko 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2.

[0023] U jednom izvođenju, proces pripreme farmaceutskih sastava predmetnog pronalaska sadrži 25 do 50 težinskih procenata Jedinjenja 1 Oblika I i 15 do 35 težinskih procenata čvrste disperzije koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2.

[0024] U jednom izvođenju, punilo se bira između celuloze, modifikovane celuloze, natrijum karboksimetil celuloze, etil celuloze hidroksimetil celuloze, hidroksipropilceluloze, celuloznog acetata, mikrokristalne celuloze, dvobaznog kalcijum fosfata, saharoze, laktoze, kukuruznog skroba, krompirovog skroba ili bilo koje njihove kombinacije. U još jednom izvođenju, punilo je mikrokristalna celuloza i prisutno je u količini u rasponu od 20 do 30 težinskih procenata.

[0025] U jednom izvođenju, sredstvo za dezintegraciju je izabrano između agar-agara, algina, kalcijum karbonata, karboksmetilceluloze, celuloze, hidroksipropilceluloze, nisko supstituisane hidroksipropilceluloze, glina, natrijum kroskarmeloze, krospovidona, gume, magnezijum aluminijum silikata, metilceluloze, polacrilin kalijuma, natrijum alginata, natrijum skrob glikolata, kukuruznog skroba, krompirovog skroba, tapioka skroba ili bilo koje njihove kombinacije. U još jednom izvođenju, sredstvo za dezintegraciju je natrijum kroskarmeloza i prisutno je u količini u rasponu od 3 do 10 težinskih procenata.

[0026] U jednom izvođenju, surfaktant je izabran od natrijum lauril sulfata, natrijum stearil fumerata, polioksietilen 20 sorbitan mono-oleata ili bilo koje njihove kombinacije. U još jednom izvođenju, surfaktant je natrijum lauril sulfat i prisutan je u količini koja se kreć e od 0,5 do 2 težinskih procenata.

[0027] U jednom izvođenju, vezivo je izabrano između polivinilpirolidona, dvobaznog kalcijum fosfata, saharoze, kukuruznog skroba, modifikovane celuloze ili bilo koje njihove kombinacije. U još jednom izvođenju, vezivo je polivinilpirolidon i prisutno je u količini koja se kreć e od 0 do 5 težinskih procenata.

[0028] U jednom izvođenju, lubrikant je izabrano između magnezijum stearata, kalcijum stearata, cinkovog stearata, natrijum stearata, stearinske kiseline, aluminijumskog stearata, leucina, gliceril behenata, hidrogenizovanog biljnog ulja ili bilo koje njihove kombinacije. U još jednom izvođenju, lubrikant je magnezijum stearat i prisutno je u količini u rasponu od 0,5 do 2 težinskih procenata.

[0029] U jednom izvođenju, ovaj pronalazak obuhvata proces pripreme farmaceutskog sastava koji ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-IV.

[0030] U jednom izvođenju, proces pripreme farmaceutskih sastava predmetnog pronalaska dalje sadrži boju i opciono vosak. U još jednom izvođenju, bojilo je prisutno u količini u rasponu od 2 do 4 težinskih procenta. U još jednom izvođenju, vosak je karnauba vosak prisutan u količini koja se kreć e od 0 do 0,020 težinskih procenta.

[0031] U jednom izvođenju, proces pripreme farmaceutskih sastava ovog pronalaska su čvrsti oralni farmaceutski sastavi. U još jednom izvođenju, čvrsti oralni farmaceutski sastavi su granulirani farmaceutski preparati ili tablete.

[0032] U jednom izvođenju, proces pripreme zrnastih farmaceutskih sastava predmetnog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-V.

[0033] U jednom izvođenju, proces pripreme zrnastih farmaceutskih sastava predmetnog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-VI.

[0034] U jednom izvođenju, proces pripreme zrnastih farmaceutskih sastava predmetnog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-VII.

[0035] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-VIII.

[0036] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-IX.

[0037] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

referred to as PC-X.

[0038] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-XI.

e nom zvoenu, proces prpreme ta eta ovog pronaasa ma se e u ormuac u:

naziva se PC-XII.

[0040] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-XIII.

[0041] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-XIV.

[0042] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-XV.

[0043] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-XVI.

[0044] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-XVII.

[0045] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-XVIII

[0046] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-XIX.

[0047] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-XX.

[0048] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima slede u formulaciju:

naziva se PC-XXI.

[0049] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-XXII.

[0050] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-XXIII.

[0051] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

agnez um stearat

Totalne Tablete 100 487

naziva se PC-XXIV.

[0052] U jednom izvođenju, proces pripreme tableta ovog pronalaska ima sledeć u formulaciju:

naziva se PC-XXV.

[0053] U jednom aspektu, ovaj pronalazak sadrži postupak lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji se sastoji od davanja pacijentu efikasne količine farmaceutskog sastava, granuliranog farmaceutskog sastava ili tablete ovog pronalaska.

[0054] U izvođenju, ovaj pronalazak sadrži postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji se sastoji od davanja pacijentu efikasne količine farmaceutskog sastava, granuliranog farmaceutskog sastava ili bilo koje tablete od formulacija PC-I do PC-XXV.

[0055] U jednom izvođenju, pacijent ima ΔF508 CFTR mutaciju. U još jednom izvođenju, pacijent je homozigotan u ΔF508. U još jednom izvođenju, pacijent je heterozigot u ΔF508. U još jednom izvođenju, pacijentu se daju dve tablete dnevno.

[0056] U jednom aspektu, ovaj pronalazak sadrži postupak pripreme granuliranog farmaceutskog sastava koji sadrži mokro granuliranje sledeć ih komponenti:

a. Jedinjenje 1 Oblik I;

b. čvrstu dispreziju koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2;

c. punilo;

d. dezintegrant;

e. surfaktant; i

f. vezivo;

[0057] U jednom aspektu, ovaj pronalazak karakteriše postupak pripreme tablete koji uključuje kompresovanje:

i) mnoštvo zrnastih farmaceutskih sastava koji sadrže sledeć e komponente:

a. Jedinjenje 1 Oblik I;

b. čvrstu dispreziju koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2;

c. punilo;

d. dezintegrant;

e. surfaktant; i

f. vezivo;

ii) dezintegrant;

iii) punilo; i

iv) lubrikant.

[0058] U jednom aspektu, ovaj pronalazak sadrži komplet koji sadrži farmaceutske sastave, granulirane farmaceutske sastave ili tablete predmetnog pronalaska i njihov zasebni terapeutski agens ili farmaceutski sastav.

[0059] U jednom izvođenju, farmaceutski sastavi, granulirane farmaceutski sastavi ili tablete ovog pronalaska i njihov zasebni terapeutski agens ili farmaceutski sastav se nalaze u odvojenim kontejnerima. U još jednom izvođenju, odvojeni kontejneri su boce. U još jednom izvođenju, odvojeni kontejneri su bočice. U još jednom izvođenju, odvojeni kontejneri su blister pakovanja.

[0060] U drugom aspektu, pronalazak obezbeđuje kontinuirani ili polukontinuirani postupak za izradu ovde opisanih farmaceutskih sastava postupkom dvostrukog zavrtnja vlažne granulacije koji obuhvata korake skrininga i vaganja Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 i pomoć nih sastojaka; mešanje Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 i pomo ć nih supstanci u blenderu i dodavanje smeše u kontinualni granulator uz dodavanje tečnosti za granulaciju koja sadrži surfaktant i vezivo prikladnom brzinom tokom odgovarajuć e količine i usitnjavanje smeše u granule; sušenje granula; mešanje granula sa ekstragranularnim ekscipijentima tokom odgovarajuć eg vremena; kompresovanje mešavine u tablete; oblaganje tableta; i, opcionalno, štampanje monograma na jednoj ili obe površine tableta.

KRATAK OPIS CRTEŽA

[0061]

Slika 1 je dijagram difrakcije rendgena izračunat iz monokristalne strukture Jedinjenja 1 Oblika I.

Slika 2 je stvarni uzorak difrakcije rentgenskog praha Jedinjenja 1 Oblika I.

Slika 3 je grafikon koji prikazuje profile rastvaranja Jedinjenja 1 gradijenta za tabletu napravljenu postupkom granulacije sa visokim krunjenjem (HSG) i postupkom dvostrukog zavrtnja vlažne granulacije (TSVG) (LOD označava gubitak pri sušenju, meru za određivanje količine vode u prahu/granulama).

Slika 4 je grafikon koji prikazuje stabilnost suštinski amorfnog oblika Jedinjenja 2 u formulaciji tableta PC-XVII na 50°C nakon prethodnog uravnoteženja na 60% relativne vlažnosti pokazuju ć i samo malu količinu kristalnosti tokom vremena. Slika 5 je grafikon koji prikazuje stabilnost suštinski amorfnog oblika Jedinjenja 2 u formulaciji tableta PC-XVII na 60°C nakon prethodno uravnoteženja na 60% relativne vlažnosti pokazuju ć i samo malu količinu kristalnosti tokom vremena. Slika 6 je grafikon koji prikazuje stabilnost suštinski amorfnog oblika Jedinjenja 2 u formulaciji tableta PC-XX na 60°C nakon prethodno uravnoteženja na 60% relativne vlažnosti pokazuju ć i samo malu količinu kristalnosti tokom vremena. Slika 7 je grafikon koji prikazuje stabilnost suštinski amorfnog oblika Jedinjenja 2 u formulaciji tableta PC-XX na 50°C nakon prethodno uravnoteženja na 60% relativne vlažnosti pokazujuć i samo malu količinu kristalnosti tokom vremena.

1

Slika 8 je HNMR spektar Jedinjenja 1.

1

Slika 9 je HNMR spektar soli jedinjenja 1 HCl.

Slika 10 je trag diferencijalne skenirajuć e kalorimetrije (DSC) Jedinjenja 1, Oblika I.

Slika 11 je konformaciona slika Jedinjenja 1 Oblika I zasnovana na rendgenskoj analizi monokristala.

Slika 12 je šematski crtež kontinuiranog proizvodnog procesa koji omoguć ava procesnu analitičku tehniku (PAT) gde u koraku 1) dodavač/blender jedan PAT1 NIR meri svojstva materijala tokom skrininga sirovina; korak 2) granulator dvostrukog zavrtnja, PAT2 NIR meri sastav i BU; korak 3) sušač sa fluidnim krevetom, PAT 3a NIR meri jednolikost granula, LOD, oblik čvrstog stanja i fizičke karakteristike granula, PAT 3b laserska difrakcija meri raspodelu veličine čestica; korak 4) mlevenje, PAT4 NIR meri sastav i BU; korak 5) dodavač/blender dva, PAT 5a Raman meri test i CU, PAT 5b težinu, tvrdo ć u, debljinu; korak 6) kompresija, PAT6 Raman meri debljinu sloja; i korak 7) premazivanje.

Slika 13 je šematski crtež koji prikazuje PAT linijski Sentronics NIR smešten posle blendera jedan, mlina za granule i dodatnog blendera za granule. Svaka sonda ima 7 tačaka koje ciklično sekvenciraju kako bi maksimizovale uzorkovanje i NIR sa multiplekserom-NIR koji obezbeđuje robusno i iscrpno uzorkovanje kontrolisanim protokom praha kroz optiku sonde.

Slika 14 je prikaz NIR-a u tečnom prahu.

Slika 15 je Kajzerov Raman spektar Jedinjenja 1 Oblika I i Jedinjenja 1 Oblika II (Jedinjenje 1 Oblik II je različiti polimorf otkriven u US 201131588 ovde u celosti referencom), uzet posle presovanja tablete. Kaiser Raman spektrometar je postavljen na ispitivač tableta Kraemer UTS.

Slika 16 je grafikon koji pokazuje dobru korelaciju između predviđenih i referentnih NIR uzorkovanja granula Jedinjenja 2.

Slika 17 je serija NIR spektra koji mere sadržaj vode u uzorcima Jedinjenja 1 granula.

Slika 18 je serija NIR spektara koji mere opseg sastava koji sadrže različite odnose Jedinjenja 1 Oblika I i čvrste disperzije koji sadrže suštinski amorfno Jedinjenje 2 levo, i prethodno obrađeni spektri desno koji prikazuju opseg A za identifikaciju Jedinjenja 1 Oblika I i Opseg B za identifikaciju amorfnog Jedinjenja 2.

Slika 19 prikazuje kalibracionu krivu za predviđeni sadržaj Jedinjenja 1 Oblika I naspram referentnog (stvarnog) sadržaja Jedinjenja 1 Oblika I koriš ć enjem tehnika delimičnih najmanjih kvadrata (PLS).

Slika 20 prikazuje stvarne rezultate nepoznatih uzoraka koji sadrže različite sadržaje Jedinjenja 1, Oblik I (Y referenca) u odnosu na predviđeni sadržaj, koriste ć i kalibracionu krivu izračunatu na Slici 19 (Y Predviđeno).

Slika 21 prikazuje procenat prenosa laserskog merenja difrakcije kao odgovor na promene brzine linije (brzine protoka) za sastav koji sadrži Jedinjenje 1, Oblik I i čvrstu disperziju koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2, što pokazuje očekivano smanjenje procenta prenosa sa poveć anjem brzine linije.

Slika 22 prikazuje laserska merenja difrakcije čestica koje sadrže Jedinjenje 1, Oblik I i čvrste disperzije koje sadrže suštinski amorfno Jedinjenje 2 pri različitim brzinama linija, pokazujuć i da na prosečnu veličinu čestica (Dv(50) ne utiče brzina linije).

Slika 23 prikazuje laserska merenja difrakcije čestica koje sadrže Jedinjenje 1, Oblik I i čvrste disperzije koje sadrže suštinski amorfno Jedinjenje 2, pod različitim parametrima obrade, što pokazuje da su merenja veličine čestica osetljiva na takve promene.

Slika 24 prikazuje predviđene moguć nosti procesno-analitičkih tehnoloških modela koji koriste Raman spektroskopiju, i neprekidno i prekidno, za pra ć enje identiteta čvrstog oblika Jedinjenja 1 u tableti.

Slika 25 prikazuje predviđene moguć nosti procesno-analitičkih tehnoloških modela koji koriste Raman spektroskopiju, i neprekidno I prekidno, za pra ć enje identiteta čvrstog oblika Jedinjenja 2 u tableti.

DETALJAN OPIS

DEFINICIJE

[0062] Kako se ovde koristi, "CFTR" označava regulator transmembranske provodljivosti cistične fibroze.

[0063] Kako se ovde koristi, "ΔF508 mutacija" ili "F508-del mutacija" je specifična mutacija unutar CFTR proteina. Mutacija je delecija tri nukleotida koji sadrže kodon za aminokiselinu fenilalanin na poziciji 508, što rezultira CFTR proteinom kojem nedostaje ovaj ostatak fenilalanina.

[0064] Kako se ovde koristi, pacijent koji je "homozigotan" za određenu mutaciju, npr. ΔF508, ima istu mutaciju na svakom alelu.

[0065] Kako se ovde koristi, pacijent koji je "heterozigotan" za određenu mutaciju, npr. ΔF508, ima ovu mutaciju na jednom alelu, a drugu mutaciju na drugom alelu.

[0066] Kako se ovde koristi, termin "CFTR korektor" se odnosi na jedinjenje koje poveć ava količinu funkcionalnog CFTR proteina na površinu ć elije, što rezultira pojačanim prenosom jona.

[0067] Kako se ovde koristi, termin "pojačivač CFTR" odnosi se na jedinjenje koje poveć ava aktivnost kanala CFTR proteina smeštenog na površinić elije, što rezultira pojačanim prenosom jona.

[0068] Kako se ovde koristi, termin "aktivni farmaceutski sastojak" ili "API" odnosi se na biološki aktivno jedinjenje.

[0069] Kako se ovde koristi, termin "PAT" označava procesnu analitičku tehnologiju.

[0070] Kako se ovde koristi, izraz "CU" označava jednoobraznost sadržaja.

[0071] Izrazi "čvrsti oblik", "čvrsti oblici" i srodni izrazi, kada se ovde koriste, odnose se na Jedinjenje 1 ili Jedinjenje 2, u određenom čvrstom obliku, npr. kristali, amorfna stanja i slično.

[0072] Kako se ovde koristi, izraz "suštinski amorfni" odnosi se na čvrsti materijal koji ima mali ili nikakav redosled dugog raspona u položaju svojih molekula. Na primer, uglavnom amorfni materijali imaju manje od oko 15% kristalnosti (na primer, manje od oko 10% kristalnosti ili manje od oko 5% kristalnosti). Takođe je primeć eno da termin „suštinski amorfni“ uključuje deskriptor „amorfni“, koji se odnosi na materijale koji nemaju (0%) kristalnost.

[0073] Kako se ovde koristi, izraz „suštinski kristalni“ (kao u frazi suštinski kristalni Jedinjenje 1 Oblik I odnosi se na čvrsti materijal koji ima pretežno dalek red u položaju njegovih molekula. Na primer, suštinski kristalni materijali imaju više od oko 85% kristalnosti (npr. više od oko 90% kristalnosti ili više od oko 95% kristalnosti). Takođe je primeć eno da izraz „u suštini kristaliničan“ uključuje deskriptor „kristalni“, koji se odnosi na materijale koji imaju 100% kristalnosti.

[0074] Izraz "kristalni" i srodni termini koji se ovde koriste, kada se koriste za opisivanje supstance, komponente, proizvoda ili oblika, znači da su supstanca, komponenta ili proizvod u osnovi kristalni kako je određeno difrakcijom rengen zraka. (Videti, na primer, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21. izdanje, Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md. (2003); The United States Pharmacopeia, 23. izdanje, 1843-1844 (1995)).

[0075] Kako se ovde koristi, "ekscipijent" uključuje funkcionalne i nefunkcionalne sastojke u farmaceutskom sastavu.

[0076] Kako se ovde koristi, "dezintegrant" je pomoć na supstanca koja hidrira farmaceutsku sastav i pomaže u disperziji tableta. Kako se ovde koristi, "razblaživač" ili "punilo" je pomoć na supstanca koja dodaje glomaznost farmaceutskom sastavu.

[0077] Kako se ovde koristi, "surfaktant" je pomoć na supstanca koja farmaceutskim sastavima daje pove ć anu rastvorljivost i/ili sposobnost vlaženja.

[0078] Kako se ovde koristi, "vezivno sredstvo" je pomoć na supstanca koja daje farmaceutskom sastavu pojačanu koheziju ili zateznu čvrstoć u (npr. tvrdo ć u).

[0079] Kako se ovde koristi, "klizno sredstvo" je pomoć na supstanca koja farmaceutskim sastavima daje poboljšana svojstva protočnosti.

[0080] Kako se ovde koristi, "bojilo" je pomoć na supstanca koja daje farmaceutski sastav, npr. tableta, željene boje. Primeri boja uključuju komercijalno dostupne pigmente kao što su FD&C Blue # 1 Aluminium Lake, FD&C Blue # 2, druge FD&C Blue boje, titan dioksid, gvožđe oksid i/ili njihove kombinacije. U jednom izvođenju, tableta obezbeđena pronalaskom je roze.

[0081] Kako se ovde koristi, "lubrikant" je ekscipijent koji se dodaje farmaceutskim sastavima koje se utiskuju u tablete. Lubrikant pomaže u zbijanju granula u tablete i izbacivanju tablete farmaceutskog sastava iz kalupa.

[0082] Kako se ovde koriste, "kubni centimetar" i "cc" se koriste naizmenično da predstavljaju jedinicu zapremine. Treba imati na umu da je 1 cc = 1 mL.

[0083] Kako se ovde koristi, "kiloPond" i "kP" se koriste naizmenično i odnose se na meru sile gde je kP = približno 9,8 Njutna.

[0084] Kako se ovde koristi, „krhkost“ odnosi se na svojstvo tablete da ostane netaknuta i da zadrži oblik uprkos spoljnoj sili pritiska. Krhkost se može kvantifikovati pomoć u matematičkog izraza predstavljenog u jednačini 1:

% krhkosti =

pri čemu je W0originalna težina tablete, a Wfkonačna težina tablete nakon što se stavi kroz friabilator. Krhkost se meri pomoć u standardnog USP uređaja za ispitivanje koji baca eksperimentalne tablete za 100 ili 400 obrtaja. Neke tablete prema pronalasku imaju krhkost manju od 5,0%. U još jednom izvođenju, krhkost je manja od 2,0%. U još jednom izvođenju, ciljana krhkost je manja od 1,0% nakon 400 obrtaja.

[0085] Kako se ovde koristi, „srednji prečnik čestica“ je prosečni prečnik čestica izmeren tehnikama kao što su lasersko rasejanje svetlosti, analiza slike ili analiza sita. U jednom izvođenju, granule korišć ene za pripremu farmaceutskih sastava predviđenih pronalaskom imaju srednji prečnik čestica manji od 1,0 mm.

[0086] Kako se ovde koristi, "zapreminska gustina" je masa čestica materijala podeljena ukupnom zapreminom koju čestice zauzimaju. Ukupna zapremina uključuje zapreminu čestica, zapreminu praznina među česticama i unutrašnju zapreminu pora. Nasipna gustina nije suštinsko svojstvo materijala; može se promeniti u zavisnosti od načina obrade materijala. U jednom izvođenju, granule korišć ene za pripremu farmaceutskih sastava predviđenih pronalaskom imaju zapreminsku gustinu od oko 0,5-0,7 g/cc.

[0087] „Efikasna količina“ ili „terapeutski efikasna količina“ jedinjenja prema pronalasku može varirati u zavisnosti od faktora kao što su stanje bolesti, starost i težina subjekta i sposobnost jedinjenja iz pronalaska da izazove željeni odgovor u predmetu. Režimi doziranja mogu se prilagoditi kako bi se obezbedio optimalan terapijski odgovor. Efikasna količina je takođe ona u kojoj su terapijski korisni efekti nadjačani bilo kojim toksičnim ili štetnim efektima (npr. neželjenim efektima) jedinjenja iz ovog pronalaska.

[0088] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije naznačeno, izrazi „terapeutski efikasna količina“ i „efikasna količina“ jedinjenja označavaju količinu dovoljnu da obezbede terapeutsku korist u lečenju ili lečenju bolesti ili poremeć aja ili da je održe ili minimiziraju ili više simptoma povezanih sa bolešć u ili poreme ć ajem. „Terapijski efikasna količina“ i „efektivna količina“ jedinjenja znače količinu terapeutskog agensa, samog ili u kombinaciji sa jednim ili više drugih agensa, koja pruža terapeutsku korist u lečenju ili upravljanju bolešć u ili poreme ć aj. Termini "terapeutski efikasna količina" i "efikasna količina" mogu obuhvatati količinu koja poboljšava celokupnu terapiju, smanjuje ili izbegava simptome ili uzroke bolesti ili poremeć aja ili pove ć ava terapeutsku efikasnost drugog terapeutskog agensa.

[0089] „Suštinski čist“, kako se koristi u frazi „suštinski čisto Jedinjenje 1, Oblik I“, znači čistoć a ve ć a od oko 90%. U još jednom izvođenju, suštinski čisto se odnosi na čistoć u ve ć u od oko 95%. U još jednom izvođenju, suštinski čisto se odnosi na čisto ć u ve ć u od oko 98%. U još jednom izvođenju, suštinski čisto se odnosi na čisto ć u ve ć u od oko 99%.

[0090] U odnosu na Jedinjenje 1, Oblik 1, ili čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2, izrazi "oko" i "približno", kada se koriste u vezi sa dozama, količinama ili težinskim procentima sastojaka smeše ili oblika doziranja, označavaju dozu, količinu ili težinski procenat koji je prepoznat od strane stručnjaka u struci da bi se obezbedio farmakološki efekat ekvivalentan onom dobijenom od navedene doze, količine ili težinskih procenata. Konkretno, izraz "oko" ili "približno" znači prihvatljivu grešku za određenu vrednost kako je utvrđeno od strane prosečnog stručnjaka, što z v v u . zv , z u okviru 1, 2, 3 ili 4 standardne devijacije. U određenim izvođenjima, pojam "oko" ili "približno" znači u okviru 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3% , 2%, 1%, 0,5%, 0,1% ili 0,05% date vrednosti ili opsega.

FARMACEUTSKI SASTAVI

[0091] Pronalazak obezbeđuje farmaceutske sastave koje sadrže Jedinjenje 1 Oblika I i čvrstu disperziju koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2. U nekim izvođenjima ovog aspekta, količina Jedinjenja 1 Oblika I koja je prisutna u farmaceutskom sastavu iznosi 100 mg, 125 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg ili 400 mg. U nekim izvođenjima ovog aspekta, težinski procenat Jedinjenja 1 Oblika I koji je prisutan u farmaceutskom sastavu je od 10 do 75 procenata. U ovim i drugim izvođenjima, Jedinjenje 1 Oblik I je prisutno kao suštinski čisto Jedinjenje 1 Oblika I. U nekim ostvarenjima ovog aspekta, količina suštinski amorfnog Jedinjenja 2 koje je prisutno u farmaceutskom sastavu je 100 mg, 125 mg, 150 mg , 200 mg ili 250 mg. U nekim izvođenjima ovog aspekta, težinski procenat suštinski amorfnog Jedinjenja 2 koje je prisutno u farmaceutskom sastavu je od 10 do 75 procenata. U ovim i drugim izvođenjima, suštinski amorfno Jedinjenje 2 je prisutno kao u osnovi čisto i amorfno Jedinjenje 2. „Suštinski čisto“ znači već e od devedeset procenata čisto ć e; poželjno ve ć e od 95 procenata čisto ć e; poželjnije ve ć e od 99,5 procenata čisto ć e.

[0092] Prema tome, u jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje farmaceutski sastav koji sadrži:

a. Jedinjenje 1 Oblik I;

b. čvrstu dispreziju koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2;

c. punilo;

d. dezintegrant;

e. surfaktant; i

f. vezivo;

[0093] U jednom izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 25 mg Jedinjenja 1 Oblika I. U drugom izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 50 mg Jedinjenja 1 Oblika I. U drugom izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 100 mg Jedinjenja 1 Oblika I. U sledeć em izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 125 mg Jedinjenja 1 Oblika I. U drugom izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 150 mg Jedinjenja 1 Oblika I. U sledeć em izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I. U sledeć em izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 250 mg Jedinjenja 1 Oblika I. U drugom izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 400 mg Jedinjenja 1 Oblika I.

[0094] U jednom izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 25 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. U drugom izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 50 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. U drugom izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 100 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. U sledeć em izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. U drugom izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 150 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. U sledeć em izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 200 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. U sledeć em izvođenju ovog aspekta, farmaceutski sastav sadrži 250 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2.

[0095] U nekim izvođenjima, farmaceutski sastavi sadrže Jedinjenje 1 Oblika I, pri čemu je Jedinjenje 1 Oblika I prisutno u količini od najmanje 15 tež.% (npr., najmanje 20 tež.%, najmanje 30 tež.%, najmanje 40 tež.%, najmanje 50 tež.%, ili najmanje 60 tež.%) težine sastava.

[0096] U nekim izvođenjima, farmaceutski sastavi sadrže suštinski amorfno Jedinjenje 2, gde je suštinski amorfno Jedinjenje 2 prisutno u količini od najmanje 15 tež.% (npr., najmanje 20 tež.%, najmanje 30 tež.%, najmanje 40 tež.% , najmanje 50 tež.%, ili najmanje 60 tež.%) težine sastava.

[0097] U nekim izvođenjima, farmaceutski sastav sadrži Jedinjenje 1, Oblik I, čvrstu disperziju koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2, punilo, dezintegrant, surfaktant i vezivo. U ovom izvođenju, sastav sadrži od oko 25 tež.% do oko 55 tež.% (npr., oko 30-50 tež.%) Jedinjenja 1 Oblika I prema težini sastava, i tipičnije, od 40 tež.% do oko 45 tež. % Jedinjenja 1 Oblika I prema težini sastava. U ovom izvođenju, sastav sadrži od oko 15 tež.% do oko 40 tež.% (npr., oko 20-35 tež.%) Suštinski amorfnog Jedinjenja 2 prema težini sastava, i još tipičnije, od 25 tež.% do oko 30 tež. % suštinski amorfnog Jedinjenja 2 prema težini sastava.

[0098] Koncentracija Jedinjenja 1 Oblika I i suštinski amorfnog Jedinjenja 2 u sastavu zavisi od nekoliko faktora kao što su količina farmaceutskog sastava potrebna da se dobije željena količina Jedinjenja 1 Oblika I i u osnovi amorfnog Jedinjenja 2 i željeni profil rastvaranja farmaceutskog sastava. Koncentracija Jedinjenja 1 Oblika I i suštinski amorfnog Jedinjenja 2 u sastavu zavisi od nekoliko faktora kao što su količina farmaceutskog sastava potrebna da se dobije željena količina Jedinjenja 1 Oblika I i u osnovi amorfnog Jedinjenja 2 i željeni profil rastvaranja farmaceutskog sastava.

[0099] U još jednom izvođenju, farmaceutski sastav sadrži Jedinjenje 1, Oblik I, u kojem Jedinjenje 1, Oblik I, u svom čvrstom obliku ima srednji prečnik čestica, mereno rasipanjem svetlosti (npr. upotrebom Malvern Mastersizer-a dostupnog od Malvern Instruments u Engleskoj) od 0,1 mikrona do 10 mikrona. U još jednom izvođenju, veličina čestica Jedinjenja 1 Oblika I je 1 mikrona do 5 mikrona. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1 Oblik I ima veličinu čestica D50 od 2,0 mikrona.

[0100] Kao što je naznačeno, pored Jedinjenja 1 Oblika I i čvrste disperzije suštinski amorfnog Jedinjenja 2, u nekim zv , u v u u v

kao što su punila, sredstva za dezintegraciju, surfaktanti, razblaživači, veziva, klizajuć a sredstva, lubrikanti, bojila ili mirisi i bilo koja njihova kombinacija.

[0101] Punila pogodna za pronalazak su kompatibilna sa sastojcima farmaceutskog sastava, tj. ne smanjuju u suštini rastvorljivost, tvrdoć u, hemijsku stabilnost, fizičku stabilnost ili biološku aktivnost farmaceutskog sastava. Primeri punila uključuju: celuloze, modifikovane celuloze (npr. natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza hidroksimetil celuloza, hidroksipropilceluloza), celulozni acetat, mikrokristalna celuloza, kalcijum fosfati, dvobazni kalcijum fosfat, skrobovi (npr. kukuruzni skrob, krompirov skrob), šeć eri (npr. sorbitol) laktoza, saharoza ili slično) ili bilo koja njihova kombinacija.

[0102] Prema tome, u jednom izvođenju, farmaceutski sastav sadrži najmanje jedno punilo u količini od najmanje 5 tež.% (npr., najmanje oko 20 tež.%, najmanje oko 30 tež.%, Ili najmanje oko 40 tež.% sastava. Na primer, farmaceutski sastav sadrži od oko 10 tež.% do oko 60 tež.% (npr. od oko 20 tež.% do oko 55 tež.%, od oko 25 tež.% do oko 50 tež.% Ili od oko 27 tež.% do oko 45 tež.%) punila, po težini sastava. U drugom primeru, farmaceutski sastav sadrži najmanje oko 20 tež.% (npr., najmanje 30 tež.% Ili najmanje 40 tež.%) mikrokristalne celuloze, na primer MCC Avicel PH102, po težini sastava. U još jednom primeru, farmaceutski sastav sadrži od oko 10 tež.% do oko 60 tež.% (npr. od oko 20 tež.% do oko 55 tež.% ili od oko 25 tež.% do oko 45 tež.%) mikroceluloze, po težini sastava.

[0103] Dezintegranti pogodni za pronalazak pojačavaju raspršivanje farmaceutskog sastava i kompatibilni su sa sastojcima farmaceutskog sastava, tj. ne smanjuju u suštini hemijsku stabilnost, fizičku stabilnost, tvrdoć u ili biološku aktivnost farmaceutskog sastava. Primeri dezintegranata uključuju natrijum kroskarmelozu, natrijum skrob glikolat ili njihovu kombinaciju.

[0104] Prema tome, u jednom izvođenju, farmaceutski sastav sadrži dezintegrant u količini od oko 10 tež.% Ili manje (npr., oko 7 tež.% Ili manje, oko 6 tež.% Ili manje, ili oko 5 tež.% Ili manje) po težini sastava. Na primer, farmaceutski sastav sadrži od oko 1 tež.% do oko 10 tež.% (npr. od oko 1,5 tež.% do oko 7,5 tež.% Ili od oko 2,5 tež.% do oko 6 tež.%) dezintegranta, po težini sastava. U drugom primeru, farmaceutski sastav sadrži oko 10 tež.% ili manje (npr. 7 tež.% Ili manje, 6 tež.% ili manje, ili 5 tež.% ili manje) natrijum kroskarmeloze, po težini sastava. U još jednom primeru, farmaceutski sastav sadrži od oko 1 tež.% do oko 10 tež.% (npr. od oko 1,5 tež.% do oko 7,5 tež.% ili od oko 2,5 tež.% do oko 6 tež.%) natrijum kroskarmeloze, po težini sastava. U nekim primerima, farmaceutski sastav sadrži od oko 0,1% do oko 10 tež.% (npr. od oko 0,5 tež.% do oko 7,5 tež.% Ili od oko 1,5 tež.% do oko 6 tež.%) dezintegranta, težinski prema sastavu. U još nekim primerima, farmaceutski sastav sadrži od oko 0,5% do oko 10 tež.% (npr. od oko 1,5 tež.% do oko 7,5 tež.% ili od oko 2,5 tež.% do oko 6 tež.%) dezintegranta, po težini sastava.

[0105] Surfaktanti pogodne za pronalazak poboljšavaju vlažnost farmaceutskog sastava i kompatibilne su sa sastojcima farmaceutskog sastava, tj. ne smanjuju u suštini hemijsku stabilnost, fizičku stabilnost, tvrdoć u ili biološku aktivnost farmaceutskog sastava. Primeri surfaktanata supstanci uključuju natrijum lauril sulfat (SLS), natrijum stearil fumarat (SSF), polioksietilen 20 sorbitan mono-oleat (npr. TweenTM), bilo koju njihovu kombinaciju ili slično.

[0106] Prema tome, u jednom izvođenju, farmaceutski sastav sadrži surfaktant u količini od oko 10 tež.% Ili manje (npr., oko 5 tež.% ili manje, oko 2 tež.% ili manje, oko 1 tež.% ili manje, oko 0,8 tež.% ili manje ili oko 0,6 tež.% ili manje) po težini sastava. Na primer, farmaceutski sastav uključuje od oko 10 tež.% do oko 0,1 tež.% (npr. od oko 5 tež.% do oko 0,2 tež.% Ili od oko 2 tež.% do oko 0,3 tež.%) surfaktanta, prema težini sastava. U drugom primeru, farmaceutski sastav sadrži 10 tež.% ili manje (npr. oko 5 tež.% ili manje, oko 2 tež.% ili manje, oko 1 tež.% ili manje, oko 0,8 tež.% ili manje, ili oko 0,6 tež.% ili manje) natrijum lauril sulfata, po težini sastava. U još jednom primeru, farmaceutski sastav sadrži od oko 10 tež.% do oko 0,1 tež.% (npr. od oko 5 tež.% do oko 0,2 tež.% ili od oko 2 tež.% do oko 0,3 tež.%) natrijum lauril sulfata, po težini sastava.

[0107] Veziva pogodna za pronalazak poboljšavaju čvrstoć u tableta farmaceutskog sastava i kompatibilna su sa sastojcima farmaceutskog sastava, tj. ne smanjuju u suštini hemijsku stabilnost, fizičku stabilnost ili biološku aktivnost farmaceutskog sastava. Primeri veziva uključuju polivinilpirolidon, dvobazni kalcijum fosfat, saharozu, kukuruzni skrob, modifikovanu celulozu (npr. hidroksimetil celuloza) ili bilo koju njihovu kombinaciju.

[0108] Prema tome, u jednom izvođenju, farmaceutski sastav sadrži vezivo u količini od najmanje oko 0,1 tež.% (npr., najmanje oko 1 tež.%, najmanje oko 3 tež.%, najmanje oko 4 tež.%, ili najmanje oko 5 tež.%) po težini sastava. Na primer, farmaceutski sastav sadrži od oko 0,1 tež.% do oko 10 tež.% (npr. od oko 1 tež.% do oko 10 tež.% ili od oko 2 tež.% do oko 7 tež.%) veziva, po težini sastava. U drugom primeru, farmaceutski sastav sadrži najmanje oko 0,1 tež.% (npr., najmanje oko 1 tež.%, najmanje oko 2 tež.%, Najmanje oko 3 tež.% ili najmanje oko 4 tež.%) polivinilpirolidona, po težini sastava. U još jednom primeru, farmaceutski sastav sadrži klizno sredstvo u količini u rasponu od oko 0,1 tež.% do oko 10 tež.% (npr. od oko 1 tež.% do oko 8 tež.% ili od oko 2 tež.% do oko 5 tež.%) polivinilpirolidona, po težini sastava.

[0109] Razblaživači pogodni za pronalazak mogu dodati neophodnu količinu formulaciji za pripremu tableta željene veličine i generalno su kompatibilni sa sastojcima farmaceutskog sastava, tj. oni u velikoj meri ne smanjuju rastvorljivost, tvrdoć u, hemijsku stabilnost, fizičku stabilnost ili biološku aktivnost farmaceutskog sastava. Primeri razblaživača uključuju: šeć ere, na primer, poslastičarski še ć er, stisljivi še ć er, dekstrate, dekstrin, dekstrozu, laktozu, manitol, sorbitol, celulozu i modifikovane celuloze, na primer celuloza u prahu, talk, kalcijum fosfat, skrob ili bilo koja njihova kombinacija.

[0110] Dakle, u jednom izvođenju, farmaceutski sastav sadrži razblaživač u količini od 40 tež.% ili manje (npr. 35 tež.% ili manje, 30 tež.% ili manje, ili 25 tež.% ili manje, ili 20 tež.% ili manje, ili 15 tež.% ili manje, ili 10 tež.% ili manje) po težini sastava. Na primer, farmaceutski sastav sadrži od oko 40 tež.% do oko 1 tež.% (npr. od oko 35 tež.% do oko 5 tež.% ili od oko 30 tež.% do oko 7 tež.%, od oko 25 tež.% do oko 10 tež.%, od oko 20 tež.% do oko 15 tež.%) razblaživača, po težini sastava. U drugom primeru, farmaceutski sastav sadrži 40 tež.% ili manje (npr., 35 tež.% ili manje, 25 tež.% ili manje, ili 15 tež.% ili manje) manitola, po težini sastava. U još jednom primeru, farmaceutski sastav sadrži od oko 35 tež.% do oko 1 tež.% (npr. od oko 30 tež.% do oko 5 tež.% ili od oko 25 tež.% do oko 10 tež.%) manitola, po težini sastava.

[0111] Klizna sredstva pogodna za pronalazak poboljšavaju protočnost farmaceutskog sastava i kompatibilna su sa sastojcima farmaceutskog sastava, tj. ne smanjuju u suštini rastvorljivost, tvrdoć u, hemijsku stabilnost, fizičku stabilnost ili biološku aktivnost farmaceutskog sastava. Primeri kliznih sredstava uključuju koloidni silicijum dioksid, talk ili njihovu kombinaciju.

[0112] Prema tome, u jednom izvođenju, farmaceutski sastav sadrži klizno sredstvo u količini od 2 tež.% ili manje (npr.

1,75 tež.%, 1,25 tež.% ili manje, ili 1,00 tež.% ili manje) po težini sastava. Na primer, farmaceutski sastav sadrži od oko 2 tež.% do oko 0,05 tež.% (npr. od oko 1,5 tež.% do oko 0,07 tež.% ili od oko 1,0 tež.% do oko 0,09 tež.%) kliznog sredstva, po težini sastava. U drugom primeru, farmaceutski sastav sadrži 2 tež.% ili manje (npr., 1,75 tež.%, 1,25 tež.% ili manje, ili 1,00 tež.% ili manje) koloidnog silicijum dioksida, po težini sastava. U još jednom primeru, farmaceutski sastav sadrži od oko 2 tež.% do oko 0,05 tež.% (npr. od oko 1,5 tež.% do oko 0,07 tež.% ili od oko 1,0 tež.% do oko 0,09 tež.%) koloidnog silicijum dioksida, po težini sastava.

[0113] U nekim izvođenjima, farmaceutski sastav može da sadrži oralni čvrsti farmaceutski oblik doziranja koji može sadržati lubrikant koje može sprečiti adheziju primese granulata i zrna na površini (npr. površina posude za mešanje, kompresioni kalup i/ili bušilica). Lubrikant takođe može smanjiti trenje među česticama unutar granulata i poboljšati kompresiju i izbacivanje komprimovanih farmaceutskih sastava iz kalupa. Lubrikant je takođe kompatibilno sa sastojcima farmaceutskog sastava, tj. oni ne smanjuju u suštini rastvorljivost, tvrdoć u ili biološku aktivnost farmaceutskog sastava. Primeri lubrikanata uključuju magnezijum stearat, kalcijum stearat, cinkov stearat, natrijum stearat, stearinsku kiselinu, aluminijum stearat, leucin, gliceril behenat, hidrogenirano biljno ulje ili bilo koju njihovu kombinaciju. U jednom izvođenju, farmaceutski sastav sadrži lubrikant u količini od 5 tež.% ili manje (npr., 4,75 tež.%, 4,0 tež.% ili manje, ili 3,00 tež.% ili manje, ili 2,0 tež.% ili manje) po težini sastava. Na primer, farmaceutski sastav sadrži od oko 5 tež.% do oko 0,10 tež.% (npr. od oko 4,5 tež.% do oko 0,5 tež.% ili od oko 3 tež.% do oko 1 tež.%) lubrikanta, po težini sastava. U drugom primeru, farmaceutski sastav sadrži 5 tež.% ili manje (npr. 4,0 tež.% ili manje, 3,0 tež.% ili manje, ili 2,0 tež.% ili manje, ili 1,0 tež.% ili manje) magnezijum stearata, po težini sastava. U još jednom primeru, farmaceutski sastav sadrži od oko 5 tež.% do oko 0,10 tež.% (npr. od oko 4,5 tež.% do oko 0,15 tež.% ili od oko 3,0 tež.% do oko 0,50 tež.%) magnezijum stearata, po težini sastava.

[0114] Farmaceutski sastavi prema pronalasku mogu opciono da sadrže jedno ili više boja, ukusa i/ili mirisa za poboljšanje vizuelne privlačnosti, ukusa i/ili mirisa sastava. Pogodna bojila, arome ili mirisi su kompatibilni sa sastojcima farmaceutskog sastava, tj. oni ne smanjuju u suštini rastvorljivost, hemijsku stabilnost, fizičku stabilnost, tvrdoć u ili biološku aktivnost farmaceutskog sastava. U jednom izvođenju, farmaceutski sastav sadrži boju, aromu i/ili miris. U jednom ostvarenju, farmaceutski sastavi obezbeđeni pronalaskom su ljubičasti.

[0115] U nekim izvođenjima, farmaceutski sastav uključuje ili može da se napravi od tableta, a tablete mogu biti presvučene bojom i opciono obeležene logotipom, drugom slikom i/ili tekstom pomoć u odgovaraju ć eg mastila. U još nekim izvođenjima, farmaceutski sastav uključuje ili može da se napravi od tableta, a tablete se mogu premazati bojom, naneti voskom i po želji obeležiti logotipom, drugom slikom i/ili tekstom pomoć u odgovaraju ć eg mastila. Pogodna bojila i mastila su kompatibilni sa sastojcima farmaceutskog sastava, tj. oni u suštini ne smanjuju rastvorljivost, hemijsku stabilnost, fizičku stabilnost, tvrdoć u ili biološku aktivnost farmaceutskog sastava. Pogodna bojila i mastila mogu biti bilo koje boje i na bazi vode ili rastvarača. U jednom izvođenju, tablete napravljene od farmaceutskog sastava presvučene su bojom i zatim obeležene logotipom, drugom slikom i/ili tekstom pomoć u odgovaraju ć eg mastila. Na primer, tablete koje sadrže ovde opisanu farmaceutski sastav mogu biti obložene sa oko 3 tež.% (npr. manje od oko 6 tež.% ili manje od oko 4 tež.%) obloge od filma koja sadrži boju. Tablete u boji mogu biti označene logotipom i tekstom koji pokazuju jačinu aktivnog sastojka u tableti pomoć u odgovaraju ć eg mastila. U drugom primeru, tablete koje sadrže ovde opisani farmaceutski sastav mogu biti obložene sa oko 3 tež.% (npr. manje od oko 6 tež.% ili manje od oko 4 tež.%) obloge od filma koja sadrži boju.

[0116] U još jednom izvođenju, tablete napravljene od farmaceutskog sastava presvučene su bojom, voskirane voskom i zatim označene logotipom, drugom slikom i/ili tekstom pomoć u odgovaraju ć eg mastila. Na primer, tablete koje sadrže ovde opisani farmaceutski sastav mogu biti obložene sa oko 3 tež.% (npr. manje od oko 6 tež.% ili manje od oko 4 tež.%) obloge od filma koja sadrži boju. Obojene tablete mogu da se voskiraju Carnauba voskom u prahu odmerenim u količini od oko 0,01% w/w od težine jezgra početne tablete. Voštane tablete mogu biti označene logotipom i tekstom koji pokazuju jačinu aktivnog sastojka u tableti pomoć u odgovaraju ć eg mastila. U drugom primeru, tablete koje sadrže ovde opisani farmaceutski sastav mogu biti obložene sa oko 3 tež.% (npr. manje od oko 6 tež.% ili manje od oko 4 tež.%) obloge od filma koja sadrži boju. Bojene tablete se mogu voskirati voskom ”Carnauba” u prahu odmerenim u količini od oko 0,01% w/w od težine početne tablete jezgra. Voskirane tablete mogu biti označene logotipom i tekstom koji ukazuju na jačinu aktivnog sastojka u tableti, koristeć i mastilo farmaceutskog kvaliteta kao što je crno mastilo (npr. Opacode® S-1-17823, mastilo na bazi rastvarača, komercijalno dostupno od Colorcon, Inc. iz West Pointa, PA.).

[0117] Jedan primer farmaceutskog sastava sadrži od oko 15 tež.% do oko 70 tež.% (npr. od oko 15 tež.% do oko 60 tež.%, od oko 15 tež.% do oko 50 tež.% ili od oko 20 tež.% do oko 70 tež.%, ili od oko 30 tež.% do oko 70 tež.%) Jedinjenja 1 Oblika I, po težini sastava; i od oko 15 tež.% do oko 40 tež.% (npr. oko 20-35 tež.%) suštinski amorfnog Jedinjenja 2 po težini sastava, i još tipičnije, od 25 tež.% do oko 30 tež.% suštinski amorfnog Jedinjenja 2 po težini sastava. Gore pomenuti sastavi mogu takođe da uključuju jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenata, na primer, od oko 20 tež.% do oko 50 tež.% punila; od oko 1 tež.% do oko 5 tež.% dezintegranta; od oko 2 tež.% do oko 0,3 tež.% surfaktanta; i od oko 0,1 tež. % do oko 5 tež.% veziva.

[0118] Drugi primer farmaceutskog sastava sadrži od oko 15 tež.% do oko 70 tež.% (npr. od oko 15 tež.% do oko 60 tež.%, od oko 15 tež.% do oko 50 tež.% ili od oko 15 tež.% do oko 40 tež.% ili od oko 20 tež.% do oko 70 tež.%, ili od oko 30 tež.% do oko 70 tež.%, ili od oko 40 tež.% do oko 70 tež.%, ili od oko 50 tež.% do oko 70 tež.%) Jedinjenja 1 Oblika I po težini sastava, od oko 15 tež.% do oko 40 tež.% (npr., oko 20-35 tež.%) suštinski amorfnog Jedinjenja 2 po težini sastava, i još tipičnije, od 25 tež.% do oko 30 tež.% suštinski amorfnog Jedinjenja 2 po težini sastava i jedan ili više pomoć nih sastojaka, na primer, od oko 20 tež.% do oko 50 tež.% punila; od oko 1 tež.% do oko 5 tež.% dezintegranta; od oko 2 tež.% do oko 0,3 tež.% surfaktanta; od oko 0,1 tež.% do oko 5 tež.% veziva; i od oko 2 tež.% do oko 0,1 tež.% lubrikanta.

[0119] Drugi primer farmaceutskog sastava sadrži od oko 15 tež.% do oko 70 tež.% (npr. od oko 15 tež.% do oko 60 tež.%, . . . . . , . . , ili od oko 40 tež.% do oko 70 tež.%, ili od oko 50 tež.% do oko 70 tež.%) Jedinjenja 1 Oblika I po težini sastava, od oko 15 tež.% do oko 40 tež.% (npr., oko 20-35 tež.%) suštinski amorfnog Jedinjenja 2 po težini sastava, i još tipičnije, od 25 tež.% do oko 30 tež.% suštinski amorfnog Jedinjenja 2 prema težini smeše i jedan ili više pomoć nih sastojaka, na primer, od oko 20 tež.% do oko 50 tež.% punila; od oko 1 tež.% do oko 5 tež.% dezintegranta; od oko 2 tež.% do oko 0,3 tež.% surfaktanta; od oko 0,1 tež.% do oko 5 tež.% veziva; od oko 2 tež.% do oko 0,1 tež.% lubrikanta; od oko 2 tež.% do oko 4 tež.% bojila; i oko 0,005 tež.% do oko 0,015 tež.% voska.

[0120] U jednom izvođenju, pronalazak je granulirani farmaceutski sastav koji sadrži:

a. oko 43 tež.% Jedinjenja 1 Oblika I prema težini sastava;

b. oko 34 tež.% čvrste disperzije koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2 po težini sastava;

c. oko 17 tež.% mikrokristalne celuloze po težini sastava;

d. oko 2 tež.% natrijum kroskarmeloze po težini sastava;

e. oko 1 tež.% natrijum lauril sulfata po težini sastava; i

f. oko 3 tež.% polivinilpirolidona po težini sastava.

[0121] U jednom izvođenju, pronalazak je tableta koja sadrži:

a. oko 35 tež.% Jedinjenja 1 Oblika I prema težini sastava;

b. oko 28 tež.% čvrste disperzije koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2 po težini sastava;

c. oko 26 tež.% mikrokristalne celuloze po težini sastava;

d. oko 6 tež.% natrijum kroskarmeloze po težini sastava;

e. oko 3 tež.% polivinilpirolidona po težini sastava;

f. oko 1 tež.% natrijum lauril sulfata po težini sastava; i

g. oko 1 tež.% magnezijum stearata po težini sastava.

[0122] U jednom izvođenju, pronalazak je tableta koja sadrži:

a. oko 34 tež.% Jedinjenja 1 Oblika I prema težini sastava;

b. oko 27 tež.% čvrste disperzije koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2 po težini sastava;

c. oko 26 tež.% mikrokristalne celuloze po težini sastava;

d. oko 6 tež.% natrijum kroskarmeloze po težini sastava;

e. oko 3 tež.% polivinilpirolidona po težini sastava;

f. oko 1 tež.% natrijum lauril sulfata po težini sastava;

g. oko 1 tež.% magnezijum stearata po težini sastava;

h. oko 3 tež.% bojila po težini sastava; i

i. oko 0.010 tež.% voska po težini sastava.

[0123] Sledeć a tableta pronalaska sadrži:

a. oko 150 do 250 mg Jedinjenja 1 Oblika I;

b. oko 100 do 150 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2;

c. oko 125 do 175 mg mikrokristalne celuloze;

d. oko 20 do 40 mg natrijum kroskarmeloze;

e. oko 10 do 20 mg polivinilpirolidona;

f. oko 2 do 6 mg natrijum lauril sulfata; i

g. oko 3 to 7 mg magnezijum stearata.

[0124] Sledeć a tableta pronalaska sadrži:

a. oko 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I;

b. oko 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2;

c. oko 150 mikrokristalne celuloze;

d. oko 34 mg natrijum kroskarmeloze;

e. oko 15 mg polivinilpirolidona;

f. oko 4 mg natrijum lauril sulfata; i

g. oko 6 mg magnezijum stearata.

[0125] Sledeć a tableta pronalaska sadrži:

a. oko 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I;

b. oko 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2;

c. oko 150 mikrokristalne celuloze;

d. oko 34 mg natrijum kroskarmeloze;

e. oko 15 mg polivinilpirolidona;

f. oko 4 mg natrijum lauril sulfata;

g. oko 6 mg magnezijum stearata;

h. oko 17 mg bojila; i

i. oko 0.06 mg voska.

[0126] U jednom izvođenju, pronalazak je granulirani farmaceutski sastav koji sadrži:

a. oko 38 tež.% Jedinjenja 1 Oblika I po težini sastava;

b. oko 40 tež.% čvrste disperzije koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2 po težini sastava; c. oko 16 tež.% mikrokristalne celuloze po težini sastava;

d. oko 2 tež.% natrijum kroskarmeloze po težini sastava;

e. oko 1 tež.% natrijum lauril sulfata po težini sastava; i

f. oko 3 tež.% polivinilpirolidona po težini sastava.

[0127] U jednom izvođenju, pronalazak je tableta koja sadrži:

a. oko 31 tež.% Jedinjenja 1 Oblika I po težini sastava;

b. oko 32 tež.% čvrste disperzije koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2 po težini sastava; c. oko 26 tež.% mikrokristalne celuloze po težini sastava;

d. oko 6 tež.% natrijum kroskarmeloze po težini sastava;

e. oko 3 tež.% polivinilpirolidona po težini sastava;

f. oko 1 tež.% natrijum lauril sulfata po težini sastava;

g. oko 1 tež.% magnezijum stearata po težini sastava; i

h. oko 3 tež.% bojila po težini sastava.

[0128] Sledeća tableta pronalaska sadrži:

a. oko 100 do 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I;

b. oko 100 do 150 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2;

c. oko 100 do 150 mg mikrokristalne celuloze;

d. oko 20 do 40 mg natrijum kroskarmeloze;

e. oko 10 do 20 mg polivinilpirolidona;

f. oko 2 do 6 mg natrijum lauril sulfata; i

g. oko 3 do 7 mg magnezijum stearata.

[0129] Sledeća tableta pronalaska sadrži:

a. oko 150 mg Jedinjenja 1 Oblika I;

b. oko 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2;

c. oko 129 mg mikrokristalne celuloze;

d. oko 29 mg natrijum kroskarmeloze;

e. oko 13 mg polivinilpirolidona;

f. oko 4 mg natrijum lauril sulfata;

g. oko 5 mg magnezijum stearata; i

h. oko 15 mg bojila.

[0130] Farmaceutski sastavi prema pronalasku mogu se preraditi u oblik tablete, kapsule, kesice, pastile ili drugog čvrstog oblika koji je pogodan za oralnu primenu. Prema tome, u nekim izvođenjima, farmaceutski sastavi su u obliku tableta.

[0131] Sledeć i aspekt pronalaska obezbeđuje farmaceutsku formulaciju koja se sastoji od tablete koja uključuje Jedinjenje 1, Oblik I, čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2, i pomoć ne supstance (npr. punilo, dezintegrant, surfaktant, vezivo, bojilo, lubrikant ili bilo koja njihova kombinacija), od kojih je svaki gore opisan i u primerima dole, pri čemu se tableta rastvara najmanje oko 50% (npr. najmanje oko 60%, najmanje oko 70%, najmanje oko 80%, najmanje oko 90%, ili najmanje oko 99%) za oko 30 minuta.

[0132] U jednom primeru, farmaceutski sastav se sastoji od tablete koja uključuje Jedinjenje 1, Oblik I, u količini od 25 mg do 400 mg, na primer 25 mg ili 50 mg, ili 75 mg, ili 100 mg, ili 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg ili 400 mg, u osnovi amorfnog Jedinjenja 2 u količini u rasponu od 25 mg do 250 mg, na primer 25 mg, ili 50 mg, ili 75 mg, ili 100 mg, ili 150 mg, 200 mg, 250 mg i jedna ili više pomoć nih supstanci (npr. punilo, dezintegrant, surfaktant, vezivo, bojilo, lubrikant ili bilo koja njihova kombinacija), od kojih je svaki gore opisan i u primerima dole, pri čemu se tableta rastvara od oko 50% do oko 100% (npr. od oko 55% do oko 95% ili od oko 60% do oko 90%) za oko 30 minuta.

[0133] Rastvaranje se može izmeriti standardnim aparatom USP Tipa II koji koristi medijum za rastvaranje od 0,1% CTAB rastvoren u 900 mL DI vode, puferisan na pH 6,8 sa 50 mM kalijum fosfata monoasikom, mešajuć i na oko 50-75 rpm na temperaturi od oko 37°C. Po jedna eksperimentalna tableta se ispituje u svakoj ispitnoj posudi aparata. Rastvaranje se takođe može izmeriti standardnim aparatom USP Tipa II koji koristi medijum za rastvaranje od 0,7% natrijum lauril sulfata rastvorenog u 900 mL 50 mM pufera natrijum fosfata (pH 6,8), mešajuć i na oko 65 rpm na temperaturi od oko 37°C. Po jedna eksperimentalna tableta se ispituje u svakoj ispitnoj posudi aparata. Rastvaranje se takođe može izmeriti standardnim aparatom USP Tipa II koji koristi medijum za rastvaranje 0,5% natrijum lauril sulfata rastvorenog u 900 mL 50 mM pufera natrijum fosfata (pH 6,8), mešajuć i na oko 65 rpm na temperaturi od oko 37°C. Po jedna eksperimentalna tableta se ispituje u svakoj ispitnoj posudi aparata.

METODE PRAVLJENJA JEDINJENJA 1 OBLIKA I I ČVRSTE DISPERZIJE KOJA SADRŽI SUŠTINSKI AMORFNO JEDINJENJE 2

Jedinjenje 1

[0134] Jedinjenje 1 se koristi kao početna tačka za Jedinjenje 1, Oblik I, i može se dobiti spajanjem kiselinsko-hloridnog dela sa aminskim delom, u skladu sa Šemama 1-4.

Šema 1. Sinteza ostatka kiselinskog hlorida

[0135] Šema 1 prikazuje preparat 1-(2,2-difluorobenzo [d] [1,3] dioksol-5-il) ciklopropankarbonil hlorida, koji se koristi u Šemi 3 za amidno povezivanje Jedinjenja 1.

[0136] Polazni materijal, 2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-karboksilna kiselina, komercijalno je dostupan od kompanije Saltigo (podružnica kompanije Lanxess Corporation). Redukcija ostatka karboksilne kiseline u 2,2-difluorobenzo[d] [1,3]dioksol-5-karboksilnoj kiselini do primarnog alkohola, prać ena konverzijom u odgovaraju ć i hlorid upotrebom tionil hlorida (SOCl2), daje 5-(hlorometil)-2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol, koji se zatim konvertuje u 2-(2,2-difluorobenzo[d] [1,3]dioksol-5-il) acetonitril koristeć i natrijum cijanid. Obrada 2-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)acetonitrila sa bazom i 1-bromo-2-hloroetanom daje 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarbonitril. Nitrilni deo u 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il) ciklopropankarbonitrilu pretvara se u karboksilnu kiselinu pomoć u baze daju ć i 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il) ciklopropankarboksilna kiselina, koja se pomoć u tionil hlorida pretvara u željeni hlorid kiseline.

Šema 2. Alternativna sinteza ostatka kiselinskog hlorida

[0137] Šema 2 prikazuje alternativnu sintezu potrebnog kiselinskog hlorida. 5-bromometil-2,2-difluoro-1,3-benzodioksol je uparen sa etil cijanoacetatom u prisustvu paladijumovog katalizatora da bi se dobio odgovarajuć i alfa cijano etil estar. Saponifikacija estarskog dela u karboksilnu kiselinu daje cijanoetilno jedinjenje. Alkilacija cijanoetilnog jedinjenja sa 1-bromo-2-hloroetanom u prisustvu baze daje cijanociklopropil jedinjenje. Tretmanom cijanociklopropilnog jedinjenja sa bazom dobija se karboksilatna sol, koja se tretiranjem kiselinom pretvara u karboksilnu kiselinu. Konverzija karboksilne kiseline u kiselinski hlorid se zatim postiže upotrebom sredstva za hlorovanje kao što je tionil hlorid ili slično.

Šema 3. Sinteza ostatka amina

[0138] Šema 3 prikazuje pripremu potrebnog terc-butil 3-(6-amino-3-metilpiridin-2-il) benzoata, koji je povezan sa 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarbonil hlorid u šemi 3 dajuć i Jedinjenje 1. Paladijum katalizovano spajanje 2-bromo-3-metilpiridina sa 3-(terc-butoksikarbonil)fenilboronom kiselinom daje terc-butil 3-(3-metilpiridin-2-il)benzoat, koji se zatim pretvara u željeno jedinjenje.

Šema 4. Formiranje soli kiseline 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksiamido)-3-metilpiridin-2-il)benzoeve kiseline

[0139] Šema 4 prikazuje spajanje 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarbonil hlorida sa terc-butil 3-(6-amino-3-metilpiridin-2-il) benzoatom korišć enjem trietil amina i 4-dimetilaminopiridina da bi se u početku dobio terc-butil estar Jedinjenja 1.

Jedinjenje 1 Oblik I

[0140] Jedinjenje 1 Oblika I se priprema raspršivanjem ili rastvaranjem oblika soli, kao što je HCl so, Jedinjenja 1 u odgovarajuć em rastvaraču tokom efikasnog vremenskog perioda. Obrada terc-butil estra kiselinom kao što je HCl, daje HCL so Jedinjenja 1, koja je tipično kristalna čvrsta supstanca. Jedinjenje 1 Oblik I se takođe može pripremiti direktno iz prekursora t-butil estra tretiranjem odgovarajuć om kiselinom, poput mravlje kiseline.

[0141] So HCl 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3] dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il) benzojeve kiseline može se koristiti za proizvodnju Oblik I dispergovanjem ili rastvaranjem HCl soli 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d] [1,3]di-oksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)benzoeva kiselina u odgovarajuć em rastvaraču efektivno dugo. Mogu se koristiti i druge soli 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)benzojeve kiseline, kao što su, na primer, soli dobijene iz drugih mineralnih ili organskih kiselina. Ostale soli su rezultat kiselinski posredovane hidrolize ostatka t-butil estra. Soli dobijene iz drugih kiselina mogu da uključuju, na primer, azotnu, sumpornu, fosfornu, bornu, sirć etnu, benzoevu i malonsku. Ovi oblici soli 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)benzojeve kiseline mogu ili ne moraju biti rastvorljive, u zavisnosti od upotrebljenog rastvarača, ali nedostatak rastvorljivosti ne ometa formiranje Jedinjenja 1 Oblika I. Na primer, u jednom izvođenju, odgovarajuć i rastvarač može biti voda ili smeša alkohol/voda, kao što je 50% smeša metanol/voda, iako je HCl oblik 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il) benzojeve kiseline samo slabo rastvorljiv u vodi. U jednom izvođenju, odgovarajuć i rastvarač je voda.

[0142] Efektivno vreme za formiranje Jedinjenja 1 Oblika I iz soli 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo [d][1,3]dioksol-5-il) ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)benzojeve kiseline može biti bilo kada između 2 i 24 sata ili više. Prepoznato je da je potrebno vreme obratno proporcionalno temperaturi. Odnosno, što je temperatura viša, manje vremena je potrebno da utiče na disocijaciju kiseline da bi se dobio Jedinjenje 1, Oblik I. Kada je rastvarač voda, mešanjem disperzije približno 24 sata na sobnoj temperaturi dobija se Jedinjenje 1, Oblik I, sa prinosom od približno 98%. Ako je rastvor soli 3-(6-(1- (2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarkarboksamido)-3-metilpiridin-2-il) benzojeve kiseline ako je poželjno za potrebe procesa, može se koristiti povišena temperatura. Nakon mešanja rastvora tokom efektivnog vremenskog perioda na povišenoj temperaturi, rekristalizacija nakon hlađenja daje suštinski čisto Jedinjenje 1, Oblik I. U jednom aspektu, suštinski čisto se odnosi na čistoć u ve ć u od oko 90%. U još jednom izvođenju, suštinski čisto se odnosi na čistoć u ve ć u od oko 95%. U još jednom izvođenju, suštinski čisto se odnosi na čisto ć u ve ć u od oko 98%. U još jednom izvođenju, suštinski čisto se odnosi na čistoć u ve ć u od oko 99%. Odabrana temperatura delimično zavisi od upotrebljenog rastvarača i dobro je u granicama moguć nosti određivanja stručnjaka u ovoj oblasti. U jednom aspektu, temperatura je između sobne temperature i oko 80°C. U još jednom izvođenju, temperatura je između sobne temperature i oko 40°C. U drugom primeru temperatura je između oko 40°C i oko 60°C. U još jednom izvođenju, temperatura je između oko 60°C i oko 80°C.

[0143] Jedinjenje 1 Oblik I se takođe može dobiti direktno od 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo [d][1,3]dioksol-5-il) ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)-t-butilbenzoat (cf. Šema 3), koji je preteča soli Jedinjenja 1. Dakle, 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il) ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)-t-butilbenzoat može da podleže reakciji sa odgovarajuć om kiselinom, kao što je, na primer, mravlja kiselina pod odgovaraju ć im reakcionim uslovima, daju ć i Jedinjenje 1 Oblik I.

[0144] Jedinjenje 1, Oblik I, se može dalje prečistiti rekristalizacijom iz organskog rastvarača. Primeri organskih rastvarača uključuju, ali nisu ograničeni na, toluen, kumen, anizol, 1-butanol, izopropil acetat, butil acetat, izobutil acetat, metil t-butil etar, metil metil izobutil keton i 1-propanol-voda smeše. Temperatura može biti kao što je gore opsano. a prmer, e n en e , , rastvara se u - utano u na o se potpuno ne rastvor. a en em rastvora na 10 °C brzinom od 0,2 °C/min dobijaju se kristali Jedinjenja 1, Oblika I koji se mogu izolovati filtracijom.

[0145] U jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I karakteriše jedan ili više vrhova na 15,2 do 15,6 stepeni, 16,1 do 16,5 stepeni i 14,3 do 14,7 stepeni u difrakciji rendgenskog zraka u prahu dobijenom upotrebom Cu K alfa zračenja. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I karakteriše jedan ili više vrhova na 15,4, 16,3 i 14,5 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I se dalje karakteriše vrhom na 14,6 do 15,0 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I dalje se karakteriše vrhom na 14,8 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I se dalje karakteriše vrhom na 17,6 do 18,0 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I je dalje okarakterisano vrhom na 17,8 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I se dalje karakteriše vrhom od 16,4 do 16,8 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I se dalje karakteriše vrhom od 16,4 do 16,8 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I se dalje karakteriše vrhom na 16,6 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I je dalje okarakterisano vrhom na 7,6 do 8,0 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I se dalje karakteriše vrhom na 7,8 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I se dalje karakteriše vrhom od 25,8 do 26,2 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I je dalje okarakterisano vrhom na 26,0 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I se dalje karakteriše vrhom od 21,4 do 21,8 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I se dalje karakteriše vrhom na 21,6 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I je dalje karakterisano vrhom na 23,1 do 23,5 stepeni. U još jednom izvođenju, Jedinjenje 1, Oblik I se dalje karakteriše vrhom na 23,3 stepena. U nekim izvođenjima, Jedinjenje 1, Oblik I se karakteriše difrakcionim uzorkom koji je u suštini sličan onome na Slici 1. U nekim izvođenjima, Jedinjenje 1, Oblik I karakteriše difrakcioni uzorak koji je u suštini sličan onome na Slici 2.

[0146] U nekim izvođenjima, raspodela veličine čestica D90 je oko 82 mm ili manje za Jedinjenje 1, Oblik I. U nekim izvođenjima, raspodela veličine čestica D50 je oko 30 mm ili manje za Jedinjenje 1, Oblik I.

Jedinjenje 2

[0147] Jedinjenje 2 je početna tačka za čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2 i može se dobiti spajanjem ostataka 4-okso-dihidrokinolin karboksilne kiseline sa aminskim delom u skladu sa Šemama 5-7.

Šema 5. Sinteza 4-okso-dihidrokuonoloin ostatka karboksilne kiseline.

Šema 6. Sinteza ostatka amina.

Šema 7. Vezivanje 4-okso-dihidrikuonolina ostatka karboksilne kiseline sa ostatkom amina.

Čvrsta Disperzija Koja Sadrži Suštinski Amorfno Jedinjenje 2

[0148] Polazeć i od Jedinjenja 2, amorfni oblik Jedinjenja 2 se može dobiti postupkom sušenja raspršivanjem. Sušenje raspršivanjem je postupak koji tečnu prehranu pretvara u osušeni oblik čestica. Po želji, sekundarni postupak sušenja, kao što je sušenje u fluidizovanom sloju ili vakumsko sušenje, se može koristiti za smanjenje rezidualnih rastvarača na farmaceutski prihvatljive nivoe. Tipično, sušenje raspršivanjem uključuje kontakt sa visoko dispergovanom tečnom suspenzijom ili rastvorom i dovoljnom zapreminom vruć eg vazduha za isparavanje i sušenje kapljica tečnosti. Preparat za sušenje raspršivanjem može biti bilo koji rastvor, gruba suspenzija, gusta smeša, koloidna disperzija ili pasta koji se mogu atomizirati pomoć u izabranog aparata za sušenje raspršivanjem. U standardnom postupku, preparat se raspršuje u struju toplog filtriranog vazduha koji isparava rastvarač i prenosi osušeni proizvod u kolektor (npr. ciklon). Tada se istrošeni vazduh iscrpljuje rastvaračem, ili se istrošeni vazduh šalje u kondenzator da uhvati i potencijalno reciklira rastvarač. Za sušenje raspršivanjem se mogu koristiti komercijalno dostupni tipovi aparata. Na primer, komercijalne sušare za raspršivanje proizvode Buchi Ltd. i Niro (npr. PSD linija sušara za prskanje koje proizvodi Niro) (vidi, US 2004/0105820; US 2003/0144257).

[0149] Sušenje raspršivanjem obično koristi čvrsta optereć enja materijala od oko 3% do oko 30 tež.% (tj. leka i ekscipijenata), na primer oko 4% do oko 20 tež.%, Poželjno najmanje oko 10%. Generalno, gornja granica čvrstih optereć enja se reguliše viskozitetom (npr. sposobnoš ć u pumpanja) rezultuju ć eg rastvora i rastvorljivoš ć u komponenata u rastvoru. Generalno, viskoznost rastvora može odrediti veličinu čestica u rezultujuć em praškastom proizvodu.

[0150] Tehnike i metode za sušenje raspršivanjem se mogu nać i u Perry’s Chemical Engineering Handbook, 6th Ed., R. H. Perry, D. W. Green & J. O. Maloney, eds.), McGraw-Hill book co. (1984); i Marshall "Atomizacija i sušenje raspršivanjem" 50, Chem. Inž. Prog. Monogr. Serija 2 (1954). Generalno, sušenje raspršivanjem se izvodi na ulaznoj temperaturi od oko 60 ° C do oko 200 ° C, na primer, od oko 95 °C do oko 185 °C, od oko 110 °C do oko 182 °C, od oko 96 °C do oko 180 °C, npr. oko 145 °C. Sušenje raspršivanjem se obično izvodi na izlaznoj temperaturi od oko 30 °C do oko 90 °C, na primer od oko 40 °C do oko 80 °C, oko 45 °C do oko 80 °C, npr. oko 75 °C. Protok atomizacije je obično od oko 4 kg/h do oko 12 kg/h, na primer, od oko 4.3 kg/h do oko 10.5 kg/h, npr., oko 6 kg/h ili oko 10.5 kg/h. Stopa napajanja je obično od oko 3 kg/h do oko 10 kg/h, na primer, od oko 3,5 kg/h do oko 9,0 kg/h, npr., oko 8 kg/h ili oko 7,1 kg/h. Odnos raspršivanja je obično od oko 0,3 do 1,7, npr. od oko 0,5 do 1,5, npr. oko 0,8 ili oko 1,5.

[0151] Uklanjanje rastvarača može zahtevati sledeć i korak sušenja, kao što je sušenje na podmetaču, sušenje u fluidnom sloju (npr. od oko sobne temperature do oko 100 °C), vakumsko sušenje, mikrotalasno sušenje, sušenje rotacionog bubnja ili bikonično vakumsko sušenje (npr. od oko sobne temperature do oko 200 °C).

[0152] U jednom izvođenju, raspršivanjem osušena disperzija se suši u fluidnom sloju.

[0153] U jednom procesu, rastvarač uključuje isparljivi rastvarač, na primer rastvarač sa tačkom ključanja manjom od oko 100 °C. U nekim izvođenjima, rastvarač uključuje smešu rastvarača, na primer smešu isparljivih rastvarača ili smešu isparljivih i neisparljivih rastvarača. Tamo gde se koriste smeše rastvarača, smeša može da sadrži jedan ili više neisparljivih rastvarača, na primer, gde je neisparljivi rastvarač prisutan u smeši sa manje od oko 15%, npr. manje od oko 12%, manje od oko 10%, manje od oko 8%, manje od oko 5%, manje od oko 3% ili manje od oko 2%.

[0154] Poželjni rastvarači su oni rastvarači gde Jedinjenje 2 ima rastvorljivost od najmanje oko 10 mg/ml (npr. najmanje oko 15 mg/ml, 20 mg/ml, 25 mg/ml, 30 mg/ml, 35 mg/ml, 40 mg/ml, 45 mg/ml, 50 mg/ml ili više). Poželjniji rastvarači uključuju one kod kojih Jedinjenje 2 ima rastvorljivost od najmanje oko 20 mg/ml.

[0155] Primeri rastvarača koji bi se mogli testirati uključuju aceton, cikloheksan, dihlorometan, N, N-dimetilacetamid (DMA), N, N-dimetilformamid (DMF), 1,3-dimetil-2-imidazolidinon (DMI), dimetil sulfoksid (DMSO), dioksan, etil acetat, etil etar, ledena sir etna kiselina (HAc), metil etil keton (MEK), N-metil-2-pirolidinon (NMP), metil terc-butil etar (MTBE), tetrahidrofuran (THF), pentan, acetonitril, metanol, etanol, izopropil alkohol, izopropil acetat i toluen. Primeri korastvarača uključuju aceton/DMSO, aceton/DMF, aceton/voda, MEK/voda, THF/voda, dioksan/voda. U sistemu sa dva rastvarača, rastvarači mogu biti od oko 0,1% do oko 99,9%. U nekim poželjnim izvođenjima, voda je rastvarač sa acetonom, gde je voda prisutna od oko 0,1% do oko 15%, na primer oko 9% do oko 11%, npr. oko 10%. U nekim poželjnim izvođenjima, voda je rastvarač sa MEK gde je voda prisutna od oko 0,1% do oko 15%, na primer oko 9% do oko 11%, npr. oko 10%. U nekim izvođenjima rastvor rastvarača uključuje tri rastvarača. Na primer, aceton i voda mogu se mešati sa treć im rastvaračem kao što su DMA, DMF, DMI, DMSO ili HAc. U slučajevima kada je u osnovi amorfno Jedinjenje 2 komponenta čvrste disperzije, poželjni rastvarači rastvaraju i Jedinjenje 2 i polimer. Pogodni rastvarači uključuju ona koja su gore opisana, na primer, MEK, aceton, voda, metanol i njihove smeše.

[0156] Veličina čestica i opseg temperaturnog sušenja se mogu izmeniti kako bi se dobila optimalna suva disperzija u spreju. Kao što bi procenili vešti stručnjaci, mala veličina čestica bi dovela do poboljšanog uklanjanja rastvarača. Podnosioci zahteva su, međutim, otkrili da manje čestice mogu dovesti do paperjastih čestica koje, u nekim okolnostima, ne pružaju optimalne suve raspršivanje raspršivanjem za dalju obradu, kao što je tabletiranje. Pri višim temperaturama može doć i do kristalizacije ili hemijske razgradnje u osnovi amorfnog Jedinjenja 2. Pri nižim temperaturama dovoljna količina rastvarača se možda neć e ukloniti. Ovde navedeni postupci pružaju optimalnu veličinu čestica i optimalnu temperaturu sušenja.

[0157] Generalno, veličina čestica je takva da je D10 (mm) manje od oko 5, npr. manje od oko 4,5, manje od oko 4,0 ili manje od oko 3,5, D50 (mm) je uglavnom manje od oko 17, npr., manje od oko 16, manje od oko 15, manje od oko 14, manje od oko 13, a D90 (mm) je obično manje od oko 175, npr., manje od oko 170, manje od oko 170, manje od oko 150, manje od oko 125, manje od oko 100, manje od oko 90, manje od oko 80, manje od oko 70, manje od oko 60, ili manje od oko manje od oko 50. Generalno, zapreminska gustina čestica sušenih raspršivanjem je od oko 0,08 g/cc do oko 0,20 g/cc, npr. od oko 0,10 do oko 0,15 g/cc, npr. oko 0,11 g/cc ili oko 0,14 g/cc. Gustina tapkanja čestica osušenih raspršivanjem uglavnom se kreć e od oko 0,08 g/cm3 do oko 0,20 g/cm3, npr. od oko 0,10 do oko 0,15 g/cm3, npr. oko 0,11 g/cm3 ili oko 0,14 g/cm3, za 10 slavine; 0,10 g/cc do oko 0,25 g/cc, npr. od oko 0,11 do oko 0,21 g/cc, npr. oko 0,15 g/cc, oko 0,19 g/cc ili oko 0,21 g/cc za 500 slavina; 0,15 g/cc do oko 0,27 g/cc, npr. od oko 0,18 do oko 0,24 g/cc, npr. oko 0,18 g/cc, oko 0,19 g/cc, oko 0,20 g/cc ili oko 0,24 g/cc za 1250 slavina; i 0,15 g/cc do oko 0,27 g/cc, npr. od oko 0,18 do oko 0,24 g/cc, npr. oko 0,18 g/cc, oko 0,21 g/cc, oko 0,23 g/cc ili oko 0,24 g/cc za 2500 slavina.

Polimeri

[0158] Ovde su takođe obuhvać ene raspršivanjem osušene disperzije, uključuju ć i amorfno Jedinjenje 2 i polimer (ili čvrsti nosač). Na primer, Jedinjenje 2 je prisutno kao amorfno jedinjenje kao komponenta čvrste amorfne disperzije. Čvrsta amorfna disperzija, generalno uključuje u osnovi amorfno Jedinjenje 2 i polimer. Primeri polimera uključuju celulozne polimere kao što su HPMC ili HPMCAS i polimere koji sadrže pirolidon kao što je PVP/VA. U nekim izvođenjima, čvrsta amorfna disperzija uključuje jedan ili više dodatnih eksipijensa, kao što je surfaktant.

[0159] U jednom izvođenju, polimer se može rastvoriti u vodenom medijumu. Rastvorljivost polimera može biti pH-nezavisna ili pH-zavisna. Potonji uključuju jedan ili više enteričnih polimera. Izraz "enterički polimer" odnosi se na polimer koji je poželjno rastvorljiv u manje kiselom okruženju creva u odnosu na kiselije okruženje želuca, na primer, polimer koji je nerastvorljiv u kiselom vodenom medijumu, ali rastvorljiv kada je pH iznad 5-6. Odgovarajuć i polimer treba da bude hemijski i biološki inertan. Da bi se poboljšala fizička stabilnost raspršenih suvih disperzija, temperatura prelaska stakla (Tg) polimera treba da bude što je moguć e ve ć a. Na primer, poželjni polimeri imaju temperaturu staklenog prelaza najmanje jednaku ili već u od temperature staklenog prelaska leka (tj. Jedinjenja 2). Ostali poželjni polimeri imaju temperaturu staklenog prelaza koja je unutar oko 10 do oko 15 °C leka (tj. Jedinjenja 2). Primeri pogodnih temperatura prelaska stakla polimera uključuju najmanje oko 90 °C, najmanje oko 95 °C, najmanje oko 100 °C, najmanje oko 105 °C, najmanje oko 110 °C, najmanje oko 115 °C, najmanje oko 120 °C, najmanje oko 125 °C, najmanje oko 130 °C, najmanje oko 135 °C, najmanje oko 140 °C, najmanje oko 145 °C, najmanje oko 150 °C , najmanje oko 155 °C, najmanje oko 160 °C, najmanje oko 165 °C, najmanje oko 170 °C ili najmanje oko 175 °C (mereno pod suvim uslovima). Bez želje da nas teorija vezuje, veruje se da je osnovni mehanizam taj da polimer sa višim Tg generalno ima nižu molekularnu pokretljivost na sobnoj temperaturi, što može biti presudni faktor u stabilizaciji fizičke stabilnosti amorfne raspršene suve disperzije.

[0160] Pored toga, higroskopnost polimera treba da bude toliko niska, npr., manja od oko 10%. U svrhu poređenja u ovoj prijavi, higroskopnost polimera ili smeše se karakteriše na oko 60% relativne vlažnosti. U nekim poželjnim rešenjima, polimer ima manje od oko 10% apsorpcije vode, na primer manje od oko 9%, manje od oko 8%, manje od oko 7%, manje od oko 6%, manje od oko 5%, manje od oko 4%, manje od oko 3% ili manje od oko 2% upijanja vode. Higroskopnost takođe može uticati na fizičku stabilnost raspršenih suvih disperzija. Generalno, vlaga adsorbovana u polimerima može u velikoj meri smanjiti Tg polimera, kao i nastale raspršene suve disperzije, što ć e dalje smanjiti fizičku stabilnost raspršenih suvih disperzija kako je gore opisano.

[0161] U jednom izvođenju, polimer je jedan ili više vodorastvorljivih polimera ili delimično vodorastvornih polimera. Vodorastvorljivi ili delimično rastvorljivi u vodi polimeri uključuju, ali nisu ograničeni na, derivate celuloze (npr. hidroksipropilmetilceluloza (HPMC), hidroksipropilceluloza (HPC)) ili etilceluloza; polivinilpirolidoni (PVP); polietilen glikoli (PEG); polivinil alkoholi (PVA); akrilati, kao što je polimetakrilat (npr. Eudragit® E); ciklodekstrini (npr. #-ciklodekstin) i njihovi kopolimeri i njihovi derivati, uključuju ć i na primer PVP-VA (polivinilpirolidon-vinil acetat).

[0162] U nekim izvođenjima, polimer je hidroksipropilmetilceluloza (HPMC), kao što je HPMCAS, HPMC E50, HPMCE15 ili HPMC60SH50).

[0163] Kao što je ovde diskutovano, polimer može biti pH zavisni enterički polimer. Takvi enterički polimeri zavisni od pH uključuju, ali nisu ograničeni na, derivate celuloze (npr. celulozni acetat ftalat (CAP)), hidroksipropil metil celulozni ftalati (HPMCP), hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinat (HPMCAS), karboksimetilceluloza (CMC) ili njegova so (npr. natrijumova so, kao što je (CMC-Na)); celulozni acetat trimellitate (CAT), hidroksipropilceluloza acetat ftalat (HPCAP), hidroksipropilmetil-celuloza acetat ftalat (HPMCAP) i metilceluloza acetat ftalat (MCAP) ili polimetakrilati (npr. Eudragit® S). U nekim izvođenjima, polimer je hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinat (HPMCAS). U nekim izvođenjima, polimer je hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinat HG (HPMCAS-HG).

[0164] U još jednom izvođenju, polimer je ko-polimer polivinilpirolidona, na primer, avinilpirolidon/vinil acetat (PVP/VA).

[0165] U izvođenjima gde Jedinjenje 2 stvara raspršenu suvu disperziju sa polimerom, na primer sa HPMC, HPMCAS ili PVP/VA polimerom, količina polimera u odnosu na ukupnu težinu raspršene suve disperzije se kreć e od oko 0,1% do 99% po težini. Ako nije drugačije naznačeno, procenti leka, polimera i drugih ekscipijenata, kako je opisano u disperziji, dati su u težinskim procentima. Količina polimera je tipično najmanje oko 20%, a poželjno najmanje oko 30%, na primer, najmanje oko 35%, najmanje oko 40%, najmanje oko 45% ili oko 50% (npr. 49,5% ). Količina je tipično oko 99% ili manje, a poželjno oko 80% ili manje, na primer oko 75% ili manje, oko 70% ili manje, oko 65% ili manje, oko 60% ili manje, ili oko 55% ili manje. U jednom izvođenju, polimer je u količini do oko 50% ukupne težine disperzije (i još preciznije, između oko 40% i 50%, kao što je oko 49%, oko 49,5% ili oko 50 %). HPMC i HPMCAS su dostupni u raznim sortama kompanije ShinEtsu, na primer, HPMCAS je dostupan u brojnim vrstama, uključujuć i AS-LF, AS-MF, AS-HF, AS-LG, AS-MG, AS-HG. Svaka od ovih vrsta varira u procentima supstitucije acetata i sukcinata.

[0166] U nekim izvođenjima, suštinski amorfno Jedinjenje 2 i polimer su prisutni u približno jednakim količinama, na primer, svaki od polimera i leka čine oko polovine procenta težine disperzije. Na primer, polimer je prisutan u oko 49,5%, a lek je u oko 50%.

[0167] U nekim izvođenjima, suštinski amorfno Jedinjenje 2 i kombinovani polimer predstavljaju 1% do 20% w/w ukupnog sadržaja čvrste supstance ne-raspršene suve disperzije pre sušenja raspršivanjem. U nekim izvođenjima, suštinski amorfno Jedinjenje 2 i kombinovani polimer predstavljaju 5% do 15% w/w ukupnog sadržaja čvrste supstance ne-raspršene suve disperzije pre sušenja raspršivanjem. U nekim izvođenjima, suštinski amorfno Jedinjenje 2 i kombinovani polimer predstavljaju oko 11% w/w ukupnog sadržaja čvrste supstance ne-raspršene suve disperzije pre sušenja raspršivanjem.

[0168] U nekim izvođenjima, disperzija dalje uključuje i druge manje sastojke, kao što je surfaktant (npr. SLS). U nekim izvođenjima, surfaktant je prisutan u manje od oko 10% disperzije, na primer manje od oko 9%, manje od oko 8%, manje od oko 7%, manje od oko 6%, manje od oko 5%, manje od oko 4%, manje od oko 3%, manje od oko 2%, oko 1% ili oko 0,5%.

[0169] U izvođenjima koje uključuju polimer, polimer treba da bude prisutan u količini efikasnoj za stabilizaciju raspršene suve disperzije. Stabilizacija uključuje inhibiranje ili sprečavanje kristalizacije suštinski amorfnog Jedinjenja 2. Takvo stabilizovanje inhibirać e konverziju Jedinjenja 2 iz amorfnog u kristalni oblik. Na primer, polimer bi sprečio barem jedan deo (npr. oko 5%, oko 10%, oko 15%, oko 20%, oko 25%, oko 30%, oko 35%, oko 40%, oko 45%, oko 50%, oko 55%, oko 60%, oko 65%, oko 70%, oko 75% ili više) Jedinjenja 2 iz pretvaranja iz amorfnog u kristalni oblik. Stabilizacija se može meriti, na primer, merenjem temperatura staklene tranzicije suve disperzije u spreju, merenjem brzine opuštanja amorfnog materijala ili merenjem rastvorljivosti ili bioraspoloživosti Jedinjenja 2.

[0170] Pogodni polimeri za upotrebu u kombinaciji sa Jedinjenjem 2, na primer za formiranje suve disperzije u spreju, poput amorfne suve disperzije u spreju, treba da imaju jedno ili više sledeć ih svojstava:

[0171] Temperatura staklene tranzicije polimera treba da ima temperaturu nižu od oko 10-15 °C nižu od temperature staklene tranzicije u osnovi amorfnog Jedinjenja 2. Poželjno je da temperatura staklene tranzicije polimera bude već a od temperature staklene tranzicije suštinski amorfnog Jedinjenja 2, i uopšte najmanje 50 °C više od željene temperature skladištenja leka. Na primer, najmanje oko 100 °C, najmanje oko 105 °C, najmanje oko 105 °C, najmanje oko 110 °C, najmanje oko 120 °C, najmanje oko 130 °C, najmanje oko 140 °C, najmanje oko 150 °C, najmanje oko 160 °C, najmanje oko 160 °C ili više.

[0172] Polimer treba da bude relativno nehigroskopan. Na primer, polimer treba, kada se čuva u standardnim uslovima, da apsorbuje manje od oko 10% vode, na primer, manje od oko 9%, manje od oko 8%, manje od oko 7%, manje od oko 6%, ili manje od oko 5%, manje od oko 4% ili manje od oko 3% vode. Poželjno je da polimer, kada se čuva u standardnim uslovima, u osnovi bude bez apsorbovane vode.

[0173] Polimer treba da ima sličnu ili bolju rastvorljivost u rastvaračima pogodnim za postupke sušenja raspršivanjem u odnosu na Jedinjenje 2. U poželjnim izvođenjima, polimer ć e se rastopiti u jednom ili više istih rastvarača ili sistema rastvarača kao Jedinjenje 2. Poželjno je da je polimer rastvorljiv u najmanje jednom rastvaraču koji ne sadrži hidroksi, kao što je metilen hlorid, aceton ili njihova kombinacija.

[0174] Polimer, kada se kombinuje sa suštinski amorfnim Jedinjenjem 2, na primer u raspršivačkoj suvoj disperziji ili u tečnoj suspenziji, treba da poveć a rastvorljivost Jedinjenja 2 u vodenom i fiziološki relativnom medijumu bilo u odnosu na rastvorljivost Jedinjenja 2 u odsustvu polimera ili u odnosu na rastvorljivost Jedinjenja 2 kada se kombinuje sa referentnim polimerom. Na primer, polimer može da poveć a rastvorljivost amorfnog Jedinjenja 2 smanjenjem količine amorfnog Jedinjenja 2 koje se pretvara u kristalno Jedinjenje 2, bilo iz čvrste amorfne disperzije ili iz tečne suspenzije.

[0175] Polimer treba da smanji stopu relaksacije amorfne supstance.

[0176] Polimer treba da pove ć a fizičku i/ili hemijsku stabilnost suštinski amorfnog Jedinjenja 2.

[0177] Polimer bi trebalo da poboljša moguć nost izrade suštinski amorfnog Jedinjenja 2.

[0178] Polimer treba da poboljša jedno ili više svojstava rukovanja, davanja ili skladištenja u suštini amorfnog Jedinjenja 2.

[0179] Polimer ne bi trebalo da reaguje nepovoljno sa drugim farmaceutskim komponentama, na primer sa ekscipijentima.

[0180] Pogodnost kandidata polimera (ili druge komponente) se može ispitati upotrebom ovde opisanih metoda sušenja raspršivanjem (ili drugih metoda) da bi se dobio amorfni sastav. Sastav kandidata se može uporediti u pogledu stabilnosti, otpornosti na stvaranje kristala ili drugih svojstava, i uporediti ga sa referentnim preparatom, npr. preparatom čistog amorfnog Jedinjenja 2 ili kristalnog Jedinjenja 2. Na primer, sastav kandidat može biti testirana da se utvrdi da li inhibira vreme do početka kristalizacije posredovane rastvaračem ili procenat konverzije u određenom vremenu pod kontrolisanim us ov ma, za na man e , , , ao re erentn preparat, se sastav an at mogao testrat a se utvrdilo da li ima poboljšanu bioraspoloživost ili rastvorljivost u odnosu na kristalno Jedinjenje 2.

Surfaktanti

[0181] Suva disperzija u spreju može sadržati surfaktant. Surfaktant ili smeša surfaktanta bi generalno smanjila međufaznu napetost između suve disperzije u spreju i vodenog medija. Odgovarajuć i surfaktant ili smeša surfaktanata takođe mogu poboljšati rastvorljivost u vodi i bioraspoloživost Jedinjenja 2 iz raspršene suve disperzije. Surfaktanti za upotrebu u vezi sa ovim pronalaskom uključuju, ali nisu ograničeni na, estere sorbitan masnih kiselina (npr. Spans®), estre polioksietilen sorbitan masnih kiselina (npr. Tweens®), natrijum lauril sulfat (SLS), natrijum dodecilbenzen sulfonat (SDBS) dioktil natrijum sulfosukcinat (dokusat), natrijum-so dioksiholne kiseline (DOSS), sorbitan-montesterat, sorbitan-tristearat, heksadecil-trimetil-amonijum-bromid (HTAB), natrijum N-lauroillsarkozin natrijum-natrijum-natrijum-natrijum-natrijumnatrijum Stearat, natrijum palmitat, Gelucire 44/14, etilendiamin tetracetna kiselina (EDTA), vitamin E d-alfa tokoferil polietilen glikol 1000 sukcinat (TPGS), lecitin, MV 677-692, mono-natrijum monohidrat glutanske kiseline, labrasol, PEG 8 kapril / kaprinski gliceridi, Transcutol, dietilen glikol monoetil etar, Solutol HS-15, polietilen glikol / hidroksistearat, tauroholna kiselina, Pluronic F68, Pluronic F108 i Pluronic F127 (ili bilo koji drugi polioksietilen-polioksipropilenski kopolimeri (Pluronics®) ili zasić eni poliglikolizovani gliceridi (Gelucirs®)). Specifični primeri takvih površinski aktivnih supstanci koje se mogu koristiti u vezi sa ovim pronalaskom uključuju, ali nisu ograničene na, Span 65, Span 25, Tween 20, Capryol 90, Pluronic F108, natrijum lauril sulfat (SLS), vitamin E TPGS, pluronike i kopolimere. Generalno je poželjna SLS.

[0182] Količina surfaktanta (npr. SLS) u odnosu na ukupnu težinu raspršene suve disperzije može biti između 0,1-15%. Poželjno je da je od oko 0,5% do oko 10%, još poželjnije od oko 0,5 do oko 5%, npr. oko 0,5 do 4%, oko 0,5 do 3%, oko 0,5 do 2%, oko 0,5 do 1%, ili oko 0,5%.

[0183] U određenim izvođenjima, količina surfaktanta u odnosu na ukupnu težinu raspršene suve disperzije je najmanje oko 0,1%, poželjno oko 0,5%. U ovim izvođenjima, surfaktant bi bio prisutan u količini ne više od oko 15%, a poželjno ne više od oko 12%, oko 11%, oko 10%, oko 9%, oko 8%, oko 7%, oko 6%, oko 5%, oko 4%, oko 3%, oko 2% ili oko 1%. Poželjno je izvođenje u kojem je surfaktant u količini od oko 0,5 po težini.

[0184] Surfaktanti kanditati (ili druge komponente) se mogu testirati na pogodnost za upotrebu u pronalasku na način sličan onom opisanom za ispitivanje polimera.

METODE ZA PRAVLJENJE FARMACEUTSKIH SASTAVA

[0185] Farmaceutski sastavi prema pronalasku se mogu proizvesti vlažnom granulacijom, sabijanjem ili kompresovanjem dodataka ili sastava, na primer praha ili granula, pod pritiskom da bi se dobio stabilan trodimenzionalni oblik (npr. tableta). Kako se ovde koristi, "tableta" uključuje komprimovane farmaceutske dozne jedinice svih oblika i veličina, bilo da su obložene ili neobložene.

[0186] Termin "tableta", kako se ovde koristi, se odnosi na fizički diskretnu jedinicu agensa koja odgovara pacijentu koji se leči. Generalno, zbijena smeša ima gustinu već u od smeše pre sabijanja. Tableta za doziranje prema pronalasku može imati gotovo bilo koji oblik, uključujuć i konkavne i/ili konveksne površine, zaobljene ili uglate uglove i zaobljeni do pravolinijski oblik. U nekim izvođenjima, kompresovane tablete prema pronalasku sadrže zaobljenu tabletu sa ravnim površinama. Tablete prema pronalasku se mogu pripremiti bilo kojim postupkom sabijanja i kompresije koji su poznati stručnjacima u struci oblikovanja komprimovanih čvrstih farmaceutskih oblika doziranja. U posebnom obliku, ovde date formulacije mogu se pripremiti primenom konvencionalnih metoda poznatih stručnjacima u polju farmaceutske formulacije, kao što je opisano, na primer, u odgovarajuć im udžbenicima. Videti, na primer, Remington: Nauka i Praksa farmacije, 21. izdanje, Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md. (2003); Ansel et al., Farmaceutski oblici doziranja i sistemi za isporuku lekova, 7. izdanje, Lippincott Williams & Wilkins, (1999); Priručnik o farmaceutskim ekscipijentima, 4. izdanje, Rove et al., Eds., American Pharmaceuticals Association (2003); Gibson, Pharmaceutical Preformulation And Formulation, CRC Press (2001), ove reference ovde su ovde uključene kao referenca u celosti.

Granulacija i Kompresija

[0187] U nekim izvođenjima, sastojci se mere prema ovde postavljenoj formuli. Dalje, svi intra-granularni sastojci se proseju i dobro izmešaju. Sastojci se mogu podmazati odgovarajuć im lubrikantom, na primer, magnezijum stearatom. Sledeć i korak se može sastojati od zbijanja/mešanja dodataka praha i sastojaka veličine. Slede ć e, zbijene mešavine se melju u granule i proseju da bi se dobila željena veličina. Dalje, granule se mogu dalje podmazivati, na primer, magnezijum stearatom. Zatim se granulirani sastav pronalaska može kompresovati na pogodnim štancama u različite farmaceutske formulacije u skladu sa pronalaskom. Po želji tablete mogu biti obložene filmom, bojilom ili drugim premazom.

[0188] Sledeć i aspekt pronalaska pruža postupak za proizvodnju farmaceutskog sastava koji se sastoji od obezbeđivanja smeše koja sadrži Jedinjenje 1, Oblik I, čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2 i jedan ili više pomoć nih sastojaka izabranih između: punila, razblaživača, veziva, surfaktanta, lubrikanta, dezintegranta i kompresovanja smeše u tabletu koja ima rastvaranje od najmanje oko 50% za oko 30 minuta.

[0189] U još jednom izvođenju, izvodi se postupak vlažne granulacije da bi se farmaceutska formulacija pronalaska dobila iz primese praškastih i tečnih sastojaka. Na primer, vaga se farmaceutski sastav koji sadrži smeše koja sadrži Jedinjenje 1, Oblik I, čvrstu disperziju koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2 i jedan ili više pomoć nih sastojaka izabranih iz: punila, veziva, surfaktanta ili dezintegratora mereni su prema ovde postavljenoj formuli. Dalje, svi intragranularni sastojci se proseju i pomešaju u granulatoru sa visokim ili malim krunjenjem, koristeć i vodu ili vodu sa surfaktantom ili vodu sa vezivom ili vodu sa surfaktantom i vezivom za granuliranje mešavine praha. Tečnost koja nije voda takođe se može koristiti sa surfaktantom ili bez njega i/ili vezivom za granuliranje mešavine praha. Dalje, vlažne granule se po želji mogu mleti pomoć u odgovaraju ć eg mlina. Dalje, voda se po želji može ukloniti iz smeše sušenjem sastojaka na bilo koji pogodan način. Dalje, osušene granule se po želji mogu mleti do potrebne veličine. Dalje, mešanjem se mogu dodati ekstra zrnasti pomoć ni sastojci (na primer punilo, razblaživač i dezintegrator). Dalje, granule određene veličine se mogu dalje podmazati magnezijum stearatom i sredstvom za raspadanje, na primer natrijum kroskarmelozom. Zatim se granulirani sastav pronalaska može prosejati dovoljno vremena da se dobije tačna veličina i zatim kompresovati na pogodnim štancama u razne farmaceutske formulacije u skladu sa pronalaskom. Po želji, tablete mogu biti obložene filmom, bojilom ili drugim premazom. Iznenađujuć e, mokra granulacija se može izvršiti bez značajnog gubitka čvrstih oblika Jedinjenja 1 Oblika I ili suštinski amorfnog Jedinjenja 2.

[0190] U posebno favorizovanom izvođenju, farmaceutski sastavi ovog pronalaska se pripremaju kontinuiranim postupkom vlažne granulacije sa procesom dvostrukog zavrtnja vlažne granulacije (TSWG). Kontinuirana proizvodnja donosi visokokvalitetne i vrlo konzistentne proizvode sa on-line nadzorom i kontrolom. Kontinuirana proizvodnja takođe olakšava kvalitet razvojem dizajna sa dizajnerskim prostorom „bogatim podacima“ i lakšim za razumevanje uticajem uzlaznih varijabli na nizvodni proces i kvalitet finalnog proizvoda. Pored toga, farmaceutski sastavi ovog pronalaska se mogu rano finalizovati na komercijalnoj opremi koja izbegava rizike od poveć anja i promene formulacije u kasnom razvoju. Konačno, kontinuirana proizvodnja ima komercijalne proizvodne prednosti kao što su poboljšana kontrola procesa, smanjeno rukovanje proizvodima i efikasnost puštanja u realnom vremenu. Ukupni rezultat je robusniji, upravljiviji i skalabilniji postupak koji ima manje provera procesa što rezultira poveć anim kvalitetom proizvoda i samim tim ve ć om sigurnoš ć u pacijenta. Ove prednosti se bave zabrinutošć u Janet Woodcock (direktorke Centra za evaluaciju i istraživanje lekova (CDER)) da hemija, proizvodnja i kontrole (CMC) neć e mo ć i da prate brzi klinički razvoj visoko efikasnih terapija (" Ono što vidimo je da ć e često korak koji ograničava stopu biti proizvodnja,“ 24. jula 2013. Prijatelji Raka bili su doma ć ini kongresnog brifinga„ Odgovaranje na nužnu potrebu: ubrzanje tretmana za spašavanje života pacijenata“ kako bi razgovarali o Probojnoj Odluci za Terapiju Uprave za Hranu i Lekove).

[0191] Na primer, granulacija visokog krunjenja (HSG), uobičajena tehnika granulacije, dobro je poznata po riziku od prevelike granulacije i loše kontrole procesa. Proširenje ovog procesa je vrlo izazovno i uključuje značajan rizik. Prelazak sa HSG procesa na kontinuirani TSWG proces, omoguć ava proširivanje pomo ć u iste opreme za proizvodnju različitih veličina serije, dužim radom. Ovo eliminiše rizik od poveć anja koji se često susre ć e sa drugim procesima granulacije. Pored toga, utvrđeno je da je postupak TSWG robusniji i da je manje osetljiv na prekomernu granulaciju. Kao što se može videti na slici 3 za tabletu Jedinjenja 1, HSG postupak je pokazao značajno usporavanje rastvaranja sa poveć anjem sadržaja vode, dok TSWG postupak nije pokazao promenu za sličan opseg dodavanja vode. Iznenađujuć e, nisu pronađene promene performansi kod formulacija tableta koje sadrže Jedinjenje 1 između 45-55 težinskih procenata i formulacija tableta koje sadrže Jedinjenje 1 između 60-70 težinskih procenata primenom proces dvostrukog zavrtnja vlažne granulacije. To nije bio slučaj sa HSG postupkom. Pored toga, ovaj kontinuirani i poveć ani kvalitet proizvoda obrađuje uobičajenu žalbu FDA u vezi sa nedostatkom lekova za pacijente kojima je to potrebno.

[0192] U jednom izvođenju kontinuirani proces započinje hranjenjem pojedinačnih ekscipijenata, Jedinjenja 1 i Jedinjenja 2 u kontinuirani linijski blender putem hranjenja gubitkom u težini. Iz ovog blendera materijal se kontinuirano transportuje i obrađuje dvostrukim zavrtnjem mokre granulacije, sušenjem, mlevenjem, dodavanjem ekstra-zrnastih ekscipijenata, mešanjem, kompresijom i oblaganjem filmom.

[0193] Na primer, u jednom izvođenju, tableta koja sadrži Jedinjenje 1 i Jedinjenje 2 se može kontinuirano pripremati u skladu sa donjim dijagramom toka.

[0194] Svaki od sastojaka ove primerne smeše je opisan gore i u Primerima dole. Dalje, smeša može sadržati opcione aditive, kao što su jedno ili više bojila, jedan ili više ukusa i/ili jedan ili više mirisa kako je gore opisano i u Primerima dole. U nekim izvođenjima, relativne koncentracije (npr. tež.%) svakog od ovih sastojaka (i bilo kojih neobaveznih aditiva) u smeši su takođe predstavljene gore i u primerima dole. Sastojci koji čine primesu se mogu dobiti uzastopno ili u bilo kojoj kombinaciji dodataka; i, sastojci ili kombinacija sastojaka mogu se dobiti u bilo kom redosledu. U jednom aspektu, lubrikant je poslednja komponenta dodata u smešu.

[0195] U još jednom izvođenju, smeša sadrži kompoziciju Jedinjenja 1, Oblika I, čvrstu disperziju suštinski amorfnog Jedinjenja 2 i bilo koji jedan ili više ekscipijenata; vezivno sredstvo, surfaktant, razblaživač, lubrikant, sredstvo za raspadanje i punilo, pri čemu je svaki od ovih sastojaka u obliku praha (na primer, u obliku čestica srednjeg ili prosečnog prečnika, merenog rasipanjem svetlosti, od 250 mm ili manje (npr. 150 mm ili manje, 100 mm ili manje, 50 mm ili manje, 45 mm ili manje, 40 mm ili manje ili 35 mm ili manje)).

[0196] U još jednom izvođenju, kompresovanje dodatka u tabletu se postiže punjenjem oblika (npr. kalupa) smešom i pritiskom na smešu. To se može postić i pomo ć u kalupa za presovanje ili drugog sličnog aparata. U nekim izvođenjima, smeša Jedinjenja 1 Oblika I, čvrsta disperzija koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2 i ekcipijente se može prvo preraditi u zrnasti oblik. Granule se zatim mogu dimenzionisati i kompresovati u tablete ili formulisati za inkapsulaciju prema poznatim postupcima u farmaceutskoj struci. Takođe je primeć eno da se primena pritiska na smešu u obliku može ponoviti primenom istog pritiska tokom svakog presovanja ili upotrebom različitih pritisaka tokom presovanja. U drugom primeru, primesa sastojaka ili granula u prahu se može kompresovati pomoć u kalupa koji pritiska dovoljno da se formira tableta sa rastvaranjem od oko 50% ili više za oko 30 minuta (npr. oko 55% ili više za oko 30 minuta ili oko 60% ili više na oko 30 minuta). Na primer, dodatak se kompresuje pomoć u kalupa da bi se dobila tvrdo ć a tablete od najmanje oko 5 kP (najmanje oko 5,5 kP, najmanje oko 6 kP, najmanje oko 7 kP, najmanje oko 10 kP ili najmanje 15 kP). U nekim slučajevima, dodatak se kompresuje da bi se dobila tvrdoć a tablete između oko 5 i 20 kP.

[0197] U nekim izvođenjima, tablete koje sadrže ovde opisan farmaceutski sastav mogu biti obložene sa oko 3,0 tež.% obloge od filma koja sadrži bojilo po težini tablete. U određenim slučajevima, suspenzija ili rastvor bojila koji se koriste za oblaganje tableta sadrže oko 20 tež.% čvrstih supstanci po težini suspenzije ili rastvora bojila. U još daljim slučajevima, obložene tablete mogu biti označene logotipom, drugom slikom ili tekstom.

[0198] U još jednom izvođenju, postupak za proizvodnju farmaceutskog sastava obuhvata obezbeđivanje smeše čvrstih oblika, npr. primesa praškastih i/ili tečnih sastojaka, smeša koja sadrži Jedinjenje 1, Oblik I, čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2 i jedan ili više pomoć nih sastojaka izabranih iz: veziva, razblaživača, surfaktanta, lubrikanta, dezintegranta i punila; mešanje smeše sve dok smeša u osnovi ne postane homogena i kompresovanje ili zbijanje smeše u granularni oblik. Tada se granulirani sastav koji sadrži Jedinjenje 1 Oblika I i čvrstu disperziju koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2 može kompresovati u tablete ili formulisati u kapsule kako je gore opisano ili u primerima dole. Alternativno, postupci za proizvodnju farmaceutskog sastava uključuju obezbeđivanje smeše Jedinjenja 1 Oblika I, čvrste disperzije koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2 i jednog ili više ekscipijenata, npr. vezivo, razblaživač, surfaktant, lubrikant, dezintegrant i punilo; mešanje dodatka sve dok smeša ne postane u osnovi homogena i kompresovanje/zbijanje smeše u granularni oblik primenom procesa mokrog sabijanja granula sa visokim krunjenjem kako je opisano u primerima u nastavku. Farmaceutske formulacije, na primer ovde opisana tableta, se mogu napraviti koristeć i granule pripremljene koje sadrže Jedinjenje 1, Oblik I i čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2 pored odabranih pomoć nih sastojaka koji su ovde opisani.

[0199] U nekim izvođenjima, smeša se meša mešanjem, blendiranjem, muć kanjem ili slično koriš ć enjem ručnog mešanja, miksera, blendera, bilo koje njihove kombinacije ili slično. Kada se sastojci ili kombinacije sastojaka dodaju uzastopno, može doć i do mešanja između uzastopnih dodavanja, kontinuirano tokom dodavanja sastojaka, nakon dodavanja svih sastojaka ili kombinacija sastojaka, ili bilo koje njihove kombinacije. Dodatak se meša dok ne dobije suštinski homogen sastav.

[0200] U još jednom izvođenju, ovaj pronalazak obuhvata mlazno mlevenje farmaceutskog sastava koji sadrži Jedinjenje 1, Oblik I i čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2 u pogodnom, konvencionalnom aparatu za mlevenje, koristeć i vazdušni pritisak pogodan za proizvodnju čestica sa značajnim udelom veličine čestice između 0,1 mikrona i 50 mikrona. U još jednom izvođenju, veličina čestica je između 0,1 mikrona i 20 mikrona. U još jednom izvođenju, veličina čestica je između 0,1 mikrona i 10 mikrona. U još jednom izvođenju, veličina čestica je između 1,0 mikrona i 5 mikrona. U još jednom izvođenju, farmaceutski sastav ima veličinu čestica D50 od 2,0 mikrona.

[0201] Formulacije ovog pronalaska pružaju fiksnu dozu dva API-ja za efikasno lečenje cistične fibroze, kombinacija koja je dobila jednu od samo dve Probojne Odluke za Terapiju od FDA, i to sa iznenađujuć om stabilnoš ć u mereno malim gubicima amorfnog čvrstog oblika Jedinjenja 2. Slika 4 prikazuje malu količinu kristalnosti Jedinjenja 2 tokom vremena u PC-XVII na 50 °C nakon prethodnog uravnoteženja pri 60% relativne vlažnosti. Čak i nakon blizu 1000 sati pod ovim uslovima, kristalizovalo se manje od 5% po težini Jedinjenja 2. Slika 5 pokazuje za PC-XVII da je čak i na višoj temperaturi od 60 °C, nakon prethodnog uravnoteženja pri 60% relativne vlažnosti, blizu 1000 sati pod ovim uslovima, kristalizovalo se manje od 10% težine Jedinjenja 2. Slike 6 i 7 pokazuju slične rezultate za PC-XIX. Stoga sadašnje formulacije pružaju pogodnost fiksne doze dva prodorna API-ja u iznenađujuć e stabilnom farmaceutskom sastavu. Takve formulacije poveć avaju usklađenost pacijenta što se direktno odnosi na efikasno lečenje bolesti.

[0202] Dozni oblici pripremljeni kao gore mogu biti podvrgnuti in vitro procenama rastvaranja prema Testu 711 „Rastvaranje“ u Farmakopeji Sjedinjenih Država 29, Farmakopejska konvencija Sjedinjenih Država, Inc., Rockville, Md., 2005 („USP“), da bi se utvrdila stopa pri kojoj se aktivna supstanca oslobađa iz doznih oblika. Sadržaj aktivne supstance i nivoi nečisto ć a pogodno se mere tehnikama poput tečne hromatografije visokih performansi (HPLC).

[0203] U nekim izvođenjima, pronalazak uključuje upotrebu ambalažnih materijala kao što su kontejneri i zatvarači od polietilena velike gustine (HDPE), polietilena male gustine (LDPE) i/ili polipropilena i/ili stakla, staklene folije, aluminijumskih kesica i blistera ili traka sastavljen od aluminijuma ili polivinilhlorida velike gustine (PVC), po izboru uključujuć i sušilo, polietilen (PE), poliviniliden dihlorid (PVDC), PVC/PE/PVDC i slično. Ovi materijali za pakovanje se mogu koristiti za skladištenje različitih farmaceutskih sastava i formulacija na sterilni način nakon odgovarajuć e sterilizacije pakovanja i njegovog sadržaja upotrebom hemijskih ili fizičkih tehnika sterilizacije koje se obično koriste u farmaceutskim tehnikama.

METODE UPRAVLJANJA FARMACEUTSKIM SASTAVIMA

[0204] U jednom aspektu, farmaceutski sastavi prema pronalasku se mogu davati pacijentu jednom dnevno ili otprilike na svaka dvadeset i četiri sata. Alternativno, farmaceutski sastavi prema pronalasku se mogu davati pacijentu dva puta dnevno. Alternativno, farmaceutski sastav pronalaska se može primenjivati otprilike na svakih dvanaest sati. Ovi farmaceutski sastavi se daju u obliku oralnih formulacija koje sadrže oko 25 mg, 50 mg, 100 mg, 125 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg ili 400 mg Jedinjenja 1 Oblika I; i oko 25 mg, 50 mg, 100 mg, 125 mg, 150 mg, 200 mg ili 250 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. U ovom aspektu, pored Jedinjenja 1 Oblika I i suštinski amorfnog Jedinjenja 2, farmaceutski sastavi sadrže punilo; dezintegrant; surfaktant; vezivo; i lubrikant (u zavisnosti od toga da li je farmaceutski sastav granula ili tableta). Na primer, doza od 400 mg Jedinjenja 1 Oblika I može sadržati dve tablete pronalaska, svaka sadrži 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I. Doza od 250 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 može sadržati dve tablete pronalaska koji sadrže 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2.

[0205] Takođe ć e se uvideti da se jedinjenje i farmaceutski prihvatljivi sastavi i formulacije pronalaska mogu koristiti u kombinovanim terapijama; to jest, Jedinjenje 1 Oblika I i čvrsta disperzija suštinski amorfnog Jedinjenja 2 i njihovi farmaceutski prihvatljivi sastavi se mogu primenjivati istovremeno, pre ili posle jednog ili više drugih željenih terapeutskih ili medicinskih postupaka.

[0206] U jednom izvođenju, dodatni terapeutski agens se bira između mukolitičkog agensa, bronhodijalata, antibiotika, antiinfektivnog sredstva, antiinflamatornog sredstva, jedinjenja koje indukuje CFTR aktivnost različitu od Jedinjenja 1 Oblika I i suštinski amorfnog Jedinjenja 2, ili nutritivnog agensa.

[0207] U jednom izvođenju, dodatni agens je (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid. U još jednom izvođenju, dodatni agens je 4-(3-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il) ciklopropankarboksamido) izokinolin-1-il)benzojeva kiselina. U još jednom izvođenju, dodatni agens je izabran iz Tabele 1:

Tabela 1.

[0208] U još jednom izvođenju, dodatni agens je bilo koja kombinacija gore navedenih agensa. Na primer, kombinacija može sadržati farmaceutski sastav ili tabletu ovog pronalaska koja sadrži Jedinjenje 1, Oblik I i čvrstu disperziju suštinski amorfnog Jedinjenja 2, a dodatno terapeutski agens je (R)-1-(2,2- difluorobenzo [d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid. U drugom primeru, kombinacija može sadržati farmaceutski sastav ili tabletu ovog pronalaska koja sadrži Jedinjenje 1, Oblik I i čvrstu disperziju suštinski amorfnog Jedinjenja 2, a dodatni terapeutski agens je 4-(3-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il) ciklopropankarboksamido) izo-kinolin-1-il)benzojeva kiselina. U drugom primeru, kombinacija može sadržati farmaceutski sastav ili tabletu ovog pronalaska koja sadrži Jedinjenje 1, Oblik I i čvrstu disperziju u osnovi amorfnog Jedinjenja 2, a dodatni terapeutsko agens je bilo koje od jedinjenja iz Tabele 1, tj. Jedinjenja 1 do 14 iz Tabele 1, ili bilo koja njihova kombinacija.

[0209] U još jednom izvođenju, dodatni agens je izabran iz Tabele 1:

[0210] U još jednom izvođenju, dodatni agens je izabran iz Tabele 2:

[0211] U jednom izvođenju, dodatni terapeutski agens je antibiotik. Primeri antibiotika koji su ovde korisni uključuju tobramicin, uključujuć i prah za inhalaciju tobramicina (TIP), azitromicin, kajston, aztreonam, uključuju ć i aerosolizovani oblik aztreonama, amikacin, uključujuć i njegove liposomske formulacije, ciprofloksacin, uključuju ć i njegove formulacije pogodne za inhalaciju, levoflaksacin uključujuć i njihove aerosolizovane formulacije i kombinacije dva antibiotika, npr. fosfomicin i tobramicin.

[0212] U još jednom izvođenju, dodatno sredstvo je mukolit. Uzorni mukoliti koji su ovde korisni uključuju Pulmozim®.

[0213] U još jednom izvođenju, dodatno sredstvo je bronhodilatator. Primeri bronhodilatatora uključuju albuterol, metaproterenol sulfat, pirbuterol acetat, salmeterol ili tetrabulin sulfat.

[0214] U još jednom izvođenju, dodatno sredstvo je efikasno u obnavljanju tečnosti na pluć nim disajnim putevima. Takva sredstva poboljšavaju kretanje soli u i iz ć elija, omogu ć avaju ć i sluzi u plu ć nim disajnim putevima da se više hidrira i, prema tome, lakše čisti. Primeri takvih sredstava uključuju hipertonski fiziološki rastvor, denufosol tetrasodijum ([[(3S, 5R)-5-(4-amino-2-oksopirimidin-1-il)-3-hidroksioksolan-2-il]metoksi-hidroksifosforil] [[[(( 2R, 3S, 4R, 5R)-5-(2,4-dioksopirimidin-1-il)- 3,4-dihidroksioksolan-2-il] metoksi-hidroksifosforil]oksi-hidroksifosforil] hidrogen-fosfat) ili bronhitol (inhalirana formulacija manitola).

[0215] U još jednom izvođenju, dodatno sredstvo je antiinflamatorni agens, tj. agens koje može smanjiti zapaljenje u pluć ima. Primeri takvih ovde korisnih sredstava uključuju ibuprofen, dokozaheksansku kiselinu (DHA), sildenafil, inhalacioni glutation, pioglitazon, hidroksihlorokin ili simavastatin.

[0216] U još jednom izvođenju, dodatni agens je jedinjenje koje poveć ava ili indukuje aktivnost CFTR koja nije Jedinjenje 1 Oblika I ili čvrsta disperzija koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2, tj. agens koji ima efekat indukovanja ili poveć anja aktivnosti CFTR. Primeri takvih sredstava uključuju ataluren („PTC124®“; 3-[5-(2-fluorofenil)-1,2,4-oksadiazol-3-il]benzojeva kiselina), sinapultid, lankovutid, depelestat (humani rekombinantni inhibitor elastaze neutrofila) i kobiproston (7-{(2R, 4aR, 5R, 7aR)-2 -[(3S)-1,1-difluoro-3-metilpentil]-2-hidroksi-6-oksoktahidroci-klopenta [b] piran-5-il}heptanska kiselina).

[0217] U još jednom izvođenju, dodatni agens je hranljivi agens. Primeri hranljivih agensa uključuju pankrelipazu (zamena enzima pankreasa), uključujuć i Pancrease®, Pancreacarb®, Ultrase® ili Creon®, Liprotomase® (ranije Trizitek®), Akuadeks® ili inhalaciju glutationa. U jednom izvođenju, dodatno hranljivo sredstvo je pankrelipaza.

[0218] U još jednom izvođenju, dodatni agens je jedinjenje odabrano između gentamicina, kurkumina, ciklofosfamida, 4-fenilbutirata, miglustata, felodipina, nimodipina, filoksina B, geništajna, apigenina, cAMP/cGMP pojačivača ili induktora kao što su rolipram, sildenafil, milrinone, tadalafil, amrinon, izoproterenol, albuterol i almeterol, deoksispergualin, inhibitori HSP 90, inhibitori HSP 70, inhibitori proteosoma kao što su epoksomicin, laktacistin itd.

[0219] U još jednom izvođenju, dodatni agens je jedinjenje odabrano između 3-amino-6-(4-fluoro-fenil)-5-trifluorometilpiridin-2-karboksilne kiseline (3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid; (3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid 5-amino-6’-metil-3-trifluor-ometil-[2,3] bipiridinil-6-karboksilne kiseline; 3-amino-6-ciklopropil-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metilpropil)-5-(trifluorometil) pikolinamid; 3-amino-6-metoksi-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-(trifluorometil) propil)-5-(trifluoro metil) pikolinamid; 3-amino-6-(4-fluoro-fenil)-5-trifluorometil-piridin-2-karbonska kiselina ((S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid; 3-amino-6-metoksi-5-trifluorometil-piridin-2-karbonska kiselina ((S-3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid; 3-amino-6-metoksi-5-trifluorometilpiridin-2-karbonska kiselina ((R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid; 3-amino-6-(2,4-((S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid dihloro-fenil)5-trifluor-ometil-piridin-2-karboksilne kiseline; 3-amino-6-( 2,4-dihloro-fenil)-5-trifluorometil-piridin-2-karboksilna kiselina ((R)-3,3,3-trifluoro -2-hidroksi-2-metil-propil) -amid; 3-amino-6-(4-fluorofenil)-5-trifluorometil-piridin-2-karboksilna kiselina (2-hidroksi-2-metil-propil)-amid; 3-amino-5,6-bis-trifluor-ometil-piridin-2-karbonska kiselina ((S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid; 3-amino-5,6-bis-trifluorome-til-piridin-2-karbonska kiselina ( (R) -3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid (S)-3-amino-6-etoksi-N-(3,3,3-tri-fluoro- 2-hidroksi-2-metilpropil)-5-(trifluoro metil) pikolinamid; 3-amino-6-metoksi-5-trifluorometil-piridin-2-karb-b oksilna kiselina ((S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid; 3-amino-6-metoksi-5-trifluorometil-piridin-2-karboksilna kiselina ((R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid; 3-amino-6-(4-fluoro-fenil)-5-trifluorometil-piridin-2-karboksilna kiselina (3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid;3-amino-5,6-bis-trifluorometil-piridin-2-karboksilna kiselina ((S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid; 3-amino-5,6-bis-trifluorometil-piridin-2-karbonska kiselina ((R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-metil-propil)-amid ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. U još jednom izvođenju, dodatni agens je jedinjenje otkriveno u patentu Sjedinjenih Država br.8,247,436 i Međunarodnoj PCT Publikaciji WO 2011113894, ovde uključenom u celosti referencom.

[0220] U još jednom izvođenju, dodatni agens može biti modulator epitelnog natrijumovog kanala (ENac) otkriven u PCT publikacijama WO2012035158, WO2009074575, WO2011028740, WO2009150137, WO2011079087 ili WO2008135557, ovde uključenim u celosti referencom.

[0221] U drugim izvođenjima, dodatni agens je opisan u WO 2004028480, WO 2004110352, WO 2005094374, WO 2005120497 ili WO 2006101740, koji su ovde uključeni u celosti referencom. U još jednom izvođenju, dodatni agens je derivat benzo [c] hinolizinijuma koji pokazuje aktivnost indukovanja ili poveć anja CFTR ili derivat benzopirana koji pokazuje aktivnost indukovanja ili poveć anja CFTR. U još jednom izvođenju, dodatni agens je opisan u Patentu Sjedinjenjih Država br. 7,202,262, Patentu Sjedinjenjih Država br. 6,992,096, US20060148864, US20060148863, US20060035943, US20050164973, WO2006110483, WO2006044456, WO2006044682, WO2006044505, WO2006044503, WO2006044502 ili WO2004091502, koji su ovde uključeni. U još jednom izvođenju, dodatni agens je opisan u WO2004080972, WO2004111014, WO2005035514, WO2005049018, WO2006099256, WO2006127588 ili WO2007044560, koji su ovde uključeni u celosti referencom.

[0222] U jednom izvođenju, 400 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 250 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu primeniti subjektu kojem je to potrebno. U ovim izvođenjima, količine doziranja se mogu postić i davanjem jedne ili više tableta iz pronalaska. Na primer, primena 400 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 250 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se može postić i davanjem dve tablete, od kojih svaka sadrži 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I, i 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. Trajanje primene se može nastaviti sve dok se ne postigne poboljšanje bolesti ili dok lekar ne savetuje, npr. trajanje primene može biti krać e od nedelje, 1 nedelje, 2 nedelje, 3 nedelje, četiri nedelje (28 dana) ili mesec dana ili duže. U jednom izvođenju, dve tablete koje sadrže po 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu davati pacijentu dnevno. U daljem izvođenju, dve tablete se mogu davati istovremeno ili u različito vreme tokom dana. U daljem izvođenju, jedna tableta se daje svakih 12 sati.

[0223] U jednoj izvođenju, 400 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 500 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu primeniti subjektu kojem je to potrebno. U ovim izvođenjima, količine doziranja se mogu postić i davanjem dve tablete, od kojih svaka sadrži 200 mg Jedinjenja 1, Oblika I, i 250 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. U jednom izvođenju tableta se daje jednom na 12 sati. U još jednom izvođenju, količina doze se takođe može postić i davanjem dve tablete, od kojih svaka sadrži 100 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2, svakih 12 sati. U još jednom izvođenju, količine doziranja se takođe mogu postić i davanjem Jedinjenja 1 Oblika I i suštinski amorfnog Jedinjenja 2 u odvojenim tabletama. Na primer, količine doziranja se mogu postić i davanjem dve tablete koje sadrže 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I, i četiri tablete koje sadrže 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 ili dve tablete koje sadrže 150 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 i dve tablete koje sadrže 100 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. Trajanje primene se može nastaviti sve dok se ne postigne ublažavanje bolesti ili dok lekar ne savetuje, npr. trajanje primene može biti manje od nedelje, 1 nedelje, 2 nedelje, 3 nedelje, četiri nedelje (28 dana) ili mesec dana ili duže. U jednom izvođenju, dve tablete koje sadrže 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I i četiri tablete koje sadrže 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu davati pacijentu dnevno. U jednom izvođenju, dve tablete koje sadrže 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I se mogu davati pacijentu dnevno, a dve tablete koje sadrže 150 mg i 100 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu davati pacijentu dva puta dnevno. U daljem izvođenju, dve tablete se mogu davati istovremeno ili u različito vreme tokom dana. U daljem izvođenju, jedna tableta koja sadrži 200 mg Jedinjenja 1 se daje svakih 12 sati, a dve tablete koje sadrže 150 mg i 100 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se daju svakih 12 sati.

[0224] U jednom izvođenju, 300 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 250 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu primeniti subjektu kojem je to potrebno. U ovim izvođenjima, količine doziranja se mogu postić i davanjem jedne ili više tableta pronalaska. Na primer, primena 300 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 250 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se može postić i davanjem dve tablete koje sadrže po 150 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. Trajanje primene se može nastaviti sve dok se ne postigne poboljšanje bolesti ili dok lekar ne savetuje, npr. trajanje primene može biti manje od nedelje, 1 nedelje, 2 nedelje, 3 nedelje, četiri nedelje (28 dana) ili mesec dana ili duže. U jednom aspektu, dve tablete koje sadrže 150 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu davati pacijentu dnevno. U daljem izvođenju, dve tablete se mogu davati istovremeno ili u različito vreme tokom dana. U daljem izvođenju, jedna tableta se daje svakih 12 sati.

[0225] U jednom izvođenju, 600 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 500 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu primeniti subjektu kojem je to potrebno. U ovim izvođenjima, količine doziranja se mogu postić i davanjem jedne ili više tableta iz pronalaska. Na primer, primena 600 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 500 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se može postić i davanjem dve tablete, od kojih svaka sadrži 150 mg Jedinjenja 1 Oblika I, i 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2, svakih 12 sati. Trajanje primene se može nastaviti dok se ne postigne poboljšanje bolesti ili dok lekar subjekta ne savetuje, npr. trajanje administracije može biti manje od nedelje, 1 nedelje, 2 nedelje, 3 nedelje, četiri nedelje (28 dana) ili mesec dana ili duže. U jednom izvođenju, četiri tablete koje sadrže 150 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu davati pacijentu dnevno. U daljem rešenju, četiri tablete se mogu davati istovremeno ili u različito vreme tokom dana. U daljem izvođenju, dve tablete se daju na svakih 12 sati.

[0226] U jednom izvođenju, 800 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 500 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu primeniti subjektu kojem je to potrebno. U ovim izvođenjima, količine doziranja se mogu postić i davanjem jedne ili više tableta pronalaska. Na primer, primena 800 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 500 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se može postić i davanjem četiri tablete, od kojih svaka sadrži 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I, i 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. Trajanje primene se može nastaviti sve dok se ne postigne poboljšanje bolesti ili dok lekar ne savetuje, npr trajanje primene može biti manje od nedelje, 1 nedelje, 2 nedelje, 3 nedelje, četiri nedelje (28 dana) ili mesec dana ili duže. U jednom izvođenju, četiri tablete koje sadrže po 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu davati pacijentu dnevno. U daljem izvođenju, četiri tablete se mogu davati istovremeno ili u različito vreme tokom dana. U daljem izvođenju, daju se dve tablete po prilici doziranja, a postoje dve prilike doziranja dnevno. U daljem izvođenju, pacijentu se daje 800 mg Jedinjenja 1 i 500 mg Jedinjenja 2, davanjem dve tablete od kojih svaka sadrži 200 mg Jedinjenja 1 i 125 mg Jedinjenja 2 dva puta dnevno (BID). U daljem izvođenju, 800 mg Jedinjenja 1 i 500 mg Jedinjenja 2 se primenjuju pacijentu davanjem dve tablete od kojih svaka sadrži 200 mg Jedinjenja 1 i 125 mg Jedinjenja 2 svakih 12 sati (q12h).

[0227] U jednom izvođenju, 600 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 250 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu primeniti subjektu kojem je to potrebno. U ovim izvođenjima, količine doziranja se mogu postić i davanjem jedne ili više tableta pronalaska. Na primer, primena 600 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 250 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se može postić i davanjem po tri tablete koje sadrže po 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 83,3 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2. Trajanje primene se može nastaviti sve dok se ne postigne poboljšanje bolesti ili dok lekar ne savetuje, npr. trajanje primene može biti manje od nedelje, 1 nedelje, 2 nedelje, 3 nedelje, četiri nedelje (28 dana) ili mesec dana ili duže. U jednom izvođenju, tri tablete koje sadrže po 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 83,3 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu davati pacijentu dnevno. U daljem izvođenju, tri tablete se mogu davati istovremeno ili u različito vreme tokom dana. U daljem izvođenju, daju se tri tablete istovremeno.

[0228] U jednom izvođenju, 600 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 500 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 se mogu primeniti subjektu kojem je to potrebno. U ovim izvođenjima, količine doziranja se mogu postić i davanjem jedne ili više tableta pronalaska. Na primer, primena 600 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 500 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 može se postić i davanjem po tri tablete koje sadrže po 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 83,3 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2, prać ene sa dve dodatne tablete koje sadrže po 125 mg Jedinjenja 2. Trajanje primene se može nastaviti sve dok se ne postigne ublažavanje bolesti ili dok lekar ne savetuje, npr. trajanje primene može biti manje od nedelje, 1 nedelje, 2 nedelje, 3 nedelje, četiri nedelje (28 dana) ili mesec dana ili duže. U jednom izvođenju, 600 mg Jedinjenja 1 se može primenjivati dnevno (qd) i 250 mg Jedinjenja 2 primenjivati dva puta dnevno (dva puta) davanjem po tri tablete koje sadrže po 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 83,3 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 dnevno (qd) i dve tablete, od kojih svaka sadrži 125 mg Jedinjenja 2 na svakih 12 sati (q12h). U jednom izvođenju, 600 mg Jedinjenja 1 se može davati svakodnevno (qd) i 250 mg Jedinjenja 2, administrirati svakih 12 sati (q12h) davanjem tri tablete, od kojih svaka sadrži 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I, i 83,3 mg suštinski amorfno Jedinjenje 2 dnevno (qd) i dve tablete koje sadrže po 125 mg Jedinjenja 2 na svakih 12 sati (q12h).

[0229] Ove kombinacije su korisne za lečenje ovde opisanih bolesti, uključujuć i cističnu fibrozu. Ove kombinacije su takođe korisne u ovde opisanim setovima. U drugom aspektu, ovaj pronalazak sadrži komplet koji sadrži farmaceutski sastav ili tabletu predmetnog pronalaska koja sadrži Jedinjenje 1 Oblika I i čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2, i odvojeni dodatni terapeutski agens ili njegov farmaceutski sastav. U još jednom izvođenju, farmaceutski sastav ili tableta ovog pronalaska, odvojeni dodatni terapeutski agens ili njegov farmaceutski sastav se nalaze u odvojenim kontejnerima. U još jednom izvođenju, odvojeni kontejneri su boce. U još jednom izvođenju, odvojeni kontejneri su bočice. U još jednom izvođenju, odvojeni kontejneri su blister pakovanja.

[0230] Količina dodatnog terapeutskog agensa prisutnog u sastavima ovog pronalaska neć e biti ve ć a od količine koja bi se normalno primenjivala u sastavu koja sadrži taj terapeutski agens kao jedini aktivni agens. Poželjno je da količina dodatnih terapeutskih agensa u sada otkrivenim sastavima bude u rasponu od oko 50% do 100% količina koja je normalno prisutna u sastavu koji sadrži taj agens kao jedini terapeutski aktivni agens.

TERAPEUTSKE UPOTREBE SASTAVA

[0231] U jednom aspektu, pronalazak takođe obezbeđuje postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja bolesti kod pacijenta, postupak koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu se bolest bira između cistične fibroze, astme, COPD izazvane dimom, hroničnog bronhitisa, rinosinusitisa, konstipacije, pankreatitisa, pankreasne insuficijencije, muške neplodnosti izazvane urođenim obostranim odsustvom vas deferensa (CBAVD), blage pluć ne bolesti, idiopatske pankreatitis, alergijske bronhopulmonalne aspergiloze (ABPA), bolesti jetre, naslednog emfizema, nasledne hemohromatoze, nedostatka koagulacije-fibrinolize, kao što je nedostatak proteina C, naslednog angioedema tipa 1, nedostatka u preradi lipida, kao što su porodična hiperholesterolemija, hibeltamieponempoteinproteinproteinprotein, bolesti lizo-somalnog skladištenja, kao što je bolest I-ć elija/pseudo-Hurler, mukopolisaharidoze, Sandhof/Tay-Sachs, Crigler-Najjar tip II, poliendokrinopatija/hiperinsulemija, dijabetes melitus, Laronov nanizam, nedostatak mileoperoksidaze, primarni hipoparatireoidizam, melanom, glikanoza, hipergenetični hipogeni, hipergeneza, hipergeneza, hipergeneza Nedostatak ACT-a, Diabetes insipidus (DI), neurofizni DI, neprogeni DI, Charcot-Marie Tooth sindrom, Perlizaeus-Merzbacher-ova bolest, neurodegenerativne bolesti kao što su Alzheimer-ova bolest, Parkinsonova bolest, amiotrofična lateralna skleroza, progresivna supranuklearna plaza, Pick-ova bolest, nekoliko poliglutamin neuroloških poremeć aja kao što su Huntington, spinocerebullar atakia tipa I, spinalna i bulbarna mišić na atrofija, dentatorubni palidoluisian i miotonična distrofija, kao i spongiformne encefalopatije, kao što je nasledna Creutzfeldt-Jakobova bolest (zbog prionske obrade proteina Fab bolest, Straussler-Scheinker-ov sindrom, COPD, bolest suvog oka ili Sjogrenova bolest, osteoporoza, osteopenija, zarastanje kostiju i rast kostiju (uključujuć i popravak kostiju, regeneraciju kostiju, smanjenje resorpcije kosti i poveć anje taloženja kostiju), Gorhamov sindrom, hloridne kanalopatije poput miotonije kongenita (Thomson i Becker oblici), Bartterov sindrom tip III, Dent-ova bolest, hiperekpleksija, epilepsija, lizosomska bolest skladištenja, Angelmanov sindrom i primarna cilijarna diskinezija (PCD), termin za nasledne poremeć aje strukture i/ili funkcije cilija, uključuju ć i PCD sa situs inversus (poznat i kao Kartagenerov sindrom), PCD bez inverza situsa i ciliarne aplazije.

[0232] U jednom aspektu, pronalazak takođe obezbeđuje postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja bolesti kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu se bolest bira između generalizovane epilepsije sa febrilnim napadima plus (GEFS ), opšte epilepsije sa ferbilnim i aferbrilnim napadima, miotonije, urođene paramiotonije, miotonije otežane kalijumom, hiperkalemične periodične paralize, LKTS, LKTS/Brugada sindroma, autosomne LK domin-nantne gluvoć e, autosomnorecesivnog LKTS, LKTS sa dismorfičnim karakteristikama, urođenog i stečenog LKTS, Timothijevom sindroma, uporne hiperinzulinemične hipoglikemije u detinjstvu, dilatirane kardiomiopatije, autosomno-dominantnog LKTS-a, bolesti Dent-a, Osteopetroze, Bartter-ov sindrom maligne bolesti, hipertermije i kateholaminergične polimorfne tahikardije.

[0233] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, umanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju N1303K, ΔI507 ili R560T.

[0234] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju G551D. U još jednom izvođenju, pacijent je homozigotan u G551D. U još jednom izvođenju, pacijent je heterozigot u G551D, gde je druga CFTR genetska mutacija bilo koja od ΔF508, G542X, N1303K, W1282X, R117H, R553X, 1717-1G-> A, 621 1G-> T, 2789+5G -> A, 3849+10kbC-> T, R1162X, G85E, 3120+1G-> A, ΔI507, 1898+1G->A, 3659delC, R347P, R560T, R334V, A455E, 2184delA ili 711+1G->T.

[0235] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, umanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, gde pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju ΔF508. U još jednom izvođenju, pacijent je homozigotan u ΔF508. U još jednom izvođenju, pacijent je heterozigot u ΔF508, gde je druga CFTR genetska mutacija bilo koja od G551D, G542X, N1303K, W1282X, R117H, R553X, 1717-1G->A, 621+1G->T, 2789+5G->A, 3849+10kbC-> T, R1162X, G85E, 3120+1G->A, ΔI507, 1898+1G->A, 3659delC, R347P, R560T, R334W, A455E, 2184delA ili 711+1G->T.

[0236] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju, odabranu od G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V, G1069R, R117C, D110H, R347H, R352Q, E56K, P67L, L206W, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070W, F1074L, D110E, D1270N, D1152H, 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G- >A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T->C and 621+3A->G.

[0237] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, umanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju, odabranu od G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V i G1069R. U jednom izvođenju ovog aspekta, pronalazak obezbeđuje metodu lečenja CFTR koja uključuje davanja Jedinjenja 1 pacijentu koji poseduje mutaciju CFTR čoveka odabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R i S1251N. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju odabranu između E193K, F1052V i G1069R. U nekim izvođenjima ovog aspekta, postupak proizvodi poveć anje transporta hlorida veće od 10 puta u odnosu na osnovni transport hlorida.

[0238] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju, odabranu od R117C, D110H, R347H, R352Q, E56K, P67L, L206W, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070W, F1074L, D110E, D1270N i D1152H. U jednom izvođenju ovog aspekta, postupak dovodi do poveć anja transporta hlorida koje je ve ć e ili jednako 10% iznad osnovnog transporta hlorida.

[0239] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, umanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju je odabran između 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G- >A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1,6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T->C and 621+3A->G. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju koja je odabrana od 1717-1G->A, 1811+1,6kbA->G, 2789+5G->A, 327226A->G i 3849+10kbC->T. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju odabranu od 2789+5G->A i 3272-26A->G.

[0240] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju, odabranu od G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V, G1069R, R117C, D110H, R34KHL, R56, R347H, R56 , L206V, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070V, F1074L, D110E, D1270N, D1152H, 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G- >A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T->C and 621+3A->G, i humana CFTR mutacija izabrana između !F508, R117H i G551D.

[0241] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju, odabranu od G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V i G1069R i mutaciju CFTR čoveka odabranu od ΔFH508, R11 i G551D. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju odabranu od G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R i S 1251N i mutaciju CFTR čoveka odabranu od ΔF508, R117H i G551D. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju odabranu od E193K, F1052V i G1069R, i humanu CFTR mutaciju odabranu od ΔF508, R117H i G551D. U nekim izvođenjima ovog aspekta, postupak proizvodi više od 10 puta poveć anje transporta hlorida u odnosu na osnovni transport hlorida.

[0242] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju, odabranu od R117C, D110H, R347H, R352K, E56K, P67L, L206V, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070V, F1074L, D110E, D1270N i D1152H CFTR mutacija izabrana od ΔF508, R117H i G551D. U jednom izvođenju ovog aspekta, postupak dovodi do poveć anja transporta hlorida koje je ve ć e ili jednako 10% iznad osnovnog transporta hlorida.

[0243] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, gde pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju koja je odabrana od 1717-1G-> A, 621 1G-> T, 3120 1G-> A, 1898 1G-> A, 711 1G-> T, 2622 1G-> A, 405 1G-> A, 406-1G-> A, 4005 1G-> A, 1812-1G-> A, 1525-1G-> A, 712-1G-> T, 1248 1G-> A, 1341 1G-> A, 3121-1G-> A, 4374 1G-> T, 3850-1G-> A, 2789 5G-> A, 3849 10kbC-> T, 3272- 26A-> G, 711 5G-> A, 3120G-> A, 1811 1,6kbA-> G, 711 3A-> G, 1898 3A-> G, 1717-8G-> A, 1342-2A- > C, 405 3A-> C, 1716G / A, 1811 1G-> C, 1898 5G-> T, 3850-3T-> G, IVS14b 5G-> A, 1898 1G-> T, 4005 2T-> C i 621 3A-> G, i humana CFTR mutacija izabrana od ΔF508, R117H i G551D. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, umanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju koja je odabrana od 1717-1G-> A, 1811 1.6kbA-> G, 2789 5G-> A, 3272-26A-> G i 3849 10kbC-> T, i humana CFTR mutacija izabrana između ΔF508, R117H i G551D. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutske smeše ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju koja je odabrana između 2789 5G-> A i 3272-26A-> G, a muška CFTR mutacija izabrana iz ΔF508, R117H.

[0244] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, umanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje genetsku mutaciju CFTR odabranu od G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V, G1069R, R117C, D110H, R267, R267, R2 , D579G, S1235R, S945L, R1070V, F1074L, D110E, D1270N, D1152H, 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G- >A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T->C and 621+3A->G, i humana CFTR mutacija izabrana od ΔF508, R117H i G551D.

[0245] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, umanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju, odabranu od G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V i G1069R. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutske smeše ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju odabranu od G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R i S1251N. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutske smeše ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju odabranu od E193K, F1052V i G1069R. U nekim izvođenjima ovog aspekta, postupak proizvodi povećanje koje je 10 puta veće u odnosu na osnovni transport hlorida.

[0246] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju, odabranu od R117C, D110H, R347H, R352K, E56K, P67L, L206V, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070V, F1074L, D110E, D1270N i D1152H. U jednom izvođenju ovog aspekta, postupak proizvodi povećanje transporta hlorida koje je veće ili jednako 10% iznad osnovnog transport hlorida.

[0247] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju koja je odabrana između 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G- >A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1,6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T->C and 621+3A->G. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju koja je odabrana između 1717-1G->A, 1811+1,6kbA->G, 2789+5G->A, 3272-26A->G and 3849+10kbC->T. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju odabranu od 2789+5G->A and 3272-26A->G.

[0248] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju, koja je odabrana od G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V, G1069R, R117C, D110H, R347H, R352 P207, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070V, F1074L, D110E, D1270N, D1152H, 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1 G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G- >A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1,6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T->C i 621+3A->G, i humana CFTR mutacija koja je izabrana između !F508, R117H i G551D, i jedna ili više mutacija CFTR čoveka izabranih od !F508, R117H i G551D.

[0249] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, umanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju, odabranu od G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V i G1069R, i jednu ili više humanih CFTR mutacija odabranih od ΔF508, R117H i G551D. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutske smeše ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju odabranu od G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R i S1251N, i jednu ili više ljudskih CFTR mutacija odabranih od ΔF508, R117H i G551D. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutske smeše ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju odabranu od E193K, F1052V i G1069R, i jednu ili više humanih CFTR mutacija odabranih od ΔF508, R117H i G551D. U nekim izvođenjima ovog aspekta, postupak proizvodi poveć anje transporta hlorida veće od 10 puta u odnosu na osnovni transport hlorida.

[0250] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje davanje efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju, odabranu od R117C, D110H, R347H, R352K, E56K, P67L, L206V, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070V, F1074L, D110E, D1270N i D1152H više ljudskih CFTR mutacija izabranih od F508, R117H i G551D. postupak proizvodi povećanje transporta hlorida koje je veće ili jednako 10% iznad osnovnog transport hlorida.

[0251] U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, umanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku, poželjno sisaru, gde pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju koje je odabrana od 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G- >A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T->C and 621+3A->G, i jedna ili više humanih CFTR mutacija izabranih između ΔF508, R117H i G551D. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju odabranu od 1717-1G->A, 1811+1,6kbA->G, 2789+5G->A, 3272-26A->G and 3849+10kbC->T, i jedna ili više ljudskih CFTR mutacija izabranih od F508, R117H i G551D. U jednom aspektu, ovaj pronalazak je usmeren na postupak lečenja, smanjenja ozbiljnosti ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koji uključuje primenu efikasne količine farmaceutskog sastava ili tablete prema pronalasku pacijentu, poželjno sisaru, pri čemu pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju odabranu od 2789+5G->A i 3272-26A->G, i jednu ili više ljudskih CFTR mutacija odabranih od ΔF508, R117H i G551D.

[0252] U određenim izvođenjima, farmaceutski prihvatljiv sastav ili tableta predmetnog pronalaska koja sadrži Jedinjenje 1, Oblik I i čvrstu disperziju suštinski amorfnog Jedinjenja 2, korisna je za lečenje, umanjenje težine ili simptomatsko lečenje cistične fibroze kod pacijenata koji pokazuju rezidualnu aktivnost CFTR u apikalnoj membrani respiratornog i nerespiratornog epitela. Prisustvo rezidualne aktivnosti CFTR na površini epitela može se lako otkriti upotrebom postupaka poznatih u struci, npr. standardnim elektrofiziološkim, biohemijskim ili histohemijskim tehnikama. Takve metode identifikuju CFTR aktivnost koriš ć enjem in vivo ili ex vivo elektrofizioloških tehnika, merenja koncentracije Cl u znoju ili pljuvački ili ex vivo biohemijskim ili histohemijskim tehnikama za prać enje površinske gustine ć elija. Koriste ć i takve metode, rezidualna aktivnost CFTR se može lako otkriti kod heterozigotnih ili homozigotnih pacijenata za niz različitih mutacija, uključuju ć i pacijente homozigotne ili heterozigotne za najčeš ć u mutaciju ΔF508, kao i druge mutacije kao što je mutacija G551D, ili mutacija R117H. U određenim izvođenjima, farmaceutski prihvatljivi sastavi ili tablete koje sadrže Jedinjenje 1, Oblik I i čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2, korisne su za lečenje, umanjenje ozbiljnosti ili simptomatsko lečenje cistične fibroze kod pacijenata koji pokazuju malo ili nimalo rezidualne CFTR aktivnosti. U određenim izvođenjima, farmaceutski prihvatljivi sastavi ili tablete koje sadrže Jedinjenje 1, Oblik I i čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2, korisne su za lečenje, umanjenje ozbiljnosti ili simptomatsko lečenje cistične fibroze kod pacijenata koji pokazuju malo ili nimalo zaostale aktivnosti CFTR u apikalnoj membrani respiratornog epitela.

[0253] U još jednom izvođenju, jedinjenja i sastavi ovog pronalaska su korisni za lečenje ili umanjivanje težine cistične fibroze kod pacijenata koji imaju rezidualnu aktivnost koja je CFTR indukovana ili poveć ana farmakološkim metodama. U još jednom izvođenju, jedinjenja i sastavi ovog pronalaska su korisni za lečenje ili smanjenje težine cistične fibroze kod pacijenata koji imaju rezidualnu aktivnost CFTR indukovanu ili poveć anu upotrebom ili genskom terapijom. Takve metode poveć avaju količinu prisutnog CFTR-a na površini ć elije, indukuju ć i tako do tada odsutnu aktivnost CFTR-a kod pacijenta ili poveć avaju ć i postoje ć i nivo rezidualne aktivnosti CFTR kod pacijenta.

[0254] U jednom izvođenju, farmaceutski sastavi i tablete predmetnog pronalaska koje sadrže Jedinjenje 1, Oblik I i čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2, kako je ovde opisano, korisne su za lečenje ili umanjenje težine cistične fibroze kod pacijenata unutar određenih genotipova koji pokazuju rezidualnu CFTR aktivnost, npr. mutacije klase I (koje nisu sintetizovane), mutacije klase II (pogrešno savijanje), mutacije klase III (ošteć ena regulacija ili mrežnjače), mutacije klase IV (promenjena provodljivost) ili mutacije klase V (smanjena sinteza).

[0255] U jednom izvođenju, farmaceutski sastavi i tablete predmetnog pronalaska koje sadrže Jedinjenje 1 Oblika I i čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2, kako je ovde opisano, korisne su za lečenje, umanjenje ozbiljnosti ili simptomatsko lečenje cistične fibroze kod pacijenata unutar određenih kliničkih fenotipova, npr. umereni do blagi klinički fenotip koji tipično korelira sa količinom rezidualne aktivnosti CFTR u apikalnoj membrani epitela. Takvi fenotipovi uključuju pacijente koji pokazuju suficijenciju pankreasa.

[0256] U jednom izvođenju, farmaceutski sastav i tablete predmetnog pronalaska koje sadrže Jedinjenje 1 Oblika I i čvrstu disperziju koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2, kako je ovde opisano, korisne su za lečenje, umanjenje težine ili simptomatsko lečenje pacijenata kojima je dijagnostikovana suficijencija pankreasa, idiopatski pankreatitis i kongenitalno obostrano odsustvo vas deferensa ili blaga pluć na bolest u kojoj pacijent pokazuje rezidualnu CFTR aktivnost.

[0257] U jednom izvođenju, farmaceutski sastav i tablete predmetnog pronalaska koje sadrže Jedinjenje 1 Oblika I i čvrstu disperziju koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2, kako je ovde opisano, korisne su za lečenje, umanjenje težine ili simptomatsko lečenje pacijenata kojima je dijagnostikovana suficijencija pankreasa, idiopatski pankreatitis i kongenitalno obostrano odsustvo vas deferensa ili blaga bolest pluć a pri čemu pacijent ima CFTR divljeg tipa.

[0258] Pored cistične fibroze, modulacija aktivnosti CFTR može biti korisna i za druge bolesti koje nisu direktno izazvane mutacijama u CFTR, kao što su sekretorne bolesti i druge bolesti presavijanja proteina posredovane CFTR-om. One uključuju, ali nisu ograničeni na, hroničnu opstruktivnu bolest pluć a (COPD), bolest suvog oka i Sjogrenov sindrom. COPD karakteriše ograničenje protoka vazduha koje je progresivno i nije u potpunosti reverzibilno. Ograničenje protoka vazduha je posledica hipersekrecije sluzi, emfizema i bronhiolitisa. Aktivatori mutiranih ili CFTR-a divljeg tipa nude potencijalni tretman hipersekrecije sluzi i ošteć enog mukocilijarnog klirensa koji je uobičajen za COPD). Konkretno, pove ć anje sekrecije aniona kroz CFTR može olakšati transport tečnosti na površini disajnih puteva radi hidratacije sluzi i optimizovane viskoznosti periciliarne tečnosti. To bi dovelo do poveć anog mukocilijarnog klirensa i smanjenja simptoma povezanih sa COPD. Bolest suvog oka karakteriše smanjenje proizvodnje vode u suzama i abnormalni profili lipida, proteina i mucina u suznom filmu. Postoji puno uzroka suvog oka, od kojih neki uključuju starost, operaciju oka Lasik, artritis, lekove, hemijske/termičke opekotine, alergije i bolesti, kao što su cistična fibroza i Sjogrensov sindrom. Poveć avanje sekrecije anjona putem CFTR-a pojačalo bi transport tečnosti iz endotelnih ć elija rožnjače i sekretornih žlezda koje okružuju oko kako bi se poveć ala hidratacija rožnjače. Ovo bi pomoglo u ublažavanju simptoma povezanih sa bolestima suvog oka. Sjogrensov sindrom je autoimuna bolest u kojoj imuni sistem napada žlezde koje proizvode vlagu u celom telu, uključujuć i oko, usta, kožu, respiratorno tkivo, jetru, vaginu i creva. Simptomi uključuju suvo ć u oka, usta i vagine, kao i bolesti pluć a. Bolest je takođe povezana sa reumatoidnim artritisom, sistemskim lupusom, sistemskom sklerozom i polimipositisom/dermatomiozitisom. Veruje se da neispravna razmena proteina uzrokuje bolest, za koju su moguć nosti lečenja ograničene. Uveć ivači ili induktori aktivnosti CFTR-a mogu hidrirati različite organe pogođene boleš ć u i pomo ć i u povišenju pridruženih simptoma.

[0259] U jednom izvođenju, pronalazak se odnosi na postupak za pove ć anje ili indukovanje aktivnosti anjonskog kanala in vitro ili in vivo, koji uključuje kontakt kanala sa bilo kojim od farmaceutskih sastava PC-I do PC-XXV. U još jednom izvođenju, anjonski kanal je hloridni ili bikarbonatni kanal. U još jednom izvođenju, anjonski kanal je hloridni kanal.

[0260] Tačna potrebna količina varirać e od subjekta do subjekta, u zavisnosti od vrste, starosti i opšteg stanja subjekta, težine infekcije, određenog agensa, načina primene i slično. Jedinjenja pronalaska su poželjno formulisana u jediničnom doznom obliku radi lakšeg davanja i ujednačenosti doziranja. Izraz "dozni jedinični oblik", kako se ovde koristi, odnosi se na fizički diskretnu jedinicu agensa koji odgovara pacijentu koji se leči. Razumeć e se, međutim, da ć e lekar koji leči odlučiti o ukupnoj dnevnoj upotrebi jedinjenja i sastava pronalaska u okviru zdrave medicinske procene. Specifični efektivni nivo doze za bilo kog određenog pacijenta ili organizma zavisić e od različitih faktora, uključuju ć i poreme ć aj koji se leči i težinu poremeć aja; aktivnost određenog jedinjenja koje se koristi; specifični sastav koji se koristi; starost, telesna težina, opšte zdravlje, pol i ishrana pacijenta; vreme primene, put administracije i brzina izlučivanja određenog jedinjenja koje se koristi; trajanje lečenja; lekovi koji se koriste u kombinaciji ili slučajno sa određenim jedinjenjem koje se koristi i slični faktori dobro poznati u medicinskoj umetnosti. Izraz "pacijent", kako se ovde koristi, označava životinju, poželjno sisara, a najpoželjnije čoveka.

[0261] Bilo gde u predmetnoj prijavi gde naziv jedinjenja možda ne opisuje tačno strukturu jedinjenja, struktura zamenjuje naziv i upravlja.

PRIMERI

XRPD (Difrakcija Rendgenskog Praha)

[0262] Podaci o difrakciji rendgena (XRD) Jedinjenja 1 Oblika I su prikupljeni na difrakterometru praha Bruker D8 DISCOVER sa dvodimenzionalnim detektorom HI-STAR i ravnim grafitnim monohromatorom. Cu zapečać ena cev sa K α zračenje je korišć eno na 40 kV, 35mA. Uzorci su postavljeni na silikonske pločice bez pozadine na 25 °C. Za svaki uzorak prikupljena su dva okvira podataka u 120 sekundi svaki pod 2 različita θ2ugla: 8° i 26°. Podaci su integrisani sa softverom GADDS i objedinjeni sa softverom DIFFRACT<plus>EVA. Neizvesnosti za prijavljene maksimalne pozicije su ± 0,2 stepena.

Diferencijalna skeniraju ć a kalorimetrija (DSC)

[0263] Podaci diferencijalne skenirajuć e kalorimetrije (DSC) Jedinjenja 1, Oblika I, prikupljeni su koriš ć enjem DSC Q100 V9.6 Build 290 (TA Instruments, New Castle, DE). Temperatura je kalibrirana indijumom, a toplotni kapacitet kalibriranim safirom. Uzorci od 3-6 mg izvagani su u aluminijumske posude koje su presovane pomoć u poklopaca sa 1 otvorom. Uzorci su skenirani od 25 °C do 350 °C brzinom zagrevanja od 1,0 °C/min i sa pročišć avanjem azotnih gasova od 50 ml/min. Podaci su prikupljeni softverom Thermal Advantage Q SeriesTM verzija 2.2.0.248 i analizirani softverom Universal Analysis verzij 4.1D (TA Instruments, New Castle, DE). Prijavljeni brojevi predstavljaju pojedinačne analize.

Određivanje monokristalne strukture Jedinjenja 1 Oblika I

[0264] Podaci o difrakciji su dobijeni na Bruker Apex II difraktometru opremljenom zatvorenim cevnim Cu K-alfa izvorom i Apex II CCD detektorom. Struktura je rešena i dorađena pomoć u programa SHELX (Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112-122). Na osnovu sistematskih statistika izostanaka i intenziteta struktura je rešena i dorađena u prostornoj grupi P2l/n.

[0265] Vitride® (natrijum bis(2-metoksietoksi)aluminijum hidrid [ili NaAlH2(OCH2CH2OCH3)2], 65 tež.% rastvora u toluenu) je kupljen od Aldrich Chemicals.

[0266] 2,2-Difluoro-1,3-benzodioksol-5-karboksilna kiselina kupljena je od Saltiga (filijala Lankess Korporacije).

Priprema Jedinjenja 1

Priprema (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-metanola.

[0267]

[0268] Komercijalno dostupna 2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-karbonska kiselina (1,0 ekv.) je suspendovana u toluenu (10 zapremina). Vitride® (2 ekv) je dodat kroz levak za dodavanje određenjom brzinom da bi se temperatura održavala na 15-25 °C. Na kraju dodavanja, temperatura je poveć ana na 40 °C tokom 2 sata (h), zatim je 10% (w/w) vodenog (vod.) NaOH (4,0 ekv.) pažljivo dodat kroz levak za održavanje, održavajuć i temperaturu na 40-50 °C. Posle mešanja dodatnih 30 minuta (min), slojevi su ostavljeni da se odvoje na 40 °C. Organska faza je ohlađena na 20 °C, zatim isprana vodom (2 x 1,5 zapremina), osušena (Na2SO4), filtrirana i koncentrovana da bi se dobio sirovi (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-metanol koji je korišć en direktno u slede ć em koraku.

Priprema 5-hlorometil-2,2-difluoro-1,3-benzodioksola

[0270] (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-metanol (1,0 ekv.) Rastvoren je u MTBE (5 zapremina). Dodata je katalitička količina 4-(N, N-dimetil) aminopiridina (DMAP) (1 mol%) i dodat je levak za dodavanje SOCl2(1.2 ekv.). SOCl2je dodat određenom brzinom da bi se temperatura u reaktoru održavala na 15-25 °C. Temperatura je poveć ana na 30 °C tokom 1 sata, a zatim je ohlađena na 20 °C. Voda (4 zapremina) je dodavana kroz levak za dodavanje, a temperatura održavana na manje od 30 °C. Posle mešanja dodatnih 30 minuta, slojevi su ostavljeni da se odvoje. Organski sloj je mešan i dodato je 10% (w/v) vodenog NaOH (4,4 zapremina). Posle mešanja od 15 do 20 minuta, slojevi su ostavljeni da se odvoje. Organska faza je zatim osušena (Na2SO4), filtrirana i koncentrovana da bi se dobio sirovi 5-hlorometil-2,2-difluoro-1,3-benzodioksol koji je direktno korišć en u slede ć em koraku.

Priprema (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-acetonitrila.

[0271]

[0272] Rastvor 5-hlorometil-2,2-difluoro-1,3-benzodioksola (1 ekv.) u DMSO (1,25 zapremina) je dodat kaši NaCN (1,4 ekv.) u DMSO (3 zapremina), uz održavanje temperature između 30-40 °C. Smeša je mešana 1 h, a zatim je dodata voda (6 zapremina), prać ena metil terc-butil etrom (MTBE) (4 zapremina). Posle 30 min mešanja, slojevi su odvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan MTBE (1,8 zapremina). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (1,8 zapremine), osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani da bi se dobio sirovi (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il) -acetonitril (95%) koristi direktno u slede ć em koraku.

Sinteza (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-1-etilacetat-acetonitrila

[0273]

[0274] Reaktor je pročišć en azotom i napunjen sa 900 mL toluena. Rastvarač je degasiran pomo ć u azotnog osipa najmanje 16 h. U reaktor se zatim napuni Na3PO4(155,7 g, 949,5 mmol), a zatim bis (dibenziliden-aceton) paladijum (0) (7,28 g, 12,66 mmol). 10% w/w rastvor terc-butilfosfina u heksanima (51,23 g, 25,32 mmol) je punjen tokom 10 minuta na 23 °C iz levka za pročišć avanje azota. Smeša je ostavljena da se meša 50 min, a u to vreme je dodat 1-bromo-2,2-difluoro-1,3-benzodioksol (75 g, 316,5 mmol) tokom 1 min. Posle mešanja tokom dodatnih 50 minuta, smeša je punjena etil cijanoacetatom (71,6 g, 633,0 mmol) tokom 5 minuta, a zatim vodom (4,5 ml) u jednom delu. Smeša je zagrevana na 70 °C tokom 40 minuta i analizirana HPLC svakih 1 - 2 sata na procenat konverzije reaktanta u proizvod. Nakon što je primeć ena potpuna konverzija (tipično 100% konverzija nakon 5 - 8 h), smeša je ohlađena na 20 - 25 °C i filtrirana kroz celitni sloj. Celitna podloga je isprana toluenom (2 X 450 ml) i kombinovane organske materije su koncentrovane do 300 ml pod vakumom na 60 - 65 °C. Koncentrat je napunjen sa 225 ml DMSO i koncentrovan pod vakumom na 70 - 80 °C sve dok aktivna destilacija rastvarača nije prestala. Rastvor je ohlađen na 20 - 25 °C i razblažen na 900 ml sa DMSO kao priprema 1

za Korak 2. H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7,16 – 7,10 (m, 2H), 7,03 (d, J= 8,2 Hz, 1H), 4,63 (s, 1H), 4.19 (m, 2H), 1,23 (t, J= 7,1 Hz, 3H).

Sinteza (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-acetonitrila.

[0275]

[0276] DMSO rastvor (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-1-etilacetat-acetonitrila odozgo je napunjen sa 3 N HCI (617.3 mL, 1.85 mol) tokom 20 minuta uz održavanje unutrašnje temperature <40 °C. Smeša je zatim zagrevana na 75 °C tokom 1 h i analizirana HPLC svakih 1 - 2 h na konverziju %. Kada se primeti konverzija od> 99% (obično nakon 5 - 6 sati), reakcija se ohladi na 20 - 25 °C i ekstrahuje sa MTBE (2 X 525 mL), sa dovoljno vremena da se omoguć i potpuno razdvajanje faza tokom ekstrakcije. Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa 5% NaCl (2 X 375 mL). Rastvor je zatim prebačen u opremu pogodnu za vakumsku destilaciju od 1,5 - 2,5 Torr-a, koja je bila opremljena ohlađenom prihvatnom bocom. Rastvor je koncentrovan pod vakumom na <60 °C da bi se uklonili rastvarači. Zatim se (2,2-Difluoro-1,3-benzodiokol-5-il)-acetonitril destiluje iz dobijenog ulja na 125 - 130 °C (temperatura peć i) i 1,5 - 2,0 Torr-a (2,2-Difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-acetonitril je izolovan kao bistro ulje u prinosu od 66% iz 5-bromo-2,2-difluoro-1,3-benzodioksola (2 koraka) i sa HPLC

1

čisto ć om od 91,5% AUC (odgovara analizi težine/težine od 95%). H NMR (500 MHz, DMSO) $ 7,44 (br s, 1H), 7,43 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,22 (dd, J = 8,2, 1,8 Hz, 1H), 4,07 (s, 2H) .

Priprema (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-ciklopropankarbonitrila.

[0277]

[0278] Smeša (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-acetonitrila (1,0 ekv.), 50 tež.% vodenog rastvora KOH (5,0 ekv.) 1-bromo-2-hloroetana (1,5 ekv.) i Oct4NBr (0,02 ekv.) je zagrevana na 70 °C tokom 1 sata. Reakciona smeša je ohlađena, zatim obrađena sa MTBE i vodom. Organska faza je isprana vodom i slanim rastvorom. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-ciklopropankarbonitril.

Priprema 1- (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-ciklopropankarboksilne kiseline.

[0279]

[0280] (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-ciklopropankarbonitril je hidrolizovan koristeć i 6 M NaOH (8 ekvivalenta) u etanolu (5 zapremina) na 80 °C preko noć i. Smeša je ohlađena do sobne temperature i etanol je uparen pod vakumom. Ostatak je pretvoren u vodu i MTBE, dodato je 1 M HCI i slojevi su se odvojili. Zatim je MTBE sloj tretiran sa dicikloheksilaminom (DCHA) (0,97 ekv.). Kaša je ohlađena na 0 °C, filtrirana i isprana heptanom da bi se dobila odgovarajuć a DCHA so. So je uzeta u MTBE i 10% limunsku kiselinu i mešana dok se sve čvrste materije nisu otopile. Slojevi su se odvojili i MTBE sloj je ispran vodom i slanim rastvorom. Zamena rastvarača u heptan prać ena filtracijom daje 1-(2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-ciklopropankarboksilnu kiselinu nakon sušenja u vakumskoj peć i na 50 °C preko no ć i.

Priprema 1- (2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-ciklopropankarbonil hlorida.

[0281]

[0282] 1-(2,2-difluoro-1,3-benzodioksol-5-il)-ciklopropankarboksilna kiselina (1,2 ekv.) je rastvorena u toluenu (2,5 zapremina) I je smeša zagrevana na 60 °C. SOCl2(1,4 ekv.) i dodata je kroz levak za dodavanje. Toluen i SOCl2su destilovani iz reakcione smeše posle 30 minuta. Dodat je dodatni toluen (2.5 zapremina) i rezultujuć a smeša je ponovo destilovana, a proizvod kiseli hlorid je ostavljen kao ulje, koje je koriš ć eno bez daljeg prečiš ć avanja.

Priprema terc-butil-3-(3-metilpiridin-2-il)benzoata.

[0283]

[0284] 2-Bromo-3-metilpiridin (1,0 ekv.) je rastvoren je u toluenu (12 zapremina). Dodat je K2CO3(4.8 ekv.), a zatim voda (3.5 zapremina). Dobijena smeša je zagrevana na 65 °C pod mlazom N2tokom 1 sata. Zatim su dodati 3-(t-Butoksikarbonil)fenil-borna kiselina (1.05 ekv.) i Pd(dppf) Cl2·CH2Cl2(0.015 ekv.) i smeša je zagrevana na 80 °C. Posle 2 sata, toplota je isključena, dodata je voda (3,5 zapremina) i slojevi su ostavljeni da se odvoje. Organska faza je zatim isprana vodom (3.5 zapremina) i ekstrahovana sa 10% vodenom rastvorom metansulfonske kiseline (2 ekv. MsOH, 7.7 zapremina). Vodena faza je bazična sa 50% vodenim rastvorom NaOH (2 ekv.) I ekstrahovana sa EtOAc (8 vol.). Organski sloj je koncentrovan dajuć i sirovi terc-butil-3-(3-metilpiridin-2-il)benzoat (82%) koji je koriš ć en direktno u slede ć em koraku.

Priprema 2-(3-(terc-butoksikarbonil)fenil)-3-metilpiridin-1-oksida.

[0285]

[0286] terc-butil-3-(3-metilpiridin-2-il)benzoat (1,0 ekv.) rastvoren je u EtOAc (6 zapremina). Dodata je voda (0,3 zapremina), a zatim urea-vodonik-peroksid (3 ekv.). Zatim se smeši u određenim delovima dodaje ftalni anhidrid (3 ekv.) takvom brzinom da bi se temperatura u reaktoru održavala ispod 45 °C. Nakon završetka dodavanja ftalnog anhidrida, smeša je zagrevana na 45 °C. Posle mešanja dodatnih 4 sata, toplota je isključena. Kroz levak za dodavanje je dodato 10% w/w vodenog rastvora Na2SO3(1.5 ekv.). Nakon završetka dodavanja Na2SO3, smeša je mešana dodatnih 30 minuta i slojevi su odvojeni. Organski sloj je mešan i 10% wt/wt je vodeno. Dodat je Na2CO3(2 ekv.). Posle 30 minuta mešanja, slojevi su ostavljeni da se odvoje. Organska faza je isprana 13% w/v vodenim rastvorom NaCl. Organska faza je zatim filtrirana i koncentrovana da bi se dobio sirovi 2-(3-(terc-butoksikarbonil)fenil)-3-metilpiridin-1-oksid (95%) koji je korišć en direktno u slede ć em koraku.

Priprema terc-butil-3-(6-amino-3-metilpiridin-2-il)benzoata.

[0288] Rastvor 2-(3-(terc-butoksikarbonil)fenil)-3-metilpiridin-1-oksida (1 ekv.) i piridina (4 ekv.) u acetonitrilu (8 zapremina) je zagrejan na 70 °C. Rastvor metansulfonskog anhidrida (1,5 ekv.) u MeCN (2 zapremina) je dodat tokom 50 min kroz levak za dodavanje dok se temperatura održava na ispod 75 °C. Smeša je mešana dodatnih 0,5 sata nakon potpunog dodavanja. Smeša je zatim ostavljena da se ohladi do ambijenta. Etanolamin (10 ekv.) je dodat kroz levak za dodavanje. Posle mešanja tokom 2 sata, dodata je voda (6 zapremina) i smeša je ohlađena na 10 °C. Posle mešanja tokom 3 sata, čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i isprana vodom (3 zapremine), 2:1 acetonitrilom/vodom (3 zapremine) i acetonitrilom (2 x 1,5 zapremine). Čvrsta supstanca je sušena do konstantne težine (razlika <1%) u vakumskoj peć i na 50 °C sa blagim ispuštanjem N2da bi se dobio terc-butil-3-(6-amino-3-metilpiridin-2-il)benzoat kao crveno-žuta čvrsta supstanca (prinos 53%).

Priprema 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)-tbutilbenzoata.

[0289]

[0290] Gore opisani sirovi kiselinski hlorid je rastvoren u toluenu (2,5 zapremina na bazi kiselinskog hlorida) i dodata je kroz levak za dodavanje smeša terc-butil-3-(6-amino-3-metilpiridin-2-il)benzoata (1 ekv.), DMAP, (0,02 ekv.) i trietilamin (3,0 ekv.) u toluenu (4 zapremina na bazi terc-butil-3-(6-amino-3-metilpiridin-2-il) benzoata). Posle 2 sata, u reakcionu smešu je dodata voda (4 zapremina na bazi terc-butil-3-(6-amino-3-metilpiridin-2-il) benzoata). Posle 30 minuta mešanja, slojevi su odvojeni. Organska faza je zatim filtrirana i koncentrovana da bi se dobilo gusto ulje 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3] dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)-t-butilbenzoat (kvantitativni prinos sirove kiseline). Dodat je acetonitril (3 zapremina na bazi sirovog proizvoda) i destilovan dok ne dođe do kristalizacije. Dodata je voda (2 zapremina na bazi sirovog proizvoda) i smeša je mešana 2 h. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana sa 1:1 (zapreminski) acetonitril/voda (2 x 1 zapremina na osnovu sirovog proizvoda) i delimično osušena na filteru pod vakumom. Čvrsta supstanca je sušena do konstantne težine (razlika <1%) u vakumskoj peć i na 60 °C sa blagim ispuštanjem N2da bi se dobio 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3 ]dioksol-5-il) ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)-t-butilbenzoat kao smeđa čvrsta supstanca.

Priprema 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il) ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il) benzojeve kiseline • HCL so.

[0292] U suspenziju 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)-tbutilbenzoata (1,0 ekv.) u MeCN (3,0 zapremina) dodata je voda (0,83 zapremina), a zatim koncentrovana vodena rastvora HCl (0,83 zapremina). Smeša je zagrevana na 45 ± 5 °C. Posle mešanja od 24 do 48 h, reakcija je završena i smeša je ostavljena da se ohladi do ambijenta. Dodata je voda (1,33 zapremina) i smeša je mešana. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana vodom (2 x 0,3 zapremina) i delimično osušena na filteru pod vakumom. Čvrsta supstanca je sušena do konstantne težine (razlika <1%) u vakumskoj peć i na 60 °C sa blagim ispuštanjem N2da bi se dobio 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3 ]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il) benzoeva kiselina • HCl u obliku beličaste čvrste supstance.

1 1

[0293] HNMR spektar Jedinjenja 1 je prikazan na Slici 8, a Slika 9 prikazuje HNMR spektar Jedinjenja 1 kao HCl so.

1

[0294] Tabela 2 dole navodi podatke HNMR za Jedinjenje I.

Tabela 2.

Priprema Jedinjenja 1, Oblik I

Priprema Jedinjenja 1, Oblik I, Metoda A.

[0295]

[0296] Kaša 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il) benzojeve kiseline • HCl (1 ekv.) u vodi (10 zapremina) je mešana na sobnoj temperaturi. Uzorak je uzet posle mešanja tokom 24 sata. Uzorak je filtriran i čvrsta supstanca je isprana vodom (2 puta). Čvrsti uzorak je dostavljen na DSC analizu. Kada je DSC analiza pokazala potpunu konverziju u oblik I, čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana vodom (2 x 1,0 zapremina) i delimično osušena na filteru pod vakumom. Čvrsta supstanca je zatim osušena do konstantne težine (razlika <1%) u vakumskoj peć i na 60 °C sa blagim ispuštanjem N2da bi se dobio Jedinjenje 1, Oblik I, kao beličasta čvrsta supstanca 1 1

(prinos 98%). H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 9,14 (s, 1H), 7,99-7,93 (m, 3H), 7,80-7,78 (m, H), 7,74-7,72 (m, 1H), 7,60-7,55 (m,2H), 7,41-7,33 (m,2H), 2,24 (s,3H), 1,53-1,51 (m,2H), 1,19-1,17 (m,2H).

Priprema Jedinjenja 1, Oblik I, Metod B.

[0297]

[0298] Rastvor 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)-t-butilbenzoata (1,0 ekv.) u mravlju kiselinu (3,0 zapremina) zagrevano je uz mešanje na 70 ' 10 °C, tokom 8 sati. Reakcija se smatrala završenom kada je ostalo ne više od 1,0% AUC hromatografskim metodama 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridina -2-il) -t-butilbenzoat). Smeša je ostavljena da se ohladi do temperature okoline. Rastvor je dodat u vodu (6 vol.), zagrejan na 50 °C, i smeša je mešana. Smeša je zatim zagrevana na 70 ± 10 °C do nivoa 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)-t-butilbenzoat nije bio već i od 0,8% (AUC). Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana vodom (2 x 3 zapremina) i delimično osušena na filteru pod vakumom. Čvrsta supstanca je sušena do konstantne težine (razlika <1%) u vakumskoj peć i na 60 °C sa blagim ispuštanjem N2da bi se dobio Jedinjenje 1, Oblik I, kao beličasta čvrsta supstanca.

[0299] DSC trag Jedinjenja 1 Oblika I je prikazan na Slici 10. Topljenje Jedinjenja 1 Oblika I se dešava na oko 204 °C.

[0300] Uzorak difrakcije rendgenskog zraka je izračunat iz monokristalne strukture Jedinjenja 1 Oblika I i prikazan je na Slici 1. Tabela 3 navodi izračunate vrhove za Sliku 1.

Tabela 3.

[0301] Stvarni šablon difrakcije rendgenskog zraka u prahu Jedinjenja 1 Oblika I je prikazan na Slici 2. Tabela 4 navodi stvarne vrhove za Sliku 2.

Tabela 4.

[0302] Bezbojni kristali Jedinjenja 1 Oblika I dobijeni su hlađenjem koncentrovanog rastvora 1-butanola sa 75 °C na 10 °C brzinom od 0,2 °C/min. Odabran je kristal dimenzija 0,50 x 0,08 x 0,03 mm, očišć en mineralnim uljem, postavljen na MicroMount i centriran na Bruker APEX II sistemu. Dobijene su tri serije od 40 okvira razdvojenih u međusobnom prostoru da bi se obezbedila orijentaciona matrica i početni parametri ć elije. Konačni parametri ć elije su dobijeni i precizirani na osnovu kompletnog skupa podataka.

[0303] Skup podataka o difrakciji uzajamnog prostora je dobijen do rezolucije 0,82 Å koristeć i korake od 0,5° koriste ć i 30 s ekspozicije za svaki kadar. Podaci su prikupljeni na 100 (2) K. Integracija intenziteta i preciziranje ć elijskih parametara ostvareni su pomoć u softvera APEXII. Posmatranje kristala nakon prikupljanja podataka nije pokazalo znakove raspadanja.

[0304] Konformaciona slika Jedinjenja 1 Oblika I zasnovana na rendgenskoj analizi monokristala prikazana je na Slici 11. Oblik I Jedinjenja 1 je monokliničan, P21/n, sa sledeć im dimenzijama jedinične ć elije: a=4,9626 (7) Å , b=12,299(2) Å ,

3

c=33,075 (4) Å , β = 93,938 (9)°, V = 2014,0 Å , Z = 4. Gustina Jedinjenja 1 Oblika I izračunata na osnovu strukturnih 3

podataka je 1,492 g/cm pri 100 K.

Priprema Jedinjenja 2

Sinteza 4-oxo-1,4-dihidrokinolin-3-karboksilne kiseline (26)

[0305]

Postupak za pripremu etil 4-oxo-1,4-dihidrokinolin-3-karboksilata (25)

[0307] Jedinjenje 23 (4,77 g, 47,7 mmol) je dodato ukapavanjem u jedinjenje 22 (10 g, 46,3 mmol) sa podpovršinskim protokom N2da bi se etanol isterao ispod 30 °C tokom 0,5 sata. Zatim se rastvor zagreva na 100-110 °C i meša 2,5 sata. Posle hlađenja smeše na ispod 60 °C, dodat je difenil etar. Dobijeni rastvor je dodat kap po kap difenil etru koji je zagrevan na 228-232 °C tokom 1,5 sata podzemnim protokom N2da bi se izbacio etanol. Smeša je mešana na 228-232 °C još 2 sata, ohlađena na ispod 100 °C, a zatim je dodat heptan da se taloži proizvod. Dobijena suspenzija je mešana na 30 °C tokom 0,5 sata. Čvrsti ostaci su zatim filtrirani, a talog je ispran heptanom i osušen u vakumu daju ć i jedinjenje 25 kao 1

smeđu čvrstu supstancu. H NMR (DMSO-d6; 400 MHz) δ 12,25 (s), δ 8,49 (d), 68,10 (m), δ 7,64 (m), δ 7,55 (m), δ 7,34 (m), δ 4,16 (q), δ 1,23 (t).

Postupak za pripremu 4-oxo-1,4-dihidrokinolin-3-karboksilne kiseline (26)

[0308]

Metod 1

[0309] Jedinjenje 25 (1,0 ekv.) je suspendovano u rastvoru HCl (10,0 ekv.) i H2O (11,6 zapremina). Kaša je zagrejana na 85 - 90 °C, mada su i alternativne temperature pogodne za ovaj korak hidrolize. Na primer, hidroliza se alternativno može izvršiti na temperaturi od oko 75 do oko 100 °C. U nekim slučajevima, hidroliza se izvodi na temperaturi od oko 80 do oko 95 °C. U drugima, korak hidrolize se izvodi na temperaturi od oko 82 do oko 93 °C (na primer, od oko 82,5 do oko 92,5 °C ili od oko 86 do oko 89 °C). Posle mešanja na 85 - 90 °C približno 6,5 sati, reakcija je uzorkovana za završetak reakcije. Mešanje se može izvoditi pod bilo kojom od temperatura pogodnih za hidrolizu. Rastvor je zatim ohlađen na 20 - 25 °C i filtriran. Reaktor/talog je ispran sa H2O (2 zapremina x 2). Talog je zatim ispran sa 2 zapremine H2O do pH ~ 3,0. Talog je zatim osušen pod vakumom na 60 °C da bi se dobilo jedinjenje 26.

Metod 2

[0310] Jedinjenje 25 (11,3 g, 52 mmol) je dodato smeši 10% NaOH (vod.) (10 mL) i etanola (100 ml). Rastvor je zagrevan do refluksa tokom 16 sati, ohlađen na 20-25 °C, a zatim je pH podešen na 2-3 sa 8% HCl. Smeša je zatim mešana 0,5 sata i filtrirana. Talog je ispran vodom (50 ml), a zatim osušen u vakumu dajuć i jedinjenje 26 u obliku smeđe čvrste supstance.

1

H NMR (DMSO-d6; 400 MHz) δ 15,33 (s), δ 13,39 (s), δ 8,87 (s), δ 8,26 (m), δ 7,87 (m), δ 7,80 (m), δ 7,56 (m).

Ukupna sinteza N-(2,4-di-terc-butil-5-hidroksifenil)-4-oxo-1,4-dihidrokinolin-3-karboksamida (Jedinjenje 2)

[0311]

Postupak za pripremu 2,4-di-terc-butilfenil metil karbonata (30)

[0312]

Metod 1

[0313] Rastvoru 2,4-di-terc-butil fenola, 29, (10 g, 48,5 mmol) u dietil etru (100 ml) i trietilaminu (10,1 ml, 72,8 mmol), dodat je metil hloroformat (7,46 mL, 97 mmol) u kapima na 0 °C. Smeša je zatim ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana još 2 sata. Zatim je dodato dodatnih 5 ml trietilamina i 3,7 ml metil hloroformata i reakcija je mešana preko noć i. Reakcija je zatim filtrirana, filtrat je ohlađen na 0 °C, a zatim je dodato dodatnih 5 ml trietilamina i 3,7 ml metil hloroformata i reakcija je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu, a zatim je mešana još 1 sat. U ovoj fazi, reakcija je bila gotovo završena i obrađena je filtriranjem, zatim ispiranjem vodom (2x), a zatim slanim rastvorom. Rastvor je zatim koncentrovan da bi se dobilo žuto ulje i prečišć en hromatografijom na koloni da bi se dobilo jedinjenje 1

30. H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,35 (d, J = 2,4 Hz,1H), 7,29 (dd, J = 8,4, 2,4 Hz,1H), 7,06 (d, J = 8,4 Hz,1H), 3,85 (s,3H), 1,30 (s,9H), 1,29 (s,9H).

Metod 2

[0314] U posudu reaktora napunjenu sa 4-dimetilaminopiridinom (DMAP, 3,16 g, 25,7 mmol) i 2,4-ditert-butil fenolom (jedinjenje 29, 103,5 g, 501,6 mmol) dodat je metilen hlorid (415 g, 313 ml). ) i rastvor je mešan dok se sve čvrste materije ne rastvore. Zatim se doda trietilamin (76 g, 751 mmol) i rastvor se ohladi na 0 - 5 °C. Zatim je u kapima dodat metil hloroformiat (52 g, 550,3 mmol) tokom 2,5 - 4 sata, dok je temperatura rastvora održavana između 0 - 5 °C. Zatim se reakciona smeša polako zagreva na 23 - 28 °C i meša 20 sati. Reakcija je zatim ohlađena na 10 - 15 °C i napunjena sa 150 ml vode. Smeša je mešana na 15 - 20 °C tokom 35 - 45 minuta, a vodeni sloj je zatim odvojen i ekstrahovan sa 150 ml metilen hlorida. Organski slojevi su kombinovani i neutralisani sa 2,5% HCl (vod) na temperaturi od 5 - 20 °C da bi se dobio konačni pH od 5 - 6. Organski sloj je zatim ispran vodom i koncentrovan u vakumu na temperaturi ispod 20 °C do 150 ml, dajuć i jedinjenje 30 u metilen hloridu.

Postupak za pripremu 5-nitro-2,4-di-terc-butilfenil metil karbonata (31)

[0315]

Metod 1

[0316] Mešanom rastvoru jedinjenja 30 (6.77g, 25.6 mmol) dodavano je kap po kap 6 mL 1:1 smeše sumporne kiseline i azotne kiseline na 0 °C. Smeša je ostavljena da se zagreje na sobnoj temperaturi i mešana je 1 sat. Proizvod je prečišć en tečnom hromatografijom (ISCO, 120 g, 0-7% EtOAc/Heksani, 38 min) dajuć i oko 8:1 - 10:1 smešu regioizomera jedinjenja 1

31 u obliku bele čvrste supstance. H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ7,63 (s,1H), 7,56 (s,1H), 3,87 (s,3H), 1,36 (s,9H), 1,32

(s,9H). HPLC ret. vreme 3.92 min 10-99% CH3CN, 5 min run; ESI-MS 310 m/z (MH) .

Metod 2

[0317] Jedinjenju 30 (100 g, 378 mmol) je dodat DCM (540 g, 408 ml). Smeša je mešana dok se sve čvrste supstance ne rastvore, a zatim ohlađena na -5 - 0 °C. Zatim je ukapavanjem dodavana koncentrovana sumporna kiselina (163 g), uz održavanje početne temperature reakcije, i smeša je mešana 4,5 sata. Azotna kiselina (62 g) je zatim dodavana u kapima tokom 2-4 sata uz održavanje početne temperature reakcije, a zatim je mešana na ovoj temperaturi dodatnih 4,5 sata. Reakciona smeša je zatim polako dodavana u hladnu vodu, održavajuć i temperaturu ispod 5 °C. Ugašena reakcija je zatim zagrevana na 25 °C, a vodeni sloj je uklonjen i ekstrahovan metilen hloridom. Kombinovani organski slojevi su isprani vodom, osušeni primenom Na2SO4i koncentrovani do 124-155 ml. Dodat je heksan (48 g) i rezultujuć a smeša je ponovo koncentrovana na 124-155 ml. Posle toga je smeši dodato još heksana (160 g). Smeša je zatim mešana na 23 - 27 °C tokom 15,5 sati, a zatim je filtrirana. U filterski talog se doda heksan (115 g), rezultujuć a smeša se zagreva pod refluksom i meša 2 - 2,5 sata. Smeša se zatim ohladi na 3 - 7 °C, meša dodatnih 1 - 1,5 sata i filtrira dajuć i jedinjenje 31 kao svetlo žutu čvrstu supstancu.

Postupak za pripremu 5-amino-2,4-di-terc-butilfenil metil karbonata (32)

[0318]

[0319] 2,4-Di-terc-butil-5-nitrofenil metil karbonat (1,00 ekv.) je napunjen u odgovarajuć i reaktor za hidrogenizaciju, prać en 5% Pd/C (2,50 tež.% suve osnove, Johnson-Matthei Tip 37). MeOH (15,0 zapremina) je napunjen u reaktor i sistem je zatvoren. Sistem je pročišć en sa N2(g), a zatim je pod pritiskom na 2,0 bara sa H2(g). Reakcija je izvedena na temperaturi reakcije od 25 °C /- 5 °C. Po završetku, reakcija je filtrirana, a reaktor/talog je ispran sa MeOH (4,00 zapremina). Dobijeni filtrat je destilovan pod vakumom na ne više od 50 °C do 8,00 zapremine. Dodata je voda (2,00 zapremina) na 45 °C /- 5 °C. Dobijena suspenzija je ohlađena na 0 °C /- 5. Kaša je držana na 0 °C /- 5 °C ne manje od 1 sata i filtrirana. Talog je ispran jednom sa 0 °C /- 5 °C MeOH/H2O (8:2) (2,00 zapremina). Zatim je osušen u vakumu (-

1

0,90 bara i -0,86 bara) na 35 °C - 40 °C da bi se dobilo jedinjenje 32. H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.05 (s,1H), 6,39 (s , 1H), 4,80 (s,2H), 3,82 (s,3H), 1,33 (s,9H), 1,23 (s,9H).

[0320] Po završetku reakcije, rezultujuć a smeša se razblaži sa oko 5 do 10 zapremina MeOH (npr. od oko 6 do oko 9 zapremina MeOH, od oko 7 do oko 8,5 zapremina MeOH, od oko 7,5 do oko 8 zapremina MeOH, ili oko 7,7 zapremina MeOH), zagrejana na temperaturu od oko 35 ± 5 °C, filtrirana, oprana i osušena, kako je gore opisano.

Priprema N-(2,4-di-terc-butil-5-hidroksifenil)-4-oxo-1,4-dihidrokinolin-3-karboksamida (Jedinjenje 2).

[0321]

[0322] 4-oxo-1,4-dihidrokinolin-3-karbonska kiselina, 26, (1,0 ekv.) i 5-amino-2,4-di-terc-butilfenil-metil-karbonat, 32, (1,1 ekv.) je napunjen u reaktor. Dodat je 2-MeTHF (4.0 zapremina, u odnosu na kiselinu), prać en 50% rastvorom T3P® u 2-MeTHF (1.7 ekv.). Posuda napunjena T3P je isprana sa 2-MeTHF (0.6 zapremina). Zatim se dodaje piridin (2,0 ekv.), a rezultujuć a suspenzija se zagreva na 47,5 °C ± 5,0 °C i drži na ovoj temperaturi 8 sati. Uzorak je uzet i proveren da li je kompletiran pomoću HPLC-a. Po završetku, rezultujuć a smeša je ohlađena na 25,0 °C /- 2,5 °C. Dodat je 2-MeTHF (12,5 zapremina) da bi se smeša razblažila. Reakciona smeša je isprana vodom (10.0 zapremina) 2 puta. Dodat je 2-MeTHF da bi se ukupna zapremina reakcije doveo do 40,0 zapremine (~ 16,5 zapremine napunjeno). Ovom rastvoru je dodat NaOMe/MeOH (1.7 ekv.) da bi se izvršila metanoliza. Reakcija je mešana ne manje od 1,0 sata i proverena da li je završena pomoć u HPLC-a. Po završetku, reakcija je ugašena sa 1 N HCl (10,0 zapremina), i isprana sa 0.1 N HCl (10,0 zapremina). Organski rastvor je “polish” filtriran da bi se uklonile sve čestice i smešten u drugi reaktor. Filtrirani rastvor je koncentrovan na najviše 35 °C (temperatura omotača) i ne manje od 8,0 °C (unutrašnja reakciona temperatura) pod smanjenim pritiskom na 20 zapremine. CH3CN je dodat na 40 zapremine i rastvor je koncentrovan na ne više od 35 °C (temperatura omotača) i ne manje od 8,0 °C (unutrašnja reakciona temperatura) do 20 zapremine. Dodavanje CH3CN i ciklus koncentracije je ponovljen još 2 puta za ukupno 3 dodavanja CH3CN i 4 koncentracije do 20 zapremine. Nakon konačne koncentracije na 20 zapremine, dodato je 16,0 zapremine CH3CN prać eno 4,0 zapremine H2O da bi se dobila konačna koncentracija od 40 zapremine 10% H2O/CH3CN u odnosu na početnu kiselinu. Ova suspenzija je zagrevana na 78,0 °C /- 5,0 °C (refluks). Kaša je zatim mešana ne manje od 5 sati. Gusta smeša je ohlađena na 0.0 °C /- 5 °C tokom 5 sati i filtrirana. Talog je ispran sa 0,0 °C /- 5,0 °C CH3CN (5 zapremina) 4 puta. Dobijena čvrsta supstanca (Jedinjenje 2) je osušena u vakumskoj pe ć i na 50,0 °C /- 5,0 °C.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) $ 12,8 (s,1H), 11,8 (s,1H), 9,2 (s,1H), 8,9 (s,1H), 8,3 (s,1H), 7,2 (s,1H), 7,9 (t,1H), 7,8 (d,1H), 7,5 (t,1H), 7,1 (s,1H), 1,4 (s,9H), 1,4 (s,9H).

Alternativni preparat N-(2,4-di-terc-butil-5-hidroksifenil)-4-okso-1,4-dihidrokinolin-3-karboksamida (Jedinjenje 2).

[0324] 4-oxo-1,4-dihidrokinolin-3-karbonska kiselina, 26, (1,0 ekv.) i 5-amino-2,4-di-terc-butilfenil-metil-karbonat, 32, (1,1 ekv.) je napunjeno u reaktor. Dodat je 2-MeTHF (4.0 zapremina, u odnosu na kiselinu), prać eno 50% rastvorom T3P® u 2-MeTHF (1.7 ekv.). Posuda napunjena T3P je isprana sa 2-MeTHF (0.6 zapremina). Zatim se doda piridin (2,0 ekv.), A rezultujuć a suspenzija se zagreva na 47,5 /- 5,0 °C i drži na ovoj temperaturi 8 sati. Uzorak je uzet i proveren da li je završena pomoću HPLC-a. Po završetku, rezultujuć a smeša je ohlađena na 20 °C /- 5 °C. Dodat je 2- MeTHF (12,5 zapremina) da bi se smeša razblažila. Reakciona smeša je isprana vodom (10.0 zapremina) 2 puta i 2-MeTHF (16.5 zapremina) je napunjena u reaktor. Ovo rešenje je napunjeno sa 30% w/w NaOMe/MeOH (1,7 ekv.) Da bi se izvršila metanoliza. Reakcija je mešana na 25,0 °C /- 5,0 °C ne manje od 1,0 sata i proverena da li je završena pomoć u HPLC-a. Po završetku, reakcija je ugašena sa 1.2 N HCI/H2O (10.0 zapremina) i isprana sa 0.1 N HCl/H2O (10.0 zapremina). Organski rastvor je “polish” filtriran da bi se uklonile sve čestice i smešten u drugi reaktor.

[0325] Filtrirani rastvor je koncentrovan na ne više od 35 °C (temperatura omotača) i ne manje od 8,0 °C (unutrašnja reakciona temperatura) pod smanjenim pritiskom na 20 zapremina. CH3CN je dodat u 40 zapremine i rastvor je koncentrovan na ne više od 35 °C (temperatura omotača) i ne manje od 8,0 °C (unutrašnja reakciona temperatura) do 20 zapremine. Dodat je CH3CN i ciklus koncentracije je ponovljen još 2 puta za ukupno 3 dodavanja CH3CN i 4 koncentracije do 20 zapremine. Posle konačne koncentracije na 20 zapremine, napunjeno je 16,0 zapremine CH3CN, prać eno sa 4,0 zapremine H2O da bi se dobila konačna koncentracija od 40 zapremine 10% H2O/CH3CN u odnosu na početnu kiselinu. Ova suspenzija je zagrevana na 78,0 °C /- 5,0 °C (refluks). Kaša je zatim mešana ne manje od 5 sati. Kaša je ohlađena na 20 do 25 °C tokom 5 sati i filtrirana. Talog je ispran sa CH3CN (5 zapremine) I zagrejan na 20 do 25 °C 4 puta. Dobijena čvrsta

supstanca (Jedinjenje 2) je osušena u vakumskoj pe ć i na 50,0 °C /- 5,0 °C.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,8 (s,1H), 11,8 (s,1H), 9,2 (s,1H), 8,9 (s,1H), 8,3 (s,1H), 7,2 (s,1H), 7,9 (t,1H), 7,8 (d,1H), 7,5 (t,1H), 7,1 (s,1H), 1,4 (s,9H), 1,4 (s,9H).

Postupak za rekristalizaciju N-(2,4-di-terc-butil-5-hidroksifenil)-4-oxo-1,4-dihidrokinolin-3-karboksamida (Jedinjenje 2)

[0326]

[0327] Jedinjenje 2 (1.0 ekv.) je napunjeno u reaktor. Dodat je 2-MeTHF (20,0 zapremine) prać eno sa 0,1N HCl (5,0 zapremine). Dvofazni rastvor je mešan i odvojen, a gornja organska faza je isprana još dva puta sa 0,1 N HCI (5,0 zapremina). Organski rastvor je “polish” filtriran da bi se uklonile sve čestice i smešten u drugi reaktor. Filtrirani rastvor je koncentrovan na najviše 35 °C (temperatura omotača) i ne više od 8,0 °C (unutrašnja reakciona temperatura) pod smanjenim pritiskom na 10 zapremine. Dodat je izopropil acetat (IPAc) (10 zapremina) i rastvor je koncentrovan na ne više od 35 °C (temperatura omotača) i ne više od 8,0 °C (unutrašnja reakciona temperatura) do 10 zapremine. Dodavanje IPAc i koncentracije je ponovljeno još 2 puta za ukupno 3 dodavanja IPAc i 4 koncentracije do 10 zapremine. Posle konačne koncentracije, napunjeno je 10 zapremina IPAc i suspenzija je zagrevana do refluksa i održavana na ovoj temperaturi 5 sati. Gusta smeša je ohlađena na 0.0 ° C /- 5 °C tokom 5 sati i filtrirana. Talog je jednom ispran IPAc (5 zapremina). Dobijena čvrsta supstanca je sušena u vakumskoj peć i na 50,0 °C /- 5,0 °C.

Priprema Čvrste Disperzije koja Sadrži Suštinski Amorfno Jedinjenje 2

[0328] Sistem rastvarača MEK i DI vode, formulisan prema odnosu 90 tež.% MEK/10 tež.% DI vode, je zagrejan na temperaturu od 20 - 30 °C u reaktoru, opremljenom magnetnom mešalicom i termičkim strujnim kolom. U ovaj sistem rastvarača dodati su polimeri hipromeloza acetat sukcinat (HPMCAS) (HG stepen), SLS i Jedinjenje 2 u odnosu 19,5 tež.% hipromeloza acetat sukcinat/0,5 tež.% SLS/80 tež.% Jedinjenja 2. Dobijena smeša je sadržala 10,5 tež.% čvrste supstance. Stvarne količine sastojaka i rastvarača korišć enih za stvaranje ove smeše navedene su u Tabeli 5, ispod:

Tabela 5: Sastojci Disperzije Čvrstog Raspršivanja za intermedijar F.

[0329] Temperatura smeše je podešena na opseg od 20 - 45 °C i mešana je sve dok nije postala suštinski homogena i dok sve komponente nisu bile suštinski rastvorene.

[0330] Sušač za raspršivanje, Niro PSD4 Komercijalni Sušač za Raspršivanje, opremljen mlaznicom pod pritiskom (Spray Systems Maximum Passage serija SK-MFP sa otvorom/veličinom jezgra 54/21), opremljen “anti-bearding” poklopcem, korišć en je u normalnom režimu sušenja raspršivanjem, prateći parametre procesa suvog raspršivanja u navedene Tabeli 6, ispod.

Tabela 6: Parametri postupka suvog raspršivanja koji se koriste za dobijanje Intermedijara F.

[0331] Ciklon visoke efikasnosti odvojio je vlažni proizvod od raspršenog gasa i para rastvarača. Vlažni proizvod je sadržao 8,5 - 9,7% MEK i 0,56 - 0,83% vode i imao je srednju veličinu čestica 17 - 19 um i zapreminsku gustinu od 0,27 - 0,33 g/cc. Vlažni proizvod je prebačen u vakum sušač sa dvostrukim konusom od nerđajuć eg čelika od 4000L radi sušenja da bi se smanjili zaostali rastvarači na nivo manji od oko 5000 ppm i da bi se stvorilo suvi raspršivanje suve disperzije amorfnog Jedinjenja 2, koja sadrži <0,03% MEK i 0,3% vode.

Formiranje Tableta iz Potpuno Kontinuiranog Procesa Vlažne Granulacije

Oprema/Proces

Oprema

[0332] Oprema za Potpuno Kontinuirani Razvoj i Lansiranje (DLR) ili slična oprema.

Prosijavanje

[0333] Jedinjenje 1 Oblik I, čvrsta disperzija koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2, i pomoć ne supstance se mogu dozirati u odvojenim srednjim “bin” kontejnerima (IBC). Ovi materijali se mogu pregledati korišć enjem postupka pregleda tzv. „bin-to-bin“. Odgovarajuć e veličine sita su mrežica 20, mrežica 40 ili mrežica 60.

Mešanje

[0334] IBC-ovi koji sadrže prosijano Jedinjenje 1, Oblik I, čvrstu disperziju koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2 i pomoć ne supstance mogu biti usidreni u sistem za dodavnje, koji može dodavati materijale na kontrolisan način, na primer korišć enjem volumetrijskog ili gravimetrijskog gubitka u dodavačima za težinu u kontinuirani blender. Stope dodavanja pojedinačnih komponenti definisane su sastavom formulacije i ukupnom brzinom dodavanja. Brzina linije može biti od 8 kg/sat do 30 kg/sat. Neprekidni blender može imati različite konfiguracije sečiva kako bi omoguć io odgovaraju ć e mešanje, a brzina rotacije ovih lopatica može biti između 80 obrtaj/min i 300 obrtaj/min.

Mokra granulacija

[0335] Rastvor za granulaciju se može pripremiti rastvaranjem 48 g natrijum lauril sulfata i 159 g polivinilpirolidona u 1,626 g vode u posudi od nerđajuć eg čelika, koriste ć i gornju mešalicu sa brzinom mešanja od 700 RPM. Rastvor za granulaciju se može staviti u posudu iz koje se rastvor može pumpati u granulator sa dvostrukim zavrtnjem pomoć u peristaltičke pumpe sa meračem masenog protoka i kontrolom, koristeć i protok koji odgovara procesu. Smeša se može granulirati pomoć u granulatora sa dvostrukim zavrtnjem kao što je granulator koji je deo DLR-a. Smeša se može dodati granulatoru sa dvostrukim zavrtnjem pomoć u dodavača za gubitak težine, kao što je dodavač K-Tron na DLR, sa brzinom dodavanja od 8 kg/sat do 24 kg/sat. Granulator sa dvostrukim zavrtnjem može da radi sa temperaturom cevi od 25 stepeni Celzijusa i brzinom zavrtanja od 200 do 950 RPM. Postupak granulacije se može izvoditi tokom tri minuta za male serije ili nekoliko sati za velike veličine.

Sušenje

[0336] Vlažne granule se mogu unositi direktno u sušač sa fluidnim slojem, kao što je segmentirani sušač sa fluidnim slojem na DLR. Krajnja tačka sušenja se može odabrati na temperaturi proizvoda tokom ispuštanja u rasponu od 40 do 55 stepeni Celzijusa, pri čemu sadržaj vode u granulama može biti 2,1% w/w („Gubitak pri sušenju, LOD“) ili manje. Vreme sušenja može biti 12 minuta, ili krać e ili duže, da bi se postigla željena krajnja tačka sušenja.

Mlevenje

[0337] Osušene granule se mogu mleti da bi se smanjila veličina granula. Za to se može koristiti konusni mlin kao što je integrisani Quadro U10 CoMil.

Mešanje

[0338] Granule se mogu mešati sa ekstragranularnim ekscipijentima kao što su punila i lubrikanti, koristeć i dodavač za gubitak težine i kontinuirani blender. Brzina mešanja može biti 80 - 300 RPM.

Kompresija

[0339] Smeša za kompresovanje se može kompresovati u tablete pomoć u jedne stanice ili rotiraju ć e prese za tablete, kao što je Courtoy Modul P presa, koja je deo DLR sistema, koristeć i alat odgovaraju ć e veličine. Težina tableta za dozu od 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 može biti oko 500 ili 600 mg.

Oblaganje Filmom

[0340] Tablete se mogu obložiti filmom koristeć i inovativni Omega film premaz, koji je deo DLR sistema. Ovaj premaz omoguć ava brzo oblaganje podserija od 1 do 4 kg kako bi se omogu ć ila kontinuirana proizvodnja.

Štampanje

[0341] Tablete obložene filmom se mogu štampati sa monogramom na jednoj ili obe površine tableta, na primer, Ackley “ramp” štampačem.

[0342] Gore opisani kontinuirani postupak u jednom izvođenju poboljšan je PAT tehnikama kako je opisano u Tabeli 7. Postoji 6 PAT položaja od kojih svaki uključuje ulaz za ručno uzorkovanje. U procesu se uzorci mogu dobiti iz istražnih razloga, po potrebi, a takođe i za održavanje, prenos i validaciju PAT modela. PAT sistemi se mogu koristiti za testiranje puštanja u realnom vremenu (RTRT), a mogu se koristiti i za kontrolu procesa (IPC) i kontrolu “feed-back”/”feed-forward” informacije.

Tabela 7.

[0343] Postizanje specifikacija se može izvršiti RTRT-om kako je opisano u Tabeli 8.

Tabela 8.

[0344] Postoji velika verovatnoć a otkrivanja neprilagodljivog materijala. Na primer, ako se kriterijum za klasifikaciju modela postavi na najmanje 95% pouzdanosti i 800 tableta se testira tokom proizvodnje serije, 40-časovni rad sa stopom uzorkovanja od 1 tablete na svaka 3 minuta jednako je 800 tableta. Tada je verovatnoć a prolaska neprilagodljive serije nizuzetno mala: <(0.05) , gde je n = # uzoraka, pa je verovatno ć a < 1.5 x 10<-1041>.Verovatnoć a da ne ć e otkriti neprilagodljive tablete kao rezultat kratkotrajnog događaja (≥ 3 minuta) je slede ć a: 1 tableta (3-minutni događaj) → < 0,05 (verovatnoć a otkrivanja > 0,95); 2 tablete (događaj od 6 minuta) → < 0,0025 (verovatnoć a otkrivanja> 0,9975).

[0345] PAT merenja mogu poslužiti kao surogati za konvencionalno krajnje testiranje direktno kombinovanjem merenja za konvencionalno izražavanje atributa (tj. kao test, CU, rastvaranje, itd.). Validacija se može izvršiti pomoć u ICH Q2 kao smernice. Sekvencijalni razvoj off-line do on-line metode omoguć ava procenu CQA na materijalno štedljiv način. Na kraju, RTRT dovodi do osiguranja kvaliteta proizvoda na višem nivou pouzdanosti od uobičajenog ispitivanja.

Formiranje Tableta iz Procesa Vlažne Granulacije Dvostrukim Zavrtnjem

Oprema/Proces

Oprema

[0346] Vlažni Granulatori sa Dvostrukim Zavrtnjem: ConsiGma-1, ConsiGma-25 ili Leistritz nano.

Prosijavanje / Pranje

[0347] Jedinjenje 1, Oblik I, čvrsta disperzija koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2 i ekscipijente se može se pregledati pre ili posle merenja težine. Odgovarajuć e veličine sita su mrežica 20, mreža 40 ili mreža 60. Jedinjenje 1, Oblik I i/ili čvrsta disperzija koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2, se mogu prethodno mešati sa jednim ili više ekscipijenata radi pojednostavljenja prosijavanja.

Mešanje

[0348] Jedinjenje 1, Oblik I, čvrsta disperzija koja sadrži u osnovi amorfno Jedinjenje 2 i ekscipijente se mogu dodati u blender u različitom redosledu. Mešanje se može izvoditi u blenderu Turbula, blenderu v-shell ili “bin” blenderu. Komponente se mogu mešati 10 minuta.

Vlažna Granulacija

[0349] Rastvor za granulaciju se može pripremiti rastvaranjem 48 g natrijum lauril sulfata i 159 g polivinilpirolidona u 1,626 g vode u posudi od nerđajuć eg čelika, koriste ć i gornju mešalicu sa brzinom mešanja od 700 RPM. Smeša se može granulirati pomoć u granulatora sa dvostrukim zavrtnjem kao što je ConsiGma-1. Rastvor za granulaciju se može dodati u granulatora sa dvostrukim zavrtnjem pomoć u peristaltičke pumpe, kao što je pumpa na ConsiGma-1, sa brzinom dovoda od 67 g/min. Smeša se može dodati granulatora sa dvostrukim zavrtnjem pomoć u dodavača za Gubitak Težine, kao što je Brabender dodavač na ConsiGma-1, sa brzinom dodavanja od 10 kg/sat. Granulator sa dvostrukim zavrtnjem može da radi sa temperaturom cevi od 25 stepeni celzijusa i brzinom zavrtanja od 400 RPM. Postupak granulacije može se izvoditi četiri minuta. Postupak granulacije se može izvoditi krać e ili duže vreme da bi se proizvela manja ili ve ć a količina vlažnih granula.

Sušenje

[0350] Vlažne granule se mogu unositi direktno u sušač sa fluidnim krevetom, kao što je komora za sušenje na ConsiGma-1 ili segmentirani sušač sa fluidnim krevetom na CTL-25. Krajnja tačka sušenja se može odabrati na temperaturi proizvoda od 43 stepena Celzijusa, pri čemu sadržaj vode u granulama može biti 1,6% w/w („Gubitak pri Sušenju, LOD“). Vreme sušenja može biti 12 minuta, ili krać e ili duže, da bi se postigla željena krajnja tačka sušenja. Sušenje se može izvoditi sa protokom vazduha od 59 m<3>/min i sa ulaznom temperaturom od 60 stepeni Celzijusa. Alternativno, mokre granule koje dolaze iz granulatora sa dvostrukim zavrtnjem se mogu sakupljati u posudu ili kontejner na određeno vreme, nakon čega se mokre granule prenose u zasebni samostalni sušač sa fluidnim krevetom, kao što je Vector Multi 15.

Mlevenje

[0351] Osušene granule se mogu samleti da bi se smanjila veličina granula. Za to se može koristiti konusni mlin kao što je Quadro 194 CoMil.

Mešanje

[0352] Granule se mogu mešati sa ekstra-granularnim ekscipijentima kao što su punila i lubrikanti, koristeć i blender sa V-ljuskom ili “bin” blender. Vreme mešanja može biti 5, 3 ili 1 minut(a).

Kompresija

[0353] Kompresiona smeša se može kompresovati u tablete pomoć u jedne stanice ili rotacione preše za tablete, kao što je Courtoy Modul P presa, koristeć i alate ovalnog oblika od 0,55 ’ x 0,33’. Težina tableta za dozu od 200 mg Jedinjenja 1 Oblika I i 125 mg suštinski amorfnog Jedinjenja 2 može biti oko 500 ili 600 mg.

Oblaganje Filmom

[0354] Tablete se mogu obložiti filmom pomoć u premaza za posudu, kao što je, na primer, Thomas Engineering Compu-Lab premaz. Količina voska Carnauba u tragovima se može dodati da bi se poboljšao izgled tableta i kvalitet procesa.

Štampanje

[0355] Tablete obložene filmom mogu biti štampane sa monogramom na jednoj ili obe površine tableta, na primer, štampačem Hartnett Delta.

Formiranje Tableta iz Kontinuiranog Procesa Vlažne Granulacije Dvostrukim Zavrtnjem

Oprema/proces

Oprema

[0356] Granulator: granulator sa dvostrukim zavrtnjem ConsiGma ili Leistritz ili Thermo Fisher.

Prosijavanje / Merenje težine

[0357] Jedinjenje 1 i ekscipijenti se mogu prosijati pre ili posle merenja težine. Moguć e veličine sita su mrežica 20, mrežica 40 ili mreža 60. Jedinjenje 1 se može prethodno mešati sa jednom ili više ekscipijenata radi pojednostavljenja prosijavanja.

Mešanje

[0358] Jedinjenje 1 i pomoć ne supstance se mogu se dodavati u blender u različitom redosledu. Mešanje se može izvoditi u Turbula blenderu, blenderu sa v-ljuskom, “bin” blenderu ili kontinualnom blenderu. Komponente se mogu mešati 10 minuta za “batch” blendere ili kontinuirano za kontinuirani blender.

Operacija Granulacije

[0359] Granulaciona tečnost - SLS i vezivo se dodaju prečišć enoj vodi i mešaju dok se ne rastvori. Pogodan odnos je 2,5% w/w SLS i 10,0% w/w PVP K30 u vodi.

[0360] Granulacija - Smeša koja sadrži Jedinjenje 1 i pomoć ne supstance se može dozirati u granulator sa dvostrukim zavrtnjem pomoć u dodavača za Gubitak Težine brzinom od 10 kg/sat. Tečnost za granulaciju se može dodati primenom peristaltičke pumpe brzinom od 3,5 kg/sat. Granulator se može pokretati brzinom od 400 RPM. Značajna prednost sadašnjeg procesa vlažne granulacije dvostrukim zavrtnjem je upotreba tečnosti za granulaciju koja sadrži i površinski aktivnu supstancu i vezivo za bolju granulaciju kroz poveć anu vlažnost. U jednom izvođenju, surfaktant je SLS. Još jedna značajna prednost je ta što se postupak neprekidno odvija i u bilo kom trenutku se obrađuje samo ograničena količina materijala, što može da bude dobro kontrolisano i rezultira visokokvalitetnim proizvodom.

Mlevenje

[0361] Granule se mogu smanjiti u veličini pomoć u mlina za sito ili konusnog mlina, bilo pre sušenja ili nakon sušenja, ili oboje.

Sušenje

[0362] Granule se mogu osušiti upotrebom vakum peć i, sušača za tacne, dvokonusnog sušača ili sušača sa fluidnim slojem. Mešanje

[0363] Granule se mogu mešati sa ekstragranularnim ekscipijentima. Granule su mešane pomoć u “bin” blendera od 300 litara tokom 60 obrtaja.

Kompresija

[0364] Kompresiona mešavina je komprimovana u tablete upotrebom Courtoy Modul P rotacione prese.

Oblaganje Filmom

[0365] Tablete mogu biti presvučene filmom pomoć u premaza za posudu, kao što je, na primer, O’Hara Labcoat.

Štampanje

[0366]Tablete obložene filmom se mogu štampati monogramom na jednoj ili obe površine tableta, na primer, Hartnett Delta štampačem.

TESTOVI PROTOKOL 1

Analize za Otkrivanje i Merenje ΔF508-CFTR Svojstava Potencijacije Jedinjenja

Optičke metode membranskog potencijala za testiranje svojstava jedinjenja Δ F508-CFTR

[0367] Test koristi fluorescentne boje za osetljivost napona za merenje promena membranskog potencijala koristeć i čitač fluorescentnih pločica (npr. FLIPR III, Molecular Devices, Inc.) kao očitavanje za poveć anje funkcionalnog ΔF508-CFTR u NIH 3T3 ć elijama. Pokretačka snaga reakcije je stvaranje gradijenta hloridnih jona u vezi sa aktivacijom kanala jednim korakom dodavanja tečnosti nakon što su ć elije prethodno obrađene jedinjenjima i naknadno napunjene bojom za osetljivost napona.

Identifikacija Jedinjenja Potencijatora

[0368] Da bi se identifikovali potencijatori ΔF508-CFTR, razvijen je HTS test dvostrukog dodavanja. Ovaj HTS test koristi fluorescentne boje za osetljivost napona za merenje promena membranskog potencijala na FLIPR III kao merilo za poveć anje gejtinga (provodljivosti) ΔF508 CFTR u temperaturno korigovanim ΔF508 CFTR NIH 3T3 ć elijama. Pokretačka -snaga odgovora je gradijent Cl jona u sprezi sa aktivacijom kanala forskolinom u jednom koraku dodavanja tečnosti pomoć u čitača fluorescentnih pločica kao što je FLIPR III nakon što su ć elije prethodno obrađene potencijatorskim jedinjenjima (ili DMSO kontrolom nosača) a naknadno napunjene bojom za preraspodelu.

Rastvori

[0369] “Bath” rastvor # 1: (u mM) NaCl 160, KCl 4.5, CaCl22, MgCl21, HEPES 10, pH 7,4 sa NaOH.

[0370] “Bath” rastvor bez hlorida: Hloridne soli u “Bath” rastvoru br. 1 (gore) su zamenjene solima glukonata.

Ćelijska Kultura

[0371] NIH3T3 mišji fibroblasti koji stabilno eksprimiraju ΔF508-CFTR se koriste za optička merenja membranskog potencijala. Ć elije se održavaju na 37 °C u 5% CO2i 90% vlažnosti u Dulbecco-ovom modifikovanom “Eagle” medijumu dopunjenom sa 2 mM glutamina, 10% fetalnog goveđeg seruma, 1 X NEAA, β-ME, 1 X olovka/strep i 25 mM HEPES u bocama za kulturu od 175 cm<2>. Za sve optičke testove, ć elije su zasejane sa ∼20.000/bunaru u ploče obložene matrigelom sa 384 bunara i kultivisane 2 sata na 37 °C pre nego što su kultivisane na 27 °C tokom 24 sata za test potencijatora. Za testove korekcije, ć elije se gaje na 27 °C ili 37 °C sa i bez jedinjenja tokom 16 - 24 sata.

[0372] Elektrofiziološki Testovi za ispitivanje svojstava jedinjenja ΔF508-CFTR modulacije.

Tzv. ”Test Ussing” Komore

[0373] Izvedeni su eksperimenti sa upotrebom komore na polarizovanim epitelnim ć elijama disajnih puteva koji eksprimiraju ΔF508-CFTR da bi dalje karakterisali ΔF508-CFTR augmentatore ili induktore identifikovane u optičkim testovima. Epiteli ne-CF i CF disajnih puteva su izolovani iz bronhijalnog tkiva, kultivisani kako je prethodno opisano (Galietta, L.J.V., Lantero, S., Gazzolo, A., Sacco, O., Romano, L., Rossi, G.A. i Zegarra-Moran, O. (1998) In Vitro Cell. Dev. Biol. 34, 478-481), i postavljeni na Costar® Snapwell<TM>filtere koji su prethodno premazani medijima koji su uslovljeni NIH3T3. Posle četiri dana apikalni medijum je uklonjen i ć elije su gajene na vazdušnom tečnom interfejsu > 14 dana pre upotrebe. To je rezultiralo jednoslojem potpuno diferenciranih stubastih ć elija koje su trepljale, što je karakteristično za epitel disajnih puteva. Ne-CF HBE su izolovani od nepušača koji nisu imali nijednu poznatu bolest pluć a. CF-HBE su izolovani od homozigotnih pacijenata za ΔF508.

[0374] HBE uzgajani na umecima ć elijske kulture Costar® Snapwell<TM>montirani su u Ussing komoru za (Physiologic -Instruments, Inc., San Diego, CA), a transepitelni otpor i struja kratkog spoja u prisustvu bazolateralog do apikalnog Cl gradijenta (ISC) meren je pomoć u naponskog “clamp” sistema (Odeljenje za Bioinženjering, Univerzitet u Ajovi, IA). Ukratko, HBE su ispitivani pod uslovima snimanja naponskog “clamp-a” (Vhold= 0 mV) na 37 °C. Bazolateralni rastvor je sadržao (u mM) 145 NaCl, 0,83 K2HPO4, 3,3 KH2PO4, 1,2 MgCl2, 1,2 CaCl2, 10 glukoze, 10 HEPES (pH podešen na 7,35 sa NaOH) i apikalni rastvor (u mM) 145 NaGlukonata, 1,2 MgCl2, 1,2 CaCl2, 10 glukoze, 10 HEPES (pH podešen na 7,35 sa NaOH).

Identifikacija Jedinjenja Potencijatora

-

[0375] Tipični protokol je koristio gradijent koncentracije Cl bazolateralne do apikalne membrane. Da bi se uspostavio ovaj gradijent, korišć eni su normalni prstenovi na bazolateralnoj membrani, dok je apikalni NaCl zamenjen ekvimolarnim natrijum glukonatom (titrovan na pH 7,4 sa NaOH) da bi se dobio veliki gradijent koncentracije Cl preko epitela. Forskolin (10 mM) i sva test jedinjenja su dodata na apikalnu stranu umetaka ć elijske kulture. Efikasnost navodnih potencijatora !F508-CFTR upoređena je sa efikasnošć u poznatog potencijatora, genisteina.

“Patch-clamp” Snimanja

-[0376] Ukupna struja Cl u ć elijama ΔF508-NIH3T3 pra ć ena je koriš ć enjem konfiguracije snimanja perforiranog “patch-a” kako je prethodno opisano (Rae, J., Cooper, K., Gates, P., & Watski, M. (1991) J. Neurosci. Metode 37, 15-26). Snimanja naponskih “clamp-a” izvedeno je na 22 °C pomoć u pojačala Axopatch 200B “patch-clamp” (Axon Instruments Inc., Foster City, CA). Rastvor pipete je sadržavao (u mM) 150 N-metil-D-glukamin (NMDG) )-Cl, 2 MgCl2, 2 CaCl2, 10 EGTA, 10 HEPES i 240 mg/ml amfotericina-B (pH podešen na 7,35 sa HC1). Van ć elijski medijum je sadržao (u mM) 150 NMDG-Cl, 2 MgCl2, 2 CaCl2, 10 HEPES (pH podešen na 7,35 sa HCl). Generisanje impulsa, prikupljanje podataka i analiza izvršeni su pomoć u računara opremljenog Digidata 1320 A/D interfejsom u saradnji sa Clampex 8 (Axon Instruments Inc.). Da bi se aktivirao ΔF508-CFTR, u “bath” je dodato 10 mM forskolina i 20 mM genisteina, a odnos struja i napon je prać en svakih 30 sekundi.

Identifikacija Jedinjenja Potencijatora

-[0377] Sposobnost potencijatora ΔF508-CFTR da pove ć aju makroskopsku struju ΔF508-CFTR Cl (IΔF508) u ć elijama NIH3T3, koje stabilno izražavaju ΔF508-CFTR, takođe je ispitivana upotrebom tehnika snimanja perforiranih “patch-eva”. Potencijatori identifikovani optičkim testovima izazvali su poveć anje doze IΔF508zavisno od doze sa sličnom snagom i efikasnošć u prime ć enom u optičkim testovima. U svim ispitivanim ć elijama, potencijal preokreta pre i tokom primene potencijatora je bio oko -30 mV, što je izračunata ECl(-28 mV).

Ćelijska Kultura

[0378] NIH3T3 mišji fibroblasti koji stabilno eksprimiraju ΔF508-CFTR se koriste za snimanje celih ć elija. Ć elije se održavaju na 37 °C u 5% CO2i 90% vlažnosti u Dulbecco-ovom modifikovanom “Eagle” medijumu dopunjenom sa 2 mM glutamina, 10% fetalnog goveđeg seruma, 1 X NEAA, β-ME, 1 X olovka/strep i 25 mM HEPES u bocama za kulturu od 175 cm<2>. Za snimanje celih ć elija, 2.500 - 5.000 ć elija je zasejano na staklenim pokrivačima obloženim poli-L-lizinom i kultivisano 24 - 48 sati na 27 °C pre upotrebe da bi se testirala aktivnost potencijatora; i inkubirano sa ili bez korektivnog jedinjenja na 37 °C za merenje aktivnosti korektora.

Jednokanalna snimanja

[0379] Aktivnost gejtinga wt-CFTR i temperaturno korigovanog ΔF508-CFTR izraženog u NIH3T3 ć elijama prime ć ena je korišć enjem izrezanih naopakih snimaka membranskih “patch-eva”, kao što je prethodno opisano ( Dalemans, W., Barbry, P., Champigny, G., Jallat, S., Dott, K., Dreyer, D., Crystal, R.G., Pavirani, A., Lecocq, J-P., Lazdunski, M. (1991) Priroda 354, 526 - 528) koristeć i Axopatch 200B “patch-clamp” pojačalo (Axon Instruments Inc.). Pipeta je sadržala (u mM): 150 NMDG, 150 asparaginske kiseline, 5 CaCl2, 2 MgCl2i 10 HEPES (pH podešen na 7,35 sa Tris bazom). “Bath” je sadržavao (u mM): 150 NMDG-Cl, 2 MgCl2, 5 EGTA, 10 TES i 14 Tris baze (pH podešen na 7,35 sa HCl). Nakon ekscizije, i wt- i ΔF508-CFTR su aktivirani dodavanjem 1 mM Mg-ATP, 75 nM katalitičke podjedinice cAMP-zavisne protein kinaze (PKA; Promega Corp. Madison, WI) i 10 mM NaF da inhibiraju proteinske fosfataze, što je sprečilo propadanje struje. Potencijal pipete održavan je na 80 mV. Aktivnost kanala analizirana je iz membranskih “patch-eva” koji sadrže % 2 aktivna kanala. Maksimalan broj istovremenih otvora odredio je broj aktivnih kanala tokom eksperimenta. Da bi se utvrdila jednokanalna amplituda struje, podaci zabeleženi tokom 120 sekundi aktivnosti ΔF508-CFTR filtrirani su „van mreže“ na 100 Hz, a zatim korišć eni za konstrukciju histograma amplitude svih tačaka koji su opremljeni multigauskim funkcijama koristeć i Bio-Patch Analiza Softver (Bio-Logic Comp. Francuska). Ukupna mikroskopska struja i otvorena verovatnoć a (Po) su određeni na osnovu 120 sek aktivnosti kanala. Poje određen pomoć u Bio-Patch softvera ili iz odnosa Po= I/i(N), gde je I = srednja struja, i = amplituda jednokanalne struje i N = broj aktivnih kanala u “patch-u”.

Ćelijska Kultura

[0380] NIH3T3 mišji fibroblasti koji stabilno eksprimiraju ΔF508-CFTR se koriste za “patch-clamp” snimanja sa izrezanom membranom. Ć elije se održavaju na 37 °C u 5% CO2i 90% vlažnosti u Dulbecco-ovom modifikovanom “Eagle” medijumu dopunjenom sa 2 mM glutamina, 10% fetalnog goveđeg seruma, 1 X NEAA, β-ME, 1 X olovka/strep i 25 mM HEPES u bocama za kulturu od 175 cm<2>. Za jednokanalna snimanja, 2.500 - 5.000 ć elija je zasejano na staklenim pokrivačima presvučenim poli-L-lizinom i kultivisano 24 - 48 sati na 27 °C pre upotrebe.

PROTOKOL 2

Testovi za Otkrivanje i Merenje !F508-CFTR Korektivnih Svojstava Jedinjenja

[0381] Optičke metode membranskog potencijala za testiranje modulacionih svojstava jedinjenja ΔF508-CFTR.

[0382] Test potencijala optičke membrane koristio je FRET senzore osetljive na napon koji su opisali Gonzalez i Tsien (videti Gonzalez, J.E. i R.Y. Tsien (1995) "Osetljivost napona prenosom fluorescentne rezonantne energije u pojedinačnim ć elijama" Biophys J. 69 (4): 1272 -80, i Gonzalez, J.E. i R.Y. Tsien (1997) „Poboljšani indikatori potencijala ć elijske membrane koji koriste fluorescentno rezonantni prenos energije“ Chem Biol 4(4): 269-77) u kombinaciji sa instrumentima za merenje fluorescentnih promena kao što je Napon/Jon Čitač Sonde (VIPR) (Videti, Gonzalez, J.E., K. Oades, i saradnici (1999) „Analize i instrumenti zasnovani nać elijama za pregled ciljeva jonskih kanala“ Drug Discov Today 4 (9): 431-439).

[0383] Ovi testovi osetljivi na napon se zasnivaju na promeni fluorescentnog rezonantnog prenosa energije (FRET) između boje koja se rastvara u membrani i koja je osetljiva na napon, DiSBAC2(3), i fluorescentnog fosfolipida, CC2-DMPE, koji je pričvršć en za spoljni listi ć membrane plazme i deluje kao FRET donor. Promene u membranskom potencijalu ( Vm) uzrokuju da se negativno naelektrisani DiSBAC2(3) preraspodeljuje kroz membranu plazme i količina prenosa energije iz CC2-DMPE se menja u skladu s tim. Promene u emisiji fluorescencije prać ene su koriš ć enjem VIPRTM II, koji je integrisani uređaj za obradu tečnosti i fluorescentni detektor dizajniran za provođenje ekrana zasnovanih nać elijama u 96- ili 3 mikrotitarskim pločama sa 84- bunara.

Identifikacija Korektivnih Jedinjenja

[0384] Da bi se identifikovali mali molekuli koji ispravljaju nedostatak transporta povezan sa !F508-CFTR; razvijen je format HTS testa sa jednim dodavanjem. Ć elije su inkubirane u medijumu bez seruma 16 sati na 37 °C u prisustvu ili odsustvu (negativna kontrola) test jedinjenja. Kao pozitivna kontrola, ć elije presvučene u ploče sa 384 bunara su inkubirane 16 sati na 27 °C da bi bile „temperaturno ispravne“ ΔF508-CFTR. Ć elije su potom isprane 3X Krebs Ringersovim rastvorom i napunjene bojama osetljivim na napon. Da bi se aktivirao ΔF508-CFTR, u svaki bunar je dodato 10 mM -forskolina i CFTR potencijator, genistein (20 mM). Dodatak medijuma bez Cl je promovisao izliv protoka kao odgovor na aktivaciju ΔF508-CFTR i rezultujuć a depolarizacija membrane optički je posmatrana pomo ć u boja na bazi FRET senzora napona.

Identifikacija Jedinjenja Potencijatora

[0385] Da bi se identifikovali potencijali ΔF508-CFTR, razvijen je HTS test dvostrukog dodavanja. Tokom prvog dodavanja, u svaki bunar je dodat medijum bez Cl<->sa ili bez test jedinjenja. Posle 22 sek, dodat je drugi dodatak medijuma bez Cl-koji sadrži 2 - 10 mM forskolina da bi se aktivirao ΔF508-CFTR. Vanćelijska koncentracija Cl<->nakon oba dodavanja je bila 28 mM, što je pospešilo izliv protoka kao odgovor na aktivaciju ΔF508-CFTR, a rezultujuć a depolarizacija membrane je optički nadgledana pomoć u boja na bazi FRET senzora napona.

Rastvori

[0386] “Bath” Rastvor # 1: (u mM) NaCl 160, KCl 4,5, CaCl2 2, MgCl2 HEPES 10, pH 7,4 sa NaOH. “Bath” rastvor bez hlorida: Hloridne soli u “bath” rastvoru br.1 (gore) su zamenjene solima glukonata.

CC2-DMPE: Pripremljen kao osnovni rastvor od 10 mM u DMSO i čuvan na -20 °C.

DiSBAC2(3): Pripremljen kao 10 mM zaliha u DMSO i čuvan na - 20 °C.

Ć elijska kultura

[0387] NIH3T3 mišji fibroblasti koji stabilno eksprimiraju ΔF508-CFTR se koriste za optička merenja membranskog potencijala. Ć elije se održavaju na 37 °C u 5% CO2i 90% vlažnosti u Dulbecco-ovom modifikovanom “Eagle” medijumu dopunjenom sa 2 mM glutamina, 10% fetalnog goveđeg seruma, 1 X NEAA, β-ME, 1 X olovka/strep i 25 mM HEPES u bocama 2

za kulturu od 175 cm . Za sve optičke testove, ć elije su zasejane sa 30.000/bunara u ploče obložene matrigelom sa 384 bunara i kultivisane 2 sata na 37 °C pre nego što su kultivisane na 27 °C tokom 24 sata za test potencijatora. Za testove korekcije,ć elije se uzgajaju na 27 °C ili 37 °C sa i bez jedinjenja tokom 16 - 24 sata.

Test Ussing Komore

[0388] Eksperimenti u Ussing komori su izvedeni na polarizovanim epitelnim ć elijama koje eksprimiraju ΔF508-CFTR da bi se dalje okarakterisali ΔF508-CFTR augmentatori ili induktori identifikovani u optičkim testovima. FRT<ΔF508-CFTR>epitelne ć elije uzgajane na umecima ć elijske kulture Costar Snapwell postavljene su u Ussing komoru (Physiologic Instruments, Inc., San Diego, CA), a jednoslojni slojevi su kontinuirano kratko spojeni korišćenjem Naponskog-“clamp” sistema (Odeljenje za Bioinženjering, Univerzitet u Ajovi, IA, i Physiologic Instruments, Inc., San Diego, CA). Transepitelni otpor je meren primenom impulsa od 2-mV. Pod ovim uslovima, FRT epiteliji pokazali su otpore od 4 K"/cm<2>ili više. Rastvori su održavani na 27 °C i mehurić i sa vazduhom. Potencijal pomeranja elektrode i otpor tečnosti korigovani su pomo ć u bez ć elijskog

-

umetka. Pod ovim uslovima, struja odražava protok Cl kroz !F508-CFTR izražen u apikalnoj membrani. ISC je digitalno nabavljen koriš enjem interfejsa MP100A-CE i softvera AcqKnowledge (v3.2.6; BIOPAC Systems, Santa Barbara, CA).

Identifikacija Korektivnih Jedinjenja

-

[0389] Tipični protokol je koristio gradijent koncentracije Cl bazolateralne do apikalne membrane. Da bi se uspostavio ovaj gradijent, na bazolateralnoj membrani je korišć en normalni prsten, dok je apikalni NaCl zamenjen ekvimolarnim -natrijum glukonatom (titrovan na pH 7,4 sa NaOH) da bi se dobio veliki gradijent koncentracije Cl preko epitela. Svi eksperimenti su izvedeni sa netaknutim jednoslojnim slojevima. Da bi se u potpunosti aktivirao ΔF508-CFTR, primenjeni su forskolin (10 µM) i PDE inhibitor, IBMX (100 µM), pra ć eni dodavanjem CFTR potencijala, genisteina (50 µM).

[0390] Kao što je primeć eno kod drugih tipova ć elija, inkubacija na niskim temperaturama FRT ć elija koje stabilno eksprimiraju ΔF508-CFTR poveć ava funkcionalnu gustinu CFTR u membrani plazme. Da bi se utvrdila aktivnost korektivnih jedinjenja, ć elije su inkubirane sa 10 mM ispitnog jedinjenja tokom 24 sata na 37 °C, a zatim su oprane 3X pre snimanja. ISC posredovani cAMP<->i genisteinom u ć elijama tretiranim jedinjenjem su normalizovani na kontrole od 27 °C i 37 °C i izraženi kao procenat aktivnosti. Preinkubacija ć elija sa korektivnim jedinjenjem značajno je pove ć ala ISCposredovane cAMP<->i genisteinom u poređenju sa kontrolama od 37 °C.

Indentifikacija Jedinjenja Potencijatora

-

[0391] Tipični protokol koji je koristio gradijent koncentracije Cl bazolateralne do apikalne membrane. Da bi se uspostavio ovaj gradijent, korišć eni su normalni prstenovi na bazolateralnoj membrani i permeabilizovani su sa nistatinom (360 mg/ml), dok je apikalni NaCl zamenjen ekvimolarnim natrijum glukonatom (titrovan na pH 7,4 sa NaOH) da bi se -dobila velika koncentracija Cl gradijenta preko epitela. Svi eksperimenti su izvedeni 30 minuta nakon permeabilizacije nistatina. Forskolin (10 mM) i sva ispitivana jedinjenja su dodata na obe strane umetaka ć elijske kulture. Efikasnost pretpostavljenih potencijatora ΔF508-CFTR je upoređena sa efikasnošć u poznatog potencijatora, genisteina.

Rastvori

[0392]

Bazolateralni rastvor (u mM): NaCl (135), CaCl2(1,2), MgCl2(1,2), K2HPO4(2,4), KHPO4(0,6), N-2- hidroksietilpiperazin-N’-2- etansulfonska kiselina (HEPES) (10), i dekstroza (10). Rastvor je titrovan na pH 7.4 sa NaOH.

Apikalni rastvor (u mM): Isto kao i bazolateralni rastvor sa NaCl zamenjen sa Na Glukonatom (135).

Ćelijska kultura

[0393] Ć elije Fisher epitela pacova (FRT) koje eksprimiraju ΔF508-CFTR (FRT<ΔF508-CFTR>) su korišć ene za eksperimente Ussingove komore za pretpostavljene augenomere ili induktore ΔF508-CFTR identifikovane iz naših optičkih testova. Ć elije su kultivisane na umecima za kulturu ć elija Costar Snapwell i gajene pet dana na 37 °C i 5% CO2u Coon-ovom modifikovanom Hamovom medijumu F-12, dopunjenom sa 5% fetalnog tele ć eg seruma, 100 U/ml penicilina i 100 µg/ml streptomicina. Pre upotrebe za karakterizaciju potencijatorske aktivnosti jedinjenja, ć elije su inkubirane na 27 °C tokom 16 - 48 sati da bi se ispravila vrednost ΔF508-CFTR. Da bi se utvrdila aktivnost korektivnih jedinjenja,ć elije su inkubirane na 27 °C ili 37 °C sa i bez jedinjenja tokom 24 sata.

Snimci Celih Ćelija

[0394] Makroskopska struja ΔF508-CFTR (IΔF508) u ć elijama NIH3T3 korigovanih sa temperaturom i ispitivanim jedinjenjem, koje stabilno izražavaju ΔF508-CFTR, prać ene su koriš ć enjem snimanja perforiranog “patch-a” i celih ć elija. Ukratko, snimanje naponskog “clamp-a” na IΔF508izvedeno je na sobnoj temperaturi pomoć u pojačala Axopatch 200B “patch-clamp” (Axon Instruments Inc., Foster City, CA). Svi snimci su prikupljeni na frekvenciji uzorkovanja od 10 kHz i niskopropusnom filtriranju na 1 kHz. Pipete su imale otpor od 5 - 6 MΩ kada su se punile unutarć elijskim rastvorom. Pod ovim uslovima snimanja, izračunati potencijal preokreta za Cl-(ECI) na sobnoj temperaturi bio je -28 mV. Svi snimci su imali zaptivni otpor > 20 GΩ i seriju otpora <15 MΩ. Generisanje impulsa, prikupljanje podataka i analiza su izvršeni pomoć u računara opremljenog Digidata 1320 A/D interfejsom u saradnji sa Clampek 8 (Axon Instruments Inc.). “Bath” je sadržao <250 µl fiziološkog rastvora i neprekidno se perfundovala brzinom od 2 ml/min koristeć i gravitacioni sistem za perfuzije.

Identifikacija Korektivnih Jedinjenja

[0395] Da bismo utvrdili aktivnost korektivnih jedinjenja za poveć anje gustine funkcionalnog ΔF508-CFTR u membrani plazme, koristili smo gore opisane tehnike snimanja perforiranih “patch-eva” za merenje gustine struje nakon 24-časovnog tretmana sa korektivnim jedinjenjima. Da bi se u potpunosti aktivirao ΔF508-CFTR, ć elijama je dodato 10 mM forskolina i 20 mM genisteina. U našim uslovima snimanja, gustina struje nakon 24-časovne inkubacije na 27 °C je bila već a od one primeć ene nakon 24-časovne inkubacije na 37 °C. Ovi rezultati su u skladu sa poznatim efektima inkubacije na niskoj temperaturi na gustinu ΔF508-CFTR u membrani plazme. Da bi se utvrdili efekti korektivnih jedinjenja na CFTR gustinu struje, ć elije su inkubirane sa 10 mM ispitnog jedinjenja tokom 24 sata na 37 °C i trenutna gustina je upoređena sa kontrolama od 27 °C i 37 °C (% aktivnosti). Pre snimanja, ć elije su oprane 3X ekstracelularnim medijumom za snimanje da bi se uklonilo bilo koje preostalo ispitivano jedinjenje. Preinkubacija sa 10 µM korektivnih jedinjenja značajno je poveć ala struju zavisnu od cAMP-a i genisteina u poređenju sa kontrolama od 37 °C.

Identifikacija Jedinjenja Potencijatora

[0396] Sposobnost potencijatora ΔF508-CFTR da poveć aju makroskopsku struju ΔF508-CFTR Cl (IΔF508) u ć elijama NIH3T3, koje stabilno izražavaju ΔF508-CFTR, takođe je ispitivana upotrebom tehnika perforiranja-snimanja “patch-eva”. Potencijatori identifikovani optičkim testovima izazvali su poveć anje doze IΔF508zavisno od doze sa sličnom snagom i efikasnošć u prime ć enom u optičkim testovima. U svim ispitivanim ć elijama, potencijal preokreta pre i tokom primene potencijatora bio je oko -30 mV, što je izračunato ECI(-28 mV).

Rastvori

[0397]

Unutarć elijski rastvor (u mM): Cs-aspartat (90), CsCl (50), MgCl2(1), HEPES (10) i 240 mg/ml amfotericin-B (pH podešen na 7,35 sa CsOH).

Vanć elijski rastvor (u mM): N-metil-D-glukamin (NMDG)-Cl (150), MgCl2(2), CaCl2(2), HEPES (10) (pH podešen na 7,35 sa HCl).

Ć elijska Kultura

[0398] NIH3T3 mišji fibroblasti koji stabilno eksprimiraju ΔF508-CFTR se koriste za snimanje celih ć elija. Ć elije se održavaju na 37 °C u 5% CO2i 90% vlažnosti u Dulbecco-ovom modifikovanom “Eagle” medijumu dopunjenom sa 2 mM glutamina, 10% fetalnog goveđeg seruma, 1 X NEAA, β-ME, 1 X olovkom/strep i 25 mM HEPES u bocama za kulturu od 175 cm<2>. Za snimanje celih ć elija, 2.500 - 5.000 ć elija je zasejano na staklenim pokrivačima obloženim poli-L-lizinom i kultivisano 24 - 48 sati na 27 °C pre upotrebe da bi se testirala aktivnost potencijatora; i inkubirano sa ili bez korektivnog jedinjenja na 37 °C za merenje aktivnosti korektora.

Jednokanalna snimanja

[0399] Jednokanalne aktivnosti temperaturno korigovanog ΔF508-CFTR stabilno izražene u ć elijama NIH3T3 i aktivnosti jedinjenja potencijatora primeć ene su koriš ć enjem izrezane membrane patch-a iznutra. Ukratko, naponska-clamp snimanja jednokanalne aktivnosti izvedena su na sobnoj temperaturi pomoć u Axopatch 200B patch-clamp pojačala (Axon Instruments Inc.). Svi snimci su prikupljeni na uzorak frekvenciji od 10 kHz i filtrirani u niskim frekvencijama na 400 Hz. Patch pipete su proizvedene od stakla Corning Kovar Sealing #7052 (World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL) i imale su otpor od 5 - 8 MΩ kada su napunjene vanć elijskim rastvorom. ΔF508-CFTR se aktivira nakon ekscizije, dodavanjem 1 mM Mg-ATP i 75 nM cAMP-zavisne protein kinaze, katalitičke podjedinice (PKA; Promega Corp. Madison, WI). Nakon stabilizacije aktivnosti kanala, flaster je perifuziran pomoć u gravitacionog sistema mikroperfuzije. Dotok je postavljen pored patch-a, što je rezultiralo potpunom razmenom rastvora u roku od 1-2 sekunde. Da bi se održala aktivnost ΔF508-CFTR tokom brze perifuzije, “bath” rastvor je dodat nespecifični inhibitor fosfataze F<->(10 mM NaF). Pod ovim uslovima snimanja, aktivnost kanala je ostala konstantna tokom celog trajanja patch-a (do 60 minuta). Struje proizvedene pozitivnim naelektrisanjem koje se kreć e od unutar do van ć elijskih rastvora (anjoni koji se kre ć u u suprotnom smeru) prikazani su kao pozitivne struje. Potencijal pipete (Vp) održavan je na 80 mV.

[0400] Aktivnost kanala je analizirana je iz membranskih patch-eva koji sadrže % 2 aktivna kanala. Maksimalan broj istovremenih otvora odredio je broj aktivnih kanala tokom eksperimenta. Da bi se utvrdila jednokanalna amplituda struje, podaci zabeleženi tokom 120 sekundi aktivnosti ΔF508-CFTR filtrirani su „off-line“ na 100 Hz, a zatim korišć eni za konstrukciju histograma amplituda svih tačaka koji su opremljeni multigauskim funkcijama pomoć u Bio-Patch Softvera za analizu patch-eva (Bio-Logic Comp. Francuska). Ukupna mikroskopska struja i otvorena verovatnoć a (Po) određene su na osnovu 120 sek aktivnosti kanala. Poje određen pomoć u Bio-Patch softvera ili iz odnosa Po= I/i(N), gde je I = srednja struja, i = jednokanalna amplituda struje i N = broj aktivnih kanala u patch-u.

Rastvori

[0401]

Vanć elijski rastvor (u mM): NMDG (150), asparaginska kiselina (150), CaCl2(5), MgCl2(2) i HEPES (10) (pH podešen na 7,35 sa Tris bazom).

Unutarć elijski rastvor (u mM): NMDG-Cl (150), MgCl2(2), EGTA (5), TES (10) i Tris baza (14) (pH podešen na 7,35 sa HCl).

Ć elijska kultura

[0402] NIH3T3 mišji fibroblasti koji stabilno eksprimiraju ΔF508-CFTR se koriste za “patch-clamp” snimanja sa izrezanom membranom. Ć elije se održavaju na 37 °C u 5% CO2i 90% vlažnosti u Dulbecco-ovom modifikovanom “Eagle” medijumu dopunjenom sa 2 mM glutamina, 10% fetalnog goveđeg seruma, 1 X NEAA, β-ME, 1 X olovka/strep i 25 mM HEPES u bocama 2

za kulturu od 175 cm . Za jednokanalna snimanja, 2.500 - 5.000 ć elija je zasejano na staklenim pokrivačima presvučenim poli-L-lizinom i kultivisano tokom 24 - 48 sati na 27 °C pre upotrebe.

[0403] Jedinjenje 1 i Jedinjenje 2 iz predmetnog pronalaska su korisni kao pojačavači ili induktori CFTR aktivnosti. Tabela 9 dole ilustruje EC50 i relativnu efikasnost Jedinjenja 1 i Jedinjenja 2. U donjoj Tabeli 9 primenjuju se sledeć a značenja. EC50: „+++“ znači <10 µM; „++“ znači između 10 µm do 25 µm; „+“ znači između 25 µm do 60 µm. % Efikasnosti: „+“ znači <25%; „++“ znači između 25% i 100%; „+++“ znači> 100%.

Tabela 9.

Claims (34)

Patentni Zahtevi

1. Neprekidni proces za pripremu tablete koja sadrži Jedinjenje 1 (3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)benzojeva kiselina). Oblik I i čvrstu disperziju koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2 (N-(5-hidroksi-2,4-ditert-butil-fenil)-4-okso-1H-kinolin-3-karboksamid) koji sadrži korake:

a) mešanje Jedinjenja 1 Oblika I, čvrste disperzije koja sadrži suštinski amorfno Jedinjenje 2, punilo i dezintegrator u blenderu da bi se dobila mešavina;

b) priprema rastvora za granulaciju sa vodom, vezivom i surfaktantom;

c) dodavanje smeše iz koraka a) u kontinualni granulator dvostrukog zavrtnja uz dodavanje rastvora za granulaciju iz koraka b) da bi se proizvele granule;

d) sušenje granula iz koraka c) i njihovo mlevenje;

e) mešanje mlevenih granula iz koraka d) sa punilom, dezintegratorom i lubrikantom da bi se dobila mešavina; i

f) kompresovanje mešavine iz koraka e) u tabletu;

pri čemu najmanje jedan od gornjih koraka sadrži analitičku tehnologiju procesa.

2. Proces prema patentnom zahtevu 1, pri čemu korak a) obuhvata analitičku tehnologiju procesa, pri čemu je analitička tehnologija procesa NIR spektroskopija za prać enje uniformnosti smeše.

3. Proces prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, pri čemu korak b) obuhvata analitičku tehnologiju procesa.

4. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-3, pri čemu korak c) obuhvata analitičku tehnologiju procesa.

5. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-4, pri čemu korak d) obuhvata analitičku tehnologiju procesa, pri čemu je analitička tehnologija procesa NIR spektroskopija za prać enje jednolikosti granula i/ili za nadgledanje sadržaja vlage, ili pri čemu je analitička tehnologija procesa laserska difrakcija za prać enje raspodele veličine čestica.

6. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-5, pri čemu korak e) obuhvata analitičku tehnologiju procesa, pri čemu je analitička tehnologija procesa NIR spektroskopija za prać enje uniformnosti smeše.

7. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-6, gde korak e) obuhvata analitičku tehnologiju procesa, pri čemu je analitička tehnologija procesa NIR spektroskopija za prać enje sadržaja vlage.

8. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-7, pri čemu korak f) obuhvata analitičku tehnologiju procesa, pri čemu je analitička tehnologija procesa Raman spektroskopija za prać enje identiteta čvrstog oblika aktivnog farmaceutskog sastojka.

9. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-8, pri čemu korak f) obuhvata analitičku tehnologiju procesa, pri čemu je analitička tehnologija procesa tester tableta za prać enje težine tablete.

10. Postupak prema bilo kojem od zahteva 1-9, pri čemu korak f) obuhvata analitičku tehnologiju procesa, pri čemu je analitička tehnologija procesa tester tableta za prać enje debljine tablete.

11. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-10, pri čemu korak f) obuhvata analitičku tehnologiju procesa, pri čemu je analitička tehnologija procesa tester tableta za prać enje tvrdo ć e tablete.

12. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-11, pri čemu proces obuhvata oblaganje tablete i praćenje debljine obloge Raman spektroskopskim tehnikama.

13. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-12, pri čemu analitička tehnologija procesa uključuje najmanje jednu lasersku difrakciju, tester tableta, NIR i Raman spektroskopske tehnike za praćenje definisanih standarda.

14. Proces prema patentnom zahtevu 13, pri čemu se definisani standard bira između uniformnosti smeše, uniformnosti granula, vlage, raspodele veličine čestica, identiteta čvrstog oblika aktivnog farmaceutskog sastojka, koncentracije aktivnog farmaceutskog sastojka, težine, debljine, tvrdoć e i debljine obloge.

15. Proces prema patentnom zahtevu 13 ili 14, pri čemu se definisani standard prati za testiranje oslobađanja u realnom vremenu (RTRT).

16. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-15, pri čemu je Oblik I, naznačen time da je kristalni oblik, koji se sastoji od monokliničkog kristalnog sistema, prostorne grupe P21/ n i sledeć ih dimenzija jediničnih ć elija:

b = 12.299 (2) Å β= 93.938 (9)°

c = 33,075 (4) Å. i/ili

pri čemu je Oblik I naznačen sa jednim ili više vrhova pri 15,4 ± 0,2 stepeni, 16,3 ± 0,2 stepeni i 14,5 ± 0,2 stepeni u difrakciji rendgenskog zraka u prahu dobijeno upotrebom Cu K alfa zračenja.

17. Proces prema patentnom zahtevu 16, naznačen time što se Jedinjenje 1, Oblik I, karakteriše jednim ili više vrhova, unutar jednog ili više opsega 2θ vrednosti, izabranih od 15,2 do 15,6 stepeni, 16,1 do 16,5 stepeni i 14,3 do 14,7 stepeni u difrakciji rendgenskog zraka u prahu dobijeno upotrebom Cu K alfa zračenja.

18. Proces prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time što se Jedinjenje 1, Oblik I, karakteriše vrhom koji ima vrednost 2θ na 15,2 do 15,6 stepeni u difrakciji rendgenskog zraka u prahu dobijeno upotrebom Cu K alfa zračenja.

19. Proces prema patentnom zahtevu 18, naznačeno time što se Jedinjenje 1, Oblik I, karakteriše vrhom koji ima vrednost 2θ na 15,4 stepena u difrakciji rendgenskog zraka u prahu dobijeno upotrebom Cu K alfa zračenja.

20. Proces prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time što se Jedinjenje 1, Oblik I, karakteriše vrhom koji ima vrednost 2θ na 16,1 do 16,5 stepeni u difrakciji rendgenskog zraka u prahu dobijeno upotrebom Cu K alfa zračenja.

21. Proces prema patentnom zahtevu 20, naznačeno time što se Jedinjenje 1, Oblik I, karakteriše vrhom koji ima vrednost 2θ na 16,3 stepena u difrakciji rendgenskog zraka u prahu dobijeno upotrebom Cu K alfa zračenja.

22. Proces prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time što se Jedinjenje 1, Oblik I, karakteriše vrhom koji ima vrednost 2θ na 14,3 do 14,7 stepeni u difrakciji rendgenskog zraka u prahu dobijeno upotrebom Cu K alfa zračenja.

23. Proces prema patentnom zahtevu 22, naznačeno time što se Jedinjenje 1, Oblik I, karakteriše vrhom koji ima vrednost 2θ na 14,5 stepeni u difrakciji rendgenskog zraka u prahu dobijeno upotrebom Cu K alfa zračenja.

24. Proces prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time što se Jedinjenje 1, Oblik I, dalje karakteriše vrhom koji ima vrednost 2θ na 17,6 do 18,0 stepeni u rendgenskoj difrakciji praha dobijeno upotrebom Cu K alfa zračenja.

25. Proces prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time što se Jedinjenje 1, Oblik I, dalje karakteriše vrhom koji ima vrednost 2θ na 7,6 do 8,0 stepeni u rendgenskoj difrakciji praha dobijenoj upotrebom Cu K alfa zračenja.

26. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-15, naznačeno time što se Jedinjenje 1 Oblik I karakteriše najmanje jednim vrhom koji ima vrednost 2θ ± 0,2 stepena, odabrano od 14,41 stepeni; 14,64 stepeni; 15,23 stepeni; 16,11 stepeni; 17,67 stepeni; 19,32 stepeni; 21,67 stepeni; 23,40 stepeni; 23,99 stepeni; 26,10 stepeni; i 28,54 stepeni u rendgenskoj difrakciji praha dobijeno upotrebom Cu K alfa zračenja.

27. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-15, naznačeno time što se Jedinjenje 1, Oblik I karakteriše najmanje jednim vrhom koji ima vrednost 2θ ± 0,2 stepena, odabrano od 7,83 stepeni; 14,51 stepeni; 14,78 stepeni; 15,39 stepeni; 16,26 stepeni; 16,62 stepeni; 17,81 stepeni; 21,59 stepeni; 23,32 stepeni; 24,93 stepeni; i 25,99 stepeni u rendgenskoj difrakciji praha dobijeno upotrebom Cu K alfa zračenja.

28. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-15, naznačeno time što se Jedinjenje 1 Oblik I karakteriše po obrascu difrakcije sa Slike 1.

29. Proces prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-15, naznačeno time što se Jedinjenje 1, Oblik I, karakteriše po obrascu difrakcije sa Slike 2.

30. Proces prema patentnom zahtevu 16, naznačeno time što se Jedinjenje 1 Oblik I karakteriše kao monoklinički kristalni sistem i prostorna grupa P21/n, i ima sledeć e dimenzije jediničnih ć elija:

a = 4,9626 (7) Å

b = 12.299 (2) Åβ = 93.938 (9)°

c = 33.075 (4) Å.

31. Tableta pripremljena procesom prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-30.

32. Tableta iz patentnog zahteva 31 za upotrebu u tretmanu cistične fibroze kod pacijenta.

33. Tableta za upotrebu prema patentnom zahtevu 32, naznačeno time što pacijent ima mutaciju ΔF508 u CFTR.

34. Tableta za upotrebu prema patentnom zahtevu 33, naznačeno time što je pacijent homozigotan za mutaciju ΔF508 u CFTR.